Tổng quan về một số phương pháp chiết xuất hợp chất tự nhiên để ứng dụng trong việc chiết xuất hoạt chất có lưu huỳnh của họ Cải... Thành phần hoạt chất của các loại rau họ Cải: Rau họ
Trang 1Đề tài: Nghiên cứu sản xuất thực phẩm chức năng từ hợp chất có lưu huỳnh chiết xuất từ
Suplơ và cải xanh trồng ở Việt Nam
MÔN: THỰC PHẨM CHỨC NĂNG
Trang 2Nội dung
I Tổng quan tài liệu về TPCN & các loại rau họ cải
II Vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu
III Kết quả
IV Kết luận
Trang 3I Tổng quan tài liệu về TPCN & các
loại rau họ cải
1 Tình hình nghiên cứu sản xuất TPCN và TPCN từ rau
Họ Cải trên thế giới và ở Việt Nam
2 Tổng quan về các loại rau họ Cải
3 Tổng quan về một số phương pháp chiết xuất hợp chất
tự nhiên để ứng dụng trong việc chiết xuất hoạt chất có lưu huỳnh của họ Cải
Trang 4- Thị trường TPCN là một trong những thị trường thực phẩm tăng trưởng nhanh nhất, hơn 10% hàng năm Riêng Mỹ chiếm tới 1/3 thị trường thế giới (khoảng 23 tỷ USD), thị trường Châu Âu đạt khoảng
19 tỷ USD, Châu Á đạt 6 tỷ USD,…
1 Tình hình nghiên cứu sản xuất TPCN và TPCN từ rau Họ Cải trên thế giới và ở Việt
Nam
Thế giới:
- Theo dự báo của các chuyên gia thì “thức ăn của con người trong thế kỷ XXI là thực phẩm chức năng” Thức ăn không chỉ đảm bảo đủ calo, ngon, an toàn, mà còn phải chứa các hoạt chất sinh học, tạo cho con người khả năng miễn dịch cao, chống sự lão hoá, tăng tuổi thọ, mà còn giúp con người phòng chống được một số bệnh, kể cả ung thư
Trang 5- Việc nghiên cứu tạo ra các
thực phẩm chức năng với phương
châm “kết hợp công nghệ cổ
truyền mang bản sắc dân tộc với
công nghệ hiện đại” Hầu hết các
Công ty Dược phẩm đều có sản
xuất TPCN
Việt Nam:
- Việt Nam có rất nhiều loại rau xanh, là thực phẩm không thể thiếu của bữa ăn hàng ngày của người Việt Đứng đầu về chủng loại và sản lượng rau xanh của Việt Nam là các loại rau thuộc họ Cải, nhằm
bổ sung các chất dinh dưỡng khác ngoài các chất dinh dưỡng cơ bản: hydrat cacbon, protein, lipid,…
Trang 62 Tổng quan về các loại rau họ Cải
a Thực vật học:
- Họ Cải là một họ thực vật có hoa Họ
này chứa một số loài có tầm quan trọng
về mặt kinh tế, cung cấp nhiều loại rau
về mùa đông trên khắp thế giới
- Bao gồm: cải bắp, cải bông xanh, súp
lơ, cải brussels, cải xoăn, cải làn, cải củ
Thụy Điển, cải củ, cải thìa và su hào,…
- Tầm quan trọng của họ Cải trong
việc cung cấp rau cho con người đã dẫn
tới việc tạo giống chọn lọc trong suốt
chiều dài lịch sử của loài người
Trang 7b Thành phần hoạt chất của các loại rau họ Cải:
Rau họ cải có nhiều loại hoạt chất khác nhau: giàu các loại vitamin, các khoáng chất và dầu béo, acid erucic, … Trong khuôn khổ đề tài, đối tượng được nghiên cứu là nhóm hoạt chất có lưu huỳnh, nhóm hoạt chất có các tác dụng sinh học quý báu
Hoạt chất có lưu huỳnh và hoạt tính sinh học: Các
glucosinolate đều thuộc các chất đặc hiệu có mặt trong các loại rau họ Cải là một nguồn thực phẩm phòng ung thư tốt
Trang 8• Glucosinolate nhóm sulforaphane:
- Có tác dụng kháng oxy hóa gián tiếp, chúng không trực tiếp
trung hòa các chất ôxy hóa trong cơ thể như peroxid, lipid peroxid, các gốc tự do mà bảo vệ, kích thích các enzyme có chức năng trung hòa, đào thải các độc chất, các chất ô xy hóa Đồng thời kìm hãm các enzyme tạo ra các chất có hại đối với cơ thể
- Có ở hầu hết trong các loại rau
họ Cải, nhiều nhất ở cây súp lơ
xanh, nhưng hàm lượng rất thấp
và biến động rất lớn, khoảng 10 -
50 lần tùy theo thời kỳ sinh
trưởng và phát triển của cây
glucoraphanine
(-)-(R)-sulforaphane
Trang 9• Glucosinolate nhóm Indol – 3 - carbinol.
- Quan trọng nhất trong nhóm này là Glucobrassicine có mặt ở một
số rau họ Cải như: cải hoa xanh, cải bắp, súp lơ, mầm cải Brussel và cải bok – choy,
- Đã có nhiều nghiên cứu về tác dụng của các loại thực phẩm được
bổ sung các hoạt chất kể trên trong việc hỗ trợ ngăn ngừa ung thư
- Glucobrassicine và sản phẩm thủy phân của nó có tác dụng kháng ôxy hóa theo cơ chế gián tiếp tương tự glucosinolate nhóm sulforaphane Được quan tâm nhiều hơn về tác dụng hỗ trợ phòng chống chứng bệnh ung thư có yếu tố do hormone
Trang 10c Ứng dụng của hoạt chất có lưu huỳnh trong TPCN
• Phòng ngừa bệnh ung thư, đặc biệt hỗ trợ việc phòng ngừa
nguy cơ ung thư dạ dày tá tràng, ruột kết, tuyến tiền liệt…
- Hoạt tính chống ung thư của
sulforaphane trong các cây họ cải có
khả năng thúc đẩy hoạt tính các
enzyme kháng oxy hóa trong gan, liên
tục kìm hãm những chất gây bệnh ung
thư, chuyển các chất đó sang dạng
khác và dễ dàng loại trừ khỏi cơ thể
- Đối với phụ nữ, Indol-3-carbinol có tác dụng giảm nguy cơ ung thư vú nguyên phát, ung thư vú thực nghiệm, làm thoái lui đến tiêu biến loạn sản cổ tử cung giai đoạn cuối
- Sulforaphane tiêu diệt HP - gây ra
sự loét dạ dày mà còn gia tăng đáng
kể ung thư dạ dày
Trang 11- Tác dụng kháng oxy hóa của
các glucosinolate và Aglycone
được ứng dụng phòng chống các
chất độc xâm nhập vào cơ thể,
trong đó đáng kể chống độc hại
của khói thuốc lá
• Phòng ngừa ngộ độc do khói thuốc lá và chống độc cho
những người nghiện hút thuốc lá.
- Nghiên cứu trên 60 người nghiện thuốc dùng dịch chiết toàn phần mầm cây súp lơ đã thu được kết quả rất khả quan Việc sản sinh, tàng trữ gốc tự do trong cơ thể đã giảm bớt Hàm lượng các chất kháng oxy hóa trong cơ thể, chất khử Glutathione (GSH) và Vitamin E, C đều tăng
Trang 12• Phòng chống một số bệnh ở người cao tuổi, người già
- Ở người cao tuổi toàn cơ thể lão hóa,
hệ miễn dịch suy giảm cho nên sức đề
kháng giảm,… biểu hiện là giảm trí
nhớ, tim mạch không khỏe, dễ bị cao
huyết áp, có thể bị nhồi máu cơ tim,
bệnh tim và đột quỵ
- Kết quả nghiên cứu của Viện Hàn
lâm Khoa học Mỹ về 4 vấn đề được
công bố, xuất bản trong tháng 5 -
2007, cho thấy hợp chất toàn phần
trong mầm Cải hoa có thể bảo vệ
chống lại tress Oxy hóa, có thể giảm
huyết áp cao, sự nguy hiểm của bệnh
tim mạch
Trang 133 Tổng quan về một số phương pháp chiết xuất hợp chất tự nhiên để ứng dụng trong việc chiết xuất hoạt
chất có lưu huỳnh của họ Cải
Bản chất của nguyên liệu: Với việc chiết xuất các dạng nguyên
liệu đã già, rắn chắc ta cần xay nhỏ nguyên liệu tạo điều kiện cho
dung môi dễ thấm ướt nguyên liệu, chất tan dễ khuếch tán vào dung môi Trong rau họ Cải cần quan tâm đến các tạp chất dầu béo và sáp
Có nhiều phương pháp chiết xuất các hoạt chất tự nhiên: phương pháp ngấm kiệt, phương pháp đun hồi lưu, phương pháp chiết bằng siêu âm,… Ở bất kỳ phương pháp nào cũng có chung các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình chiết xuất là: Bản chất của nguyên liệu; Các yếu tố thuộc về dung môi; Phương pháp chiết xuất
Trang 14 Các yếu tố thuộc về dung môi: Chọn loại dung môi hòa tan tốt
hoạt chất cần chiết và tính chất hòa tan có chọn lọc, dung môi phải phù hợp với kỹ thuật và thiết bị chiết xuất, hiệu quả kinh tế, không gây ô nhiễm môi trường
Nhiệt độ chiết xuất: yếu tố nhiệt độ trong quá trình chiết xuất
được lựa chọn hoàn toàn phụ thuộc vào sự bền vững của hoạt chất
cần chiết với nhiệt độ
Các loại dung môi thường được sử dụng để chiết xuất và tinh chế hoạt chất có lưu huỳnh ở rau họ Cải bao gồm chloroform; n.hexan; methanol; ethanol, các hoạt chất cần chiết đều an toàn ở nhiệt độ sôi của các dung môi này
- Có nhiều phương pháp chiết xuất khác nhau, trong đó có phương pháp chiết xuất bằng siêu âm Phương pháp này này có các đặc tính riêng và hiệu quả hơn so với các phương pháp chiết xuất khác
Trang 15II Vật liệu, nội dung và phương pháp nghiên cứu
1 Nguyên liệu và phương pháp sơ chế
2 Nội dung nghiên cứu
3 Phương pháp nghiên cứu xác định hoạt chất
Trang 161 Nguyên liệu và phương pháp sơ chế
Cải xanh và suplơ ở 3 thời
điểm sinh trưởng và phát triển
khác nhau: mầm giá, chớm ra
hoa (hoa nụ) và hoa nở đã
được chọn để làm nguyên liệu
trong công trình nghiên cứu
này
Điều kiện của nguyên liệu: Những nguyên liệu này đã được lựa chọn và thu mua dưới dạng tươi ở vùng trồng rau Đông Anh và Đông Dư (Hà Nội) Bảo quản nguyên liệu ở nơi thoáng mát và tiến hành các thí nghiệm ngay sau thu mua không quá 3 giờ
Trang 17 Nguyên liệu phối hợp cùng là củ nghệ:
- Củ Nghệ thu hoạch vào tháng 4,
thân rễ phát triển đầy đủ thân rễ cấp
1, cấp 2 và cấp 3 Cây hoang dại
được thu thập ở miền núi phía bắc
(Hoà Bình), cây gieo trồng được thu
thập ở đồng bằng Bắc Bộ (Hưng Yên)
- Từ nguyên liệu thu mua việc nghiên cứu chiết xuất các curcuminoid theo hướng công nghiệp đã được thực hiện tại Viện nghiên cứu thực phẩm chức năng (RIFF)
Trang 182 Nội dung nghiên cứu:
- Nghiên cứu xác định hàm lượng hoạt chất có lưu huỳnh (sulforaphane và dẫn chất của nó) ở 3 thời điểm sinh trưởng và phát triển: Mầm giá, thời kỳ hoa nụ và thời kỳ hoa nở
- Nghiên cứu quy trình công nghệ chiết xuất hoạt chất có lưu huỳnh (sulforaphane và dẫn chất của nó) từ Suplơ và cải xanh
- Nghiên cứu quy trình công nghệ chế biến 1 loại thực phẩm chức năng bằng cách phối chế các hoạt chất có lưu huỳnh chiết xuất được từ các loại rau nghiên cứu với bột nghệ vàng giàu curcumin, tumeric và ukon nhằm phục vụ cho nhóm người cao tuổi
Trang 193 Phương pháp nghiên cứu:
Phương pháp nghiên cứu xác định hoạt chất:
- Việc xác định sulforaphane và Indol-3-carbinol có trong các nguyên liệu đã chuẩn bị sẵn được tiến hành bằng phương pháp HPLC/MS và được thực hiện trên máy HPLC Hitachi
- Để xác định được chất lượng của sản phẩm, tiến hành kiểm tra bằng phương pháp phân tích sắc ký lỏng cao áp (HPLC) tại Viện Bảo
- Việc đánh giá chất lượng sản phẩm các hợp chất có chứa lưu huỳnh được tiến hành bằng phương pháp HPLC/MS
Trang 20 Nghiên cứu quy trình công nghệ chế tạo thực phẩm chức năng Sucur
- Quy trình công nghệ này chủ yếu dựa trên viêc phối chế các hoạt chất có lưu huỳnh glucosinolate nhóm sulforaphane và indol -3-carbinol với hoạt chất curcuminoid của nghệ nhằm tạo ra Sucur
- Việc kết hợp glucosinolate nhóm sulforaphane và Indol – 3 - carbinol được chiết xuất từ các loại rau cải họ Cải và Curcuminoid
là sự kết hợp đồng thời sự tác dụng kháng oxy hóa gián tiếp và kháng oxy hóa trực tiếp
- Loại TPCN Sucur này phục vụ
cho: Người già yếu hoặc có nguy cơ
nhồi máu cơ tim; người bị đau dạ
dày, nguy cơ đau dạ dày, tá tràng,
nguy cơ ung thư đường tiêu hoá,
người bị lão và các tác hại xấu của
môi trường đối với mắt
Trang 21 Phương pháp xác định thủy phần: Việc xác định độ ẩm của
nguyên liệu đã dựa trên nguyên tắc sấy khô đến trọng lượng không đổi, sau đó cân lượng nguyên liệu còn lại để suy ra độ ẩm
Phương pháp xử lý số liệu: Việc xử lý số liệu đã được tiến
hành theo phương pháp loại trừ sai số thô và lấy kết quả trung
bình
Trang 22III Kết quả
1 Kết quả nghiên cứu sản xuất mầm giá và chế biến hoa suplơ
và cây cải xanh
Nhận xét: Việc gieo trồng cả 2 loại mầm giá phụ thuộc chủ yếu
vào mùa vụ, đặc biệt khó khăn ở mùa hè Khối lượng sản phẩm mầm giá rau cải xanh cao hơn mầm giá rau súp lơ Bột rau mầm giá rất dễ bị côn trùng (con mọt) tấn công, khó bảo quản lâu dài
Kết quả nghiên cứu sản xuất mầm giá:
Ký
Khối Chiều Khối Bột khô lượng cao lượng Khối Tỷ lệ
(gam) (cm) (gam) (gam)
1 Suplơ 100 1,8 – 2,5 520 52,0 5,9 48,9
xanh
2 Cải 100 2,1 – 3 555 56,5 6,2 53,0
xanh
Trang 23Ký hiệu Khối lượng
Nhận xét: Khối lượng sản phẩm bột của cây cải xanh thấp hơn
bột hoa súp lơ Bột hoa súp lơ rất dễ bị côn trùng (mọt) tấn
công, cần có biện pháp bảo quản lâu dài
Bảng 2: Hiệu suất bột khô khi chế biến hoa súp lơ và cây cải xanh
Trang 242 Kết quả nghiên cứu việc xác định hàm lượng glucosinolate ở các thời điểm sinh trưởng và phát triển khác nhau của suplơ và cải xanh
Nhận xét: Nhóm hoạt chất này có hàm lượng cao ở giai đoạn sinh
trưởng mầm giá Ở cây trưởng thành nhóm hoạt chất này chủ yếu tập trung ở hoa
Bảng 3: Hàm lượng glucosinolate toàn phần nhóm sulforaphane của suplơ xanh ở các thời điểm sinh trưởng và phát triển khác nhau
Mẫu Nguyên Độ Lượng hoạt
Trang 25Bảng 4: Hàm lượng glucosinolate nhóm sulforaphane của
Nhận xét: Hàm lượng glucosinolate toàn phần của mầm giá 2 loại
cây súp lơ xanh và cây cải xanh là tương đương, nhưng hàm lượng sulforaphane ở mầm giá súp lơ cao hơn ở mầm giá rau cải xanh
Trang 263 Kết quả nghiên cứu việc chiết xuất glucosinolate
Kết quả khảo sát về các phương pháp chiết xuất
Phương Khối lượng
Thể tích
glucosinolate
Tỷ lệ
pháp chiết mẫu (ml) toàn phần (%)
Trang 27- Chiết hồi lưu : thời gian chiết không kéo dài, hiệu suất thu hòi sản phẩm cao Thiết bị chiết không quá phức tạp, có thể áp dụng khi sản xuất lớn
- Chiết ngấm kiệt: tốn thời gian chiết cũng như thời gian thu hồi dung môi do lượng dung môi nhiều Thiết bị đơn giản
- Chiết siêu âm: thời gian chiết ngắn, tốn kém năng lượng thấp Thiết bị tạo siêu âm phải nhập ngoại Nếu sản xuất lớn, thiết bị tạo siêu âm phải có công suất lớn, Việt Nam chưa sản xuất loại thiết bị này
- Dựa trên kết quả khảo sát các phương pháp chiết xuất nói trên, chúng tôi chọn phương pháp chiết hồi lưu để chiết glucosinolate nhóm sulforaphane
Nhận xét:
Trang 28 Kết quả khảo sát việc sử dụng dung môi chiết xuất
Bảng 7: So sánh hiệu quả của các dung môi sử dụng chiết xuất
glucosinolate nhóm sulforaphane
Khối lượng
glucosinolate
Tỷ lệ thu hồi STT Dung môi toàn phần
- Dung môi để chiết xuất glucosinolate nhóm sulforaphane:
Trang 29- Dung môi chiết xuất glucosinolate nhóm Indol-3-carbinol
Bảng 8: So sánh hiệu quả chiết xuất của các dung môi
Trang 30Kết quả khảo sát về thời gian chiết xuất.
Bảng 9: Hiệu suất chiết xuất glucosinolate nhóm
sulforaphane theo thời gian
STT
Thời gian Khối lượng glucosinolate
Tỷ lệ thu hồi chiết (giờ) mẫu (gam) toàn phần
Nhận xét : Thời gian chiết 2,5 giờ đã cho kết quả tốt nhất
Từ 2 bảng trên: Dựa vào các kết quả nghiên cứu về các yếu tố
chiết xuất vừa nói trên, để chiết xuất glucosinolate nhóm sulforaphane chúng tôi chọn phương pháp chiết xuất đun hồi lưu với dung môi CHCl3, thời gian chiết là 2,5 giờ
Trang 314 Kết quả các việc nghiên cứu sản xuất TPCN Sucur
Quy trình sản xuất TPCN viên nang sucur
Trang 32• Các chỉ tiêu cảm quan:
- Trạng thái : Dạng bột mịn, đóng trong viên nang
- Màu sắc : Màu vàng sẫm
- Vị: Có mùi thơm đặc trưng của sản phẩm, không có mùi vị lạ
- Tạp chất : không có tạp chất nhìn thấy bằng mắt thường
- Có tác dụng hỗ trợ trong điều trị giảm thiểu nguy cơ ung thư, viêm loét dạ dày, tá tràng
Trang 33- Quy trình chiết xuất này có thể ứng dụng cho việc sản xuất lớn
Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm sản phẩm TPCN Sucur:
- Đã nghiên cứu việc phối chế bột súp lơ xanh, glucosinolatse toàn phần của một số rau họ Cải với Curcuminoid (tinh chất củ Nghệ)