Nghiên Cứu Bào Chế Xà Phòng Trị Mụn Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh.pdf

0 BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ XÀ PHÒNG TRỊ MỤN Cơ quan chủ trì nhiệm vụ Khoa[.]

BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ BÁO CÁO KẾT QUẢ ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ XÀ PHÒNG TRỊ MỤN Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Khoa Y HỌC CỔ TRUYỀN Chủ trì nhiệm vụ: ThS Hứa Hồng Oanh – TS Nguyễn Thành Triết Thành phố Hồ Chí Minh - 2020 ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ XÀ PHỊNG TRỊ MỤN (Đã chỉnh sửa theo kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày 09/12/2020) Chủ trì nhiệm vụ: ThS Hứa Hồng Oanh TS Nguyễn Thành Triết Thành phố Hồ Chí Minh - 2020 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG I – TỔNG QUAN CHƯƠNG II – ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 CHƯƠNG III - KẾT QUẢ - BÀN LUẬN 20 CHƯƠNG IV – BÀN LUẬN 26 CHƯƠNG V – KẾT LUẬN 29 CHƯƠNG VI – KIẾN NGHỊ 30 ĐẶT VẤN ĐỀ Mụn trứng cá thông thường (mụn sần, mụn mủ, mụn đầu đen, mụn đầu trắng) loại bệnh lý da phổ biến nước phát triển Mụn trứng cá thường xuất da nhờn, kèm theo mụn (đầu đen trắng) vùng mặt thơng thường cịn xuất cổ, vai, ngực lưng Trong trường hợp bị mụn vừa nặng, da trở nên ửng đỏ với phát triển nốt sần gây viêm nhiễm mụn mủ Mụn khiến tâm lý căng thẳng, khó chịu kéo dài đồng thời dẫn đến vết thâm để lại sẹo Bệnh thường gặp độ tuổi dậy thì, xuất lúc với thay đổi hormon thể kéo dài đến độ tuổi trưởng thành Khoảng 80 – 90% niên bị ảnh hưởng mụn trứng cá mức độ khác có đến 20 – 30% số cần hỗ trợ liệu pháp y học Số lượng người trưởng thành bị mụn trứng cá ngày gia tăng ô nhiễm mơi trường (khói, bụi bẩn) Mụn trứng cá có bốn chế gây bệnh tăng sản xuất bã nhờn, tăng sinh nang trứng, vi khuẩn gây mụn trứng cá (Propionibacterium acne) yếu tố gây viêm [1] Trong năm gần đây, hiểu biết tốt chế bệnh sinh mụn trứng cá, phương thức trị liệu thiết kế [2] Có nhiều lựa chọn điều trị để đạt liệu pháp thành công cho số lượng lớn bệnh nhân bị mụn hơn, đảm bảo cải thiện khả dung nạp đáp ứng mong đợi bệnh nhân Để điều trị mụn thành công cần lựa chọn cẩn thận chế phẩm trị mụn theo triệu chứng lâm sàng nhu cầu bệnh nhân Hiện nay, xu hướng sử dụng chế phẩm tự nhiên thân thiện với môi trường người tiêu dùng nước hướng đến Nước ta với nguồn dược liệu phong phú kho tàng thuốc dân gian mạnh cho nghiên cứu phát triển sản phẩm tự nhiên đem lại lợi ích kinh tế Tuy nhiên, việc canh tác nông nghiệp với việc sử dụng chất bảo vệ thực vật với phân bón hóa học, … làm ảnh hưởng đến an toàn chất lượng chế phẩm tự nhiên có nguồn gốc xuất xứ khơng rõ ràng Vì vậy, cần thiết quản lý nguồn nguyên liệu đầu vào chất lượng chế phẩm đầu để đảm bảo an toàn cho người sử dụng Đó mục tiêu hướng đến đề tài này: “Nghiên cứu bào chế xà phòng trị mụn” từ dược liệu tự nhiên CHƯƠNG I – TỔNG QUAN I TỔNG QUAN VỀ ĐIỀU TRỊ MỤN TRỨNG CÁ [1], [2] Mụn trứng cá thông thường (mụn sần, mụn mủ, mụn đầu đen, mụn đầu trắng) loại bệnh lý da phổ biến nước phát triển Mụn trứng cá thường xuất da nhờn, kèm theo mụn (đầu đen trắng) vùng mặt thơng thường cịn xuất cổ, vai, ngực lưng Trong trường hợp bị mụn vừa nặng, da trở nên ửng đỏ với phát triển nốt sần gây viêm nhiễm mụn mủ Mụn khiến tâm lý căng thẳng, khó chịu kéo dài đồng thời dẫn đến vết thâm để lại sẹo Bệnh thường gặp độ tuổi dậy thì, xuất lúc với thay đổi hormon thể kéo dài đến độ tuổi trưởng thành Khoảng 80 – 90% niên bị ảnh hưởng mụn trứng cá mức độ khác có đến 20 – 30% số cần hỗ trợ liệu pháp y học Số lượng người trưởng thành bị mụn trứng cá ngày gia tăng nhiễm mơi trường (khói, bụi bẩn) Mụn trứng cá có bốn chế gây bệnh tăng sản xuất bã nhờn, tăng sinh nang trứng, vi khuẩn gây mụn trứng cá (Propionibacterium acne) yếu tố gây viêm Trong năm gần đây, hiểu biết tốt chế bệnh sinh mụn trứng cá, phương thức trị liệu thiết kế Có nhiều lựa chọn điều trị để đạt liệu pháp thành công cho số lượng lớn bệnh nhân bị mụn hơn, đảm bảo cải thiện khả dung nạp đáp ứng mong đợi bệnh nhân Để điều trị mụn thành công cần lựa chọn cẩn thận chế phẩm trị mụn theo triệu chứng lâm sàng nhu cầu bệnh nhân Hiện nay, phân loại phương thức trị mụn sau: Điều trị chỗ Điều trị chỗ hiệu điều trị mụn trứng cá nhẹ trung bình, bao gồm đơn trị liệu, điều trị kết hợp trì 1.1 Benzoyl peroxid Là tác nhân chỗ hiệu từ nhiều năm có sẵn cơng thức khác (rửa mặt, lotion, cream gel) nồng độ (2,5 - 10%) Dạng gel thường ổn định gel gốc nước gây kích ứng ưu tiên loại cream lotion Benzoyl peroxid chất diệt khuẩn phổ rộng có hiệu tác động oxy hóa Thuốc có hoạt tính chống viêm, tiêu sừng ức chế hình thành mụn, định mụn trứng cá từ nhẹ đến trung bình Nhược điểm benzoyl peroxid phụ thuộc vào nồng độ gây khô da tẩy trắng quần áo, tóc Nó gây viêm da kích ứng với triệu chứng nóng rát, ban đỏ, bong tróc khơ Thường xảy vài ngày đầu điều trị chủ yếu giảm dần tiếp tục sử dụng 1.2 Retinoid chỗ Retinoid sử dụng 30 năm Retinoid chỗ nhắm vào tổn thương tiền chất sinh mụn trứng cá (microcomedo) Hiện có đồng thuận retinoid chỗ nên sử dụng liệu pháp đầu tay, đơn trị liệu kết hợp, mụn viêm nhẹ đến trung bình tác nhân lựa chọn để điều trị trì Hiệu điều trị ghi nhận rõ ràng, retinoid chỗ tập trung vào tăng sinh biểu mô nang bất thường, làm giảm chèn ép nang trứng giảm tiền chất sinh mụn giảm tổn thương mụn có viêm khơng viêm Tretinoin, adapalen, tazaroten, isotretinoin, metretinid, retinaldehyd β-retinoyl glucuronid retinoid chỗ Các retinoid nghiên cứu nhiều để điều trị mụn trứng cá toàn giới tretinoin adapalen Adapalen dung nạp tốt tất retinoid khác so sánh Tretinoin gần có sẵn cơng thức với hệ phân bố giúp cải thiện khả dung nạp Ví dụ: Retin-A Micro (gel 0,1%) có chứa tretinoin bào chế copolyme xốp siêu nhỏ Trong chế phẩm Avita, Tretinoin kết hợp polyoylprepolyme (PP-2) Mỗi công thức bào chế nhằm giải phóng tretinoin từ từ nang bề mặt da, từ làm giảm kích ứng với hiệu trị mụn Các tác dụng phụ với retinoid chỗ viêm da kích ứng ngun phát, xuất dạng ban đỏ, vảy, cảm giác nóng rát thay đổi tùy theo loại da, độ nhạy cảm công thức 1.3 Kháng sinh chỗ Nhiều cơng thức có kháng sinh chỗ, đơn trị liệu kết hợp Kháng sinh chỗ ức chế phát triển P acnes giảm viêm Các kháng sinh chỗ erythromycin clindamycin phổ biến việc kiểm sốt mụn trứng cá có nhiều loại chế phẩm Clindamycin erythromycin có hiệu trị mụn trứng cá dạng bôi chỗ với nồng độ - 4% có khơng bổ sung kẽm Tác dụng phụ ban đỏ, bong tróc, ngứa, khơ rát, viêm đại tràng giả mạc gặp, báo cáo với clindamycin Một tác dụng phụ quan trọng kháng sinh chỗ phát triển vi khuẩn đề kháng đề kháng chéo; đó, không nên sử dụng đơn trị liệu D Các thuốc bôi/ thuốc khác Liệu pháp kết hợp: Benzoyl peroxid có lợi để ngăn ngừa loại bỏ phát triển P acnes đề kháng Vì vậy, liệu pháp lựa chọn nhiều liệu pháp kết hợp Hiệu khả dung nạp tăng cường kết hợp với erythromycin clindamycin chỗ, xác nhận thử nghiệm khác Benzoyl peroxid kết hợp với tretinoin cho vượt trội so với đơn trị liệu Cả hai phân tử khơng nên áp dụng đồng thời benzoyl peroxid oxy hóa tretinoin Một kết hợp retinoid chỗ kháng sinh chỗ có hiệu việc giảm tổn thương viêm không viêm so với sử dụng đơn độc Clindamycin benzoyl peroxid chỗ bôi lần ngày nồng độ clindamycin phosphat 1,2% tretinoin 0,025% công thức gel dạng nước sử dụng lần ngày coi phương pháp điều trị hiệu mụn trứng cá Bổ sung kẽm acetat vào clindamycin gel erythromycin cho thấy hiệu tương đương có lẽ làm giảm phát triển vi khuẩn kháng thuốc Acid salicylic: sử dụng nhiều năm điều trị mụn trứng cá, mạnh retinoid chỗ Acid azelaic 10 - 20%: dạng kem bơi chứng minh có hiệu điều trị viêm mụn trứng cá Acid lactic/ Lactat lotion: hữu ích việc ngăn ngừa giảm số lượng tổn thương mụn trứng cá Tinh dầu trà 5% (Tea tree oil 5%): đáp ứng lâm sàng với chế phẩm chắn chậm so với phương thức điều trị khác Gel acid picolinic 10%: chất chuyển hóa trung gian acid amin, tryptophan, có đặc tính chống vi rút, kháng khuẩn điều hòa miễn dịch Khi thoa hai lần ngày 12 tuần cho thấy có hiệu hai loại tổn thương mụn, cần thử nghiệm thêm để xác nhận tính an tồn hiệu Dapson gel 5%: sulfon có đặc tính chống viêm kháng khuẩn Các thử nghiệm xác nhận gel dapson 5% có hiệu an toàn dùng đơn trị liệu kết hợp với thuốc bôi khác điều trị mụn trứng cá từ nhẹ đến trung bình Liệu pháp hệ thống 2.1 Kháng sinh toàn thân Kháng sinh uống định mụn chủ yếu từ trung bình đến nặng Tetracyclin dẫn xuất lựa chọn Các macrolid, co-trimoxazol trimethoprim lựa chọn thay khác cho mụn trứng cá Các tác nhân sau không nên sử dụng mụn trứng cá thiếu hiệu cân nhắc an toàn cephalosporin, sulphonamid chất ức chế gyrase Tetracyclin (500 mg, g/ ngày), doxycyclin (50 - 200 mg/ ngày), minocyclin (50 200 mg/ ngày), lymecyclin (150 - 300 mg/ ngày), erythromycin (500 mg - g/ ngày), co-trimoxazol, trimethoprim gần azithromycin (500 mg * ba lần/ tuần) sử dụng thành công điều trị mụn trứng cá Minocyclin doxycyclin có hiệu tetracyclin erythromycin Gần đây, doxycyclin liều thấp liều kháng khuẩn (20 mg * hai lần/ ngày) viên thuốc minocyclin phóng thích kéo dài (1 mg/ kg/ ngày) sử dụng có hiệu quả, cần thử nghiệm thêm Khó chịu đường tiêu hóa nấm Candida âm đạo tác dụng phụ phổ biến Doxycyclin liên quan đến nhạy cảm ánh sáng Minocyclin tạo lắng đọng sắc tố da, màng nhầy Viêm gan tự miễn, hội chứng giống lupus ban đỏ hệ thống phản ứng giống bệnh huyết xảy với minocyclin Điều trị lâu dài kháng sinh đường uống không đe dọa đến khả đề kháng P acnes mà gây tụ cầu khuẩn coagulase âm tính da, Staphylococcus aureus mũi Streptococci khoang miệng Có liên quan rõ sử dụng kháng sinh mụn trứng cá tỷ lệ nhiễm trùng đường hô hấp Nghiên cứu chứng minh P acnes đề kháng kháng sinh gia tăng, phổ biến với erythromycin Do đó, cần phải xem xét sách kê đơn thuốc kháng sinh ủng hộ việc sử dụng chế phẩm khơng chứa kháng sinh Đơn trị liệu kháng sinh phải tránh kết hợp với retinoid benzoyl peroxid chỗ theo nhu cầu Bất nơi nên hạn chế thời gian điều trị Thời gian điều trị tối thiểu thông thường - tuần cung cấp tối đa 12 – 18 tuần dài Nên sử dụng loại kháng sinh điều trị lại sử dụng benzoyl peroxid tối thiểu – ngày đợt kháng sinh để giảm vi sinh vật kháng thuốc Tránh sử dụng đồng thời điều trị đường uống chỗ với kháng sinh khác 2.2 Liệu pháp nội tiết tố Có thể cần thiết bệnh nhân nữ mắc bệnh bã nhờn nghiêm trọng, rụng tóc rõ lâm sàng, hội chứng SAHA (bã nhờn/ mụn trứng cá/ rậm lơng/ hói đầu), mụn trứng cá khởi phát muộn Cách tiếp cận liệu pháp hormon mụn trứng cá ngăn chặn tác động nội tiết tố androgen tuyến bã nhờn Cần tham khảo ý kiến bác sĩ sản phụ khoa trước bắt đầu trị liệu a) Thuốc tránh thai Estrogen thường kết hợp với proestin để tránh nguy ung thư nội mạc tử cung Tác dụng chống mụn trứng cá thuốc tránh thai cách giảm mức độ androgen tuần hồn thơng qua việc ức chế hormon luteinizing (LH) hormon kích thích nang trứng (FSH) Các chất FDA phê duyệt bao gồm norgestimat với ethinyl estradiol norethindon acetat với ethinyl estradiol b) Spironolacton Hoạt động chủ yếu chất ức chế thụ thể androgen steroid Spironolacton gây tăng kali máu (khi dùng liều cao có tổn thương tim thận), kinh nguyệt khơng c) Cyproteron acetat Đây tác nhân ngăn chặn thụ thể androgen nghiên cứu tìm thấy có hiệu điều trị mụn trứng cá nữ Liều cao có hiệu so với liều thấp Nó kết hợp (2 mg) với ethinyl estradiol (35 50 g) công thức tránh thai đường uống để điều trị mụn trứng cá d) Flutamid Hiệu việc trị mụn trứng cá sử dụng phụ nữ mắc chứng rậm lông e) Isotretinoin uống Retinoid đường uống định mụn trứng cá từ trung bình đến nặng mức độ nhẹ tạo sẹo tổn thương tâm lý, không đáp ứng với liệu pháp thông thường Đây loại thuốc ảnh hưởng đến bốn yếu tố gây bệnh liên quan đến nguyên nhân mụn trứng cá Liều phê duyệt 0,5 - mg/ kg/ ngày, thường dùng 20 tuần Ngồi ra, sử dụng liều thấp thời gian dài hơn, với tổng liều tích lũy 120 mg/ kg Những xu hướng phát triển chế độ điều trị isotretinoin liều thấp dài hạn công thức isotretinoin (micronized isotretinoin) Các tác dụng phụ bao gồm tác dụng hệ thống xương, niêm mạc nhãn khoa, đau đầu ảnh hưởng đến hệ thần kinh trung ương Hầu hết tác dụng phụ tạm thời hết sau ngưng thuốc Isotretinoin đường uống chất gây dị tật bẩm sinh Do đó, phụ nữ độ tuổi sinh đẻ cần thử thai âm tính trước điều trị, cần biện pháp tránh thai nghiêm ngặt trước, chí kéo dài sau tuần điều trị Do đó, Hoa Kỳ, chương trình quản lý rủi ro (iPLEDGE) phát triển, tất bệnh nhân điều trị thuốc phải đăng ký Ngồi ra, cịn có phương pháp điều trị khơng dùng thuốc: điều trị laser; CHƯƠNG III - KẾT QUẢ 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến chất lượng chế phẩm Một yếu tố ảnh hưởng đến hiệu suất phản ứng xà phịng hóa nhiệt độ Do đó, nghiên cứu sản xuất quy mô nhỏ cần tiến hành khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến phản ứng xà phịng hóa Phản ứng thực điều kiện cố định sau: Thành phần tỷ lệ dầu béo là: Dầu olive, dầu dừa dầu đậu nành với tỷ lệ 3:1:1 Thành phần dược chất: Bột thân Khổ qua, gel Lô hội, tinh dầu Kinh giới tinh dầu Trầu không NaOH thiếu 7% Nước: lượng đủ hòa tan hết lượng NaOH Thời gian xà phòng hóa: phút Phản ứng tiến hành thực nhiệt độ 60 °C, 70 °C 80 °C Tại nhiệt độ thực thí nghiệm lần Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến phản ứng xà phịng hóa phương pháp gia nhiệt nhẹ, trình bày bảng Bảng Kết nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến chất lượng bánh xà phòng Nhiệt độ (°C) Màu sắc Độ sánh Độ cứng sau ủ 60 Xanh đen Sánh vừa Cứng 70 Xanh đen Sánh đặc Cứng 80 Xanh đen Đặc Cứng Như vậy, nhiệt độ tối ưu q trình xà phịng hóa 60 °C đạt độ cứng thành phẩm thích hợp để bào chế với bột dược liệu tinh dầu 3.2 Kết khảo sát ảnh hưởng NaOH đến chất lượng chế phẩm Khảo sát ảnh hưởng NaOH thực điều kiện NaOH thiếu 3% 5% 7% để phản ứng xà phịng hóa tạo bánh xà phịng chất lượng Phản ứng thực điều kiện cố định sau: Thời gian phản ứng: phút Nhiệt độ: 60 °C Nước: lượng vừa đủ hòa tan hết lượng NaOH 20 Thành phần tỷ lệ dầu béo là: 3:1:1 Tại khảo sát đánh giá tỷ lệ NaOH ảnh hưởng đến q trình phản ứng xà phịng hóa thực lần Kết khảo trình bày bảng Bảng Kết nghiên cứu ảnh hưởng NaOH đến chất lượng bánh xà phòng Lượng NaOH so với tính Độ cứng xà tốn thiếu (%) phòng Màu Cứng Xanh đen Cứng Xanh đen Chắc Xanh đen Kết bảng cho thấy lượng NaOH thiếu 7% tốt xà phịng tự nhiên thân thiện với da nên tối ưu thiếu 7% để phản ứng dư lượng dầu béo cần thiết 3.3 Kết ảnh hưởng thành phần dầu béo lên xà phòng Tỷ lệ dầu béo thành phần dùng để nấu xà phịng ảnh hưởng lớn đến tính chất chất lượng bánh xà phịng thành phẩm, ví dụ độ cứng, dưỡng ẩm, tạo bọt, … Do đó, nghiên cứu sản xuất quy mô nhỏ, đề tài tiến hành khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ dầu béo (olive, dừa, đậu nành) lên chất lượng bánh xà phòng với mục đích đưa cơng thức xà phịng có chất lượng tốt Kết nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ thành phần dầu béo đến chất lượng xà phịng trình bày bảng 3.4 Kết thử pH chế phẩm Chế phẩm xà phòng sau bào chế phải để – tuần q trình xà phịng hóa diễn Sau tuần lấy mẫu xà phòng hòa tan vào nước mô tả phần phương pháp nghiên cứu Chỉ số pH đo máy đo Metler Toledo S220 sau hiệu chuẩn dung dịch chuẩn (pH = 7) cung cấp Giá trị trung bình pH chế phẩm (n = 3): 10,3 ± 21 Bảng Kết nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ thành phần dầu béo đến chất lượng xà phòng tiêu đánh giá so với tiêu chuẩn TCVN2224:1991 Chỉ tiêu Mẫu Mẫu Mẫu acid 63,536 64,185 62,137 Hàm lượng NaOH, 0,046 0,031 0,039 3,298 4,456 2,832 0,008 0,010 0,020 < 1,50 3,290 4,446 2,812 < 1,00 Hàm lượng TCVN2224:1991 béo, % < 0,05 % Tổng hàm lượng chất hữu chất béo chưa xà phòng hóa, % Hàm lượng chất hữu khơng xà phịng hóa, % Hàm lượng chất béo khơng xà phịng hóa, % Kết cấu bánh Chắc, Cứng Cứng Cứng mịn, vết rạn nứt Xanh đen, Màu Tươi sáng, đồng Xanh đen, đồng Xanh đen, tương ứng đồng nhất đồng với màu quy định Có mùi thơm dễ chịu, Mùi Thơm dễ chịu đặc trưng Thơm dễThơm dễ chịu theo loại sản chịu phẩm, khơng có mùi hơi, chua mỡ bị phân hủy 22 3.5 Thử tác dụng kháng khuẩn xà phòng tự nhiên trị mụn P acnes Định danh chủng vi khuẩn P acnes ATCC 6919: Hình Định danh chủng vi khuẩn P acnes ATCC 6919 môi trường thạch máu Mức độ nhạy cảm chủng chuẩn P acnes ATCC 6919 với chế phẩm nghiên cứu trình bày bảng Bảng Mức độ nhạy cảm P acnes ATCC 6919 với chế phẩm (CP) nghiên cứu Mẫu thử Nồng độ dịchThạch máu Chocolate KK GC chiết (mg/mL) CP 0,2 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP 2,2 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP 4,4 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP 8,8 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP 17,6 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP +P acnes 0,2 Mọc Mọc Mọc Mọc CP +P acnes 2,2 Mọc Mọc Mọc Mọc CP +P acnes 4,4 Mọc Mọc Mọc Mọc CP +P acnes 8,8 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP +P acnes 17,6 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc Mọc Mọc Mọc Mọc Cồn 20% + P acnes Chế phẩm nồng độ 8,8 mg/mL có tác dụng ức chế chủng vi khuẩn P acnes ATCC 6919 23 Mức độ nhạy cảm P acnes phân lập từ bệnh nhân với chế phẩm nghiên cứu thể bảng Bảng Mức độ nhạy cảm P acnes phân lập từ bệnh nhân với chế phẩm nghiên cứu Dịch chiết Nồng độ dịch Thạch máu Chocolate KK GC chiết (mg/mL) 4,4 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc 8,8 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc + 4,4 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc + 8,8 Không mọc Không mọc Không mọc Không mọc CP 10% (0,05 g chế phẩm /0,5 ml) CP 20% (0,1 g chế phẩm /0,5 ml) CP 10% P.acnes CP 20% P.acnes Mẫu thử 10%: nồng độ 4,4 mg/mL (0,05 g chế phẩm/0,5 ml) mẫu thử 20%: 8,8 mg/mL (0,1 g chế phẩm/0,5 ml) có tác dụng ức chế phát triển P acnes phân lập từ bệnh nhân 3.6 Kết khảo sát khả kháng khuẩn mẫu chế phẩm thử nghiệm nhóm vi khuẩn P.acnes Kết khảo sát trình bày bảng Bảng Kết thử tác dụng kháng khuẩn chế phẩm nghiên cứu chủng P acnes Đường kính vòng kháng khuẩn mẫu thử (100 g/đĩa)/mẫu chuẩn % (n =2) Chủng vi sinh vậtP acnes thử nghiệm P acnes ATCC 6919 (BN1) P acnes (BN2) Chế phẩm 53,8 48,4 41,0 Chứng dương 50,0 47,0 45,3 Chứng âm Âm tính (-) (-) 24 Chế phẩm xà phịng tự nhiên nghiên cứu có tác dụng kháng khuẩn P acnes 3.7 Kết khảo sát khả kháng khuẩn mẫu chế phẩm thử nghiệm nhóm vi khuẩn khác nấm Candida albicans Kết khảo sát hình cho thấy chế phẩm có tác dụng kháng vi khuẩn khác S aureus nấm Candida albicans Hình Khảo sát khả kháng khuẩn chế phẩm S aureus nấm Candida albicans 25 CHƯƠNG IV – BÀN LUẬN Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ: Nhìn vào khoảng nhiệt độ phản ứng xà phịng hóa chất lượng sản phẩm khoảng nhiệt độ tốt màu sắc, độ cứng giống Vậy việc tăng nhiệt độ lên cao khơng cần thiết giúp phản ứng xà phịng hóa phản ứng gần hồn tồn Đồng thời, nhiệt độ thích hợp để phối trộn hỗn hợp dược chất gồm bột dược liệu tinh dầu mà không làm ảnh hưởng đến hàm lượng hoạt chất bị phân hủy nhiệt độ cao, đặc biệt tinh dầu Đề tài không tiến hành khảo sát nhiệt độ 60 °C ngưỡng phối trộn thành phần vào làm hỗn hợp sệt, sánh, khó khuấy trộn thành hỗn hợp đồng đổ khuôn Như vậy, nhiệt độ tối ưu q trình xà phịng hóa 60 °C Và thơng số tiếp tục nghiên cứu để tối ưu q trình sản xuất với quy mơ phịng thí nghiệm Khảo sát ảnh hưởng NaOH: Lượng NaOH thiếu 5% tốt sau phản ứng xà phịng hóa cịn dư lượng dầu béo cần thiết, lượng dầu béo giúp giữ hoạt chất lưu giữ lâu da làm tăng tác dụng điều trị, lượng NaOH nhiều q trình xà phịng hóa gây nguyên nhân làm pH cao, sử dụng ảnh hưởng đến da không tốt cho thể Lượng NaOH thiếu 5% giúp tránh trường hợp làm xà phòng cứng giòn gây vỡ Và xà phịng dưỡng da chăm sóc thể tránh trường hợp dư NaOH Do chọn tỷ lệ NaOH thiếu 5% tối ưu sản xuất xà phịng với quy mơ thử nghiệm Kết phân tích ngoại quan mẫu xà phịng bảng cho thấy mẫu xà phòng có kết cấu bánh chắc, cứng, khơng có vết rạn nứt (hình 1), màu xanh đen đồng có mùi thơm dễ chịu tinh dầu kinh giới trầu không Như vậy, mặt tiêu ngoại quan ba mẫu xà phịng đạt TCVN 2224:1991 Tuy nhiên, xét độ cứng mẫu số cứng Khi thử nghiệm sản phẩm xà phòng lên thể người, mẫu cho bọt to, mẫu lại cho bọt nhỏ Cả mẫu đảm bảo tác dụng tẩy sạch, mẫu số tạo cảm giác da mềm mại Các tiêu hóa lý mẫu xà phịng (bảng 5) cho thấy hàm lượng NaOH nằm khoảng 0,03-0,05%, hàm lượng chất hữu khơng xà phịng hóa nhỏ 0,05% Cả hai tiêu đạt TCVN 2224:1991 Hàm lượng NaOH lại mẫu số (0,031%) ba mẫu xà phịng 26 Điều đáng ý hàm lượng acid béo không xà phịng hóa lớn TCVN 2224:1991 (> 1,00) Vì mục đích nghiên cứu chế tạo bánh xà phịng ngồi tác dụng trị mụn cịn dưỡng ẩm, dưỡng da nên lượng acid béo cần phải lấy dư so với lượng NaOH, để đảm bảo lượng acid béo lại bánh xà phòng giữ chức dưỡng da Do đó, hàm lượng acid béo chưa xà phịng hóa vượt TCVN 2224:1991 điều dễ hiểu đạt yêu cầu đưa Như vậy, dựa vào kết phân tích tiêu ngoại quan tiêu hóa lý, mẫu xà phịng số với tỷ lệ dầu dừa, dầu olive, dầu đậu nành 1:3:1 có chức dưỡng ẩm, dưỡng da tốt nhất, tạo bọt nhỏ đảm bảo yếu tố thẩm mỹ hương thơm Thử pH: Chế phẩm xà phòng sau bào chế phải để – tuần q trình xà phịng hóa diễn ra, độ pH độ an toàn Sinh lý da thường tiết thành phần acid, lớp màng amino/ acid lactic tạo để bảo vệ da tác động mơi trường Các thành phần có tính acid, vậy, cách hiệu để làm da với chất tiết bã dầu tích tụ, bụi bẩn vi khuẩn, cách sử dụng xà phịng có tính kiềm Xà phịng bào chế tự nhiên thường có độ pH kiềm 9,0 10,0; khoảng pH lý tưởng cho việc làm bề mặt Ngoài ra, độ pH lý tưởng da mạnh khoẻ khoảng pH Việc sử dụng hàng ngày xà phịng có độ pH tính kiềm không ảnh hưởng đến chế bảo vệ pH da Sử dụng xà phịng có tính kiềm chắn làm tăng độ pH da, nhiên, da tự trở lại chế độ pH acid sau thời gian ngắn Vì vậy, sử dụng chế phẩm cho bệnh nhân bị mụn trứng cá tăng tiết bã nhờn Nghiên cứu khoa học cho thấy việc sử dụng liên tục lâu dài xà phòng kiềm khơng ảnh hưởng đến chế trì pH da người Đánh giá mức độ nhạy cảm P acnes chế phẩm nghiên cứu cho thấy mức độ nhạy cảm P acnes với chế phẩm: Theo kết bảng bảng 7, MIC chế phẩm chủng chuẩn P acnes ATCC 8,8 mg/mL MIC chế phẩm với P acnes phân lập từ bệnh nhân 4,4 mg /mL, giá trị thấp ½ so với MIC chủng chuẩn Điều người bệnh thường tự mua thuốc điều trị mà khơng có đơn thuốc từ bác sỹ chuyên khoa, nên hầu hết bệnh nhân bị bệnh mụn trứng cá dùng chế phẩm có hoạt tính kháng sinh trước đó, ngồi bệnh phẩm trứng cá có thành phần làm suy yếu độc lực vi khuẩn, 27 thử nghiệm cho thấy chế phẩm có hoạt tính mạnh với P acnes chủng phân lập từ bệnh nhân mạnh chủng chuẩn ACTC Với kết bảng 8, nhận thấy hoạt tính kháng khuẩn chế phẩm nghiên cứu thể chủng vi khuẩn gây bệnh P acnes chủng chuẩn chủng phân lập từ bệnh nhân với hoạt lực cao so với mẫu chứng dương mẫu chứng âm khơng có tác dụng vi khuẩn dung môi chiết ethanol 70% có khả bốc nhanh 28 CHƯƠNG V – KẾT LUẬN Sau thời gian thực hiện, đề tài đạt mục tiêu đề ra: Nghiên cứu bào chế mẫu xà phòng với tỷ lệ thành phần dầu dừa, dầu olive, dầu đậu nành 3:1:1, 1:3:1, 1:1:3 với quy trình nấu xà phịng theo phương pháp gia nhiệt nhẹ 60 °C Chọn công thức tỷ lệ thành phần dầu 1:3:1 đạt tiêu chuẩn TCVN 2224:1991 Cơng thức xà phịng chọn đạt tiêu đánh giá theo TCVN 2224:1991, ngoại trừ hàm lượng acid béo khơng xà phịng hóa để tăng dưỡng ẩm da Sản phẩm nghiên cứu bánh xà phịng có thành phần dược chất trị mụn, đồng thời dưỡng ẩm, dưỡng da với thành phần tự nhiên, tạo bọt nhỏ, cứng, thơm dịu tinh dầu bánh xà phòng có cơng thức gồm: hỗn hợp dầu béo 60%, dược chất 25%, NaOH 10%, nước vừa đủ khoảng 5% Chế phẩm xà phòng tự nhiên với thành phần dược liệu bột thân Khổ qua, gel Lô hội, tinh dầu Kinh giới Trầu khơng có hoạt tính kháng khuẩn chủng P acnes Các kết thử tính kháng khuẩn pH cho thấy chế phẩm hứa hẹn đem đến hiệu điều trị mụn an toàn sử dụng 29 CHƯƠNG VI – KIẾN NGHỊ Các hướng nghiên cứu đề xuất đề tài: - Phát triển sản xuất với qui mô lớn kiểm tra chất lượng sản phẩm, đảm bảo đồng chất lượng tất mẻ - Thử nghiệm lâm sàng bệnh nhân có mụn trứng cá - Nghiên cứu cải tiến sản phẩm sang dạng bào chế đại: dạng gel, cream, 30 TÀI LIỆU THAM KHẢO Sanjay K Rathi (2011), Acne vulgaris treatment: the current scenario Indian J Dermatol.; 56(1): 7–13 Hoàng Thị Thanh Nga (2014) Nghiên cứu bào chế gel erythromycin tretinoin Khóa luận tốt nghiệp Đại học Dược Hà Nội; 2-8 Lê Ngân Đồng (2015) Thuốc quý quanh ta NXB Thanh Hóa; 84 – 90 Hội phịng thí nghiệm Việt Nam Bản tin Thử nghiệm ngày Số 16 (05/2016), Độ nhạy kháng sinh – Cách tìm nồng độ ức chế tối thiểu Võ Văn Chi (2012), Từ điển thuốc Việt Nam, tập 2, NXB Y học, Hà Nội, trang 1076, 1109, 1164, 1192 Jia S, Shen M, Zhang F, Xie J (2017) Recent Advances in Momordica charantia: Functional Components and Biological Activities Int J Mol Sci 18(12), pp 25-55 Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Tập 2, NXB Y học, Hà Nội, trang 1096, 1373 Guo Z, Liu Z, Wang X, Liu W, Jiang R, Cheng R, and She G (2012), Elsholtzia: phytochemistry and biological activities, Chem Cent J.; 6: 147-150 Shah SK, Garg G, Jhade D, Patel N (2016), Piper betle: Phytochemical, pharmacological and nutritional value in health management, International Journal of Pharmaceutical Sciences Review and Research, 38(2):181-189 10 Hamman HJ (2008), Composition and Applications of Aloe vera Leaf Gel, Molecules, 13(8): 1599–1616 11 Boateng L, Ansong R, Owusu WB, and Matilda SA (2016), Coconut oil and palm oil's role in nutrition, health and national development: A review, Ghana Med J.; 50(3): 189–196 12 Wani AT, Masoodi FA, Gani A, Baba NW, Rahmanian N, Akhter R, Wani AI, Ahmad M (2018), Olive oil and its principal bioactive compound: Hydroxytyrosol – A review of the recent literature, Trends in Food Science & Technology, 77, p 77-90 13 Woodfield HK, Harwood JL (2017), Oilseed Crops: Linseed, Rapeseed, Soybean, and Sunflower, Encyclopedia of Applied Plant Sciences (Second Edition ), 3, p 34-38 31 Phụ lục- Kết kiểm tra theo TCVN trung tâm Quatest 32 33 34