Nghiên cứu xây dựng quy trình định lượng dư lượng thuốc trừ sâu nhóm phosphor hữu cơ và pyrethroid có trong khoai lang bằng phương pháp sắc ký khí

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ THÚY NGA NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM PHOSPHOR HỮU CƠ VÀ PYRETHROID CÓ TRONG KHOAI LANG BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Cần Thơ – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ THÚY NGA NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM PHOSPHOR HỮU CƠ VÀ PYRETHROID CÓ TRONG KHOAI LANG BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ KHÍ Chuyên nghành: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT Mã số: 8720210 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học: Ts.Ds PHẠM THỊ TỐ LIÊN Ths.Ds NGUYỄN NGỌC NHÃ THẢO Cần Thơ –2020 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi Các số liệu, kết nêu luận văn đảm bảo tính trung thực chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu khác Người cam đoan Nguyễn Thị Thúy Nga LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, Em xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Quý Thầy, Cô Trường Đại học Y Dược Cần Thơ tạo điều kiện thuận lợi cho Em học tập nghiên cứu Em xin trân trọng bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc đến: Quý Thầy, Cơ Khoa Dược Liên mơn Hóa phân tích - Kiểm nghiệm thuốc - Độc chất tận tình giúp đỡ tạo điều kiện cho em hồn thành luận văn Với lịng kính trọng biết ơn, Em xin gửi lời cảm ơn đến Cô PGS.TS Nguyễn Thị Ngọc Vân, Cô TS Phạm Thị Tố Liên Cô ThS Nguyễn Ngọc Nhã Thảo người tận tâm hướng dẫn, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm, góp ý cho Em suốt trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn Công Ty Cổ Phần Warrantek - Cần Thơ hỗ trợ tơi q trình nghiên cứu Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn gia đình, Quý Thầy, Cô, anh, chị, em bạn đồng nghiệp quan tâm động viên tơi q trình học tập thực luận văn Xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ - 2020 Nguyễn Thị Thúy Nga i MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT iii DANH MỤC CÁC BẢNG v ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan hóa chất bảo vệ thực vật 1.1.1 Một số khái niệm 1.1.2 Phân loại hóa chất bảo vệ thực vật 1.1.3 Sơ lược thuốc bảo vệ thực vật nhóm phosphor hữu 1.1.4 Sơ lược thuốc bảo vệ thực vật nhóm pyrethroid tổng hợp 1.2 Tình hình sử dụng thuốc bảo vệ thực vật 10 1.3 Dư lượng thuốc bảo vệ thực vật cho phép theo Bộ Y Tế 12 1.4 Phương pháp xử lý mẫu QuEChERS 13 1.5 Một số nghiên cứu xác định dư lượng thuốc bảo vệ thực vật 14 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Đối tượng 18 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 18 2.1.2 Tiêu chuẩn chọn mẫu 20 2.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ 20 2.1.4 Địa điểm thời gian nghiên cứu 20 2.2 Phương pháp nghiên cứu 20 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 20 2.2.2 Cỡ mẫu nghiên cứu 20 2.2.3 Phương pháp chọn mẫu 21 2.2.4 Nội dung nghiên cứu 21 2.2.5 Phương pháp thu thập đánh giá số liệu 29 2.2.6 Phương pháp kiểm soát sai số 29 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 30 3.1 Xây dựng quy trình định lượng đồng thời cypermethrin, permethrin, chlorpyrifos ethyl, chlorpyrifos methyl diazinon có khoai lang phương pháp GC - MS/MS 30 3.1.1 Khảo sát lựa chọn nội chuẩn 30 ii 3.1.2 Khảo sát điều kiện khối phổ 30 3.1.3 Khảo sát điều kiện sắc ký 31 3.1.4 Khảo sát lựa chọn quy trình xử lý mẫu 33 3.2.Thẩm định quy trình định lượng đồng thời cypermethrin, permethrin, chlorpyrifos ethyl, chlorpyrifos methyl diazinon có khoai lang phương pháp GC - MS/MS 36 3.2.1 Tính tương thích hệ thống 36 3.2.2 Tính đặc hiệu 36 3.2.3 Khoảng tuyến tính 38 3.2.4 Độ độ xác 41 3.2.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng 42 3.3 Ứng dụng quy trình xây dựng ……………………………………… 43 Chương BÀN LUẬN 45 4.1 Xây dựng qui trình định lượng đồng thời cypermethrin, permethrin, chlorpyrifos ethyl, chlorpyrifos methyl diazinon có khoai lang phương pháp GC - MS/MS 45 4.1.1 Khảo sát lựa chọn nội chuẩn 45 4.1.2 Khảo sát điều kiện khối phổ 46 4.1.3 Khảo sát điều kiện sắc ký 47 4.1.4 Khảo sát lựa chọn quy trình xử lý mẫu 48 4.2 Thẩm định quy trình định lượng đồng thời cypermethrin, permethrin, chlorpyrifos ethyl, chlorpyrifos methyl diazinon có khoai lang phương pháp GC - MS/MS 50 4.2.1 Tính tương thích hệ thống 50 4.2.2 Tính đặc hiệu, chọn lọc 51 4.2.3 Khoảng tuyến tính 52 4.2.4 Độ độ xác 52 4.2.5 Giới hạn phát giới hạn định lượng 53 4.3 Ứng dụng quy trình xây dựng ……………………………………… 57 KẾT LUẬN 59 KIẾN NGHỊ 60 iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt AOAC Từ nguyên Nghĩa Tiếng Việt Association of Official Hiệp hội nhà hóa học Analytical Chemists phân tích thức ChE Cholinesterase CV Coefficient of variation Hệ số biến thiên d - SPE Dispersive - Solid phase Chiết phân bố pha rắn extraction ESI Electrospray Ionization Ion hóa kiểu phun điện tử FAO Food and Agriculture Tổ chức nông lương giới Organization GC - MS/MS Gas Chromatography - Sắc ký khí ghép đầu dò Mass Spectrometry/Mass kết hợp lần khối phổ Spectrometry GCB Graphitized carbon black Than hoạt tính Hóa chất bảo vệ thực vật HCBVTV IP Identification Point Điểm xác nhận IS Internal standard Nội chuẩn LD50 Lethal dose 50 Liều chết 50 LOD Limit of detection Giới hạn phát LOQ Limit of Quantification Giới hạn định lượng MRL Maximum residue limit Giới hạn dư lượng tối đa MRM Multiple Reaction Chế độ chọn lọc nhiều lần Monitoring PHI Pre-Harvest Interval Thời gian cách ly iv Chữ viết tắt Từ nguyên Nghĩa Tiếng Việt PSA Primary secondary amine Amin thứ cấp QuEChERS Quick, Easy, Cheap, Nhanh, dễ dàng, rẻ, hiệu quả, Effective, Rugged, Safe ổn định, an toàn R2 Coefficient of Correlation Hệ số tương quan RSD Relative standard Độ lệch chuẩn tương đối deviation SD Standard deviation Độ lệch chuẩn SSL Split/splitless Chia dịng/khơng chia dịng WHO World Health Tổ chức Y tế Thế Giới Organization v DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Bảng phân loại hóa chất bảo vệ thực vật theo nhóm độc Bảng 1.2 Thuốc bảo vệ thực vật nhóm phospho hữu nghiên cứu Bảng 1.3 Thuốc bảo vệ thực vật nhóm pyrethroid nghiên cứu Bảng 1.4 Thống kê hóa chất bảo vệ thực vật phép sử dụng, cấm sử dụng12 Bảng 1.5 Mức dư lượng tối đa thuốc bảo vệ thực vật theo Bộ Y Tế 12 Bảng 1.6 Một số nghiên cứu xác định dư lượng hóa chất bảo vệ thực vật phương pháp sắc ký khí giới 14 Bảng 2.1 Thông tin chất chuẩn dùng nghiên cứu 18 Bảng 2.2 Hóa chất dung mơi dùng nghiên cứu 18 Bảng 2.3 Thiết bị dùng nghiên cứu 19 Bảng 2.4 Chương trình nhiệt 22 Bảng 2.5 Chương trình nhiệt 22 Bảng 2.6 Chương trình nhiệt 23 Bảng 2.7 Tỷ lệ chênh lệch ion cho phép 26 Bảng 2.8 Pha dung dịch khảo sát khoảng tuyến tính 26 Bảng 2.9 Pha dung dịch khảo sát độ độ xác 27 Bảng 2.10 Mã hóa mẫu khoai thu thập chợ 28 Bảng 2.11 Mã hóa mẫu khoai thu thập siêu thị 28 Bảng 3.1 Các điều kiện GC - MS/MS dùng nghiên cứu 30 Bảng 3.2 Chương trình nhiệt tối ưu chất nghiên cứu 32 Bảng 3.3 Điều kiện chạy tối ưu chất nghiên cứu 33 Bảng 3.4 Kết độ thu hồi quy trình xử lý mẫu 36 Bảng 3.5 Kết tính tương thích hệ thống 36 Bảng 3.6 Tỷ lệ ion chất nghiên cứu 38 vi Bảng 3.7 Kết khoảng tuyến tính chất nghiên cứu 39 Bảng 3.8 Khoảng tuyến tính, phương trình hồi quy hệ số tương quan chất nghiên cứu 39 Bảng 3.9 Giá trị thống kê phương trình hồi quy chất nghiên cứu 40 Bảng 3.10 Phương trình hồi quy chất nghiên cứu sau đánh giá 41 Bảng 3.11 Độ đúng, độ xác ngày liên ngày 41 Bảng 3.12 Giá trị LOD LOQ phương pháp 42 Bảng 3.13 Kết định lượng mẫu rau lang 43 Bảng 3.14 Kết định lượng mẫu củ khoai lang 44 Phụ lục Độ đúng, độ xác, LOD LOQ *Độ đúng ngày *Độ đúng ngày *Độ đúng ngày Phụ lục Kết định lượng chất nghiên cứu mẫu ứng dụng Kết chất nghiên cứu mẫu ứng dụng 1-12 Kết chất nghiên cứu mẫu ứng dụng 13-30 ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y DƯỢC CẦN THƠ NGUYỄN THỊ THÚY NGA NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG DƯ LƯỢNG THUỐC TRỪ SÂU NHÓM PHOSPHOR HỮU CƠ VÀ PYRETHROID CÓ TRONG KHOAI LANG BẰNG... trình định lượng dư lượng thuốc trừ sâu nhóm phosphor hữu pyrethroid có khoai lang phương pháp sắc ký khí? ?? Với mục tiêu sau: Xây dựng thẩm định quy trình định lượng đồng thời cypermethrin, permethrin,... diazinon có khoai lang phương pháp GC-MS/MS Ứng dụng quy trình xây dựng xác định dư lượng cypermethrin, permethrin, chlorpyrifos ethyl, chlorpyrifos methyl diazinon có khoai lang phương pháp GC-MS/MS