Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng và khảo sát độ ổn định của viên nang mềm chứa tinh dầu chúc (citrus hystrix) dùng để xông

BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ SƠN THỊ HUỲNH NA NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG VÀ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN NANG MỀM CHỨA TINH DẦU CHÚC (CITRUS HYSTRIX) DÙNG ĐỂ XÔNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Cần Thơ – 2018 BỘ GIÁO DỤC ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ SƠN THỊ HUỲNH NA NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG VÀ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN NANG MỀM CHỨA TINH DẦU CHÚC (CITRUS HYSTRIX) DÙNG ĐỂ XÔNG LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ ĐẠI HỌC Giáo viên hướng dẫn ThS LÊ THỊ MINH NGỌC Cần Thơ – 2018 LỜI CẢM ƠN “Con ghi nhớ lời Công cha, nghĩa mẹ, công thầy quên Chữ thầy cõi người ta Dặm dài hoa nắng trời xa biển đầy Thời gian bạc mái đầu Tim trò tạc đậm câu ơn thầy” Em xin mượn câu ca dao xưa để phần tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến cơng ơn sinh thành mẹ cha, công lao dạy dỗ thầy cô Đầu tiên xin gửi lời cảm ơn đến Mẹ, Cha người gia đình Những người bên cạnh động viên, an ủi Mẹ, Cha cho mái ấm, chổ dựa vững để vượt qua khó khăn Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cô ThS Lê Thị Minh Ngọc người cô tận tình giúp đỡ, bảo em Cơ ln động viên tạo điều kiện tốt cho em để em hồn thành tốt luận văn Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Thầy PGS.TS Phạm Thành Suôl, Thầy ThS Lê Thanh Vĩnh Tuyên tận tình hướng dẫn, quan tâm, giúp đỡ em suốt thời gian qua Đồng thời, em xin chân thành cảm ơn cô ThS Huỳnh Thị Mỹ Duyên, cô ThS Nguyễn Ngọc Thể Trân, Cô ThS Nguyễn Ngọc Nhã Thảo quý Thầy Cô Anh, Chị kỹ thuật viên Liên mơn Bào chế-Cơng nghiệp dược-Quản lí dược, Liên môn Dược Liệu-Thực Vật Dược-Dược Cổ Truyền cho em lời khuyên quý báu, tạo điều kiện cho em thực luận văn Cảm ơn bạn nhóm đề tài Bào chế, Dược liệu đồng hành mình, giúp đỡ chia kinh nghiệm với Sau cùng, em xin cảm ơn tất quý Thầy Cô trường Đại Học Y Dược Cần Thơ truyền đạt kiến thức cho em suốt thời gian qua Cần Thơ, tháng 6, năm 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi với hướng dẫn khoa học Cô ThS Lê Thị Minh Ngọc Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa công bố hình thức trước Cần Thơ, ngày tháng Người thực Sơn Thị Huỳnh Na năm 2018 i MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN iii LỜI CAM ĐOAN iv MỤC LỤC i Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt iv ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ CÂY CHÚC 1.1.1 Thực vật học 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Tác dụng dược lý tinh dầu Chúc 1.2 TỔNG QUAN VỀ VIÊN NANG MỀM 1.2.1 Khái niệm viên nang mềm 1.2.2 Ưu nhược điểm viên nang mềm 1.2.3 Thành phần vỏ nang 1.2.4 Thành phần dịch nhân 1.2.5 Các phương pháp bào chế thuốc nang mềm 1.3 TỔNG QUAN VỀ ĐỘ ỔN ĐỊNH VÀ TUỔI THỌ CỦA THUỐC 1.3.1 Khái niệm 1.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến độ ổn định thuốc 1.3.3 Phương pháp nghiên cứu độ ổn định thuốc 10 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .15 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 15 2.1.1 Nguyên liệu 15 ii 2.1.2 Thiết bị 16 2.1.3 Địa điểm nghiên cứu 16 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 2.2.1 Thẩm định quy trình định lượng β-pinen, sabinen, limonen, citronellal viên xơng có chứa tinh dầu vỏ Chúc phương pháp GC-FID 16 2.2.2 Khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 23 2.2.3 Xác định tuổi thọ viên xông có chứa tinh dầu Chúc 24 Chương KẾT QUẢ .25 3.1 THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG SABINEN, β-PINEN, LIMONEN, CITRONELLAL TRONG VIÊN XƠNG CĨ CHỨA TINH DẦU VỎ QUẢ CHÚC BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-FID 25 3.1.1 Tính tương thích hệ thống 25 3.1.2 Tính đặc hiệu 29 3.1.3 Tính tuyến tính miền giá trị 31 3.1.4 Độ 35 3.1.5 Độ lặp lại 39 3.2 KẾT QUẢ KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN XƠNG CĨ CHỨA TINH DẦU CHÚC 44 3.2.1 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc điều kiện dài hạn 44 3.2.2 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc điều kiện cấp tốc 48 3.3 KẾT QUẢ ƯỚC TÍNH TUỔI THỌ BẰNG PHƯƠNG PHÁP LÃO HÓA CẤP TỐC 51 Chương BÀN LUẬN 52 iii 4.1 THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG Β-PINEN, SABINEN, LIMONEN, CITRONELLAL TRONG VIÊN XƠNG CĨ CHỨA TINH DẦU VỎ QUẢ CHÚC BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-FID 52 4.1.1 Tính tương thích hệ thống 52 4.1.2 Tính đặc hiệu 52 4.1.3 Độ 54 4.1.4 Độ xác 54 4.1.5 Tính tuyến tínhkhoảng xác định 55 4.2 KHẢO SÁT ĐỘ ỔN ĐỊNH CỦA VIÊN XƠNG CĨ CHỨA TINH DẦU CHÚC …………………………………………………………………………… 59 4.2.1 Khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 59 4.2.2 Độ ổn định vật lý 59 4.2.3 Độ ổn định hóa học 60 KẾT LUẬN 61 KIẾN NGHỊ .62 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iv DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT CHỮ VIẾT TẮT TỪ NGUYÊN NGHĨA TIẾNG VIỆT As C1 Asymetrical Hệ số bất đối Chuẩn citronellal gốc C2 Chuẩn citronellal trung gian DĐVN IV Dược điển Việt Nam IV FID Flame ion detector Đầu dị ion hóa lửa GC Gas chromatography Sắc ký khí k’ L1 Capacity factor Hệ số dung lượng Chuẩn limonen gốc L2 Chuẩn limonen trung gian LOD Limit of detection Giới hạn phát LOQ Limit of quantitative Giới hạn định lượng N Theoretical Plate Số đĩa lý thuyết Pic Peak Đỉnh sắc ký đồ Rs RSD Resolution Relative standard deviation Độ phân giải Độ lệch chuẩn tương đối S Area Diện tích đỉnh S1 Chuẩn sabinen gốc S2 Chuẩn sabinen trung gian SD Standard deviation Độ lệch chuẩn tR Viên xông β1 Retention time Thời gian lưu Viên nang mềm dùng để xông Chuẩn β-pinen gốc β2 Chuẩn β-pinen trung gian v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Mơ hình khảo sát độ ổn định điều kiện dài hạn cấp tốc 12 Bảng 1.2 Giá trị hệ số tương quan K ứng với nhiệt độ thực nghiệm (ttn) .13 Bảng 2.1 Các hóa chất, dung mơi sử dụng nghiên cứu .15 Bảng 2.2 Các thiết bị dùng nghiên cứu .16 Bảng 3.1 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn sabinen 25 Bảng 3.2 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn β-pinen 25 Bảng 3.3 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn limonen 26 Bảng 3.4 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống mẫu chuẩn citronellal 26 Bảng 3.5 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống sabinen mẫu thử dịch nhân viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 27 Bảng 3.6 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống β-pinen mẫu thử dịch nhân viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 27 Bảng 3.7 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống limonen mẫu thử dịch nhân viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 28 Bảng 3.8 Kết khảo sát tính tương thích hệ thống citronellal mẫu thử dịch nhân viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 28 Bảng 3.9 Kết khảo sát tính tuyến tính, LOD, LOQ sabinen .31 Bảng 3.10 Khoảng nồng độ tuyến tính sabinen 31 Bảng 3.11 Kết khảo sát tính tuyến tính, LOD, LOQ β-pinen .32 Bảng 3.12 Khoảng nồng độ tuyến tính β-pinen .32 Bảng 3.13 Khảo sát tính tuyến tính LOD, LOQ limonen 33 Bảng 3.14 Kết khảo sát tính tuyến tính limonen 33 Bảng 3.15 Kết khảo sát tính tuyến tính, LOD, LOQ Citronellal 34 Bảng 3.16 Khoảng nồng độ tuyến tính citronellal .34 Bảng 3.17 Kết khảo sát độ sabinen viên xông tinh dầu Chúc 35 Bảng 3.18 Kết khảo sát độ β-pinen viên xông tinh dầu Chúc 36 Bảng 3.19 Kết khảo sát độ limonen viên xông tinh dầu Chúc .37 Bảng 3.20 Kết khảo sát độ citronellal viên xông tinh dầu Chúc 38 vi Bảng 3.21 Kết khảo sát độ xác ngày (n=7) sabinen viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 39 Bảng 3.22 Kết khảo sát độ xác ngày (n=7) β-pinen viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 39 Bảng 3.23 Kết khảo sát độ xác ngày (n=7) limonen viên xông có chứa tinh dầu Chúc 40 Bảng 3.24 Kết khảo sát độ xác ngày (n=7) citronellal viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 40 Bảng 3.25 Kết khảo sát độ xác liên ngày 2, ngày (n=7) sabinen viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 41 Bảng 3.26 Kết khảo sát độ xác liên ngày 2, ngày (n=7) β-pinen viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 42 Bảng 3.27 Kết khảo sát độ xác liên ngày 2, ngày (n=7) limonen viên xơng có chứa tinh dầu Chúc 42 Bảng 3.28 Kết khảo sát độ xác liên ngày 2, ngày (n=7) citronellal viên xơng có chứa tinh dầu Chúc .43 Bảng 3.29 Kết kiểm nghiệm viên xơng có chứa tinh dầu Chúc từ lơ trước đưa vào nghiên cứu độ ổn định 44 Bảng 3.30 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc .45 Bảng 3.31 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc .46 Bảng 3.32 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc .47 Bảng 3.33 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc .48 Bảng 3.34 Kết khảo sát độ ổn định viên xơng có chứa tinh dầu Chúc điều kiện cấp tốc (lô 2) 49 Bảng 3.35 Kết khảo sát độ ổn định viên xông có chứa tinh dầu Chúc .50 Bảng 4.1 Kết xử lý thống kê tính tuyến tính sabinen 55 Bảng 4.2 Kết xử lý thống kê tính tuyến tính β-pinen 56 Bảng 4.3 Kết xử lý thống kê tính tuyến tính limonen 57 Bảng 4.4 Kết xử lý thống kê tính tuyến tính citronellal .58