BAO CAO TONG KET DE TALNGHIEN CUU KHOA HOC
Cấp quản lý : BỘ Y TẾ
NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH SẢN XUẤT THUỐC
AMPELOP TỪ CHE, DAY (Ampelopsis cantoniensis
Planch Vitaceae) DE DIEU TRI LOET DA DAY -
HANH TA TRANG VÀ TIẾP TỤC ĐÁNH GIÁ
TÁC DỤNG LÂM SÀNG CỦA THUỐC {1998 - 2000)
—
Chủ nhiệm để tài : G5 TS PHAM THANH KỲ
Cơ quan chủ trì: TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI
Năm 2001
15.61 - a
HAI
Trang 2chính : GS TS Pham Thanh Kỳ TS Nguyễn Thị Lai
‘Ths, Nguyễn Huy Văn DS, Bao Dinh Khoa
DS CKI, Nguyễn Thị Lam Ths Nguyễn Ngọc Chiến
DS Nguyễn Quốc Huy Ths Nguyễn Kim Trung, BS Phan Quốc Hồn
GS TS Nguyén Khánh Trạch
BS Mai Minh Huệ
BS Nguyễn Trường Sơn
"Tổng kinh phí được duyệt :
"Tổng kinh phí được cấp : 134 tr
Trang 3I ĐẶT VẤN ĐỀ
Loét da day hành tá tràng là một bệnh khá phố biến trong cộng đồng, ở nhiều nước tỉ lệ mắc bệnh khoảng 10% dân số, ở Việt Nam khoảng 6 - 7% [2, 5, 8, 9] Bên cạnh dùng thuốc cĩ nguồn gốc hố dược việc nghiên cứu những bài thuốc, cây thuốc sắn cĩ trong nước để điều trị bệnh loét dạ dày - hành tá tràng luơn được nhiều nhà khoa học và sản xuất dược phẩm quan
tâm
Chè đây là một cây thuốc chưa được gh¡ vào đanh mục “Những cây
thuốc và vị thuốc Việt Nam" của GS TS Đỗ Tất Lợi [4| Nhân đân địa
phương miên núi cĩ cây chè dây mọc hoang như Cao Bằng Lào Cai, Hà
Giang thường nấu nước uống như nước chè Bệnh viện Y học dân tộc tỉnh
Cao Bing và bệnh viện Y học dân tộc quân đội dùng chè dây đế sắc hay hãm uống chữa đau đạ dày Chúng tơi đã tiến hành nghiên cứu cây chè dây về mặt
thực vật, thành phần hố học, độc tính, một số tác dung sinh học và đưa ra chế phẩm AMPEI.OP điển trị loét dạ dày - hành tá tràng ớ giải doan | (R) đã
được nghiệm thu Để cĩ chế phẩm đưa ra phục vụ rộng rãi ở cộng đồng,
chúng tơi tiến hành nghiên cứu giai đoạn 2 (RD) với tên đề tài : "Nghiên cứu
quy tình sản xuất thuốc AMPELOP từ chè dày (Ampelopsis cantoniensis
Planch - Vitaceae) để điển trị loét dạ đầy - hành tá tràng và tiếp tục đánh giá số KHYĐ - 02 - 17 tác dụng lâm sàng của thuốc." cĩ n
1- MỤC TIÊU CUA DE TAI
Theo đúng đề cương đã đăng ký chúng tơi thực hiện 3 mục tiêu : 1- Nghiên cứu sản xuất thuốc AMPELOP từ chè dây
2- Tiếp tục đánh giá tác dụng lâm sàng của chế phẩm
3- Hồn thiện hồ sơ khoa học của chế phẩm AMPELOP để xin phép Bộ Y tế cấp số đăng ký lưu bành
Trang 41II- NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ VẢ PHƯƠNG PHAP NGHIEN CUU
3.1- Thử tác dụng diệt xoắn khuẩn Helicobacter pylori (HP)
-31.1- Chế phẩm thử :
Bột AMPELOP chiết từ chè đây (ký hiệu KA) pha thành dung dịch 1% (10mg/1ml)
3.1.2- Mơi trường và trang thiết bị nuơi cấy
- Mơi trường canh thang Trytone Soya broth đùng để bảo quần và vận
chuyển các mảnh sinh thiết Cơng thức : Pancreatic Digest of Casein Papaic Digest Sodium chloride Dibasic Potassium phosphate Dextrose i Nước cất vừa đủ 1000ml
Cân 30g mơi trường bột Trytone Soya broth hồ tan trong nước cất cho
đủ 1000ml, điều chỉnh pH = 7,3 + 0,2, chia thành các ống nhỏ hấp tiệt trùng
& 121°C trong l5ph
- Mơi trường thạch máu (Helicobacler Agar Stacker plates) đo hãng
Trang 5Các khoanh giấy đã tẩm sẵn kháng sinh chuẩn Amoxicilline (30g) của hãng BBLẺ cịn hạn sử dụng
Các khoanh giấy đường kính 7mm đã tiệt trùng để tấm chế phẩm thử
Kũt Pyloritek Test SERIM (USA) để chẩn đốn men urease hoạt động
của Helicobactcr pylori trong mảnh sinh thiết của người mắc bệnh viêm loét
đạ dày - tá trầng (DDTT) 3⁄1.3- Vý khuẩn thử:
- Vi khudn Helicobacter pylori (HP) duge phan lap tir mau bệnh phẩm sinh thiết bằng nội soi của bệnh nhân mắc bệnh viêm loét DDTT đang hoạt động tại phịng r
Í soi và nuơi cấy tại khoa Vì sinh vật, bệnh viện Trung
ương quản dọi 108
- Tiêu chuẩn mẫu sinh thiết : Mẫu phải lấy từ hang vị dạ đầy của bệnh
nhân khơng phán liệt giới, lứa ruổi, cĩ viêm loét DDTT đang hoạt động, khơng dùng kháng sinh trong vịng 6 tháng viêm loét khơng phải do đùng
các chất none - sieroid, thử clortcst cho dương tính, đồng thời ghí rõ họ tên, tuổi cla bệnh nhân lấy mẫu Bảo quản trong ống nghiệm cĩ mơi trường canh thang Trylone Soya broth và phải nuơi cấy trong vịng 120 phút sau khi lấy 3 4- Phương pháp nghiên cứu ›
œ- Thữ sơ bộ khá nãng ue chế FỊP của chế phẩm bằng phương pháp ức chế
rực tiếp:
Mẫu sinh khiết được nghiền nát trong mơi trường canh thang Trytone Soya broth, lấy mơi trường cĩ vi khuẩn HP này cấy ria lên mơi trường Helicobacter Agar Lấy 0,5ml dung dịch chế phẩm thứ láng dễu lên mặt đĩa
mơi trường đã cấy HP, nuơi cấy ở 37°C trong tủ ấm cĩ 10% khí CŨ; hoặc
trong túi Campy - Pak
Song song làm đĩa mẫu đối chứng khơng cĩ chất thử
Trang 6
b- Xác định nổng độ cĩ khả năng úc chế vi khuẩn FÍP của chế phẩm thứ
Làm kháng sinh đồ theo phương pháp khuếch tán trên mơi trường (phương pháp Kirby - Bauer) : dùng micropipet hút lượng dung dich chứa các chất định thử cĩ nồng độ định trước nhỏ lên các khoanh giấy cĩ đường
kính 7mm đã được tiệt trùng
Dung dich Ampelop cĩ các hàm lượng : 200, 150, 100, 75, 50ng
Các đĩa mơi trường được láng déu vi khuản HP đã phân lập với nỗng độ xấp xï IO* vị khuẩn / Iml Sau khi đặt các khoanh giấy tấm các chất thử trên được nuơi cấy ở 37°C trong tủ ấm cĩ 10% khí CW hoặc wong ni Campy
- Pak Đọc kết quả sau 5 ngày kể từ khí nuơi cấy
Dùng các khoanh giấy tắm kháng sinh chudn Amoxicillin 30g lam đối chứng Tất cá các thí nghiệm đều được làm lại 3 lần
Quy định đường kính vịng ức chế của hãng BBLF với mẫu chuấn dối chitng Amoxicillin (Amo C-30) 30ug như sau : - Đường kính $ > 18mm : nhạy cắm (S) - Đường kính ÿ = 14 - 17mm : trung gian (D) - Đường kính ÿ < L3mm : để kháng (R) 3.2- Nghiên cứu sẵn xuất thuốc AMPELOP từ chè dây 3.2 1- Nguyên liệu : Chè dây mua tại Cao bằng đạt tiêu chuẩn cơ sở (TCCS) -.22- Máy mốc, thiết bị ; - Bình ngấm kiệt
~ Nồi cất thu hồi dung mơi
Trang 7- Tủ sấy giĩ nồng
- Thùng pha chế Inox
3.2.3- Phuong pháp nghiên cứu :
- Chiết xuất hoạt chất trong chè dây bằng phương pháp ngấm kiệt với
cồn 70%
- Định tính bằng phản ứng hố học và sắc ký lớp mong dũng bản
mỏng Silicapel GF›„, tráng sắn của hãng MERCK, hệ dung mơi khai triển : Toluen - Ethylacetat - acid formic [5: 6:1]
~ Định lượng [avonoid tồn phần bằng phương pháp cân
- Xác định độ ẩm theo phương pháp của DĐVN II
Thử dọ đồng đéu khỏi lượng theo DðVNIL - Thử độ heo DĐVNII (Thuốc nang)
- Thử độ nhiễm khuẩn theo DĐVNI
- Kiểm nghiệm nguyên liệu đĩng nang : Bột AMPELOP và viên nang
AMPELOP theo tiêu chuẩn cơ sở
3.3- Thứ tác dụng của thuốc AMPELOP trên lâm sàng
‹33.1- Mục dích nghiên cứu :
~ Đánh giá tác dụng của thuốc AMPELOP làm giảm các triệu chứng
lâm sàng của loét đạ day 14 trang
- Đánh giá tác dụng của AMPELOP làm lành vết loét dạ dày hành tá
Tràng
- Nghiên cứu tác đụng phụ của thuốc AMPELOP trong điều trị loét dạ
dầy tá tràng
1.3.2- Đĩï tượng nghiên cửu :
- > 60 bệnh nhân tuổi từ 19 đến 70 tuổi
Nội soi cĩ loét dụ đầy hoặc loét hành tá tràng, hoặc loéi cả hai
Trang 8
Loại bỏ qgiiêp cứu : những bệnh nhân bĩ dỡ thuốc hoạc uống thuốc khơng đây đủ theo quy định
-3.3.1- Phương pháp nghiên cứu -
- Bệnh nhân chọn vào nghiên cứu được làm bệnh án theo mẫu nghiên
cứu, thco đối diễn biến các triệu chứng trước và sau điều trị theo các mức độ
~ Loét dạ dày tá tràng được chẩn đốn và đánh giá qua nội soi trước và
sau điều trị theo : vị trí, số lượng ổ loét, kích thước và tính chất ở loét
- Xác định nhiễm H Pylori bang các mẫu sinh thiết li\ từ vùng hang
vị và được xác định bằng 2 phương pháp
+ Test urease (sử dụng dung địch uc - indol do Viên vệ sinh
dịch tẻ phá chế)
+ Dượng tính (+) : ít H.P chuyển màu san 2h
+ Dương tính (++) : Mức độ vừa, chuyển màu trong vịng 15ph -
2h
© Dương tính (+++) : Mức độ nặng, chuyển mâu trong vịng
15ph
+ Mơ bệnh học : Mức độ nhiễm H Pylori trên các tiêu bản nhuộm Giemsa được đánh giá theo số lượng vi khuẩn trên một vỉ
Trang 9IY- KẾT QUÁ NGHIÊN CỨU
4.1- THU TAC DUNG DIET KHUAN HELICOBACTER PYLORI (HP)
Từ năm ¡983 đến nay các nhà khoa học đã xác định sự cĩ mặt của xoắn khuẩn Helicobacter pylori trong bệnh viêm loét dạ dày tá tràng (DDTT), đã cĩ nhiều nghiên cứu chứng minh HP cĩ vai trị chủ yếu trong cơ chế gày bệnh loét DDTT Vì vậy cần chứng minh xem ché phim AMPELOP sản xuất từ chè đây cĩ tác dung điệt khuẩn HP hay khơng Trong giai đoạn
¡ kiện thử tác dụng này, Gần đây
nghiên cứu trước chúng tơi chưa cĩ đi
khoa Vị sinh vật - Bệnh viện TW Quân đội 108 đã triển khai được kĩ thuật nuơi cấy HP đo đĩ chúng tơi đã làm bổ xung thêm phần thử tác dụng điệt HP cúa chế phẩm AMPELOP (Ký hiệu KA)
41.1- Thử sơ bộ khả năng tức chế HP của chế phẩm
Trang 10
Dung dich KA “Thử nghiệm tắc dựng đc chế lrết ví khuển coaster poe
Hình ¡ : Tác dụng ức chế vi khuẩn EIP của AMPELOP
4.12- Kếi quả thử xác định hầm lượng chế phẩm KA cĩ khá năng dc chế ví
khuẩn !FIP theo phương phần khuếch tần trên mơi irvéng (Phuong phip Kirby
- Bauer)
“Tiến hành theo mục 3.1.4-b, Kết quả được ghí ở bảng 2 và hình 2
Trang 11Hinh 2: Vong v6 khudn cia ché pham KA va Amoxicillin Ghỉ chú: 1: 30ug Amoxicillin TT: 100mg KA II: 200g KA IV: 50g KA Kết luận -
- Chế phẩm AMPELOP chiết xuất từ cây chè đây (Ampelopsis
cantonicnsis Planch.) cĩ hoạt tính ức chế vi khudn Helicobacter pylori được
phân lập và nuơi cấy từ các mẫu sinh thiết của bệnh nhân cĩ viêm loét da day - tá tràng đang hoạt động
- Hầm lượng chất cĩ khả nãng ức chế (nhạy cảm) vi khuẩn HP của chế
phẩm AMPELOP (KA) là I50ng so với mẫu kháng sinh đối chứng Amoxicilin 30pg theo phương pháp khuếch tán trên mơi trường (Phương
pháp Kirby - Bauer)
Trang 1242 KEY QUA NGHIEN CUL QUY TRINH SAN XUAT VIEN NANG AMPELOP TU CHE DAY
4.2.1- Quy trình sẵn xuất bột AMPELOP
42.1.1- Đặc điểm nguyên liệu :
- Lá chè đây đạt tiêu chuẩn cơ sở, tán thành bột (độ mịa qua cổ rây
O.18mm)
Fihanol 70° TCVN DĐVN HH tậpTH : Tr 132
- Gelatin TCVN (632 - 70) DDVN tap 1; Tr 291
- Than hoạt _ TCVN (836 - 70) DĐVN tập F ; Tr 528
+2.1.2- Gíc giai đoạn xẵn xuấi
Quy trình sản xuất bột AMPBLOP được thực hiện theo so dé I:
Nguyên phu liệu Các giai đuạn Nội dụng kiem tra
Bội được liệu Ni Z
Ethanol 70° E—> “* Kiểm nghiệm nạ
Trang 13——> Kiểm ưra độ ẩm
|
Đồng gĩi — Kiểm nghiệm chế phẩm
Sơ đồ 1 : Sơ đồ các giai đoạn sản xuất bột AMPELOP
4.2.2- Quy trình sắn xuất viên nang AMPELOP +4-22.1- Cùng thác ¡ 1 viên nang AMPELOP - Tinh cho 10.000 nang Bột Ampelop 0315g 3.150g Lactose 0045 450g Lycatab 0045 450 Cơn PVP 10% vd Magnesistcarat vd Tale vd
4.2.2.2- Đặc điểm nguyên liệu -
- Bột Ampelop đạt tiềư chuẩn cơ sở
- Lactose dat TCVN (683 - 710) DDVN I; Tr 346
- Lycatab đạt tiêu chuẩn nơi sản xuất
- Con PVP dat TC USP 23
- Tale dat TCVN (DDVN II tap 3 - Tr 77)
- Magnesi stearat dat tiéu chudn DDVN IE tap 3; Tr 182
4.2⁄2.1- Sơ dồ các giai doạn sản xuất viên nang AMPELOP Các giai đoạn sản xuất được thực hiện thco sơ đồ 2
Trang 14Nguyên phụ liêu - Bat Ampeloy - Lactose - Lycatab Cén PVP 10% —— „| - Magnesistearat Tale VI - Vỏ nang cứng —— —> ~ Lọ, nắp, núi, nhãn—» ác giai đoạn Chuẩn bị nguyên phụ liệu Trộn bột kép — | Đồng nang Đồng gĩi thành phẩm 4.2.3- Xây dựng tiên chuẩn ;
Nội dụng kiểm tra
- Kiểm sốt kiểm
nghiệm nguyên liệu
- Kiểm tra dộ đồng nhất
- Kiểm tra độ đơng nhất
- Kiểm tra nhiệt độ - Kiểm tra độ ấm ~ Kiểm nghiệm hàm huong Flavonoid - Kiếm tra khối lượng trung bình dộ đồng đều khối lượng - Kiểm nghiệm thành phẩm
Sở đồ các giai đoạn sản xuất viên nang AMPELOP
Dé đáp ứng yêu cầu sản xuất chúng tơi đã xây dựng các tiẻu chuẩn cơ
SỞ SâU +
- Tiên chuẩn nguyên liệu CHÈ DẦY
- Tiêu chuẩn bột AMPELOP
- Tiêu chuẩn viên nang AMPELOP
Cúc tiêu chuẩn này được trình bày ở phần PHỤ [ỨC
Trang 154.2.4- Theo dai độ ổn định của thuốc :
Chúng tơi tiến hành theo đối 3 lơ viên nang AMPELOP : 010497, 020497, 030497
~ Điều kiện báo quản : Trong lọ nhựa, 2 lần nắp cĩ xi sáp kín, để ở
nhiệt độ phịng cĩ sự thay déi tir 20 - 30°C Độ ẩm thay đổi từ 60 - 90%
(theo thời tiết điển biến trong 24 tháng, từ 04/1997 đến (04/1999 - Tiêu chuẩn đánh giá độ ồn định :
+ Hình thức cảm quan (Theo TCCS)
+ Định tính (Theo TCCS)
+ Độ nhiềm khuẩn (Theo DĐVNII tập 3, phụ lục 8.3)
+ Độ rã (theo DĐVNII, tập 3 phụ lục 1.8)
Kết qua theo dõi trong 24 tháng được trình bảy ở bảng 3
- Kết luận : Nang AMPELOP cĩ độ ổn định trong 24 tháng, do đĩ
Trang 16Bảng 3: Kết quả nghiên cứu đơ ổn định của viên nang AMPELOP 3 lơ ; 010497, 020497, 030497 16
, Thời gian bão | Cain quan Đinhtính [ Độ nhiễm khuẩn ; D6 1 (nh theo phut)
¡quần 318 316 |— 3 lơ [2010497 - Lơ020497 Ï La030497 `
tháng Đạt Đúng Đạt 15 13 J 15 !
6 thang Dat Ding Dat 14 15 ị 13 7]
12 tháng Dat Ding Đạt 13 15 | 1 ị
18 thang Dat Ding Dat 15 r 14 fw!
| 24 thang Dat” ‘Ding Đạt f 14 Ị 15 an l3]
Kết luận ; năng Ampelop cĩ dệ ổn định trang 24 tháng
Trang 174.3- KẾT QUÁ THỦ TÁC DUNG CUA THUGC AMPELOP TREN LAM
SANG
4.3.1- Sé bénh ahan : 63 người, trong đĩ cĩ 35 nữ, 38 nam 4.3.2- Đặc điểm nhĩm bệnh nhân nghiên cứu + 4.3.2 1- Triệu chứng lâm sàng - [ST Mức độ
| T ` Triệu chứng Ï Whe “TTrang binh Nàng
ị T L (B/nhân) | (B/nhân) Í (B/nhân) (B/nhán)
a Dau a 3 2
[ 2 | Q hơi - ợ chua 14 17 23] 9
3 Đầy bụng 2 | 13 lÐ TT” 9
Ea | _Nơn - buổn nơn | [46] 7 8 Sổ
Trang 18Jem - 15cm 8
> 1Sem : 4 3
+ Tính chất ố loét : Loét sâu : 63/63 bệnh nhân
4.3.2.3 Tiah trang nhiém H pylori : Mức độ nhiễm H pylori : Nang 13 bệnh nhãn Trung bình : 33 - Nhẹ - 4.3.3- Điều trị :
Để năng cao hiệu qua điều trị của thuốc AMPELOP chúng tơi đã đe
nghị G5 TS Nguyễn Khánh Trạch, chủ nhiệm khoa tiêu hố bệnh viện Bạch
Mai đưa ra | phác đồ điều trị phối hợp AMPELOP với kháng sinh
63 bệnh nhân đều được ding 1 phác đồ điều trị thống nhất
- Viên nang AMPDI.OP 0.25g dùng trong 30 ngày - AMOXICILLIN 0,5g ding trong 10 ngay dầu
- FLAGYL 0,25g ding wong 10 ngay diu
Liều lượng cụ thể :
- AMPFLOP 0,25g : 4 viên x 3 lần/ngày x 30 ngày
- AMOXICILLIN 0,5g : 2 viên x 2 lần/ngầy x 10 ngày
- FLAGYL 0.25g : 2 viên x 2 lần/ngày x L0 ngày
+4.3.4- Kết quả điều trị :
4.3⁄4.1- Lâm sang
- Đánh giá sự thay đổi của các triệu chứng lâm sàng :
+ Tốt : Hết đau sau | tuần điều trị hết các triệu chứng kèm theo + Khá : Hết đau sau I - 2 tuần điều trị, các triệu chứng khác
giảm rõ rệt
+ Trung bình : hết đau sau 2 tuần điều trị, các triệu chứng khác
Trang 19+ Xấu : Triệu chứng đau và các triệu chứng khác khơng thay đổi hoặc nặng thêm - Kết quả cải thiện các triệu chứng lâm sàng : Tốt : 39 bệnh nhân (61,90%) Khá : 20 - 175%) "Trung bình : 3 Me (476%) Xấu : 1 5 (1588) 4.14.2- Nội soÏ - Đánh giá mức độ liền sẹo của các ổ loét : + Mức độ [ (tốt) loét đã liên sẹo nhưng chưa hồn tồn - seo đỏ, hết xung huyết quanh loét lên sẹo hồn tồn - sẹo trắng hoặc ổ ổ loét
+ Mức độ II (khá) : kích thước ổ loét thu nhỏ trên một nửa, đáy
cịn phủ Fibrin mỏng, bớt phù nễ và xung huyết xung quanh ổ loét
+ Mức độ IÍI (trưng bình) : kích thước ổ loết thú nhỏ íL so với
trước điều trị, cịn biểu hiện viêm mạnh xung quanh ổ loét
+ Mức độ IV (xấu) : kích thước ổ loét và tính chất viêm xung quanh ổ loét khơng thay đổi
- Kết quả liền sẹo theo các mức độ (n = 63) + Mức đội : 41 bệnh nhân (65,08%) + Mức độ ÏI : 13 bệnh nhân (20,63%) + Mức độ HI : 7 bệnh nhân (11,11%) + Mức độïV : — 2 bệnhnhân (3,17%)
~ Hiệu quả liền sẹo (mức độ I + ID các ổ loét theo kích thước (n = 54)
0.5em - lem lem-I/5em l7 44] 938% 4 7 30% 7 27 - Mức độ liên sẹo theo vị trí các ổ loét,
+ Trong số 63 bệnh nhân nghiên cứu cĩ 8 bệnh nhăn cĩ loết dạ dày phối hợp với loét hành tá tràng
Trang 20[
+ Kết quả điều trị : loết dạ dày và loét hành tá trăng cùng lên sẹo như nhau trong cá 8 trường hợp
~ Mối liên quan giữa hiệu quả liền sẹo các ổ loét với mức độ làm sạch
HP
‘Len seo tat (n = 54) Lên sẹo khơng tốt (n
_CơnLHEPŒ 7 HAHPC) Cịn TP CĐ | ConA.) H 254 |46/29%| 29 [5371% 4 |44244% | 5 1 55,56% 4.3.4.3- Két qua diét H pylori» - Đánh giá :
+ Het H pylon (H.P ain tinh) + Giảm : H P cịn như số lượng + Khơng thay đổi : H P dương tính với mức độ nhiễm khơng thay đổi - Kết quả diệt H, pylod +lHIết H.P : 34 bệnh nhân (53,97%) +Giảm ¡9 - (14,28%)
+ Khơng thay đổi:20 - (31,75%) 4-3.5- Kết luận về tác dụng điểu trị trên lâm sàng :
s4.1.5.1- Đánh giá tác dụng của AMPELOP vé mat lâm sang :
Thuốc AMPELOP cĩ tác dụng tốt trong việc cải thiện các triệu chứng lâm sàng của bệnh loét dạ dầy tá tràng : 39/63 bệnh nhân (61.90%) het hoan
wu Í tuần điểu trị, 20/63 bệnh nhân (31.75%) hết các triệu chứng sau 2 tuân điều trị Sau cả đợt điều trị,
Trang 2130% - Các ư loét lớn > I,5cm liên so chỉ đạ 4.3.5.3- Đánh giá tác dụng diệt HP - Sạch H.P : 34/63 bệnh nhân (53,97%)
- Giảm H P cịn số lượng ít : 9/63 bệnh nhân (14.28%) ~ Khơng thay đổi : 20/63 bệnh nhân (31,75%)
4.3.5.4 Nghiên cứu tác dụng khơng mong muối của thuốc
Trong tất cả 63 bệnh nhân nghiên cứu khơng cĩ trường hợp nào cĩ
biểu hiện tác dụng khơng mong muốn của thuốc Y kiến nhân xét của nhĩm theo dõi thuốc điều trị trên lạm sang (iS uyễn Khánh Trạch ~ AMPELOP là thuốc an tồn, cĩ hiệu quả cao trong điều trị bệnh loết TS da day tá trang
- Hiệu quá điều trị của AMPELOP cao hơn số với nhiều loại thuốc
điều trị loét đạ dày tá tràng hiện vẫn đang phải nhập từ nước ngồi
- Để đảm báo kết quả điều trị cao, AMPELOP nên dùng điều trị cho
các ổ loét cĩ kích thước dudi Lem
- Nên nghiên cứu sản xuất viên AMPELOP cĩ hàm lượng cao hơn để
bệnh nhân sử dụng thuận tiện hơn ; uống ít viên và uống ít lần hon
4.4- HỒN THIỆN HỒ SỞ KHOA HỌC CỦA CHẾ PHẨM AMPELOP :
“Trong mục tiêu thứ 3 của để cương cĩ nêu : la chế phẩm AMPELOD để xin phép Bộ Hồn thiện hồ sơ khoa học Y tế cấp số đăng ký lưu hành,
Chúng tơi đã tiến hành tra cứu nhãn hiệu AMPELOP lại Cục sở hữu
cơng nghiệp - Bộ khoa học cơng nghệ và mơi trường và làm đảy đủ các văn
bắn theo yêu cầu của Cục quản lý Dược Việt Nam đối với HO SO DANG KÝ THUỐC, đã xin phép sản xuất và lưu hành trên thị trường cá nước dưới
Trang 22tên của cơ sở đảng ký là : TRƯNG TÂM KHOA HỌC CƠNG NGHỆ
DƯỢC - TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI
Sau khi thẩm định, xét duyệt hổ sơ đăng ký thuốc AMPELOP, Cục quản lý Dược Việt nam đã cĩ quyết định sở 52/1999/QĐ-QLD ngày 15 tháng 9 năm 1999 cho phép thuốc AMPELOP được sản xuất và lưu hành trên thị trường cả nước (Phần phụ lục)
Trang 23V, BẢN TL
5.1- VỀ THUTAC DUNG DIET ILP
Sau khi Barry Marshall va Robin Warren ở bệnh viện Royal - Perth
(Úc) cơng bố đã xác định cĩ vi khuẩn gram (-), hình xoắn sống ở niêm mac
da dày của những bệnh nhân người lớn bị viêm da dày Vì khuẩn này được đặt tên là Campylobacter pyloridis, sau này được định danh là Helicobacter pylori [6] đã cĩ nhiễu nghiên cứu chứng mình H.P cĩ vai trị chính trong
loệt đụ đầy - tí rằng [1], do đĩ rong những
yên nhân sinh bệnh v
năm gần đây các thuốc điều trị viêm loét da dầy - tả tràng người ta rất quan
tâm đến vai trị diệt H.P, Thuốc AMPELOP da duge thit tac dung tte ché vi
khuẩn ilelicobacter pylori được phản lập và nuơi cấy từ các mẫu sinh thiết của bệnh nhân cĩ viêm loét dạ dùy
cứu này cũng phù hợp với những nghiên cứu trên lâm sàng trong đánh giá tác
tràng đang hoạt dộng Ket quả nghiên
dụng làm sạch Helicobacter pylori của Tiến sĩ Vũ Nam (7| và Thạc Sĩ Nguyên Thị Tuyết Lan [6] cũng như phẩn nghiên cứu tác dụng của thuốc AMPELOP trên lâm sàng ở bản báo cáo này Đây cũng là kết quả mới, lần đầu tiên được nghiên cứu và cơng bố tại Việt Nam
5.2- VỀ QUY TRÌNH SÁN XUẤT THUỐC AMPELOP TỪCHÈ DẦY : Việc nghiên cứu về cây chè đây của chúng tơi đã được tiến hành từ năm 1990 phối hợp cùng với GS TSKH Hoang Tích Huyền, G5 Hồng Bảo
Châu Cĩ thể nĩi chè dây là một dược liệu được nghiên cứu khá hồn chỉnh từ thực vật, thành phần hố học, độ an tồn của thuốc, tác dung dược lý, chiết xuất, bào chế, tác dụng của thuốc trên lâm sàng Quy trình sản xuất phù hợp
với hồn cảnh và điều kiện hiện nay ở các cơ sở sản xuất thuốc cĩ nguồn gốc
dược liệu Sau khi thực hiện ở quy mơ pilot tại bộ mơn cơng nghiệp Trường Đại học Dược Hà nội, chúng tơi đã tiến hành sản xuất Ì mở 500.000 viên nang tại Cơng ty cổ phân Dược phẩm và trang thiết bị y tế TRAPHACO Chế phẩm AMPBLOP đã cĩ đầy đủ hồ sơ xin phếp sản xuất và lưu hành trong cả
nước và đã được Cục Quán lý Dược - Bộ Y tế cấp phép (Quyết định số
Trang 24
52/1999/QĐ-QLD) Để thuốc AMPELOP cĩ điều kiện phát triển phục vụ
cộng đồng nhất là bệnh nhân viêm loét dạ đày tá tràng ở vùng nơng thơn và
vùng núi chúng tơi đã bàn giao quy trình sản xuất thuốc cho Cơng ty cổ phần
Dược phẩm và trang thiết bị Y tế TRAPHACO
ở phịng thí nghiệm trong nhà
Kết quả nghiên cứu khơng dừng lạ
trường mà được cơ sở sản xuất tiếp nhận để tiếp tục sản xuất ra thuốc phục
xụ cộng đồng, đĩ là 1 thành cơng và đĩng gĩp nhỏ bé của chúng tơi
` THỨTÁC DỤNG CÚA THUỐC AMPELOP :
Chế phẩm AMPELOP sản xuất từ chè đây đã được nghiên cứu trên
lâm sàng ở luận án PTS của BS Vũ Nam [6] trên 44 bệnh nhản cĩ s
với nhĩm dùng Alusi : 36 benh nhân Bác sĩ Vũ Nam dã đưa ra mội số kết
luận chính :
- Chè đây cĩ tác dụng cất cơn đau trung bình 8,9 ngày cịn Alusi là 17.35 ngày (P< 0.01) Sau 2 tuần điều trị cĩ (90,09%) bệnh nhân hết đau, Alusi : 61,11%,
- Chè dây làm liền sẹo ổ loớt hành tá tràng 79,55%, Alusi 50% (P<0,001), trong đĩ chất lượng sẹo tốt - trắng đạt 54,28% cịn Alusi : 33,88%, - Chè dây làm sạch H.P: 42,5%, Alusi : 19,35% (P<0,01) - Chè đây cĩ tác dụng làm giảm viêm dạ đầy, cịn Alusi khơng cĩ tác dụng này
- Chè dây khơng gây đĩc và khơng cĩ tác dụng khơng mong muốn Để nâng cao hiệu quả điều trị của thuốc AMPBLOP, các nha lam sing dã dưa ra 1 phác đồ diễu trị: dùng AMPELOP trong † tháng kết hợp với kháng sinh sẵn cĩ và khơng đất tin : AMOXICILLIN và
METRONIDAZOLE (FLAGYL) uống trong I0 ngày đầu
Kết quả theo đối điều tri cho 40 bệnh nhân loét hành tá tràng cĩ nhiễm
Helicobacter pylor bằng nhĩm thuốc Ampclop - Metronidazole -
Amoxieillin (AMA) của BS Nguyễn Thị Tuyết Lan trong luận án Thạc sĩ y
học đã cĩ kết luận :
- Tác dụng cắt cơn đau sau 2 tuần điều trị đạt tỉ lệ 95%
Trang 25- Tỉ lệ liên sẹo ổ loét tá trang đạt 92,59,
- Lam sạch H.P đạt tỷ lệ 70%
¬ Thuốc cĩ tác dụng giảm rõ rệt hoạt động viêm của niêm mạc hang vị
đạ dày Từ trạng thái viêm hoạt động mức độ vừa và nặng sang trạng thái
viêm khơng hoạt động hoặc hoạt động nhẹ Mức độ nhiễm H.P cũng giám
nhiều đến âm tính
- Nhĩm thuốc AMA được dung nạp tốt, khơng cĩ tác dụng khơng mong muốn
‘Theo GS Nguyễn Xuân Huyền [3] đã nẻu kết quá điều trị phối hợp
thuốc kháng sinh của một số tác giá nước ngồi (bảng 4) và một số cơng thức
điều trị loét dạ đầy tá trầng đã thực hiện ở Việt Nam (bảng 5)
Bảng 4: Kết quá điệt HP của một số cơng thức [Cong thtic ket hop Tí lệ điệt HP \ Bismuth + Tinidazol : 40 T0 - Amoxillin + Metronidazol 30% - Omeprazol + AmoxiHin 53-55% - Omeprazol + Clarithromycin 30 - 80%
(Citrate Bism + Tetracyclin + Metronidazol) 94%
(Citrate Bism + Amoxillin + Tinidazol) 3 thuốc
- Ranitidin + Amoxillin + Tinidazol 81%
- Omeprazol + Amoxillin + Tinidazol 86%
! | ~ Bismuth + 2 khang sinh j F
J - Omeprazol + Clarithromycin + Amoxillin 90%
Trang 26Bảng 5 : Kết quả của một số cơng thức điều trị loét DD - TT ở Việt Nam
Cơng thức a | Ty ile dict HP 7 Tý lạ liên seo |
(Bénh | DietHP | % | Tai | Toi Hồn j Khơng Khơng
nhân) | đa | thiểu tồn | h/ồn | thay đối Amox.tMetron.| 9ï Ì TiAl | 78% ¡81% 644 | 72% | I8 | 10% 7Ì Tetracvcin+ ? 248 [ 210/248 - 84% [92%] 66% | 167251 ¡ 51/251 | 33/251 ¡ Metonidaol j | | 66.5% WIG j 131% Fores +Mebon | IÚI ! SRTRT F9] aoe Re Tins “ie as 4 | +Omeprazol ¡ 1 19% 15.5% 5% | Ranitidin + 42 | 32/42 | 78% 1 Amsillin i a _ _ Ranitidin + 41 ¡ 2647 | 35% 46/66, 8/66 12/66” | Amox | Metron, - |] — 70% 122, 186 | Omeprazol + 30 | 53/80 |66% [68% | 63 ' 811 |2U/MT[ gấu | LG, LƠ | j 7A6 | 189% | S49 |
Kết quá nghiên cứu dưới sự chỉ đạo của GS TS Nguyễn Khánh Trạch theo dõi điều trị cho 63 bệnh nhân loét dạ dày tá rằng bằng AMPELOP + AMOXICILLIN + FLAGYL duge trình bày trong báo cáo này cũng phù hợp với kết quả nêu trong luận án thạc sĩ y học của BS Nguyễn Thị Tuyết Lan Kết quá này cũng cho thấy khi sử dụng AMPELOP kết hợp với AMOXICILLIN và FLAGYL đã làm tăng hiệu quá điều trị : Tỷ lệ cất cơn loét tăng lén, tỉ lệ lầm sạch
đau sau 2 tuần điều trị tăng lên, tỷ lệ liền sco
HP tầng lên Chúng tơi cho rằng với phác đồ điều trị này cĩ thể thực hiện ở nhiều cơ sở y tế gĩp phẩn điều trị bệnh nhân viêm loét đạ dày tí tràng ở cộng
đồng,
Trang 27
VIL KẾT LUẬN
Căn cứ vào 3 mục tiêu đã nêu trong để cương nghiên cứu, để tài đã
thực hiện được đẩy đủ 3 mục tiêu đĩ, cụ thể :
~ Đã nghiên cứu từ khâu nguyên liệu là chè dây, bán thành phẩm : bột
AMPELOP và thành phẩm thuốc là viên nang AMPELOP Qui trình đã thực
hiện từ phịng thí nghiệm nâng lên sán xuất ở mức pilot và san xuất Ở xí
nghiệp; đã xảy đựng các tiêu chuẩn kiểm nghiệm chất lượng từ nguyên liệu,
bán thành phẩm tới thành phẩm
iếp tục đánh giá tác dụng của thuốc AMPELOP trên lâm sàng - Đã hồn thiện hồ sơ đăng ký thuốc AMPELOP và đã được Cục Quan ly Dược - Bộ Y tế cấp phép sản xuất và lưu hành trong cả nước
Ngồi 3 nội dung đã thực hiện theo để cương nghiên cứu chúng tơi đã làm thêm phân thử tác dụng diệt vi khuẩn Helicobacter pylori được phân lập
và nuơi cấy từ các mẫu sinh thiết của bệnh nhân cĩ viêm loét dạ dày tá tràng,
đang hoạt động Kết quả này cũng là một đĩng gĩp mới cho cơng trình nghiên cứu cây chè dây làm thuốc điển trị loét dạ dày - tá tràng cúa chúng
TƠI
Trang 28TAI LIEU THAM KHAO
Trần Văn Hợp, Tạ Long, Bùi Văn Lạc, Hà Văn Mạo : Helicobaceter
polyri và viêm loét dạ dày 1á tràng
“Tạp chí Nội khoa 1992, 1, l6
Nguyễn Xuân Huyền : Bệnh học nội tiêu hố - NXB Y học 1989, 35 Nguyễn Xuân Huyền : Bệnh loớt da dày - tá tràng - NXB Y học 1999
Đỗ Tất Lợi : Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam NXB Y học, 1999,
Ta Long : Helicobacter pylori va bénh loét tá trang Tạp chí Y học thực hành 1996, 10, 37
Nguyễn Thị Tuyết Lan : Đánh giá tác dụng điều trị loét tá tràng cĩ Helicobacter pylori của nhĩm thuốc AMPELOP - METRONIDAZOLE - AMOXICILLIN ; Luận án Thạc sĩ Y học -
1999
Vũ Nam : Nghiên cứu tác dụng của Chè dây trong điều trị loét hành tá tràng, Luận án PS khoa học Ý dược - 1995,
Nguyễn Khánh Trạch : Một số nhận xét về đặc điểm loét dạ dày tá tràng ở khoa tiêu hố bệnh viện Bạch Mai Hội thảo về diều trị loét tá
tràng ở Việt Nam trong tương lại, Hà nội 5/1991
Trần Tuấn : Dịch tế học bệnh loét tá tràng ở Việt Nam Hội thảo vẻ
điểu trị loét tá trang ở Việt Nam trong tương lai Hà nội 5/1991
Trang 29a
6
4,
PHU LUC
Một số hình ảnh nội soi trước và sau điều trị
Danh sách 63 bệnh nhân được điều trị thuốc AMPELOP
Tiéu chudn co s6 "CHE DAY"
liều chuẩn cơ sở "NGUYÊN LIỆU ĐĨNG NANG
AMPELOP"
Tiêu chuẩn cơ sở : "VIÊN NÀNG AMPELOP" Phiếu kiểm nghiệm : VIÊN NANG AMPELOP
Thong báo kết quả xác dịnh độc tính cấp mẫu thuốc AMIPFI.OP
Hồ sơ đăng ký thuốc (Bản chụp bìa và đanh mục của hồ sơ)
BỘT
Quyết định của Cục Quán lý Dược Việt Nam (cho phép sản xuất và
lưu hành trên thị trường cả nước)
Đề cương nghiên cứu
Trang 30MOT SO HINH ANH NOI SOI TRUGC VA SAU DIEU TRI
- Trần NgocD 43 tudi (Loét HTT) “Trước điệu trị Sau điều trị - Nguyễn quang Th 41 tuổi (Loét sau HTT) Trước điều trị
- Đàm QuangH 23 tudi (Loét HTT)
"Trước điều trị Sau điều trị
- Vũ ThịT 60tnổi (Loết HTT)
“Trước điển trí Sau điều trí
Trang 31
DANH SÁCH BỆNH NHÂN
"TTỊ — HỌVÀTÊN TUỔI ĐỊA CHÍ Ị
FỊ TNguyên Van Thing ˆ 4L |60Hàng uống-Hàanội |
:2 |[VũThịNgọc Tuyết Ð 7 | 60 !TT.Bộcơngnghiệpnang |
[3 [Nguyễn ĐạiHải ˆ 30 [510K2.TT Hào Nam
4 TNguyễn Văn Thắng 31 |Phúthượng
5 | ¥a@ Kim Thanh _ “45 |ViệnSRKSTHN ” — —Ì
,6 | Nguyen Minh Die 22 22 Thy nhugm HN
'7 | Dương Thanh Chung - 39 ÏK95 Phúc xá HN `
Đ ÁN Ï 47 Số 10 Nguyên Chú Thiểu HNÌ
j9 | Ngơ | 43 £7, Cor Vien sit x61, HN |
10 | Doin Quang Huy 23 3129 - Thanh cong, HN
11 | Trần Đình Để 46 |732 La thành, Giảng võ, HN
12 | Vũ Thị Nhiệm 70 !Sã5, Tran Phú HN
¡13 [Đỗ Ngọc Bớ —ˆ ~~ ] 52 §69 đường !Ú Nghĩa đũng -
‘14 [Phạm Thị Hướng ” Ƒ 47 Đi căn,HN ;
“TS ; Tran Ngọc Dung 43 | 128 đường Thăng Long, HN 16 | Nguyễn Thiệp 62 | 12 Dang Tat
17 | Đặng Hữu Thanh cử 44 | 30 ngõ 100 phố Tây Sơn,HN _18 | Lê Xuân Tĩnh ——Ƒ 33 † mi ưấn Thường Tín Hà tây
[ 19 | Nguyễn Thị Giáp - $6 ˆ 176Độicấn HN ©
|20 [Phạm VănHọc ” ~ 56 | 112 Ngo SiLien, HN —
[21 | Trần Thị Lan 7 57 Ï14Nguyễn khuyến HN
22 | Dương Tiến Lực 44 |383KimngưuHN `
123 | Trinh Văn Lịch ” St | 31Ligugiai, HN
Dạ, Tre Thị Hải 50 |2 Ngõ Doi can HN :
125 | Dang Ngọc Quỳnh 56 |24 Trần Himg Dao, HN” 26 Nguyễn Thị Đại ˆ ˆ 50 ' Tổ24, cụm 3- Tây hồ, HN 27 ` Nguyễn Văn Sửu ˆ 7 31 ‘TT Vien mat TU- HN
"28 | Nguyễn Ngọc Hùng 6 ngõ Tịn Thất Thiệp,HN
Trang 32
29 [ Lê Thị Hoa
|30 ¡ Hồng Minh Trí
31 VG Qui Don 41 | TTintién 66 HN “
32 | Hồng Thị Hoa ` 742 168 Auco HN 33 | Vũ Mạ 50 [25 Nguyén Bi 34 | Nguyễn Thị Hoa 49 | TT Dai hoc Y, HN 35 | Phạm Văn Duong 38 ¡ Đức giang, Giá lâm, HN [36 | Phạm Thị Hoa — | # |3ỐchgdainN — | 3 y 3 Í Chí đầm, Đoan Hùng, P+họ
Tš§_ | Trân Văn Phú 68 ÌP.Phúc thành IK Ninh Binh |
39, TNguyén Xuan Te 58 | UBND tinh Thanh Hod # 40 | Duong Kim Tuyé 4 Nguyễn Thị i
50 | Hậu Lộc, Thanh Hố : Duy Hải, đuy tiên, Hà nam ˆ ¡ hấu NĐịnh ˆ
Nguyễn Văn Khơi | 53 201 Hồng Văn Thục HN i
¡ Nguyễn Hữu Hiện ~ | 4 |
- TNguyễn Hữu Việt 27
| Nguyễn Văn Luận 19
49 | Nguyễn Thị Phượng 65 | MễTn, Từ Liêm, HN
s0 | Trần Thị Hải 40 |P116-A5- Thành cơng-HN
t U8 # tý, Hồng Bang, H HP -
[52 ˆ[ Nguyễn Hữu Nhâm 38 | Ủy mỗ, Đơng anh,HN _
53 | Hồ Xuân Hữu —— | 48 |ĐàiTHNghệ an |
¡ Ý yên, NÐ Si
Cty chế biến mì sợi HDương | 64 Lương Van Can, HN
[La Kim Dung “37 48 Hà Huy Tap HN
Bùi Thanh Hà ˆ `” 45 | 7ingo dai déng HN Nahiém ThiLan ` | 65 TT BH Cong doin, HN
Trang 3360 ‘Nguyén Xuân Bính [ 42 162,P Hoang Van Thu, HN:
Trang 34THU CHUAN CO SG PT i I Trưởng ĐH Dược Hà dội Ì i Nhềm 8 ! ee tnt CHE DAY | F—————>*= ¡ Trung tâm KHCN Dược | Cĩ hiệu lực từ: sâm 1998 Douce lu là lá và ngọn đã sào khĩ của cây che day pan hin s6 08 ngay 9 tháng Queer dink i cantuntensis Planch, bho Nho.Vitacae) : ; 1 Mota al La chet bind W8 tủ Hnh
Hình thái ben ngồi Lá xếp cũ 3 - Fic
khong déu, dai? Som Dinh 4 hol nhon, day trịn Mép cĩ răng cưa thưa khơng rõ Phiến lá mỏng, mặt trên mào nâu, mất đưới mầu trắng nhạt, đơi khi cĩ những chim mau trắng ở mặt dưới Lá íL khi cịn nguyên vẹn, thường bị vỡ vụn vì đã qua sao chế Mbj thơm đặc biết, vị chất ngàng vớ cấu tạo de bis! aun Cấm tạo VỆ Rúc cĩ Ý BỘ và trêu cúa phuiêu lá, Biểu bị tren cĩ lơng
aiion hình tbáp sẻ piua sài
dấu nhọa Đám mỏ đày năm sát biểu bì trên và biểu bì đưới tế bảo z3 thành
Mê mềm vỏ gồm những tế bào hình trịn bay đa giác xếp xíc nhau Bồ libe gĩ cửa
sản chính gồm 4 - š bĩ nhỏ xếp thành vịng trịn gỗ phía tron libè plía ngồi
ngồi các bĩ libe gỗ cĩ những đám sợi Phần thịt lá cĩ mỏ giáu và mỏ khuy 6 các tế bào mĩ khuyết chứa tình thể canxi oxalat bình kim
- Bột: Mầu vàng nâu, mùi thơm, vị chất Dưới kính luẻn vỉ thấy lơng che chờ đơn bào Tế bào mơ mềm chứa tỉnh thể canxi oxalat hình kim và những Unh thể bình kim rải rác ở ogồi tế bào, Sợi và những đám sơi dài, bai dấu
nhọn, Miảnh mạch xoắn Mảnh nhu mơ cĩ chứa khí khổng
2 Dinh tinh
+ LLấy khoảng 5 sam bội lá, thêm LOml cén 70°C, dun néng trên cách thuỷ, Loe, dich Ie ding dé làm các phản ứng hố học
- Nhỏ 1 3 giọtdich lọc lên miếng giấy lạc, hở tren Rơi annoniae dặc
tmẫu vàng “rên giày phải đậm rõ lén
Phan ứng Giandin : Lay Qmi dich chiết,
Trang 35- Dung mơi khai triển ; Toluen - ethylacetat - acid formic (5:6:1)
- Dung địch chất đối chiếu : Myricetin và dihvdramwricetin pha !% trong cồn tuyệt đối :
- Dung địch thử ; Dùng cắn sau khi định lượng : pha 3% trong cơn
tuyết đối
- Lượng chấm : 10Hi mẫu đối chiếu và mẫu thử trên bản mỏng
Sau khi khai triển làm khơ bản mỏng ngồi khơng khí Quan sát dưới ánh sảng thường hoặc hơi amoniac Mẫu thử phải cĩ ít nhất 4 vết trong đĩ cĩ 2 vết cĩ
cũng Rf và màu sắc với mẫu đối chiếu, heo TCVN LUỢI - ;Ú 3 Do am : Khang quá 4 Định lượng : Căn chính xác khoản:
soxhlet, chiết với ether dấu hoả trên cách thuỷ
hết hơi dựng mới rồi chiết flavonoid bằng 20m] cĩn T09 trong bình cầu cĩ lấp sint›
nan ngược trong cách ng sỏi Sáu 1Ơ phút sĩi dịch an cho dén Khi chiét hét flavonoid (thit véi hơi amoniac) Gop cae dịch chiết cất thụ Gi cơn đến khi cơn dịch chiết nước (khoảng 3ƠmÙ) Để nguội thêm 5 sam bot da hoặc nhỏ ducg dich gelatin 3% dến khi khơng cồn thấy tủa tring, Lac hỗn hợa
Gop dich ci
mm bot ia ché day di xde vinu 4 din cw vse Duất rong 2 giờ, Để được liệu cho bay và dịch rửa, bốc hơi ethy fe cơng thức h lượng phản
a- Khối lượng máu dem định lượng b- Khối lượng cần thu dược
Trang 36TIEU CHUAN CƠ SỞ
[— TÍKhoahe- Ï NGUYÊNIIÊU NhĩmR — ””Ï
| CưngnghệDược ' PONG NANG (
Trường đại học Dược —— BỐT AMPEFLOP
Ị Hà Nội i I \
Quyết định ban hành số : ngày Ĩ5 tháng § năm 1998
1 Yêu cầu kỹ thuật
1.1 - Cơng thức bào ché cho Ì.150ke bột Ampclop
- Bột lá chẻ dây : 10kg
- Ethanal 70° 106 bit
- Gelatin : 40 6
- Than hoat : sos
1.2 - Tiếu chuẩn nguyên liệu - Bột lá chè đây : TCCS - Ethanol 70° : TCVN - Gelatin : TCVN (632 - 70) DĐVN tập 1, 1291 - Than hoạt : TƠVN (836 - 70) DDVN tập 1 tr 528 ).3 - Chất lượng 1.3.1 - Hình thức cảm quan : Bột cĩ màu vàng nguyen liệu g nhất, thou mùi được liệu vị chát, nhẹ 1.3.2- Đĩ mịn : Qua rây số 26 1.3.3 - Độ ẩm : Dưới 5% 1.3.4 - Định tính ; Chế phim phai cd phan ứng định tính của chè đây 1.3.5 - Định lượng - Ham lượng flavonoid tồn phần cĩ trong nguyên liệu khơng ít hơn 80% 2 Phương pháp thử : 221 - Hình thức cảm quan : Bằng cảm quan, chế phẩm phải đạt các tiêu chuẩn đã nều
2.3 - Độ mịn ¡ Lấy 20s bột, rấy quá rấy số 26 Lượng bốt cơi lại tiến vây khơng duce lan hen 12684
Trang 37
Dụng dịch đối chiều : Cân khoảng 3§ bột lá chè dây cho vào bình cầu
cĩ nấp (sinh hàn hồi lưu) chiết bằng cơn 90° cho đến hết Flavonoid, dich lọc
cơ đặc để chấm sắc ký
Dung dich thử Can f1.5g bệt ngu cho vào bình cầu (cĩ nắp «
hần ngược) chiết bang can 9G" cho dén hé: flavonoid Loc, dich loc cĩ đặc đẻ
chấm sắc ký
Sau khi khai ưiên bằng hệ dung trên, để khơ bản mỏng ài khơng
khí, Quan sát dưới ánh sáng thường và hơi amoniac, Mẫu thử phải cĩ ít nhất 4 vết chính cĩ cùng Rf và màu sắc với các vết cĩ trong mẫu đối chiếu 3.6 Dịnh 2.6.) Đại lượng fiavonoid tồn phần bảng phương pháp cán lượng Can chins Nee mies aioe
tạp chất bảnh chết dâu hồ So khi loại tạp, để hay bh:
độ phịng, rồi đem chiết kiệt flavonoid bang cén 70° trong bìnhcầu cĩ ống sini: hàn hồi lưu trong cách thuỷ sĩi (thử bằng cách nhỏ vài giọt dịch chiết lên gi
lược cĩ niàn vàng) sau LŨ phút rút địch clhiế: }
Joc, ho lén hơi aponlac khơi
lần Gộp địch chiết cổn và đem bay bơi hết cổn, cịn địch chiết nước Để ngudi, nhd dung dich Gelatin 3% đến khi khơng cịn tủa wing, Ide hén hop
dich chiét va tia véi cthyt acetat trong bình gạn tới khí hết flavonoid (tha vai
NH: nhữ tiến), Ciêp dịch chiết ethyl acetat, Bốc hơi ethylacerat đến khĩ rồi sấy cần ở LOỨSC đều khối lượcg khơng đổi
Hầm lượng flavonoid tồn phần được tính theo cơng thức : ai độ ẩm của cao (g] thụ được (E} bì: khối lượng
m: khối lượng đem định lượng (g) 3 Đồng gĩi, bảo quản :
ấp sắp kín, bảo quân nơi khơ mắt
- Trong lo kín cĩ
TTKHOA HỌC - CƠNG NGHỆ DUOC TRUONG DAL HOC DUOC HA NOL
Z ee
By NTU AN
Trang 38TIÊU CHUẨN CƠ SỞ i i i i 1 i
_ Trung tâm KH - CN Dược [Vien nang | Nhĩm R 5 [rường Đại học Dược Hà Mới | Ampdop | Cĩhlealựew: ”¡ | Quyết định ban hành số 40 ngày 10 tháng 10 năm 1998
{ 1 Yêu cầu kỹ thuật:
i T.1 - CAng thức hào chế cha mơi viền nang BAL Ampelop 93158 Laiose 0 045g - Tyeatah 00459 : { - Cồn PVP 10% vd - TA dược trơn (Tale, magnesistedrat) vd liêu
1.2 -'Fiêu chuẩn nguyê
- Bột Ampelop : Chế từ bột lá cây chè day(Ampelopsis cantoniensis Planch) dat TCCS - Lactose Đạt DDŨ Anh 1993 ab Dat ticuchudn cha hãng - lực: én PVP Dat USP 23 - Tá dược trơn : Đạt TC dược dụng 1.3 - Chất lượng thành phẩm 1.3.1 - Hình thức : Viên nang cứng hình tru, thân nang màu đỏ, nắp
nang man den Nap va than khít nhau Nang khơng bị biến đạng, nứt vỡ bên trong cĩ mâu nâu den
~ Mùi, vị : Mùi thơm được liệu, vị hơi chát 1.3.2 - Độ tan ci: Kho 13.3 Do dm: Khong qu | 1.3.4 - Độ đồng đều khối lượng : Khối lượng trung bình thuốc trong mot nang 27.5%
Trang 39
2.2 - Độ đồng đều khối lượng : Thử theo DĐVN II tấp 3, phụ luc 1, muc
1.8 thuốc nang
2.3 - Độ tan rã : Thử theo DDVN TTtập 3, phụ lục L8 - Thuốc nai
2.4 - Độ ẩm : Thử theo DDVNH (ấp 3, phụ lạc 3.¡6 phương pháp sấy
trong rù sấy ở áp suất thườue nhiết độ 105°C hướng mẫu thử ! gam, 3.5 - Định tinh : Bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng
- Dung địch thử : Lấy 0.2 chế phẩm thém 10m! ethanol 90°, đun sơi trên cách thuỷ 10 phút lọc Bã được chiết như trên 2 lần nữa Tâp trung cái
lọc nê cạn trên cách hụt Hồ cần với 2Ưml nước lọc Dịch lac đực 3 can † 15ml, Tap tung dick bằng Ethylacetat 3 lấn, mi thuỷ Hồ cần với 2m] ethanol muvét đối được dung dich đi m sac kv
- Dung dich mâu đối chiéu : Lay 0,2g cao ché day chuét nhu mau thit
Căn thu được bồ với 2ml ethanol tuyệt đổi được dung địch dể c
im sic ky
Trén ban méng slicegen G wang day 0,25mm, hoat hod 4 £00 - 1
trong 1 gi’ cham tai diém a 1ƠMl dung địch mẫu thử, chấm tại điểm b 10ui dung dich mẫu đối chiếu Khai triển sắc ký với hệ dung mới : Toiucn - khai triển cao khoảng Ethylacetat - Acid formun (3 - 6 - 1) San khi bản mỏi 12cm; lấy ra để Khĩ ở miệt độ phịng rồi cho vào bình đã bảo hồ hơi sIHODIAC, Kết quả : Mẫu thừ phải cho Các vết cĩ cùng màu và Rƒ so với mẫu đổi
2.6 - Độ nhiễm khuẩn : Thử theo phụ lục 8.3 ĐDVN II tập 3 3 Đồng gĩi - Ghí nhân - Bảo quản
Trang 40
BỘ Y TẾ CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM:
VIÊN KIỂM NGHIÊM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc
28 Hai bà trưng Hà nội XE+EEEKEEEEEker+ATe ĐT:2.55471, 2 55341 PHIẾU KIỂM NGHIỆM Số :3eŠ VEN.TCH Mẫu để kiểm nghỉ Vién nang Ampelop
Nơi sẵn xuất: -— “Trung tẤm KIICN Dược Trường Đại học Dược
Số lơ, số DK, han ding: 010699
Nơi lấy mâu : NT
Người lấy mẫu :
Yêu cầu KN ( Ghi rõ nội đung,số,ngày thắng, : KTCL., XD tiêu chuẩn
năm của biên bản lấy màu)
Ngày, tháng, nam nhận mẫu : 6/1/89 Số đăng ky KN: 299 TCH
Người nhận mẫu : Đ Thanh
Thử theo : TCCS
Tình trạng mẫu khi nhận và khi mở niêm phong để KN :
Vien nang đựng trong lọ nhựa, đậy 2 lần nút Nhãn trình bày rõ rằng
YÊU CẨU KẾT QUÁ
1- Hình thức : Viên nang cứng hình bụ, rong cĩ chứa bột thuốc màu |
nâu đen Nắp và thân nang khít phau, khơng bị biến đạng, nút vỡ, Mũ: Ding
vị thơm được liệu, vị hơi chat i
2- D6 tan rã : Khơng quá 30 phút | Dat
3- DO dm : Khong qud 9% | Dat(5%)
4 Độ đồng đều khối lượng : Khối lượng trung bình thuốc trong một Ị
nang È 7,5% | Dat
5- Định tính : Chế phẩm phải cĩ phản ứng của chè day, Đúng
€ Độ nhiễm khuẩn : Đạt 52TCN 316-81 | Đạt
Kết luận : 1- Nhất trí với tiêu chuẩn cơ sở
2- Mẫu Viên nang Ampelop KS : 010699 của Trung tam KHCN Dược - trường
ĐHDK đạt các chỉ tiêu chất lượng theo tiêu chuẩn cơ sở
Hà nội, ngày 3 thắng 8 năm 1999
VIỆN TRƯỜNG
Tờ “