nhóm 6 thứ 4 ca 3 chủ đề 4

● Tinh thể protein được tạo thành trong giai đoạn tạo bào tử, kích thước 0,6 - 2µm● Hình dạng rất đa dạng: hình tháp, hình ovan, hình lập phương, hình thoi, hình tròn hoặc có hình dạng k

THUỐC BẢO VỆ THỰC VẬT CÓ NGUỒN GỐC TỪ VI KHUẨN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SINH HỌC

GV: Võ Thị Thúy HuệNhóm 6

21126113 Nguyễn Thị Thu Ngân21126267 Nguyễn Hoài An

21126282 Phan Thanh Bạch21126325 Lý Gia Hân

21126355 Trần Lê Hùng

21126408 Võ Hoàng Minh21126432 Trần Khôi Nguyên21126476 Bàng Đức Quân21126480 Trần Văn Quốc21126529 Nguyễn Thị Thuỳ21126900 Trần châu Anh

● Nguồn gốc từ vật liệu tự nhiên như động vật, thực vật, vi khuẩn và một số khoáng chất

● 3 loại chính dựa vào thành phần hoạt chất:○ Thuốc bảo vệ thực vật vi sinh

○ Thuốc bảo vệ thực vật có nguồn gốc thực vật.○ Thuốc bảo vệ thực vật sinh hoá.

○ Thuốc BVTV có nguồn gốc từ vi khuẩn

Thuốc bảo vệ thực vật (BVTV) sinh học

● Có thể kiểm soát sự phát triển của vi khuẩn gây bệnh thực vật và nấm, nên có sử dụng làm thuốc trừ sâu

● Ưu điểm

○ Ít độc hơn thuốc trừ sâu hóa học.

○ Chỉ ảnh hưởng đến dịch hại mục tiêu và các sinh vật có quan hệ gần gũi.○ Có hiệu quả với số lượng rất nhỏ và thường phân hủy nhanh chóng.

Thuốc BVTV từ vi khuẩn

NỘI DUNG CHÍNH

Đặc điểm hình thái

Giới thiệu

Cơ chế gây độc của Bt

Quy trình sản xuất 9 bước

Thuốc trừ sâu

từ Bt

BtQuy trình sản xuất dụngỨng

BtĐặc điểm hình thái

● Bacillus thuringiensis (Bt) là vi khuẩn

sinh bào tử hiếu khí không bắt buộc● Gram dương

● Dạng que, hai đầu tù,

● Kích thước 3 – 6 µm x 1,2 – 1,8µm● Có tiêm mao mọc quanh tế bào.

Hình thái tế bào vi khuẩn Bt ở độ phóng đại 100X

● Kích thước bào tử 1,6 - 2 µm

● Tinh thể protein được tạo thành trong giai đoạn tạo bào tử, kích thước 0,6 - 2µm● Hình dạng rất đa dạng: hình tháp, hình

ovan, hình lập phương, hình thoi, hình tròn hoặc có hình dạng không xác định.

Tinh thể độc tố của vi khuẩn Bt

Giới thiệu

Thuốc trừ sâu

từ Bt

● Chế phẩm Bt thực chất có nguồn gốc từ vi khuẩn, được sản xuất bằng phương pháp lên men

vi khuẩn Bacillus thuringiensis Sản phẩm lên men là độc tố ở dạng đạm tinh thể và bào tử

● Độc tố không bền vững trong môi trường kiềm, môi trường acid mạnh và dưới tác động của một số loại men

● Không tan trong nước và trong nhiều dung môi hữu cơ,

● Nhưng tan trong dung dịch kiềm có độ pH từ 10 trở lên, tan trong dịch ruột của ấu trùng sâu bộ Lepidoptera.

Cơ chế gây độc của Bt

Thuốc trừ sâu từ Bt

● Bacillus thuringiensis cũng sản sinh ra các phân tử protein đặc hiệu, gây ngộ độc

cho đường tiêu hoá của ấu trùng, sâu hại

● Các protein này sẽ gây độc và làm thủng đường ruột hoặc làm bào mòn mỏng đường ruột của các ấu trùng, sâu non

● Chính vì vậy sau một thời gian khoảng từ 2-5 ngày sâu ngừng ăn và chết.

Thuốc trừ sâu

từ Bt

Cơ chế gây độc của Bt

Thuốc trừ sâu từ Bt

Thuốc trừ sâu

từ Bt

Quy trình

sản xuất Bước 1: Chuẩn bị giống vi khuẩn cấp 1

● Các ống giống của 4 dòng vi khuẩn Bt không tạp nhiễm, bảo quản ở nhiệt độ là 50oC

● Vi khuẩn được cấy chuyền từ ống nghiệm chứa sang ống nghiệm có chứa môi trường T3-agar, đặt ở nhiệt độ phòng từ 25–28oC

Quy trình

sản xuất Bước 2: Tăng sinh khối vi khuẩn trên môi trường T3

● Chuẩn bị môi trường T3 lỏng (thành phần môi trường: tryptone 3 g, dịch chiết nấm men 1,5 g, tryptose 2 g, MnCl2 0,005 g, Na2HPO4 8,9 g, NaH2PO4 6,9 g, nước cất 1.000 ml, pH = 7), hấp 121oC, 1atm trong thời gian 20 phút, môi trường để trong các bình tam giác,

● Cấy vi khuẩn Bt vào, lắc trong thời gian 36 giờ,

● Tiến hành đếm mật số vi khuẩn Bt và nhuộm, quan sát bào tử dưới kính hiển vi.

Quy trình

sản xuất Bước 3: Tăng sinh khối vi khuẩn trên môi trường lỏng

● Mỗi dòng vi khuẩn đã tăng sinh từ môi trường T3 cho vào môi trường lỏng với thành phần glucose, pepton, khoáng với mật số vi khuẩn 107CFU/mL, tỷ lệ 1%, ● Lắc 48 giờ, 30-35oC, sau đó thu dịch lỏng vi khuẩn, đếm bào tử và quan sát tinh

thể độc.

Quy trình

sản xuất Bước 4: Tăng sinh khối Bt trên môi trường bán rắn

● Mật số vi khuẩn đạt 107 CFU/mL và có sự xuất hiện tinh thể độc khoảng 30 -40% so với bào tử vi khuẩn

● Môi trường bán rắn được khảo sát tối ưu nhất cho 4 dòng vi khuẩn là MT6 (cám bắp 30% và bột gạo 70%)

● Cấy giống vi khuẩn Bt từ môi trường lỏng sang môi trường bán rắn có pH 7-8 , độ ẩm 50% với tỷ lệ giống 1%, ủ 60 giờ, 35-45oC

● Sau thời gian 12 giờ kiểm tra độ ẩm môi trường bán rắn đang ủ một lần và đảo trộn đều khối ủ Sau 60 giờ ủ vi khuẩn, thu nhận sinh khối bán rắn, đếm mật số khuẩn lạc, kiểm tra bào tử và tinh thể độc.

Quy trình

sản xuất Bước 5: Sấy và nghiền sinh khối vi khuẩn

● Sinh khối vi khuẩn sau khi ủ 2,5 ngày được đổ ra khay, mỗi khay chứa khoảng 2 kg, bóp tơi sinh khối ra và đưa vào phòng kín, tối, đã được khử trùng bằng tia UV, nhiệt độ phòng khoảng 30oC,

● Phơi hong trong thời gian 3 ngày, sau đó cho vào tủ sấy trong 24 giờ

● Sau khi sản phẩm khô với độ ẩm khoảng 15-20%, sinh khối vi khuẩn còn khoảng 40-50%.

Quy trình sản xuất

● Sản phẩm vi khuẩn sau khi sấy khô đưa vào mày nghiền có kích cỡ lưới nghiền là 0,5mm với công suất 20 kg/giờ

● Sau khi nghiền, tiến hành đếm mật số vi khuẩn, nhuộm, quan sát bào tử, tinh thể độc.

Bước 5: Sấy và nghiền sinh khối vi khuẩn (tt)

Quy trình

sản xuất Bước 6: Phối trộn phụ gia

● Sản phẩm sau khi sấy sẽ tiến hành phối trộn với các chất phụ gia kháng UV như TiO2, bột talc, bột cao lanh theo tỷ lệ 40% vi khuẩn, 60% chất phụ gia

● Mỗi lần trộn trong vòng 10 phút tạo sản phẩm đồng đều với máy trộn 100 kg/lần.

Quy trình

sản xuất Bước 7: Đóng gói chế phẩm

● Bao bì thành phẩm được thiết kế và cung cấp bởi công ty, lượng thành phẩm 1kg/túi được định lượng bằng cân và hàn miệng túi bằng máy ép.

Quy trình

sản xuất Bước 9: Bảo quản sản phẩm

● Sản phẩm sau khi đóng gói được cho vào thùng và để vào kho bảo quản ở nhiệt độ 28-320C, phòng rộng rãi, thoáng mát, không ẩm ướt

● Không tồn trữ hàng quá 3 tháng trong nhà kho.

Ứng dụng

● Bt nước hiệu lực diệt sâu tơ khoảng 75-80%, sâu khoang và sâu xanh da láng khoảng 60-65% trong phòng thí nghiệm

● Ngoài đồng ruộng, hiệu lực tốt diệt sâu các loại khoảng 60-70% với 7 ngày khi phun.

Hofte H and H R Whitelog (1989) “Insecticidal crystal protein of Bacillus thuringiensis", Microbiol, Rev 53: 242 – 255.

TÀI LIỆU THAM KHẢO

CHÂN THÀNH CẢM ƠN CÔ VÀ CÁC

BẠN ĐÃ LẮNG NGHE