Nghiên cứu bào chế viên nén bao phim từ bài thuốc đào hồng tứ vật thang, đánh giá tác dụng ly giải huyết khối, chống đông máu và tốc độ máu lắng

Nghiên cứu bào chế viên nén bao phim từ bài thuốc đào hồng tứ vật thang, đánh giá tác dụng ly giải huyết khối, chống đông máu và tốc độ máu lắng Nghiên cứu bào chế viên nén bao phim từ bài thuốc đào hồng tứ vật thang, đánh giá tác dụng ly giải huyết khối, chống đông máu và tốc độ máu lắng

TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN BAO PHIM TỪ BÀI THUỐC ĐÀO HỒNG TỨ VẬT THANG, ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG LY GIẢI HUYẾT KHỐI, CHỐNG ĐƠNG MÁU VÀ TỐC ĐỘ MÁU LẮNG NGUYỄN HỮU THÌN ĐỒNG NAI, THÁNG 06/2023 TRƯỜNG ĐẠI HỌC LẠC HỒNG KHOA DƯỢC BÁO CÁO NGHIÊN CỨU KHOA HỌC ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN BAO PHIM TỪ BÀI THUỐC ĐÀO HỒNG TỨ VẬT THANG, ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG LY GIẢI HUYẾT KHỐI, CHỐNG ĐÔNG MÁU VÀ TỐC ĐỘ MÁU LẮNG Sinh viên thực hiện: NGUYỄN HỮU THÌN Giảng viên hướng dẫn: Th.S Võ Văn Lệnh Th.S Đoàn Văn Viên ĐỒNG NAI, THÁNG 06/2023 i TÓM TẮT Objectives: Tao Hong Si Wu Tang (THSWT) consists of Semen Pruni, Flos Carthami tinctorii, Radix Angelicae sinensis, Rhizoma Ligustici wallichii, Radix Paeoniae, and Radix Rehmanniae glutinosae; is a famous traditional Chinese herbal medicine formula, that has long been employed clinically to promote blood circulation to relieve women’s irregular menses disorder and is also used to treat such as hypertension and angina The form of decoction is being used commonly, however, there are many disadvantages such as prolonged decoction time, difficulty in use, storage and transportation, and not safety and effectiveness Therefore, this study aims to extract and standardize the dried extracts from this decoction to create raw materials for the production of modern tablet forms, making it convenient for people to access and use This study is carried out with the objective of quality control of medicinal herbs input, extraction and standardization of dried extract, validation of the quantitative process of ferulic acid in the dried extract and table from THSW decoction; otimizing the formula and building a process to prepare tablets; production batch size to 2000 tablets; evaluation of acute toxicity, in vitro and in vivo anticoagulant effects, erythrocyte protection, erythrocyte sedimentation rate, thrombolysis of THSW tablets Materials: Tao Hong Si Wu Tang decoction Method: Preparation of tablets from the dried extract of THSW by straight stamping method and evaluation of acute toxicity, in vitro and in vivo anticoagulant effects, erythrocyte protection, erythrocyte sedimentation rate, thrombolysis of tablets Result: Successfully prepared THSW tablets from standardized dried extracts according to the optimal formula developed by Desgin-Expert software and increased the batch size to 2000 tablets, successfully validated the quantitative process of ferulic acid in dried extracts and tablet of THSW, evaluated some pharmacological effects Keywords: Tao Hong Si Wu Tang, dried extracts, ferulic acid, HPLC, DesignExpert, anticoagulant effects, erythrocyte sedimentation rate, thrombolysis ii MỤC LỤC TÓM TẮT i MỤC LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG .ix DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ, ĐỒ THỊ xii LỜI CẢM ƠN xv CHƯƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 BÀI THUỐC “ĐÀO HỒNG TỨ VẬT THANG” .3 2.1.1 Nguồn gốc, lịch sử 2.1.2 Thành phần thuốc 2.1.3 Lý luận y học cổ truyền 23 2.2 LY GIẢI HUYẾT KHỐI 26 2.2.1 Liệu pháp tiêu sợi huyết 26 2.2.2 Thuốc tiêu huyết 28 2.2.3 Một số mơ hình ly giải huyết khối 32 2.3 ĐIỀU TRỊ CHỐNG HUYẾT KHỐI 34 2.3.1 Điều trị chống kết tập tiểu cầu (Antiplatelet Therapy) 34 2.3.2 Điều trị chống đông (Anticoagulant Therapy) 37 2.3.3 Một số mơ hình chống đơng máu 41 2.4 TỐC ĐỘ MÁU LẮNG .43 2.4.1 Tổng quan tốc độ lắng máu 43 2.4.2 Phương pháp Westergren 43 iii 2.4.3 Sinh lý bệnh 44 2.4.4 Yếu tố gây nhiễu phương pháp Westergren 46 2.4.5 Quy trình xét nghiệm máu lắng .46 2.5 TỐI ƯU HÓA BẰNG PHƯƠNG PHÁP BỀ MẶT ĐÁP ỨNG 47 2.5.1 Tổng quan tối ưu hóa 47 2.5.2 Lựa chọn phương pháp tối ưu hóa 47 2.5.3 Thiết kế thực nghiệm 49 2.5.4 Phương pháp bề mặt đáp ứng (RSM) 51 2.6 TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU ĐỀ TÀI 53 2.6.1 Tình hình nghiên cứu nước 53 2.6.2 Tình hình nghiên cứu nước 53 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 56 3.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 56 3.2 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU .56 3.2.1 Nguyên vật liệu .56 3.2.2 Hóa chất/thuốc thử 57 3.2.3 Thiết bị 58 3.2.4 Phần mềm 59 3.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 59 3.3.1 Kiểm tra chất lượng dược liệu thuốc ĐHTV 59 3.3.2 Chiết xuất tiêu chuẩn hóa cao khơ Đào Hồng Tứ Vật .61 3.3.3 Thẩm định quy trình định lượng acid ferulic cao khơ Đào Hồng Tứ Vật phương pháp HPLC 69 iv 3.3.4 Tối ưu hóa cơng thức, xây dựng quy trình bào chế viên nén chứa cao khơ từ thuốc ĐHTV 73 3.3.5 Thẩm định quy trình định lượng acid ferulic viên nén Đào Hồng Tứ Vật phương pháp HPLC 87 3.3.6 Nâng cỡ lô lên quy mô 2000 viên nén ĐHTV 91 3.3.7 Đánh giá độc tính cấp, tác dụng chống đơng máu in vitro in vivo, ly giải huyết khối, bảo vệ hồng cầu, tốc độ máu lắng viên nén Đào Hồng Tứ Vật .96 3.4 ĐẠO ĐỨC Y DƯỢC HỌC KHI THỰC HIỆN NGHIÊN CỨU 102 3.4.1 Động vật thử nghiệm .102 3.4.2 Đảm bảo tính tồn vẹn liệu nghiên cứu 103 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 105 4.1 KẾT QUẢ 105 4.1.1 Kiểm tra chất lượng dược liệu thuốc ĐHTV 105 4.1.2 Chiết xuất tiêu chuẩn hóa cao khơ ĐHTV .109 4.1.3 Thẩm định quy trình định lượng acid ferulic cao khô ĐHTV phương pháp HPLC .114 4.1.4 Tối ưu hóa cơng thức xây dựng quy trình bào chế viên nén chứa cao khơ từ thuốc ĐHTV 120 4.1.5 Thẩm định quy trình định lượng acid ferulic viên nén ĐHTV phương pháp HPLC .137 4.1.6 Nâng cỡ lô lên quy mô 2000 viên nén ĐHTV 144 4.1.7 Đánh giá độc tính cấp, tác dụng chống đông máu in vitro in vivo, ly giải huyết khối, bảo vệ hồng cầu, tốc độ máu lắng viên nén Đào Hồng Tứ Vật 145 4.2 BÀN LUẬN .154 4.2.1 Kiểm tra chất lượng dược liệu thuốc ĐHTV 154 v 4.2.2 Chiết xuất tiêu chuẩn hóa cao khô ĐHTV .155 4.2.3 Thẩm định quy trình định lượng acid ferulic cao khơ ĐHTV phương pháp HPLC .155 4.2.4 Tối ưu hóa cơng thức xây dựng quy trình bào chế viên nén chứa cao khô từ thuốc ĐHTV 156 4.2.5 Thẩm định quy trình định lượng acid ferulic viên nén ĐHTV phương pháp HPLC .157 4.2.6 Nâng cỡ lô lên quy mô 2000 viên nén ĐHTV 157 4.2.7 Đánh giá độc tính cấp, tác dụng chống đơng máu in vitro in vivo, ly giải huyết khối, bảo vệ hồng cầu, tốc độ máu lắng viên nén Đào Hồng Tứ Vật 158 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 160 5.1 KẾT LUẬN 160 5.2 KIẾN NGHỊ .162 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Chữ nguyên Ý nghĩa ANOVA Analysis of Variance Phân tích phương sai CLSI Clinical & Laboratory Standards Institute Viện Tiêu chuẩn Lâm sàng Xét ngiệm COVID-19 Coronavirus disease 2019 Bệnh vi-rút corona 2019 COX Cyclooxygenase Enzym xúc tác cho chuyển đổi acid arachidonic thành prostaglandin CRP C protein reaction Protein phản ứng C CT Công thức Công thức CYP450 Cytochrome P450 Hệ thống enzyme thuộc nhóm monooxygenase ĐHTV Đào Hồng Tứ Vật Bài thuốc cổ truyền Đào Hồng Tứ Vật Thang Deoxyribonucleic Acid Phân tử mang thông tin di truyền quy định hoạt động sống DNA EDTA Ethylenediaminetetraacetic Ethylenediaminetetraacetic acid acid ESR Erythrocyte Sedimentation Rate Tốc độ máu lắng FDA Food and Drug Administration Cục quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ GACP Good Agricultural and Collection Practices Thực hành tốt trồng trọt thu hái dược liệu vii HATT Huyết áp tâm thu Huyết áp tâm thu HATTr Huyết áp tâm trương Huyết áp tâm trương HPLC High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao ICR Institute for Cancer Research Chủng chuột ICR ICSH International Committee For Standardization In Hematology Ủy ban Tiêu chuẩn hóa Huyết học Quốc tế INR International Normalized Ratio Xét nghiệm máu theo tỷ lệ chuẩn hóa quốc tế kl/tt khối lượng/thể tích khối lượng/thể tích NS Normal saline Nước muối sinh lý OECD Organization for Economic Cooperation and Development Tổ chức Hợp tác Phát triển Kinh tế PG Prostaglandin Acid béo khơng bão hịa mơ PT Prothrombin time Thời gian prothrombin Q-marker Quality marker Chất đánh dấu chất lượng RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối RSM Response Surface Methodology Phương pháp bề mặt đáp ứng SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn viii SKLM Sắc ký lớp mỏng Sắc ký lớp mỏng TB Trung bình Trung bình TCCL Tiêu chuẩn chất lượng Tiêu chuẩn chất lượng tR Retention time Thời gian lưu TT Thuốc thử Thuốc thử UV-Vis Ultravioliet – Visible Quang phổ UV-Vis