Alkaloid Thực Hành Dược liệu 2

Ôn tập ALKALOID Dược Liệu 2 TH chuyên đề Đại Học, một số câu hỏi và phần vi học: cấu tử bột dược liệu .........................................................................................................................................................

Alkaloid Định lượng caffein Caffein % = x 250 x x Vd: A = 0.788 Phương trình tuyến tính có : y = 0,0524x + 0,0146   X = = Ct Thay x vào Ct tính Trong trình chiết xuất alkaloid, việc chuyển dạng qua lại alkaloid muối base nhằm mục đích gì?  Lợi dụng tính chất khác độ tan alk MT acid kiềm, loại bỏ đc tạp phân cực hay phân cực, nhằm mục đích tinh khiết hố alkaloid  Vd chiết alk dạng muối = nước acid lúc vừa chiết alk dạng muối vừa kèm theo tạp pc, tạp pc ko có vào dd nên loại bỏ dc tạp pc Sau tiếp tục chiết với alk dạng base = DMHC mt kiềm, có alk qua cịn tạp pc ko thể tan DMHC nên loại dc tạp pc Trong môi trường pH = 10, alk tồn dạng Base Phương pháp chiết alkaloid cà độc dược:  Kiềm hoá chiết = DMHC, ko sd kiềm mạnh  KHÔNG chiết = nước acid chiết = nước acid chúng dùng H2SO4 đun lên phá huỷ cấu trúc atropin scopolamin Vì cấu trúc có lk ester nên dễ bị thuỷ phân môi trường acid kiềm mạnh kết hợp vs nhiệt độ Tác nhân kiềm hoá chiết xuất Cà độc dược?  Na2CO3, tính kiềm mạnh Atropin Scopolamin mạnh để làm thuỷ phân cấu trúc ester atropin scopolamin  Khi chiết xuất Cà độc dược, phải tránh kiềm mạnh acid mạnh nhiệt độ tránh tượng đun lên bị phân huỷ Cắn khô alkaloid + aceton + KOH 5% MeOH phản ứng  Vitali – Morin ( định tính Atropin Scopolamin ) Cơ chế phản ứng định tính Vitali – Morin? Oxy hố khử  Trong alk thuốc thử chung chế tạo phức với muối KL -> quan sát tủa -> nhạy , thuốc thử đặc hiệu hầu hết pư oxh khử cho màu -> quan sát màu -> yêu cầu hàm lượng cao phải tinh khiết xảy Phương pháp chiết alkaloid Mã tiền?  Chiết = nước acid  Chiết = DMHC mt kiềm alk ko ảnh hưởng có nhược điểm là: chiết Mã tiền chiết hạt mà hạt có dầu béo nên chiết alk dạng base = DMHC chiết = DMHC hồ tan dầu béo nên hỗn hợp thu có dầu béo, tránh tạp dầu béo = cách chiết alk dạng muối = nước acid, tránh dầu béo lại gặp chất nhày ( hạt ) dịch bị nhớt nên tiến hành pha lỗng dịch Tác dụng acid nitric đậm đặc với hỗn hợp Alkaloid toàn phần mã tiền phản ứng của:  Brucin phản ứng Cacothelin + HNO3 đậm đặc có màu đỏ máu  Strychnin phản ứng Sulfo – chromic + H2SO4 đậm đặc + K2Cr2O7 vệt màu cam chuyển sang tím Định tính Strychnin hạt Mã tiền, kiềm hoá … Và chiết dược liệu … bằng?  Chiết alk dạng muối = nước acid ( chiết phận hạt ) sau kiềm hố = NH3 hay NH4OH tính kiềm yếu, lắc với CHCl3 để thu alk dạng base 10 Khi dùng đũa thuỷ tinh kéo hạt tinh thể K2Cr2O7 chén sứ thấy có vệt tím biến thành nâu đen Thử nghiệm chứng tỏ có alkaloid nào?  Định tính Strychnin 11 Khi thêm vào cắn chén sứ giọt HNO3, – 5ml aceton, giọt KOH/MeOH xuất màu tím Thử nghiệm chứng tỏ có alkaloid nào?  Pư vitali – morin chứng tỏ có atropin scopolamin 12 Phương pháp chiết alkaloid Trà?  Chiết = nc sơi sau kiềm hố = kiềm mạnh lúc chiết alk dạng tanin  Chiết = pp khác kiềm hố chiết = DMHC tiến hành kiềm = kiềm mạnh chiết = CHCl3 ; chiết = nc acid sulfuric kiềm hoá = NH3 caffein có tính kiềm yếu, lk với tanin sử dụng kiềm mạnh 13 Chiết caffein trà nước sôi tiến hành kiềm hoá … để thu caffein dạng base  Chiết = nc sơi sau kiềm hố = kiềm mạnh lúc chiết alk dạng tanin 14 Dược liệu + dd H2SO4 0,5%, - dịch chiết + nước Javel, dung dịch có màu đỏ máu Kết luận có?  Thuốc thử đặc hiệu Berberin tiến hành với Berberin dạng muối  Dung môi chiết H2SO4 0.5% acid lỗng để thu đc dạng muối BaSO4 có độ tan 33% 15 Trong dược liệu thực hành, thuốc thử chung tiến hành với alkaloid dạng nào? Thuốc thử đặc hiệu tiến hành với alkaloid dạng nào?  Tt chung : dạng muối  Tt đặc hiệu : dạng base ( trừ Berberin dạng muối ) 16  Bột dược liệu (1) + H2SO4 2%, t độ Dịch A (2) Dịch B + H2SO4 2% Nhược điểm phương pháp là: có khả thuỷ phân alkaloid có liên kết ester Dịch (A) , (B)Dịch , (C)C gì? Dịch A dịch nước acid chứa alk dạng muối Dịch B CHCl3 chứa alk dạng base (3)  17   Kiềm hoá, + CHCl3, lắc phân bố Dịch C acid ( tinh khiết ) 18 Ý nghĩa bước (1)?  Hạn chế tạp phân cực, ngc lại thu tạp pc nên bước tiến hành bước loại tạp pc 19 Nhược điểm phương pháp này:  Bột dược liệu Dịch CHCl3 (A) Dịch acid (B) Dịch CHCl3 (C) (1) Kiềm hoá, + CHCl3 (2) H2SO4 2% (3) Kiềm hoá (pH = 10), + CHCl3 Không dùng chiết dược liệu tươi dược liệu tươi có nước nên ko chiết = DMHC  Quy trình phụ thuộc nhiều vào kĩ thuật kiềm hố, kiềm hố q ướt q khơ hàm lượng alk  Chiết = DMHC hiệu chiết = acid mà chiết = DMHC thực quy mô nhỏ, tốn tiền mà cịn gây nhiễm mơi trường 20 Thao tác lắc phân bố, bình lắng gạn có lớp, lớp lúc lớp nước acid lớp lớp CHCl3  Nếu cho acid sulfuric vào lắc lên lát lấy lớp , lớp CHCl3 21 Thao tác lấy lớp qua Natri sunfat khan  Natri sunfat khan: giữ nước, hút nước đảm bảo cho dịch CHCl3 khan nước lát chấm sắc ký làm tt đặc hiệu hiệu hơn, tốt  ĐỊNH LƯỢNG CAFFEIN BẰNG PP UV VIS Bước 1: Xác định bước sóng hấp thu cực đại Xác định bước sóng hấp thu cực đại dung dịch cafein: dùng bình chuẩn (C2 → C10), đo chế độ spectrum để xác định bước sóng hấp thu cực đại (λmax) Bước sóng hấp thu cực đại mặc định 275 nm Bước 2: Xây dựng đường tuyến tính Cân xác khoảng 20 mg caffein chuẩn cho vào bình định mức 100 ml Thêm khoảng 30 ml nước cất, siêu âm đến tan hết cafein Thêm nước cất đến vạch, lắc dung dịch gốc A (nồng độ khoảng 200 µg/ml) Pha dung dịch C2, C4, C6, C8,C10 Bước 3: Chiết xuất định lượng phương pháp suy từ đường tuyến tính Chiết xuất Cân xác 1g bột cà phê (Arabica/ Robusta/ Espresso) cho vào bình nón 250 ml Thêm 50 ml nước sôi, cách thủy 10 phút Lọc qua giấy lọc cho vào cốc có mỏ 250ml Chiết thêm lần nữa, gộp chung với dịch chiết lần chiết làm lạnh tủ lạnh, để qua đêm Sau đó, lọc dịch chiết lạnh qua giấy lọc vào bình định mức 250 ml Để nguội, thêm nước cất đến vạch, lắc Lấy xác ml (bằng buret) dung dịch bình định mức 250 ml cho vào bình định mức 100 ml, thêm nước cất đến vạch, lắc Định lượng Đo độ hấp thu bước sóng 275 nm At Thay vào phương trình y = ax + b để tìm nồng độ mẫu thử Ct (ppm) KIỂM NGHIỆM VI HỌC: • Tinh bột hình đa giác: tinh bột bắp, tinh bột gạo   Bắp: Hình đa giác kích thước nhỏ, hạt tinh bột kết dính thành mảng, khơng thấy tễ Gạo: Hình đa giác, hạt tinh bột rời nhau, thấy nhiều tễ hình     • Tinh bột hình chỏm ( hình chng ) : tinh bột sắn dây, tinh bột khoai mì Tinh bột sắn dây: Hình chỏm cầu lõm, chiết quang, không thấy tễ Tinh bột Khoai mì :Hình chỏm cầu lồi, khơng chiết quang, thấy rõ tễ hình • Tinh bột hình dĩa: tinh bột Ý dĩ, tinh bột lúa mì Tinh bột Lúa mì : Hạt tinh bột hình dĩa to xen kẽ hình dĩa nhỏ, có rìa sứt me Tinh bột Ý dĩ: Mép thường dợn sóng, tễ hình chữ Y vạch to chia hạt tinh bột    • Tinh bột hình trừng: tinh bột khoai tây, tinh bột đậu xanh, hoài sơn Tinh bột Khoai tây: Hình trứng đầu to, đầu nhỏ, lộ rõ vân tăng trưởng lắc nhẹốc thứ cấp Tinh bột Đậu xanh: Hình trứng, tễ hình xương cá đặc trưng Tinh bột Hồi sơn: Hình trứng, khơng thấy tễ Nếu có tễ dài khơng phân nhánh, dọc theo trục dài hạt NHẬN BIẾT DƯỢC LIỆU = KÍNH HIỂN VI Bột thường có màu xanh lục tới nâu Các cấu tử thường thấy • biểu bì mang khí khổng, • lơng che chở, lơng tiết, tinh thể calci oxalat, mạch gỗ,… ▪ Bột vỏ thân, vỏ rễ thường có màu vàng nâu tới nâu Các cấu tử thường thấy là: mảnh bần, mô mềm, loại sợi, tinh thể calci oxalat hay calci carbonat, mơ cứng,… ▪ Rễ củ, thân ngầm phình thành củ cần ý tới đặc điểm cấu tạo hạt tinh bột ▪ Hoa cần ý tới cấu tạo hình dạng hạt phấn, biểu bì loại lông che chở, lông tiết bao hoa         Mã tiền: Đám tế bào vỏ hạt (*) Mảnh nội nhũ (*) Lông che chở đơn bào Lá cà độc dược: Lông che chở đa bào màng lấm thường có eo thắt (*) Mảnh biểu bì mang lỗ khí Tinh thể calci oxalat hình cầu gai Lơng tiết đầu đa bào Mảnh mạch vạch Trà ( chè ):      Thể cứng (*) Tinh thể canxi oxalat hình cầu gai Mảnh biểu bì mang lỗ khí Mạch vạch Lơng che chở đơn bào Vàng đắng:          Tế bào đám tế bào mô cứng (*)  Mảnh bần  Mạch điểm  Mảnh mô mềm  Sợi có vách dày Trúc đào:       Mảnh buồng ẩn khổng (*) Tinh thể calci oxalat hình khối Lơng che chở đa bào Tế bào lỗ khí Mạch vạch Tinh thể calci oxalat hình cầu gai Hoa hoè:     Lông che chở đơn bào Mạch xoắn Đại hoàng: Hạt phấn có ba lỗ nảy mầm (*) Lơng che chở đa bào           Tinh thể Calci oxalat hình cầu gai (*) Mảnh bần Sợi Mạch mạng Mạch vạch Mảnh mô mềm THUỐC GIỊI Lơng che chở móc câu* Bào thạch Mảnh biểu bì mang lỗ khí Lơng che chở đơn bào lấm gai nhỏ * MUỒNG TRÂU:           Lông che chở đơn bào ngắn, đầu nhọn Tinh thể Calci oxalat hình khơi Mảnh biểu bì phiến mang lỗ khí cutin lồi * Cutin lồi * 10 NGŨ BỘI TỬ Lông che chở đa bào * Mảnh mạch xoắn Mảnh mạch vạch Hạt tinh bột Mảnh mạch điểm Khối nhựa màu vàng ... thu đc dạng muối BaSO4 có độ tan 33% 15 Trong dược liệu thực hành, thuốc thử chung tiến hành với alkaloid dạng nào? Thuốc thử đặc hiệu tiến hành với alkaloid dạng nào?  Tt chung : dạng muối ... dạng base ( trừ Berberin dạng muối ) 16  Bột dược liệu (1) + H2SO4 2% , t độ Dịch A (2) Dịch B + H2SO4 2% Nhược điểm phương pháp là: có khả thuỷ phân alkaloid có liên kết ester Dịch (A) , (B)Dịch... thu tạp pc nên bước tiến hành bước loại tạp pc 19 Nhược điểm phương pháp này:  Bột dược liệu Dịch CHCl3 (A) Dịch acid (B) Dịch CHCl3 (C) (1) Kiềm hoá, + CHCl3 (2) H2SO4 2% (3) Kiềm hoá (pH = 10),