ĐẠI CƯƠNG VỀ ANKALOID MỞ DẦU SƠ LƯỢT VỀ DƯỢC LIỆU CHỨA ALCALOID Định nghĩa Messner HCHC, kiềm, N, thực vật Polo + HCHC, N,dị vòng + Kiềm + Phản ứng với các thuốc thử chung Alcaloid + Thực vật (động vậ[.]
ĐẠI CƯƠNG VỀ ANKALOID MỞ DẦU SƠ LƯỢT VỀ DƯỢC LIỆU CHỨA ALCALOID Định nghĩa: - Messner: HCHC, kiềm, N, thực vật - Polo: + HCHC, N,dị vòng + Kiềm + Phản ứng với thuốc thử chung Alcaloid + Thực vật (động vật) + Dược tính rõ rệt - Chất alkaloid: chất tổng hợp, truyền thống, peptid, nucleoid Danh pháp: theo tên thực vật Theo tên tác dụng Phân bố: - Thực vật bậc cao Một số phận Hỗn hợp-Alcaloid họ - nhóm chất – nhiều họ Hàm lượng - Động vật, nấm, vi khuẩn BÀI PHÂN LOẠI I II PHÂN LOẠI CHUNG Theo bậc Nitơ: N bậc Theo đường sinh tổng hợp: pseudo Proto Alc, thực Cấu trúc hóa học: purin, tropan, quinolin, indol… Phân loại theo bậc N 1) Mất N thay nhóm hydrocacbon số lượng 1, 2, tương ứng bậc I, II, III, • Bậc bậc thêm nhóm Hydrocacbon (Berberin, Banafin, Palmatin) bậc tan nước • Amid có tính trung tính , (Colchicine,Tazol) R3-N R4-N+ Dạng ion hóa Dạng muối Thân nước Tan/ DM phân cực 2) Các amid ankaloid Trung tính Colchicin Capsaicin Ricinin 3) Phân loại Theo Sinh Tổng Hợp Loại alkaloid N từ acid amin Alkaloid thực (tổng hợp từ acid amin tạo sp có Có N dị vòng) Proto (tiền) Alkaloid (Tổng hợp từ acid amnin ko Có có N dị vịng N mạch nhánh) Pseudo Alkaloid (ko xuất phát từ acid amin Khơng tổng hợp N nằm dị vịng) N dị vịng? Có Khơng Có (chủ yếu) Proto Alkaloid: Cochicin (cây tỏi độc), Ephedrin (cây ma hoàng), Capsaicin (ớt) Pseudo Alkaloid: Conessin (cây mộc hoa trắng), Cafein (cà phê) 4) Phân loại theo cấu trúc hóa học: Proto alkaloid Alkaloid thực Pseudo Alkaloid - Phenyl-alkylamin - Pyrol, pyrolidin - Terpenoid - Indol-alkylamin - Tropan - Steroid - Tropolon - Indol, indolin - Purin - Quinolin, isosquinolin - Peptid - Pyridin, piperidin ALC THỰC Khung: + Piridin: (Nicotin; Arecolin) + Piperidin: (Lobelin) + Tropan: chủ yếu họ cà: Atropin, Scopolamin, Cocaine + Quinolin: Quinin, Quinidin, chủ yếu canh ki na + Isoquinolin: papaverine, nuciferin, morphine, codeine, berberin palmatin (hồng liên, vàng đắng), Rotudin (bình vôi) + Indol: Brucin strychnin (mã tiền), Reserpin (Ba gạt) ALC Proto Khung + Phenyl-alkylamin: Capsaicin, ephedrine + Tropolon: Colchicin ALC Pseudo Khung + Purin: Theobromin, Cafein, Theophyllin + Steroid: Connessin (mộc hoa trắng), solanidin + Terpenoid: aconitin (ô đầu), taxol, mesaconin + Peptid: ergotamine, ergocryptinin Đặc điểm chung cấu trúc Cấu Trúc hóa học - Loại vịng: • Thường: Dị vịng N • Protoalkaloid: Vịng Cacbon - Số vịng: • Thường: 2-5 vịng • Protoalkaloid: vịng - Số N: • Thường: 1-2 Nitơ • Đôi khi: > Nitơ (dạng dimer) - Bậc N • Thường: Bậc III (=N-), Bậc II (-N-) • Một số: Bậc IV, N-oxyd (N =>O) Tính chất vật lý - Độ âm điện: • Alkaloid phân cực Alcol - Điểm sôi: thấp Alcol tương ứng III • Alcol > Alc > Alc > Alc > ether - Tính kiềm: Alc có tính kiềm yếu Amoniac • NH4OH > alc IV > alc I > alc II > alc III (- NR2) pKa = 9,3 tính kiềm yếu BÀI TÍNH CHẤT ALKALOID I Lý Tính Thể chất: + Chứa Oxy thường trạng thái rắn ngoại trừ (arecolin, pilocarpidin) - Có nhiệt độ nóng chảy rõ ràng, kết tinh - Thăng hoa: rắn => khí (cafein, ephedrine), lỏng bay (nicotin) + Khơng có Oxy tồn trạng thái lỏng (nicotin) ngoại trừ (conessin {mộc hoa trắng}, Sempervirin {cây ngón}) - Có thể bay được, cất kéo - Alkaloid thường khơng màu khơng mùi, có vị đắng Ngoại trừ: Berberin, Palmatin có màu vàng Nicotin có mùi Piperin (Hồ tiêu) capsaisin (Ớt) vị cay, aconitin không đắng Năng xuất quay cực - Thường có khả quay cực: thường dạng tả tuyền (L) (tồn cây) tổng hợp chuyển dạng hữu tuyền (đã tổng hợp) Dạng tả tuyền có hoạt tính mạnh dạng hữu tuyền - Một số TH dạng hữu tuyền (D) + Tubocurarin, pilocarpine, cinchonin - Dạng L > D trừ (D-tubocurarin > L-tubocurarin) Trạng Thái Tự Nhiên Dạng tồn tự nhiên: Dạng muối, Dạng Base thường dạng bậc Tính chất Alkaloid dạng Base Alkaloid dạng muối Độ tan - Kém tan nước - Tan DM Phân cực - Kém tan DM phân cực - Dễ tan nước Một số ngoại lệ độ tan Dạng Base: - Cafein, coniin, colchicine, nicotin, codein, ephedrine, pilocarpine tan nước - Morphine, Strychnin: tan ether - Alkaloid phenol (Morphine, cephaelin): tan dung dịch kiềm Một số ngoại lệ độ tan Dạng muối: - Berberin (bậc 4): dạng tan nước - Berberin sunfat tan nước Berberin clorid berberin nitrat tan nước - Lobelin clorid, Reserpin clorid, apoatropin clorid: tan CHCl3 Hố tính *Tính kiềm đặc trưng Alkaloid*: (ngoại trừ Morphine có tính acid yếu, colchicine có tính trung tính Alkaloid có tính Base yếu ngoại trừ Nicotin (Alkaloid có Nitơ) Alkaloid bậc > NH4OH (về độ kiềm) tính base mạnh [alc.H]+.X¯ + OH¯ ➔ [alc] + (X¯/H2O) OH¯ > Alc (về tính kiềm) Kiềm mạnh: Ephedrin, quinin, nicotin, berberin base > NH4OH Nên cần dung kiềm mạnh NaOH để ĐỊNH TÍNH CHIẾT XUẤT CƠ BẢN: II Chiết xuất bản: Dung môi - Dược liệu Alc muối Dịch chiết nước, cồn Alc muối Nước acid Dịch chiết NH4OH Alc base CHCl3 Cồn acid Alc muối NH4OH Alc Base Nước acid Alc muối Dừng Nước Acid: Alc dạng Base tác dụng vs acid chuyển dạng muối tan nước Trong acid có vai trị tạo muối cịn nước dung mơi phân cực Định tính: a) Phản ứng với thuốc thử chung (quan sát tủa) - Cơ chế thuốc thử chung Alkaloid tạo tủa vơ định hình với Iot + Một ba thuốc thử dương tính kết luận có Alkaloid độ nhậy thuốc thử khác với loại Alkaloid Bouchardat: nâu đỏ Dragendorff: đỏ cam Valse-Mayer: trắng => vàng ngà Marmé: trắng => vàng (tinh thể) Bertrand: Trắng => trắng ngà Tannin: trắng Lưu ý xét phản ứng màu: phải có tủa tính dương tính • Giải độc Alkaloid: dung tannin, Lugol tạo tủa vs Alkaloid Tủa tinh thể: acid picric (Hager), acid styphnic, acid picrolonic (vàng => đỏ cam) Ví dụ độ nhậy Valse-Mayer Quinin: ppm Morphine 400 ppm Cafein Bouchardat Dragendorff 100 ppm 1700 ppm - Độ nhậy thay đổi tuỳ loại thuốc thử tuỳ loại Alkaloid - Thuốc thử chung Alkaloid bền môi trường kiềm (mt thử: trung tính với acid nhẹ) => Định tính dịch chiết nước-acid - Tủa tan lại (nên nhỏ ít thơi) + Thuốc thử thừa, MeOH, EtOH: Marmé + Thuốc thử thừa, MeOH, EtOH, AcOH: Valse-Mayer MeOH, EtOH, AcOH, NH4OH: Tannin - Khi tủa có thành phần ổn định Định lượng phương pháp gián tiếp: Bertrand b) Thuốc thử đặc hiệu: Alkaloid Erdmann Frohde Mandelin Merke Marquí Wasicky Cacothelin Lưu ý: (Conessin) (Morphine) (Strychnin) (Codein) (Morphine) (Indol) (Brucin) Vàng => Xanh => Lục Tím Tím xanh => đỏ Xanh Ngọc Tím đỏ Xanh tím => đỏ Đỏ máu - Các thuốc thử đặc hiệu hình thành nên phản ứng oxy hố khử, để tạo nên phản ứng oxy hoá khử cần có tác nhân acid đặc => thực môi trường khan => Dùng dịch chiết CHCl3 (vì CHCl3 dung mơi phân cực dễ bay hơi) - Màu thường bền nên cần thực nhanh - Trường hợp đặc biệt là: Berberin quinin lại dùng dịch chiết nước acid làm phản ứng đặc hiệu Lưu ý Alkaloid tồn dạng muối sunfat cho phản ứng đặc hiệu + Phản ứng Oxy-Berberin: Berberin sunfat (loãng) oxy-berberin (đỏ) màu đỏ Javel (mới) Javel thừa Berberin Alkaloid (canh ki na) chiết với H2SO4 loãng, test huỳnh quang, thêm Br2 => huỳnh quang NH3 thừa màu xanh ngọc Thaleoquinin, màu đỏ Erythroquinin Một số phản ứng màu đặc hiệu số loại Alkaloid Alkaloid P/ứ màu Tropan Vitali-Morin Strychnin Sulfo-chromic Brucin Cacothelin Cafein Murexid Berberin Oxyberberin Quinin Thaleoquinin Quinin Erythroquinin Quinin Huỳnh quang Định tính Alkaloid: - Vi hố mơ: làm phản ứng hố học mơ thực vật (làm tiêu bản) - Alkaloid protein cho tủa với thuốc thử Bouchardat - Alkaloid tan/cồn tartric; protein không tan /cồn tartric c) Sơ đồ vi hố mơ Tiêu Thuốc thử Bouchardat Có protein Alkaloid Cồn Tartric (hồ tan Alkaloid) khơng tan Protein nhằm loại protein Có tủa nâu Khơng có tủa (-) Rửa cồn Tartric Thuốc thử Bouchardat Khơng có Alkaloid Có tủa (+) Có Alkaloid Khơng tủa (-) Khơng có Alkaloid Định tính Alkaloid làm - Dược liệu có chứa Alkaloid khơng (1) - Trong dược liệu có Alkaloid x, y, z hay khơng (2) - Có phải dược liệu A, B, C hay không (3) d) Nguyên tắc chung Vi hố mơ (1) Phản ứng hố học (1; 2) Sắc ký (1;2;3) Thuốc thử tủa vơ định hình bền/kiềm (mt thử; trung tính đến acid nhẹ) Thuốc thử đặc hiệu: có tính oxy-hố mạnh (Acid sulfuric đđ, acid nitric đđ, Sulfochromic) Môi trường thực môi trường khan (do acid có tính háo nước) => sử dụng dịch chiết CHCl3 - Màu thường bền (quan sát nhanh), thay đổi tuỳ theo điều kiện phản ứng (to, pH độ tinh khiết mẫu Alkaloid) • Phản ứng Vitalin- Morin: số phản ứng Alkaloid có khung Tropan khơng cho phản ứng Vitalin- Morin chất định tính acid Tropic e) Sắc kí lớp mỏng: Lưu ý: - Chỉ dùng cho dịch chiết CHCl3 (Alc base) bảng mỏng sắc kí kị nước - Phát vết: UV/ thuốc thử Dragendorff - Pha động: dung môi tthường thêm kiềm - Pha tĩnh: Bản mỏng Silica-gel F254 (pha thường) RP-18 (pha đảo) - Để hạn chế tượng kéo vết người ta thêm kiềm vào dung môi để hạn chế kéo vết (vì dung mơi có mơi trường trung tính dẫn đến chạy sắc ký lên dẫn đến Alc base phần chuyển thành dạng muối) nên mục đích cho bazo vào pha động tránh chuyển dạng chạy sắc kí) III ĐỊNH LƯỢNG: Phương pháp cân: - Áp dụng khi: hàm lượng chất cao + Không định lượng pp acid-base kiềm yếu + Alkaloid chưa rõ cấu trúc hoá học (chưa đo quang được) + Hỗn hợp phức tạp nhiều Alkaloid (sắc kí lỏng khó tách pic) + Muốn đánh giá sơ dược liệu chứa Alkaloid - Mức độ tin cậy + Kém xác (% alkaloid ít; tạp thừa) + Khắc phục phương pháp cân gián tiếp Quy trình cân: • Cân trực tiếp Chiết Alc acid base => loại tạp (tannin, chất béo….) => đổi pH nhiều lần (chuyển dạng) => Alc base => cân trực tiếp, gián tiếp • Cân gián tiếp Cafein, nicotin Bertrand.(alc)4 Palc (cân gián tiếp) Bertrand Khối lượng Alc = Lượng Bertrand.(alc)4 – Lượng Bertrand Phương pháp thể tích ( Acid-base) - Áp dụng khi: + Alc có tính kiềm mạnh: CĐ trực tiếp + Alc có tính kiềm yếu: CĐ gián tiếp + Alc có tính kiềm yếu (Cafein, Colchicin): CĐ môi trường khan (ACOH: acid acetic băng, acid perchlorid, tím tinh thể) thị methyl đỏ/cam - Chuẩn độ trực tiếp - Chuẩn độ gián tiếp (chuẩn độ thừa) Alkaloid base Acid thừa (HCl, H2SO4 lỗng) Kiềm Trường hợp Alkaloid có tính kiềm yếu cần áp dụng phương pháp cân phương pháp thể tích mơi trường khan Phương pháp đo quang - Áp dụng định luật Lambert-beer - Dựa sở nồng độ hoạt chất tỉ lệ thuận với độ hấp thụ quang Sắc kí lỏng hiệu cao - Dưa sở diện tích pic tỉ lệ thuận hoạt chất Sắc kí lớp mỏng: - Xếp vào bán định lượng độ xác thấp Nên mục đích xác định lượng chất nhiều hay IV CHIẾT XUẤT: MỘT SỐ LƯU Ý CƠ BẢN: - Bước chiết xuất làm ẩm dược liệu :Thường Alkaloid tồn dang muối kết hợp với phức tồn bền nằm sâu tế bào nên dung mơi khó vào, nên làm ẩm giúp dược liệu trương nở nên dung môi dễ vào - Dung mơi làm ẩm dung mơi chiết - Một số loại tạp: + Tạp phân cực: đường, acid hữu cơ, gôm, chất nhầy, pectin, tinh bột (ở rễ, quả) + Tạp phân cực: chất béo, tinh dầu, sáp, nhựa, diệp lục, pholyphenol (hạt, lá) Lựa chọn phương pháp: Thân rễ, rễ củ, tinh bột nhiều: pp dung môi hữu môi trường kiềm để hạn chế kéo theo tạp phân cực Lá, hạt: dùng pp nước acid cồn acid để hạn chế kéo theo tạp phân cực kéo theo Phương pháp (Chiết cồn nước) - Bước1: Do MeOH dung mơi đa nên chiết kiệt có dược liệu (tạp phân cực, Alc, phân cực) - Mục đích dùng quay MeOH dung mơi đa hồ tan DCM dẫn đến tạo dung dịch đồng Bột dược liệu MeOH Tạp pc, pc Alc muối tự nhiên Alc base Làm ẩm Dịch chiết MeOH Tạp pc, pc, Alc muối tự nhiên SKC Silica-gel Cắn khô, Alc base Cô quay Loại bỏ MeOH Tạp pc, pc, Alc muối tự nhiên Cắn MeOH HCl 2% Tạp PC Loại bỏ tủa Dịch lọc Alc muối (clorua) Tạp pc, Alc clorua Cô quay Thu DCM Alc base/ DCM Lọc qua MgSO4 Loại nước Kiềm hoá Alc base/ DCM Chiết = DCM Phương pháp Cồn- Acid, Nước – Acid: a) Phương pháp cồn acid - Do cồn Dung Môi đa nên dịch chiết cồn acid đủ tạp PC KPC, Alc muối - Vì cần trung hồ pH 5-6: TH mơi trng trung tính, với dịch chiết nước acid cô dung dịch acid trở nên đậm đặc làm phá vỡ hoạt chất (do bị oxy hoá – khử) dịch chiết - Hạn chế sử dụng pp Nước-Acid nước kéo theo nhiều tạp phân cực có độ nhớt cao chiết hiệu suất thấp khó ngấm vào dược liệu khó xử lí phía sau Alc.muối/dược liệu Alc muối, tạp PC, tạp KPC Làm ẩm H2SO4 2-5%, HCl, AcOH Chiết = cồn acid Dịch chiết cồn acid Alc muối, tạp PC, tạp KPC Trung hồ pH 5-6 Cơ thu hồi (+ nước acid) Alc.muối mới/dịch acid Lắc với Et2O (C2H5OC2H5) Là DM KPC Bỏ tạp tan/Et2O Alc.muối mới/dịch acid Chuyển dạng Alc.muối => Alc.Base +Kiềm Tạp KPC Alc muối, tạp PC Lắc với d.m hữu Alc.Base/DMHC Cô thu hồi Alc muối, tạp PC, tạp KPC d.môi hữu Cắn Alcaloid base Lọc tủa loại Tạp PC Lưu ý chiết Alcaloid muối (Alc-tannin): - Nếu cho dư acid tạo muối tan - Vơi phức hợp Alcaloid-tannin (bền), acid hưu không dùng phải dùng acid vơ nóng (H2SO4,HCl nóng) tạo Alc.sunfat, Alc.HCl - Lựa chọn kiềm (Alcaloid-tannin) lựa chọn kiềm mạnh NaOH Chiết Alcaloid base (sử dụng dung môi hữu cơ/ mt kiềm) - Làm ẩm kiềm có ý nghĩa trương nở dược liệu chuyển Alcaloid từ dạng muối dạng base Tạp PC Alc.base, tạp KPC (Alc.base), tạp PC, KPC Làm ẩm Bằng kiềm Dmhcơ/kiềm Dược liệu Lọc, loại Dmhcơ/kiềm Tạp PC Alc base/dmhcơ Mục đích: chiết Lắc với Acid lỗng Mục đích: chiết Lọc, loại Tạp KPC Alc base/dmhcơ Dmhcơ/kiềm Mục đích Chuyển dạng Alc.muối/nước Cơ giảm áp Tinh chế Cắn Alcaloid base Lắc với Từng Alcaloid base riêng Phân lập Acid loãng Alc.muối/nước Kết tinh Phân lập Từng Alcaloid muối riêng tạp KPC V ƯU VÀ NHƯỢC ĐIỂM CỦA PHƯƠNG PHÁP CHIẾT: Phương pháp dung môi hữu cơ/mt kiềm: Ưu điểm Nhược điểm - Áp dụng phổ biến hầu hết Alcaloid - Tốn nhiều dung môi, dung môi độc hại - Có tính chọn lọc, alkaloid base thu - Khó áp dụng quy mơ lớn (thiết bị, thời gian) - Rất thích hợp cho kiểm nghiệm - Bã (ngấm dung môi hữu cơ) sau chiết gây nhiễm mơi trường Phương pháp Cồn-Acid: Ưu điểm Nhược điểm - Dung mơi độc hại hơn, giá thành rẻ tiền nhiều - Áp dụng quy mô lớn, quy mô công nghiệp (tránh hỏng thiết bị) - Bã (ngấm cồn) sau chiết gây nhiễm mơi trường - Kém chọn lọc (vì cồn dung mơi đa năng), dịch chiết thu kéo theo nhiều tạp - Khơng thích hợp cho kiểm nghiệm (mất thời gian nhiều) - Khó áp dụng phổ biến với hầu hết Alcaloid Lưu ý chiết dạng base - Lựa chọn kiềm cho phù hợp + Tránh dùng kiềm mạnh từ đầu làm biến đổi cấu trúc Alcaloid có tính kiềm yếu + Kiềm ảnh hưởng đến hoạt chất (phá vỡ cấu trúc, thuỷ phân, racemic hoá) - Lựa chọn dung môi + Nếu dùng dãy dung mơi có độ phân cực tăng dần, chiết riẻng nhóm Alcaloid có độ phân cực tang dần + Dung mơi phá huỷ/biến đổi alkaloid base - Loại bỏ chất béo (tránh phản ứng với kiềm) + Phản ứng xà phịng hố Xử lí chiết DMHCơ/ kiềm với dược liệu chứa chất béo + Vd: Dược liệu chứa chất béo gặp dung môi kiềm gây phản ứng xà phịng hố dẫn đến khó chiết xuất ngấm ngược vào dược liệu Cần loại chất béo cần cần loại dung mơi (hữu cơ) phân cực trước chiết để loại tạp phân cực mà không ảnh hưởng đến Alc.muối dược liệu 5 Quy mô (3 cấp độ) chiết xuất để lựa chọn phương pháp: a) Quy mơ phịng thí nghiệm: - Mục đích: định tính, định lượng, - Yêu cầu: thời gian nhanh - Lựa chọn phương pháp: nước-acid dung môi hữu phân cực/ môi trường kiềm b) Quy mơ cơng nghiệp: - Mục đích: thu lấy dịch chiết - Yêu cầu: thu Alcaloid tinh khiết, dung mơi oan tồn than thiện - Lựa chọn phương pháp: Cồn – Acid c) Quy mô đời sống - Mục đích: thu lấy dịch chiết đem dùng - Yêu cầu: không cao thu hoạt chất - Lựa chọn phương pháp: Cồn – Nước ( đơn giản đem dược liệu ngâm rượu) BÀI TRƯỜNG HỢP ĐẶC BIỆT I Morphine Dạng tồn + Tồn cây: Morphine meconat + MT Kiềm mạnh (NaOH, Ca(OH)2):Muối phenolat + MT Kiềm yếu NH4OH: Morphine base + MT Acid: tồn dạng muối cloric Chiết xuất: pH 8-9 do: (kiềm mạnh) + codein Morphinat Calci 2a) + Vôi bột (CaO) 2b) Lọc bỏ tủa (Alc base) 3a) Đun nhẹ; NH4Cl 3b) Để nguội, lọc thu tủa Ca(OH)2+NH4Cl => NH4OH (kiềm nhẹ) Morphinat+NH4OH => morphine base Morphinat base thô (tủa) Pứ1: CaO +H2O => Ca(OH)2 (Kiềm) 4a) + Vôi bột 4b) HCl + C*; Lọc nóng Pứ2: Ca(OH)2 + Morphine meconat Dịch chiết Alc muối + Morphine meconat 1a) +135 lít nước sôi 1b) Khấy kỹ, lọc Nhựa Opi (15kg) Morphine.HCl (tan) Để nguội Morphine.HCl kết tinh II Berberin: Dạng tồn - Dạng Base dạng muối tan dung môi phân cực Chiết xuất Bột vàng đắng H2SO4 2% Dịch B2SO4 Ca(OH)2 pH 11 - Lọc bỏ tủa Alc.sunfat, palmatin Alc- base Dịch B+OH- HCl pH NaCl Berberin cloric dạng muối tan nước Nên cho HCl vô tạo tủa Tủa B+Cl- thô (tủa) III Colchicin (tỏi độc) Dạng tồn tại: - Có tính trung tính Độ tan - Tan dung môi hữu cơ, cồn, nước => đa Chiết xuất: - Cơ chế: dựa vào độ tan Colchicin Bột hạt Tỏi Độc Cồn 95% Cắn Cồn Hồ Na2SO4 có tính trung tính giữ Colchicin dạng trung tính Colchicin, tạp PC, tạp KPC Lắc với Ether =>Loại tạp KPC Dịch Na2SO4 20% Lắc với CHCl3, Vì Colchicin trung tính tan dc Dm KPC Loại Tủa ko tan, Tạp PC Thu dịch CHCl3 Cô Cắn CHCl3 IV Loại tạp sơ - Loại tạp than hoạt: loại tạp phân cực (chlorophyll), sử dụng lượng phù hợp hấp thụ Alcaloid - Loại tạp nước: dựa độ tan Chlorophyll tan cồn từ 75% trở lên, không tan cồn 50% trở xuống Chiết cồn xong cho nước vào giảm độ cồn Chlorohyll tủa lọc loại - Loại tạp celite: loại tạp phân cực - Chì acetat: loại tạp phân cực, tủa với Morphine => loại chì thừa Na2SO4 BÀI PHÂN LẬP ALCALOID Phân lập dựa vào độ tan kết tinh - Cơ chế: dựa vào khác độ tan kết tinh - Cô đặc dẫn đến Alcaloid bị bão hồ kết tinh xuống - Tạo dạng muối không tan nước => lắng xuống - Vd: (Conesscin, Berberin, Strychnin, Morphine, Colchicin) Phân lập dựa vào tính kiềm - Độ kiềm khác Alc tủa khác - Không thu dược Alcaloid tinh khiết mà thu dược nhóm Alcaloid Phân lập dựa vào độ phân cực - Dãy dung mơi có độ phân cực từ thấp đến cao - N – hexan ➔ CHCl3 ➔ EtOAc ➔ N - butanol - Không thu dược Alcaloid tinh khiết mà thu dược nhóm Alcaloid Phân lập cách tạo dẫn chất Phân lập sắc ký