Khảo sát dư lượng một số thuốc trừ sâu lân hữu cơ trong trà thuốc đại học y dược tp hcm

TÓM TẮT ĐỀ TÀI Đề tài Khảo sát dư lượng số thuốc trừ sâu lân hữu trà thuốc nhằm góp phần vào cơng tác giữ gìn vệ sinh an toàn thực phẩm bảo vệ sức khỏe người sử dụng trà thuốc Ba loại thuốc trừ sâu lân hữu khảo sát đề tài diazinon, chlorpyrifos phosalon Chúng xây dựng quy trình chiết xuất đồng thời diazinon, chlorpyrifos phosalon mẫu trà Sau áp dụng phương pháp sắc ký khí để khảo sát loại thuốc trừ sâu 20 mẫu trà thuốc thị trường Tuy nhiên, kết khảo sát không phát dư lượng loại thuốc trừ sâu lân hữu SUMMARY EXAMINATION OF ORGANOPHOSPHORUS PESTICIDE RESIDUES IN SOME HERBAL TEA PRODUCTS This research has been carried out in order to contribute to the food hygien and safety and to take care of people who usually consume a lot of herbal teas The organophosphorus pesticides investigated in the tea products are diazinon, chlorpyrifos and phosalone We establisted a process of simultaneous extraction of diazinon, chlorpyrifos and phosalone in the tea samples The method of gas chromatography has been used to determinate these organophosphorus pesticides in the 20 herbal tea products on the market However, we have not detected these organophosphorus pesticide residues in all 20 tea samples MỤC LỤC Trang Tóm tắt đề tài I Mục lục II Danh sách chữ viết tắt IV Danh sách hình VI Danh sách bảng VIII Bảng tốn IX Bảng dự trù kinh phí giai đoạn II X PHẦN MỞ ĐẦU - CHƯƠNG I- TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1-Tình hình nghiên cứu nước 1.2-Tình hình nghiên cứu nước 1.3- Tính cần thiết, phạm vi nghiên cứu đối tượng nghiên cứu đề tài 1.4-Ý nghĩa khoa học đề tài 10 CHƯƠNG II- NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 11 2.1- Khảo sát điều tra sản phẩm trà thuốc thị trường TP.HCM - 11 2.2-Xây dựng quy trình chiết đồng thời diazinon, chlorpyrifos phosalon từ trà Actisô trà đắng 11 2.3-Xác định hiệu suất chiết -2.4-Phương pháp lấy mẫu -14 2.5-Xây dựng quy trình định lượng -14 2.6-Ứng dụng phương pháp chọn khảo sát dư lượng diazinon, chlorpyrifos, phosalon số chế phẩm trà - 15 CHƯƠNG III- KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN - 16 3.1- Khảo sát điều tra sản phẩm trà thuốc thị trường TP.HCM - 16 3.2- Xác định hiệu suất chiết 16 3.3- Thăm dò điều kiện triển khai sắc ký – khối phổ phân tích đồng thời diazinon, chlorpyrifos phosalon - 20 3.4- Xây dựng quy trình định lượng - 23 3.4.1- Khảo sát tính tương thích hệ thống 23 3.4.2- Thẩm định quy trình 25 3.4.3- Công thức tính kết - 31 3.4.4- Quy trình xác định dư lượng Diazinon, Chlorpyrifos Phosalon 32 3.5-Ứng dụng phương pháp chọn khảo sát dư lượng Diazinon, Chlorpyrifos, Phosalon số chế phẩm trà thuốc có chứa Actisơ - 32 CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 53 PHỤ LỤC - 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO - 67 DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ TIẾNG VIỆT THUẬT NGỮ TIẾNG ANH ADI lieàu dung nạp ngày Acceptable Daily Intake chấp nhận BVTV EC EEC Bảo vệ thực vật Ủy ban Châu u European Commission Cộng đồng kinh tế Châu u European Economic Commission EI Ion hóa va chạm điện tử Electron impact FAO Tổ chức lương nông giới Food & Agricultural organization GC Sắc ký khí Gas Chromatography IUPAC Danh pháp quốc tế International Union of Pure and Applied Chemistry LD50 Liều gây chết 50% súc vật Lethal dose 50 thử nghiệm LC Sắc ký lỏng Liquid Chromatography LHC Lân hữu LOD Giới hạn phát Limit of detection LOQ Giới hạn định lượng Limit of quantitation LPME vi chiết pha lỏng Liquid Phase Microextraction MSD Đầu dò chọn lọc khối phổ Mass Selective Detector PA loại tinh khiết dùng cho phân tích pour analyse Ppm phần triệu parts per million RT thời gian lưu Retention time S/N Tỷ số tín hiệu nhiễu Signal to Noise ratio SPE NP chiết pha rắn pha thuận Normal phase SPE SPE RP chiết pha rắn pha đảo Reverse phase SPE SPE chiết pha rắn Solid Phase Extraction TOF thời gian bay Time of fly WHO Tổ chức Y tế giới World Health Organization DANH SÁCH HÌNH SỐ TÊN HÌNH ẢNH TRANG 2.1 12 14 3.1 Quy trình chiết Diazinon, Chlorpyrifos, Phosalon dung mơi hữu làm dịch chiết qua cột silicasel Sơ đồ khảo sát hiệu suất thu hồi Diazinon, Chlorpyrifos, Phosalon Sắc ký đồ mẫu dược liệu chiết không qua SPE 3.2 Sắc ký đồ mẫu dược liệu chiết làm qua 20 3.3 Sắc ký đồ dung dịch chuẩn 21 3.4 SPE Sắc ký đồ Diazinon chuẩn 22 3.5 Sắc ký đồ Chlorpyrifos chuẩn 22 3.6 Sac ky đồ Phosalon chuẩn 23 3.7 Đường biểu diễn phương trình hồi quy Diazinon chuẩn 25 3.8 Đường biểu diễn phương trình hồi quy Chlorpyrifos chuẩn 26 3.9 Đường biểu diễn phương trình hồi quy Phosalon chuẩn 26 3.10 32 3.11 Sơ đồ quy trình sử dụng để chiết dư lượng thuốc trừ sâu dược liệu Sắc ký đồ Actisô A1 3.12 Sắc ký đồ hoa Actisô A2 35 3.13 Sắc ký đồ Actisô A3 36 3.14 Sắc ký đồ Actisô A4 36 3.15 Sắc ký đồ Actisô A5 37 3.16 Sắc ký đồ Actisô A6 38 3.17 Sắc ký đồ Actisô A7 39 3.18 Sắc ký đồ Actisô A8 40 3.19 Sắc ký đồ Actisô A9 41 3.20 Sắc ký đồ trà đắng TĐ1 42 3.21 Sắc ký đồ trà đắng TĐ2 43 2.2 20 34 3.22 Sắc ký đồ trà đắng TĐ3 44 3.23 Sắc ký đồ trà đắng TĐ4 45 3.24 Sắc ký đồ trà đắng TĐ5 46 3.25 Sắc ký đồ trà đắng TĐ6 47 3.26 Sắc ký đồ giảm cân GC1 48 3.27 Sắc ký đồ giảm cân GC2 49 3.28 Sắc ký đồ giảm cân GC3 50 3.29 Sắc ký đồ giảm cân GC4 51 3.30 Sắc ký đồ giảm cân GC5 52 DANH SÁCH BẢNG SỐ TÊN BẢNG SỐ LIỆU TRANG 2.1 Chất chuẩn làm việc sử dụng 11 2.2 Chuẩn bị mẫu thử thuốc trừ sâu phun dược liệu 13 2.3 Chuẩn bị mẫu thuốc trừ sâu không qua dược liệu 13 3.1 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi chuẩn không qua dược liệu 16 3.2 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi chuẩn qua mẫu trà Actisô 17 3.3 Kết khảo sát hiệu suất thu hồi chuẩn qua mẫu trà đắng 17 3.4 18 3.5 Kết so sánh hiệu suất thu hồi Diazinon, Chlorpyrifos, Phosalon không qua có qua dược liệu Actisơ Kết so sánh hiệu suất thu hồi Diazinon, Chlorpyrifos, 3.6 Phosalon không qua có qua dược liệu Trà đắng Kết xử lý tính tương thích hệ thống 24 3.7 Nồng độ diện tích đỉnh tương đối Diazinon chuẩn 25 3.8 Nồng độ diện tích đỉnh tương đối Chlorpyrifos chuẩn 25 3.9 Nồng độ diện tích đỉnh tương đối Phosalon chuẩn 26 3.10 Kết khảo sát độ lặp lại chuẩn qua trà Actisô 27 3.11 Kết khảo sát độ lặp lại chuẩn qua Trà đắng 27 3.12 Khảo sát độ Diazinon mẫu trà Actisô 28 3.13 Khảo sát độ Chlorpyrifos mẫu trà Actisô 28 3.14 Khảo sát độ Phosalon mẫu trà Actisô 29 3.15 Khảo sát độ Diazinon mẫu trà đắng 29 3.16 Khảo sát độ Chlorpyrifos mẫu trà đắng 30 3.17 Khảo sát độ Phosalon mẫu trà đắng 30 3.18 Một số loại trà túi lọc Actisô nghiên cứu 33 3.19 Một số loại trà đắng nghiên cứu 33 3.20 Một số loại trà túi lọc giảm cân nghiên cứu 33 19 QUYẾT TỐN KINH PHÍ Đề tài: Khảo sát dư lượng số thuốc trừ sâu lân hữu trà thuốc Chủ nhiệm đề tài: TS.Trần Thanh Nhãn ThS Nguyễn Đăng Tiến Cơ quan chủ trì: Đại Học Y Dược TP HCM Thời gian đăng ký hợp đồng : 12 tháng Tổng kinh phí duyệt: 190.000.000 đồng Kinh phí cấp giai đọan 1: 120.000.000 đồng (đợt 1) theo HĐ NCKH Phát triển công nghệ số: 183/HĐ-SKHCN ngày 12/12/2006 Kinh phí cấp giai đọan 2: TT (Theo số: Nội dung /TB-SKHCN ngày Kinh phí (đồng) Trong Ngân sách I Kinh phí cấp năm 120.000.000 120.000.000 II Kinh phí tốn năm 167.000.000 120.000.000 Cơng chất xám Cơng th khốn 85.000.000 Nguyên, nhiên, vật liệu, dụng cụ, 79.000.000 phụ tùng, văn phịng phẩm Thiết bị Quản lý phí quan quản lý Hội nghị, hội thảo Đánh máy tài liệu Giao thông liên lạc Tiết kiệm 5% III Kinh phí chuyển sang năm sau 3.000.000 IV DỰ TRÙ KINH PHÍ GIAI ĐOẠN II ) Nguồn khác Tạm ứng TT Nội dung Kinh phí (đồng) I Kinh phí đề nghị cấp giai đọan Trong Ngân sách 70.000.000 70.000.000 10.000.000 10.000.000 7.000.000 7.000.000 6.000.000 6.000.000 II Công chất xám, nguyên vật liệu 1.1 Hội nghị, hội thảo chuyên đề 1.2 Viết tham luận, báo cáo … Giám định, nghiệm thu Chi phí điều hành Quản lý phí quan chủ trì II 10 Nguồn khác góp phần nâng cao uy tín doanh nghiệp Dược liệu khơng đạt tiêu mà cịn có chất lượng tốt, hiệu cao Có thể sản xuất dược liệu theo phương pháp nông nghiệp-hữu (thuốc trừ sâu vi sinh, phân bón vi sinh, nguồn nước tưới xử lý sạch…) Đây giải pháp sinh thái học có tính an tồn, bền vững, đảm bảo chất lượng cho việc nuôi trồng dược liệu - Dư lượng thuốc trừ sâu tồn lâu dược liệu thuốc trừ sâu sử dụng q trình trồng trọt dược liệu đó, đễ dàng xuất sản phẩm trà thuốc từ nguyên liệu trà ban đầu, trình sản xuất, chế biến Do đó, cần có quy trình sản xuất trà đạt tiêu chuẩn GMP thuốc Quy trình phải việc trồng trọt nguồn dược liệu, thu hái đến sản xuất chế biến trà thuốc, chí suốt q trình phân phối bảo quản - Áp dụng quy trình phân tích dư lượng thuốc trừ sâu quản lý sản xuất, xuất khẩu, tiêu dùng…của chế phẩm trà thuốc Để nâng cao chất lượng hiệu an toàn việc sử dụng xuất chế phẩm trà thuốc thị trường cần phải xây dựng tiêu giới hạn thuốc trừ sâu lân hữu cơ, chlor hữu cơ, cúc tổng hợp sản phẩm Áp dụng kết nghiên cứu đề tài quản lý giới hạn tiêu thuốc trừ sâu lân hữu nghiên cứu -Tiếp tục nghiên cứu thuốc trừ sâu lân hữu khác, nhóm thuốc bảo vệ thực vật khác thường sử dụng nơng nghiệp nói chung trồng trọt nguồn dược liệu nói riêng chế phẩm trà thuốc nhằm hồn thiện chương trình sử dụng sản phẩm trà thuốc an toàn, hiệu thiết bị đại GC-TOF MS, LC-MS Trong trình nghiên cứu, khảo sát dư lượng thuốc trừ sâu lân hữu diazinon, chorpyrifos, phosalon chế phẩm trà thuốc khơng tránh khỏi thiếu sót Rất mong Hội đồng khoa học đồng nghiệp góp ý kiến để cơng trình hồn thiện nâng cao hiệu ứng dụng quản lý chất lượng sản phẩm trà thuốc, chế phẩm phổ biến gần gũi với phong tục tập quán người Việt Nam sinh hoạt trị liệu 65 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Khảo sát tính tuyến tính Diazinon số liệu phân tích hồi quy n Nồng độ (ppm) Diện tích píc tương đối 0,25 0,188 0,5 0,547 1,175 2,211 4,863 6,479 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0.998391 R Square Adjusted R Square 0.996784 Standard Error 0.161349 0.99598 Observations ANOVA df SS MS F 1239.925 Regression 32.27971 32.27971 Residual 0.104134 0.026034 Total 32.38384 Coefficients Standard Error t Stat P-value Significance F 3.882E-06 Lower 95% Intercept -0.17681 0.102253 -1.72911 0.158848 -0.460709 X Variable 1.295992 0.036805 35.21258 3.88E-06 1.1938053 t0.05 = 2.776445 Upper 95% Lower 95.0% Upper 95.0% 0.107094 -0.46071 0.1070936 1.398178 1.193805 1.3981783 Phụ lục 2: Khảo sát tính tuyến tính Chlorpyrifos số liệu phân tích hồi quy 66 n Nồng độ (ppm) Diện tích píc tương đối 0,5 0,22 0,505 1,037 4 2,292 5 3,038 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0.998689 R Square Adjusted R Square 0.99738 0.996507 Standard Error 0.071185 Observations ANOVA df SS MS F Significance F 1142.107 5.69565E-05 t Stat P-value Lower 95% 0.312248309 0.562659347 Regression 5.787459 5.787459 Residual 0.015202 0.005067 Total 5.802661 Coefficients Standard Error Intercept -0.13435 0.055901 -2.50334 0.095587 X Variable 0.621153 0.01838 33.79507 5.7E-05 t0.05 = 3.282446 Upper 95% Lower 95.0% Upper 95.0% 0.043553 -0.31225 0.043552542 0.679646 0.562659 0.679645947 67 Phụ lục 3: Khảo sát tính tuyến tính Phosalon số liệu phân tích hồi quy n Nồng độ (ppm) Diện tích píc tương đối 0,067 0,088 10 0,274 15 0,654 20 0,985 SUMMARY OUTPUT Regression Statistics Multiple R 0.99498021 R Square 0.989985619 Adjusted R Square 0.986647492 Standard Error 0.045855974 Observations ANOVA df SS MS F Significance F 296.5691834 0.000426614 P-value Lower 95% Regression 0.623616889 0.623616889 Residual 0.006308311 0.00210277 Total 0.6299252 Coefficients Intercept X Variable Standard Error t Stat -0.288261965 0.045624377 -6.3182 0.008014149 -0.43345909 0.062666247 0.003638905 17.221 0.000426614 0.051085628 t0,05 3.2824 Upper 95.0% -0.14306484 Lower 95.0% 0.433459094 0.074246865 0.051085628 0.074246865 Upper 95% 68 -0.14306484 Phụ lục 4: So sánh hiệu suất thu hồi Diazinon không qua có qua mẫu trà Actisơ Hiệu suất thu hồi Diazinon (%) Khôg qua dươc liệu Qua dược liệu n 89,48 75,63 94,22 76,24 83,71 75,77 77,34 81,99 81,08 82,90 71,05 77,51 F-Test Two-Sample for Variances Qua DL Không qua DL Mean 82,8133 78.34 Variance 69,3397 10.6328 Observations 6.0000 df 5.0000 F 6.5213 P(F