Nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn (ralstonia solanacearum smith) hại một số cây trồng cạn vụ thu đông và xuân hè tại hà nội, phụ cận năm 2014 2015

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - LÊ ĐÌNH TIẾN NGHIÊN CỨU BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN (RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH) HẠI MỘT SỐ CÂY TRỒNG CẠN VỤ THU ĐÔNG VÀ XUÂN HÈ TẠI HÀ NỘI, PHỤ CẬN NĂM 2014 - 2015 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI, NĂM 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - - LÊ ĐÌNH TIẾN NGHIÊN CỨU BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN (RALSTONIA SOLANACEARUM SMITH) HẠI MỘT SỐ CÂY TRỒNG CẠN VỤ THU ĐÔNG VÀ XUÂN HÈ TẠI HÀ NỘI, PHỤ CẬN NĂM 2014 - 2015 CHUYÊN NGÀNH: BẢO VỆ THỰC VẬT MÃ SỐ: 60 62 01 12 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS ĐỖ TẤN DŨNG HÀ NỘI, NĂM 2015 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan, giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 10 tháng Năm 2015 Tác giả Lê Đình Tiến Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, nỗ lực cố gắng thân, nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt thầy cô, bạn bè, người thân quan đơn vị Trước tiên xin chân thành cảm ơn thầy, cô ban đào tạo sau đại học khoa Nông họcđã trực tiếp giảng dạy, trang bị kiến thức bổ ích suốt thời gian qua Đặc biệt, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo PGS TS Đỗ Tấn Dũng, người tận tình hướng dẫn, giúp đỡ động viên tơi q trình thực đề tài hoàn thiện luận văn Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới nhân dân địa phương huyện Thanh Trì, Gia Lâm, Thạch Thất, Mê Linh - Hà Nội; Gia Đông, Nghĩa Đạo - Bắc Ninh; Văn Lâm - Hưng Yên giúp đỡ tơi tận tình thời gian thực đề tài Hà Nội, ngày 10 tháng Năm 2015 Tác giả Lê Đình Tiến Học viện Nơng nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii MỤC LỤC Lời cam đoan ii Lời cảm ơn iii Mục lục iv Danh mục bảng viii Danh mục đồ thị x Danh mục hình xi MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2.Mục đích yêu cầu 1.2.1.Mục đích 1.2.2.Yêu cầu Chương TỔNG QUAN VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 1.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.1.1 Lịch sử nghiên cứu, mức độ phổ biến tác hại bệnh héo xanh vi khuẩn 1.1.2 Nghiên cứu đặc điểm hình thái, đặc tính sinh lý, sinh hố lồi vi khuẩn R solanacearum 1.1.3 Các phương pháp phát hiện, chẩn đoán giám định vi khuẩn Ralstonia solanacearum 1.1.4 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith 10 1.2 Tình hình nghiên cứu nước 13 Chương VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Vật liệu đối tượng nghiên cứu 19 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu: 19 2.1.2 Vật liệu nghiên cứu 19 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 19 2.2.1 Thời gian nghiên cứu 19 2.2.2 Địa điểm nghiên cứu 19 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 2.3 Nội dung nghiên cứu 19 2.4 Phương pháp nghiên cứu 20 2.4.1 Phương pháp điều tra bệnh héo xanh vi khuẩn đồng ruộng 20 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn phịng thí nghiệm 20 2.4.3 Phương pháp nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn nhà lưới 25 2.4.4 Phương pháp xử lý số liệu 27 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 28 3.1 Điều tra thực trạng bệnh héo xanh vi khuẩn gây hại số trồng cạn vùng Hà Nội phụ cận vụ thu đông 2014 xuân hè 2015 28 3.1.1 Điều tra bệnh héo xanh vi khuẩn hại cà chua vùng Hà Nội phụ cận vụ thu đông 2014 28 3.1.2 Tình hình bệnh héo xanh vi khuẩn hại cà chua vùng Hà Nội phụ cận vụ xuân hè 2015 32 3.1.3 Tình hình bệnh héo xanh vi khuẩn hại khoai tây vùng Hà Nội phụ cận vụ đông 2014 33 3.1.4 Tình hình bệnh héo xanh vi khuẩn hại ớt vùng Hà Nội phụ cận vụ thu đông 2014- 2015 36 3.1.5 Tình hình bệnh héo xanh vi khuẩn gây hại cà pháo vùng Hà Nội phụ cận vụ thu đông 2014 38 3.1.6 Bệnh héo xanh vi khuẩn hại lạc 40 3.2 Nghiên cứu số đặc điểm hình thái khuẩn lạc đặc tính sinh học loài R solanacearum Smith 43 3.2.1 Phương pháp phân li nuôi cấy vi khuẩn gây bệnh 45 3.2.2 Đặc điểm hình thái tế bào khuẩn lạc vi khuẩn R solanacearum Smith 46 3.2.3 Thử gram vi khuẩn R solanacerum dung dịch KOH 3% 49 3.2.4 Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum 51 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v 3.2.5 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển mẫu phân lập vi khuẩn Ralstonia solanacearum 53 3.2.6 Nghiên cứu số đặc tính sinh hoá vi khuẩn R solanacearum 54 3.2.7 Thử phản ứng siêu nhạy dòng vi khuẩn gây bệnh héo xanh thuốc (Nicotiana tabacum) 55 3.3 Nghiên cứu phạm vi ký chủ mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum phân lập từ ký chủ vùng Hà Nội phụ cận 57 3.4 Khảo sát hiệu lực phịng trừ thuốc hố học thuốc kháng sinh với mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum môi trường nhân tạo 62 3.4.1 Khảo sát hiệu lực phòng trừ vi khuẩn gây bệnh héo xanh vi khuẩn đối kháng B subtilis môi trường nhân tạo 65 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 68 Kết luận 68 Đề nghị 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Giải nghĩa B subtilis Bacillus subtilis BVTV Bảo vệ thực vật HXVK Héo xanh vi khuẩn P solanacearum Pseudomonas solanacearum R solanacearum Ralstonia solanacearum Cs Cộng TZC Triphenyl -Tetrazolium - Chloride SPA Saccarose - peptone - agar PPSA Potato - Peptone - Saccarose - Agar ICM Quản lý trồng tổng hợp TLB Tỷ lệ bệnh QCVN Quy chuẩn Việt Nam Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii DANH MỤC BẢNG Số bảng Tên bảng Trang 3.1 Tình hình bệnh héo xanh vi khuẩn cà chua Hà Nội phụ cận vụ thu đông năm 2014 31 3.2 Điều tra bệnh HXVK hại cà chua vụ xuân hè 2015 số vùng Hà Nội phụ cận 32 3.3 Tình hình bệnh HXVK hại khoai tây vụ đông năm 2014-2015 vùng Hà Nội phụ cận 34 3.4 Diễn biến bệnh HXVK hại ớt xã Nghĩa Đạo, huyện Thuận Thành, Bắc Ninh, Đa Tốn Gia Lâm vụ thu đông năm 2014 36 3.5 Tình hình bệnh HXVK gây hại cà pháo (giống xanh) Hà Nội phụ cận vụ đông xuân 2014-2015 38 3.6 Diễn biến bệnh HXVK hại lạc vụ xuân hè 2015 vùng Hà Nội phụ cận 41 3.7 Diễn biến bệnh HXVK hại lạc Tiên Dương, Đông Anh vụ xuân hè 2015 42 3.8 Danh mục mẫu phân lập vi khuẩn Ralstonia solanacearum phân lập số ký chủ vùng Hà Nội phụ cận năm 2014-2015 46 3.9 Một số đặc điểm hình thái mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum Smith gây bệnh HXVK hại số trồng vùng Hà Nội phụ cận năm 2015 47 3.10 Kết thử nhuộm Gram cho mẫu phân lập vi khuẩn ký chủ 50 3.11 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum 52 3.12 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum 54 3.13 Khảo sát số đặc tính sinh lý sinh hố mẫu phân lập vi khuẩn Ralstonia solanacearum 55 3.14: Kết kiểm tra phản ứng siêu nhạy dòng vi khuẩn thuốc (Nicotiana tabacum) 56 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii 3.15 Kết lây nhiễm nhân tạo mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum giống cà chua chịu nhiệt 58 3.16 Kết lây nhiễm nhân tạo mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum giống cà bát 60 3.17 Khảo sát hiệu lực ức chế số thuốc hoá học thuốc kháng sinh với mẫu phân lập vi khuẩn gây bệnh héo xanh môi trường nhân tạo 63 3.18 Khảo sát hiệu lực vi khuẩn đối kháng B subtilis với số mẫu phân lập vi khuẩn héo xanh môi trường nhân tạo 66 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ix Bảng 3.17 Khảo sát hiệu lực ức chế số thuốc hoá học thuốc kháng sinh với mẫu phân lập vi khuẩn gây bệnh héo xanh môi trường nhân tạo Đường kính vịng vơ khuẩn (mm) Chỉ tiêu theo dõi Công thức CC-CN-DH-01 KT-Ma-GĐ - 01 O-HQ-NĐ-01 CP-DT-01 L-ĐX-01 24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 Cloramphenicol (0.1%) 4.3 4.9 5.8 4.2 4.7 5.3 4.5 5.0 5.9 4.5 5.1 5.8 4.1 4.5 5.2 Strep gold 70WP (0.1%) 1.5 2.4 3.5 1.3 2.3 3.4 4.2 2.4 3.6 1.4 2.6 3.7 1.2 2.5 3.5 Nika Su 82SL 0.1% 2.2 3.3 4.2 2.1 3.3 4.6 2.1 3.4 4.4 2.3 3.2 4.2 2.1 3.3 4.7 thí nghiệm Đối chứng 63 (0%) Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 63 Qua bảng 3.17 nhận thấy: loại thuốc có khả ức chế phát triển vi khuẩn R solanacearum so với đối chứng Trong thuốc Cloramphenicol nồng độ 0.1% có hiệu lực cao với đường kính vịng vơ khuẩn sau 72h mẫu phân lập CC-CN-DH-01là 5.8 mm, KT-Ma-GĐ - 01 5.3 mm, OHQ-NĐ-01 5.9mm, CP-TĐ -02 5.8 mm L-ĐX-01 5.2 mm Sau đến Nika Su 82SL nồng độ 0.1% với đường kính vịng vơ khuẩn sau 72h mẫu phân lập CCCN-DH-01 4.2mm, KT-Ma-GĐ - 01 4.6mm, O-HQ-NĐ-01 4.4mm, CP-TĐ 02 4.2mm, L-ĐX-01 4.7 mm Hiệu thấp Strep gold 70WP nồng độ 0.1% với đường kính vịng vô khuẩn sau 72h mẫu phân lập CC-CN-DH-01là 3.5mm, KT-Ma-GĐ - 01 3.4mm, O-HQ-NĐ-01 3.6mm, CP-TĐ -02 3.7mm LĐX-01 3.5 mm Kết cho thấy thuốc hoá học thuốc kháng sinh có khả ức chế phát triển vi khuẩn R solanacearum môi trường nhân tạo Trong phải nói đến hiệu thuốc kháng sinh Cloramphenicol có lực ức chế mạnh thuốc hố học nhiều Hình 3.20 Hiệu lực ức chế thuốc hoá học, thuốc kháng sinh mẫu phân lập vi khuẩn (CC-CN-DH-01) sau 72 h Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nơng nghiệp Page 64 3.4.1 Khảo sát hiệu lực phịng trừ vi khuẩn gây bệnh héo xanh vi khuẩn đối kháng B subtilis mơi trường nhân tạo Phịng trừ bệnh HXVK gặp nhiều khó khăn phứ tạp vùng sản xuất rau màu Cùng với biện pháp khác, biện pháp sử dụng vi sinh vật đối kháng để phòng chống bệnh HXVK hại trồng nhiều tác giả nước nghiên cứu Theo kết nghiên cứu Kelman (1953): số vi khuẩn Bacillus sp; Pseudomonas fluorescens, v.v có khả ức chế, cạnh tranh, đối kháng tiết chất chống vi khuẩn gây bệnh héo xanh Theo kết nghiên cứu Đỗ Tấn Dũng (1998) loài vi khuẩn đối kháng Bacillus subtilis Pseudomonas fluorescens kết luận: hai lồi có khả ức chế, cạnh tranh với loài R solanacearum gây bệnh héo xanh Để nghiên cứu khả ức chế vi khuẩn Bacillus subtilis vi khuẩn gây bệnh héo xanh R solanacearum tiến hành thí nghiệm mơi trường nhân tạo Thí nghiệm bố trí gồm cơng thức, cơng thức nồng độ khác Kết cho bảng 3.18: Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 65 Bảng 3.18 Khảo sát hiệu lực vi khuẩn đối kháng B subtilis với số mẫu phân lập vi khuẩn héo xanh mơi trường nhân tạo Đường kính vịng vô khuẩn (mm) Chỉ tiêu theo dõi Công thức CC-CN-DH-01 KT-Ma-GĐ - 01 O-HQ-NĐ-01 CP-DT-01 L-ĐX-01 24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h 24h 48h 72h Đối chứng 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 CT1 3.1 3.8 4.1 2.2 3.3 3.8 3.0 3.7 4.2 3.3 3.9 4.5 3.0 3.6 4.1 CT2 3.6 4.5 5.2 3.8 4.7 5.5 4.1 5.0 5.9 4.0 4.9 5.6 4.1 5.0 5.7 CT3 3.8 5.0 5.5 4.1 4.9 5.8 4.4 5.4 6.3 4.3 5.2 6.0 4.4 5.2 6.1 thí nghiệm 66 Ghi chú: Công thức 1: vi khuẩn B.subtilis 106 cfu/ ml Công thức 2: vi khuẩn B.subtilis 107 cfu/ ml Công thức 3: vi khuẩn B.subtilis 108 cfu/ ml Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 66 Qua số liệu bảng 3.18 nhận thấy: vi khuẩn đối kháng B subtilis mật độ tế bào khác có khả ức chế phát triển vi khuẩn R.solanacearum môi trường nhân tạo so với công thức đối chứng Ở nồng độ (mật độ tế bào vi khuẩn B subtilis 106 CFU/ml) có hiệu lực ức chế thấp hơn, thể qua đường kính vịng vô khuẩn sau 72h với mẫu phân lập vi khuẩn CC-CN-DH01 4.1mm, KT-Ma-GĐ-01 3.8mm, O-HQ-NĐ-01 4.2mm, CP-DT -01 4.5mm, L-DX-01 4.1 mm Nhưng nồng độ (mật độ tế bào vi khuẩn B subtilis 107 CFU/ml) có hiệu lực ức chế cao hơn, thể qua đường kính vịng vơ khuẩn sau 72h với mẫu phân lập CC-CN-DH-01 5.2mm, KT-Ma-GD-01 5.5 mm, O-HQNĐ-01 5.9mm, CP-DT-01 5.6mm L-ĐX-01 5.7 mm nồng độ (mật độ tế bào vi khuẩn B subtilis 108 CFU/ml) có hiệu lực ức chế cao nhất, thể qua đường kính vịng vô khuẩn sau 72h với mẫu phân lập CC-CN-DH-01 5.5mm, KTMa-GD-01 5.8 mm, O-HQ-NĐ-01 6.3mm, CP-DT-01 6.0 mm L-ĐX-01 6.1 mm Kết cho thấy vi khuẩn đối kháng B subtilis mật độ tế bào khác có khả ức chế phát triển vi khuẩn R.solanacearum môi trường nhân tạo Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 67 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Quá trình tiến hành thực đề tài: “Nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn vi khuẩn (Ralstonia solanacearum Smith) hại số trồng cạn vụ thu đông xuân hè vùng Hà Nội, phụ cận năm 2014-2015” rút số kết luận sau: Bệnh héo xanh vi khuẩn (Ralstonia solanacearum) loại bệnh hại phổ biến hầu hết vùng địa bàn Hà Nội phụ cận Bệnh phát sinh gây hại nhiều loài trồng như: cà chua, khoai tây, ớt, cà pháo, lạc v.v Trong cà chua nhiễm bệnh HXVK nặng nhất, tỷ lệ bệnh 25.6%, khoai tây tỷ lệ bệnh thấp 5.9%, tiếp đến ớt tỷ lệ bệnh 7.5% cà pháo tỷ lệ bệnh 6.2% lạc tỷ lệ bệnh 6.4%, Tuy nhiên, diễn biến bệnh HXVK hại cà chua, khoai tây, ớt, cà pháo, lạc ngồi đồng ruộng cịn tuỳ thuộc đặc điểm giống trồng, giai đoạn sinh trưởng, chế độ luân canh, chân đất Các mẫu phân lập vi khuẩn phân lập từ ký chủ: Cà chua, khoai tây, ớt, cà pháo lạc phát triển thuận lợi môi trường nhân tạo SPA PPSA Trên môi trường nhân tạo khuẩn lạc đặc trưng mẫu phân lập vi khuẩn có hình trịn, nhầy, màu trắng kem - trắng sữa, rìa nhẵn khơng làm thay đổi màu môi trường Các mẫu phân lập vi khuẩn gây bệnh héo xanh cà chua, khoai tây, ớt, cà pháo lạc có phản ứng gram âm, Phản ứng oxy hoá Catalaza, phản ứng tạo H2S, không thuỷ phân tinh bột không phản ứng với gelatin Các mẫu phân lập vi khuẩn phân lập từ 05 ký chủ: Cà chua, khoai tây, ớt, cà pháo, lạc thể tính gây bệnh lây nhiễm nhân tạo cà chua (giống chịu nhiệt), cà bát Các mẫu phân lập vi khuẩn khác thể tính độc, tính gây bệnh khác cao ký chủ Khảo sát hiệu lực số thuốc hoá học, thuốc kháng sinh với mẫu phân lập vi khuẩn héo xanh môi trường nhân tạo PPSA cho thấy loại thuốc có khả ức chế phát triển vi khuẩn héo xanh Thuốc kháng sinh Cloramphenicol 0.1% có hiệu lực ức chế cao thuốc dùng làm thí nghiệm Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 68 Khảo sát hiệu lực ức chế vi khuẩn đối kháng B subtilis với mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum môi trường PPSA cho thấy ba nồng độ vi khuẩn 106,107,108 CFU/ ml có khả ức chế phát triển vi khuẩn héo xanh Ở nồng độ 108 CFU/ ml khả ức chế vi khuẩn đối kháng B subtilis với mẫu phân lập vi khuẩn R solanacearum cao với đường kính vịng vơ khuẩn sau 72h dao động từ 5.5 - 6.3mm Đề nghị Từ kết nghiên cứu thu được, rút số đề nghị: - Cần tiếp tục điều tra, nghiên cứu sâu rộng ảnh hưởng chế độ luân canh, thành phần giới đất, giống ký chủ đến phát sinh phát triển bệnh HXVK hại trồng vùng Hà Nội phụ cận - Tiếp tục khảo sát, nghiên cứu hiệu lực thuốc BVTV, thuốc kháng sinh Cloramphenicol đặc biệt vi khuẩn đối kháng B subtilis phòng trừ bệnh héo xanh vi khuẩn hại cà chua, khoai tây, ớt, cà pháo, lạc điều kiện chậu vại diện hẹp sản xuất Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Văn Biếu, Bùi Thị Vân, Đào Đức Thuận, Trần Thị Vui Tào Ngọc Tuấn (1996) Thành phần sâu bệnh hại thuốc vàng vùng trồng phía Bắc Việt Nam, Kết nghiên cứu khoa học 1986- 1996, Viện kinh tế kỹ thuật thuốc lá, NXB Nông nghiệp Hà Nội, tr 96- 102 Tạ Thu Cúc Nguyễn Thành Quỳnh (1983) Kỹ thuật trồng cà chua, NXB Nông nghiệp Hà Nội Đỗ Tấn Dũng (1995a).Tính phổ biến bệnh vi khuẩn gây bệnh héo rũ (Bacterial Wilt) số trồng cạn vùng Hà Nội phụ cận, Tạp chí Bảo vệ Thực vật, 2: 38-42 Đỗ Tấn Dũng (1995b) Một số kết nghiên cứu bệnh vi khuẩn gây héo rũ cà chua, tạp chí Bảo vệ Thực vật, 2: 47-50 Đỗ Tấn Dũng, Đào Đức Thức Lê Lương Tề (1997) Một số kết điều tra nghiên cứu bệnh héo rũ thuốc (Pseudomonas solanacearum Smith) vùng Hà Nội phụ cận, Tạp chí Bảo vệ Thực vật, 6: 20-24 Đỗ Tấn Dũng (1998) Nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn Pseudomonas solanacearum Smith hại số trồng ngoại thành Hà Nội phụ cận, Luận án Tiến Sỹ Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội, 181tr Đỗ Tấn Dũng (2009) Một số kết nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn (Ralstonia solanacearum Smith) hại cà chua số rau màu vụ thu đông – xuân hè năm 2007-2008 Ninh Bình, Hội thảo quốc gia bệnh hại thực vật, 25-26/7/2009, NXB Nông nghiệp Hà Nội, tr 122-128 Đỗ Tấn Dũng, Nguyễn Tất Thắng NguyễnVăn Tuất (2011) Nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn (Raltonia solanacearum Smith) Hại khoai tây vùng Hà Nội – phụ cận biện pháp phịng trư, Tạp chí Khoa học Phát triển, (5): 725 - 734 Nguyễn Văn Đĩnh cs (2005) Biện pháp quản lý trồng tổng hợp (ICM) khoai tây đồng sông hồng Nguyễn Xuân Hồng, Nguyễn Thị Yến Nguyễn Văn Liễu (1993) Một số kết nghiên cứu bệnh hại lạc xác định nguồn gen chống chịu bệnh héo miền Bắc Việt Nam, Báo cáo khoa học, Hội nghị Khoa học Bảo vệ thực vật, 24-25, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, tr 16-17 Nguyễn Xuân Hồng, Nguyễn Thị Yến, Nguyễn Văn Liễu Phạm Văn Chương (1995) Nghiên cứu chọn tạo giống lạc kháng bệnh héo xanh vi khuẩn, Kết nghiên cứu khoa học đậu đỗ 1991-1995, Viện khoa học Kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Xuân Hồng, Nguyễn Thị Yến Nguyễn Văn Liễu (1997) Kết nghiên cứu đặc điểm phân bố, tác hại bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith miền Bắc Việt Nam, Tạp chí Bảo vệ thực vật, 6: 27 -31 Trần Văn Lài, Lê Lương Tề Chu Văn Chuông (2002) Kết khảo nghiệm dòng giống cà chua kháng bệnh héo xanh vi khuẩn Gia Lâm, Hà Nội, Tạp chí Bảo vệ Thực vật, 4: 10-13 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70 Lê Lương Tề (1997) Ảnh hưởng số yếu tố sinh thái bệnh héo rũ vi khuẩn hại lạc vùng đất bạc màu Trung du Bắc bộ, Tạp chí Bảo vệ thực vật, 4: 5-8 Đoàn Thị Thanh, Nguyễn Xuân Hồng Vũ Triệu Mân (1995) Nghiên cứu vi khuẩn Pseudomonas solanacearum số ký chủ miền Bắc Việt Nam, Các cơng trình nghiên cứu Nghiên cứu sinh, Quyển 5, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội, tr 273-278 Ngô Đức Thiệu Nguyễn Văn Thắng (1978) Kỹ thuật trồng khoai tây, NXB Nông nghiệp Hà Nội, 136 tr Hà Minh Trung, Ngô Vĩnh Viễn Trần Thị Thuần (1989) Một số kết theo dõi bệnh virus, vi khuẩn khoai tây nhập nội, Kết nghiên cứu Bảo vệ thực vật 19791989, NXB Nông nghiệp Hà Nội 1989, tr 83-87 Phạm Xuân Tùng (1995) Di truyền tính chống bệnh héo tươi Pseudomonas solanacearum Smith khoai tây, Tạp chí Nơng nghiệp CNTP, 391:33- 35 Viện Bảo vệ Thực vật (1997) Phương pháp nghiên cứu Bảo vệ Thực vật, Tập 1, NXB Nông nghiệp Hà Nội, 99 tr Tài liệu tiếng anh Abeygunawardena, D.V and Siriwardena, A.A (1963) A study on resistance in tomato to Bacterial, Tropical Agriculturist, pp.1-12 Akiew, E., Trevorrow, P.R and Tonello, P.E (1992) Management of bacteria wilt ò tobacco, Bacterial wilt, ACIAR proceedings N045 (Hartman , G.L., and Hayward, A.C.,eds), ACIAR, Canberra, Australia, pp 270-275 Alice, M., Carlos, A and Lopes, C.A (1997) Evaluation in Brazil of potato clone resistance to Bacterial wilt in the Philippines, Bacterial with Newsletter, 14: 1-3 AVRDC (2000) Internal Review and Planning Workshop, 5-7 Dec.,, at Asian Vegetable Research and Development Centre, Tainan 741, Taiwan Buddenhagen and Kelman, A (1964) Biological and physiological aspect of bacterial wilt caused by Pseudomonas solanacearum, Am Phytopath, 2:203 – 230 Caetano-Anolles, G., Bassam, B.J and Gresshop, P.M (1991) DNA ampli-fication fingerprinting using very short arbitray oligonucleotides, Bio-technology, 9: 553 - 557 Devos, K.M and Gale, M.D (1992) The use of random amplified polymorphic DNA markers in wheat, Theor Applied Genetics, 84: 567 - 572 French, E.R (1986) Interaction between strains of Pseudomonas solanacearum, its hot and the environment, Bacterial wilt disease in Asia and South Parcifics, ACIAR Proceedings, 13 : 99- 104 French, E.R (1998) The use fulness of potato resistance to R solanacearum, for the integrated control of Bacterial wilt, Bacterial Wilt Disease, Molecular and Ecological Aspects, Springer and INRA editions, pp 381 - 385 Hayward, A.C (1960) A method for characterising Pseudomonas solanacearum Natural, London, 186, pp 405- 406 Hayward, A.C (1986) Bacterial wilt caused by Pseudomonas solanacearum in Asia and Australia, ACIAR Proceedings, 13:101-105 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 71 Hayward, A.C (1994) The host of Pseudomonas solanacearum, Bacterial wilt: the disease and its causative Agent, CAB International in association with the Asian Vegetable Research and Development Center, pp - 24 He, L.Y., Sequera, L and Kelman, A (1983) Characteristics of strains of Pseudomonas solanacearum from China, Plant disease, 67: 1357-1362 He, L.Y (1986) Bacterial wilt in the People’s republic of China, Bacterial Wilt, ACIAR Proceedings, 13: 40 – 48 He, L Y (1990) Control of bacterial wilt of Groundnut in China with emphasis on cultural and biological methods, Bacterial wilt of Groundnut, ACIAR Proceedingd, 13: 40- 48 Jackson, M.T and Gonzalez, L.C (1981) Persistance of Pseudomonas solanacearum (race 1) in a naturally infested soi in CostaRica Phytopathology 71, pp 600- 603 Kagona, J D Z (2008) The incidence of Bacterial wilt (Ralstonia solanacearum) in informal potato planting material used by farmers in Dedza and Ntcheu districts of Malawi, pp.73 Kelman, A (1953) The bacterial wilt caused by Pseudomonas solanacearum, aliterary review and bibliography Technical Bulletin of North Carolina Agricultural Experiment station, 99: 12 - 20 Kelman, A (1954) The relationship of pathologencity in Pseudomonas solanacearum to colony appearance on a tetrazolium medium, Phytopothology, 44: 693 - 695 Kelman, A., Hartman, G.L and Hayward, A C (1994) Introduction, Bacterial wilt, CABI, p - Kelman, A (1997) One hundred and one years of research on Bacterial Wilt, Bacterial Wilt Disease, Molecular and Ecological Aspects, Springer and INRA editions Kiraly, Z., Klement Z., Solymosy and Voros.J (1983) Những phương pháp nghiên cứu bệnh Vũ Khắc Nhượng Hà Minh Trung dịch, NXB Nông nghiệp Hà Nội Lum, K.Y (1990) Host plant Resistance to Pseudomonas solanacearum, Bacterial wilt of Groundnut, ACIAR Proceedings, 31:18 - 21 Mc Carter, S M (1991) Bacterial wilt of tomato, In: Compendium of tomato diseases, APS Press Machmud, M (1986) Bacterial wilt in Indonesia, In: Persley G J, ed, Bacterial wilt in Asia and the South Pacific, CAIAR Proceedings, 13: 30- 34 Machmud, M (1993) Control of Peanut Bacterial Wilt throungh crop rotation, In: Hartman, G L and Hayward, A C, eds, Bacterial wilt, ACIAR Proceeding, 45:221224 Machmud, M and Rats, S.A (1994) Status of Groundnut Bacterial wilt in Indonesia, Bacterial wilt in Asia, Proceedings of the Third working Group meeting, - July ICRISAT, pp 115 - 119 Mehan, V K., Mc Donald, D and Subrahmanyam, P (1986) Bacterial wilt of groundnut: cotrol with emphasis on host plant resistance, Bacterialwilt, ACIAR Proceedings, 13: 112 - 119 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 72 Mehan, V.K., Liao, B.S., Tan, Y.J and Hayward, A.C (1994) Bacterial wilt of groundnut, No 35, ICRISAT, India, 23 p Murakoshi, R and Takahashi, M (1984) Trials of some control of tomato bacterial wilt caused by Pseudomonas solanacearum Bulletin of the Kanagawa Horticultural Experiment Station, 31: 50- 56 Prior, P., Claison M and Schmit, J (1993) Contribution Integrated control against Bacterial wils different redoclimatic situation: Guadeloupe experience, In: Hartman, G L., and Hayward, A C, eds, Bacterial wilt ACIAR Proceedings, 45: 294- 304 Prior, P., Alien, C and Elphinstone, J (1997) Bacterial wilt diseases, Molecular and Ecological Aspects, Springer and INRA Editions, 447 p Ramesh, C R., Badyopadhyay, A K (1992) Bacterial wilt potential of soil Andaman and Nicobar Islands, Bacterial wilt, ACIAR Proceedings, 45: 335- 337 Seal, S E (1998) Molecular methods for detection and discimination of Ralstonia solanacearum In: Prior, P., Allen, C., and Elphinstone, F., eds Bacterial Wils Diseases, INRA, France, pp 103- 109 Sinha ,S.K., (1986) Bacterial wilt in India, Bacterial wilt disease in Asia and the south Pacific, ACIAR Proceeding, 13: 28 – 29 Smith, E F (1986) A bacterial diseases of the tomato, eggplant and Izish potato (Bacillus solanacearum), Department of Agriculture, Division of vegetable physiogy and pathology, USA, Bulletin 12, pp 1- 28 Scott, J.W., Somodi, G.C and Jones, J.B (1993) Testing tomato genotypes and breeding for resistance to Bacterial wilt in Florida, Bacterial Wilt, ACIAR Proceedings, 45:126-131 Tan, Y.J and Liao, B.S (1990) General aspects of roundnut Bacterial wilt in China, Bacterial Wilt of groundnut, ACIAR Proceedings, 31:44 – 47 Titatarn, V (1986) Bacterial wilt in Thailand, Bacterial wilt disease in Asia and South Pacific, ACIAR Proceedings, 13: 65 - 67 Trigalet, A., Frey, P and Trigalet- Demery, D (1994), Biological control of bacterial wilt caused by Pseudomonas solanacearum, Bacterial wilt, the diseases and its causative agent Pseudomonas solanacearum, CAB International, pp 225- 233 Wang, J S and Hou, X Y (1982) A study on the conttrol of the Bacterial wilt of peanut Agricultural Science and Technology in Lingyi, pp 1- 11 Wang J.F., (1998) Sysmtoms and diagnostic methods for bacterial wilt in tomato in the field, field guide for CLV Project Yabuuchi, E., Kosako, Y and Hotta, H.(1992) Proposal of Burkholderia gen Nov and transfer of seven species of thegenus Pseudomonas solanacearum homology group II to the new genus, with type species Burkholderia cepacia (Palleroni & Holmes 1981) comb Nov Microbiology and Immunology, pp 1251- 1275 Yabuuchi, E., Kosako, Y., Yano, I and Nishiuchi, Y (1996) Transfer of two Burkholderia and an Alcaligenes species to Ralstonia gen nov: Proposal of Ralstonia pieketti (Ralston, Palleroni and Douderoff 1973) comb nov nd Ralstonia eutropha (Davis, 1969) comb nov Microbiology and Immunology, 39: 897- 904 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 73 PHỤ LỤC Xử lý thống kê BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLB FILE 11/ 9/** 13: PAGE Thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên thí ngiêm lây nhiễm nhân tao sỏt thng r (c chua) VARIATE V003 TLB LN Tû lÖ bÖnh (%) SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1881.95 470.487 22.94 0.000 * RESIDUAL 10 205.067 20.5067 * TOTAL (CORRECTED) 14 2087.01 149.072 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 11/ 9/** 13: PAGE ThiÕt kÕ hoµn toµn ngẫu nhiên thí ngiêm lây nhiễm nhân tạo MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CC-CN-DH-01 KT-Ma-GD-01 O-HQ-ND-01 CP-DT-01 L-DX-01 NOS 3 3 TLB 54.4333 28.9000 21.8667 33.3667 27.7667 SE(N= 3) 2.61449 5%LSD 10DF 8.23835 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 11/ 9/** 13: PAGE Thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên thí ngiêm lây nhiễm nhân tạo F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 33.267 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 12.210 4.5284 13.6 0.0001 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | | Page 74 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLB FILE 11/ 9/** 13:34 PAGE Thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên lây bệnh nhân tạo tiờm nỏch la (c chua) VARIATE V003 TLB LN Tû lƯ bªnh (%) SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1369.19 342.298 17.11 0.000 * RESIDUAL 10 200.007 20.0007 * TOTAL (CORRECTED) 14 1569.20 112.086 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 11/ 9/** 13:34 PAGE Thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên lây bệnh nhân tạo tiờm nỏch la (c chua) MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CC-CN-DH-01 KT-Ma-GD-01 O-HQ-ND-01 CP-DT-01 L-DX-01 NOS 3 3 TLB 52.2333 30.0000 24.4667 35.5333 30.0333 SE(N= 3) 2.58203 5%LSD 10DF 8.13608 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 11/ 9/** 13:34 PAGE ThiÕt kÕ hoàn toàn ngẫu nhiên lây bệnh nhân tạo tiờm nỏch la (cà chua) F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 34.453 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.587 4.4722 13.0 0.0002 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | | Page 75 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLB FILE 11/ 9/** 13:35 PAGE Thiết kê hoàn toàn ngẫu nhiên lây bệnh nhân tạo sát th?ng rễ (cà bát) VARIATE V003 TLB LN Tû lƯ bªnh (%) SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1100.10 275.026 16.91 0.000 * RESIDUAL 10 162.600 16.2600 * TOTAL (CORRECTED) 14 1262.70 90.1931 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 11/ 9/** 13:35 PAGE Thiết kê hoàn toàn ngẫu nhiên lây bệnh nhân tạo sát th?ng rễ (cà bát) MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CC-CN-DH-01 KT-Ma-GD-01 O-HQ-ND-01 CP-DT-01 L-DX-01 NOS 3 3 TLB 45.5667 28.9000 25.5667 46.6667 38.9000 SE(N= 3) 2.32809 5%LSD 10DF 7.33590 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 11/ 9/** 13:35 PAGE ThiÕt kê hoàn toàn ngẫu nhiên lây bệnh nhân tạo sát th?ng rễ (cà bát) F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 37.120 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.4970 4.0324 10.9 0.0002 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | | Page 76 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLB FILE 11/ 9/** 13:37 PAGE ThiÕt kÕ hoµn toµn ngÉu nhiên lây nhiễm nhân tạo b"ng tiêm nách (cà bát) VARIATE V003 TLB LN Tỷ lệ bênh (%) SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 905.113 226.278 25.33 0.000 * RESIDUAL 10 89.3401 8.93401 * TOTAL (CORRECTED) 14 994.453 71.0324 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 11/ 9/** 13:37 PAGE ThiÕt kÕ hoµn toµn ngÉu nhiên lây nhiễm nhân tạo b"ng tiêm nách (cà b¸t) MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CC-CN-DH-01 KT-Ma-GD-01 O-HQ-ND-01 CP-DT-01 L-DX-01 NOS 3 3 TLB 41.1000 27.8000 23.3333 43.3333 37.7667 SE(N= 3) 1.72569 5%LSD 10DF 5.43771 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 11/ 9/** 13:37 PAGE Thiết kế hoàn toàn ngẫu nhiên lây nhiễm nhân tạo b"ng tiêm nách (cà bát) F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TLB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 34.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 8.4281 2.9890 8.6 0.0001 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp | | | | Page 77