Xây dựng quy trình nhân giống in vitro cây cốt khí củ polygonum cuspidatum sieb et zucc giai đoạn 2

BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY THUỐC QUÝ CỐT KHÍ CỦ (Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc) (GIAI ĐOẠN 2) THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2018 BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY THUỐC Q CỐT KHÍ CỦ (Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc) (GIAI ĐOẠN 2) CƠ QUAN CHỦ TRÌ CHỦ NHIỆM NHIỆM VỤ KS Phạm Trần Thủy Tiên THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2018 MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi THÔNG TIN CHUNG vii TÓM TẮT KẾT QUẢ GIAI ĐOẠN x PHẦN MỞ ĐẨU xi Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.1.1 Khái niệm 1.1.2 Cơ sở khoa học 1.1.3 Vai trị chất kích thích sinh trƣởng phát sinh hình thái thực vật 1.1.4 Một số phƣơng pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật 1.2 Tổng quan Cốt Khí Củ 1.2.1 Giới thiệu chung vây Cốt Khí Củ 1.2.2 Phân bố, thu hái chế biến 1.2.3 Thành phần hóa học cơng dụng 1.3 Tính hình nghiên cứu nhân giống in vitro Cốt Khí Củ 1.3.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 1.3.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nƣớc Chƣơng NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 11 2.1 Nội dung nghiên cứu 11 2.1.1 Nội dung 1: Ảnh hƣởng số chất điều hòa sinh trƣởng thực vật (BAP, Kinetin) lên khả tái sinh chồi từ chồi ngủ non Cốt khí củ 11 2.1.2 Nội dung 2: Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với NAA IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 11 i 2.1.3 Nội dung 3: Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 11 2.1.4 Nội dung 4: Ảnh hƣởng môi trƣờng khoáng MS biến đổi, nồng độ đƣờng sucrose lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ 12 2.1.5 Nội dung 5: Ảnh hƣởng chế độ ni cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích mơi trƣờng ni cấy) lên khả nhân chồi Cốt khí củ hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời 14 2.1.6 Nội dung 6: Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng thực vật IBA lên khả tạo hồn chỉnh Cốt khí củ mơi trƣờng bán rắn 18 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 19 2.3 Vật liệu nghiên cứu 19 2.4 Phƣơng pháp thí nghiệm 19 2.5 Phƣơng pháp thu thập, xử lý số liệu tiêu theo dõi 20 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Ảnh hƣởng số chất điều hòa sinh trƣởng thực vật (BAP, Kinetin) lên khả tái sinh chồi từ chồi ngủ non Cốt khí củ 22 3.2 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với NAA IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 22 3.3 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 22 3.4 Ảnh hƣởng mơi trƣờng khống MS biến đổi, nồng độ đƣờng sucrose lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ 26 3.5 Ảnh hƣởng chế độ nuôi cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích môi trƣờng nuôi cấy) lên khả nhân chồi Cốt khí củ hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời 30 3.5.1 Ảnh hƣởng thời gian ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 30 3.5.2 khí củ Ảnh hƣởng số lần ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt 32 ii 3.5.3 khí củ Ảnh hƣởng thể tích nuôi cấy lên khả nhân chồi Cốt 33 3.6 Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng thực vật IBA lên khả tạo hồn chỉnh Cốt khí củ mơi trƣờng bán rắn 36 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 39 4.1 Kết luận 39 4.2 Đề nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 PHỤ LỤC I 44 iii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Các nghiệm thức ảnh hƣởng nồng độ BAP kết hợp với IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 12 Bảng 2.2 Các nghiệm thức ảnh hƣởng mơi trƣờng khống MS biến đổi lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ 13 Bảng 2.3 Các nghiệm thức ảnh hƣởng nồng độ đƣờng sucrose lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ 14 Bảng 2.4 Các nghiệm thức ảnh hƣởng thời gian ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 15 Bảng 2.5 Các nghiệm thức ảnh hƣởng số lần ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 16 Bảng 2.6 Các nghiệm thức ảnh hƣởng thể tích mơi trƣờng ni cấy ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 17 Bảng 2.7 Các nghiệm thức ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật IBA lên khả rễ tạo hồn chình Cốt khí củ 18 Bảng 3.1 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 22 Bảng 3.2 Ảnh hƣởng mơi trƣờng khống MS biến đổi, nồng độ đƣờng sucrose lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ 26 Bảng 3.3 Ảnh hƣởng thời gian ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 30 Bảng 3.4 Ảnh hƣởng số lần ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 32 Bảng 3.5 Ảnh hƣởng thể tích ni cấy lên khả nhân chồi Cốt khí củ 33 Bảng 3.6 Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng thực vật IBA lên khả tạo hồn chỉnh Cốt khí củ môi trƣờng bán rắn 36 iv DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Các thành phần hệ thống Plantima (Đài Loan) Hình 1.2 Các phận Cốt khí củ (Lá, hoa củ) Hình 2.1 Chồi Cốt khí củ in vitro 11 Hình 2.2 Bố trí thí nghiệm thời gian ngập chìm tạm thời 15 Hình 2.3 Bố trí thí nghiệm số lần ngập chìm tạm thời 16 Hình 2.4 Bố trí thí nghiệm ảnh hƣởng thể tích mơi trƣờng ngập chìm tạm thời lên khả nhân cụm chồi Cốt khí củ in vitro 17 Hình 3.1 Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ 25 Hình 3.2 Ảnh hƣởng mơi trƣờng khống MS biến đổi, nồng độ đƣờng sucrose lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ 29 Hình 3.3 Ảnh hƣởng thời gian ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 31 Hình 3.4 Ảnh hƣởng số lần ngập chìm lên khả nhân chồi Cốt khí củ 33 Hình 3.5 Ảnh hƣởng thể tích ni cấy lên khả nhân chồi Cốt khí củ 35 Hình 3.6 Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng thực vật IBA lên khả tạo hồn chỉnh Cốt khí củ môi trƣờng bán rắn 38 v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT HSN BAP IBA NAA Hệ số nhân N – – Benzyladenine – Indolebutyric acid α – Naphthaleneacetic acid MS Murasighe Skoog (1962) TIS Temporary Immersion System PLB Protocom Like Body vi THÔNG TIN CHUNG Tên đề tài Xây dựng quy trình nhân giống in vitro Cốt khí củ (Polygonum cuspidatum Sieb et Zucc.) (Giai đoạn 2)  Chủ nhiệm Họ tên: Phạm Trần Thủy Tiên Sinh ngày 13/12/1995; Giới tính: Nữ Học vị: Kỹ sƣ Chun ngành: Cơng nghệ sinh học Năm đạt học vị: 2017 Chức vụ: Chuyên viên Phịng Hỗ trợ Cơng nghệ Tế bào Thực vật Tên quan công tác: Trung tâm Ƣơm tạo Doanh nghiệp NNCNC Địa quan: Ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, TP HCM Điện thoại quan: 0286 264 6103 ; Fax: 0286 264 6104 Địa nhà riêng: 271 đƣờng Nhuận Đức, ấp Bàu Cạp, xã Nhuận Đức, huyện Củ Chi, Tp.HCM Điện thoại nhà riêng: ĐTDĐ: 036 6626 621 E-mail: thuytienpt1312@gmail.com  Cơ quan chủ trì: Trung tâm Ƣơm tạo Doanh nghiệp Nơng nghiệp Công nghệ cao  Thời gian thực hiện: 12 tháng  Kinh phí đƣợc duyệt Kinh phí giai đoạn 129,709,645 đồng, đó: Tổng số (đồng) Nguồn Từ Ngân sách nghiệp khoa học TP 129,709,645 Từ nguồn khác (ghi rõ nguồn cấp) - vii Nội dung Giai đoạn (đã nghiệm thu năm 2017): Nhân nhanh cụm chồi in vitro Cốt Khí Củ Giai đoạn (thực năm 2018): Tạo Cốt Khí Củ in vitro hoàn chỉnh Nội dung 3: Ảnh hƣởng chất điều hòa sinh trƣởng thực vật BAP kết hợp với IBA lên khả nhân chồi Cốt khí củ Thời gian thực hiện: từ 01/2018 đến 02/2018 Nội dung 4: Ảnh hƣởng mơi trƣờng khống MS biến đổi, nồng độ đƣờng sucrose lên chất lƣợng chồi Cốt khí củ Thời gian thực hiện: từ 03/2018 đến 06/2018 Nội dung 5: Ảnh hƣởng chế độ ni cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích mơi trƣờng ni cấy) lên khả nhân chồi Cốt khí củ hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời Thời gian thực hiện: từ 05/2018 đến 10/2018 Nội dung 6: Ảnh hƣởng nồng độ chất điều hòa sinh trƣởng thực vật IBA lên khả tạo hồn chỉnh Cốt khí củ môi trƣờng bán rắn Thời gian thực hiện: từ 10/2018 đến 12/2018 Sản phẩm nhiệm vụ Giai đoạn 1: năm 2017 Báo cáo khoa học: Báo cáo đƣợc trình bày khoa học, số liệu đƣợc phân tích phần mềm xử lý thống kê đƣợc hội đồng thơng qua 50 bình chồi Cốt khí củ với tiêu chuẩn: Mỗi bình có khoảng 10 chồi, chiều cao chồi trung bình cm, có – lá, chồi khỏe mạnh, không bị dị dạng Giai đoạn 2: năm 2018 Báo cáo khoa học: Báo cáo đƣợc trình bày khoa học, số liệu đƣợc phân tích phần mềm xử lý thống kê đƣợc hội đồng thơng qua Quy trình nhân giống Cốt khí củ 500 Cốt khí củ in vitro có tiêu chuẩn: chiều cao – 5cm, có – lá, có – rễ, khỏe mạnh, phát triển tốt viii Môi trƣờng ni cấy: mơi trƣờng khống ½ MS + 0,5 mg/L IBA + 30 g/L đƣờng sucrose + 8,5 g/L agar, pH = 5,8 cho kết rễ 100% SƠ ĐỒ CÁC BƢỚC THỰC HIỆN QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY CỐT KHÍ CỦ Cây Cốt khí củ từ vƣờn ƣơm B1 Tái sinh chồi từ chồi ngủ Cốt khí củ B2 Nhân chồi Cốt khí củ B3 Nhân nhanh chồi Cốt khí củ B4 B5 Nhân nhanh chồi Cốt khí củ hệ thống ngập chìm tạm thời Nhân nhanh chồi Cốt khí củ mơi trƣờng thạch B6 Cây Cốt khí củ hoàn chỉnh 45 PHỤ LỤC II Xử lý số liệu HSN số chồi nội dung Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness Stnd kurtosis IN1 1,975 0,0957427 4,84773% 1,9 2,1 0,2 0,697748 -0,526337 IN10 3,825 0,05 1,30719% 3,8 3,9 0,1 1,63299 1,63299 IN11 3,72 0,207846 5,58726% 3,58 4,02 0,44 1,30364 0,955379 IN12 3,805 0,53799 14,139% 3,0 4,1 1,1 -1,60936 1,59106 IN13 3,43 0,396148 11,5495% 3,2 4,02 0,82 1,56594 1,50915 IN14 4,175 0,05 1,1976% 4,1 4,2 0,1 -1,63299 1,63299 IN15 3,78 0,190438 5,03804% 3,5 3,9 0,4 -1,45269 1,27984 IN16 3,45 0,057735 1,67348% 3,4 3,5 0,1 0,0 -2,44949 IN2 2,375 0,0957427 4,03127% 2,3 2,5 0,2 0,697748 -0,526337 IN3 2,525 0,125831 4,98339% 2,4 2,7 0,3 0,922101 0,909229 IN4 3,625 0,0957427 2,64118% 3,5 3,7 0,2 -0,697748 -0,526337 IN5 2,175 0,0957427 4,40196% 2,1 2,3 0,2 0,697748 -0,526337 IN6 2,95 0,057735 1,95712% 2,9 3,0 0,1 0,0 -2,44949 IN7 2,75 0,057735 2,09946% 2,7 2,8 0,1 0,0 -2,44949 IN8 3,05 0,191485 6,27821% 2,8 3,2 0,4 -0,697748 -0,526337 IN9 3,1 0,141421 4,56198% 3,0 3,3 0,3 1,1547 0,612372 Total 64 3,16937 0,669878 21,136% 1,9 4,2 2,3 -0,711138 -1,71476 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 26,3204 15 1,75469 43,19 0,0000 Within groups 1,95 48 0,040625 Total (Corr.) 28,2704 63 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit IN1 1,975 0,100778 1,83172 IN10 3,825 0,100778 3,68172 IN11 3,72 0,100778 3,57672 IN12 3,805 0,100778 3,66172 IN13 3,43 0,100778 3,28672 IN14 4,175 0,100778 4,03172 IN15 3,78 0,100778 3,63672 IN16 3,45 0,100778 3,30672 IN2 2,375 0,100778 2,23172 IN3 2,525 0,100778 2,38172 IN4 3,625 0,100778 3,48172 IN5 2,175 0,100778 2,03172 IN6 2,95 0,100778 2,80672 IN7 2,75 0,100778 2,60672 IN8 3,05 0,100778 2,90672 IN9 3,1 0,100778 2,95672 Total 64 3,16937 CV 0,0636 Upper limit 2,11828 3,96828 3,86328 3,94828 3,57328 4,31828 3,92328 3,59328 2,51828 2,66828 3,76828 2,31828 3,09328 2,89328 3,19328 3,24328 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD 46 Count Mean Homogeneous Groups IN1 1,975 X IN5 2,175 XX IN2 2,375 IN3 2,525 IN7 2,75 IN6 2,95 XX IN8 3,05 X IN9 3,1 X IN13 3,43 X IN16 3,45 XX IN4 3,625 XXX IN11 3,72 XX IN15 3,78 X IN12 3,805 X IN10 3,825 X IN14 4,175 XX XX XX X Xử lý số liệu chiều cao chồi nội dung Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness Stnd kurtosis IN1 4,175 0,125831 3,01391% 4,0 4,3 0,3 -0,922101 0,909229 IN10 3,625 0,0957427 2,64118% 3,5 3,7 0,2 -0,697748 -0,526337 IN11 5,125 0,05 0,97561% 5,1 5,2 0,1 1,63299 1,63299 IN12 6,125 0,05 0,816327% 6,1 6,2 0,1 1,63299 1,63299 IN13 3,825 0,05 1,30719% 3,8 3,9 0,1 1,63299 1,63299 IN14 5,4 0,0816497 1,51203% 5,3 5,5 0,2 0,0 0,612372 IN15 5,15 0,057735 1,12107% 5,1 5,2 0,1 0,0 -2,44949 IN16 4,95 0,057735 1,16636% 4,9 5,0 0,1 0,0 -2,44949 IN2 5,175 0,0957427 1,8501% 5,1 5,3 0,2 0,697748 -0,526337 IN3 5,4 0,0816497 1,51203% 5,3 5,5 0,2 0,0 0,612372 IN4 5,85 0,1 1,7094% 5,8 6,0 0,2 1,63299 1,63299 IN5 4,8 0,0816497 1,70103% 4,7 4,9 0,2 0,0 0,612372 IN6 4,575 0,05 1,0929% 4,5 4,6 0,1 -1,63299 1,63299 IN7 6,4 0,0816497 1,27578% 6,3 6,5 0,2 0,0 0,612372 IN8 4,175 0,125831 3,01391% 4,0 4,3 0,3 -0,922101 0,909229 IN9 5,75 0,057735 1,00409% 5,7 5,8 0,1 0,0 -2,44949 Total 64 5,03125 0,78959 15,6937% 3,5 6,5 3,0 -0,45181 -1,2745 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 38,9575 15 2,59717 389,57 0,0000 Within groups 0,32 48 0,00666667 Total (Corr.) 39,2775 63 47 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit IN1 4,175 0,0408248 4,11696 IN10 3,625 0,0408248 3,56696 IN11 5,125 0,0408248 5,06696 IN12 6,125 0,0408248 6,06696 IN13 3,825 0,0408248 3,76696 IN14 5,4 0,0408248 5,34196 IN15 5,15 0,0408248 5,09196 IN16 4,95 0,0408248 4,89196 IN2 5,175 0,0408248 5,11696 IN3 5,4 0,0408248 5,34196 IN4 5,85 0,0408248 5,79196 IN5 4,8 0,0408248 4,74196 IN6 4,575 0,0408248 4,51696 IN7 6,4 0,0408248 6,34196 IN8 4,175 0,0408248 4,11696 IN9 5,75 0,0408248 5,69196 Total 64 5,03125 CV 0,0162 Upper limit 4,23304 3,68304 5,18304 6,18304 3,88304 5,45804 5,20804 5,00804 5,23304 5,45804 5,90804 4,85804 4,63304 6,45804 4,23304 5,80804 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups IN10 3,625 X IN13 3,825 IN1 4,175 X IN8 4,175 X IN6 4,575 IN5 4,8 IN16 4,95 IN11 5,125 X IN15 5,15 X IN2 5,175 X IN14 5,4 X IN3 5,4 X IN9 5,75 X IN4 5,85 X IN12 6,125 IN7 6,4 X X X X X X Xử lý số liệu HSN số chồi nội dung 4.1 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation HSN 4.1.CT0 2,91 0,224796 7,72496% HSN 4.1.CT1 4,385 0,127932 2,9175% HSN 4.1.CT2 3,085 0,47085 15,2626% HSN 4.1.CT3 2,96 0,327414 11,0613% Total 16 3,335 0,68956 20,6765% ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 5,945 1,98167 20,03 Within groups 1,1874 12 0,09895 Total (Corr.) 7,1324 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals 48 Minimum 2,68 4,28 2,4 2,5 2,4 P-Value 0,0001 Maximum 3,2 4,56 3,46 3,26 4,56 Range 0,52 0,28 1,06 0,76 2,16 Stnd skewness 0,527862 0,933551 -1,34477 -1,04813 1,07763 HSN 4.1.CT0 HSN 4.1.CT1 HSN 4.1.CT2 HSN 4.1.CT3 Total CV 0,0899 Count 4 4 16 Mean 2,91 4,385 3,085 2,96 3,335 Stnd error (pooled s) 0,157282 0,157282 0,157282 0,157282 Lower limit 2,66768 4,14268 2,84268 2,71768 Upper limit 3,15232 4,62732 3,32732 3,20232 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count HSN 4.1.CT0 HSN 4.1.CT3 HSN 4.1.CT2 HSN 4.1.CT1 Mean 2,91 2,96 3,085 4,385 Homogeneous Groups X X X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung 4.1 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum CC 4.1.CT0 4,2275 0,115289 2,72713% 4,1 4,38 CC 4.1.CT1 3,8325 0,0741058 1,93361% 3,77 3,93 CC 4.1.CT2 3,41 0,0804156 2,35823% 3,34 3,51 CC 4.1.CT3 3,275 0,0818535 2,49934% 3,16 3,35 Total 16 3,68625 0,394544 10,7031% 3,16 4,38 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2,23912 0,746375 93,44 0,0000 Within groups 0,09585 12 0,0079875 Total (Corr.) 2,33497 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit CC 4.1.CT0 4,2275 0,0446864 4,15865 4,29635 CC 4.1.CT1 3,8325 0,0446864 3,76365 3,90135 CC 4.1.CT2 3,41 0,0446864 3,34115 3,47885 CC 4.1.CT3 3,275 0,0446864 3,20615 3,34385 Total 16 3,68625 CV 0,0242 Range 0,28 0,16 0,17 0,19 1,22 Stnd skewness 0,521503 0,726786 0,489878 -1,04813 0,641645 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean CC 4.1.CT3 3,275 CC 4.1.CT2 3,41 CC 4.1.CT1 3,8325 CC 4.1.CT0 4,2275 Homogeneous Groups X X X X Xử lý số liệu HSN nội dung 4.2 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation HSN 4.2.CT0 3,115 0,081035 2,60144% HSN 4.2.CT1 3,675 0,0378594 1,03019% HSN 4.2.CT2 4,265 0,112694 2,6423% HSN 4.2.CT3 3,0175 0,0125831 0,417003% Total 16 3,51813 0,519284 14,7603% ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 3,98227 1,32742 254,56 Within groups 0,062575 12 0,00521458 Total (Corr.) 4,04484 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error 49 Minimum 3,01 3,62 4,14 3,0 3,0 Maximum 3,2 3,7 4,37 3,03 4,37 P-Value 0,0000 Range 0,19 0,08 0,23 0,03 1,37 Stnd skewness -0,515556 -1,35418 -0,173429 -0,922101 0,870547 HSN 4.2.CT0 HSN 4.2.CT1 HSN 4.2.CT2 HSN 4.2.CT3 Total CV 0,0205 Count 4 4 16 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count HSN 4.2.CT3 HSN 4.2.CT0 HSN 4.2.CT1 HSN 4.2.CT2 Mean 3,115 3,675 4,265 3,0175 3,51813 Mean 3,0175 3,115 3,675 4,265 (pooled s) 0,036106 0,036106 0,036106 0,036106 Lower limit 3,05937 3,61937 4,20937 2,96187 Upper limit 3,17063 3,73063 4,32063 3,07313 Homogeneous Groups X X X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung 4.2 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum CC 4.2.CT0 3,48 0,407349 11,7054% 3,01 3,98 CC 4.2.CT1 4,6225 0,339546 7,34551% 4,13 4,9 CC 4.2.CT2 5,58 0,354307 6,34958% 5,12 5,98 CC 4.2.CT3 3,8225 0,200728 5,25122% 3,58 4,02 Total 16 4,37625 0,88767 20,2838% 3,01 5,98 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 10,4782 3,49274 31,25 0,0000 Within groups 1,34115 12 0,111763 Total (Corr.) 11,8194 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit Upper limit CC 4.2.CT0 3,48 0,167154 3,22247 3,73753 CC 4.2.CT1 4,6225 0,167154 4,36497 4,88003 CC 4.2.CT2 5,58 0,167154 5,32247 5,83753 CC 4.2.CT3 3,8225 0,167154 3,56497 4,08003 Total 16 4,37625 CV 0,0764 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean CC 4.2.CT0 3,48 CC 4.2.CT3 3,8225 CC 4.2.CT1 4,6225 CC 4.2.CT2 5,58 Range 0,97 0,77 0,86 0,44 2,97 Stnd skewness 0,160901 -1,31502 -0,403794 -0,33959 0,612168 Homogeneous Groups X X X X Xử lý số liệu HSN nội dung 5.1 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness HSN 5.1.CT1 6,0075 0,0330404 0,549986% 5,97 6,05 0,08 0,356533 HSN 5.1.CT2 7,325 0,0264575 0,361195% 7,29 7,35 0,06 -0,705387 HSN 5.1.CT3 8,42 0,0391578 0,465057% 8,37 8,46 0,09 -0,489556 Total 12 7,25083 1,03059 14,2134% 5,97 8,46 2,49 -0,181737 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 11,6733 5,83666 5266,16 0,0000 Within groups 0,009975 0,00110833 Total (Corr.) 11,6833 11 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals 50 HSN 5.1.CT1 HSN 5.1.CT2 HSN 5.1.CT3 Total CV 0,0046 Count 4 12 Stnd Error (pooled s) 0,0166458 0,0166458 0,0166458 Mean 6,0075 7,325 8,42 7,25083 Lower limit 5,98087 7,29837 8,39337 Upper limit 6,03413 7,35163 8,44663 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups HSN 5.1.CT1 6,0075 X HSN 5.1.CT2 7,325 HSN 5.1.CT3 8,42 X X Xử lý số liệu số chồi nội dung 5.1 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness SC 5.1.CT1 20,5025 0,0236291 0,11525% 20,47 20,52 0,05 -0,974753 SC 5.1.CT2 22,525 0,0191485 0,0850102% 22,5 22,54 0,04 -0,697748 SC 5.1.CT3 25,545 0,03 0,11744% 25,51 25,57 0,06 -0,302406 Total 12 22,8575 2,16422 9,46832% 20,47 25,57 5,1 0,384469 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 51,517 25,7585 42342,70 0,0000 Within groups 0,005475 0,000608333 Total (Corr.) 51,5224 11 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd Error Count Mean (pooled s) SC 5.1.CT1 20,5025 0,0123322 SC 5.1.CT2 22,525 0,0123322 SC 5.1.CT3 25,545 0,0123322 Total 12 22,8575 CV 0,0001 Lower limit 20,4828 22,5053 25,5253 Upper limit 20,5222 22,5447 25,5647 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups SC 5.1.CT1 20,5025 X SC 5.1.CT2 22,525 SC 5.1.CT3 25,545 X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung 5.1 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness cc 5.1.CT1 5,3275 0,0457347 0,858465% 5,28 5,38 0,1 0,160036 cc 5.1.CT2 5,2125 0,0639661 1,22717% 5,14 5,28 0,14 -0,114647 cc 5.1.CT3 6,2875 0,464857 7,39335% 5,98 6,98 1,0 1,56453 Total 12 5,60917 0,560364 9,99016% 5,14 6,98 1,84 2,18975 ANOVA Table 51 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2,78727 1,39363 18,81 0,0006 Within groups 0,666825 0,0740917 Total (Corr.) 3,45409 11 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) cc 5.1.CT1 5,3275 0,136099 cc 5.1.CT2 5,2125 0,136099 cc 5.1.CT3 6,2875 0,136099 Total 12 5,60917 CV 0,0485 Lower limit 5,1098 4,9948 6,0698 Upper limit 5,5452 5,4302 6,5052 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups cc 5.1.CT2 5,2125 X cc 5.1.CT1 5,3275 X cc 5.1.CT3 6,2875 X Xử lý số liệu HSN nội dung 5.2 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness HSN 5.2.CT1 7,2125 0,0997914 1,38359% 7,09 7,32 0,23 -0,286542 HSN 5.2.CT2 7,3575 0,035 0,475705% 7,32 7,4 0,08 0,26185 HSN 5.2.CT3 8,8075 0,142215 1,6147% 8,7 9,0 0,3 0,881917 HSN 5.2.CT4 7,925 0,0341565 0,430997% 7,88 7,96 0,08 -0,614689 Total 16 7,82562 0,651859 8,3298% 7,09 9,0 1,91 1,15972 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6,27607 2,09202 256,89 0,0000 Within groups 0,097725 12 0,00814375 Total (Corr.) 6,37379 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd Error Count Mean (pooled s) HSN 5.2.CT1 7,2125 0,0451214 HSN 5.2.CT2 7,3575 0,0451214 HSN 5.2.CT3 8,8075 0,0451214 HSN 5.2.CT4 7,925 0,0451214 Total 16 7,82562 CV 0,0115 Lower limit 7,14298 7,28798 8,73798 7,85548 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups HSN 5.2.CT1 7,2125 X HSN 5.2.CT2 7,3575 HSN 5.2.CT4 7,925 HSN 5.2.CT3 8,8075 X X X Xử lý số liệu số chồi nội dung 5.2 52 Upper limit 7,28202 7,42702 8,87702 7,99452 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness sc 5.2.CT1 23,42 0,261151 1,11508% 23,19 23,79 0,6 1,12317 sc 5.2.CT2 23,0975 0,0206155 0,0892544% 23,07 23,12 0,05 -0,58244 sc 5.2.CT3 24,17 0,193046 0,7987% 23,91 24,34 0,43 -0,829415 sc 5.2.CT4 23,735 0,0960902 0,404846% 23,61 23,82 0,21 -0,662596 Total 16 23,6056 0,436424 1,84882% 23,07 24,34 1,27 0,428412 53 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2,51162 0,837206 29,09 0,0000 Within groups 0,345375 12 0,0287812 Total (Corr.) 2,85699 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) sc 5.2.CT1 23,42 0,0848252 sc 5.2.CT2 23,0975 0,0848252 sc 5.2.CT3 24,17 0,0848252 sc 5.2.CT4 23,735 0,0848252 Total 16 23,6056 CV 0,0072 Lower limit 23,2893 22,9668 24,0393 23,6043 Upper limit 23,5507 23,2282 24,3007 23,8657 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups sc 5.2.CT2 23,0975 X sc 5.2.CT1 23,42 sc 5.2.CT4 23,735 sc 5.2.CT3 24,17 X X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung 5.2 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness cc 5.2.CT1 5,13 0,16207 3,15926% 4,92 5,3 0,38 -0,515556 cc 5.2.CT2 5,6225 0,162147 2,8839% 5,48 5,84 0,36 0,809436 cc 5.2.CT3 5,65 0,189385 3,35195% 5,5 5,92 0,42 1,20011 cc 5.2.CT4 5,865 0,0574456 0,979465% 5,8 5,94 0,14 0,422094 Total 16 5,56688 0,309208 5,55443% 4,92 5,94 1,02 -1,10075 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1,15897 0,386323 16,85 0,0001 Within groups 0,275175 12 0,0229312 Total (Corr.) 1,43414 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd Error Count Mean (pooled s) cc 5.2 CT1 5,13 0,0757153 cc 5.2 CT2 5,6225 0,0757153 cc 5.2 CT3 5,65 0,0757153 cc 5.2 CT4 5,865 0,0757153 Total 16 5,56688 CV 0,0272 Lower limit 5,01335 5,50585 5,53335 5,74835 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups cc 5.2.CT1 5,13 X cc 5.2.CT2 5,6225 X 54 Upper limit 5,24665 5,73915 5,76665 5,98165 XX cc 5.2.CT3 5,65 cc 5.2.CT4 5,865 X Xử lý số liệu HSN nội dung 5.3 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness HSN 5.3.CT1 6,305 0,0420317 0,666641% 6,25 6,35 0,1 -0,527793 HSN 5.3.CT2 6,455 0,0208167 0,322489% 6,43 6,48 0,05 0,0 HSN 5.3.CT3 6,465 0,0264575 0,409242% 6,44 6,5 0,06 0,705387 HSN 5.3.CT4 6,3875 0,0298608 0,467488% 6,35 6,42 0,07 -0,344987 Total 16 6,40313 0,0716211 1,11853% 6,25 6,5 0,25 -1,1673 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,0655688 0,0218563 23,06 0,0000 Within groups 0,011375 12 0,000947917 Total (Corr.) 0,0769438 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd Error Count Mean (pooled s) HSN 5.3.CT1 6,305 0,0153941 HSN 5.3.CT2 6,455 0,0153941 HSN 5.3.CT3 6,465 0,0153941 HSN 5.3.CT4 6,3875 0,0153941 Total 16 6,40313 CV 0,0048 Lower limit 6,28128 6,43128 6,44128 6,36378 Upper limit 6,32872 6,47872 6,48872 6,41122 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups HSN 5.3.CT1 6,305 X HSN 5.3.CT4 6,3875 HSN 5.3.CT2 6,455 X HSN 5.3.CT3 6,465 X X Xử lý số liệu số chồi nội dung 5.3 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness SC 5.3.CT1 36,555 0,82996 2,27044% 35,5 37,51 2,01 -0,283294 SC 5.3.CT2 47,5975 0,274029 0,575721% 47,32 47,97 0,65 0,777471 SC 5.3.CT3 45,36 0,0594418 0,131045% 45,28 45,41 0,13 -0,839714 SC 5.3.CT4 49,0025 0,472185 0,963593% 48,57 49,66 1,09 0,994402 Total 16 44,6287 5,01747 11,2427% 35,5 49,66 14,16 -1,67802 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 374,653 124,884 504,37 0,0000 Within groups 2,97125 12 0,247604 Total (Corr.) 377,625 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd Error 55 Count SC 5.3.CT1 SC 5.3.CT2 SC 5.3.CT3 SC 5.3.CT4 Total 16 CV 0,0111 Mean 36,555 47,5975 45,36 49,0025 44,6287 (pooled s) 0,248799 0,248799 0,248799 0,248799 Lower limit 36,1717 47,2142 44,9767 48,6192 Upper limit 36,9383 47,9808 45,7433 49,3858 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups SC 5.3.CT1 36,555 X SC 5.3.CT3 45,36 SC 5.3.CT2 47,5975 SC 5.3.CT4 49,0025 X X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung 5.3 Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness cc 5.3.CT1 5,475 0,122338 2,23449% 5,35 5,64 0,29 0,727758 cc 5.3.CT2 6,6525 0,0386221 0,580565% 6,6 6,69 0,09 -0,818462 cc 5.3.CT3 6,7275 0,0170783 0,253857% 6,71 6,75 0,04 0,614689 cc 5.3.CT4 5,87 0,0316228 0,538719% 5,83 5,9 0,07 -0,516398 Total 16 6,18125 0,548803 8,87852% 5,35 6,75 1,4 -0,411688 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 4,46453 1,48818 335,36 0,0000 Within groups 0,05325 12 0,0044375 Total (Corr.) 4,51778 15 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) cc 5.3.CT1 5,475 0,0333073 cc 5.3.CT2 6,6525 0,0333073 cc 5.3.CT3 6,7275 0,0333073 cc 5.3.CT4 5,87 0,0333073 Total 16 6,18125 CV 0,0108 Lower limit 5,42368 6,60118 6,67618 5,81868 Upper limit 5,52632 6,70382 6,77882 5,92132 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups cc 5.3.CT1 5,475 X cc 5.3.CT4 5,87 cc 5.3.CT2 6,6525 X cc 5.3.CT3 6,7275 X X Xử lý số liệu chiều dài rễ trung bình nội dung Summary Statistics CD re 6.IBA1 Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness 1,8 0,25807 14,3372% 1,5 2,03 0,53 -0,285983 56 CD re 6.IBA2 3,17 0,101325 3,19636% 3,08 3,3 0,22 0,602797 CD re 6.IBA3 4,575 0,43062 9,41245% 4,0 5,0 1,0 -0,71505 CD re 6.IBA4 4,78 0,147196 3,07941% 4,58 4,93 0,35 -0,768046 CD re 6.IBA5 2,6675 0,171925 6,44519% 2,5 2,88 0,38 0,417541 Total 20 3,3985 1,18496 34,8671% 1,5 5,0 3,5 0,00372367 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 25,7379 6,43447 102,61 0,0000 Within groups 0,940575 15 0,062705 Total (Corr.) 26,6785 19 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd Error Count Mean (pooled s) CD re 6.IBA1 1,8 0,125205 CD re 6.IBA2 3,17 0,125205 CD re 6.IBA3 4,575 0,125205 CD re 6.IBA4 4,78 0,125205 CD re 6.IBA5 2,6675 0,125205 Total 20 3,3985 CV 0,0737 Lower limit 1,6113 2,9813 4,3863 4,5913 2,4788 Upper limit 1,9887 3,3587 4,7637 4,9687 2,8562 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups CD re 6.IBA1 1,8 X CD re 6.IBA5 2,6675 CD re 6.IBA2 3,17 CD re 6.IBA3 4,575 X CD re 6.IBA4 4,78 X X X Xử lý số liệu số rễ trung bình nội dung Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness sr.IBA1 6,3575 0,0991211 1,55912% 6,23 6,47 0,24 -0,356533 sr.IBA2 8,9925 0,457703 5,08983% 8,67 9,67 1,0 1,50407 sr.IBA3 9,0325 0,142449 1,57707% 8,89 9,23 0,34 0,897207 sr.IBA4 8,7425 0,100457 1,14907% 8,67 8,89 0,22 1,43461 sr.IBA5 7,1875 0,163987 2,28156% 7,0 7,38 0,38 0,0590171 Total 20 8,0625 1,13771 14,1111% 6,23 9,67 3,44 -0,904663 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 23,7634 5,94085 107,39 0,0000 Within groups 0,829775 15 0,0553183 Total (Corr.) 24,5932 19 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit sr.IBA1 6,3575 0,117599 6,18026 sr.IBA2 8,9925 0,117599 8,81526 sr.IBA3 9,0325 0,117599 8,85526 Upper limit 6,53474 9,16974 9,20974 57 sr.IBA4 sr.IBA5 Total 20 CV 0,0292 8,7425 7,1875 8,0625 0,117599 0,117599 8,56526 7,01026 8,91974 7,36474 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups sr.IBA1 6,3575 X sr.IBA5 7,1875 sr.IBA4 8,7425 X sr.IBA2 8,9925 X sr.IBA3 9,0325 X X Xử lý số liệu chiều cao nội dung Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range Stnd skewness CD 6.IBA1 6,535 0,0932738 1,4273% 6,43 6,65 0,22 0,225384 CD 6.IBA2 6,76 0,195789 2,89629% 6,5 6,93 0,43 -0,763707 CD 6.IBA3 9,425 0,288271 3,05858% 9,0 9,63 0,63 -1,46971 CD 6.IBA4 8,35 0,104243 1,24842% 8,26 8,5 0,24 1,23688 CD 6.IBA5 6,0125 0,168795 2,8074% 5,82 6,23 0,41 0,353347 Total 7,4165 1,31484 17,7286% 5,82 9,63 3,81 1,0141 Range Stnd skewness 20 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 32,339 8,08475 238,50 0,0000 Within groups 0,508475 15 0,0338983 Total (Corr.) 32,8475 19 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit CD 6.IBA1 6,535 0,0920575 6,39625 CD 6.IBA2 6,76 0,0920575 6,62125 CD 6.IBA3 9,425 0,0920575 9,28625 CD 6.IBA4 8,35 0,0920575 8,21125 CD 6.IBA5 6,0125 0,0920575 5,87375 Total 20 7,4165 CV 0,0248 Upper limit 6,67375 6,89875 9,56375 8,48875 6,15125 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups CD 6.IBA5 6,0125 X CD 6.IBA1 6,535 X CD 6.IBA2 6,76 X CD 6.IBA4 8,35 CD 6.IBA3 9,425 X X Xử lý số liệu số nội dung Summary Statistics Count Average Standard deviation Coeff of variation 58 Minimum Maximum SL 6.IBA1 6,0 0,816497 13,6083% 5,0 7,0 2,0 0,0 SL 6.IBA2 7,5 1,29099 17,2133% 6,0 9,0 3,0 0,0 SL 6.IBA3 6,5 0,57735 8,88231% 6,0 7,0 1,0 0,0 SL 6.IBA4 5,5 0,57735 10,4973% 5,0 6,0 1,0 0,0 SL 6.IBA5 6,25 0,5 8,0% 6,0 7,0 1,0 1,63299 Total 20 6,35 0,988087 15,5604% 5,0 9,0 4,0 1,84443 ANOVA Table Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 8,8 2,2 3,38 0,0366 Within groups 9,75 15 0,65 Total (Corr.) 18,55 19 Table of Means with 95,0 percent LSD intervals Stnd error Count Mean (pooled s) Lower limit SL 6.IBA1 6,0 0,403113 5,39244 SL 6.IBA2 7,5 0,403113 6,89244 SL 6.IBA3 6,5 0,403113 5,89244 SL 6.IBA4 5,5 0,403113 4,89244 SL 6.IBA5 6,25 0,403113 5,64244 Total 20 6,35 CV 0,1269 Upper limit 6,60756 8,10756 7,10756 6,10756 6,85756 Multiple Range Tests Method: 95,0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups SL 6.IBA4 5,5 X SL 6.IBA1 6,0 X SL 6.IBA5 6,25 X SL 6.IBA3 6,5 XX SL 6.IBA2 7,5 X 59