Góp phần nghiên cứu thành phần hóa học của cây cỏ the centipeda minima l

n cảm ơn thấy Dương Thúc Huy, cò Lẻ Thị Ảnh Tuyết và cỗ Lẻ Thị Thu Heong, dã giáp đỡ và cho ơm những ý kiến quý báu để cm có 1 hoàn tất đề tai của mình, Xin cam em quý Thấy Cổ bộ môn Hó

GVHD: TS BUI XUAN HAO

ltb thse

Igptigh che Ah Tesi

TP.HCM ngày thing nm 2015

n cảm ơn thấy Dương Thúc Huy, cò Lẻ Thị Ảnh Tuyết và cỗ Lẻ Thị Thu Heong,

dã giáp đỡ và cho ơm những ý kiến quý báu để cm có 1

hoàn tất đề tai của mình, Xin cam em quý Thấy Cổ bộ môn Hóa, Khoa Hóa - Dại học Sư Phạm thành phổ Hỗ Chỉ Minh, các thủy cổ đã hét long hướng dẫn, giáng dạy và truyền đạt cho em những kiến thức khoa học quỹ báu trong suốt thời gian em học tại trường Cuỗi cũng em cũng xin cam em tắt cả các bạn trong phông thi nghiệm Hợp chất thiên nhiên trường Đại học Sir Pham thanh phổ Hồ Chỉ Minh đã tận tình trao đôi những kinh nghiệm đoán kết gắn bo và tạo mọi điều kiện giúp đỡ nhau trong xuất quả trình thực hiện để ải

Em xin chân thành cảm ơn!

Muc luc

MO DAU

CHUONG 1 TONG QUAN

3.33 Phương pháp xác đụ cấu trúc các hợp chất 10

2.3.2 Điệu thế các lại cao va cũ lấp các hợp chất rong cao hulanol u CHƯƠNG 3 KET QUA VA BIỆN LUẬN TAI LIEU THAM KHAO

PHY LUC

HÌNH ẢNH

Hình 1.1 Cây có the

Tình 1.2, Hoa eo the son

Hin 3.1, Phân mang I vi cfu tric A va edu troe B Hint 3.2, Tuomg quan HMBC evi CT3

SƠ bỏ

Xử đồ 3.1 Quy trình điều chế

Ser dk Quy trình sắc ký cột siliea gel cao cthy] aeetate

Sir db 2.3 Quy tin sic hy et silica gol phân đoạn A3

BANG BIEU

ing 2.1 Khai lượng của các loại cao và thu suất so với bột mẫu nguyên liệu bạn đầu bạn đầu

Bang 3.2 Kết quả sắc ký cột trên cao ethyl acetale của cây co the,

Đăng 3.1 Số liệu phố 'H-NMR và ”C-NMR của hợp chất CT3

Đảng 3.2 Bảng so sánh số liêu phd 'H-NMR và ''C-NMR của hợp chất D-

“TCI6 và Minimosid

brs

a

dd

IMBC

broad singlet (mat don rong)

doublet (mũi đôi)

doubleLofF doublet (mỗi đôi đội)

Heteronuctear Multiple Bonds Correlation

coupling constant (hing sb ghép spin)

muliplet (môi da)

Nuclear Magnctie Resonance spectroscupy (phủ công hưởng tir hat nhân)

singlet (mii den)

sắc Mỹ cật

sắc ký lớp móng điều chế

Khoa Huận tốt nghiệp Vo Thi Kim Hing

MO DAU

Cây có từ lâu đã được dùng nhiều trong các bài thuốc y học cổ truyền dân

an ở Việt Nam cũng như trên thể

¡ Đây là nguồn tải nguyên thực vật cỏ giá trị thiết thực trong việc phối hữa bệnh cho nhân đán Từ cây có các nhà khoa học

Š giải đã chiết xuất được nhiễu hợp chất hôa học được đùng để chữa tị nhỉ

cản bệnh hiểm nghèo như hợp chit taxol được cô lập từ cây thông đỏ hợp chất vinblastin tt ey dia con ding digu trị une thư ngực ở phụ nữ Ngây nay, sự kết hợp của ngành hỏa học các hợp chất tự nhiên với các ngành + được học, sinh học, đã không ngừng nghiền cửu thành phin hỏa học vả hoạt tính việc chữa bệnh cho con người

Vigt Nam thuộc vũng khí hậu cận nhiệt đới với bệ thực vật rất phong phủ đa dạng Nhiễu cây thuốc có giá trị sử dụng cao như cây sâm Ngọc Linh mọc ử tinh

Quang Nam, cây thông đỏ mọc ở Lâm Đồng Đây là một thuận lợi lớn cho vi

nghiên cửa của các nhà hóa học các hợp chất thiên nhiên ở nước la

Cây có the từ lâu đã được đũng trong y học dẫn tộc đẻ điều trị các chứng

bệnh như viêm họng cắp viêm mỗi đị ứng viêm phế quản man tinh, ho ga, ii chén khoa học nào công bổ về nghiền cửu thành phần hỏa học của cây có the Vi lý do

đó, túng tôi chọn cây có the là đổi trợng nghiên cứu trong để tải này, với mong muỗn lãm sáng tỏ thành phần hóa học của cây có the gp phần vào việc nghiền cứu

gia trị sử dụng của được thảo Việt Nam

CHƯƠNG 1 TONG QUAN 1,1, Vải nét về Họ Cúc - Asteraceae!”!

Họ Cúc (Asteraceae) còn được gọi là họ Hướng dương hay họ Cúc tây, là một họ thực vật có hai lá mắm

Họ Cúc là họ lớn nhất trong ngành thực vật có hoa với khoảng 25.000 loài gồm 2 phan ho:

- Phân họ hoa ông (Tubuliforae Asteroideae): trên cụm hoa chi có hoa hình

ng hoặc hoa hình ông ở giữa, hoa hình lười nhỏ ở xung quanh đầu

= Phan ho hoa lưỡi nhỏ (Liguiiflorae Cieborioideae); tất cả vác hoa trong cụm hoa đầu là hoa lưỡi nhỏ không bao giờ có hoa ẳng Cây có nhựa mũ

Hẹ Cúc phần bố rộng khắp thể giới nhưng phổ biển nhất tại các khu vực ăn đối và miễn m hiệt dời

Ở Việt Nam họ Cúc cỏ khoang 125 chỉ trên 350 loài chủ yếu là có dại một

xà được trồng làm cảnh (các loại hoa cúc) rau án (ngải cứu cái cúc rau điểp) giá

vì (súc tân),

+ Mot sé đặc điểm thực vật của họ Cúc:

‘Than co hay bụi sống một năm hay nhiều năm it khi là dây leo hay cây gỗ

ất dự trừ ở đây không phải là tỉnh bột

Rẻ có thể phủ lên thành củ, nhưng cl

lin (thược được)

Lá có hình dạng biển thiên không có lá kèm, thường mọc đổi hoặc tụ thành

hình hoa ở gốc có những loại lá có gai Thông thường phiển lả nguyễn xẻ sâu hinh

dạng lä kếp hình lông chim hay hình chân xịt hiểm gặp

(Cum hoa: Đầu có thể mang nhiễu hoa hay ít hoa Đầu có thé dime ring te

huy tụ thành chim gic xim nhưng thông thường nhất là tụ thành ngũ Có thể xem hay liên tục, hoa giá ơ hia, hoa non ở giữa Dạng thông thường của hoa tự đầu là hình nón nhưng cũng có thể phẳng hoặc có khi lõm hình chén [ lu mang hai loại lá hắc lá bắc ngoài bắt thụ, tạo thành một tổng bao Cav Ki be nay có thể định trên một hãng (Sencciio, 1agetes) hoặc đính trên nhiều hãng kết hợp Hình đạng và kịch

thước của là bắc ngoài rất biển thê G actisd các lá bắt ngoâi nạc và phẫn nảy ăn

Khĩa luận ốt ngh Võ Thị Kim Hãng

ng ơ giữa cĩ nhiệm vụ sinh sản và hoa khơng đều hình lười nhỏ cĩ ba răng ử bìa

«ling vai tr cia trảng để thú hút cơn trùng Kiễu đầu này gọi là đi giao Bao hoa: là đội thường giảm vì nhiệm vụ bảo vẻ đã được đảm nhiệm bi các

là bắc của tổng bao, Đài cĩ thể ơn một gữ nhỏ, nguyễn hay

thủy, gờ cĩ thể mang những vây hoặc một vịng lơng tơ Sau khi thy tinh, dai cĩ thể

phát triển thành một mào lơng cĩ thể láng hay cỏ gi, cĩ nhiệm vụ trong sự phát tần dẫu dị giao) hoặc khơng đi

3/3 hoặc hình ơng dai hoi cong

Bộ nhị: năm nhị bằng nhau đính trén dng trang và xen kẽ với cảnh hoa Chỉ

66 dang lười nho cĩ ba răng hay răng hoặc hình mơi

nh rb nhau từ tơng Cynareac Bao phẫn mở đạc, hướng trong dính nhau hành một

ng bao quanh vịi Chung đới thường kéo đài trên bao phản thành hộ Ngồi ra bao phần cịn mang ở gốc những phụ bộ chội ra tạo thành những tai nhỏ, che chớ cho

mãi hoa ở gốc vời khỏi bị nước mưa

Bộ nhụy: hai là noằn ở vị tí trước và sau tạo thành bầu đưới một ơ đựng

một nỗn, định đây Dia mat trên bầu Ở hoa lưỡng tính và hoa cdi, véi xuy đĩa mặt và chỉa thành hai nhánh đầu nhụy (voi khơng chia thành ở hoa bắt thụ), Các qua ủng câu tạo bởi các bao phan Su thụ phẫn nhữ cơn trùng Qua bé, thường mang một máo lỏng do đải biến đỏ cĩ khi mào lơng dược mang bởi một cuống đải hay ngắn Đơi khi quả trần hoặc cĩ mĩc hay cĩ gai Hạt

khơng cĩ nội nh lả mẫm to nhiều khỉ chứa đẫy

Họ Cúc là họ có số loài được dũng làm thuốc lớn nhất trong giới thực vật Có khoảng 5I loài của họ Cúc được dùng làm thuốc, trong đó có 18 loài được ding cic tin, hing hoa, hy thiém, ké đầu ngựa, khoản đông hoa, mẫn tưới, mộc hương,

ngải cứu, ngưu bằng, sai đất, thương truật, thanh hao hoa vàng, tử uyễn 1.2 Các chỉ trong họ Cúc ~ Asteraceae

© Vigt Nam, họ Cúc có khoảng 125 chỉ, trong đó có một số chỉ tiêu biểu, thường gặp nw chi Gerbera, chi Helianthus L, chi Cynara Cây cô the là một loài thuộc chỉ Cemipeda

1.3 Đặc điểm thực vật cây cỏ the|3|

Hình II Cây cỏ the Hình 1.2 Hoa cố the Cây có the thuộc họ Cúc, chỉ Centipeda

"Tên khoa học: Cemipeda minima (L),

Tên thông thường: nga bắt thực thảo, địa hồ tiêu, cầu tử thảo, cóc mắn, cúc mắn, thạch hỗ tuy

Có the là một loại cỏ mềm, mọc bò lan trên mặt đất ẩm, thân rắt nhiều cảnh,

ở ngọn có lông min trắng, nhưng toàn thân trông nhẫn bóng Lá đơn mọc so le, hình

10-18

ba l cạnh, đầu tú, phía công hẹp li, mép có mộ, hai hoặc ba răng cưa;

mm rộng 6-10 mm, gân chính hơi nỗi ở mặt dưới lá, gân phụ không rồ không có

cuồng Cụm hoa hình đầu mọc ở nách lá, hoa cái gồm nhiều lớp, cánh hoa hình ống mau trắng, trên có rằng cưa, hoa lưỡng tinh it hon, Tring hoa hình chuông, có bốn

4

răng hình trừng rộng mãu hơi tim Qua bể bổn cạnh trên cạnh cỏ lông mịn nhỏ

Mia hoa th i thang 4 - 7 Dé dùng làm thuốc thường hái toàn cấy

gầm cà rễ, dũng tươi hay phơi hoặc sấy khô Cây mọc hoang khắp nơi ở vũng đồng

hổ chỗ những chân tường ẩm khe gạch vỡ hở đất cũng thường hay gập cây này 1.3.1, Phin bd thu hái và chế biến

Có the mọc hoang ở nơi im thip hoc ruộng bô hoang ở Việt Nam Trung

ju), Malaysia, Indonesia, An Độ Nhật Bản

Quốc (Quảng Tây Giang Tỏ Quảng

Châu Úc, Manga, snọc phố biển sau vu gật, mọc nhiễu vào thắng giếng:

.®ˆ Một số bài thuốc dân gian sử dụng cây có the:

đầu xanh một ph nhỏ đắp lên nơi bị mẫn ngứa đã được rửa sạch 1 mudi Vai hạt

© Chia min ngiza (eczema): 60 the hai pÏ

Ca ba thir

© Chita ho: có the khô 20 g hoặc tươi 30 nước S00 ml sắc côn 100 mi ehia

hạ lẫn uống trong ngày

+ Chữa viêm mỗi nghợt mũi: đng có the, hos mộc lan (mỗi vị 6 kế đầu

ngựa (1 g) xắ: lổA nước uỏng, Nếu dũng ngoài nghiền có the tế tân và bạch chỉ

rỗi đặt mỗi lẫn một Ít vào Irong mũi

Thành phẫn hóa học có trong cây có the

Nam 1989, IDipl Gupta và J Singh công hỗ bổn trilerpenoid saponin mới từ

28-oic-2R-/-D-

ylopyranosid (2), 34.202 n-28-O-f-D-xylopyranosid (3), 3a.N6a.21a.224.28:pentahydroxyolean-I2-en-3-0-B-D-xylopyranosy -28-O-f-D-

vấp ccó the là acid la-3/:l94

i98 -pentahy droxy urs-12-en- tetrahydroxyurs-12-

tetrahydroxyolean-

xy lopyranosid (4).!4!

Khoa Iudn tit nghigp Vo Thi Kim Hang Năm 1998, Robin s 1 Taylor vag H Neil Towers đã cô lập được bà sesquiterpen lacton có hoạt tính kháng khuẩn là 6-(-methylacrylylplenolin (12) 6- /.isobutyroylplenolin (133 6 angeloylplenolin (14)!

Nam 2007, Heng-Xing Liang và cộng sự đã cỏ lập được được các sesquiterpen lacton la 4,$f-dihydroxy-26-(isobutyryloxy }-10H-guai-11(13)-en- 12.8f-otid (15) 4-hydroxy-IfH-guaia-9.11(13}dien-I2.8-olid (16) 2f- (sobutyryloxy Morlenalin (17), pulchellin-2a-O.-tight (18), forilenalin-22-O-tigat

«ayy

CHUONG 2 THUC NGHIEM VA PHUONG PHAP

NGHIEN CUU

3.1 Đối tượng nghiên cứu

Trong phạm vỉ để tải này chúng tôi chọn khảo sat cao ethyl acetate eta cây

cò the được thứ bãi tại tinh Vinh Long vào tháng 07 năm 2013, Cây được nhận danh tên khoa học bởi TS Hoàng Vị 1, khoa Sinh, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên Thực hiện sắc ky -ao ethyl acetate với chất hấp phu silica gel sư dụng hệ dung mỗi giải ly diclorometan-methanol với độ phân cực tang dần thu được 10 phan doan (được ký hiệu từ C-1 đến CT-X) Do giới hạn về thời gian chúng tôi chỉ khao sắt phần đoạn CT-| và CI-V,

2.2.1, Phuong pháp cô lập các hợp chit

Để cô lập các hợp chất hữu cơ trong để tải này đã đùng các phương pháp sắc

ký, bao gam sic hy lop mong silica gel sắc kỹ lớp móng pha đáo RP-18 sắc ký lớp mông siliea gel điều chế sắc kỹ cột silca ge, sắc ký cột pha đảo RP-18

3.3.3 Phương pháp xác định cấu trúc các hợp chất

Phương pháp chung để xác định cẫu trủc hóa học các hợp chất cô lập được là dùng các phương pháp quang phá hiện đại hao ghm phổ khối lượng phân giải cao phố vông hưởng từ hạt nhân (1D-NMR và 2ID-NMR)

2.3.Thye nghiệm

2a ác điều kiện thí nghiệm

Dung méi dùng trong sắc ký cột và sắc ký lớp mong là dielorometan cloroform methanol, n-butanol el acetate

Sie ky lap mong được thực hiện trên băn mỏng trang sin DC-Atufolien 60

Fs (Merck) va bin méng ining sn RP-IA Fs: (Merck), Các chất trên bản móng

dược phát hiện bằng đến LIV hoặc dùng dung dich H;SOs Ban méng sau khí khai

0

triển bằng hệ dung môi giái ly thích hợp được nhúng vào dung dịch I›SO,

5%,

iy khô và sấy nóng từ từ cho đến khi hiện màu

Phổ công hưởng từ hạt nhãn được ghi trên máy Bruker AMS00 FT-NMR Spectrometer (tin sé 500 MIz dỗi với phô 'H-NMR và 125 MH¿ đối với phố 'ẺC- NMR) với TMS là chất nội chun fa CDCI vi DMSO 18 dung môi Khỏi phô phân giai cao đo trên máy Bruker MicroTOF-QIL

2.32, Didw ché cao ethyl acetate vi clip các hợp chất

3.4.1.1 Điều chế các loại cao

Cây lươi sau khi thú hải về được rửa sạch và sấy ở 60%C cho đến khi khỏi lượng không đối sau đỏ mẫu nguyên liệu được xay nghiỄn thành bội thô thủ được 3.2 ke Đán hoàn lưu 3⁄2 kg bột tho v6i dung m6i methanol (3 tin x 3 giờ) lọc long lòng cao methanel này ẫn lượt với

đầu rợn của các loại cao và thú suất so với bột mẫu nguyễn liệu ban

[_ Khôi lượng tạ) “Thủ suất (%)

So dé 2.1, Quy trình điều chế các loại cao

~ Bun hod lưu với MẸOH (40 lí, 3 giờ x 3 lẫn, lọc nông

~ Cô quay đến cần ở áp suất thấp

Cao eter dau héa (320.22) Phần dịch còn lại (97.18)

~ Chiết phân bổ lỏng - long

oi ethyl acetate Phần dịch còn l Cao ethyl acetate (36.52)

“Chiết phân bộ long long

với buthanol bão hòa nước Cô quay thụ hỗi dung mỗi

| Cao n-butanol (13.6 g)

inh là dụng dịch acid sulrie 28% (sây nóng khi những) hoặc phát hiện vất bằng đến UV, Kết qu sắc ký cột cao cthyl acetate được trình bảy trong bảng 2.2

“#0

096