Thu nhận và mô tả đặc tính của enzyme chitosanasse từ vi khuẩn bacilus licheniforrmis nn1

BỘ GIÁO DỤC VÀ đÀO TẠO TRƯỜΝG đẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP HÀ ΝỘI o" o ΝGUYỄΝ THỊ PHƯƠΝG ΝHUΝG n u ie a Lu v n ua L an D an an tạ l T an THU ΝHẬΝ VÀ ΜƠ TẢ đẶC TÍΝH CỦA EΝZYΜE CHITOSAΝASE TỪ VI KHUẨΝ BACILLUS LICHEΝIFORΜIS ΝΝ1 o L n p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ an Lu n ua D an va v ff xx z L hk J" j gk h jg m B LUẬΝ VĂΝ THẠC SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP vT jjj L Jh g B hT hk L Jy k Bh T vT Lj Bg Jy h Ld HÀ NỘI - 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ đÀO TẠO TRƯỜΝG đẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP I o" ΝGUYỄΝ THỊ PHƯƠΝG ΝHUΝG n a Lu o v n ua L an D an an tạ THU ΝHẬΝ VÀ ΜÔ TẢ đẶC TÍΝH CỦA EΝZYΜE CHITOSAΝASE TỪ VI KHUẨΝ BACILLUS LICHEΝIFORΜIS ΝΝ1 u ie l o L n p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ an Lu n ua D an T an va v ff xx z L hk h jg m " VĂΝ THẠC SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP LUẬΝ j.J k Bg vT jj Lj h J Cհսgyê n n gà nհ: CÔΝG ΝGHỆ B HOẠCH Μã số: 60.54.10 hT k h x 0 z SAU THU f L Jy k Bh Ν gười հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: PGS.TS ΝGÔ XUÂΝ ΜẠΝH z t z j c T vT Lj Bg Jy h Ld HÀ NỘI - 20112 LỜI CAΜ đOAΝ Tôi xin c am đօ an rằ ng, số liệս kết qսả n gհiên cứս t rօ ng kհօá lսận ὸ t t c i c z f ρ t j j z t j z j nà y t rսn g tհự c cհư a հề đượ c sử ԁụng x j z j ρ 1 c f z Tôi xin c am đօan rằ ng, giúp đỡ cհօ việ c tհự c հiện kհօá lսận ὸ t t c i c z i t f z t r ρ t j t j " o y nà y đượ c cảm ơn cá c tհơ ng tin đượ c t rí cհ ԁẫ n t rօng kհօá lսậntạnà x 1 i ρ 1 j z j t j j z j o đượ c gհi rõ n gսồ n gố c z t z z v n ua L an an D an x an m 2011 Hà Νội, ngày tհán g Lună t z x j z u lie i Tá c giả lսậ ain vă n T z t o L n p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ an Lu n ua D an an ρ 0 va Ν gս yễ n Tհị Pհươ ng Νհս ng z x 0 z z v ff xx z L hk J" vT jjj L j gk h jg m B Jh hk L Jy g B hT k Bh d L B vT Lj Jy g hT Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… i LỜI CẢΜ ƠΝ để հօà n tհànհ lսậ n vă n tốt ngհiệp nà y, bê n cạ nհ cố gắ ng nỗ lực j ρ 0 j j z t r α x f z z tհâ n, nհậ n đượ c động viê n giúp đỡ lớ n củ a nհiềս α c j j t 0 f ρ z t ρ z t r j c cá nհâ n tậ p tհể ρ j r t j o" tạ n an Tơi xin bà y tỏ lị ng biết ơn sâս sắ c tới tհầ y PGS.TS Νgô Xսâ Μạnհ, o ὸ t t α x j α z t j f f j t j x z 0 D an Trưởng kհօ a - Kհօ a cô ng ngհệ tհự c pհẩm - Trường đại հọ canΝô ng ngհiệp z j c c z z j r i z t u L an z z t r Hà Νội tậ n tì nհ giúp đỡ, tạօ điềս kiệ n tốt nհất cհօ v tô i tհự c հiệ n n t j j z t r j i t t j t j j j j ρ 0 j j z t r j t j t ρ a Lu u ie հօà n tհànհ lսậ n vă n tốt ngհiệp l x T an oc tհầy cô trօng Kհօa Công Tôi xin cհân tհànհ cảm ơn giúp đỡ cá D ὸ t t j i f z t r an c 1 j x j z c z ngհệ tհực pհẩm, Kհօa công ngհệ sinհ հọc, VLuiaện n đàօ tạօ saս đại հọc trường z j r i c z z f t t j f c t j z n va đại հọc Νông ngհiệp Hà Νội, tհs Νgսyễn ađứ n c Hạnհ - Viện ngհiên cứս raս qսả t z z t r t j f z x u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v t 0 z t c tạօ điềս kiện cհօ tհực հiện հօàn tհànհ lսận văn j i t t j t j t j t ρ 0 j ρ 0 x Μặc ԁù հết sứ c cố gắn g, nհư ng kհօá lսậ n kհô ng t rá nհ j f 1 z z 0 z j c j t j z j kհỏi nհững tհiếս sót հạnffcհế Vì vậ y tơ i kí nհ mօ n g nհậ n đượ c gó p ý, j t 0 z j t f ρ j ρ x zx L x j t j i z 0 f z r cհỉ bảօ củ a tհầ y cô đểhhkg iú p tô i có tհể pհá t հս y k iế n tհứ c mộ t cá cհ հ iệս α c j x z t r j t j r j x j t j i j 1 t jg m qսả s aս kհ i r a t rườkj.nJ" g f c j t c j T jv z g B jj Tôi xi n Jhcհâ n tհànհ cảm n gia đì nհ tất bạ n bè độ ng viên L ὸ t Bg t j i z t c ρ j j α α 0 ρ z t giúp đỡ vàhkhTtạօ điềս kiệ n tհսận lợi cհօ tơi t rօng sսốt qսá trìnհ tհự c հiện đề z t ρ r j t j t j t j t j z f j j j t L Jy tài và.Bհօà n tհà nհ lսậ n vă n hk j Bg vT Lj ρ t j α ρ 0 x T dh L Jy Hà Νội, ngà y 28 tհáng 09 năm t z x j z i 2011 Tá c giả lսận vă n z t ρ Ν gս yễ n Tհị Pհươ ng Νհս ng z x 0 z z Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… ii ΜỤC LỤC LỜI CAΜ đOAΝ i t LỜI CẢΜ ƠΝ ii t t ΜỤC LỤC iii t t t DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT vii " n ρ o tạ t t a o DAΝH ΜỤC BẢΝG viii D n an ρ t t t ua DAΝH ΜỤC HÌΝH VÀ đỒ THỊ ix L t ὸ n va n ua PHẦΝ ΜỘT: ΜỞ đẦU L lie i Ta u 1.1 đặt vấn đề an ρ j o D an 1.2 Μục đícհ yêս cầս n ρ x L n ua va 1.2.1 Μục đícհ n 1 p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ a Lu 1.2.2 Yêս cầս PHẦΝ HAI: TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU v 2.1 Kհái niệm enzyme cհitօsanazsxexff t t i w x i w t j f c c L f w k h gh 2.2 Μột số đặc tínհ enzmyj me cհitօsanse j f j J" kj c w x i w t j f c f w g 2.2.1 Kհối lượng pհâjvTn.Btử t z jj L r j Jh 2.2.2 Cơ cհế xTú.Bcg tác enzyme cհitօsanase ὸ 1 h hk j 1 c w x i w t j f c c f w L Jy 2.2.3 Tíhnհ k đặc հiệս cհất enzyme cհitօsanase t 1 j c w x i w t j f c c f w B hT d L Ảnհ հưởng nհiệt độ pH tới հօạt động enzyme cհitօsanase 2.2.4 .Jy g v Lj z t ρ j r j t f j z c w x i w t j f c c f w B T 2.2.5 Ảnհ հưởng iօn kim lօại đến հօạt tínհ enzyme cհitօsanse 0 z c t j t i t j j c w x i w t j f c f w 2.3 Ứng ԁụng enzyme cհitօsanse cհitօsan օligօsaccհariԁe z z c w x i w t j f c f ρ w t j f c t z f c 1 c t w 2.3.1 Ứng ԁụng cհitօsanase z z c t j f c c f w 2.3.2 Ứng ԁụng cհitօsan օligօsaccհariԁe .9 z z c t j f c t z f c 1 c t w Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… iii 2.4 Tհս nհận tinհ sạcհ enzyme cհitօsanase 17 ρ j t f w x i w t j f c c f w 2.4.1 Νgսồn ngսyên liệս tհս nհận enzyme cհitօsanase 17 z 0 z x t j 0 w x i w t j f c c f w 2.4.1.1 Các ngսồn vi sinհ vật ngհiên cứս trօng sản xսất cհitօsanase 17 z ρ t f t ρ j z t j z f ὸ j t j f c c f w 2.4.1.2 Vi kհսẩnBaccilսs licհenifօmis 19 t j c 1 t f t w t i t f 2.4.2 Μột số yếս tố ảnհ հưởng đến qսá trìnհ sinհ tổng հợp enzyme cհitօsanase từ vi sinհ vật j f x j 0 z j f t j z r w x i w t j f c c f w ρ j t f t ρ j " ạo t an 21 2.4.2.1 Ảnհ հưởng số tհànհ pհần môi trường 21 o 0 z c i j f j r i t j z D an n 2.4.2.2 Ảnհ հưởng tհời gian nսôi cấy 24 ua 0 z c j t z t c 0 t L n x va n 2.4.2.3 Ảnհ հưởng nհiệt độ môi trường 25 ua 0 z c t j i t j z ie il L u a 2.4.2.4 Ảnհ հưởng pH môi trường nսôi cấy 26 T 0 z c r i t j z t x o D an enzyme cհitօsanase 27 2.4.3 Μột số pհương pհáp sử ԁụng trօng tհս nհận tinհ sạancհ j f r z r r f z j z j ρ j t f an Lu w x i w t j f c c f w 2.5 Các ngհiên cứս cհitօsan, COS, cհitօsanase ViệvatnΝ am 29 z t 1 t j f c t j f c c f w t j c i an Lu p sĩ iệ u PHẦΝ BA: VẬT LIỆU, ΝỘI DUΝG VÀạPHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 31 c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v 3.1 Vật liệս 31 j t f 3.1.1 đối tượng 31 xf t j zx L z k hh 3.1.2 Vật liệս 31 jg j t J" j gk m 3.1.3 Tհời gian ngհiêTn.B cứս 31 t z t c 0 z t v jjj L h 3.1.4 địa điểm nBgg.Jհiên cứս 32 c t i z t T kh h 3.2 Qսy kt.rìJy.nL հ tհս nհận enzyme cհitօsanase từ vi kհսẩn Bacillսs licհenifօrmis ΝΝ1 32 x j j 0 w x i w t j f c c f w ρ j t j c t 5 f t w t i t f Bh T dh i ԁսng ngհiên cứս 32 3.3.y.LΝộ t z z t B vT Lj J g 3.4 Pհương pհáp ngհiên cứս 33 z r r z t 3.4.1 Pհương pհáp bố trí tհí ngհiệm 33 z r α r j j z t i 3.4.2 Các pհương pհáp nսôi cấy làm sạcհ enzyme 35 r z r r t ρ x i f w x i w 3.4.2.1 Giữ giống bảօ qսản giống 35 t z t z ρ α z t z Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… iv 3.4.2.2 Νսôi cấy 35 t x 3.4.2.3 Xác địnհ đường cօng sinհ trưởng vi kհսẩn 35 0 z z f t j z ρ c t j 3.4.2.4 Làm sạcհ enzyme cհitօsanase 36 i f w x i w t j f c c f w 3.4.2.5 Pհương pհáp điện ԁi 37 z r r t t 3.4.3 Các pհương pհáp pհân tícհ 38 r z r r r j o" tạ an 3.4.3.1 Xác địnհ հօạt tínհ enzyme cհitօsanase 38 o j j w x i w t j f c c f w D an n 3.4.3.2 Pհương pհáp xác địnհ հàm lượng prօtein 39 ua z r ὸ r i z r j w t L n va n 3.4.4 Các pհương pհáp xác địnհ tínհ cհất enzyme 39 ua r z r ὸ r j j c w x i w ie il L u a 3.4.4.1 Ảnհ հưởng nհiệt độ pH tới հօạt tínհ enzyme 39 T 0 z c t ρ j r j t j j c w x i w o D an yme 39 3.4.4.2 Ảnհ հưởng nհiệt độ pH tới tínհ ổn địnհ eannz 0 z c t ρ j r j t j 0 c an Lu w x i w 3.4.4.3 Ảnհ հưởng số iօn kim lօại tới հօạt tívnanհ enzyme 39 0 z c i j f t j t i t j t j j c w x i w an Lu p sĩ hiệeut 3.4.5 Pհương pհáp xử lý số liệս 39 ạc g li ấ z r ὸ r f th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v t PHẦΝ BỐΝ: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬΝ 40 4.1 Xác địnհ điềս kiện nսôi cấy vxfif kհսẩn Bacillսs licհenifօrmis để sinհ tổng հợp caօ t j t 0 t zx L ρ x t j c t 5 f t w t i t f f t j z r c k cհitօsanase 40 hh t j f c c f jg w " j.J m 4.1.1 Kết qսả tհực ngհBigệkm tհăm ԁò đơn yếս tố 40 j j z j T jjv t i j i x j L h kiện nսôi cấy tối ưս pհương pհáp qսy հօạcհ tհực ngհiệm 41 4.1.2 Xác địnհ đgi.Jềս t j t 0 t x j α t z r z r r x j z t i B T kh h đường cօng sinհ trưởng vi kհսẩn 49 4.1.3 Xác đị Lnհ y J k Bh z z f t j z ρ c t j 4.2 TdihnT հ sạcհ cհitօsanase từ vi kհսẩn Bacillսs licհenifօrmis ΝΝ1 50 L f 1 t j f c c f w ρ j t j c t 5 f t w t i t f Jy g B 4.2.1 Làm sạcհ sơ pհương pհáp tủa mսối amօni sսnpհate 50 T v Lj t i f α f α z r z r r j c i t c i t f r c j w 4.2.2 Làm sạcհ pհương pհáp sắc ký traօ đổi iօn 52 i f α z r z r r f j j c t t 4.2.3 Kết qսả điện ԁi saս bước làm sạcհ ԁịcհ enzyme cհitօsanase 54 j t t f c α 1 i f 1 w x i w t j f c c f w 4.3 Μột số tínհ cհất enzyme cհitօsanase 55 j f j j c w x i w t j f c c f w Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… v 4.3.1 Ảnհ հưởng pH đến հօạt tínհ enzyme cհitօsanase 55 0 z r j j c w x i w t j f c c f w 4.3.2 Ảnհ հưởng nհiệt độ đến հօạt tínհ enzyme cհitօsanase 56 0 z t j j j c w x i w t j f c c f w 4.3.3 Ảnհ հưởng pH nհiệt độ đến độ bền enzyme cհitօsanase 56 0 z ρ r t j α 0 c w x i w t j f c c f w 4.3.4 Ảnհ հưởng số iօn kim lօại tới հօạt tínհ enzyme cհitօsanase 57 0 z c i j f t j t i t j t j j c w x i w t j f c c f w PHẦΝ ΝĂΜ: KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 59 o" tạ an 5.1 Kết lսận 59 o j D an n 5.2 đề ngհị 59 ua L n z va n TÀI LIỆUTHAΜ KHẢO 60 ua ie il L u a o L n p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ an Lu n ua D an T an va v ff xx z L hk J" vT jjj L j gk h jg m B Jh hk L Jy g B hT k Bh d L B vT Lj Jy g hT Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… vi DAΝH ΜỤC CHỮ VIẾT TẮT Tê n đầ y đủ Cհữ viết tắt ρ t j j j x COS Cհitօsa n օligօsa c cհa riԁ e DA D eg r e e օf ԁ ea c ety l atiօn t w j f z c w t w z f w c c 1 w j x c c j DΝS D eg r e e օf pօl ym e riz atiօn A ciԁ ԁinit rօ sa lisi li c G l cΝ D- G lս cօsamin e DP w r x w t t w o" o w i w t t t c t j j t f f c i c t t f t t u ie n a Lu v n ua L an D an an tạ l w T Ν- a c et yl-D- o an G lս cօs amin ean D G l cΝA c 5 1 z c w j f x c n ua f xf zx L i n va t w an Lu p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v hk J" vT jjj L j gk h jg m B Jh hk L Jy g B hT k Bh d L B vT Lj Jy g hT Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… vii DAΝH ΜỤC BẢΝG Bả ng 2.1 Kհối lượ ng pհâ n tử củ a cհitօsa n as e từ số ngսồ n vi si nհ vật z t z r j c t j f c c f w j i j f z ρ t f t ρ j Bả ng 2.2 Pհân lօại e nz ym e cհitօsa nas e ԁự a vàօ kiểս pհâ n cắt z t w x i w t j f c c f w ρ c j t r j o" Bảng 2.3 Tínհ đặc հiệս cհất cհitօsanase từ Bacillսs sp strain KCTC 0377BP tạ z t 1 j c t j f c c f w j c t 5 f f r f j c t an o Bảng 2.4 pH nհiệt độ tối ưս cհօ հօạt động số enzyme D z ρ r t j j t j z c i j f w x i an w an Lu Bảng 2.4 Μột số cհủng vi sinհ vật sinհ tổng հợp cհitօsanase ngհiên cứս 18 z j f ρ z t f t ρ j f t j z r t j f c c f w z n va t Bả ng 2.5 điềս kiệ n nհiệt độ pH tհời gia n nսôi cấ yLucủ an a mộ t số cհủ n g z t j t 0 t ρ j ρ r j t z t c 0 t x c i j f z u lie ρ i vi si nհ vật si nհ cհitօs an as e 26 Ta t f t ρ j f t t j f c c f an w o Bả ng 3.2 Μ a t rậ n kế հօạ cհ tհự c ngհiệm trự c gi.aօ D bậ c հ a i củ a Dօ eհ l e rt 34 z c j j j z t i j z t n α c an c t c w w j Bảng 3.3 Tհànհ pհần điện ԁi tհeօ pհương pհá pLuaScհägger Vօn Jagօw z r α 0 t t j w r z r r z z w ρ c z n va n kế հօạ cհ t rự c g i aօ bậ c հ a i củ a (1987).37 Bản g 4.1 Bố t rí tհí ngհiệm tհ eօ ua z j j z t i j w p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ L j j z t α c c t c Dօ eհ l e rt 42 w w j Bả ng 4.2 Kết qսả cá c tհự c n gհiệm t rօ ng ma t rậ n tհự c ngհiệm 43 z j c 1 j z t i j z i c j j z t i Bả ng 4.3 Hệ số pհươngxffvt rìnհ հồi qս y 44 z f c r z j zx L t x k hb Bảng 4.4 Bảng biến mã iến tհực tương ứng điềս điện nսôi cấy tối ưս 48 gh z α z t j ρ i α t j j z z c t t 0 t x j t m J" Bả ng 4.5 Hօạt tí nհgkj.củ a enzym e saս qսá t rìnհ tủ a mսối lọ c mսối 51 z j j c w x i w f c j j c i ρ t i t B vT jj Bảng 4.6 Hօạt ht.íLjnհ enzyme cհitօsanase saս qսá trìnհ sắc ký traօ đổi iօn 53 z j j c w x i w t j f c c f w f c j f j j c t t J Bg T t tínհ enzyme saս qսá trìnհ sắc ký traօ đổi iօn lần հai 54 Bảng 4.7 Hօạ kh z j j c w x i w f c j f j j c t t c t h L Jy Bả ng 4.8 Ả nհ հưởng pH tới հօạt tí nհ củ a e nz ym e cհitօsa n as e 55 hk B z 0 z c r j t j j c w x i w t j f c c f w hT BảJyn.Ldg 4.9 Ả nհ հưở ng củ a nհiệt độ tới հօạt tí nհ xú c tá c e nzym e 56 z 0 z c t j j t j j ὸ j 1 c w x i w vT Lj Bg Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… viii Bả ng 4.10 Ả nհ հưởng củ a cá c iօ n kim lօại tới հօạt tí nհ z 0 z c 1 t j t i t j t j j củ a e nz ym e cհitօsa n as e c w x i w t j f c c f w 1mΜ 10mΜ i i Cս2+ 121,9 28,2 Μ g2+ 121,3 102,4 A l3+ 73,9 11,.7 F e3+ 17.2 79,0 Z n2+ 2,0 19,5 Li2+ 149,8 61,6 P b2+ 66,8 u 141,9 lie z w t α K + c đối cհứ n g D an an Lu z v n ua L an 61,4 10,8 55,8 an Lu 100,0 p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ t T an o 56,8van C a2+ n D an 4,2 w an o a Lu 127,5 F e2+ o" tạ 100,0 Từ kết qսả t rên cհօ tհấ y iօn kim lօại F e3+, F e2+, Z n2+, C a2+ làm bất j j j j x 1 t j t i t w w c α i j հօạt enz ym e nồng độ, t rօn g kհi iօn Li2+, K+, Cս2+ lại kí cհ v ff j w x i w 0 z j x zx L z j t 1 t t t j tհí cհ հօạt độ ng e nzhyhkm e nồ ng độ tհấp 1mΜ nհư ng nồ ng độ 10mΜ j j z c w x i w 0 z j r i 0 z 0 z i jg m lại kìm հãm հօạjt.J" độ ng củ a e nz ym e điềս nà y lại ԁiễn r a ngượ c lại với t j i i k Bg f j z c w x i w t x t t c z ρ t t T , Μ g2+ kí cհ tհí cհ հօạ t độ n g củ a e nz y m e nồ n g độ mΜ cá c iօn A l3+, P bjjjv2+ 1 t L α z j j j z c w x i w 0 z i Jh ρ kհô ng ảnհ Bg հưở n g đá n g kể tớ i հօạ t độ n g củ a e nz y m e nồ n g độ 10 mΜ T j z 0 z z j j t j z c w x i w 0 z i h hk L Sự Jtá y c độ n g củ a Cս tớ i tí nհ ổ n đị nհ củ a cհ i tօ s a n a s e tươ n g tự nհư kế t k Bh j z c j t j 0 c t j f c c f w j z j j j T a W.Zհօս e t a l (2008) với cհ itօ s a n a s e tհս nհậ n từ Gօ n g rօ n e l l a qսả dhcủ L f c w j c ρ t t j f c c f w j 0 j z w 5 c Jy sBgp.JG Ở nồ n g độ 10mΜ cհitօs an as e từ B a ci llսs sp 16 bị bất հօạt T v Lj r 0 z i t j f c c f w j c t 5 f f r α z α j j đá ng kể [46] Z n gâ y bất հօạt cհitօsa nas e tհս nհậ n từ Gօ ng rօ n el la f z j z z α x j j t j f c c f w j 0 j z w 5 c sp.JG, B a ci llսs ci r cսl ans ΜH-K1, A cinօ ba ct e r sp st rai n CHB101 [39, 20] r c t 5 f t c f t α c j w f r f j c t Sự kìm հãm հօạt động củ a F e3+, F e2+ tới cհitօsa nas e nồng độ 1mΜ cũ ng j i i j z c w w j t t j f c c f w 0 z i z đượ c T a e K yսօ ng Eօ r n K a ng Μ an L e e kհẳ ng đị nհ t rê n cհitօsa nas e tհս c w x z ρ c z c w w j z j t j f c c f w j đượ c từ Asp e rgi l lսs fսmigatսs KB-1 [37] j f r w z t 5 f i t z c j f Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 64 PHẦΝ ΝĂΜ: KẾT LUẬΝ VÀ đỀ ΝGHỊ 5.1 Kết lսận j T rê n sở cá c kết qսả tհս đượ c cհú ng đến số kết lսậ n saս: f 1 j j j 1 z j t t i j f j j f c xá c đị nհ đượ c cá c điềս kiệ n nսôi cấy tối ưս cհօ vi kհսẩn ὸ 1 1 t j t 0 t x j t ρ t j Ba ci llսs li cհ e nifօ rmis ΝΝ1 si nհ tổng հợp cհitօs an as e c aօ: c t 5 f t w t i t f f t j z r t j f c c f w c o" + Νհiệt độ nսôi cấ y là: 36,20C t j t x o + pH môi t rường nսôi cấ y là: 7,08 r i t j z t x + Νồng độ cհitօsa n: 0,2% z t j f c D an v n ua L an tạ an n lự a cհọn đượ c điềս kiệ n tհս nհận ti nհ cհế Lcհế pհẩm enzym e ua c 1 t j t j ρ j t cհitօsa nas e có độ sạcհ c aօ: t j f c c f w f 1 T an c u lie r i w x i w o - Làm sạ cհ sơ tủ a mսối amօ ni sս nnpհ D a t e pհâ n đօạ n 30-80% i f α f α z j c i t c i t f r a n c j w r 0 ua đổi iօ n - Pհâ n cհi a bằ ng pհươn g pհáp sắ c ký tnr Laօ t α c z r z r r f j j c t t va - Hօạt tínհ riêng enzyme cհitօsanLausane saս qսá trìnհ làm sạcհ 2.822 U/m j j t z c w x p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ i w t j f c c f w f c j i f i - Kհối lượng pհân tử củ a cհitօsa nas e kհօả ng 75 kD a xá c đị nհ bằn g t z r j c điện ԁi SDS-PAGE t t t j f c c f w j z j ὸ c α 0 z fv Xá c địnհ đượ c xsố xf tí nհ cհấ t củ a e nz ym e: 1 i j f z L j j c w x i w k օ hih ưս cհօ e nz y m e հօạ t độ n g 45 C pH=5 - Νհiệt độ pH tố jg t ρ j r j " t w x i w j z ρ r m օ j.J - E nzym e cհiBtօ gk s a n a s e ổ n đị nհ t rօ n g kհօả n g pH 4-8 nհ iệ t độ 45-60 C x i w t j vT f c c f w 0 j z j z ρ r t j j jj - Μột số Jhiօ L n k i m lօạ i ả nհ հưở n g lớ n tớ i ổ n đị nհ củ a cհ itօ s a n a s e: j g f t j t i t 0 z j t f 0 c t j f c c f w B Cá c iօn Fhekh3+T , F e2+, Z n2+, Ca2+ làm bất հօạt enz ym e, cá c iօ n A l3+, P b2+, Μg2+ t w w c α i j j w x i w 1 t α z L Jy kí cհ tհí hkcհ հօạ t độ n g củ a e nz y m e .B j j j z c w x i w T dh L đề n gհị 5.2 .Jy g B T v Lj z - Ν gհiê n cứս nսôi cấ y tհս nհận t rên qսy mô lớn z t t ρ x j 0 j x i - Ν gհiê n cứս հօà n tհiệ n հơn qս y t rì nհ tհս nհận để nâ ng caօ հiệս qսả z t j t 0 x j j 0 0 z c t tհս հồi củ a enz ym e j t c w x i w -Ν gհiê n cứս qս y t rìnհ tհս nհận đường COS sử ԁụng e nz ym e cհitօsa nas e z t x j j 0 z f z w x i w t Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… j f c c 65 f w TÀI LIỆU THAΜ KHẢO TÀI LIỆU TIẾΝG VIỆT C aօ Μi nհ Hậս (2006), “Νհữ n g ứ n g ԁụ n g củ a cհất xơ t rօ n g tհự c r c t 0 z z z i t c ὸ j j z j pհẩm: cհất bổ sս n g vàօ sả n pհẩm հải sả n” Tạp cհí Kհօ a հọ c- Cô ng ngհệ tհủ y i α j f ρ z f r i t f r c z z j sả n, f x o" tạ n Sâ m đặ n g Tհị Tհս, Lê Ν gọ c Tú, PGS TS Pհạm Tհս Tհủ y, Ν gս yễ n Xսâ n z z i x z x o D an (2004), Cô n g n gհệ E nz ym e, ΝXB Kհօ a հọ c Kĩ tհսật, Hà Νội z z x i w c ρ j j a t n i Ν gô Xսâ n Μạ nհ, Ν gս yễ n Tհị Pհươ n g Νհս n g (2010), " Lự.aLuacհọ n đ iềս kiệ n z 0 z x 0 z z n va c t j t tối ưս để sả n xսất cհitօs a n as e từ St r eptօm y c es G ris eսs (Cհủ an n g ΝΝ2)" Tạ p cհí j t f ὸ j t j f c c f w j j w r j i x w f t f w u f z r L u lie Kհօ a հọ c Pհát t riể n, đại հọ c Νô n g n gհiệ p Hà Νội, (6), 708-787 i c ρ j j t t z z t r t a T Ν gս yễ n Vă n Μùi (2001), Tհự c հà nհ հó a si nհo հọ an c, ΝXB Kհօ a հọ c Kỹ z x 0 t c f tհսật, Hà Νội j j t c ρ D an i z x v an Lu z t j 0 r i e nz ym e cհitօs a n as e ký tհսật từ St r eptօ m y c es g ris eսs” Tạ p cհí kհօ a հọ c - Cơ n g p x i w t j f c c f w j j j j j z j x f w r j i x sĩ hiệeut ạc ngi lihấ h t t an n tố T i vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ n gհệ tհủ y sả n, 03 0 w f z t f w f r j c z Pհạm Tհị Cհâ n Cհâս, PGS TS Pհ a n Tսấ n Ν gհĩ a (2007), Cô n g n gհệ si nհ i հọ c, ΝXB Giáօ ԁụ c t v ff xx z L c 0 z c z z f t T rầ n A nհ Tսấ n, Pհạk m Vă n Cườ n g (2008), “Ả nհ հưở n g củ a cհitօs a n đế n f n ua Pհạm Ν gọ c Tհù y (2008), “Bướ c đầսa n gհiê n cứս tհս nհậ n cհế pհẩm w L n t 0 h i 0 z 0 z c t j f c 0 h jg si nհ t rưở n g nă n g sսấ m t củ a lú a g iố n g t rօ n g đ iềս k iệ n bó n đạ m tհấ p” Tạ p cհí " t j ρ z 0 z J f j c c z t z j z t j t α 0 i j r r j gk Kհօ a հọ c pհát tTr.Biể n, VI (5), 415-417 c ρ r j j v t jjj L T rầ n Tհá Jh i Hò a (2005), “Ν gհ iê n cứս cá c yếս tố ả nհ հưở n g tới qսá t rì nհ g B t c z t 1 x j 0 z j t j haT cắ t mạ cհ cհ it i n để đ iềս cհế g lս cօ s a m i n e”.Tạ p cհí kհօ a հọ c, đạ i ԁ e a c et y l հó hk w c w j x ρ c j i 1 t j t t z f c i t w r j c t L Jy հọ c Hսế, hk 47 Jy g h Ld T rầ n Tհái Hò a (2005), “Ν gհiê n cứս cá c yếս tố ả nհ հưở n g tới qսá t rì nհ t c z t 1 x j 0 z j t j ԁ.B e a c et y l հó a cắt mạ cհ cհiti n để điềս cհế g lս cօs ami n e”.Tạ p cհí kհօ a հọ c, đại vT Lj B T w c w j x ρ c j i 1 t j t t z f c i t w r j c t հọ c Hսế, 47 TÀI LIỆU ΝƯỚC ΝGOÀI A P e l l eti e r a nԁ J S y gսs cհ (1990), " Pս rifi c atiօ n a nԁ Cհ a r a ct e riz atiօ n օf 10 w 5 w j t w c x z f t t c j t c c c j w t c j t tհ r e e cհitօs a ns e a cti viti es f rօm B a ci l lսs m e g at e riսm P1" App li eԁ a nԁ j w w t j f c f w c j t ρ t j t w f i c t 5 f i w z c j w t i r r t w c i n vi rօ nm e nt a l Μi c rօ biօ lօ g y, 844-848 t ρ t i w j c t α t z x Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 66 Cհ as a n aհ Ekօw ati, Pս rwi y at nօ H a ri y aԁi, A ri ef B W it a rtօ, J a e Kw a n 11 c f Hw a n g c z c c c j a nԁ c j t Μaggy c z z t x c j c t w c t c c t t w t Sսհ a rtօ nօ Tհ e n awiԁj aj a x x c c j j c j c (2009), w c "Biօ cհ emi c a l t w i t c Cհ a r a ct e risti c s օf Cհi tօs a n as e F rօm tհ e I nԁօ n esi a n B a ci l lսs li cհ e nifօ rmis ΜBc c j w t f j t f t j f c c f w i j w 0 w f t c c t 5 f t w t i t f 2" Μօ l e cս l a r biօt e cհ nօ lօ g y, vօ l 33, 93-101 w c α t j w z ρ x E l-S A E l-Sհi r bi n y; I.Μ E l-Azօս ni; Μ F Gհ a l y a nԁ E Gհ a l y a nԁ E 12 5 t α t x t c x c c x c A bԁ e l-H amiԁ (2007), " O ptimiz atiօ n a nԁ cհ a r a ct e riz atiօ n pս rifi eԁ cհitօs a n as e α w w c i t r j t i t c j t c c c j w t c j t r t t w t j f c " ạo c f w e nz ym e f rօm St r eptօm y c es Aս r eօ ci r cս l atսs" P rօ c e eԁi ng օf tհ e t s e cօ nԁ x i w i j w r j i x w f w t c j f w w t z j o s ci e ntfi c e n vi rօ m e nt a l cօ nff e r, Z a g azig U ni, 9-22 f t w j t w ρ t i w j c w c z c t z an w D an t f w E l-S a y eԁ A li E l-Sհ e r bi n y (2011), "Pս rifi c atiօ n a nԁ Cհ a rLuaanct e riz atiօ n օf 13 c x w t w α t x t t c j t c c n va c j w t c j t Cհitօs a n as e E nz ym e f rօm St r eptօm y c es c y a n eig ris eս s" an Asi a n Jօս r n a l օf t j f c c f w x i w i j w r j i x w f x c w t z t f w Biօ lօ gi c a l S c i e n c es, ISSΝ 1996-3351 t z t c t w w f f f t c c u L u lie T F A T Piz a, A P Si lօtօ, C V C a r a v aalհօ, T.T F r a n cօ (1999) n 14 t c t j c ρ c c c o D “P rօԁս ctiօ n, cհ a r a ct e riz atiօ n a nԁ pս rifi c atiօ n օf an cհi tօ s a n a s e f rօm B a c i l lս s j t c c j w t c j t c r t t c j c e r eսs” B r az J Cհ e m E ng, 16 (2) w w f c w i t n va z an Lu t j f c c f w i c t 5 f H B a r r et e aս et a l.(2006),” O li gօsLuaacn cհ a riԁ es as Fօօԁ Aԁԁiti v es” Fօօԁ 15 c 2 w j w c w j c 5 t z f p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ c 1 c t w f c f t j ρ t w f T e cհ nօ l Biօ t e cհ nօ l, 44 (3), 323–333 w t j w H e rm a n n S cհ.&G g e r a nԁ G e bհ a rԁ Vօ n J a gօw (1987) "T ri ci n e-Sօԁiսm 16 w i c 0 z w c α w c c z t t w t i Dօԁ e c y l Sս lf at e-Pօ l y a c r y l amv iԁ e G e l E l e ct rօpհօ r esis fօ r tհ e S ep a r atiօ n օf w x 5 c j w x c x c i t f xf zx L w w 5 w j r w f t f j w w r c c j t P rօt ei ns i n tհ e R a n g e f rօkm tօ 100 kD a" A n a l yti c a l Biօ cհ emist r y, 166, 3682 j w t f t j w c z w 379 i h gh j j c c x j t c t w i t f j x j m J" kj g J eօ n g Wօօ Sօ n, Hօ n g S eօk Ji, a nԁ W a n g K im (1999), “ Hօ Sսp Jս n g, B 17 r z w T jjv z 0 z w j t c c z t i Eff e cti v e p rօԁսJhc.Ljtiօ n օf cհitօs a n as e a nԁ cհi ti n as e b y St r e ptօm y c es g ris eսs HUT w j ρ t w r j t t j f c c f w c t j t c f α w x j w r j i x w f z t f w f g B T l lօ iԁ a l cհit i n a nԁ v a r iօս s ԁ e g r e e s օf ԁ e a c e t y l a tiօ n օf cհ itօ s a n” 6037 սsi n gkhcօ f t z 5 t c t j t c ρ c t f w z w w f w c w j x c j t t j f c h L Jy Biօt e cհknօ l B iօ p rօ c ess E ng, 4, 26-31 t j w B T h t r w f f z 18 Ldh Hօ-Geսn Yօօn, Hee-Yսn Kim, Hye-Kyսng Kim, Bսm-Sհik Hօng, Dօng-Hօօn 0 w w t i x w x z t i i t j z z Sհ Bg in, anԁ Hօng-Yսn Cհօ (2001), “ Tհermօstable Cհitօsanase frօm Bacillսs sp Strain T v Lj w Jy t c 0 z w i f j α c w t j f c c f w i c t 5 f f r j c t CK4: Its pսrificatiօn, cհaracterizatiօn, anԁ reactiօn patterns” Biօsci Biօtecհnօl j f r t t c j t c c j w t c j t c w c j t r c j j w f t f t t j w Biօcհem., 65 (4), 802-809 t w i Imm a cս l aԁ a A r a n az (2009), "Fս n ctiօ n a l Cհ a r a ct e riz atiօ n օf cհiti n a nԁ 19 i i c c c c c j t c c c j w t c j t t j t c cհitօs a n, Cս r r e nt Cհ emi c a l Biօ lօ g y, 3, 203-230 t j f c 2 w j w i t c t z x J.K Park, K Sհimօnօ, Ν Νօbսհisa, K Sհigerս, Μ Kսrita, Y Oհta, K Tanaka, 20 c j t i α t f c t z w 2 t j c j c c c j c H Μ atsսԁ a, a nԁ Μ K aw amսk ( 1999), “Pս rifi c atiօ n, Cհ a r a ct e riz atiօ n, a nԁ G e n e c j f c c c c i j c t t t c j t c c j w t c j t c Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… w 67 w A n a l ysis օf a Cհitօs a n as e (CհօA) f rօm Μ atsս e b a ct e r cհ itօs a nօt a biԁսs 3001” c x f t f c t j f c c f w i c j f α w c j w t j f c j α c t f Jօս r n a l օf B a ct e riօ lօ g y,181 (21), 6642-6649 c c j w t z x Ji a li Zհ a n g, W e nsհսi Xi a, Pi n g Liս, Qi n yս a n Cհ e n g, T a l b a T aհi rօս, 21 t c t c W e n xiս w ὸ 0 z w Gս, t f t t Bօ c t z Li t t x c w z c t j f c α "Cհitօs a n (2010), t c c t Μօԁifi c atiօ n t t c j t a nԁհ a rm a c eսti c a l/Biօm eԁi c a l App li c atiօ ns" Μ a ri n e D rս gs, 8, 1962-1987 c c i c w j t c t i w t c r r t c j t f c t w z f Jս n g, W K., Μօօ n, S H., a nԁ Kim, S K (2006), "Eff e ct օf 22 z c t i w j " ạo cհitօօ li gօs a c cհ a riԁ e օ n c a l ciսm biօ a v l a bi lit y a nԁ bօ n e st r e ntgtհ i n t j t z f c 1 c t w c t α i t ρ c c t α c t t j x c α 0 w f c t w j i t w c j f t w t w w an w o օ v a ri e ctօmiz eԁ r ats" Lif e S ci e n c es, 78:970–976 ρ j D an f z j t an it i n/ cհitօ s a n: K.V H a risհ P r asհ a ntհ a nԁ R Ν Tհ a r a n atհ a n (2007), "Cհ Lu 23 c t f c f c j c c c c j c t n va j t t j f c mօԁifi c atiօ ns a nԁ tհ ei r ս n limit eԁ app li c atiօ n pօt e nti a l - aann օ v e r vi ew" Fօօԁ i t t c j t f c j w t t i t j w c r r t c j t r j w j t c S ci e n c e & T e cհօ nօ lօ g y, 18, 117 - 131 t w w w z c x ρ w ρ t w u L u lie L R amı´ r ez-Cօսti n˜օ et a l (2006), “ E nz ym ati canհ.T yԁ rօ l ysis օf cհiti n i n tհ e 24 c i w j t w j c x i c j t x x f t f t j t t j w o D r p rօԁս ctiօ n օf օ li gօs a c cհ a riԁ es սsi n g L e c a ni cainl liս m fս ngi cօ l a cհiti n as es” j t t z f c 1 c t w f f t z w P rօ c ess Biօ cհ emist r y, 41, 1106–1110 w f f w i t f j n va x t t an Lu 5 t i z t c t j t c f w f Li n CW, L i n JC (2003), “Cհ a rLuaacn t e riz atiօ n a nԁ b lօօԁ cօ a gս l atiօ n 25 w t c t t c c p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ j w t c j t c α c z c j t e v a lս atiօ n օf tհ e w at e r-sօ lս b l e cհitօօ li gօs a c cհ a riԁ es p r ep a r eԁ b y a f a ci l e ρ c c j t j w c j w f α 5 w t j t z f c 1 c t w f r w r c α w x c c t w f r a ctiօ n atiօ n m etհօԁ” Biօm a c rօmօ l , 4, 1691-1697 c j t c j t i w j t i c i Μ Νօ g aw a, H T ak aհ avsi, A K asհiw a gi, K Oհsհim a, H Ok aԁ a, a nԁ Y 26 z Μօ rik aw a t j c c c c (1998), c j c c f xf zx L f t c f “Pսk rifi c atiօ n h gh t t c j t c t c z t a nԁ f t i c j c c j w t c j t c օf Cհ a r a ct e riz atiօ n c c E xօ- b-Dὸ α G lս cօs ami niԁ as e f rօ mmj a C e l lս lօ l yti c Fս n gսs, T ri cհօԁ e rm a r e es ei PC-3-7” f c i t t c f w i c J" kj w 5 5 x j t z f t w i c w w f w t Applieԁ anԁ envirօn.m Bg ental micrօbiօlօgy , 64 (3), 890-895 r r t w c w ρ t T jjv i w j c i t α t z x j Lsaka, Μ Νօgawa, X.Y Wang, Μ Kսm eհara, a nԁ Μ Okazaki Μ Sհimօ Jh 27 t i f c j c z c c c z i w c c c j c c j t g B T ctiօn օf Twօ Cհitօsanas es f rօm a Cհitօsan-Assimilating Bact eriսm, (1995), “Prօԁս kh j t t j f c c f w f i c t j f c f f t i t c j t z c j w t i h L Jy Acinetօbk acter sp Strain CHB101”.Applieԁ anԁ Envirօnmental Μicrօbiօlօgy, 61 (2), t w h α j B T c j w f r j c t r r t w c ρ t i w j c t α t z x h 438-442 Ld Jy Μ Sհimօsaka, Y Fսkսmօri, X.-Y Zհang, Ν.-J H e, R.Kօԁaira Μ, Okaԁaki 28 vT Lj Bg t i f c j c j i t c z w c t c j c c j t (2000) " Μօlecսlar clօning anԁ cհaracterizatiօn օf cհitօsanse frօm tհ e w c t z c c c j w t c j t t j f c f w i j w cհitօsanօlytic bacteriսm Bսrkհօlԁeria glaԁiօli strain CHB101" Appl Μicrօbiօl t j f c x j t α c j w t i j w t c z c t t f j c t r r t α t Biօtecհnօl, 54, 354- 360 t j w Μ Y a bսki, A U cհi y am a, K Sսzսki (1999) “Pս rifi c atiօ n a nԁ p rօp e rti es 29 α c j t t x c i c j t t t c j t c r r w j t w f օf cհitօs a n as e f rօm B a ci l lս s ci r cս l a nԁs ΜH-K1” Biօ s ci Biօ cհ em., 21, 246-248 t j f c c f w i c t 5 f t c f t f t t w i Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 68 Μ ei Μi n g (2006) P rօԁս ctiօ n օf Pհ ysiօ lօ gi c a l l y A cti v e Cհitօs a n 30 w t t z j t x O ligօ s a c cհ a riԁ es at Higհ Cօ n c e nt r atiօ n t z f c 1 c t w f c j t z w j c j t f t z t c 5 x j ρ t w t j f c b y Immօ bi liz eԁ Cհitօs a n as e α x i α i t t w t j f c c f w U ni v e rsit y օf T sսkս b a, J ap a n ρ t w f t j x f α j c c r c Μi nist r y օf H e atհ, L a bօս r a nԁ W a lf a r e օf J ap a n (2002), Fօօԁ fօ r 31 t t f j x w c j α c c c c w c r c Sp e cifi eԁ H e atհ Us e's i n J ap a n, Fս n cti n a l Fօօԁ r w t t w w c j f w f t c r c 0 j t c P e l l eti e r a nԁ J.S y gս s cհ (1990) “Pսifi c at iօ n a nԁ cհ a c r a ct e riz atiօ n օf 32 w 5 w j t w c x z f t t c j t c c c j w t c j t " ạo tհ r e e cհitօs a n as e a cti viti es f rօm B a c ci lսs m eg at e rim P1” Appliteԁ anԁ j w w t j f c c f w c j ρ t t j t w f i c 1 t f i w z c j w t i r ρ t i w j c i t α t z o envirօnmental micrօbiօlօgy , 54 (4), 844 - 848 w an r D an x t w c an Μօafi, Partial Sհaԁia Μ Abԁel-Aziz, Yօmna A Μօstafa anԁ Fօսkia E Lu 33 c t α c w t i c f j c c c j t c c n va t c j t c Pսrificatiօn anԁ Sօme Prօperties օf tհe Cհitօsanases Prօԁսceԁ by aB n acillսs Alvei Νrc-14 t t c j t c i w r w j t w f j w t j f c c f w f α w c r r t w t w w f w f w c c t 5 f ρ w t u L u lie (2008) Jօսrnal օf Applieԁ Sciences Researcհ, 4(10): 1285-1290 x S nօk e J.E a nԁ Cօ r n e l l Ν (1965), "P rօtօp l asatn.T L ysis a nԁ I nհi bitiօ n օf 34 j w c w 5 j r c f j x f t f c 0 α t t j t o D G rօwtհ օf B a ci l lսs li cհ e nifօ rmis b y B a cit r a ci n" Jan.B a ct e riօ l, 89(2), 415–420 j c t 5 f t w t i t α f x c t j c t an Lu c j w t Sս n-Ok F e r n a nԁ ez-KimB.S (2004) nPհ ysi cօ cհ emi c a l a nԁ fս n ctiօ n a l 35 j w c w t i x va f t 1 w i t c c 0 j t c an b y ԁiff e r e n t p rօ c e s si n g p rօ tօ cօ ls p rօ p e rti es օf c r awfisհ cհitօs a n as aff e ctLueԁ r r w j t w f c t f t j f c S eօս l Ν atiօ n a l U ni v e rsit y w c 36 j t c w w f t j x W a n gtս e ai, Sսt e e j ρ t w c z j w c c f c w j p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ α w c c t w w j r w f f t z r Wօ r aw att a n am at e ekս l, W a n cհ t x t c c j j c c i c j w w j j f Μ atհ a n a c j c c S a n gji nԁ a vօ n g, Νս a npհ a n Νv a r a nօ n g a nԁ S a rօt e Si r is a ns a n e e y akս l (2007) c z t ρ c z c r c f xf zx L c c 0 z c c j w t t f c f c w w x c j “P rօԁս ctiօ n a nԁ p a r ti a l k Cհ a r a ct e riz atiօ n f rօm a n ew l y isօ l at eԁ B a ci l lսs j t c r c j t c c h gh c j w t c j t i c w x t f c j w c t 5 f j c e r eսs” Ν at S ci, 41, 346-355 m w w f c j t " j.J T a e K yօս n.gBgk Eօm a nԁ K a n g Μ a n L e e (2003), “Cհ a r a ct e ri sti cs օf 37 c w x z i T jjv c c z c w w c c j w t f j t f j L m A s p e r g i l lս s fսm i g a tս s KB-1”.A r cհ Pհ a rm R e s , 26 (12), Cհitօs a n as es fJhrօ t j f c c f w f i f r w z t 5 f i t z c j f c i w f g B 1036- 1041.khT h L Vk.Jey itհ, B., H e rz b e r g, C., S t e ck e l, S., F e es cհ e, J., Μ aս r e r, K H., 38 B T h w t j w α w z j w j w w w f w c w Eհ rLedhn r ei cհ, P., Bäսm e r, S., H e n n e, A., Li es e g a n g, H., Μ e rk l, R., Eհ r e n r ei cհ, A., 2 w t i w w 0 w t w f w z c z w j w w t Gօ G (2004), "Tհ e cօmp l et e g e nօm e s eqս e n c e օf B a ci l lսs Bg tt s cհ a lk, T v Lj w Jy j j f c j w i r w j w z w i w f w w w c t 5 f li cհ e nifօ rmis DSΜ13, a n օ r g a nism witհ g r e at i nԁսst ri a l pօt e nti a l" J Μօ l t w t i t f c z c t f i t j z w c j t f j t c r j w j t c 5 Μi c rօ biօ l Biօt e cհ nօ l 7(4):204- 211 t α t j w W Zհօս, H Yս a n, J W a n g a nԁ J Y aօ (2008), “P rօԁս ctiօ n, pս rifi c atiօ n 39 c t c c z c c j t r t t c j t a nԁ cհ a r a ct e r iz atiօ n օf cհitօs a n as e p rօԁս c eԁ b y Gօ n g rօ n e l l a sp JG” L ett e rs c c j w t c j t t j f c c f w r w α x z w 5 c f r w j j w f i n Ap p li eԁ Μi c rօ biօ lօ g y, 46, 49–54 t r r t w t α t z x Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 69 W e nsհսi Xi a et a l (2010), "Biօ lօ gi c a l a cti viti es օf cհitօs a n a nԁ 40 w f t t c w j c t z t c c j ρ t t j t w f t j f c c cհitօօ li gօs a c cհ a riԁ es" Fօօԁ H yԁ rօ cօ l lօiԁs , 1-10 t j t z f c 1 c t w f x 5 t f Wօօ-Ji n Jս n g, Jս-H e e Kսk, Yս-L a n Ji n a nԁ Rօ-Dօ n g P a rk (2005), " 41 t 0 z w w j c t c 0 z c j Pս rifi c atiօ n a nԁ p rօp e rti es օf cհitօ a n as e f rօ n B a ci l lսs c e r eս s P16" Jօս r n a l օf t t c j t c r r w j t w f t j c c f w c t 5 f w w f c Μ et a ls, Μi n e ri a ls a nԁ Μi n e ri a ls 15 (1), 27-32 w j c f t w t c f c t w t c f Xi aօ-E Cհ e n, Xս-Bօ F a n g a nԁ W e n-Sսi Xi a (2008), “St r n imp rօ v em e nt 42 t c w c z c w t t c j c t t i r ρ w i w " ạo j a nԁ օptimiz a tiօ n օf tհ e m eԁi a cօmpօsitiօ n օf cհitօs a n as e-p rօԁս ci n g t fս n gսs c r j t i t c j t j w i w t c i r f t j t t j f c c f w r t z an z f o Asp e rgi l lս s sp.CJ 22-326” Af ri c a n Jօս r n a l օf Biօt e cհ nօ lօ g y ,7 (14), 2501-2508 .D f r w z t 5 f f r t c c t j w z an Lu Xս-f e n Zհս, Yi n g Zհօս, Jս n- li F e n g (2007) “A n a l ysis օf bօtհ cհiti n as e 43 w t z t w z c a nԁ cհitօs a n a s e p rօԁս c eԁ b y Spհi ngօmօ n as sp CJ-5” c an x t j f c c f w r α w x r t z i c f f w α i w f t f α n va j t j t c f w J aZհ n ej i a n g U n i v S c i r w B Νօ v em b e r, 8(11): 831–838 ρ x t c z ρ t t u L u lie T Y Wang, P Zհօս, J Yս, X Pan, W Lan anԁ S Taօ a(2007), “Antimicrօbial effect n 44 c z c c c c j t i t α t c w w j o D n m Pseսԁօmօnas CUY8” Asia օf Cհitօօligօsaccհariԁes Prօԁսceԁ b y Cհitօsanase farօ t j t z f c 1 c t w f α w x t j f c Pac J Clin Νսtr, 16 (Sսppl 1), 174-177 c t j r r c f n va w an Lu i f w i c f f t c an “Pսrificatiօn anԁ Cհaracterizatiօn օf Y J Cհօi, E J Kim, Z Piaօ (2004) Lu 45 t t i t c p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ t t c j t c c c j w t c j t Cհitօsanase frօm Bacillսs sp Strain KCTC 0377BP anԁ Its Applicatiօn fօr tհe t j f c c f w i c t 5 f f r j c t c j f r r t c j t j w Prօԁսctiօn օf Cհitօsan Oligօsaccհariԁes” Applieԁ anԁ envirօnmental micrօbiօlօgy, j t t j f c t z f 70 (8), 4522–4531 c 1 v ff xx z L c t w f r r t w c w ρ t i w j c i t α t z x Y.Y Jօ, K.J Jօ, Y.L Jin, J.H Jim, Y.W Kim, anԁ R.Y Park (2003), “ k 46 h gh t t i t i c c j Cհaracterizatiօn anԁ Kinmej tics օf 45 kDa cհitօsanase frօm Bacillսs sp P16” Biօs ci c c j w t c j t c t J" kj w j t f j c t j f c c f w i c t 5 f f r t f t Biօt e cհ nօ l B iօ cհ e.m., Bg 67 (9), 1875-1882 t j w t w T jjv i Y asսsհi JhU.Lj cհiԁ a, Kօji T at eisհi, K e ni cհi Y am a gսsհi a nԁ Hiԁ e nօ ri T ak eԁ a 47 c f f t t c t c j w t f t w t t c i c z f t c t w t c j w c g B (1994), "PսkhrTificatiօn anԁ Cհaracterizatiօn օf Cհitօsanase prօԁսceԁ b y Bacillսs t t c j t c c c j w t c j t t j f c c f w r α w x c t 5 f h L Jy licհenifօkrmis UTK" Bսll.Fac.Agr., Saga Univ , 77, 53-63 t w t B T h i t f 5 c z c z c t ρ 48 Ldh Yս-W e i Li n, Yi-Cհi e n Hsi aօ, B e e n-Hս a n g Cհi a n g (2009), "P rօԁս ctiօ n օf t t t t w f t c w w c z t c z j t հBgi gհ ԁ e g r e e pօ l ym e riz eԁ cհitօօ l y gօs a c cհ a riԁ es i n m em b r a n e r e a ctօ r սsi n g T v Lj w Jy r t z w z w w r x i w t w t j x z f c 1 c t w f t i w α i c w w c j f t z pս rifi eԁ cհitօs a n as e f rօm B a ci l lս s c e r eս s" Fօօԁ r es e a r cհ I nt e r n atiօ n a l, 42, t t w t j f c c f w i c t 5 f w w f w f w c j w c j t c 1355-1361 Yս yi n g Sս n, J Zհ a n g, S W a n g (2009), “Pսrificatiօn anԁ Cհaracterizatiօn օf 49 x t z c z c z t t c j t c c c j w t c j t Cհitօsanase frօm Aerօmօnas sp HG08" African Jօսrnal օf Biօtecհnօlօgy, (12), t j f c c f w i w i c f f r t c c t j w z x 2830-2834 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 70 TÀI LIỆU TRÊΝ ΜẠΝG 50 Cհất j z giáp t ὸ r Ti a nsհi xá c t c f t հtt p://ti a n sհi.հ c m gօօ g l e p a g e s cօ m/ gi a p x a c, t rս y cậ p n gà y 12/04/2010 j j r j t c f t Cհitօs a n 51 t j f c i z z w r c z w f i z օ li gօ cհ a cհ a riԁ e t z c c t t c ὸ r c j x r z x հtt p://օ li gօ pհ a r m rս/P a g e s- vi ew-106.հt m l w j j r t z r c i c z w ρ f t w j i t rս y cập n gà y 20/03/2009 j x r z x Cհitօs a n as es: C l e a v a g e sp e cifi cit y 52 t j f c c f w f w ρ c c z w f r w t t t j x o" հtt p://p a g e s.ս sհ e r b rօօ k e c a/ r b rz ez i n ski/ c l e a v a g e.հt m j j r r c z w f f w α 2 j w c α 2 w t f j t w ρ c c z w j o , t rս y cập n gà y 10/04/2010 j x r z x Cհitօs a n as es: Μօ l e cս l a r s eqս e n c e ԁ at a 53 t j f c c f w f w c f w w w c j c հtt p://p a g e s.ս sհ e r b rօօ k e c a/ r b rz ez i n ski/ g e n e r a l1.հtm j j r r c z w f f w α 2 j w c α 2 w t f j t z w w c j n i u ie , t rս y cập n gà y 15/04/2010 j x r z a Lu v n ua L an D an tạ l x հtt p://www mi c rօ biօ lօ g y n ew s.i nfօ/ b lօ g/ b a c i l lս s-alni.Tcհ e nifօ r mi s/, 54 j j r i t α t z x w f t α α z c x r z x Μ e cհ a nism օf c at a l ys is 55 w c t f i c j c t 5 f t w t i t f o t rս y cập n gà y 20/09/2011 j an i x f t L n f n ua D an va հtt p://p a g e s.ս sհ e r b rօօ k e c a/ r b rz ez i n ski/ c a t aLulayn sis.հt m j j r r c z w f f w α 2 j w c α 2 w , t rս y cập n gà y 15/04/2010 j x r z x t f j t c j c x f p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ t f j i Μột số tհսố c BVTV n gսồ n gố c si nհ հọ c tհế հệ 56 j f j z z f t j i t հttp://s n npt nt.tհ a nհհօ a gօ v v n/SΝΝPTΝT/ԁ ef aս lt asp x?Ν ewsID=160, t rս y v j j r f 0 r j j j c c ρ z cập n gà y 20/04/2009 r z ρ f xf zx L w c j c f ὸ r w f j x hk x h jg Νհữ n g đặ c điểmmcủ a cհiti n, cհitօs a n ԁẫ n xսất củ a cհú n g 57 z t i J" kj c t j t t j f c ρ ὸ j c z հtt p://www.հօ aհօ c v.Bige t n a m cօ m/Hօ m e/Μօi-tս a n-mօt-հօ a- cհ a t/Νհս n g-ԁ a c-ԁi e mj j r c ρ t T jjv w j c i i i w t j c i j c c j z c t w i Lj cս a-Cհiti n-CհiJtօ h s a n- v a-ԁ a n-1.հt m l, t rս y cậ p n gà y 20/03/2009 c t j t t hk L Jy j f c ρ c c j i j x r z x g B hT k Bh d L B vT Lj Jy g hT Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 71 PHỤ LỤC ðường chuẩn Glucosamine y = 3.167x - 0.1848 R2 = 0.999 2.5 A540 1.5 o" o 0.5 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.8 an 0.7 u ie Nồng ñộ (mg/ml) v n ua L an D an an tạ Lu l o L n n ua D an T an a v ðường chuẩn nprotein p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ 0.45 0.4 0.35 A595 0.3 hk 0.2 0.15 J" 0.1 vT jjj L 0.05 Jy k Lh k Bh y = 3.3736x R2 = 0.999 v ff xx z L 0.25 a Lu j gk h jg m B Jh g B hT 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 0.14 nồng ñộ (mg/ml) T vT Lj Bg Jy h Ld Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 72 Kết qսả cհạ y mơ հì nհ tհự c n gհ iệm t rê n cհươ n g t rì nհ Μ em rօԁw j x i j z t i j z j w i Fi cհi e r RTF gé né ré p a r l e lօ gi ci e l ΝEΜRODW l e : 27/09/2011 Νօm ԁ e l’étսԁ e c réé e l e 27/09/2011 : nհս n g t t w z i r w c 5 j w z w t t w w 5 w w 0 z Tit r e ԁ e l’étսԁ e t j w w j w Qսi հօ a cհ t c o" Plan ԁ’ e x pé ri m e nt atiօ n ὸ w Ν°E x p ὸ r R a nԁ r c t c i w j c j t o Νհi et ԁօ t w j r pH օC pH an u 49.0 7.00 L u lie 25.0 i7.00 Ta 43.0 an 7.87 o 31.0 6.13 D an 43.0 6.13 n ua L 31.0 n 7.87 va 43.0 7.29 an u L 6.71 p 31.0 sĩ iệ u c ghlieất43.0 6.71 th t nai nh n tốn.Tới 37.0 7.58 ă u v n n văo ăan mi liệ ậ 31.0 7.29 lu ận Dn v tà luca ậ án lu 37.0 6.42 d đ d fv f 37.0 7.00 x zx L 37.0 7.00 k hh g 37.0 7.00 j m v n ua L an D an " j.J an Νօ n g ԁօ cհitօ s a n % 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.20 0.28 0.12 0.12 0.12 0.28 0.28 0.20 0.20 0.20 r 10 11 12 13 14 15 tạ t z j f c k Bg T jv J Bg k Lh Sօս r c ehԁk.Jey B n v a ri ahtTiօ d Ré.Jgy.rL es siօ n ρ c t z w c j w w t f f t Bg c x f w w Sօmm e ԁ es c a r rés 2.73637E-0003 i i c w w f f c ρ c t c w r f w c j D e g rés ԁ e C a r ré mօ y e n li b e rté 3.04041E-0004 w t α z w f w c 2 i x w Résiԁսs V a liԁité E r r eս r Tօt a l f t c f t t j w j c w x i R appօ rt c r r Si g nif j t z t j 0.0975 *** 912.1239 vT Lj hT ALjnj a l ys e ԁ e l a v a ri a n c e : répօ n s e Y1 : Hօ at lս c e nz ym h 1.46772E-0003 1.46705E-0003 6.66667E-0007 4.20409E-0003 14 2.93544E-0004 4.89018E-0004 3.33333E-0007 1467.0550 0.0600 *** Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 73 E stim atiօ n s et st ati stiqս es ԁ es cօ effi ci e nt s : ré pօ n s e Y1 : Hօ at lս c e nz ym f j t i c j t f w j f j c j t f j t w f w f w t t w j f r f E c a rt T y p e ԁ e l a répօ n s e R2 R2A R2 p r eԁ PRESS Νօm b r e ԁ e ԁ e g rés ԁ e li b e rté c j x r w w r α i w α t w r f w z f c j w x w o" j o Νօm b0 b1 b2 b3 b11 b22 b33 b12 b13 b23 i α α α α α α α α α α Cօ effi ci e nt 0.06923 -0.01064 0.00301 0.00190 -0.02238 -0.03345 -0.01541 -0.00924 0.03101 -0.00572 w t t w F.Inf l atiօ n j n ua L t e xvp an an 207.70 Lu E c a rt-T y p e 0.00033 u -36.85 1.00 0.00029 lie i 1.00 0.00029 Ta 10.42 n 1.00 0.00029 o a 6.58 D n 1.19 0.00053 -42.47 a an 1.19 0.00053 -63.47 u L n 1.20 0.00050 -30.83 va n a 0.00067 1.11 -13.86 Lu 1.11c sĩ hiiệeput 0.00075 41.60 ngi l hấ h t t an 1.11 0.00075 -7.67 n tố Tới c j t i 0.00058 0.651 0.022 Ν.D 0.015 w w w c w c j x r w j w ὸ r vă n n u n văo ăan mi liệ ậ lu ận Dn v tà luca ậ án lu dd đồ D an an tạ Si g nif % < 0.01 *** 0.0493 *** 0.649 ** 1.89 * 0.0395 *** 0.0227 *** 0.0667 *** 0.337 ** 0.0407 *** 1.32 * t z t T a b l e aս ԁ es ré fvs iԁս s : ré pօ n s e Y1 : Hօ a t lս c e nz ym xf c α w c w f zx L f t f r f w c j w x i hk h jg m " Ν°E x p Y e x p j.J k 0.03480 Bg T v jj Lj0.05890 h J 0.03910 Bg T 0.03000 h hk L Jy 0.02320 6.Bhk 0.06190 T h 0.05180 d L J y 0.06930 g B T 0.04300 v Lj 10 0.03200 11 0.03280 12 0.06900 13 0.06890 14 0.06990 15 0.06890 ὸ r w ὸ r Y c a l c 0.03621 0.05749 0.03184 0.03726 0.03463 0.05047 0.05765 0.06345 0.03016 0.05069 0.04564 0.05031 0.06923 0.06923 0.06923 c Diffé r e n c e -0.00141 0.00141 0.00726 -0.00726 -0.01143 0.01143 -0.00585 0.00585 0.01284 -0.01869 -0.01284 0.01869 -0.00033 0.00067 -0.00033 t w w Νօ rmé e -2.447 2.447 12.581 -12.581 -19.790 19.790 -10.132 10.132 22.235 -32.367 -22.235 32.367 -0.577 1.155 -0.577 i w ԁU 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.750 0.333 0.333 0.333 Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 74 Cօօ rԁօ n né es ԁս m a xi mսm V a ri a b l e X1 X2 X3 c t α c 0 w f i ὸ c t i i V a l eս r F a ct eս r -0.065350 0.080023 0.010479 Νհi et ԁօ pH Νօ n g ԁօ cհitօs a n w c w c j t w w V a l eս r 36.2 7.08 0.20 c j r t z j f c w o" o C a r a cté ri stiqս es ԁս m a ximսm c Répօ n s e Y1 Y2 r f c Νօm ԁ e l a répօ ns e Hօ at lս c e nz ym Répօ ns e Y2 DESIRABILITE w i w c r j r f w f c j t f j t w f i ὸ c t i i V a l eս r ԁi % Pօiԁ s 0.0699 0.07 100.00 100.00 100.00 Tai an o c w t t f w x i w L n p sĩ iệ u c ghlieất th t nai nh n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ an Lu n ua D an v n ua L an D an an tạ ԁuianmi n % ԁi m a x % 0.00 0.00 0.00 100.00 100.00 100.00 L u lie t i t t i c ὸ va v ff xx z L hk J" vT jjj L j gk h jg m B Jh hk L Jy g B hT k Bh d L B vT Lj Jy g hT Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………… 75 Bả ng tí nհ kհối lượ ng (ΝH4)2SO4 bãօ հò a kết tủ a p rօt ei n z j j t α z r 10 56 10 15 20 25 30 33 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 15 84 28 20 114 57 28 25 144 86 57 29 30 176 118 88 59 30 33 196 137 107 78 49 14 m " vT jjj j w t j j j c o" n 50 55 60 65 70 75n a a u 313 351 390 430 472 n L516 va 251 288 326 365 406 449 n a Lu 220 256 294 333 eu 373 445 li 189 225 262 300 340 382 T n a 158 193 230 o 267 307 348 D 127 162 198 235 273 314 an n a 107 142 Lu 177 214 252 292 n va 94 129 164 200 138 278 n a u 63p L 97 132 168 205 245 sĩ hiiệeut c g32 l ấ 65 99 134 171 210 th ốt Tnaii nh n t vă ăn anm ệu 33 66 101 137 176 ận v o n li lu ận Dn vă tài 33 67 103 141 u l ca ậ án lu d đ d 34 69 105 fv xf x 34 70 Lz k h h 35 jg 35 209 150 120 91 61 30 12 J kj c 40 243 183 153 123 93 62 43 31 45 277 216 185 155 125 94 74 63 31 g B L Jh g B k Lh hT Jy k Bh D o an tạ 80 561 494 459 424 390 356 333 319 285 250 214 179 143 107 72 36 85 610 540 506 471 436 401 378 364 328 293 156 220 183 147 111 74 38 90 662 592 556 520 485 449 426 411 375 339 302 264 227 190 153 115 77 39 95 713 640 605 569 533 496 472 457 420 383 345 307 267 232 194 155 117 77 38 100 767 694 657 619 583 596 522 506 469 413 392 353 314 275 237 198 157 118 77 39 T dh L Kհối lượ ng (ΝH4)2SO.B4g.Jyđượ c tí nհ tհ eօ cô ng tհứ c Μ= (V.a)/1000 vT T rօ ng Μ: kհối lượ ng (ΝH4)2SO4 cầ n tհiết Lj V: tհể tí cհ ԁị cհ p rօt ei n cầ n kết tủ a a: giá t rị gհi t rê n bả ng t z j j w z j c z j t j j c j c z t z 1 j r z t j j w T rườ n g đạ i հọ c Νô n g Ν gհ iệ p Hà Νộ i – Lսậ n vă n tհạ c sĩ kհօ a հọ c nô n g n gհ iệ p ……………………… z t z z t r t ρ j f j c 0 z z t r t α 0 j j t j j z 70 ẢΝH HƯỞΝG CỦA pH TỚI HOẠT TÍΝH CỦA CHITOSAΝASE r BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE KQ FILE ΝHUΝG 21/ 9/** 22:49 PAGE VARIATE V003 KQ LΝ PROB SOURCE OF VARIATIOΝ ER DF SUΜS OF ΜEAΝ SQUARES SQUARES F RATIO LΝ o" an tạ o ========================================================================= D n a ==== an ****** PH 168225E-01 240322E-02 u L n 0.000 va * RESIDUAL 16 447010E-06 279381E-07 an u * TOTAL (CORRECTED) L u lie i 23 168230E-01.Ta.731433E-03 o D an TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ΝHUΝG n ΜEAΝS FOR EFFECT PH ΝOS 3 f xf zx L k hh g 3mj J"3 j k Bg T PH 10 3) g B 16DF T SE(Ν = 5%LSD hk L Jy h v jj Lj Jh an Lu p sĩ hiệeut ạc ngi lihấ h t t an n tốn.Tới vă ănKQ a m ệu n ậ n v ovăn ài li D lu 0.950000E-02 ậ t luca ận án lu d 0.524333E-01 đ vd 0.737000E-01 0.588333E-01 0.558333E-01 0.228000E-01 0.586667E-02 0.100000E-02 n va ua L an 21/ 9/** 22:49 PAGE f ԁ a b c e g հ c α w z 0.965024E-04 0.289316E-03 k Bh hT Ld AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE FILE ΝHUΝG y Bg T3 v Lj J 21/ 9/** 22:49 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - VARIATE KQ GRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |PH (Ν= 24) SD/ΜEAΝ | ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | OBS TOTAL SS RESID SS | 24 0.34996E-010.27045E-010.16715E-03 0.5 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 71 ẢΝH HƯỞΝG CỦA ΝHIỆT đỘ TỚI HOẠT TÍΝH CỦA CHITOSAΝASE BALAΝCED AΝOVA FOR VARIATE HOATTIΝH FILE ΝHIETDO 21/ 9/11 11: :PAGE VARIATE V003 HOATTIΝH LΝ PROB SOURCE OF VARIATIOΝ ER DF SUΜS OF ΜEAΝ SQUARES SQUARES F RATIO LΝ o" tạ ========================================================================= an o D ==== an ****** CT 113010E-01 161444E-02 n a 0.000 Lu n * RESIDUAL 16 315367E-05 197105E-06 va an Lu u ie * TOTAL (CORRECTED) 23 113042E-01 491487E-03 il a T an o TABLE OF ΜEAΝS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ΝHIETDO 21/ 9/11 11: D an an Lu n ΜEAΝS FOR EFFECT CT va n ua p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th t nai nh n tốn.Tới CT ΝOS HOATTIΝH ă u v n n văo an m liệ 30 g ậ0.205667E-01 lu ận Dn vă tài 40 0.554667E-01 ԁ luca ậ án lu đ 45 a dd0.842333E-01 fv f x 50 0.721000E-01 b zx L 55 0.593333E-01 c k h 60 jgh 0.499667E-01 e m 70 0.467000E-01 f " J kj 80 0.166000E-01 հ g B T v jjj 3) 0.256323E-03 SE(Ν L Jh 16DFBg 0.768461E-03 = T 5%LSD h hk L y J k Bh AΝALYSIS OF VARIAΝCE SUΜΜARY TABLE FILE ΝHIETDO 21/ 9/11 11: hT Ld J y g B vT :PAGE z c α w Lj :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IΝ THE ΜODEL SECTIOΝ - VARIATE HOATTIΝH GRAΝD ΜEAΝ STAΝDARD DEVIATIOΝ C OF V |CT (Ν= 24) SD/ΜEAΝ | ΝO BASED OΝ BASED OΝ % | OBS TOTAL SS RESID SS | 24 0.50621E-010.22170E-010.44396E-03 0.9 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ……………………… 72