ĈҤI HӐC QUӔC GIA TP HCM
75ѬӠ1*ĈҤI HӐC BÁCH KHOA
NGUYӈN THӎ KIM NGÂN
NÂNG CAO CHҨ7/ѬӦNG CHIӂT XUҨT TӮ RAU MÁ VÀ Ĉӎ1++ѬӞNG ӬNG DӨNG CHO SҦN PHҬM
Trang 2&{QJWUuQKÿѭӧc hoàn thành tҥi: 7UѭӡQJĈҥi hӑc Bách Khoa ± Ĉ+4*-HCM
Cán bӝ Kѭӟng dүn khoa hӑc: PGS TS Lê Thӏ Hӗng Nhan
Cán bӝ chҩm nhұn xét 1: TS Hà Cҭm Anh
Cán bӝ chҩm nhұn xét 2: PGS TS Mai HuǤnh Cang
LuұQYăQWKҥFVƭÿѭӧc bҧo vӋ tҥL7UѭӡQJĈҥi hӑF%iFK.KRDĈ+4*7S+&0QJj\WKiQJQăP
Thành phҫn HӝLÿӗQJÿiQKJLiOXұQYăQWKҥFVƭJӗm: 1 PGS TS Bҥch Long Giang
2 TS Hà Cҭm Anh
3 PGS TS Mai HuǤnh Cang 76/r9NJ+j
5 TS Phan NguyӉn QuǤnh Anh
Xác nhұn cӫa Chӫ tӏch HӝLÿӗQJÿiQKJLi/9Yj7Uѭӣng Khoa quҧn lý chuyên ngành sau khi luұQYăQÿmÿѭӧc sӱa chӳa (nӃu có)
Trang 3ĈҤI HӐC QUӔC GIA TP.HCM CӜNG HÒA XÃ HӜI CHӪ 1*+Ƭ$9,ӊT NAM 75ѬӠ1*ĈҤI HӐC BÁCH KHOA Ĉӝc lұp ± Tӵ do ± Hҥnh phúc
NHIӊM VӨ LUҰ19Ă1 THҤ&6Ƭ
Hӑ và tên hӑc viên: NGUYӈN THӎ KIM NGÂN MSHV: 1970453 1Jj\WKiQJQăPVLQK 06/10/1997 1ѫLVLQK Ĉӗng Nai Chuyên ngành: Kӻ thuұt Hóa hӑc Mã sӕ: 8520301
,7Ç1Ĉӄ TÀI: NÂNG CAO CHҨ7/ѬӦNG CHIӂT XUҨT TӮ 5$80È9¬ĈӎNH
+ѬӞNG ӬNG DӨNG CHO SҦN PHҬ0&+Ă06Ï&&È1+Æ1
Tên tiӃng Anh: Enhancing quality of Centella asiatica extract for application trend in
personal care products
II NHIӊM VӨ VÀ NӜI DUNG: Nghiên cӭu, ÿiQKJLá thành phҫn saponin và hoҥt
tính cӫa hai loҥi rau má rҿ quҥt YjOiWUzQÿӗng thӡi khҧo sát quá trình nâng cao hàm Oѭӧng saponin trong chiӃt xuҩt tӯ rau má, ÿӏQKKѭӟng ӭng dөng cho sҧn phҭPFKăPVyFcá nhân Vӟi nӝi dung:
x Chuҭn bӏ YjÿiQKJLá nguyên liӋu
x Khҧo sát quá trình trích ly saponin tӯ rau má x ĈiQKJLiWKjQKSKҫn saponin trong hai loҥi rau má
x KhҧRViWTXiWUuQKQkQJFDRKjPOѭӧng saponin tәng trong chiӃt xuҩt tӯ rau má x ĈiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa, ӭc chӃ hình thành melanin cӫa các chӃ phҭm tӯ
Trang 4LӠI CҦ0Ѫ1
LӡLÿҫu tiên, tôi xin gӱi lӡi cҧPѫQVkXVҳc nhҩWÿӃQJLDÿuQKQKӳQJQJѭӡLWKkQÿmluôn bên cҥnh, ӫng hӝ vӅ vұt chҩt lүn tinh thҫQÿӇ tôi có thӇ hӑc tұp và sinh hoҥWGѭӟi QJ{LWUѭӡQJÿҥi hӑc Bách Khoa
Tôi xin gӱi lӡi cҧPѫQÿӃn toàn bӝ cán bӝ giҧng viên cӫa Khoa Kӻ thuұt Hóa hӑc QyLFKXQJFNJQJQKѭFiFFiQEӝ giҧng viên cӫa Bӝ môn Kӻ thuұt Hóa hӳXFѫQyLULrQJYuÿmFXQJFҩp và trang bӏ cho tôi nhӳng kiӃn thӭFFѫEҧn và tҥo nӅn tҧng vӳng chҳFÿӇ thӵc hiӋn luұQYăQ
Ĉһc biӋt, tôi muӕn gӱi lӡi cҧPѫQVkXVҳFÿӃn PGS TS Lê Thӏ Hӗng Nhan và TS Phan NguyӉn QuǤQK$QKQJѭӡLÿmWUӵc tiӃSÿӏQKKѭӟQJKѭӟng dүQJL~Sÿӥ tôi tұn tình và tҥRÿLӅu kiӋn thuұn lӧi nhҩt cho tôi trong quá trình thӵc hiӋn luұQYăQWӕt nghiӋp Xin chân thành gӱi lӡi cҧP ѫQÿӃn Thu Hҧo, QJѭӡLÿmOX{QKӛ trӧ, JL~S ÿӥ tôi trong quá trình tìm hiӋQÿӅ tài luұQYăQQj\
Cuӕi cùng, tôi xin gӱi lӡi cҧPѫQÿӃQJLDÿuQKYjEҥn bè, nhӳQJQJѭӡi luôn bên cҥQKYjJL~Sÿӥ tôi trong suӕt quá trình thӵc hiӋn luұQYăQӣ phòng thí nghiӋm 209B2 FNJQJQKѭFKLDVҿ nhӳng niӅm vui và NKyNKăQWURQJVXӕt thӡi gian qua
Tp Hӗ Chí Minh, ngày 6 tháng 7 QăP
NguyӉn Thӏ Kim Ngân
Trang 5TÓM TҲT
Nghiên cӭu tұSWUXQJÿiQKJLi thành phҫn saponin và hoҥt tính sinh hӑc cӫa rau má rҿ quҥt và rau má lá tròn ӣ ViӋt Nam và quy trình tinh chӃ, QkQJFDRKjPOѭӧng asiaticoside và madecassoside trong chӃ phҭm tӯ rau má bҵng nhӵa hҩp phө +jPOѭӧng saponin tәng trong cao chiӃt rҿ quҥt và cao chiӃt lá tròn WѭѫQJÿѭѫQJQKDX Yj21,79% Cө thӇKjPOѭӧng asiaticoside và madecassoside trong cao chiӃt rҿ quҥt lҫn Oѭӧt là 6,24% và 10,42% Tuy nhiên, rau má lá tròn không có thành phҫn asiaticoside Yj KjP Oѭӧng madecassoside trong cao chiӃt chӍ chiӃm 0,91% Asiaticoside và madecassoside trong cao chiӃt rau má rҿ quҥWÿѭӧc nâng cao KjPOѭӧng bҵng quá trình tinh chӃ sӱ dөng nhӵa hҩp phө HPD100 Bӝt chӃ phҭP WKX ÿѭӧF Fy KjP Oѭӧng DVLDWLFRVLGHYjPDGHFDVVRVLGHOrQÿӃn 15,78% và 54,38% Ĉӗng thӡi, hoҥt tính kháng oxi hóa cӫa bӝt chӃ phҭPFNJQJWăQJOrQÿiQJNӇ so vӟi hai loҥi cao chiӃt rau má, vӟi giá trӏ IC50 cӫa bӝt chӃ phҭm là 2,74 ppm (ABTS) và 47,64 ppm (DPPH) Hoҥt tính kháng oxi hóa cӫa cao chiӃt rau má lá tròn tӕWKѫQso vӟi cao chiӃt rҿ quҥt vӟi giá trӏ IC50 lҫn Oѭӧt là 200,9 ppm và 269,2 ppm (DPPH) Bên cҥQKÿyUDXPiOiWUzQFNJQJFyKRҥt tính hӛ trӧ trҳng da tӕWKѫQ Nhìn chung, bӝt chӃ phҭm tӯ nghiên cӭu này cho thҩy tiӅPQăQJcao khi ӭng dөng cho các sҧn phҭPFKăPVyFFiQKkQ
Trang 6ABSTRACT
This research focused on evaluating saponins composition and biological activities of
Centella asiatica and Hydrocotyle verticillata in Vietnam and the enrichment and purification process of asiaticoside and madecassoside from Centella asiatica extract with macroporous resins The total saponins content in C asiatica and H verticillata
extracts were similar, 21.91% and 21.79% In particular, the asiaticoside and
madecassoside contents in C asiatica extract were 6.24% and 10.42%, respectively However, no asiaticoside trade was founded in H verticillata and the madecassoside
content of this extract was only 0.91% After enrichment and purification process with
HPD100, the enriched C asiatica extract had the asiaticoside and madecassoside
contents increased to 15.78% and 54.38% Besides, the antioxidant activity of enriched extract also increased significantly with IC50 value of 2.74 ppm (ABTS) and 47.64 ppm
(DPPH) The antioxidant activity of H verticillata was better than that of C asiatica
with IC50 value of 200.9 ppm and 269.2 ppm (DPPH), respectively Moreover, H verticillata also had better whitening effect than C asiatica Overall, the enriched
extract from this research showed high potential for application in personal care products.
Trang 7LӠ,&$0Ĉ2$1
7{L[LQFDPÿRDQÿk\OjF{QJWUuQKQJKLrQFӭu cӫa riêng tôi Các sӕ liӋu, kӃt quҧ nêu trong luұQYăQOjWUXQg thӵFYjFKѭDWӯng có ai công bӕ trong bҩt kǤ công trình nào khác
Tp Hӗ Chí Minh, ngày 06 tháng 07 QăP
NguyӉn Thӏ Kim Ngân
Trang 81.1.1 Cҩu trúc cӫa saponin 2
1.1.2 Tính chҩt hóa lý cӫa các hӧp chҩt saponin 4
1.1.3 Hoҥt tính sinh hӑc cӫa các hӧp chҩt saponin 5
1.1.4 Ӭng dөng hӧp chҩWVDSRQLQWURQJWKѭѫQJPҥi 7
3KѭѫQJSKiSQkQJFDRKjPOѭӧng saponin trong chӃ phҭm 8
1.2 Tәng quan vӅ cây rau má 10
1.2.1 Phân loҥLYjÿһFÿLӇm hình thái 11
Trang 9;iFÿӏnh các tính chҩt cӫa mүu 22
;iFÿӏQKKjPOѭӧng saponin tәng trong dӏch chiӃt 23
ĈiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa 25
ĈiQKJLiKRҥt tính hӛ trӧ trҳng da 27
2.4 Nӝi dung thӵc hiӋn 28
2.4.1 Quy trình thӵc hiӋn 28
2.4.2 Trích ly triterpenoid saponin tӯ rau má 29
2.4.3 Tinh chӃQkQJFDRKjPOѭӧng saponin trong cao chiӃt 30
ĈiQKJLiFiFFKӃ phҭm tӯ rau má 32
&+ѬѪ1* .ӂT QUҦ VÀ BÀN LUҰN 35
3.1 Chuҭn bӏ nguyên liӋu 35
3.3.1 ҦQKKѭӣng cӫa nӗQJÿӝ dung dӏch cao chiӃt 49
3.3.2 ҦQKKѭӣng cӫa dung môi rӱa giҧi 49
3.3.3 ҦQKKѭӣng cӫa polymer tinh chӃ 51
Trang 10&+ѬѪ1* .ӂT LUҰN VÀ KIӂN NGHӎ 70
TÀI LIӊU THAM KHҦO 72
PHӨ LӨC 76
Trang 11DANH MӨC BҦNG
Bҧng 1 1 Ĉһc tính vұt lý cӫa nhӵa hҩp phө 10
Bҧng 1 2 HӋ thӕng phân loҥi cây rau má rҿ quҥt [33] 12
Bҧng 1 3 HӋ thӕng phân loҥi cây rau má lá tròn 13
Bҧng 1 4 6RViQKÿһFÿLӇm hình thái 2 loҥi rau má 14
Bҧng 1 5 Bҧng thành phҫn hoҥt chҩt cӫa cây rau má [33] 15
Bҧng 1 6 KӃt quҧ ÿӏnh tính dӏch chiӃt methanol cӫa hai loҥi rau má [37] 16
Bҧng 2 1 Hóa chҩt sӱ dөng 21
Bҧng 2 2 Dөng cө và thiӃt bӏ sӱ dөng 21
Bҧng 3 1 Tính chҩt cӫa bӝt rau má khô 36
Bҧng 3 2 Giá trӏ Rf cӫa các hӧp chҩt 37
Bҧng 3 3 NӗQJÿӝ saponin tәng cӫa dӏch chiӃt rau má rҿ quҥt 39
Bҧng 3 4 NӗQJÿӝ saponin tәng trong các dӏch chiӃt lҫn thӭ nhҩt vӟi dung môi khác nhau 41Bҧng 3 5 NӗQJÿӝ saponin tәng cӫa dӏch chiӃt EtOH 98% cӫa rau má lá tròn 42
Bҧng 3 6 NӗQJÿӝ saponin tәng cӫa dӏch chiӃt EtOH 75% 43
Bҧng 3 7 Tính chҩt cӫa cao chiӃt rau má 45
Bҧng 3 8 Tính chҩt cӫa các loҥi bӝt chӃ phҭm 53
Bҧng 3 9 HiӋu suҩt thu hӗi saponin tӯ cao chiӃt 55
Bҧng 3 10 So sánh tính chҩt cӫa các loҥi bӝt chӃ phҭm 56
Bҧng 3 11 Tính chҩt cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má 57
Trang 12DANH MӨC HÌNH
Hình 1 1 Cҩu trúc khung carbon 11 nhóm chính cӫa saponin [3] 4
Hình 1 2 Hình thái bӅ mһt cӫa nhӵa hҩp phө không phân cӵc [28] 9
Hình 1 3 Ngoҥi quan mӝt sӕ loҥi rau má 11
Hình 1 4 Hình thái cây rau má 12
Hình 1 5 Hình thái rau má lá tròn 13
Hình 1 6 Cҩu trúc cӫa các hoҥt chҩt triterpenoid chính trong rau má 16
Hình 2 1 Không gian màu CIE LCh 23
Hình 2 2 0i\ÿRPjX&5-400 23
Hình 2 3 SҳFNtÿӗ cӫa sҳc kí bҧn mӓng 23
Hình 2 4 Quy trình tách chiӃt, tinh chӃ YjÿiQKJLiWtQKFKҩt chӃ phҭm tӯ rau má 28
Hình 2 5 Quy trình tinh chӃ cao chiӃt rau má bҵng nhӵa hҩp phө 31
Hình 3 1 Rau má rҿ quҥWWѭѫL 35
Hình 3 2 Rau má rҿ quҥt sҩy khô 35
Hình 3 3 5DXPiOiWUzQWѭѫL 35
Hình 3 4 Rau má lá tròn sҩy khô 35
Hình 3 5 Sҳc kí lӟp mӓng phân tách các hӧp chҩt trong TECA (1), cao chiӃt rҿ quҥt (2) và cao chiӃt lá tròn (3) 36
Hình 3 6 Ngoҥi quan cӫa dӏch chiӃt rau má rҿ quҥt vӟi các loҥi dung môi khác nhau 38
Hình 3 7 ҦQKKѭӣng cӫa dung môi chiӃWÿӃn hiӋu suҩt chiӃt saponin 38
Hình 3 8 Ngoҥi quan dӏch chiӃt EtOH 98% tӯ bӝt rau má rҿ quҥt 39
Hình 3 9 ҦQKKѭӣng cӫa tӍ lӋ nguyên liӋX GXQJP{L JP/ ÿӃn hiӋu suҩt chiӃt saponin 40
Hình 3 10 Ngoҥi quan cӫa dӏch chiӃt rau má lá tròn vӟi các loҥi dung môi khác nhau 41
Hình 3 11 Ngoҥi quan dӏch chiӃt EtOH 98% cӫa rau má lá tròn 42
Hình 3 12 Phә hҩp thu UV-Vis cӫa dӏch chiӃt rau má rҿ quҥt và rau má lá tròn 43
Trang 13Hình 3 13 ҦQKKѭӣng cӫa nguyên liӋXÿӃn nӗQJÿӝ saponin tәng 44
Hình 3 14 SҳFNtÿӗ HPLC cӫa TECA, cao chiӃt rҿ quҥt và cao chiӃt lá tròn 46
Hình 3 15 SҳFNtÿӗ HPLC cӫa asiaticoside, madecassoside, cao chiӃt rҿ quҥt và cao chiӃt lá tròn 47
Hình 3 16 ҦQKKѭӣng cӫa nӗQJÿӝ dung dӏFKÿӃn khҧ QăQJUӱa giҧi saponin 49
Hình 3 17 ҦQKKѭӣng cӫDGXQJP{LÿӃn ngoҥi quan cӫa dung dӏch rӱa giҧi 50
Hình 3 18 ҦQKKѭӣng cӫa dung môi rӱa giҧLÿӃn khҧ QăQJUӱa giҧi saponin 50
Hình 3 19 Dung dӏch rӱa giҧi lҫn 1 và lҫn 2 cӫa 3 loҥi nhӵa hҩp phө 51
Hình 3 20 Khҧ QăQJKҩp phө và rӱa giҧi saponin cӫa ba loҥi nhӵa 52
Hình 3 21 Phә hҩp thu UV-Vis cӫa dung dӏch bӝt chӃ phҭm 54
Hình 3 22 SҳFNtÿӗ HPLC cӫa bӝt chӃ phҭm 55
Hình 3 23 Khҧ QăQJNKiQJR[LKyDFӫa các mүXWKHRSKѭѫQJSKiSEҳt gӕc tӵ do ABTS 58
Hình 3 24 Giá trӏ IC50 cӫa các mүXWK{QJTXDSKѭѫQJSKiSEҳt gӕc tӵ do ABTS 59
Hình 3 25 Khҧ QăQJNKiQJR[LKyDFӫa các mүXWKHRSKѭѫQJSKiSEҳt gӕc tӵ do DPPH 60
Hình 3 26 Giá trӏ IC50 cӫa các mүXWKHRSKѭѫQJSKiSEҳt gӕc tӵ do DPPH 60
Hình 3 27 +jPOѭӧng melanin nӝi bào cӫa hai mүu cao chiӃWUDXPiYjÿӕi chӭng 61
Hình 3 28 Ngoҥi quan cӫa hӋ giҧ lұp các sҧn phҭm tӯ rau má ӣ tuҫQÿҫu tiên 62
Hình 3 29 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn sӕc nhiӋWÿӃn màu sҳc cӫa chӃ phҭm 63
Hình 3 30 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn sӕc nhiӋWÿӃn nӗQJÿӝ saponin tәng 64
Hình 3 31 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn nhiӋWÿӝ ÿӃn màu sҳc cӫa chӃ phҭm 65
Hình 3 32 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn nhiӋWÿӝ ÿӃn nӗQJÿӝ saponin tәng 66
Hình 3 33 ҦQKKѭӣng cӫDiQKViQJÿӃn màu sҳc cӫa chӃ phҭm 67
Hình 3 34 ҦQKKѭӣng cӫDiQKViQJÿӃn nӗQJÿӝ saponin tәng 68
Trang 14DANH MӨC PHӨ LӨC
Phө lөc 1 ҦQKKѭӣng cӫDGXQJP{LÿӃn hiӋu quҧ chiӃt saponin trong rau má rҿ quҥt 76
Phө lөc 2 ҦQKKѭӣng cӫa tӍ lӋ nguyên liӋX GXQJP{LÿӃn hiӋu suҩt chiӃt saponin trong rau má rҿ quҥt 77
Phө lөc 3 ҦQKKѭӣng cӫa nguyên liӋXÿӃn nӗQJÿӝ saponin tәng cӫa dӏch chiӃt EtOH 98% 77Phө lөc 4 +jPOѭӧng saponin tәng cӫa cao chiӃt rҿ quҥt và cao chiӃt lá tròn 78
Phө lөc 5 ҦQKKѭӣng cӫa nӗQJÿӝ dung dӏch cao chiӃWÿӃn khҧ QăQJUӱa giҧi 78
Phө lөc 6 ҦQKKѭӣng cӫa dung môi rӱa giҧLÿӃn khҧ QăQJUӱa giҧi 79
Phө lөc 7 ҦQKKѭӣng cӫa polymer hҩp phө ÿӃn khҧ QăQJKҩp phө và rӱa giҧi 80
Phө lөc 8 +jPOѭӧng saponin trong các mүu bӝt chӃ phҭm 80
Phө lөc 9 Công thӭc hóa hӑc cӫa ABTS và DPPH 80
Phө lөc 10 KӃt quҧ ÿiQh giá hoҥt tính kháng oxi hóa cӫa cao chiӃt rҿ quҥWWKHRSKѭѫQJSKiSABTS 81
Phө lөc 11 KӃt quҧ ÿiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa cӫa cao chiӃWOiWUzQWKHRSKѭѫQJSKiSABTS 81
Phө lөc 12 KӃt quҧ ÿiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa cӫa bӝt chӃ phҭP WKHRSKѭѫQJSKiSABTS 82
Phө lөc 13 KӃt quҧ ÿiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa cӫa cao chiӃt rҿ quҥWWKHRSKѭѫQJSKiSDPPH 82
Phө lөc 14 KӃt quҧ ÿiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa cӫa cao chiӃWOiWUzQWKHRSKѭѫQJSKiSDPPH 83
Phө lөc 15 KӃt quҧ ÿiQKJLiKRҥt tính kháng oxi hóa cӫa bӝt chӃ phҭP WKHRSKѭѫQJSKiSDPPH 83
Phө lөc 16 KӃt quҧ ÿiQKJLiKRҥt tính hӛ trӧ trҳng da 84
Phө lөc 17 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn sӕc nhiӋWÿӃn màu sҳc cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má 84
Phө lөc 18 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn nhiӋWÿӝ ÿӃn màu sҳc cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má (45 oC) 85
Phө lөc 19 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋn nhiӋWÿӝ ÿӃn màu sҳc cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má (10 oC) 85
Trang 15Phө lөc 20 ҦQKKѭӣng cӫDÿLӅu kiӋQiQKViQJÿӃn màu sҳc cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má (Sáng)
Phө lөc 24 NӗQJÿӝ saponin tәng cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má ӣ ÿLӅu kiӋn nhiӋWÿӝ thҩp (10
oC) 87
Phө lөc 25 NӗQJÿӝ saponin tәng cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má ӣ ÿLӅu kiӋn sáng 88Phө lөc 26 NӗQJÿӝ saponin tәng cӫa các chӃ phҭm tӯ rau má ӣ ÿLӅu kiӋn tӕi 88
Trang 16DANH MӨC TӮ VIӂT TҲT
1 C asiatica Centella asiatica
2 H verticillata Hydrocotyle verticillata
acid)
Trang 17LӠI MӢ ĈҪU
ViӋt Nam là mӝW Qѭӟc có nhiӅu loҥi thҧo mӝc dân gian phát triӇQ 7URQJ ÿy
Centella asiatica (rau má rҿ quҥt) là mӝt loҥi thҧo mӝc thuӝc hӑ Apiaceae, phân bӕ rӝng
rãi ӣ nhiӅu vùng cӫa ViӋt Nam GҫQÿk\[Xҩt hiӋn thêm mӝt loҥi rau má mӟi du nhұp
vào ViӋW1DPÿѭӧc gӑi là rau má lá tròn, tên khoa hӑc là Hydrocotyle verticillata Cҧ
hai loҥLUDXPiQj\ÿӅu có các thành phҫn có hoҥt tính sinh hӑFQKѭVDSRQLQIODYRQRLGtanin
Rau má nәi tiӃng vӟi khҧ QăQJKӛ trӧ chӳa lành vӃWWKѭѫQJYjFKӳa trӏ các bӋnh ngoài da 7URQJÿyFiFWKjQKSKҫn triterpenoid saponin cӫDUDXPiQKѭDVLDWLFRVLGHmadecassoside, asiatic acid và madecassic acid có khҧ QăQJNtFKWKtFKWiLWҥo collagen, phөc hӗi chӭFQăQJFӫa da 'RÿyFK~QJÿѭӧc ӭng dөng rӝng rãi và phә biӃn trong các bài thuӕc cә truyӅn cӫDFiFQѭӟc cKkXÈÿһc biӋt ӣ ҨQĈӝ và Trung Quӕc Bên cҥQKÿyFiFFKӃ phҭm tӯ UDXPiFNJQJÿѭӧc ӭng dөng nhiӅXWURQJFiFOƭQKYӵFGѭӧc phҭm, thӵc phҭm và mӻ phҭm
Tuy nhiên, các chӃ phҭP UDX Pi WKX ÿѭӧc tӯ TXi WUuQK WUtFK O\ Fy KjP Oѭӧng VDSRQLQNK{QJFDRĈӇ WăQJKiӋu quҧ các hoҥt tính sinh hӑc cӫa saponin trong rau má, nhiӅXSKѭѫQJSKiSÿѭӧc sӱ dөQJÿӇ WăQJKjPOѭӧng saponin Mӝt trong nhӳQJSKѭѫQJSKiSÿyOjVӱ dөng nhӵa hҩp phө Nhӵa hҩp phө là mӝt loҥi polymer hҩp phө có cҩu WU~FYLP{ÿѭӧc ӭng dөng phә biӃn trong các quá trình tinh chӃ YjQkQJFDRKjPOѭӧng cӫa các loҥi hoҥt chҩWÿѭӧc trích ly tӯ thӵc vұWQKѭVDSRQLQIODYRQRLG,
Tӯ nhӳQJOtGRÿyÿӅ WjL ³1kQJFDRFKҩWOѭӧng chiӃt xuҩt tӯ UDXPiYjÿӏQKKѭӟng ӭng dөng cho sҧn phҭPFKăPVyFFiQKkQ´Trong phҥm vi luұQYăQQj\Qӝi dung chính bao gӗm hai phҫn là nghiên cӭu thành phҫn saponin trong hai loҥi rau má ViӋt Nam và xây dӵng quá trình tinh chӃQkQJFDRKjPOѭӧng saponin, tӯ ÿyÿӏQKKѭӟng ӭng dөng vào các sҧn phҭPFKăPVyFFiQKkQ
Trang 18&+ѬѪ1* 7ӘNG QUAN
1.1 TӘNG QUAN Vӄ HӦP CHҨT SAPONIN
Saponin là mӝt glycoside WKѭӡng gһp trong thӵc vұt, phân bӕ rӝng rãi trong tӵ nhiên 1yÿѭӧc biӃWÿӃn là hӧp chҩWNK{QJED\KѫLFKҩt hoҥWÿӝng bӅ mһt, là thành phҫn quan trӑng trong nhiӅu sҧn phҭm có nguӗn gӕc tӯ tӵ nhiên6DSRQLQWKѭӡng tұp trung trong rӉ cây, cánh hoa và hoa cӫa nhiӅu loài thӵc vұt, bên cҥQKÿy QyFzQÿѭӧc tìm thҩy trong nhiӅu loài sinh vұt biӇn [1] NhiӅu nghiên cӭXÿm công bӕ saponin có mһt trong KѫQ Kӑ thӵc vұt Nguӗn saponin chӫ yӃu ÿѭӧc tìm thҩy trong các cây hӑ ÿұu OHJXPHV QKѭÿұXQjQKÿұX[DQKÿұu phӝQJ«1JRjLUDVDSRQLQFNJQJFyWURQJ\Ӄn mҥch, các loài thuӝFFKLKjQK DOOLXP PăQJWk\WUjUDXELQDFӫ cҧLÿѭӡng và khoai lang Mӛi loài thӵc vұt chӭa mӝt hӛn hӧp saponin phӭc tҥp vӟi nhiӅu cҩu trúc khác nhau Thành phҫn saponin trong mӛi loài bӏ ҧQKKѭӣng bӣi loҥi thӵc vұt, nguӗn gӕc gen, P{LWUѭӡng và các yӃu tӕ ҧQKKѭӣQJWURQJTXiWUuQKVLQKWUѭӣng [2]
Tên gӑL³VDSRQLQ´FyQJXӗn gӕc tӯ tiӃQJ/DWLQ³VDSR´YӟLêQJKƭDOj[jSKzQJEӣi vì các phân tӱ saponin khi tiӃp xúc vӟL Qѭӟc sӁ hình thành bӑt giӕQJ QKѭ [j SKzQJSaponin bao gӗm các aglycone không phân cӵc cùng vӟi các monosaccharide Sӵ kӃt hӧp giӳa các thành phҫn không phân cӵc và phân cӵc trong cҩu trúc cӫa saponin giҧi thích cho khҧ QăQJWҥo bӑWNKLSKkQWiQWURQJQѭӟc cӫa saponin Saponin có nhiӅu tính chҩt vұt lý, hóa hӑc và hoҥt tính sinh hӑc nәi trӝLQrQQyÿѭӧc ӭng dөng rӝng rãi trong các ngành thӵc phҭm, mӻ phҭPYjGѭӧc phҭm [3]
1.1.1 Cҩu trúc cӫa saponin
Saponin có cҩu trúc hóa hӑc gӗm các aglycone không phân cӵc cùng vӟi các monosaccharide Sӵ khác biӋt cӫa saponLQÿѭӧc thӇ hiӋn ӣ sӕ nguyên tӱ carbon trong cҩu trúc aglycone Theo cҩX WU~F ÿy VDSRQLQ ÿѭӧc chia làm 2 loҥi: triterpenoid và steroidal [3] Triterpenoid aglycone có cҩu trúc khung gӗPFDUERQWURQJÿyÿѫQvӏ terpene liên kӃt theo kiӇu head-to-tail Aglycone bao gӗm các hӧp chҩt pentacylic và tetracylic Cҩu trúc khung cӫa hӧp chҩt pentacylic chӭa 5 vòng và 8 nhóm methyl Các nhóm methyl này có thӇ bӏ oxi hóa hình thành ±CH2OH (tҥi vӏ trí C23, C28), ±CHO hoһc ±COOH (tҥi vӏ trí C23, C27 hoһc C30) Các nhóm phө pentacylic bao gӗm oleananes,
Trang 19ursanes, taraxasteranes, lupanes và hopanes Triterpenoid tetracylic saponin bao gӗm dammaranes, lanostanes, tirucallanes và cucurbitantes Steroid aglycone có 27 nguyên tӱ carbon trong mҥFKYjÿѭӧc chia thành 2 cҩXWU~FNKXQJFDUERQFѫEҧn: C27 spirostanes (nhóm lӟn, cҩu trúc 6 vòng) và C26 furostanes (cҩu trúc 5 vòng)
Tҩt cҧ FiF DJO\FRQHÿӅu có nhiӅu nhóm chӭFQăQJ ±OH, ±COOH, ±CH) trong mҥch, tҥo thành sӵ ÿDGҥng trong cҩu trúc cӫa aglycone [4] Aglycone có thӇ chӭa mӝt hoһc nhiӅu liên kӃt C-&FKѭDEmRKzD&iFVDSRQLQFyFKXӛi oligosaccharide gҳn ӣ vӏ trí C3 ÿѭӧc gӑLOjPRQRGHVPRVLGLFWURQJNKLFiFVDSRQLQNKiFÿѭӧc gҳn thêm các gӕc ÿѭӡng ӣ vӏ trí C16 hoһc C28 ÿѭӧc gӑi là bidessmosidic [5] Thành phҫQÿѭӡng phә biӃn nhҩt trong cҩu trúc cӫa saponin là hexoses (glucose, galactose), 6-deoxyhexoses (furanose, quinovose, rhamnose), pentoses (arabinose, xylose), và uronic acids (glucuronic acid, galocturonic acid) Các cҩXWU~Fÿѭӡng liên kӃt vӟi aglycone thông qua mӝt ether hoһc ester glycosidic liên kӃt tҥi mӝt hoһc hai glycosylation [4]
Các cҩu trúc cӫDVDSRQLQÿѭӧc phân loҥi dӵa trên khung carbon Do quá trình sinh tәng hӧp triterpenes và steroids khác nhau nên cҩu trúc cӫa saponin rҩWÿDGҥng Cө thӇ,
VDSRQLQÿѭӧc phân chia thành 11 nhóm chính: dammaranes (1), tirucallanes (2), lupanes
(3), hopanes (4), oleananes (5), taraxasteranes (6), ursanes (7), cycloartanes (8),
lanostanes (9), cucurbitanes (10) và steroids (11) [3]
Trang 20Hình 1 1 Cҩu trúc khung carbon 11 nhóm chính cӫa saponin [3]
1.1.2 Tính chҩt hóa lý cӫa các hӧp chҩt saponin
Saponin là steroid hoһc triterpenoid glycoside, là thành phҫn phә biӃQÿѭӧc tìm thҩ\WURQJKѫQKӑ thӵc vұt [4] và nhiӅu sҧn phҭm có nguӗn gӕc tӯ thӵc vұt Sӵ ÿDdҥng và phӭc tҥp vӅ cҩu trúc cӫa các hӧp chҩt saponin trong tӵ nhiên dүQÿӃn sӵ ÿDGҥng vӅ tính chҩt vұt lý, hóa lý và các hoҥt tính sinh hӑc [2] Do cҩu trúc bao gӗm aglycone tan trong dҫu và các gӕF ÿѭӡQJ WDQ WURQJ QѭӟF QrQ ÿa sӕ FiF VDSRQLQ ÿӅu có chung nhӳQJÿһFÿLӇPFѫEҧQWѭѫQJWӵ QKѭPӝt chҩt hoҥWÿӝng bӅ mһt không ion (tҥo bӑt, tҭy rӱDQKNJKyD
6DSRQLQWKѭӡng có vӏ ÿҳng, trӯ mӝt sӕ WUѭӡng hӧSQKѭJO\F\UUKL]LQH WURQJ&DPthҧo), abrusoside (trong Cam thҧo dây), «FyYӏ ngӑt Bên cҥQKÿy QyFNJQJGӉ gây kích
Trang 21ӭng niêm mҥc Saponin là chҩt hoҥWTXDQJÿLӇm nóng chҧ\WKѭӡng rҩt cao (khoҧng 200
o& WDQWURQJQѭӟc, ethanol, methanol loãng và rҩt ít tan trong acetone, hexane Ngoài ra, saponin còn có mӝt sӕ tính chҩWGѭӧc lý, diӋWF{QWUQJNêVLQKWUQJÿӝng vұt thân mӅm, kháng khuҭn, «'RÿyVDSRQLQÿѭӧc ӭng dөng rӝng rãi trong các loҥi thuӕc, chҩt tҭy rӱa, dҫu gӝLNHPÿiQKUăQJEiQKNҽo và mӻ phҭm [2, 6]
1.1.3 Hoҥt tính sinh hӑc cӫa các hӧp chҩt saponin
Bên cҥnh nhӳng tính chҩt vұt lý, hóa hӑc, saponin còn nәi tiӃng vӟi các hoҥt tính sinh hӑFYjGѭӧc lý nәi bұt nKѭNKiQJYLrPNKiQJNKXҭn, bҧo vӋ tim mҥFKYjÿLӅu hòa miӉn dӏch [7] Các nghiên cӭu gҫQÿk\Wұp trung vào viӋc chӭng minh các hoҥt tính sinh hӑc cӫDVDSRQLQÿһc biӋWWURQJOƭQKYӵFOLrQTXDQÿӃn sӭc khӓHFRQQJѭӡi Asiaticoside (mӝWWULVDFFKDULGHWULWHUSHQH ÿmÿѭӧc chӭng minh là mӝt chҩt có hoҥt tính chӳa lành
vӃWWKѭѫQJPҥnh nhҩt trong C asiatica QKѭFKӳa lành loét dҥ dày, bӋnh phong và mӝt
sӕ bӋnh lao [8] Madecassoside (mӝt trong nhӳng thành phҫn triterpenoid saponin có
KjPOѭӧng cao nhҩt trong Centella asiatica FNJQJÿѭӧc chӭng minh có nhiӅu tác dөng
GѭӧF Oê QKѭ NKiQJ YLrP NKiQJ R[L KyD Yj NKiQJ NKXҭn [9] Bên cҥQK ÿyPDGHFDVVRVLGHFNJQJÿѭӧc chӭng minh là có khҧ QăQJNtFKWKtFKVӵ tái tҥo collagen và ÿLӅu hòa miӉn dӏch [10]
Rau má (Centella asiatica) là mӝt loài thӵc vұt chӭa saponin NhiӅu nghiên cӭu
gҫQÿk\ÿmFKӭng minh rҵng rau má chӭa các thành phҫn triterpenoid saponin có hoҥt tính sinh hӑFQKѭNKҧ QăQJWiLWҥo collagen, kháng oxi hóa và chӕng tia UV [11]
Hoҥt tính chӳa lành vӃWWKѭѫQJ :RXQG+HDOLQJ(IIHFW
ChiӃt xuҩt Centella asiatica ÿѭӧc ӭng dөQJWURQJFiFSKѭѫQJSKiSÿLӅu trӏ nhiӉm
trùng vӃWWKѭѫQJPmQWtQK[12] Asiaticoside có khҧ QăQJӭc chӃ sӵ WăQJVLQKFiFQJX\rQbào sӧi có sҽo lӗLÿӗng thӡi kích thích quá trình tәng hӧp collagen, tӯ ÿyQJăQQJӯa sӵ hình thành sҽo lӗi [13] MDGHFDVVRVLGHFNJQJ giúp tăQJFѭӡng khҧ QăQJFKӳa lành vӃt WKѭѫQJYjJLҧm hình thành sҽo lӗi trong nguyên bào sӧi có nguӗn gӕc tӯ ÿӝng mҥch chӫ [12] Bên cҥQKÿyDVLDWLFRVLGHFNJQJÿѭӧc chӭng minh có khҧ QăQJ WăQJFѭӡng tәng hӧp collagen, tái tҥo mô cӭng và tәng hӧp chҩt nӅn ngoҥi bào, giúp tái tҥo mô nha chu [14]
Trang 22Hoҥt tính kháng viêm (Anti-inflammatory activity)
Asiatic acid và madecassic acid, hai triterpenoid saponin trong Centella asiatica,
thӇ hiӋn hoҥt tính kháng viêm thông qua viӋc ӭc chӃ các enzyme (iNOS, cyclooxygenase-2 (COX-2)), interleukin (IL-6, IL-ȕ và các yӃu tӕ gây hoҥi tӱ khӕi u cytokine (TNF-Į