Thực trạng nhiễm vi nấm, aflatoxin trong một số vị thuốc đông dược và kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc của cán bộ y tế tại tỉnh nghệ an, hiệu quả can thiệp (2016 2017

O Ụ V OT O T V ỆN SỐT RÉT - KÝ SINH TRÙNG - ÔN TRÙN TRUN ƢƠN ẬU HU HO N Lu ận THỰ TR N NH ỄM V NẤM, AFLATOX N TRONG M T SỐ VỊ THUỐ ÔN ƢỢ V K N THỨ , TH , THỰ H NH ẢO QUẢN THUỐ ỦA N T T TỈNH N HỆ AN, H ỆU QUẢ AN TH ỆP (2016 - 2017) án n tiế hƣ ng HỌ n ho họ : PGS.TS Ngu ễn Văn PGS.TS Phạm Văn Thân H N - 2018 c n N SỸ họ LUẬN N T 972 01 17 Y M số: sĩ hu n ng nh: ị h tễ họ LỜ ẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Phạm Văn Thân PGS.TS Nguyễn Văn Ba tận tình dẫn giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn! PGS.TS Trần Thanh Dương Viện trưởng Ban Giám đốc Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương PGS.TS Cao Bá Lợi, toàn Lu thể cán Phòng Khoa học - Đào tạo Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương; TS Đỗ Ngọc Ánh tồn thể cán Bộ mơn Ký sinh ận trùng Học việ Quân y; Toàn thể cán Bệnh viện Sản Nhi tỉnh Nghệ An; Các Sở Y tế, Sở Khoa học Công nghệ, Trường Đại học Y khoa Vinh tỉnh án Nghệ An tận tình giúp đỡ tơi suốt thời gian học tập thực đề tiế tài nghiên cứu GS.TS Lê Bách Quang, PGS.TS Nguyễn Mạnh Hùng, PGS.TS Lê n Xuân Hùng, PGS.TS Đồn Huy Hậu có ý kiến q báu giúp tơi sĩ hồn thiện luận án Y Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Bố, Mẹ, Vợ, Con, gia đình họ bạn bè đồng nghiệp động viên khích lệ tơi vượt qua khó khăn gian khổ hồn thành luận án Luận án bước đầu nghiệp cảm thật cao q, tình cảm theo tơi suốt đời không thay đổi! ậu Hu Ho n c khoa học Những lời cảm ơn khơng đủ kể hết tình MỤ LỤ ẶT VẤN Ề hƣơng 1: TỔN QUAN T L ỆU 1.1 Lịch sử nghiên cứu nấm 1.1.1 Một số khái niệm nấm, nấm y học 1.1.2 Lịch sử nghiên cứu nấm giới 1.1.3 Lịch sử nghiên cứu nấm Việt Nam Lu 1.2 Dịch tễ học vi nấm 1.2.1 Tác nhân vi nấm ận 1.2.2 Đường truyền bệnh 11 1.2.3 Khối cảm thụ 11 án 1.3 Các yếu tố liên quan đến nhiễm nấm kiến thức, thái độ thực hành phòng chống nhiễm nấm cho vị thuốc đông dược .12 tiế 1.3.1 Các yếu tố khí hậu vi khí hậu 12 n 1.3.2 Các yếu tố điều kiện bảo quản 14 sĩ 1.3.3 Các yếu tố kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược cán y tế 14 Y 1.4 Tình hình nhiễm vi nấm độc tố nấm thực phẩm sản phẩm họ nông nghiệp sau thu hoạch 16 1.4.2 Tại Châu Á 17 1.4.3 Tại Châu Phi 18 1.4.4 Tại Việt Nam 19 1.5 Cấu trúc phân tử, chế sinh aflatoxin gây độc aflatoxin 20 1.5.1 Cấu trúc phân tử, chế gây độc aflatoxin 20 1.5.2 Cơ chế sinh độc tố alflatoxin nấm 22 1.6 Các kỹ thuật phát nhiễm nấm aflatoxin 24 1.6.1 Kỹ thuật soi tươi 24 c 1.4.1 Tại Châu Âu 16 1.6.2 Kỹ thuật nuôi cấy nấm môi trường Saboraud 25 1.6.3 Các kỹ thuật khác .25 1.6.4 Kỹ thuật sinh học phân tử PCR 28 1.7 Một số bệnh nấm độc tố nấm gây 30 1.7.1 Nhiễm độc gan cấp tính 30 1.7.2 Nhiễm độc mãn aflatoxin ochratoxin 30 1.7.3 Các bệnh nấm phổi Aspergillus spp 31 1.8 Chẩn đoán xác định sản phẩm nông nghiệp, thực phẩm, thuốc đông Lu dược nhiễm nấm 31 ận 1.9 Điều trị phòng bệnh nấm cho người, phòng nhiễm nấm cho sản phẩm nông nghiệp vị thuốc đông dược 32 án 1.9.1 Điều trị bệnh nấm gây với người 32 1.9.2 Phòng bệnh nấm 33 tiế 1.9.3 Phòng chống nhiễm nấm cho sản phẩm nông nghiệp vị thuốc đông dược 34 V PHƢƠN n hƣơng 2: Ố TƢỢN PH P N H ÊN ỨU 36 sĩ 2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 36 Y 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 36 họ 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 36 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 37 2.2.1 Phương pháp nghiên cứu mơ tả có phân tích thực trạng nhiễm nấm aflatoxin 37 2.2.2 Nghiên cứu mô tả thực trạng nhà kho, môi trường bảo quản thuốc kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc thuốc đông dược cán y tế 49 2.2.3 Nghiên cứu can thiệp 53 2.3 Mơ hình thiết kế nghiên cứu 54 c 2.2 Phương pháp nghiên cứu 37 2.4 Vật liệu nghiên cứu 56 2.5 Phương pháp xử lý phân tích số liệu 56 2.6 Đạo đức nghiên cứu 56 hƣơng 3: K T QUẢ N H ÊN ỨU 58 3.1 Thực trạng nhiễm nấm aflatoxin dược liệu đông dược bệnh viện thuộc tỉnh Nghệ An năm 2016 58 3.1.1 Thực trạng nhiễm nấm vị thuốc đông dược 58 3.1.2 Kết định danh loài nấm mẫu thuốc đông dược kỹ Lu thuật PCR 67 ận 3.1.3 Hàm lượng aflatoxin vị thuốc đông dược bệnh viện thuộc tỉnh Nghệ An năm 2016 72 án 3.2 Thực trạng môi trường, trang thiết bị kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược cán y tế 74 tiế 3.2.1 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc 74 3.2.2 Kiến thức, thái độ, thực hành bảo quản thuốc đông dược n y tế hành nghề đông dược bệnh viện tỉnh Nghệ An 76 sĩ 3.3 Hiệu can thiệp phịng chống nấm cho thuốc đơng dược 82 Y 3.3.1 Thay đổi kiến thức thực hành cán y tế phòng chống họ nhiễm nấm cho thuốc sau 12 tháng can thiệp 82 3.3.2 Tình trạng nhà kho, thiết bị bảo quản thuốc trước sau can thiệp 3.3.3 Hiệu giảm tình trạng nhiễm nấm vị thuốc đông dược sau can thiệp 12 tháng 85 hƣơng 4: N LUẬN 88 4.1 Thực trạng nhiễm nấm, aflatoxin mẫu thuốc đông dược bệnh viện tỉnh Nghệ An năm 2016 88 4.1.1 Thực trạng nhiễm nấm 88 c 12 tháng 83 4.1.2 Hàm lượng aflatoxin vị thuốc đông dược sở y tế tỉnh Nghệ An năm 2016 95 4.2 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc kiến thức thái độ, thực hành bảo quản vị thuốc đông dược cán y tế bệnh viện tỉnh Nghệ An 99 4.2.1 Thực trạng môi trường, trang thiết bị bảo quản thuốc đông dược 99 4.2.2 Kiến thức thái độ, thực hành bảo quản vị thuốc đông dược y tế bệnh viện tỉnh Nghệ An 103 Lu 4.3 Hiệu can thiệp phịng chống nấm cho thuốc đơng dược 108 ận 4.3.1 Hiệu can thiệp truyền thông kiến thức thực hành phòng chống nấm cho cán y tế 108 án 4.3.2 Hiệu can thiệp thay đổi trang thiết bị bảo quản thuốc 109 K T LUẬN 116 N N HỊ TÍNH KHOA HỌ , TÍNH MỚ ỦA Ề T n tiế K Ý N HĨA THỰ T ỄN ỦA Ề T L ỆU THAM KHẢO ÔN Ố NN c họ T LUẬN N Ã ƢỢ P Y UN O L ÊN QUAN TRỰ T sĩ ANH MỤ ANH MỤ ẢN Bảng 1.1 Một số tính chất hóa lý aflatoxin 21 Bảng 2.1 Giới hạn ô nhiễm aflatoxin số thực phẩm theo tiêu chuẩn QCVN 8-1:2011/BYT 48 Bảng 3.1 Danh mục, tên khoa học vị thuốc nam sử dụng nghiên cứu 58 Bảng 3.2 Danh mục, tên khoa học vị thuốc bắc sử dụng nghiên Lu cứu 60 ận Bảng 3.3 Tỷ lệ nhiễm nấm chung mẫu thuốc đông dược kỹ thuật soi tươi (n = 505) 62 án Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm nấm vị thuốc đông dược thân - rễ, lá, củ tiế kỹ thuật soi tươi (n = 505) 62 Bảng 3.5 Tỷ lệ nhiễm nấm chung vị thuốc bắc nam dược n kỹ thuật nuôi cấy nấm môi trường Saboraud (n = 505) 63 sĩ Bảng 3.6 Tỷ lệ nhiễm nấm vị thuốc đông dược thân - rễ, lá, củ Y nuôi cấy nấm môi trường Sauboraud 64 nấm môi trường Saboraud bệnh viện 65 Bảng 3.8 Tổng hợp kết xác định tỷ lệ nhiễm nấm kỹ thuật soi tươi nuôi cấy môi trường Saboraud (n = 505) 66 Bảng 3.9 Tỷ lệ tương đồng số mẫu nấm so với ngân hàng genbank 70 Bảng 3.10 Thành phần loài nấm phân lập từ mẫu thuốc đông dược 71 Bảng 3.11 Tỷ lệ nhiễm aflatoxin chung (n = 505) 72 c họ Bảng 3.7 Tỷ lệ nhiễm nấm mẫu thuốc đông dược nuôi cấy Bảng 3.12 Tỷ lệ mẫu dược liệu nhiễm aflatoxin vượt tiêu chuẩn QCVN 8-1:2011/BYT (n = 24) 73 Bảng 3.13 Thực trạng nhà kho bảo quản thuốc đông dược (n =10) 74 Bảng 3.14 Trang thiết bị bảo quản thuốc đông dược (n = 10) 75 Bảng 3.15 Nhóm tuổi, giới, trình độ chun mơn đối tượng nghiên cứu (n = 60) 76 Bảng 3.16 Kiến thức cán y tế nguyên nhân thuốc đông dược bị Lu nấm tác hại nấm với sức khỏe người (n = 60) 77 Bảng 3.17 Kiến thức cán y tế tác nhân gây nấm điều ận kiện bảo quản thuốc đông dược không bị nấm (n = 60) 78 án Bảng 3.18 Thực hành cán y tế phịng chống nhiễm nấm cho thuốc đơng dược (n = 60) 80 tiế Bảng 3.19 Thực hành cán y tế phòng chống tác hại nấm n cho cá nhân (n = 60) 81 sĩ Bảng 3.20 Kiến thức cán y tế vi nấm điều kiện vi khí hậu bảo quản thuốc đơng dược không bị nhiễm nấm (n = 60) 82 Y họ Bảng 3.21 Hiệu bổ sung trang thiết bị làm thay đổi vi khí hậu (n = 10) 83 thiệp 12 tháng (n =10) 84 Bảng 3.23 Hiệu giảm tỷ lệ nhiễm vi nấm chung mẫu thuốc đông dược 85 Bảng 3.24 Hiệu giảm tỷ lệ nhiễm nấm thuốc đông dược bệnh viện sau can thiệp 12 tháng 86 c Bảng 3.22 Hiệu làm thay đổi yếu tố vi khí hậu kho sau can ANH MỤ HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh số lồi Aspergillus Hình 1.2 Hình ảnh nấm mốc Penicilinum spp Hình 1.3 Cơ chế sinh tổng hợp aflatoxin 23 Hình 1.4 Kết PCR (+) với Aspergillus sp Candida spp 29 Hình 1.5 Kết xét nghiệm PCR (+) với Aspergillus fumigatus 29 Lu Hình 2.1 Tóm tắt bước thực kỹ thuật PCR 43 Hình 2.2 Sơ đồ thiết kế nghiên cứu 55 ận Hình 3.1 Tỷ lệ nấm sợi, nấm men (n = 262) 66 án Hình 3.2 Sản phẩm điện di số mẫu nấm phân lập từ mẫu thuốc đông dược bệnh viện tỉnh Nghệ An 67 tiế Hình 3.3 Kết giải trình tự gen 68 n Hình 3.4 Trình tự nucleotit gen mẫu giải trình tự 69 sĩ Hình 3.5 Tỷ lệ vị thuốc nam, thuốc bắc có hàm lượng alflatoxin vượt tiêu chuẩn QCVN 8-1:2011/BYT (n = 16) 73 Y Hình 3.6 Tỷ lệ tên lồi nấm cán y tế (n = 25) 79 c họ ẶT VẤN Ề Nấm sinh vật có nhân thành tế bào thực sự, dị dưỡng, sinh sản bào tử Nấm phân bố rộng rãi tự nhiên, phần lớn sống hoại sinh đất, số có khả ký sinh gây bệnh cho người động vật [5] Ước tính giới có triệu lồi nấm Có loại nấm có lợi, có loại có hại cho sức khỏe người Với đa dạng phong phú nấm người ta xếp nấm thành giới riêng “giới nấm” Hiện nay, khoa học phát Lu khoảng 400 loài nấm gây bệnh cho người [19], [36] ận Các vị thuốc đông dược thường chế biến theo phương pháp cổ truyền phơi, sấy, tẩm đường, mật Trong điều kiện khí hậu nhiệt đới án nóng ẩm nước ta q trình bảo quản khơng tốt thiếu thốn phương tiện kỹ thuật bảo, vị thuốc đông dược dễ bị ẩm mốc Nhiều cơng tiế trình nghiên cứu cho thấy vị thuốc đông dược, sản phẩm nông n nghiệp sau thu hoạch thường nhiễm loài nấm Aspergillus spp như: sĩ Aspergillus flavus, Aspergillus parasiticus, Aspergillus niger có vai trị y học quan trọng Aspergillus flavus (A flavus) [64], [67], [80] Y Theo Tổ chức Y tế Thế giới, bệnh vi nấm thường gặp nước họ phát triển có điều kiện vệ sinh kém, mơi trường sống chật chội ẩm ướt, khó chẩn đốn bệnh nấm phổi, bệnh nấm máu, bệnh nấm dịch não tủy [55], [87] đặc biệt ung thư gan nguyên phát độc tố aflatoxin [1], [21] Tổ chức Y tế Thế giới đưa aflatoxin vào danh mục chất gây ung thư mạnh năm 1988 Tổ chức Nông lương giới (FAO) khuyến cáo aflatoxin cần kiểm sốt chặt trẽ sản phẩm nơng nghiệp sản phẩm sau thu hoạch Các nước cần có công cụ đủ mạnh giám sát hàm c tỷ lệ mắc từ -10%, có nơi > 10% Một số bệnh nấm diễn biến phức tạp 18 Học viện Quân Y (2005), “Nghiên cứu mối liên quan tỷ lệ nhiễm nấm đường hô hấp bệnh phổi mãn tính”, Báo cáo khoa học Hội nghị khoa học Y – Dược Học viện Quân Y năm 2005, Hà Nội ận Lu 19 Học viện Quân Y (2008), Ký sinh trùng trùng y học, Giáo trình giảng day đại học, NXB Quân đội nhân dân, Hà Nội, Tr.53-57; 7584; 347-401 20 Lý Thu Hương (2012), Mức độ nhiễm vi nấm sinh ochratoxin A đất rễ cà phê số vùng trồng cà phê trọng điểm, Luận văn thạc sỹ chuyên ngành Vi sinh vật, Đại học Khoa học tự nhiên- Đại học Quốc gia Hà Nội 21 Bùi Thị Mai Hương, Lê Danh Tuyên (2012), “Ô nhiễm độc tố vi nấm ngũ cốc: Nguy sức khỏe người dân tỉnh Lào Cai”, Tạp chí Y học Dự phịng, Tập 22, Số 2(128), Trang 33-38 22 Nguyễn Thị Hải (2018), Nghiên cứu sử dụng thiết bị sắc ký khí lỏng HPLC 1200 để phân tích hàm lượng alflatoxin số loại nông sản thực phẩm, Viện Khoa học sống, Kết Đề tài khoa học trường Đại học Nông Lâm 23 Trịnh Đình Khá, Quyền Thị Thi, Nguyễn Sỹ Lê Thanh (2007), “Tuyển chọn nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố môi trường lên khả sinh tổng hợp Cellulase chủng Penicillium sp, DTQ-KH1”, Tạp chí Công nghệ sinh học, Số 5(3), Tr.355-362 24 Phạm Thị Ngọc Lan, Ngô Thị Tuyết Mai (2012), “Khảo sát ô nhiễm vi sinh vật số thực phẩm địa bàn thành phố Huế năm 2010-2011”, Tạp chí Khoa học Đại học Huế, Số 4, Tập 73, Trang 137-145 25 Cao Bá Lợi (2013), “Thực trạng nhiễm khuẩn đường sinh sản phụ nữ độ tuổi sinh đẻ (18-49) có chồng huyện Tam Nơng tỉnh Phú Thọ, Tạp chí Phịng chống bệnh sốt rét bệnh Ký sinh trùng, Viện Sốt rét – KST – CTTƯ, Số 3, Trang 3-12 án n tiế sĩ Y c họ 26 Cao Bá Lợi (2013), “Phân tích mối liên quan nhiễm khuẩn đường sinh sản với kiến thức, thái độ, thực hành phòng bệnh phụ nữ độ tuổi sinh đẻ (18-49) có chồng huyện Tam Nơng tỉnh Phú Thọ (2011-2012)”, Tạp chí Phịng chống bệnh sốt rét bệnh Ký sinh trùng, Viện Sốt rét – KST – CTTƯ, Số 3, Trang 75-83 27 Cao Bá Lợi (2013), “Ứng dụng kỹ thuật PCR định danh loài nấm đường sinh sản phụ nữ 18 -49 có chồng huyện Tam Nơng tỉnh Phú Thọ 2011 -2012”, Tạp chí Phịng chống bệnh sốt rét bệnh Ký Lu sinh trùng, Viện Sốt rét – KST – CTTƯ, số 2, trang 3-12 28 Nguyễn Khắc Lực, Đỗ Ngọc Ánh (2014), “Xác định loài số nấm men ận Phân lập từ người kỹ thuật PCR-RFLP”, Tạp chí Phịng chống bệnh sốt rét bệnh Ký sinh trùng, Chuyên đề Hội nghị khoa học – án Đào tạo chuyên ngành Ký sinh trùng toàn Quốc lần thứ 41, tr:93-100 tiế 29 Trần Xuân Mai CS (2004), Vi nấm y học, Sách đào tạo bác sỹ y khoa Trường đại học Y Dược Thành Hồ Chí Minh, Sách tham khảo, trang n 107-120 sĩ 30 Trần Phú Mạnh Siêu, Hồ Quang Thắng (2010), “Tình hình nhiễm vi nấm họ đới Tp.HCM 2009”, Tạp chí Y dược Tp.HCM Y Candida sp bệnh nhân nhập viện bệnh viện bệnh nhiệt 31 Nguyễn Công Minh, Đồng Lưu Ba, Phạm Thọ Tuấn Anh CS (2000), Tạp chí Ngoại khoa-Tổng hội Y–Dược học Việt Nam, Tập (1), Trang 5-16 32 Lương Thị Minh Hương (2005), Nghiên cứu chẩn đoán điều trị viêm quản nấm, Luận án tiến sỹ y học, Hà Nội 33 Nguyễn Đình Nga, Nguyễn Thị Kiều Khanh, Văn Phố (2012), “Khảo sát mức độ nhiễm nấm mốc aflatoxin số dược liệu bán Quận – Thành phố Hồ Chí Minh”, Tạp chí Y học Thành Phố Hồ Chí Minh, “Tập 16”, Phụ số 1, Trang 93-96 c “U nấm phổi Aspergillus, chẩn đoán điều trị Bệnh viện Chợ Rẫy”, 34 Lê Bách Quang CS (2010), Kỹ thuật ký sinh trùng, Giáo trình giảng dạy đại học – Học viện Quân y NXB Quận đội nhân dân, tr:310-319 35 Lê Đình Ranh (2002), Các bệnh nhiễm khuẩn, Giải phẫu bệnh học, NXB Y học, Hà Nội, Trang 183-195 36 Bùi Thị Tám (1999), Các bệnh nấm phổi - Bệnh hô hấp, Sách giảng dạy đại học, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội, Trang 420-439 37 Đỗ Dương Thái CS (1975), Ký sinh trùng bệnh ký sinh trùng người, Sách giảng dạy đại học sau đại học, Đại Y khoa Hà Nội, Lu Quyển III, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội 38 Phạm Văn Thân (2012), Ký sinh trùng, Sách đào tạo cử nhân điều dưỡng, ận NXB Giáo dục Hà Nội, Hà Nội 39 Dương Thơng, Nguyễn Hồi Nam (2003), Chẩn đốn điều trị ngoại án khoa u nấm phổi Aspergillus, Sách tham khảo giảng dạy đại học sau đại học, Tổng Hội Y-Dược học Việt Nam, Tập (2), Tr.13-19 tiế 40 Đào Thiện, Trần Thanh Hòa CS (2012), “Mơ hình hóa với loại nấm n mốc”, Tạp chí khoa học phát triển, Số.5, Tập.10 sĩ 41 Nguyễn Thị Thúy Anh, Trần Cát Đơng, Nguyễn Đình Nga (2012), “ Khảo sát mức độ nhạy cảm Candida sp, với Fluconazole”, Tạp chí Y Y học Thành Phố Hồ Chí Minh, “Tập 16”, Phụ số 1, Tr 83 85 họ 42 Nguyễn Ngọc Thụy, Lê Trần Anh (2004), Bệnh nấm y học, Sách giảng dạy 43 Nguyễn Thị Thu, Nguyễn Thị Yến, Trần Thị Kiều Anh (2016), “Định Lượng alflatoxin M1 sữa thô phương pháp LC-MS/MS”, Tạp chí Khoa học trẻ, Số 2(1), Trang 1-7 44 Lê Ngọc Tú (2006), Độc tố hóa học An toàn thực phẩm, Sách hướng dẫn kỹ thuật, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật,250 trang 45 Vũ Quyết Thắng, Cao Bá Lợi, Trần Thanh Dương (2013), “Hiệu can Thiệp cộng đồng phòng chống nhiễm ký sinh trùng đường sinh sản c đại học, NXB Quân đội nhân dân, Hà Nội, Trang 173-177 phụ nữ độ tuổi sinh đẻ (18-49) có chồng thị xã Quảng Yên tỉnh Quảng Ninh 2013”, Tạp chí Phịng chống bệnh sốt rét bệnh Ký sinh trùng, Chuyên đề Hội nghị khoa học – Đào tạo chuyên ngành Ký sinh trùng toàn Quốc lần thứ 41, trang 73-78 46 Trường Đại học Y Hà Nội (2009), Vệ sinh môi trường dịch tễ, Sách giảng Dạy đại học sau đại học, Tập I (511), NXB Y học, Hà Nội, Trang 82-115, 47 Trường Đại học Y Hà Nội (2009), Vệ sinh môi trường dịch tễ, Sách giảng dạy đại học sau đại học, Tập II (466), NXB Y học, Hà Nội, Tr 88-163 Lu 48 Trường Đại học Y Hà Nội, Bộ môn Ký sinh trùng (2012), Ký sinh trùng 343 Trang ận y học, Giáo trình đào tạo bác sỹ đa khoa, NXB Y học Hà Nội, Hà Nội, Tài liệu dịch án 49 Tổ chức Nông Lương Thế giới (2014), Mycotoxin - độc tố nấm mốc, tiế 50 Phan Anh Tuấn CS (2007), “Các loài Candida sp gây viêm âm đạo tái phát độ nhạy với thuốc kháng nấm”, Tạp chí Phịng chống bệnh sốt rét n bệnh Ký sinh trùng, Viện Sốt rét–KST–CTTƯ, số 1, trang 70-75 sĩ 51 Pham Diệu Thùy (2012), “Ngộ độc thực phẩm người độc tố nấm Y mốc”, Chuyên đề báo cáo khoa học Đại học Nông Lâm Thái Nguyên phổi Aspergillus sp Bệnh viện Phạm Ngọc Thạch (2005-2008)”, Tạp chí Y học Thành phố Hồ Chí Minh, Số 12, Trang 50-53 53 Nguyễn Thị Cẩm Vy (2010), “Alflatoxin hiểm họa từ nông sản nhiễm nấm mốc”, Tạp chí Khoa học ứng dụng, Số 12, Trang:15 -17 54 Đặng Bích Thủy, Phạm Ngọc Khái (2008), “Tình hình nhiễm nấm mốc lạc, đỗ tương kiến thức, thực hành phòng chống nhiễm nấm thực phẩm người dân số xã huyện Kiến Xương, Thái Bình”, Tạp chí Dinh dưỡng Thực phẩm, Tập 4, Số c họ 52 Nguyễn Thế Vũ, Lê Tiến Dũng CS (2008), “ Điều trị phẫu thuật u nấm ận Lu Tiếng Anh: 55 A.J.M Van deventer and et al (1995), Improved Detection of Candida albicans by PCR in Blood of Neutropenic Mice with Systemic Candidiasis, Journal of clinical Microbiology, Vol.33, pp.625-628 56 Amada Anater, Lara Manyes, Giuseppe Meca and et al (2016), Mycotoxins And their consequeces in aquaculture: A review, Juonal of Homepape, Aquaculture, Vol 451, pp.1-10 57 Anina J Sirma, Elizabeth O Ouko, Gatwiri Murithi et al (2015), Prevalence Of alflatoxin contamination in cereals from Nandi County Kenya, Int Jounal Agric Sciences and Vetery Medicine, Vol.3(3) 58 Andre El Khoury, Ali Atoui, Toufic Rizk and et al (2011), Defferentiation Between Aspergillus flavus and A Aspergillus parasiticus from pure culture and alflatoxin-Contaminated grapes using PCR-RFLP analysis of aflr-aflj intergennic specer, Jounal of food science, Vol.76(4), pp.247-253 59 Ajfand (2016), Africa Scholarly Science Communications Trust, African Jounal of Food Agricuture, Nutrition and Development, Vol.16(3), pp.10992-11003 60 Atsushi Murai (2013), Maternal Transfer of Immunoglobulins into Egg Yolks of Birds, Japan Poultry Science Assocciation, 61 Argunov DA, Krylov VB, Nifantiev NE (2015), Con vergent synthesis of Isomeric heterosacharides related to the fragmernt of galactomannan from Aspergillus fumigatus, Research Article, Biomol ChemPMID:25643073 62 Barrs VR, Ujvari B, Dhand NK and et al (2014), Detection of Aspergillus Specific antibidies by agar gel double immunodiffusion and IgG ELISA in feline upper respiratory tract Aspergillosis Supplementary Informatin, Vet Jounal, pii: S1090-0233(14)00516-4.doi10.1016 63 Bretagne S., Costa J.M., Mamorat – Khuong A and et al (2006), Detection of Aspergillus DNA by PCR in Bronchoalveola Lavage Fluid, án n tiế sĩ Y c họ ận Lu PubMed – MEDLINE, Parasitologie – Mycologie, Hopital Henri Mondor, Cretell, Prace 64 Cornell University, USA (2013), Aflatoxins : Ocucurrence and Health Risks, Tekbooke 65 C.DallAsta and P.Battialani (2016), Fumonisins and their modified Forms a matter of concern in future scenario, World Mycotoxin Jounal, Vol.9(5), pp.727-739 66 C El aaraj, M Bakkali, A Infantino and et al (2015), Mycotoxigenic fugi In cereals grains and coffee from the North of Moroco, Amarica Journal of Research Communication, Vol.3(2) 67 David G Schmele III and et al (2013), Mycotoxins in Crops: A threat to Human and Domestic Animal Health,Virgnia Polytechnic Institute and State University Blachsburg VA 68 Dr Raj Murugesan (2015), Mycotoxin survey in the 2015 Ú corn, Mycotoxin Report, Biomin 69 Dubey LK, Moeller JB, Schlosser A, Sorensen GL and Holmskov U (2015), Chitin enhances serum IgE in Aspergillus fumigatus induced allergy in mice, Author information, Jounal of Immunobiology Japan, PMID: 25634077 70 Elif Burcu Bahadir., Mustafa Kemal Sezginturk (2016), Lateral Flow Assays: Principles, Designs and Lables, Techbook Accepted Manuscript, pp.1-44 71 Elisabeth Streit, Karin Naehrer et al (2012), Ines Rodrigues and Gerd Schatzmaryr Mycotoxin occurrence in feed and raw materials worlde: Long –term analisis with special focus on Europe and Asia, Review Accepted article published, Doi.10.1002/Jsfa.625 72 F Bertiller, C Brera, M.H Iha, R Krska et al (2017), Developments In mycotoxin analysis: an update for 2015 -2016, World Mycotoxin Jounal, Vol.10(1), pp.5-29 73 Fabiana Aparecida Couto, Sara Chalfoun de Souza, Monica Cristina án n tiế sĩ Y c họ ận Lu Pereira Monteiro et al (2014), Diversity and association of filamentous fungi in coffee beans under organic and conventional cultivation, African Jounal of Microbiology Research, Vol.8(6), pp.2505-2512, Doi: 10.5897/AJMR2013.6571 74 Gabriel Kigen, Naftali Busakhala, Zipporah (2017), Factors associated With the high prevalence of oesophageal cancer in Western Kenya: a review, BioMed Central, Open Access, Doi.10.1186/s13027-0169-y 75 Golsun Demirel, Buket Alpertunga and Sibel Ozden (2014), Role of Fumonisin B1 on DNA methylation changes in rat kidney and liver cells, Original Article, Pharmaceutical Biology, Infoma healthcare, Inc, Doi:10.3109/13880209.2014.976714 76 Hossein Mirhendi and et al (2006), A One-Enzyme PCR-RFLP Assay for identification of Six Medical Important Candida Species, Jpn J., Med, Myol, Vol 47, pp.225-229 77 Huong Bui Thi Mai, Le Danh Tuyen, Do Huu Tuan and Leon Brimer (2016), Dietary exposure to alflatoxin B1, ochratoxin A and fumisisins of adults in Lao Cai provice, Viet Nam : A total dietary study approach, Food and Chemical Toxicology, Jounal hompage, Vol.98, pp.127-133 78 Hyang Sook Chun, Hyun Ee Ok, Hyun Jung Kim and et al (2006), Risk Assessment of aflatoxin in food products consumed in South Kerea, Techbook, Doi:10.1051/IUFoST:2006045.pp.1796-1809 79 Yuan-Kai Wang, Yi-Bo Shi, Qi Zou and et al (2013), Development of a Rapid and simultaneous immunochromatographic assay for the determination of zearalenone and fumonisin B1 corn, wheat and feedstuff samples, Jounal home Food Control, Vol.31, pp.180188 80 Kaaya N.A.L, H.L Warren et al (2005), A review of past and present Research on aflatoxin in Uganda, African Journal of Food Agriculture and Nutritional Development, Volume.5, No.1 án n tiế sĩ Y c họ ận Lu 81 Jean-Paul Latge, Richad Calderone (2002), Host microbe interactions: fungi invasive hunman fungi opportunistic infactions, Curent Opinion in Microbiology, Vol (5), pp.355-358 82 J.W Bennett, M.Klich et al (2003), Mycotoxins, Lin Microbiol Rev, Vol16(3), pp.497-516 83 L Klingspor and S.Jalal (2006), Molecular detection and identification of Candida and Aspergillus spp from clinical samples using real time PCR, Clinical Microbiology and Infection Diseases, Volume 12 Number 8, August, pp.745-753 84 Magrit Hulmel., Corina Baust et al (2004), Detection of Aspergillus DNA by a nested PCR assay is superior to blood culture in an experimental murine model of invasive aspergillosis, Medizinische Klinik, Universitäts Klinikum Mannheim, Margit Hummel: margit.hummel @med3.ma.uni-heidelberg.de 85 Matthew Atongbilk Achaglinkame., Nelson Opoku., Francis Kweku Amagloh (2017), Alflatoxin conmination in cereals and legumes to reconsider usage as complementary food ingredients for Ghanaian infants: A review, Jounal of Nutrition & Intermediary Metabolism, Vol.10, pp.1-7 86 Manish Adhikari, Bhawana Negi, Neha Kaushik and et al (2017), T-2 Mycotoxin: toxicological effects and decontamination strategies, Jounal of Oncotarget, Vol.8(no20), pp.33933-33952 87 Murta E.F at al (2000), Insidence of Gardnerella vaginalis, candida spp and human papilloma virus in cytologycal smears, Sao Paulo Med J, Jul 6, Vol.118 (4), pp: 105-8 88 Muhammad Sajid, Abdl-Nasser Kawde and Muhammad Dau (2014), Designs formats and application of lateral flow assay: A literature review, Original Article, Jounal of Saudi Chemical Society 89 Ni Made A., Tarini et al (2010), Development of multiplex -PCR assay for rapid detection of Candida sp, Med J Indones, Vol.19, No.2 án n tiế sĩ Y c họ 90 P Lewis White et al (2003), Detection of seven Candida species using the Light - Cycler system, Journal of Medical Microbiology, Vol.52, pp.229–238 91 P.V.C Yong and et al (2008), Molecular Identification of Candida orthopsilosis Isolated from Blood Culture, Mycopathologia, Vol 165:81-87, DOI10.1007/s11046-007-9086-8 92 Pauline Jolly et al (2014), Mushrooms in rice corn make HIV multiply more, Agency for Food and Drug Administration (FDA) 93 Peter J, Delves I, Seamus J, Martin Dennis, R Burton I van M.Roitt Lu (2017), Roits Essential Immunology, Wiley Blakwell, 541 pp ận 94 Rosa de Llanos Frutos et al (2004), Identification of species of the genus Candida by analysis of the 5.8S rRNA gene and the two ribosomal pp 175–185 án internal transcribed spacers, Antonie van Leeuwenhoek, Vol.85, tiế 95 Samina Ashiq (2014), Natural occurrence of mycotoxin in food and n feed Pakistan perspective, Comprehensive Reviews, Vol.0, pp.1- sĩ 11 Doi.10.1111/1541-4337.12122 96 S.H Mirhendi et al (2001), A PCR-RFLP Method to Identification of the Y important Opportunistic Fungi: Candida Species, Cryptococcus họ neoformans, Aspergillus famigatus and Fusarium solani, Iranian J 97 Sumei Ling, Rongzhi Wang, Xiaosong et al (2015), Rapid detection Of fumonisin B1 using a colloidal gold immunoassay strip test in corn samples, Jounal hompage, Elsevier – Toxicon, Vol.108, pp.210-215 98 Xi-Chun Wang, Hai-Xin Fan, Meng-Xue Fan et al (2016), A sensitive Immunochromatographic assay using colloidal gol - antibody probe for rapid detection of fumonisin B1 on corn, Jounal of Food Additives & Contaminants: Part A, Doi10.1080/19440049.1213429 c Publ Health, Vol 30, Nos 3-4, pp.103-106 ận Lu 99 T.D Cardoma, S.G Hangantileke and et al (2013), Aflatoxin Research on grain in Asia – Its problems and possible solutions, FAO 100 White P.L., Bretagne S., Klingspor L (2006), Aspergillus PCR: one step closer to standardization, PubMed –indexed for Medlin, niversity Hospital of Wales, Health Park, Cardiff CF 144XN, London, Kingdom 101 White P.L., Carlo Mengoli et al (2011), Evaluation of Aspergillus spp PCR Rrotocal for Testing Serum Speccimens, Juonal of Clinical Microbiology, American Society for Microbiology, 102 Wei X, Zhang Y, Lu L (2015), The moleccular mecchanism of azole Resistance in Aspergillus fumigatus: from bedside to bench and back, Jounal of Microbiol, Vol53(2), pp.91-9 103 World Health Organization (2013), Jont FAO/WHO Food Standards Programe Condex Committee On Contannamnts In Foods, Food and Agriculture Organization of the United Nations, pp.118 104 World Health Organization (2018), Jont Fao/WHO Food Standards Programe Condex Committee On Contannamnts In Foods, Food and Agriculture Organization of the United Nations, 178 pp án n tiế sĩ Y c họ PHỤ LỤC NGÂN HÀNG GEN MẪU CỦA Aspergillus spp M157-ITS(501bp) (Aspergillus spp + Eurotium spp) Sequences producing significant alignments: Aspergillus niveoglaucus 18S rRNA gene (partial), ITS1, 5.8S rRNA gene, ITS2 and 926 926 100% 0.0 100% HE801344.2 28S rRNA gene (partial), strain CCF 4191 Eurotium parviverruculosum genomic Lu DNA containing 18S rRNA gene, ITS1, strain CBS 101750 containing 18S rRNA gene, ITS1, 5.8S strain CCF 4232 926 926 100% 0.0 100% HE615129.1 c họ rRNA gene, ITS2 and 28S rRNA gene, Y containing 18S rRNA gene, ITS1, 5.8S sĩ Aspergillus proliferans genomic DNA n strain CCF 4192 926 926 100% 0.0 100% HE615128.1 tiế rRNA gene, ITS2 and 28S rRNA gene, án Aspergillus proliferans genomic DNA 926 926 100% 0.0 100% HE615135.1 ận 5.8S rRNA gene, ITS2 and 28S rRNA gene, ÂU HỎ PHỎN VẤN K N THỨ , TH ẢO QUẢN THUỐ ÔN ƢỢ ỦA T N HỆ AN 2016 , THỰ H NH N T PHẦN H NH HÍNH Thơng tin người vấn: 2.Tuổi:… Nam/nữ:… Địa : Trung tâm y tế/Bệnh viện …… …… ……… | | (1= mù chữ, 2= Tiểu học, 3= Trung học sở, 4= Trung học phổ thông, 5= Đại học trở lên) Chuyên môn: (ghi số vào ô trống) Lu | | (1= Sơ cấp; = Trung cấp; = Cao đẳng; 4= Bác sỹ; 5= Thạc sỹ, Bác sỹ CKI; 6= Tiến sỹ, ận Bác sỹ CKII; 7= Khác (Ghi rõ ) PHẦN PHỎN VẤN NHÂN V ÊN T L M N HỀ ÔN ƢỢ án Anh/Chị có biết nguyên nhân gây nấm mốc vị thuốc? | | (1= có, 2= khơng, 3= không biết) tiế Theo Anh/chị, người sử dụng thuốc mốc có mắc bệnh khơng? | | (1= có, = không, 3= không biết) Nếu không/không biết hỏi đến câu n Theo Anh/chị, người mắc bệnh nấm mốc (đánh dấu x vào ô bên cạnh) : Dụng cụ nhà bếp bị nhiễm bẩn | | Do tiếp xúc với môi trường | | Do ăn uống thực phẩm nhiễm nấm mốc | | sĩ Uống thuốc đông dược bị mốc | | Y Anh/chị kể tên bệnh nấm mốc gây người mà biết Xơ gan | | Suy gan | | Ngứa/dị ứng | | Ung thư | | Các bệnh ống tiêu hóa (nơn, buồn nôn, Thiếu máu | | Suy tủy | | táo bón, chảy, chậm tiêu…) | | Khơng biết | | Khác (ghi rõ) | | Anh/chị nêu vài triệu chứng bệnh nấm mốc gây người mà biết: Sốt c họ Khác (ghi rõ)………………………………………………………………… Đau bụng | | Ngứa/dị ứng | | Vàng da | | Sụt cân Rối loạn tiêu hóa (nơn, buồn nơn, táo bón, chảy, chậm tiêu…) | | Không biết | | Khác (ghi rõ) | | | | | | Chóng mặt, hoa mắt | | Theo Anh/chị bệnh nấm mốc gây có hại khơng ? (ghi số vào trống) | | (1= có, 2= khơng, 3= không biết) Nếu không/không biết đến câu Anh/chị nêu tác hại bệnh nấm mốc gây với sức khỏe người mà biết: Suy nhược thể | | Gây chết người | | Khác(ghi rõ)… U gan, áp xe/viêm gan | | Theo Anh/chị phịng bệnh nấm mốc gây cho người không? (ghi số vào ô trống) | | (1= có, 2= khơng, 3= khơng biết) Nếu không/không biết, đến câu 11 Nếu được, phịng bệnh cách nào? (đánh dấu x vào ô bên cạnh) Vệ sinh dụng cụ nhà bếp □ Lu Khơng dùng □ Có dùng, đun kỹ trước dùng □ Khác (ghi rõ): ận 10 Theo Anh/chị bệnh nấm mốc người, điều trị khỏi khơng? (ghi số vào ô trống) Nếu không/không biết, đến câu 13 án | | (1= được, 2= không, 3= không biết) tiế 11 Nếu được, cách nào? (ghi số vào ô trống) n | | (1= điều trị tây y bệnh viện, 2= sử dụng thuốc đông y, 3= khác (ghi rõ) 12 Nếu bị mắc bệnh nấm mốc gây ra, Anh/chị làm gì? (ghi số vào trống) sĩ | | (1= mua thuốc,tự điều trị, 2= đến TYT xã, 3= đến BV huyện, 4= đến BV tỉnh, Y 5= khác (ghi rõ)……………………………………………………………… 14 Nếu có sử dụng thuốc đơng dược thuốc gì? (đánh dấu x vào bên cạnh) Kỳ □ Sen □ Kỳ tử Quy □ Đỗ trọng Kê huyết đằng □ □ Hoài sơn □ □ Bạch truật □ Đại táo □ Thục địa □ Long nhãn □ Ích mẫu Hà thủ □ □ c Sâm □ họ 13 Anh/chị có dùng thuốc đơng dược ngâm rượu khơng? | | (1= có, 0= khơng) Bạch thược □ Dâm dương hoắc □ Khác (gi rõ tên thuốc)………………………………………………………………………… 15 Kể tên lồi nấm mốc có thuốc đông dược bị mốc mà Anh/Chị biết (đánh dấu x vào ô bên cạnh) Aspergilus plavus □ Aspergilus niger □ Candida sp □ Penicillium spp□ Aspergilus fumigatus □ Khác □ (ghi rõ tên lồi gì………………………………… 16 Nếu biết thuốc đơng dược có nấm chất độc nấm mốc sinh Anh/chị sẽ: Khơng dùng □ Nấu chín trước sử dụng □ Khác □ (ghi rõ)…………… 17 Nếu biết vị thuốc trồng canh tác có sử dụng phân hóa học, phân chuồng, chất kích thích tăng trưởng…thì Anh/chị sẽ: Khơng sử dụng □ Nấu chín trước sử dụng □ Sử dụng bình thường □ 18 Nếu có, số lần Anh/chị sử dụng thuốc đông dược (ghi số vào ô trống) | | (1= Hàng ngày, 2= tuần 2-3 lần, 3= tuần/lần, 4= 2tuần/lần, 5=tháng/lần, 6= vài lần/năm) - …………………… Lu 19 Anh/chị kể vài vị thuốc mà biết thường xuyên sử dụng - ……………………… - ………………………… - ………………………… - ………………………… - ………………………… ận 20 Anh/chị có sử dụng loại thuốc đơng dược - ……………………… - ………………………… án - Không sử dụng | | - ……………………… Nếu không, đến câu 24 21 Nếu có, số lần Anh/chị sử dụng vị thuốc (ghi số vào trống) tiế | _| (1= thường xuyên, 2= thỉnh thoảng) n 22 Anh/chị có sử dụng vị thuốc đông dược chưa qua chế biến khơng? (ghi số vào trống) | | (1= có, 0= không) sĩ Y 23 Tại sở y tế anh, chị có thực kiểm tra định kỳ chất lượng vị thuốc đông dược không? (ghi số vào trống) | | (1= có, = không) - Canh tác, nuôi trồng vị thuốc theo quy trình an tồn sinh học □ - Sử lý hết mầm bệnh trước sử dụng □ - Không dùng phân trâu/bị tươi bón □ - Tất biện pháp □ 25 Hằng năm anh, chị có tập huấn nâng cao nghiệp vụ cơng tác chế biến bảo quản vị thuốc đông dược không? (ghi số vào ô trống) | | (1= Có, 2= Khơng) 26 Nếu có tháng/mấy năm tập huấn lần ? Ghi rõ………………………… 27 Anh chị có biết điều kiện để bảo thuốc đơng dược khơng? c - Không tưới rau/rửa rau nước sông/ao/hồ/mương thủy lợi □ họ 24 Để giảm số người mắc bệnh nấm mốc gây cộng đồng, theo Anh/Chị cần phải (đánh dấu x vào ô bên cạnh): | | (1= có, = khơng) (Nếu có, đến câu 30) 28 Nhiệt độ tối đa cho phép để bảo quản kho thuốc là: 35°C | | 30°C | | 25°C | | 20°C | | 29 Độ ẩm tương đối kho không vượt 70% phải không? Đúng | | Sai | | 30 Tốc độ gió(độ lưu thơng khơng khí) m/s? lựa chọn kết điền vào ô (1) < 0,5m/s; (2) từ 0,5m/s – 1m/s; (3) > 1m/s | | Cảm ơn Anh/chị tham gia vào vấn ận Ngƣời đƣợ vấn Lu Nghệ An, ngày tháng năm 2016 iều tr vi n án n tiế sĩ Y c họ