Xây dựng quy trình nhân giống in vitro cây bảy lá một hoa paris polyphylla

BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY BẢY LÁ MỘT HOA (Paris polyphylla) THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2019 BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG IN VITRO CÂY BẢY LÁ MỘT HOA (Paris polyphylla) CƠ QUAN CHỦ TRÌ CHỦ NHIỆM Phạm Trần Thủy Tiên THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2019 MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC BẢNG iii DANH MỤC HÌNH iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v TÓM TẮT vi THÔNG TIN CHUNG vii PHẦN MỞ ĐẦU CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.Tổng quan Bảy hoa 1.1.1 Giới thiệu chung vây Bảy hoa 1.1.2 Giá trị dược liệu Bảy hoa 1.1.3 Các nghiên cứu thành phần hóa học Bảy hoa 1.2 Tính hình nghiên cứu nhân giống in vitro Bảy hoa 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước CHƯƠNG II: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nội dung nghiên cứu 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 2.3 Vật liệu nghiên cứu 2.4 Phương pháp nghiên cứu 2.4.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% mẫu thân củ Bảy hoa 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng cytokinin (BA, Kinetin) đến khả tạo chồi từ đoạn thân củ Bảy hoa 11 2.4.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng auxin (NAA, IBA) phương pháp nuôi cấy (lỏng lắc, bán rắn) lên khả tạo cụm chồi Bảy hoa 13 2.5 Phương pháp đo đếm tiêu theo dõi 14 i 2.6 Phương pháp phân tích số liệu 15 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 16 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến tỷ lệ sống, tỷ lệ nhiễm, tỷ lệ chết không nhiễm mẫu Bảy hoa 16 3.2 Ảnh hưởng cytokinin (BA, Kinetin) đến khả tạo chồi từ đoạn thân củ Bảy hoa 20 3.3 Ảnh hưởng auxin (NAA, IBA) phương pháp nuôi cấy (lỏng lắc, bán rắn) đến khả tạo cụm chồi Bảy hoa 24 3.4 Sản phẩm nhiệm vụ 30 CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 31 4.1 Kết luận 31 4.2 Kiến nghị 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC I 35 PHỤ LỤC II 36 ii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Bảng thành phần môi môi trường MS (Murashige Skoog, 1962) Bảng 2.2 Các nghiệm thức thời gian khử trùng thân củ 11 Bảng 2.3 Các nghiệm thức ảnh hưởng BA Kinetin đến khả tạo chồi từ đoạn thân củ Bảy hoa 12 Bảng 2.4 Các nghiệm thức ảnh hưởng NAA, IBA phương pháp nuôi cấy bán rắn, lỏng lắc đến khả tạo cụm chồi Bảy hoa 14 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến tỷ lệ sống mẫu Bảy hoa 16 Bảng 3.2 Ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến tỷ lệ nhiễm mẫu Bảy hoa 16 Bảng 3.3 Ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến tỷ lệ chết không nhiễm mẫu Bảy hoa 17 Bảng 3.4 Ảnh hưởng BA Kinetin đến tỷ lệ tạo chồi từ đoạn thân củ mẫu Bảy hoa 20 Bảng 3.5 Ảnh hưởng BA Kinetin đến số chồi mẫu Bảy hoa 21 Bảng 3.6 Ảnh hưởng NAA, IBA phương pháp nuôi cấy lỏng lắc, bán rắn đến hệ số nhân chồi Bảy hoa sau 12 tuần 24 Bảng 3.7 Ảnh hưởng NAA, IBA phương pháp nuôi cấy lỏng lắc, bán rắn đến số chồi Bảy hoa sau 12 tuần 24 Bảng 3.8 Ảnh hưởng NAA, IBA phương pháp nuôi cấy lỏng lắc, bán rắn đến tỷ lệ tạo rễ Bảy hoa sau 12 tuần 25 iii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Các phận Bảy hoa (Lá, hoa củ) Hình 2.1 Nguồn mẫu Bảy hoa 10 Hình 2.2 Đoạn thân củ Bảy hoa thí nghiệm sau tuần 11 Hình 2.3 Chồi Bảy hoa thí nghiệm sau tuần 13 Hình 3.1 Mẫu Bảy hoa sau tuần theo dõi 19 Hình 3.2 Sự tạo chồi Bảy hoa in vitro mơi trường thí nghiệm 23 Hình 3.3 Chồi Bảy hoa cảm ứng sau tuần 26 Hình 3.4 Sự hình thành rễ trình nhân chồi Bảy hoa sau 12 tuần theo dõi 27 Hình 3.5 Sự nhân chồi Bảy hoa môi trường nuôi cấy bán rắn lỏng lắc sau 12 tuần nuôi cấy 29 Hình 3.6 Bình chồi Bảy hoa 30 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT MS Murasighe Skoog (1962) BA N – – Benzyladenine NAA α – Naphthaleneacetic acid IBA – Indolebutyric acid GA3 Gibberellin HSN Hệ số nhân v TĨM TẮT Nghiên cứu “Xây dựng quy trình nhân giống in vitro Bảy hoa (Paris polyphylla)” thực Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Công nghệ cao kỹ thuật ni cấy mơ Nhóm nghiên cứu tiến hành thực nội dung thí nghiệm, sử dụng phương pháp khử trùng mẫu, phương pháp tạo chồi, phương pháp nhân nhanh chồi mơi trường MS có sử dụng chất điều hịa sinh trưởng thực vật BA, NAA, IBA Kết xây dựng quy trình nhân giống Bảy hoa từ giai đoạn tạo mẫu in vitro đến giai đoạn nhân nhanh chồi thu kết sau: khử trùng HgCl2 0,1% thời gian 10 phút cho tỷ lệ mẫu sống đạt 56,67%, tỷ lệ mẫu nhiễm mẫu chết không bị nhiễm thấp (16,67%, 26,67%) Môi trường tạo chồi từ đoạn thân củ Bảy hoa môi trường MS bổ sung BA 1,5 mg/L Môi trường nhân nhanh chồi môi trường MS bổ sung BA 1,5 mg/L kết hợp NAA 0,2 mg/L môi trường nuôi cấy bán rắn với hệ số nhân chồi đạt 2,33 lần vi THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Xây dựng quy trình nhân giống in vitro Bảy hoa (Paris polyphylla) Chủ nhiệm Họ tên: Phạm Trần Thủy Tiên Sinh ngày: 13/12/1995; Giới tính: Nữ Học vị: Kỹ sư Chun ngành: Cơng nghệ sinh học Năm đạt học vị: 2017 Chức vụ: Chun viên Phịng Hỗ trợ Cơng nghệ Tế bào Thực vật Tên quan công tác: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp NNCNC Địa quan: Ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, TP HCM Điện thoại quan: 0286 264 6103 ; Fax: 0286 264 6104 Điện thoại di động: 036 6626 621 E-mail: thuytienpt1312@gmail.com Thư ký nhiệm vụ: Họ tên: Dương Phú Tiến Sinh ngày: 18/12/1995 Giới tính: Nam Học vị: Kỹ Sư Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Năm đạt học vị: 2017 Chức vụ: Chun viên Phịng Hỗ trợ Cơng nghệ Tế bào Thực vật Tên quan công tác: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp NNCNC Địa quan: Ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, TP HCM Điện thoại quan: 0286 264 6103 ; Fax: 0286 264 6104 Điện thoại di động: 0977454028 E-mail: duongtien18121995@gmail.com vii Cơ quan chủ trì Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp Nông nghiệp Công nghệ cao Điện thoại: 08.62646103 Fax: 08.62646104 E-mail: info@abi.com.vn Website: www.abi.com.vn Địa chỉ: ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, Tp HCM Thời gian thực hiện: từ tháng 01/2019 đến tháng 12/2019 Kinh phí duyệt: 223.133.295 đồng, đó: Nguồn Tổng số (đồng) Từ Ngân sách nghiệp khoa học TP 223.133.295 Từ nguồn khác (ghi rõ nguồn cấp) - Nội dung Xây dựng quy trình nhân giống Bảy hoa từ giai đoạn tạo nguồn mẫu in vitro đến giai đoạn nhân nhanh chồi Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% mẫu thân củ Bảy hoa Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng cytokinin (BA, Kinetin) đến khả tạo chồi từ đoạn thân củ ây Bảy hoa Nội dung 3: Khảo sát ảnh hưởng auxin (NAA, IBA) phương pháp nuôi cấy (lỏng lắc, bán rắn) đến khả tạo cụm chồi Bảy hoa Sản phẩm nhiệm vụ Báo cáo phân tích có đầy đủ số liệu thu thập xử lý thống kê phần mềm xử lý Quy trình nhân giống in vitro Bảy hoa từ giai đoạn tạo nguồn mẫu in vitro ban đầu đến giai đoạn nhân nhanh chồi (Xem phần Phụ lục) 30 bình chồi Bảy hoa viii Devi W., et al “Antioxidant activity and Polyphenol contents of Paris polyphylla Smith and Prospects of in situ conservation” Original Research Article 2018 10 Huang Y., et al “Separation and identification of steroidal compounds with cytotoxic activity against human gastric cancer cell lines in vitro from the rhizomes of Paris polyphylla var chinensis” Chemistry of Natural Compounds, 43(6), 672-677 (2007) 11.Huang Z., 2016 “Seeds germination and tissue culture of Paris polyphylla Smith”, Journal of Anhui Agricultural Sciences 2016 – 27 12.Huang Z., 2013 “Study on tissue culturing and seed germination conditions of Paris polyphylla Journal of South – Central University for Nationalities (Natural Science Edition) 2013 – 02 13.Manoheiran K P., et al, Phytochemitry, 66, 2304-2308 (2003) 14.Li W., et al “Oligostilbenes from Vitis heyneana” Phytochemistry, 42(4), 1163-1168 (1996) 10 15.Kun Y., et al, “Improving rhizome yield and quality of Paris polyphylla through gibberellic acid – induced retardation of senescence of aerial parts” Plant signaling & behavior 2009 May; 4(5): 413–415 16.Selvaraj K., et al “Isolation and structural elucidation of flavonoids from Aquatic Fern Azolla Microphylla and Evaluation of Free Radical Scavenging Activity” International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 5(3), 743-749 (2013) 17.Xiong H., et al, 2012 “Factors affecting the formation of Callus of Paris polyphylla” An Endangered Medicinal Plant Species Lishizhen Medicine and Materia Medica Research 2012 – 33 18.Xiong H., Yi J., Zhang Z Studies on the seed germination and tissue culture of Paris polyphylla var yunnanensis Guangdong Agricultural Sciences 2011 – 21 19.Zhou, Anhuan, et al Identification and quantitative determination of amino acids in “Yun Mu Xiang” (Sausurea lappa) and many leaf Paris (Paris polyphylla), Zhongcaoyao, 15, 496-497 (1984) J S Negi, V K Bisht, A K Bhadari, V P Bhatt, P Singh and N Singh Paris polyphylla: chemical and biological prospectives, Anticancer Agents Med Chem., 14(6), 833-839 (2014) 20.Zuraida A R., Nurul Shahnadz A H., Harteeni A., Roowi S., Che Radziah C M Z., Sreeramanan S A novel approach for rapid micropropagation of maspine pineapple (Ananas comosus L.) shoots using liquid shake culture system African Journal of Biotechnology Vol 10, No (2011) Tài liệu Internet 21.http://khcncaobang.gov.vn/index.php?language=vi&nv=news&op=Khoahoc-cong-nghe/Kiem-tra-tien-do-thuc-hien-de-tai-1901 34 PHỤ LỤC I Sơ đồ bước thực quy trình nhân giống in vitro Bảy hoa từ giai đoạn tạo nguồn mẫu đến giai đoạn nhân nhanh chồi Cây Bảy hoa từ vườn ươm Khử trùng HgCl2 0,1% trong10 phút Tạo chồi từ đỉnh sinh trưởng Bảy hoa Môi trường MS bổ sung BA 1,5 mg/L + 0,2 mg/L NAA Nhân nhanh chồi Bảy hoa mơi trường ni cấy bán rắn Diễn giải quy trình Bước 1: Chuẩn bị mẫu Bảy hoa từ vườn ươm Chọn có hình thái khỏe mạnh, khơng bị sâu bệnh, đoạn thân củ có kích thước – cm sử dụng để tiến hành vào mẫu Mẫu rửa vòi nước chảy loại bỏ nguồn lây nhiễm bề mặt Khử trùng lần NaClO 3,75% 15 phút, – giọt Tween 80 Khử trùng lần dung dịch HgCl2 0,1% 10 phút bổ sung – giọt Tween 80 Mẫu sau khử trùng, đặt môi trường MS Bước 2: Mẫu sau nuôi cấy theo dõi loại nhiễm chuyển vào môi trường cảm ứng tạo chồi môi trường nuôi cấy bán rắn Môi trường nuôi cấy: môi trường khoáng MS + BA 1,5 mg/L + đường sucrose 30 g/L + agar g/L, pH = 5,8 Bước 3: Nhân nhanh chồi Bảy hoa mơi trường ni cấy bán rắn MS có bổ sung BA 1,5 mg/L kết hợp với NAA 0,2 mg/L cho hệ số nhân chồi đạt 2,33% 35 PHỤ LỤC II Xử lý thống kê số liệu thí nghiệm a Nội dung Tỷ lệ mẫu sống sau tuần Summary Statistics for CD Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range CT1 15,302 13,1133 85,6966% 0,906 26,5651 25,6591 CT2 68,855 4,69397 6,81718% 63,4349 71,5651 8,1302 CT3 77,4081 10,1203 13,074% 71,5651 89,094 17,5289 Total 53,855 30,3955 56,4394% 0,906 89,094 88,188 ANOVA Table for CD by Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6798,25 3399,12 34,40 0,0005 Within groups 592,826 98,8043 Total (Corr.) 7391,07 Multiple Range Tests for CD by Cong thuc Method: 95,0 percent LSD Cong thuc Count Mean Homogeneous Groups CT1 15,302 X CT2 68,855 X CT3 77,4081 X Tỷ lệ mẫu sống sau tuần Summary Statistics for D_ND1 CD D_ND1 Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range CT1 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 CT2 48,8457 3,33045 6,8183% 45,0 50,7685 5,7685 CT3 35,2178 3,476 9,87% 33,2109 39,2315 6,0206 Total 28,3231 21,5278 76,0079% 0,906 50,7685 49,8625 36 ANOVA Table for D_ND1 CD by D_ND1 Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3661,23 1830,61 236,98 0,0000 Within groups 46,3488 7,7248 Total (Corr.) 3707,58 Multiple Range Tests for D_ND1 CD by D_ND1 Cong thuc Method: 95,0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups CT1 0,906 X CT3 35,2178 X CT2 48,8457 X Tỷ lệ mẫu nhiễm sau tuần Summary Statistics for B_ND1 CD B_ND1 Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range CT1 74,698 13,1133 17,5551% 63,4349 89,094 25,6591 CT2 21,145 4,69397 22,199% 18,4349 26,5651 8,1302 CT3 12,5919 10,1203 80,3714% 0,906 18,4349 17,5289 Total 36,145 30,3955 84,0932% 0,906 89,094 88,188 ANOVA Table for B_ND1 CD by B_ND1 Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6798,25 3399,12 34,40 0,0005 Within groups 592,826 98,8043 Total (Corr.) 7391,07 Multiple Range Tests for B_ND1 CD by B_ND1 Cong thuc Method: 95,0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups CT3 12,5919 X CT2 21,145 X CT1 74,698 X 37 Tỷ lệ mẫu nhiễm sau tuần Summary Statistics for E_ND1 CD E_ND1 Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range CT1 89,094 0,0 0,0% 89,094 89,094 0,0 CT2 23,855 4,69397 19,6771% 18,4349 26,5651 8,1302 CT3 15,302 13,1133 85,6966% 0,906 26,5651 25,6591 Total 42,7503 35,6415 83,3712% 0,906 89,094 88,188 ANOVA Table for E_ND1 CD by E_ND1 Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 9774,54 4887,27 75,58 0,0001 Within groups 387,984 64,664 Total (Corr.) 10162,5 Multiple Range Tests for E_ND1 CD by E_ND1 Cong thuc Method: 95,0 percent LSD Level Count Mean Homogeneous Groups CT3 15,302 X CT2 23,855 X CT1 89,094 X Tỷ lệ mẫu chết không nhiễm sau tuần Summary Statistics for CD Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range CT1 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 CT2 30,9956 3,83695 12,379% 26,5651 33,2109 6,6458 CT3 46,9228 6,66089 14,1954% 39,2315 50,7685 11,537 Total 26,2748 20,5997 78,401% 0,906 50,7685 49,8625 38 ANOVA Table for CD by Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3276,61 1638,31 83,18 0,0000 Within groups 118,179 19,6966 Total (Corr.) 3394,79 Multiple Range Tests for CD by Cong thuc Method: 95,0 percent LSD Cong thuc Count Mean Homogeneous Groups CT1 0,906 X CT2 30,9956 X CT3 46,9228 X b Nội dung Tỷ lệ mẫu tạo chồi sau tuần Summary Statistics for CD Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range B1 12,5919 10,1203 80,3714% 0,906 18,4349 17,5289 B2 21,145 4,69397 22,199% 18,4349 26,5651 8,1302 B3 37,1406 6,80644 18,3261% 33,2109 45,0 11,7891 B4 23,855 4,69397 19,6771% 18,4349 26,5651 8,1302 DC 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 K1 9,45903 14,8143 156,615% 0,906 26,5651 25,6591 K2 23,855 4,69397 19,6771% 18,4349 26,5651 8,1302 K3 21,145 4,69397 22,199% 18,4349 26,5651 8,1302 K4 21,145 4,69397 22,199% 18,4349 26,5651 8,1302 K5 26,0703 7,40042 28,3864% 18,4349 33,2109 14,776 Total 30 19,7313 11,3696 57,6221% 0,906 45,0 44,094 39 ANOVA Table for CD by Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2682,46 298,051 5,59 0,0007 Within groups 1066,29 20 53,3145 Total (Corr.) 3748,75 29 Multiple Range Tests for CD by Cong thuc Method: 95,0 percent Duncan Cong thuc Count Mean Homogeneous Groups DC 0,906 X K1 9,45903 XX B1 12,5919 XXX B2 21,145 XX K3 21,145 XX K4 21,145 XX K2 23,855 XX B4 23,855 XX K5 26,0703 XX B3 37,1406 X Tỷ lệ mẫu tạo chồi sau tuần Summary Statistics for C_ND2.CD C_ND2.Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range B1 23,855 4,69397 19,6771% 18,4349 26,5651 8,1302 B2 30,9956 3,83695 12,379% 26,5651 33,2109 6,6458 B3 56,9975 6,33577 11,1159% 50,7685 63,4349 12,6664 B4 33,0025 6,33577 19,1979% 26,5651 39,2315 12,6664 DC 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 K1 21,145 4,69397 22,199% 18,4349 26,5651 8,1302 K2 28,7804 3,83695 13,3318% 26,5651 33,2109 6,6458 K3 33,2109 0,0 0,0% 33,2109 33,2109 0,0 40 K4 35,2178 3,476 9,87% 33,2109 39,2315 6,0206 K5 39,1475 5,895 15,0584% 33,2109 45,0 11,7891 Total 30 30,3258 14,228 46,9173% 0,906 63,4349 62,5289 ANOVA Table for C_ND2.CD by C_ND2.Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 5469,42 607,714 30,29 0,0000 Within groups 401,258 20 20,0629 Total (Corr.) 5870,68 29 Multiple Range Tests for C_ND2.CD by C_ND2.Cong thuc Method: 95,0 percent Duncan C_ND2.Cong thuc Count Mean Homogeneous Groups DC 0,906 X K1 21,145 X B1 23,855 XX K2 28,7804 XXX B2 30,9956 XXX B4 33,0025 XX K3 33,2109 XX K4 35,2178 XX K5 39,1475 X B3 56,9975 X Số chồi sau tuần Summary Statistics for B_ND2.CD B_ND2.Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range B1 1,05217 0,298836 28,402% 0,7071 1,2247 0,5176 B2 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 B3 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 B4 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 DC 0,7071 0,0 0,0% 0,7071 0,7071 0,0 41 K1 0,879633 0,298836 33,9728% 0,7071 1,2247 0,5176 K2 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K3 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K4 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K5 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 Total 30 1,12118 0,210579 18,7819% 0,7071 1,2247 0,5176 ANOVA Table for B_ND2.CD by B_ND2.Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,928754 0,103195 5,78 0,0005 Within groups 0,357213 20 0,0178607 Total (Corr.) 1,28597 29 Multiple Range Tests for B_ND2.CD by B_ND2.Cong thuc Method: 95,0 percent Duncan B_ND2.Cong thuc Count Mean Homogeneous Groups DC 0,7071 X K1 0,879633 XX B1 1,05217 XX B3 1,2247 X K5 1,2247 X K2 1,2247 X K4 1,2247 X K3 1,2247 X B4 1,2247 X B2 1,2247 X Số chồi sau tuần Summary Statistics for D_ND2.CD D_ND2.Cong thuc Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range B1 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 B2 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 42 B3 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 B4 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 DC 0,7071 0,0 0,0% 0,7071 0,7071 0,0 K1 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K2 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K3 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K4 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 K5 1,2247 0,0 0,0% 1,2247 1,2247 0,0 Total 30 1,17294 0,157935 13,4648% 0,7071 1,2247 0,5176 ANOVA Table for D_ND2.CD by D_ND2.Cong thuc Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0,723356 0,0803729 Within groups 0,0 20 0,0 Total (Corr.) 0,723356 29 F-Ratio Multiple Range Tests for D_ND2.CD by D_ND2.Cong thuc Method: 95,0 percent Duncan D_ND2.Cong thuc Count Mean Homogeneous Groups DC 0,7071 X B3 1,2247 X K3 1,2247 X K5 1,2247 X K1 1,2247 X K2 1,2247 X B4 1,2247 X K4 1,2247 X B2 1,2247 X B1 1,2247 X 43 P-Value c Nội dung HSN chồi sau 10 tuần Analysis of Variance for HSN - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square MAIN EFFECTS A:Moi truong 0,0885199 0,0885199 B:Dieu hoa 0,319087 0,0797718 INTERACTIONS AB 0,127075 0,0317687 RESIDUAL 0,018308 20 0,000915398 TOTAL (CORRECTED) 0,55299 29 F-Ratio P-Value 96,70 87,14 0,0000 0,0000 34,70 0,0000 ANOVA Table for HSN_1 by To hop Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,534682 0,0594091 64,90 0,0000 Within groups 0,018308 20 0,000915398 Total (Corr.) 0,55299 29 Summary Statistics for HSN_1 To hop Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range LD 1,22474 0,0 0,0% 1,22474 1,22474 0,0 LI1 1,22474 0,0 0,0% 1,22474 1,22474 0,0 LI2 1,2645 0,0395494 3,12768% 1,22474 1,30384 0,0790956 LN1 1,32904 0,021824 1,64209% 1,30384 1,34164 0,0378003 LN2 1,27748 0,0456659 3,5747% 1,22474 1,30384 0,0790956 RD 1,22474 0,0 0,0% 1,22474 1,22474 0,0 RI1 1,22474 0,0 0,0% 1,22474 1,22474 0,0 RI2 1,34164 0,0 0,0% 1,34164 1,34164 0,0 RN1 1,68285 0,0452008 2,68597% 1,64317 1,73205 0,0888831 RN2 1,38973 0,0546356 3,93139% 1,34164 1,44914 0,107497 Total 30 1,31842 0,138089 10,4738% 1,22474 1,73205 0,507306 Multiple Range Tests for HSN_1 by To hop Method: 95,0 percent Duncan To hop Count Mean Homogeneous Groups RI1 1,22474 X 44 RD 1,22474 X LD 1,22474 X LI1 1,22474 X LI2 1,2645 X LN2 1,27748 X LN1 1,32904 X RI2 1,34164 XX RN2 1,38973 X RN1 1,68285 X Số chồi sau 10 tuần Analysis of Variance for So choi_1 - Type III Sums of Squares Source MAIN EFFECTS A:Moi truong B:Dieu hoa INTERACTIONS AB RESIDUAL TOTAL (CORRECTED) Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 0,0154344 0,0565236 0,0154344 0,0141309 93,64 85,73 0,0000 0,0000 0,0210853 0,0032966 0,0963399 20 29 0,00527133 0,00016483 31,98 0,0000 Summary Statistics for So choi_1 To hop Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range LD 1,10668 0,0 0,0% 1,10668 1,10668 0,0 LI1 1,10668 0,0 0,0% 1,10668 1,10668 0,0 LI2 1,12441 0,0175898 1,56436% 1,10668 1,14186 0,0351764 LN1 1,15281 0,00948808 0,823036% 1,14186 1,15829 0,0164338 LN2 1,13013 0,0203091 1,79706% 1,10668 1,14186 0,0351764 RD 1,10668 0,0 0,0% 1,10668 1,10668 0,0 RI1 1,10668 0,0 0,0% 1,10668 1,10668 0,0 RI2 1,15829 0,0 0,0% 1,15829 1,15829 0,0 RN1 1,29717 0,0173882 1,34047% 1,28186 1,31607 0,034213 RN2 1,17872 0,0231099 1,9606% 1,15829 1,2038 0,0455092 Total 30 1,14683 0,0576374 5,02582% 1,10668 1,31607 0,209392 45 ANOVA Table for So choi_1 by To hop Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0,0930433 0,0103381 62,72 0,0000 Within groups 0,0032966 20 0,00016483 Total (Corr.) 0,0963399 29 Multiple Range Tests for So choi_1 by To hop Method: 95,0 percent Duncan To hop Count Mean Homogeneous Groups RI1 1,10668 X RD 1,10668 X LD 1,10668 X LI1 1,10668 X LI2 1,12441 X LN2 1,13013 X LN1 1,15281 X RI2 1,15829 XX RN2 1,17872 X RN1 1,29717 X Tỷ lệ mẫu tạo rễ sau10 tuần Analysis of Variance for TL mau tao re_1 - Type III Sums of Squares Source MAIN EFFECTS A:Moi truong B:Dieu hoa INTERACTIONS AB RESIDUAL TOTAL (CORRECTED) Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value 17,4898 2777,87 17,4898 694,468 4,76 188,94 0,0413 0,0000 69,9592 73,5112 2938,83 20 29 17,4898 3,67556 4,76 0,0073 Summary Statistics for TL mau tao re_1 To hop Count Average Standard deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range LD 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 LI1 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 46 LI2 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 LN1 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 LN2 21,145 4,69397 22,199% 18,4349 26,5651 8,1302 RD 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 RI1 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 RI2 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 RN1 0,906 0,0 0,0% 0,906 0,906 0,0 RN2 28,7804 3,83695 13,3318% 26,5651 33,2109 6,6458 Total 30 5,71733 10,0667 176,074% 0,906 33,2109 32,3049 ANOVA Table for TL mau tao re_1 by To hop Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2865,32 318,369 86,62 0,0000 Within groups 73,5112 20 3,67556 Total (Corr.) 2938,83 29 Multiple Range Tests for TL mau tao re_1 by To hop Method: 95,0 percent Duncan To hop Count Mean Homogeneous Groups LI1 0,906 X LI2 0,906 X LN1 0,906 X LD 0,906 X RD 0,906 X RI1 0,906 X RI2 0,906 X RN1 0,906 X LN2 21,145 X RN2 28,7804 X 47