Nghiên cứu sản xuất và sử dụng hỗn hợp chế phẩm sinh học bảo vệ thực vật trừ sâu bệnh cây trồng lâm nghiệp

trong đó phải hình thành được một nên nông nghiệp sạch và bên vững như Nghị quyết Đại hội VI, VI của Đảng vộng sản Việt Nam để Để tài KHCNĐ2-07B được Bộ khoa học công nghệ và môi trườn

Trang 1

MỘT SỐ THAO TÁC CƠ BẢN ĐỌC TỒN VĂN KQNC ©

Onter, phim miii tin trén bin phim hode cite biéu tugng snuấi tên teén thanh cbag on dé lik trang:

Tools View Window

IEN),

Trang 2

BO KHOA HOC CONG NGHE VA MOI TRUGNG

* CHƯƠNG FRÌNH KHOA BOC CONG NGHE QUỐC GIA-KHCN-02

EÁO cho

TỔNG HẾT 9 NĂM 1999-2000 ĐỀ TÀI

"NGHIÊN CỨU SẲN XUẤT VÀ SỬ DỤNG HON HGP GHẾ PHẨM SINH HOC BAO và THUC VAT TRU SAU, BENE

HAI CAY TRÔNG NÔNG-LÂM NGHIỆP" MA 86: KHCN-02-078

S Nguyễn Văn Tuất

Trang 3

LỜI GIỚI THIỆU

` Nghiên cáu sẵn xuất tả sử dụng hỗn hợp chế phẩm sinh học Bán vệ thực vái Irừ sâu bệnh hại cảy trồng nông-lảm nghiệp”, mã số: KHCN02- 07B thuộc chương trình KHCN-02 “ Công nghề sinh hoc phục vụ phát triển nông-lám ngư nghiệp bến vững, bảo vệ môi trường và sức khoế con người” được tiến hành trong 2 năm 1999-2000

Để tài KHCN03-07H là quá trình tiếp nổi của giai đoạn 1996-1998 và các

nấm trước đây nghiên cứu về các chế phẩm sinh học Bảo vệ thực vật trong điều

kiệu cả nước tiến hành sự nghiệp cơng ng iếp hố hiện đại hoá trong đó phải hình thành được một nên nông nghiệp sạch và bên vững như Nghị quyết Đại hội VI,

VI của Đảng vộng sản Việt Nam để

Để tài KHCNĐ2-07B được Bộ khoa học công nghệ và môi trường và Ban chủ nhiệm chương trình KHCN-2 giao cho Viện BẢo vệ thực vật thuộc Bộ Nông, nghiệp và PTNT là cơ quan chủ trì ó sự tham gia của Viện công nghệ sinh học và Viện sinh thái vũ tài nguyên sinh vội thuộc Trung tâm khoa học tự nhiên và

công nghệ quốc gia, Trung tân nghiên cứu ví sinh vật ứng dụng thuộc Đại học

Quốc gia Hà Nội, Viên khoa học kỹ thuật nông nghiệp Việt Nam và sự phối hợp của các cơ quan địa phương tiền hành thí nghiệm trong cả nước

Để tài KHCN02-07B trong 2 nám 1999-2000 đã nghiên cứu hoàn thiện tạo ra một số công nghệ sản xuất và ứng dụng các chế phẩm sinh học về Bảo vệ thực

vật đồng thời tạo ra ruột số hỗn hợp giữa chúng với nhau để sử dụng trong phòng

trừ dịch hại của một số cây trồng nông-lâm nghiệp trên cơ sở nghiên cứu áp dụng, kỹ thuật công nghệ vì sinh (ví nấm, vị khuẩn và virns), làm liền dé cho sy phat

triển rộng rãi phương nhấp sinh học bảo vệ cây trồng trong chương trình kình tế-

kỹ thuật gần chặt giữa công tác Bảo vệ thực vật và bảo vệ môi trường ở nước

Chúng tôi hy vọng đề tài KTKCN02-07B cùng với những kết quả thực hiện trong 2 năm 1999-2000 sẽ gúp phần vào mục liêu cao cả đó

Chú nhỉ

Trang 4

LOL CAM ON

ong quá trình thực hiện dẻ ia: KHCN 92-07B chúng tôi luôn luôn nhận

được sự quan tâm chỉ đụo và giúa đỡ của Bộ khoa học công nghệ và môi trường

(Vụ RD và TCUH), Ban chủ nhiệm chương trình KHCN 02, sự giúp đỡ tận tình

của Ban giám đốc và các phòng chức năng của Viện Bảo vệ thực vật (cơ quan chủ

trì để tà), sự hợp tác chật chẽ, có hiệu quả của Viện công nghệ sinh học, Viện khoa học kỹ thuật Nông nghiệp Việt Nam, Viện sinh thái và tài nguyên sinh vậi va Trung tam nghi vị sinh ứng dụng Ctrường đại bọc quốc gia Hà Nội), các cơ quan chỉ đạo sản xuất ở các địu phương, nơi tiền hành thử nghiệm và xây dựng

mô hình sử dụng chế phẩm sinh học Bao vệ thực vật Thay mặt lập thể cán bộ

nghiên cứu để tài KHCN 12-07B tôi xin chân thành cảm ơn sự quan tâm, giúp đỡ và cộng tác quý báu đố

Có được những thành quá thể hiện trong tập báo cáo khoa lục này là do sự cố gắng lao độug không biết mệt mỗi và sự lận tâm của các Giáo sự, Phó giáo sự, liến sỹ, và Thạc sỹ khoa học, cúc kỹ sư và kỹ thuật viên đã và đang thực hiện để tài Nhân danh chủ nhiệm để tài KHCN 112-07B tôi xin ghỉ nhận và chân thành cảm ơn sự cố gắng và tận tâm đồ, Thay mat tap tl khoa học và chỉ đạo này

dán bộ thực hiện để tải, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn các nhà

xuấi đã piành thời gian đọc và góp ý cho bản bio cao

Chủ nhiệm đẻ tài KHCN 02- 07B " Ấ HÁT sát

Trang 5

MUC TIÊU CỦA ĐỂ tÀI:

1, Nghiên cứu hồn thiền quy trình cơng nghệ sản xuất một số chế phẩm

sinh học và hiện pháp hôn hợp chúng để tăng hiện hực trừ sâu bệnh Phương pháp sản xuất nấm sinh khối hàng loạt nhằm giám giá thành, ổn định chế phẩm và đảm bảo hiệu luc

2 Xây dựng mô hình sử dụng chế phẩm để phòng trừ sâu bênh ở một số vùng đại điện trên một số cây Irồng nông-lâm nghiệp,

3 Từng bước phát triển công nghệ sản xuất chế phẩm tại địa phương, giúp cho địa phương tiếp thu công nghệ hoặc tham gia một số khâu trong quy trình

công nghệ để sản xuất chế phẩm với mục liêu thay thé phần thuốc hoá học sử

dung trong sản xuất, đặc biệt là thuốc nhóm độc cao

NỘI DUNG NGHIÊN CỨU:

1, Điền Ira thu thập, nghiên cứu bổ sung các nguồn vì sinh vật có ích vào

danh mục các chẻng loài VSV của Việt Nam Từng bước xây dựng tiêu chuẩn của các loài VSV có ích sử dụng trong Bảo

2 Phát triển công nghệ sản xuất một số chế phẩm sinh học gém BT NPV

Metarhizinm Beanveria, Trinhoderima, tuyến trùng để trừ sâu bệnh hại

3 Thử ngRiệm đơn lẻ luệu l phương pháp phối chế, hỗn hợp mộ dễ sử dụng và đảm bảo hiệu quả kinh

; của các chế phẩm nói trên, nghiên cứu các

số chế phẩm để tăng hiệu lực trừ sâu bệnh,

¿ÿ thuật

4 Xây dựng mô hình triển khai và áp dụng một số chế puẩm gồm đem lẻ và biên hợp để trừ sâu bệnh lai trêu Ida, sau, cay thuốc lí, cây ăn quả tri Hà Nội, Vĩnh Phúc Hải Dương

phẩm sinh học ở d;a phương để nông

hội và môi trường,

$ Phát triển pikwt sản xuất một số chế

dân thử nghiệm, đánh giá hiệu qua kinh t

Trang 6

"0U VÀ CÁC CHỦ NHIÊM NHÁNH THUÔC ĐỀ I KHCN-02-07 CÁC NHÁNH NGHIÊN

1 Sản xuất và ứng dụng chế phẩm NUV, V-BỊ phòng trừ tội số sầu Ï

Chủ nhiệm: Thạc xỹ Hoài ệiTrưởng nhóm nghiền cite virds con trting- Trưng tâm ĐTSH-Viện bảo s thực vật

rau

3 Nghiên cửu sản xuấi và ứng dụng chế phẩm nấm côn trồng (Eeuwseri vê Aetarhizium) để phùng trừ sâu bai cây rồng nêng-lâm nghiệp,

Chủ nhiệm: PGSTS Phạm Thị Thuầ-Fidông nhm nghiên cử nếm con iriny- Tràng tám ĐTSH-Viên Báo vệ thưực vật 3 Nghiên cứu sân xuất và sử dụng nấm đỏi khẳng 7richoderme phòng trữ một SỐ bệnh hại cây trồng cạn Chả nhiệm: Thạc «9 Thần Thị Thuần-Rộ môn Bệnh cá én Beco vé thực vật

4 Nghiên cứu sản xuất và ứng dụng chế phẩm xinh học huynh quang (fluerescent) từ ví khuẩn Pseiglomonds ƒiterescene phòng trừ một vài loại bệnh hại cây trồng

nông nghiệp,

Chủ nhiệm Thar x8 Dink Thi Thank Bo môn Bệnh cây-Viện Bảo vệ thực vật

eé chế phẩm sinh học Báo về thực vật

21S Lé Van Trinh-Phé BG mon Con tràng-Viện Bỏo vệ thực vật 5, Thữ nghiện! Chủ nhiệ 6 Nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản cuất và sử dụng chế phẩm sinh học phòng, trừ bệnh hại rễ cây trồng cạn

Chủ nhiệm: TS, Phạm Văn Toản trưởng BẠ môn ví sinh-Liên khoa học È Nông nghiệp Việt Hưm thuật 3 Nghiên cứu sử đụng tuyến hồng của phòng trữ sinh học sâu hại cay trồng VIỆC nam Chả nhiệm: TS Nguyễn Ngọc Châu Viên sinh thái và tài nguyên sinh vật 8 Hồn thiện cơng nghệ sẵn xuốt và ứng dụng chế phẩm lật và hỗn hợp vớ chế phẩm khác

Chi uhiém: TS Neo Dinh Bink Vien cong nghé sinh hoc

9 Nghiên cứu, tuyển chọn vì khuẩn Dị vó khả năng digt cbn ting xée dinh gen có hoat dính điệt sâu cao hing KF dual PCR và nghiên cứu điều kiên lên mon cho sinh khối và hoạt tính điệt sâu cao

Chả nhiệm GÁTS Nghyên Lán Dâng Trung (am vi sink var rag dung Dai hee Quoi gre Ha Nor

Trang 7

DANH SÁCH CÁC CƠ QUAN KHOA HỌC VÀ CÁC CÁN BỘ 'THAM GIÁ ĐỀ TÀI

1 Viện Bảo vệ thực vật -Bộ Nông nghiệp và PTNT: - TS Nguyén Văn Tuất

- PGS Lé Van Thoyét

‘VS Train Quang Tan

- TS, Nguyén Xuan Hong 1 puyén Van Vấn Trần Huy The -_ PGS.TS Nguyễn Công Thuật - Pt Phạm: Thị Thuỳ - TS Le Van Trink / TS Pham Thi Vượng - TS trần Đình Pha “Thạc sỹ Hoàng Thị Việt ~_ Thạc sy Trần Thị Thuần ~ Thạc sỹ Định Thị Thanh “Thạc sỹ Nguyễn Thi Ly -_ Thạc sỹ Phạm Anh Tuấn - KS Luong Thanh Ci

- KS Nguyén Thi Hoai Bac

Trang 8

- TS, Phạm Văn Toản - TS Nguyén Mạnh Dũng - KS Nguyén Vi Trong -_ KS, Nguyên Thị Yến - KS Phan Duy fai » KS Vi Anh Tuan = KS Pham Bich Hien sinh học-Erong tâm KHTN và CN Quốc gia: -'T§, Ngô Đình Bính

Nguyễn Quỳnh Châu - CN Nguyễn Văn Thưởng

- T8 Vị Thị Đoan Chính-[rường ĐH Y Thái Nguyên CN Nguyễn Ảnh Nguyệt Uường I3H1 Y Thái Nguyên - CN, Ngô Anh Trí“trường ĐH Y Thái Nguyên

4, Viện sinh thái và TNSV-Trung tâm KHẨN và CN Quốc gia: - TS Nguyễn Ngọc Châu

- TS, Vũ Tú Mỹ

Trang 9

*ÚU CỦA ĐỀ TÀI KHCN92-078 (1999-2090)

A- KẾT QHẢ NGHIÊN

Các kết quả nghiên cửu và ứng dụng phục vụ sản xuất nông-[âm nghiệp của để tài KHCN02-07 trong hai năm 1999-2090 được trình bày cụ thể trong các báo

cán khoa học của các nhánh để tài, trong đó đều nêu các phẩn đặt vấn đề, tổng

quan nghiên cứu trong và ngoài ước vật liệu và phương pháp nghiên cứu, nội đụng và các kết quả nghiên cứu, kết luện và để nghị, tài liệu tham khảo ở báo cáo chung này chúng tôi chỉ xia giới thiêu tổng quất những kết quả nghiên cứu các mặt của đề tả + đánh giá và sau phần kết luận chung có kiến nghị với Nhà nước đầu tư phát triển đề tài trong những năm tiếp theo

L KẾT QUÁ SẲN XUẤT VÀ UNG DUNG CHẾ PHẨM NPY, V-BT TRONG PHÒNG

'TRỮ MỘT SÂU HAI RAU:

Các chế phẩm sinh hye trừ sâu, bệnh hại tây trồng bong đồ có chế phẩm

NPV, V-ft đang đồng một vai trò quan trong trong hệ thống phòng trừ tổng hợp

(IPM) sau hại trên rau Để đạt được mục tiêu là hạn chi dụng thuốc hoá học,

làm sạch môi trường và sàng có nhiều sản phẩm rau an toàn đấp ứng cho người tiêu dùng và để xuất khẩu can được, trong hai nam: 1999-2000 nhánh để tài đã tiếp tục sản xuất ché phim NPV, V-Bi dang dich thể và đạng bột để trừ sâu hại rau, cải tiến phương phái í thấm, mở rộng điện tích ứng dụng các chế

phẩm NPV, V-BL đến nhiều vũng trồng rau để trừ một số sâu hại chính trên rau

Sau đây là kết quả đạt được:

1 Kết quả sẵn xuất chế phẩm NPV-V-BL

Trong 2 năm (1999-2000) nhánh để tài đã sản xuất được 215 lít chế phẩm NPV dạng địch thể và 59 kg dạng bột khô thẩm nước của 3 loại sâu: sâu Keo da láng (Spodoptera cxigua Hubner), sâu khoang (Spodoptera Htura F.) và sâu xanh

(Helicoverpa arinigera) để chuyển giao cho một số địa phương, sit dung trong

Trang 10

I UY) L 3 1 Độ bám định động dên ea “ 4 + 2 Sản xuâi chế phẩm NPV ở dạng bột khô thấm nước:

Để tiện lợi cho việc sử đụng, vận chuyển à hảo quần chế phẩm NPV, V-Bt, nhánh để tài đã tiển hành nghiên cứu và sản xuất thữ-thử nghiệm các chế phẩm

trên ở dạng bột khó thẩm nước Kết quả được trình bày ở bằng 2 “ác chỉ tiêu chất lượng các chế phẩm NPV đạng bội Bang 2: c — Đơn vi tính (VNĐ) —_ | thước hạt chị tiêu chất tượng TKÍch tu Dộ thuỷ phần DPS pH _ Luong PIB/my ¢ Bảng 3: Giá thành sản xuất của chế phẩm NPV dạng bội sự Cũng nuồi 1000 sâu từ tuổi 1-4 nhiềm pha s 0 công x 15.000đ/oông 5kg x7000đkp —_ xúi, xÀ phòng, giấy hat chống thối han mac, túi nilong ¡Biên (Kwgiờ) Nước (mÙ) ~ | Khẩu hao ti sản cổ định —¡ Khẩu hao dụng cụ Lống cộn

Như vậy trong năm 2000, nhánh để tài đã hoần thiện được quy trình $

xuất chế phar NPV đạng bột với ¡hữu chỉ tiêu chất: lượng tương đối tết, Chế

phẩm không phải lọc, tan nhành và sử dụng để dạng, gọn nhẹ, VỚI pid thành 5.000đ/1 bình phụn nâng đân có thể chấp phận được,

Đề tài nhánh đã thể nghiệm hiệu lưc trừ sâu hại rau eta che phim NPV dang, bot trong phòng thí nghiệm Hữ + quả tốt đối với sâu khoang Gat 96,3-100% sau 5 6 ngày thí nghiệm Ở công thức sử dụng hồn hợp V-Dt theo tỷ lệ NEV Sĩ

102 PHB/mp + BL ¡7/060 TL (5055 lượng dùng) thì tỷ lệ sâu chết đạt 87,2-98,6%

sau 5-6 ngày phun thuốc thấp hơn sông thú: sử đụng NIPV-SL 10” PIB/ng, Trong

khi công thú sử dụng BL đơn lẻ chỉ đạt 54,8-61/7%, Tượng tự như vậy khi thit

nghiệm với sâu xanh thì NPV-Ha dạng bói cũng cho hiệu quả trừ sau cao (đồ

Trang 11

keo da láng NIV-Se dạng bội cũng cho hiệu lực trừ sâu caw (86,7-97,2%) san 5-6 ngày thí nghiệm

thí nghiệm trong phòng nhánh để tài đã tiến hành thí nghiệm ngoài đồng nhằm so xánh hiệu lực trừ sau hại rau của chế phẩm NPV, V- Rt dạng bội với dạng dich thể và thuốc trừ sâu hoá học Thí nghiệm tiến hành tại HTX Yên Nhân, xã Tiên Phong, Mê Lánh, Vĩnh Phúc Kết quả được trình bày ở bảng 4

Song song với vi

Bảng 4: Hiệu quá trừ sâu khoang hại bắp cái của chế phẩm NPV dang boi (tai HTX Yen Nhan, Tién Phong, Mé Linh, Vĩnh Phúc) Tháng 6/2000

Cong thie | Luong | Thiệu quả phòng trừ (%6) sau |' hi chit

| 3ø 7 | 31Ã | 54 | 687 | r6 JTDCEAĐE | _| ngày | ngày | ngày | ngày [7971765 | 836 A°=85 | Ÿ [6 { S1 c9 [Nâng nóng |

lộng cho thấy chế phẩm NPV-SI dạng bột

đã bảo đâm được chất lượng thể sử dụng được để trừ sâu Với liểu lượng là

20g:/bình phun.hiệu quả phòng trừ sâu khoang của chế phẩm NPV-SI bột đạt 53.1% sau Š ngày phun thuốc và 68,7-7 16% sau 7-10 ogay phun thuốc Ö các ruộng sứ dụng thuốc hoá học hiệu quả phòng trừ đổi với sau khoang cao hơn: 83.8% sau 7 ngày phun thuốc Ngoài điện tích dư nghiệm nhánh để tài đã phân

phát thuốc cho nông dân sử dụng, phúa phòng trên điện tích 2,5 ha au bắp cải,

Trang 12

Như vậy qua 2 năm thực hién (1999-2000) nhanh dé tai da dat duge mot so sau:

Đã sản xuất được 215 lũ chế phdm NPV dạng dịch thể và 59 kg NPV

dạng bột khơ thẩm nước

Đã hồn thiện và thành công ương việc sắn xuất chế phẩm NPV dang bội khô thẩm nước

~_ Đã triển khai được việc sử đọng chế phẩm NPV trừ sâu hại rau trên điện tích 4L lá tại nhiều địa phương với hiệu quả phòng trừ đạt 61,1-71,6% sau 9-10 ngày phun thuốc

Kết quả cối bật của để lài là đã cái tiến dược quy tình công nghệ sẵn xuất chế phẩm nhằm tăng hiệu quả, giá thành và sắn xuất được chế phẩm NPV dạng bột khô thẩm nước vừa đạt hiệu quá trừ sâu lại tiện lợi khi sử dụng, vận chuyển và bảo quản Ngoài ra điện tích sử dụng chế phẩm NPV, V-B\ của nhánh dé (ai và của nông dân đã được mở rộng nhiêu hơn, U- KET QUA NGHIÊN CÚU SẲN XUẤT VÀ ỨNG DỤNG CHẾ PHẨM NẤM CÔN

Tiếp tục thực hiện công việc nghiên cứu của nhánh đề tài, năm 2000 nhánh:

để tài đã tiến bành hoàn thiện thêm một bước về công nghệ sản xuất chế phẩm

Metarhizium anisopliae (M.a) nham nang cao chat luong cia ché phdm này với muc dich phòng trữ san hại, giá cá phù hợp cho người nông đân, cụ thể đã nghiên

thột số môi trường nuôi cấy và phương pháp nghiên tạo chế phẩm

Sản đây là vác Kết quả đại được

1 Nghiên cứu khd nang phát triển của nấm M.a trên môi

trường cấp { có giầm một lương Pepton và gÌacose:

Qua nghiên cứu nhân thấy Ma là một loại nấm khoẻ, dé đầng mọc trên

nhiều loại cơ chất, có thể giảm dĩ một một lượng thành phần dinh dưỡng trên môi trường cap | ma khong ảnh bưởng nhiêu đến sự phát triểa của nấm Như phần phương pháp đã nêu, giảm l lượng Pepton và 1 lượng Gaucose trọng Ì lít mơi trường cấp 1 để nuôi cấy nấm Kết quả Ihụ được trình bày ở bảng 6,

Trang 13

Rảng 6: Khả nâng phát triển của nấm M.a trên mơi trường Sabouraud Khống chất cổ giảm PPapton và Glucnse sau 10 ngày nưôi cấy ~ “Đường kính Số lượng bào từ — | khudn tac (om)_| (x 10" bell cnt) so 5 Điều kiện TN: pH moi trường = 6,0 L=27,5°C, IL= 851%

Ghi chú: MTI: Mơi trường Sahourand khống chất chuẩn thường đùng MT2: Như MTI có giảm 5 gr Pepton va 10 gr Glucose trong I Ift MT; Như MTI giảm 10 gr Pepton và 20 gr Glucose trong I lit

Qua bảng 6 thay nain M.a vẫn phát triển tốt trên cả 3 môi trường ở cùng

một điều kiện thí nghiệm, môi trường 2 so với môi trường 1 vẫn CÓ sự chênh lệnh

tương đổi íL, cồn môi trường 3 chênh lệch có phân đáng kể một chút, nhưng khả

năng mọc cla nar van dal liễu chuẩn để có thể đưa vào sản xuất

Như vậy, cứ mỗi một lít môi trường có thể giảm lượng Pepton dao đọng từ

5-10 gr, Glucose ti 10-20 gr mà không ảnh bưởng nhiều đến tốc độ phát triển của Mia, Mặt khác khi sản xuất nấm với một khối lượng lớn, giá thành sắm phẩm có thể dược hạ xuống vài nghìu đồng/1 lít môi trường

2 Nghiên cứu cải tiến môi trường sdn xudt ndm M.a:

Đây là một loài nấm hiếu khí, ngoài chất đính dưỡng ra chúng còn cần thiết

đến độ thông khí Theo một số tài liệu của Nguyễn Lân Dũng va mot số tác giả

khác thì oxy là một yếu tố quan trọng ong quá trình phát triển, nhất là cho sự

hình thành bào tử Môi trường chỉ gồm cám gạo, bột ngõ đảm bảo chất dinh dưỡng song không đỏ tạo ra độ thoáng, dộ tơi xốp cho nấm mọc, qua nghiên cứu

nhận thấy thêm vào thành phần môi trường một số nguyên liệu thô xốp như trấu-

đây là nguyên liệu đễ kiếm có thể tạo ra một điều kiện tế: ưu cho nấm phát triển,

mặt khắc 6 thé tiết kiệm được nguyên liệu cho quá trình san xudt mot lyong

lớn Kết quả thí nghiệm được trình bày ở Đáng 7

Trang 14

Bảng 7: Khả năng hình thành bảo tử của nấm M.a trên các môi

trường sản xuất có bổ sung trấu sau 7 ngày nuôi cấy Số lượng bào | (€), H(%) ittigr (x16”) _ 1n 87%

Kết quả ở bảng 7 cho thấy số lượng bào tử M.a hình thành có tầng hơn đáng

kể, ở công thức 2 đạt là 5,0 x I0” bƯợr so với công thức ! dạt 5,L x 10” b/ạr, Vậy

nếu thêm một lượng trấu thích hợp (19) Không những chúng ta có thể tiết kiệm

được một lượng ngô và cám thay vi Urdu ind còn làm tăng chất lượng của chế

phẩm Tuy nhiên nếu thêm quá nhiều trấu từ 159 trở lên môi trường không đâm

bảo được chất dinh dưỡng số lượng bào tử nấm trong 1 gr chế phẩm lại giảm

xuống thấp lợn môi trường 1 Như môi trường sản xuất có bồ sung 10% trấu

là thích hợp có thể sử dụng kết quả này vào trong quy trình sân, xuất nấm M.a

3 Nghiên cứu thôi gian sấy tối wu để bảo quân chế phẩm nấm

Ma:

Để chế phẩm năm có thể sử dụng được lâu đài, điều cẩn thiết là phải sấy khô để bảo quan chúng, nhưng say Ở nhiệt độ nào và thời gian như thế nào để không ảnh hưởng đến bào tử nấm, chế phẩm nấm có độ thuỷ phần thấp không gây

mốc trong quá trình bảo quản chúng tôi đã tiến hành thí nghiệm sấy nấm ở nhiệt

do 50°C ở các ngưỡng thời gian là 3 giờ 4 giờ, 5 giờ, 6 giờ Kết quả thu được trình bày ở bằng 8 Bang 8: Anh hưởng của thôi gian sáy đến chát lượng chế phẩm nam Ma, vnivais (87) | Số lượng bệ Ì (ld? 402 2 4 600 [3T 5 “600 Lá [~ 6 606 7

Qua bang 8 cho thay néu

cồn cao và số lượng bào 1/1 gr cơu ¢

BCENSnhaoc

íy dưới 4 giờ thì độ thuỷ phần trong chế phẩm:

íp Vậy khi hảo quản dễ bị các loại nấm

Trang 15

mốc khác hoại sinh như Penicillium, Aspegilius thực tế những năm trước cho thấy nếu sấy không đảm bảo độ ẩm, chế phẩm chỉ giữ khoảng 3 tháng là bị mốc và đính kết lại với nhau, Còn khi sấy trong khoảng từ 4-5h chế phẩm M.a cho số lượng bào tử cao hơn, mặt khác ở đỏ thuỷ phản này chế phẩm giữ trong điều kiện bình thường được lâu hơn khoảng 6 tháng,

Còn Khi sấy > 5h độ thuỷ phần thấp có thể đảm bảo không cho sự xâm nhập

của các vi sinh vật khác nhưng số lượng bào tử/1 gr chế phẩm lại giảm di do say quá lâu bào tử có thể bị chết Từ những nhận xét trên thấy sấy chế phẩm ở 50°C trong khoáng 4-5h là thích hợp nhất

4 Nghiên chế phẩm năm để tạo chế phẩm dạng bột tiện lợi cho người sử dụng:

Chế phẩm sau khi cho vào máy nghiên chúng ta đã có một loại chế phẩm dạng bột màn xanh, kiểm tra lại số bảo tử trong 1 ạr chế phẩm đạt =5,9 x10” bị

Như vậy số bào tử thất thoát trong quá trình nghiền là không đáng kể Chế phẩm

sau khi đã nghiền mang lại tiện lợi cho người sử đụng bơn, trước đây mỗi lẫn sử đụng chế phẩm này phải ngâm vào uước một lúc sau đó dùng tay bóp cho chế

pham nát ra để bào lử có thể khuyếch tần vào nước, như vậy rất nặng nhọc, mật

khác có phần phí phạm bởi có những phần chế phẩm vẫn bị vén cục lại và bào tử không ra được hết Chế phẩm đã được nghiễn thì chỉ việc hoà vào nước và lọc qua một lớp vải thô là có thể sử đụng được Chế phẩm tạo ra chúng tôi đã thí nghiệm lại trên sâu tơ và sâu xanh bướm trắng hại rau để xác định hoạt lực của chúng, kết

quả thu được trình hày ở bảng 9 Bảng 9: Hiệu lực của chế phẩm nấm À1.a trừ sdu to và sản xanh bướm trắng Loai sau | Nông độ TÑ | TỔ lễ (%) sản chết sau các ngày ÏÌ TN (xi0' bml) thí nghiệm -H Sau to 4 5,0 8 50-1 309) Ÿâu xanh 2 - y | 60.0 bướm § 200 | 685 | 88 Lắng _ oe Bl sacs `

Qua bảng Ö rút ra nhận xét là chế phẩm nấm M.a mới sản xuất có hiệu quá cao đối với sâu tơ và sâu xanh bướm trắng hại rau ở nổng độ càng cao 8 x 10°

bt/ml thì hiệu quả chết của sâu cầng cao, sau 8 ngày tỷ lệ chết của sâu to đạt

79,2% và tỷ lệ chết của sâu xanh đạt 95.590, theo dõi số sau chết ở các nông độ có để ấm và thấy số sâu chết có mọc nấm trở lại đối với sâu tơ là 4Q% và sâu xanh là 45%,

Trang 16

Sau thôi gian nghiên cứu rắt ra một số kết luận:

1 Môi trường nhân giống cấp | trong L lít có thể giảm lượng Pepton 5-10 ar va Glucose 10-20 gr dé sit dung trong quá trình sẵn xuất chế phẩm mà không

Arh hong nhigu dén kha mang phat, widen cla nam Mua

2, Cần thiết bổ sung thêm một lượng trấu khoảng 10% vào môi trường sản

xuất để tăng chất lượng của chế phẩm: đạt 3,9 x 10? YL gr và tiết kiệm được nguyên liệu trong quá trình sẵn xuất lớn

3 Thời gian sấy chế phẩm thích hợp là 4-5h ở 50%C đẻ cho chất lượng chế

pham dat 4,9 x IUP bưigr và có độ thuỷ phần đảm bảo cho việc bảo quản lâu đài,

4 Chế phẩm đá được nghiên sử dung tiện lợi hơn và có vẻ mỹ quan hon so với chế phẩm chưa được nghiền và chúng có hoại lực diệt sâu tơ cao là 79,2% và

sâu xanh bướm trăng là 95,5% sau 8-10 ngay thí nghiệm ở nồng độ 8 x10 byml

Nam 2000 tại nh Rén ‘Tre xây ra dịch họ dừa (Brontispa sp.) nhá hại nõn và lá non của dừa y bị nhiễm tới 60.000 cây (theo báo cáo của Chỉ Cục BVTV Bến Tre) Một số tài liệu thể giới phi nhận sự phá hại của loại này trên đa và để phòng trừ chúng ngoài thuốc trừ sâu hoá học, có thể đùng chế phẩm nấm Metarhizium anisopliae trong những điều kiện thích hợp Theo yêu cầu của tỉnh Bên Tre nhánh để tài đã tiến hành khảo nghiệm sử dụng chế phẩm này tại Bến Tre từ thí nghiệm ong phòng trang lồng lưới đến thí nghiệm ding M.a trừ bọ đừa trên diện rộng Sau đầy là hếi quả đạt được

$ Thủ nghiệm ngoài đồng ruộng:

Như phần đặt vấn để có nêu điện tích dừa bị hại nặng do bọ dừa tập trung ở một số nơi như thị xã lến Tre huyện Cháu Thành, Giống Trôm và Mỏ Cày Từ kết quả thí nghiệm Irong phòng và trong lồng lưới, nhánh để tài bố trí thí nghiệm

Trang 17

Bảng 10: Hiện quả phòng trừ của năm M.a tai Rén Tre (TN đồng ruộng với nông độ 2,5 x (0° bia + 0,1% Agral + 0,05% Pandan)

Triệu quả phòng irù

sew các ngày thí nghiệm | TB E | 69,0 ABO, 80.0 ; 65,0 Dia diém phun 37.0” 48,5 | AG) 400 316 | 500

Số liệu ở bảng 10 cho thấy irong thí nghiệm đồng ruộng, rấm MLa bước dan

cũng có hiệu quá với bạ dừa ở Bến 17c, Sau 5 ngày nhưn nấm ở cả 3 địa điểm đều

bắt đầu cho hiệu quả au 7-19 ngày phụn đều thấy có hiện tượng bọ dừa chết vớ nấm mọc lại ngay trên lá dừa Tý lệ bọ dừa chết đạt 65,0-80,0% va ty lệ nấm

mọc lại trên bọ dừa khoảng 30% trong diều kiện nhiệt, ẩm độ thích hợp là 26,5°C và K77

Với số liệu thí nghiệm trong thất

chế phẩm năm Mua trên diện rộng vào ï Thị xã: 20 ha Châu Thành: 20 hạ Giêng Trôm: 5 ha Bình Đại: 5 ha lính để tài tiếp tục cho ứng dụng 9ở 4 huyện Thí nghiệm theo đồi mỗi điểm trên F2 Khương-Thị xĩ và ớc-Chân U4 một điểm ids Un Hảng 11: Hiệu lực của chế phẩm năm M.a crit bo dita trên điện rộng (PN thang 8-9/2000)

Trang 18

Kết quả bảng LÌ cho thấy Ở cả hai địa điểm thí nghiệm: thì công thức phun nam M.a + Agral + 0,056 Padan thì có hiệu quả sau 10 ngày phun nấm dat 75,3- 80,09 và hiệu quả kéo dài đến 45 ngày phơn đại 68.3-81%, Cơng thức khơng có

bố chất cũng cho hiệu quả dạt được @⁄1,5-69,2%, tuy nhiên kết quả không bằng

sơ với thêm một ít hoá chất và công thức phua riêng M.a ở cả Thị xã và huyện Chan Thành đêu cho số liệu tương lự sau 10 ngày tỷ lẽ bọ đừa chết đạt 62,7% và sau 45 ngày đại 47.4% sở với đối chứng

Riêng công thức phún Padan với liệu lượng rất nhỏ 0,05% thí hấu nhự không có hiệu quả Sau 10 ngày thu mẫu vẻ phân tích, chúng têˆ nhận thấy có nấm mọc lại trên mình sâu, sổ liệu về sự mọc lại nấm khoảng 20-30%,

Điều tra về những cây không phun nấm trên ô xử lý, nhanh để tài thu được

kết quả trình bày ở báng £2

Bảng 12: Hiệu lực của chế phẩm nấm M.a trên những cây không

phụn nếm (theo dõi tại thị x4) Ree TB Dia diém phan “Hiện quả phòng trừ (%) ly thí nghiệm _ 30 sau cae ng _ to | 20 + 01% Agil tỊ 440 | 450 Uadan

ử phững cây không phun nấm và thuốc hoá học đủ tý lệ bọ đùa chết ở công thức phun Mia + Agral + Padan cho tỷ lệ 44 — 47/7 Công thức phúa Mái riêng cho thấy tỷ lộ họ dữa giảm rất thấp 25,0-2,556 &

công thức phún Padan nông độ thấp 0,05% IRÌ khơng có hiệu lực, như vậy không

phun thi bo dita khong chet

Ket gua & bang 12 cho thay là bảo tứ nấm chưa có khả năng phát tán trên điện rộng, theo chúng lôi thì cáy đữa cao và cách xa nhan vài mết một cây, bọ dùa lạt di chuyén cham chap, không bay xa và ấu trùng chỉ nằm ở trong hệ ;á đừa, mật khác năm 2000 là năm đầu thí nghiện ứa dụng chế phẩm nấm M.ä trừ bọ dừa

nên khả năng phát tần và lây lan của bọ dừa Eì chưa rõ Theo đối khong lies tue ở

huyện Châu Thành cũng cho kết quả tfxne tự,

Trang 19

HI- KET QUA NGHIEN COU SAN XUAT VA SU DUNG NAM DOL KHANG TRICHODERMA PHONG TRU MỘT SỐ BỆNH HẠI CÂY TRƠNG CAN:

“Tiếp tục cơng việc của giai đoạo trước trong 2 năm (1999-2000), nhánh đẻ lài tiếp tục nghiên cứu sản xuất và sử đụng nấm đối kháng Trichoderrna để phòng trừ một số Đệnh hại cây trồng Nhánh đề tài đá duy trì việc thu thập và phân lập từ

các mẫu đất, tàn dự cây trồng để tìm các nguồn Tirichoderma mới, ngoài ra còn

bảo quần các nguồn nam frichoderma đã có để phục vụ cho việc sản

phẩm Trichederna và ứng dụng ngoài đồng ruộng, Sau đây là kết quả luôn giữ xuất chỉ thực hiện cửa nhánh để lài 3 Sản xuất chế phẩềm Tríchoderrttd:

chọn rập đoàn giống ndm Trichoderma c6 triển vọng

Dề có nguồn năm có khả năng đới kháng cao với các nấm gây bệnh hại cây

trồng và phát triển tốt trên môi trường cho lượng sinh khối lớn, nhánh để tài đã tiến hành theo dõi và tuyển chọn được mội số nguồn nấm Tr:choderma có triển

vọng trong tập đoàn Kết quả được trình bay ở bảng l3 fd Pp 3 lễ

c nguồn nấm Tiichoderma tuyển chọn đến cho hiệu

quả ức chế cao đối với nấm hệnh của một số bệnh như khô vằn trên ngô, Eusariom, Aspergillus niger trừ 58.9-79,39), Đến nay đã thu thập bổ sung thêm 3

Trang 20

Bảng 14: Tình hành sẵn xuất chế phẩm nấm đối kháng Trichoderma (1999-2000) “Nam “Se Inong (hg) Số lượng bao tligr | | 1349 " 7gp 3-32 x 10P ˆ : ~~ 3000 3000 ~ 33,2 x 10°

Sử đụng chế phẩm Tríchoderiia phòng trừ một số bệnh trên cây trồng cạn

với quy trình sẵn xuất đã được cải tiến nên chế phẩm nấm đối Kháng có chất lượng tương đổi ổa định qua các đợt sản xuất, hàng năm cung cấp cho nông đân để sử

dung phòng trừ một số bệnh cho cây rau, màu, như Lục Ngàn (Bắc Giang), Chí

Linh-Cẩm Giảng (Hải Dương) trết: cây vải thiểu, chương trình IPM trên rau, đậu đỗ tại Lâm ang, Ha ‘Tay, Hai Phong và rên thuốc lá tại Sóc Sơn (Hà Nội) đạt tỷ lệ giảm bệnh từ 45.2-06,6% (xem bảng 15) Bảng 15: Hiệu quả sử dụng chế phẩm Trichoderma trén cay rau,

| Dia diém thi trắng và | Công thức thí | TỶ lệ cây lệu quả

nghiện: : bệnh hại nghiệm bệnh sau | guầm bệnh

E—— xử lý (%) | (Mo)

[mi Neo nh hối hạn (Ruy ao 588 —|

Trang 21

TV- KRY QUA NGENEN CUU SAN XLIAU VA TING DUNG CHE PHAM SINH HOC

HUYNH QUANG (FLUORESCENS) TỪ VI KHUAN PSBUDOMONAS

ELUDRESCENS PHÒNG CHỐNG MỘT VAT LOẠI BỆNH HAI CÂY TRÔNG NÔNG

‡- NGHIỆP:

i Tiếp tục và xế thừa các kết quả đạt được từ giai đoạn trước, nhánh đề tài đã

đi sâu nghiên cứu hoàn thiện quy trình sản xuất thử chế phẩm sinh học huỳnh quang (luoroscen0, thử nghiệm và ứng dung trên đồng ruộng Sau đây là những kết quá đạt được:

1, Nghiên cầu xây dựng và hoàn thiện quy trình sẵn xuất chế phẩm sinh học huỳnh quang:

- Đã tiến hành điểu tra bổ sung và bảo quản, cất trữ được 54 đồng vi khuẩn có triển vọng, trong đó tuyển chọn được dòng vi khuẩn 5.2, gián định vi khuẩn | Pseudomonas fluoreseens có độc tính cao, có khả năng tiếp độc tố làm chết dẩn

nấm gây bénh Fusarinm ở một sỡ vùng trồng cà phê và vải thiéu tai mién Bắc, là

nguồn vật liệu khởi đấu chủ công tác nghiên cứu sau này:

n thiện quy trình sẵn xuất chế pi

- Bước đầu nghiên cứu, xây dựng và ha

as fluorescens phân lập từ vùng đất

sinh học huỳnh quang từ ví khuẩn Dscuiomei

rễ cây trồng can (xem suv def)

Trang 22

Sơ đề 1: Quy trình sẵn xuấi chế phẩm sinh học huỳnh quang

(Pseudomonas fluorescens — Pƒ) ——Phẫn lập tuyển chọn từ đất vững rễ cây trồng can-

Trang 23

Chế phẩm sinh hoc huỳnh quang dược sản xuất bằng phương pháp lên men và thủ được ð dạng địch thể, Kiểm trả sau 5 lên sản xuất thử thấy số lượng lế bào

vị khuẩn ổn định tong khoảng từ 8-8,8 x ¡07 tế bào ¡ml chế phẩm, đạt yêu cầu

chất lượng (chế phẩm sinh học huỳnh quang của Nga là 9-242 x 40" tế bào/mÌ chế

phẩm) Chế phẩm có thể bảo quản trong, vòng 5 tháng nhưng phải tuân :hủ các yêu

câu kỹ thuật báo quần nghiền: ngát

2 Thủ hiệu quả của chế phẩm sinh hoc Fluorescent phong chống một số luai bệnh hại cây trồng nông nghiệp:

Nghiên cứu khả năng đổi kháng của chế phẩm sinh học huỳnh quang với

bệnh khô vẫn bại lúa, nhánh đ ä tiến hành thử nghiệm cả ở trong phòng v¿ ngoài đồng, Kết quả Irình bày ở bảng lồ, Hảng 16: Hiệu quả ức chế của chế phẩm với nấm bệnh khó văn hại hia (Rhizoctonia solani)

gố | Nẵng độ chế | Thi nghiém trong phong_ ghiệm ngoài đồng —_

|r | phẩm Tiện quả Ï Khả năng hình | € ác chế | thành hạch | _ — -—(EBĐ,, { bệnh sau xử lý Ì | ® sau {0 ngày | He "2i ey 1 "ngày | ngày | Khong Ì 305 , 382] 0.2% _786 | ˆ7 Không | 22¡ | 22 3 08% | 80.5 Khong | 200 [242] 4 Validacin 100.0 | Ñấm 10.2 | 10.8 q7 | |_._—.— —: Nế, ss ps ae ee ale

Đối chứng, od Sau 4 ngày 551 | 69

(không xử lý) | - | hạch nấm xuất hiện _ | _.| Ị | [12 Lsbos |

Thí nghiệm trong phòng: Tiến hành thử thuốc trên mơi trường cho thấy (buốt hố học Validacin là thuốc uữ bệnh khô vẫn đặc hiệu hiện nay dang sử dụng đã ức chế hoàn toàn nấm bệnl, nấu chết không mọc được Chế phẩm sinh

học huỳnh quang Ở nồng độ 0L2-0.3%° có khả năng, ức chế cao từ 70 80, Đặc biệt

sau 1Ô ngày cả nông độ chế phẩm: đếu không hình thành bạch nấm trong khỉ đó công thức đòi chứng chỉ sau 4 ngày hạch đã mọc nh

Trang 24

ir dng hop bệnh hại lúa, bạn chế và luân phiên với thuốc hoá học và đảm bảo an loan thực phẩm, công tác phòng bảo vệ môi sí

Để tài cũng tiến hành thí nghiệm khả năng đối kháng của chế phẩm sinh học huỳnh quang đối với nhóm nẩm trong dat gây bệnh chết cây con của cây

trồng cạn (rau, đậu) Kết quả được trình bùy ở hẳng 17

Bảng 17: Hiệu quả của chế phẩm sinh học huỳnh quang với bệnh chet héo cay con dau tong do ndim Rhizoctonia solani gay ra

Hiệu quả giảm | Công thức thí nghiện: jm “1 — | Bội chúng (không xứ lý chế phẩm) _ _ bệnh Œ) — | 00 3°") Nhigm ch® pham trude khi gico hat + 740

| Bice hạt + phun lấn 2 khi cây xuấ |

| hiện 2 lá mầm _ |

Qua bảng, L7 thấy: Ở công thức 2 và 3 có xữ lý chế phẩm sinh học huỳnh quang tý lệ cây bị bệnh giảm rất n¡iều xo với đối chứng (71,0-77.9%) Như vậy

với tiểu lượng 0,39 và mật độ tế bào § x 108m] thì chế phẩm có hiệu quả tốt và

ổn định trong việc phòng trừ bệnh héo rũ cây con đậu tương

3 Kết quả triển khai ứng dựng chế phiẩm sinh học huỳnh quang

tại một số địa phương?

tài n hiệu quả của CÌ phẩm sinh học huỳnh quang trên đồng

suông, nhánh để lãi dĩ ứng dung chế phẩm: này tại một số HTX tại Hà Nội và Hà

Tây để phòng trừ một số bệnh hại trên cây lúa, cây đậu tương và Cây lạc Kết quả

được trình hày ở bằng 18

Quá bảng 18 thấy: Ở các lò ;ưỡng dược Xử lý chế phẩm sinh học huỳnh

quang đầu chờ hiệu quả giảm bệnh từ 02,8-70/2/0 (uuỹ lừng loại cây và Ở các

địa phương khác nhau), cây Wonk sinh trường và phát triển tốt

Trang 25

Bang 18: Tinh hình triển khai, ứng dung chế phẩm sinh học huỳnh

quang tại một vài địa phương thuộc dia ban Ha Noi va Hà Tây, 1999-2000

[FF | Pia diem triển ' cay ông T Số hệ | , khai | | tham | - eo ï |HfX Ngộ Vũ đồng Ï999 , Dậu tương | 15

_ [Nội „ ee Vy thu 260¢ Lac_ 10

pe if x Seng) Vu dong 1999 Bau twang [10

Phugng- | Virdong 2000 | Dau qsomg » 20 |10009

LL | ens Ð [Va mu 2000_] „ Lac | _ 10 [5.000 |

3 TATX Đại j we mia 200 Lia | 20 [1.500] 6ã

| mạch ThấcHà | { |

Tay, _ —#

HIẾN CỤ HỒN THIÊN QUY TRÌNG SÀN XUẤT VÀ SỬ DỤNG CHẾ PHẨM SINH

HỌC PHÒNG TRỪ BỆNH HAI VỀ CÂY TRÔNG GẠN:

“Tiếp tục, kế thừn và phát huy kết quá nghiên cứu từ các năm trước trong 2 năn: 1999-2000, nhánh để iên cứu hoàn thiện quy trình sắn xuất chế phẩm vì sinh vật có íh đối kháng với nấm bệnh ở vùng rẻ cây trồng cạn (đặc biệt là đối với cây lạc) í a

nhầm trên 2 môi trường: Môi trường xốp và môi

trường lỏng có sục khí, Trên môi trường xốp dễ chuyển giao cho nông, dân hơn so

với mới trường lòng có sục khí, tuy nhiên chất lượng chế phẩm không cao so với môi trường lòng cổ sục khí Với hai phương pháp sắn xuấi chế phẩm này, nhánh

để tài đã có lượng chế phẩm đăm bảo chat tượng phục vụ cho việc thử nghiệm ứng,

dụng ở một số địa phương trừ trệnh hai rễ can ay 1 Đánh giá tác đụng của các biện pháp sử dụng khác nhau cúa chế phẩm:

Trong 2 năm 1929 2000 chế phẩm dược thứ nghiệm xạ Gia Lam, Ha Noi và Yên Khánh, Ninh Bình trong bai vụ: xuân và bè thu Mục đích của các thử nghiệm này nhằm đánh giá hiệu quả của chế phần trêu đồng ruộng phòng :từỪ bệnh hại rễ cây lac

'” Tiện quả phòng từ bệnh hại với các hiện pháp sử dụng khác nhau

~_ Hiệu quả phòng trừ bệnh hai duy tì của chế phẩm thes thoi gran

Chế phẩm đọc sử dụng trong hai vụ năm 2000 với sác điêu kiệt thông thường sử dụng Ở địa phương Chế phẩm dược bón vào đất với lì

Trang 26

tác chia fam 2 phần một nữa được xử lý với chế phẩm, nữa kia khong xử lý (đốt chứng), Diện tích thứ nghiềm ử môi địa phương là 2 ha

Chế phẩm được sử dụng theo hai cách: Xử lý bằng cách bón rải đếu vào dal

trước khi gieo và bón theo rạch trước khỉ gieo Chí phẩm được dùng vào hai thời điểm: Bán trước khi gieo kết bợp với bón lớt phân Đớn và sau khi gieo Ì0 ngày kết hợp với đợt làm có vụn gốc, Hiệu quả của chế phẩm được trình bày qua bảng 19

Bảng 19: Hiệu quả chế phẩm phòng trừ bệnh rễ

theo biện pháp sử dung

“Từ xố liều bằng 19 có thể nhận thây rằng: Việc xử lý chế phẩm đã làm giảm: tý lệ nhiễm bệnh vẽ trong cả hai vụ xuân và he the ở cả hai địa điểm được thử

nghiệm Trong vụ xuân việc xử lý chế phẩm làm giảm ty le nhiễm bệnh 9,6-

13.3% tai Gia Lâm và 119-167 tại Yên Khánh Trong vụ hề thủ tại Gia Lâm

mức độ giảm là 6,¡-10,9% Kết quả do giảm nhiễm bệnh nên nang suất lạc ở các

điên tích được xử lý tang 0,8-1,6 tafha & Gis Lam vb 163.4 tạ/ha tại Yên Khánh

trong vụ xuân và Q.9-1,8 tạ/ha trong vu hề thủ tại Gia Lâm, Trong các biện pháp

ở lý tì biên pháp xử lý bằng cách rải vào đất trước khi giếo có hiệu quả tốt nhất tâm giảm tý lệ nhiềm bệnh cao và dé ;hục hiện, đơn giản đề làm trong điều kiện

sản xuất ở nông thôn 3 Đánh giá tác dụng duy trì của chế phẩm phòng trừ theo (hủi gian: Ở các đăng trồng lạc chuyên cát

gây bệnh ở các vụ nổi tiếp nhau Đề dánh

sinh trừ bệnh rễ từ tân xử lý rước chúng

hè thụ trên hai loại đấu, ĐẤU đã dược xử lý chí

tý vào vụ trước (vụ xuân) Kết quí của Thú tế

th nan: bệnh hại rễ lướn tồn tại trong, đất

tác dụng duy trì của chế phẩm vi hành thử nghiệm tại Gia Lâm vào vụ

phẩm vụ xuân và đãi chưa được xử

Trang 27

Bảng 20: Tác dụng duy trì của chế phẩm phòng trừ bệnh rễ E

Neng sudt (taiha) | ĐẠI chưa Dat da i Ị bị eee ae sel |_| sly 1 Khêng xử lý 17.0 12] Xử lý trưi 18.8 6 |

Qua số liệu bảng 2Ô có thể nhận thấy ring bien pháp xử lý chế phẩm rải

trộn vào đất làm giảm bệnh hại rẻ cây lạc Tuy vậy cũng c2 thể thấy tác dụng của

hế phẩm xử lý từ vụ trước, không duy uì tiếp được đến vụ sau được biểu hiện

ằng tý lệ nhiễm bệnh giảm rất ïI giữa đất đã được xử lý vụ trước và đất chưa được xử lý Việc xử lý vào đầu vụ ngay trước khi gieo đã mang lại hiệu quả cao làm

giảm bệnh hai rễ và góp phẩn lâm giảm tổn hại năng suất lạc trong sản xuất TRÙNG CHO PHÒNG TRỪ SINH HỌC SAU

VỊ NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TUYẾT

HAI CÂY TRÔNG VIỆT NAM:

Day 1a van để mới của để tài KHCM-02-07B nhằm đa dạng hoá các chế phẩm sinh học bảo vệ thực vật trong nông nghiệp Trong 2 năm 1999-2000 mục tiêu chính cũa nhánh để tài là:

- Phân lap, tuyển chọn cá

ứng tiên chuẩn phòng trừ sinh học

Sản xuất chế phẩm BPN (chế phẩm tuyến trùng ký sinh và gây bệnh côn

trùng) để phục vụ sản xuất,

- Thữ nghiệm khả nang diệt một số sâu hại của BEN trong phòng thí

nghiệm và trên đồng ruộng Sau đây là tóm tất các kết quả đạt được:

chủng tuyển trùng có khả năng diệt sâu hại đáp

1 Kết quả điển tra phân lập EPN:

Việc tìm kiếm các chủng bản địa có đếm năng cho PTSH luôn được quan

tâm ở bất kỳ quốc gia nào Mặc dù nấu hết các loài tuyến trùng BPN đều có tiểm

năng phòng trừ sâu hại nhưng hiệu lực điệt cên trùng của các loài rất khác nhau, thậm chí khác nhau giữa các chủng trong cũng một loài Vì vậy việc điều tra phái hiện và thu thập các chẳng loài của nhóm tuyến trùng này có Ý nghĩa quan trọng sau:

sự Có Inật và phi N rong tự nhiên -_ Duy trì bảo tồn EPN như một nguồn điện địch tự nhiên

~ Thủ thập và nhân nuôi để xác định khả năng phòng trừ sinh học

-_ Cung cấp vật liệu ban đầu để sản xuất sinh khối lớn phục vụ cho phòng

trừ sinh học

Với mục đích trên đây, chúng tôi đã diều Ira EPN tại một số vùng địa lý,

khí hận khác nhau tại hơu S00 địa điểm thuộc 38 nh ở nước ta Đã phân lập được

Trang 28

33 ching EPN, trong đồ có 22 chủng thuộc gidngd Steinenema va 1} ching thuộc giống Heterorhabdiis

Tất cả các chúng EPN bên đây dang được duy trì sống và nhân nuôi liên

tục tại Viện xinh thái và tải nguyên sinh vật

Từ thực tế điều tra phản lập tuyển trừng ở Việt Nam cũng đã xây dựng và hoàn thiện quy trình: phân lập IPN từ đất (Nguyễn Ngọc Châu & Lại Phú Hoàng,

2000) &

2 Nếi quả nhân nuôi tuyén trang:

Việc nhân nuôi và duy trì các chủng uyến trùng dược phân lập ở Việt Nam:

nhằra xây đựng sưu tập EPN phục vụ cho các nghiên cứu thử nghiệm Và tạo nguồn

vật liệu ban đầu cho các cơ sở sẵn xuất thuốc sinh học hiện tại

“Từ 33 chủng tuyến trùng được phân lập ở Việt Nam, đã tuyển chọn nhân quai va duy trì thành công 8 chủng tuyến trùng cho các nghiên cứu và thử nghiệm

khác nhau, Đây là các chủng có khả năng sinh sản tốt và có thé nhân nuôi phân

Ang bướm sáp lớn (Galloria mellonella) Trong số các chủng nhân nuôi thì các chủng H-MPII, H-MT3 cho sản lượng ấu trùng cẩm nhiễm (1)s) cao nhất

(180-210.000 1JS) và vào loại cao nhất so với các chủng trên thế giới đã biết, các chủng khác tuy thấp hơn nhưng cũng đáp ứng tiêu chuẩn về mặt nhân nuôi của một chế nhẩm sinh học

3 Phân loại tuyến trùng:

Do tính đặc thù của tuyến trùng ý sinh gây bệnh cho côn trùng đa số là các

kải dồng hình, không thể đựa trên các đặc điểm hình thái trung thường để giám định đến loài mà cẩn phải sử dụng bố sung các kỹ thuật hin đại như kỹ thuật

phân tử và kỹ thuật kính hiển vị điện tử quét để phân loại chúng

Từ cúc chủng phán lập được từ Việt Nam bước đấu đã hợp tắc với các Phang thi nghiệm trên thế giới và trong nước tiến hành phân tích DNA để, phân toại tuyến trùng Hựp tác với Dại học tổng hợp Gent, Vương quốc Bì sử dụng kỹ thuật hiển vị điện tử (SEM) và kỹ thuật phân tử (CR-RFLP) xác định được 3 loài tuyến trùng mới cho khoa học là Steirerneina loei (chủng S-TK I0), Šteinernerna G10) và SIcinernerra sangi (chủng S/TX1) Đã hợp láu với Viện công nghệ sinh học sứ dụng kỹ thuật PCR-RFI,P phân tích DNA xác định được loài tuyến trừng mới cho khoa học thuộc giống Heterorhabditis là Heterorhabditis p:sungensis (chủng [MP] 1), Ngoài các chứng để được phân lập vã nhận nuôi trong phòng thí nghiệm: Tuyến trùng học đã hợp tác với Viện Tuyến trùng học Munset, CHLB Dic xde dinh 7 loài khác bằng phương pháp phan tích

Trang 29

Cho đến nay trên thể giới đã phát hiện được hàng tram chủng EPN thuộc 30

a giống Steinemmerna và 10 loài giống Heterorhabdiis, Với kết quả cơng bố 4 lồi mới cho khoa học và khá năng sẽ công bổ 3-4 loài mới khác trong thời gian tới, Việt nam sẽ thành một trong những trung tân" nghiên cứu và sở hữu nguồn vật

tiêu EPN trên thể giới Kết quả này không những phục vụ cho PTSH ở Việt Nam

mà còn là đóng góp quan trong cho Tinh wae nay của khu vực và thế giới

4 Phái triển công nghệ sẵn xuất chế phẩm EPN-

Nghiên cứu sản xuất quy mở lớn cáu chế phẩm EDN cho phòng trừ sinh học là một tong những mục tiêu quan trọng nhằm cũng cấp các chế phẩm cho các thử nghiệm phòng trừ trong phòng thí nghiệm tiến tối thương mại hoá Đã nghiên cứu

và hồn thiện cơng nghệ sẵn xuất chế phẩm sinh học tuyển trùng BPN theo công

nghệ in vivo và in vito (Sơ đồ 2)

Đây là quy Hình công nghệ rất thích hợp với quy mỡ sảu xuất nhỏ trong điều kiến của Việt Mam Quy trình cảng nghệ sắn xuất các chế phẩm sinh lọc

EPN hang in vive dược chuyển giao cho So Nong nghiệp tỉnh Ninh Thuận oé san

xuất chế phẩm IEPN cho phòng Hữ sâu hại nho đã được triển khai và thu được kết

quả bước đầu tốt

Để tạo nguồn nguyên liệu cho nhắn nuôi theo công, nghệ ìn vivo để tài cũng

đã nghiên cứu hoàn thiện "Quy bình nhân nuôi bướm sap lớn” trong điều kiện viet Nam

Với công nghệ trên trong năm 1999 để tài đã sản xuất quy mô phòng thí nghiệm 300 lít chế phẩm sinh học từ 4 chúng EPN có triển vọng nhất dã được nhân nuôi, tuyển chọn tong số 13 chủng EDN đá được phân lập từ Việt Nam

(bang 21)

Các chế phẩm sinh học được sáo xuất đáp ứng tiêu chuẩn của thuốc sinh bọc tuyến trùng như:

Phổ điệt sâu rộng, hấu hết các chúng đều có khả năng điệt từ 3-10 loại

sâu hại khác nhau

~ Khả năng sinh sẩn iốL, cho sản lượng thủ hoạch cao

TĐể đàng, sẵn xuất sinh khối ;ớn bảng công nghệ Ín vivo và in vitre

Có khả năng báo quản lâu Q3 2-6 tháng) trong điểu kiện Đình thường,

không cầu bảo quần lạnh, Đây là một trong, những ưu thể quan trọng Của

các chủng BPN bin dia ela Viet Nar

Trang 30

| MOLTRUGNG NHAN TAO

| monoaxente hose axenic | c—

— ` a

last instar larvae |

raceme tr —

_[ NHÂN 6 18:12 NGAY AN VIVO! | |

Trang 31

Bang 21; Két qua sin xuất các chế phẩm sinh học EPN

| Tên chế phẩm | Khoiluong | Tiêu chuẩn -

sink hac | (lit) nổng độ

(J4)

100 —

xi0

5% Thử nghiệm đánh giá hiệu lực diệt sâu hại của các chủng

EPN phán lập từ Việt Nam:

a) Thử nghiệm mong phòng thí nghiệm

Từ năm 1997-2000 đã tiến hành hàng loạt thử nghiệm trong phòng thí nghiệm nhằm xác định phổ gây chốt, hiếu lực gây chết và Ï.Cạ, của 16 ching BPN trếo 26 loại sâu hại phổ biến ở Việt Nam

Các kết quả thử nghiệm hước đầu đã xác định được 8 chủng có khả năng diệt 10 loại sâu hại tốt: hiệu lực gay chế: từ ó3 10096 Hầu hết các chủng EPN đều có phổ gây chết rất rong từ 8 chủng trên đây đã xác định được 25 chỉ tiêu L,C«o trên 25 loại sâu hại chủ yếu

Từ kết quá xác định LLC¿, cha thay hau hết các chủng EPN có hiệu lực gay

chết rất cao (LC2, nhỏ hơn 100) đổi với LŨ loại sâu hại là sâu khoang (Spodoptera litura), sau keo da lắng (S exigua), sau xám (Agrotis ypsilon), sâu tc (Plntella

xylostella), sâu xanh bướm trắng (Piciis rapae) sâu xanh thuéc 14 (Helicoverpa

asulla), sau xanh (Helicoverpa armigera), sâu cuốn lá dau tuong (Lamprocema

indicata), sau cud 1s bong (Sylepa flava) vi bo hung nâu (Adoretus sp.) Ngoại

trữ sâu khoang, sân xám và bo hung màu, vor, hu het cde loa: sin khde déu 06

LC, tuomg doi thấp, cho thấy higu luc pay chét cla ede ching BPN tốt và én định bị Kếi quả dai nghiệm sử dựng ĐỀN phòng trờ một số tâu hại cây o ơng ngồi đồng ruộng

Lần dầu tiên các chế ph ø BPN được sứ dựng để thử nghiệm diệt sâu hại

ngoài đồng ruộng trên một số cây trồng Cúc loại sâu hại trên các cây trồng này

Trang 32

Kết quả thử nghiệm hiệu lực gây chết của 3 chủng BPN để thử nghiệm

phòng trừ 5 loại xâu hại ngoài đồng ruộng trên một số cây trồng (bằng 22) đếu đạt mức từ trung bình đến tốt (50-872) Tuy nhiên, hiệu lực phòag trừ cả 3 chung

EPN đối với sâu tơ hai cây trồng chán cao so với kết quả thử nghiệm trong điều Kiện phòng thí ¡phiệm tuyển giao công nghệ: n giao công, nghệ

nho cho Chỉ Cục BVTV tỉnh Ninh Thuận

0] xưởng pilot sẵn xuất chế phẩm sinh học EPN: quy mỏ sẵn xuấ 300

HrUkg chế phẩm Quy mô áp dụng cho PTS:I: 5-10 ha

-_ˆ Quy trình công nghệ sẵn xuất DPN

và sử dụng EPN tong FISIT sâu hại 7 Kết quả nổi bật của nhánh để tài aie ï guá chính Thành lập bộ sưu tập tuyển trùng EPN sống của Việt Nam phục vụ cho PTSH sâu hại 2

Phân lập và công bổ 4 loài mối cho khoa học bằng kỹ thuật phân tử,

+ Nghiên cửu thành công chế phẩm: sảnh học BIOSTAR phòng ud mat so

sâu hại ở,Việt Nani,

~— Chuyển giao công nghệ củo Jặt nhường

Trang 33

bj Trink do cng nghé eta ket que

~_ Về vật liệu EPN: Đại tiêu chuẩn thế giới

TT”! `” Tên TRR Ge quan | Quy mô và | Hiểu quả [” Pháp lý |

| tarra | diabinép | kinh tế | cho việc áp

: = - đụng _—| - đựng

[ 1 [Rei chế phẩm trừ | Viện sinh |4 ba, Hà| Tốt Có thểi Chưa dang

| loại sâu hai |

| 4 ¡ Giá thành |

| — Bộ sưu lập tuyến - cat | Rong còn ở Đạt tiêu | Chưa 2ml ` a | trùng cho PTSH chuẩn ký bản

- - - - | — quyển _—_

| JvieEPN_ | Sha _ | _._ quyên -

| 4 là» trình sản xuất ole 100 kg/nam ¡ Dat tiếu | Chưa đăng

bướm sáp lớn cho v Sf- | chuẩn ký — bản

Tiếp tục công việc nghiên cứu của giai doạn tước, Irong 2 năm 1999-2000 nhánh để tài đã tiến hành nghiên cứu với mục tiêu hồn thiện quy trình cơng nghệ

sẵn xuất chế phẩm: BỊ ong dung of ế phẩm Bt và phôi hợp với các chế phẩm khác

Két quả công tác nghiên cứu đạt dave:

1- Hoàn thiện quy trùnh công nghệ sản xuái chế pham Bt

TT Chọn giống cho sản xuất Dé Sn định cho sẵn xuất chế phẩm, giống có hoạt tỉnh cao có tính quyết định Trong số hơn 300 chủng Bt phân,

đã uyển chọn được 4 ching co heat tinh diệt cao để đưa vào sản xuất, Hú là

chủng có ký hiệu: NA12-3, K- 106, HRI, B9

Trang 34

1.2 Tối tại môi trường xản xuất: Từ 9 môi trường thí nghiệm đã chọn được

1 môi trường thích hợp eho lên men, môi trường số 6 bao gồin: Bột đậu 15g, bot

cá lƯg, bội khơ lạc lŨp và các muối ví tượng Số lượng bao Ny dat 4, 38x I0° bào

tử/m!

1.3, Chon thong số cha quá trình lên mien và dụ: hồi sản phẩm; Mỗi một chủng BL đều đồi liỏi các điều kiện lên men thích hợp khác nhau Đối với chủng số 2 cần phải tuân thủ theo các thong sẽ sau: pH sau khử trùng 6.8-7,2; trong suốt quá trình lên men có rhể duy tì pH 7.0 Nhiệt độ tối ưu 28%C Tỷ lệ thông Khí 11:1; DO = 50-1996; tốc độ khuấy: 250 vòng/phút, Thời gian lên men 48-72 giờ 1.4 Thành lập các công thất: chế ph thể tích bằng cách lì tân), sấ) định hoạt tính chế phẩm 2 đang chế phẩra

Trang 35

So dé 3: Quy tình công nghệ sẵn xuất BỊ Chế phẩm bột thấm nước Sấy phun > Bao gồi, nhãn B€CNSeie Ống ang đông khô - + Ống thạch nghiêng Giống cấp 1 (Bình tam giác) | Giống cấp 2 (Nỗi lên men Biofto HI-61) i 4

Trang 36

2- Ung dung ché phdm Bt va phoi hợp với các chế phẩm khác ngoài đồng ruộng: Ì Nhánh để tài đã'chụ virus cơn trùng của Viện ngồi đồng ruộng n giao chế phẩm và công tác với nhóm nghiên cứu vệ thực vật dễ thử nghiệm trong phòng và ứng dụng, 3.1 Kế quả diệt sâu trong phòng tí nghiệm của chế phẩm: (Đối với sâu (e-Plutella xylestella, Bảng 23: Hiệu lực trừ sản tơ của chế phẩm BI (Viện Hảo vệ thực \ Chế phẩm 7 Agày theo đội và 5 = bef rung Quốc 10,34 | 40,58 Không chết | Khéng chết 3 } s49 | 62,66 9/22 [9517 KHCN:02-07B) : a

Nhan xét: Sau 3-4 ngay thử nghiệm, chế phẩm Btl đạt hiệu quả diệt sâu cao

(91-95%), trang khi đồ chế phẩm của 1rung Quốc chỉ đạt hiệu quả diệt sâu ở ngày thứ 2 thấp (40,589) và không có tác dụng diệt sâu ở ngày thứ 3 và thứ 4

2.2 Nới quả ngoài dẳng rưộng

- Địa điểm ứng dụng: HTX Yên Nhân, xã Tiền Phoag, Mê Linh, tỉnh Vĩnh Phúc - Qui snd: 5 ha - Kết quả: Chế phẩm BTL Đối chứng là thu 3 ngày phun tỷ lệ điệt sâu đạt 43,77% c trừ sâu hoá học đạt 43,8%

Nhận xét Thuốc phún vào đấu tháng 11, mưa rất tớ

khong được như raang miốn Ty Vậy số với thuốc trừ

BTI tương đương

Ung dung phe hợp chế phẩm B( với NPV trên đồng ruộng HTX Yên Nhân, xã Tiểu Phong, Mê Linh, Vĩnh Pluíc (chu thấy ở bang 24)

à kéo đài nén kết quả heá học thì chế phẩm

Trang 37

Bảng 24: Kết quả ứng dụng BÀ và hôn hop V-Bt

trừ sân rau trên đồng ruộng

| —Kargua đại lược | Quinnô, dia chi dp | Hiéu quá kinh tế

Ché phain Bel 43.77% Sli HTX Yen Nhan | diet sâu tương Ché phim V-Pt ' G11 3% | Tiên Phong đương với thuốc

Trong năm 2000 nhánh để tài đã bái đầu chuyển giao quy trình công nghệ thích ứng trong sẵn xuất chế phẩm Bù tại Chỉ Cục BVTV Vĩnh Phúc, cần tiếp túc

nghiên cứu để ổn định và nâng cao hoạt tính diệt gâu của Br hơn nữa để tiến tới

sản xuất đại trà cho nhụ cầu sản xuất rau sạch lại địa phương

VITL PHAN LAP VA TUYEIN CRON MOT SO CHUNG BT TU DAT TRONG LUA KMIU VEC HA NOE

Sử dụng chế phẩm BL có chất lượng cao phòng trừ sâu hại có tác dụng giảm

thiểu thuốc sâu hoá bọc nhằm đảm bảo mới sinh và sức khoẻ công đồng Tuy nhiên, đo tính đặc thù về sinh thái nên việc phân lập các chủng Bt và phát hiện các chủng chứa gen độc tổ có vai trò quan trọng trong nghiên cứu phất triển sản phẩm

Phương pháp nghiên cứu:

1 Môi trường dàng trong nghiên cứu:

Khi trùng 1 au/30 phút

L2 Môi trường phân lập và lên men - MT2 (8/)

Trang 38

Pepton 5.0, Tripton 3.0, Cao me

CH, COON, 0,5, pH 7

Khử trùng ở Ï auw/30 phút

1.3, Môi trường xinh bào tử MỸF4 (6/1)

Giá để 106, Nước miẫm 20, Dường kính:

1.5, MnCl, 0,005, Na, HPO4 1,0,

2 Phần lập:

Mẫu đất từ các khu vực ruộng lúa Ha Nội (Mê Trì, Thanh Xuân,

Xá) được tiến hành phân lập ngày trang ngày mẫu Vị sinh vật

một gam đất được Tàu giàu trên 100 mì môi trường M12, ớ 32 "C, lắc ở tốc độ 220 võng/nhút sau 72h Xử lý nhiệt độ 80" C/LS phút địch sau lên men, 9.05 mì dịch sau xử lý được cây gạt trên môi trường thạch đĩa (MT2) Giữ 24h ở 32° C tiến hành quan sắt khuẩn lạc, nhưộm và sói lể bào Các khuẩn lạc có đạc tính giống vì khuẩn TM được cấy truyền và giế trên môi trường giữ giống cho các nghiên cứu tiếp theo ‘au Diễn, trong

3 Đánh giá tỷ lệ sinh bào tử của các chẳng lựa chọn:

chúng lựa chọn được nuôi cây lặc trên môi trường M'I3 sau 72 h và

địch sau lên men được gật ở 80” C trong 15 phút Tiến hành đếm số lượng khuẩn

lạc của dịch sau xữ lý nhiệt 4 Đăng PCR để phát hiện chúng Bt mang zen doc dé bié

4.1 Chuẩn bị AND mỗi: Dũng 13 AND mỗi cho các gen Cry gây độc cho côn trừng đủ biết LepiALep.l Akap2B, DipIA, Dip.LB, Dip2A, Dịp2B

€Col,LAÁ, Col.18, Col.2A, ColL2B

4.2 Chuda bi AND cho PCR, Dịch lên men các chẳng BL sau 24 h được ly tâm và tiến hành pha thành tế bào và tách, :inh sạch AND theo phương pháp đã được mô tả, Sử dụng cnzym VNUBioTad 1U/micro lít chế phẩm của Trung tâm CNSH-Đại học Quốc pin Kết quả: 1 Phân lập:

Sau khi thủ được khuẩn lạu trên môi trường thạch, chọn các khuẩn lạc

lớn (0,2-0,4cm) có mép răng tựa, mt nhậu Tiến hành chọn các khuẩn lạc với các

tế bào vỉ khuẩn hình que gram (L) Kết qua thụ được trong bảng 25

Trang 39

Bảng 25: Kết quả phân lập các chủng vĩ khuẩn có khả năng diệt côn trùng Nguồn phần lập Địa điểm lây mẫu | So chúng vi khuẩn Đất Hần —— 2 —— Mé Tri-Ha Noi Bt I, Br 2 : 2 Br 3, Bt4 Thanh Xuan Nam | Bt 5, BL6, BL7 _ |Hà Nội _ Bị 8, BL9, BH — NT Bt 11, Br 12 20 Bt 13, Bi 14 v == Bí 15, BÈT6 TL—— Lại Xá-Hà Nội Bị L7 1 Bris

Để nhận được pm BL từ mẫu đất và bùn thu được, việc làm giầu trên môi trường MT2 ưu thế tho các chủng vi khuẩn sinh bào tử, Bước xử lý nhiệt có tác dụng loại các vi sinh vại không sinh bào tử, Việc kiểm tra các đặc tính khuẩn

lạc và tế bào nhằm thu được các chủng Bì mong muốn Kết quả trên cho thấy từ

hàng trăm các chủng vị khuẩn có bào tử chúng tôi đã chọn được 18 chủng dùng

cho các nghiên cứu tiếp theo

2 Đánh giá tỷ lệ hình thành bào tẩ: Kết quả kiểm tra tỷ lệ sinh bào tử của các chủng BỊ mới phân lập được ghỉ ở bảng 26

Trang 40

Kết quả bảng 2 cho thấy số lượng bào tử không đồng đến giữa các chủng

nghiên cứu và thay đổi từ 9,! x 1° đến 12 x 10

3 Tim các chúng mang gen độc tố đã biết bằng PCR:

3.1 Điều kiện phẩm ứng: Sau quá trình thử nghiệm Kết quả cho thấy điều kiện để phát hiện gen độc tố bằng PCR cho phản ứng 30 micro lít như san: Taqhfer 210 x 3p

ANTP 25M 0,244 AND mới 50 ng

AND Bt Sul

Nước đủ 30}

Chu trình phản ứng: 94 C : I phút; 48°C | phút; 72°C: 1 phút: lập lai 30 cho kỳ Mẫu thu được sau phan ing PCR lay IO4l chạy trên gen agarose 1%,

3.2 Kết quả kiểm tra PCR v6i các chẳng Bì mới phôn “4p:

Qua kiểm tra PCR thấy trong 18 ching Bt méi phân lập thì chỉ có 12 chủng trang gen độc t6 đã biết Trên gel A nhánh đề tài chọn đối chứng là chủng Bt đã biết mang get Cry †V, Trên gel B chúng tôi chọn đối chứng là chủng BI đã biết mang gel Cry I Như vậy tong 12 chủng Bì thì các chúng 2,3/4,6,7,8,9,10 mang gel Cry! với sản phẩm PCR là hai băng AND có kích thước giống với ching Bt mang gen Cry! đã biết long khì đó các chủng BỊ 5, 11,13,17 mang gen Cry IV với sản phẩm PCR Ia hai băng có kích thước guống với chủng Bt mang gen Cry IV đã biết

Như vậy dựa vào các nghiên cứu trước đây có thể thấy được các chủng mang gen Cry 1 sẽ có khả năng gây dộc với Lepidoptera cồn các chủng mang gen Cry TV có khả năng gây độc cho Diptera Tuy nhiên để khẳng định điều này cần phát tiến hành xác định hoạt lực diệt côn trùng trong các nghiên cứu tiếp theo với các chủng Pịt này,

Tám lại từ các kết quả trên chúng tôi sơ bộ có kết luận như sau:

1 Từ các mẫu đất thu được từ ruộng lúa Hà Nội chúng tôi đã phân lập dược 18 chúng Bt

2 Trong 1 chủng BỊ, bằng phản ứng PCR chúng tối thấy 8 chủng mang

gen Cry I và 4 chủng mang gen Cry IV

3-1 Nghiên cứu phái hiện các chủng Bt mang gien độc tố diệt sâu cao dt PCR) - Với kỹ thuật PCR dã phát hiện được 2 chủng Bt có ký hiệu M24, M30 có độc tính điệt sâu cao (hiệu quả trừ sâu xanh, sâu tơ từ 96.100% sau S6 h xử lý) Nhánh đẻ tài đã tiến hành nghiên cứu đạc diểm hình thái, nuôi cấy, sinh lý, sinh hoá cũng như các yếu 16 ảnh hưởng đến mới trường nuỏi cấy và khả năng phát triển và sinh bào lữ của 2 chủng vi khuẩn M24, M3O như độ pH, nhiệt độ v.v

Định dạng
Số trang	47
Dung lượng	6,95 MB