Thực trạng và một số yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chómèo (toxocara sp ) ở trẻ em tiểu học từ 6 đến 11 tuổi tại xã yên lạc, huyện yên định, tỉnh thanh hóa năm 2014

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG PHẠM THỊ THU HOÀI H P THỰC TRẠNG VÀ MỘT SỐ YẾU TỐ LIÊN QUAN ĐẾN NHIỄM GIUN ĐŨA CHÓ/MÈO (TOXOCARA SP.)Ở TRẺ EM TIỂU HỌC TỪ ĐẾN 11 TUỔI TẠI XÃ YÊN LẠC, HUYỆN YÊN ĐỊNH, TỈNH THANH HÓA NĂM 2014 U H LUẬN VĂN THẠC SĨ Y TẾ CÔNG CỘNG MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 60.72.03.01 HÀ NỘI, 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CƠNG CỘNG PHẠM THỊ THU HỒI H P THỰC TRẠNG VÀ MỘT SỐ YẾU TỐ LIÊN QUAN ĐẾN NHIỄM GIUN ĐŨA CHÓ/MÈO (TOXOCARA SP.) Ở TRẺ EM TIỂU HỌC TỪ ĐẾN 11 TUỔI TẠI XÃ YÊN LẠC HUYỆN YÊN ĐỊNH TỈNH THANH HÓA NĂM 2014 U H LUẬN VĂN THẠC SĨ Y TẾ CÔNG CỘNG MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 60.72.03.01 TS NGUYỄN THU HƯƠNG PGS.TS LÊ XUÂN HÙNG HÀ NỘI, 2015 i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đề tài này, tơi nhận giúp đỡ nhiệt tình nhiều người Đặc biệt tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Thu Hương, PGS.TS Lê Xuân Hùng người thầy tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình thực đề tài Tơi xin trân cảm ơn: Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo sau Đại học thầy cô giáo môn trường Đại học Y tế công cộng tạo điều kiện thuận lợi H P cho tơi hồn thành mục tiêu học tập đề tài Tơi xin chân thành cảm ơn Trung tâm Phòng chống sốt rét – Ký sinh trùng – Cơn trùng Tỉnh Thanh Hóa, Trung tâm Y tế Huyện Yên Định, UBND, Trạm Y tế xã Yên Lạc, cộng tác viện y tế thôn xã Yên Lạc cộng tác ủng hộ tơi nhiệt tình q trình thu thập số liệu nghiên cứu đề tài U Tôi xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc, Lãnh đạo cán viên chức Khoa Ký sinh trùng, Viện Sốt rét – Ký sinh trùng – Côn trùng Trung ương tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình học tập hồn thành đề tài H Tơi xúc động vơ biết ơn gia đình, bạn bè, đồng nghiệp quan tâm động viên, chia sẻ giúp đỡ tơi q trình học tập hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 17 tháng 03 năm 2015 PHẠM THỊ THU HOÀI ii MỤC LỤC DANH MỤC CÁC HÌNH .vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT vii TÓM TẮT NGHIÊN CỨU viii ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lịch sử bệnh giun đũa chó/mèo H P 1.2 Một số đặc điểm dịch tễ học bệnh giun đũa chó/mèo 1.2.1 Tác nhân gây bệnh 1.2.2 Các đặc điểm sinh học Toxocara sp 1.2.3 Chu kỳ phát triển 1.2.4 Quá trình truyền nhiễm 10 U 1.2.5 Thể lâm sàng bệnh giun đũa chó/mèo 11 1.2.6 Dịch tễ học 12 1.2.7 Chẩn đoán 13 H 1.2.8 Điều trị 14 1.2.9 Dự phòng 14 1.3 Tình hình nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo người Thế giới Việt Nam 15 1.3.1 Tình hình nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo người Thế giới 15 1.3.2 Tình hình nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo người Việt Nam 17 1.4 Các yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo người 18 1.4.1 Hành vi cá nhân 18 1.4.2 Thói quen ăn uống 19 1.4.3 Tiếp xúc với chó/mèo 20 1.5 Khung lý thuyết 23 iii 1.6 Địa điểm nghiên cứu 24 Chương 25 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 25 2.3 Thiết kế nghiên cứu 25 2.4 Cỡ mẫu 25 2.5 Phương pháp thu thập số liệu 25 2.6 Thử nghiệm công cụ 26 H P 2.7 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 26 2.8 Các biến số nghiên cứu 28 2.9 Phương pháp quản lý phân tích số liệu 31 2.9.1 Quản lý số liệu 31 2.9.2 Phân tích số liệu 32 U 2.10 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 32 2.11 Hạn chế nghiên cứu, sai số biện pháp khắc phục sai số 33 Chương 35 H KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 35 3.1 Thông tin chung đối tượng nghiên cứu 35 3.1.1 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo làng 35 3.1.2 Tuổi đối tượng nghiên cứu 35 3.1.3 Phân bố đối tượng nghiên cứu theo giới 36 3.1.4 Thực trạng ni chó/mèo gia đình đối tượng nghiên cứu 36 3.2 Thực trạng nhiễm giun đũa chó/mèo đối tượng nghiên cứu 38 3.2.1 Kết xét nghiệm ELISA đối tượng nghiên cứu 38 3.2.2 Kết xét nghiệm bạch cầu toan đối tượng nghiên cứu 40 3.3 Phân tích yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèoở đối tượng nghiên cứu 42 iv 3.3.1 Liên quan giới với nhiễm giun đũa chó/mèo 42 3.3.2 Liên quan tiếp xúc chó/mèo với nhiễm giun đũa chó/mèo người 42 3.3.3 Liên quan vệ sinh mơi trường với nhiễm giun đũa chó/mèo người 45 3.3.4 Liên quan hành vi cá nhân đối tượng nghiên cứu với nhiễm giun đũa chó/mèo 46 3.3.5 Mối liên quan thói quen ăn uống trẻ với ELISA (+) 49 3.4 Kết phân tích đa biến: số yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo trẻ em Trường tiểu học Yên Lạc 49 Chương 52 H P BÀN LUẬN 52 4.1 Địa điểm đối tượng nghiên cứu 52 4.1.1 Địa điểm nghiên cứu 52 4.1.2 Đối tượng nghiên cứu 52 4.2 Tỷ lệ nhiễm giun đũa chó/mèo trẻ em từ – 11 tuổi điểm nghiên cứu 53 U 4.3 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo trẻ em điểm nghiên cứu 57 4.3.1 Yếu tố liên quan đặc điểm ĐTNC 57 H 4.3.2 Một số yếu tố liên quan tiếp xúc với chó, mèo ĐTNC 58 4.3.3 Liên quan vệ sinh mơi trường với nhiễm giun đũa chó/mèo 61 4.3.4 Liên quan hành vi cá nhân với nhiễm giun đũa chó/mèo 62 4.3.5 Liên quan thói quen ăn uống với nhiễm giun đũa chó/mèo 63 KẾT LUẬN 64 5.1 Thực trạng nhiễm giun đũa chó/mèo trẻ em – 10 tuổi điểm nghiên cứu 64 5.2 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm ấu trùng giun đũa chó trẻ em từ – 10 tuổi điểm nghiên cứu 64 KHUYẾN NGHỊ 66 PHỤ LỤC 73 Phụ lục 1: Bộ câu hỏi dành cho trẻ em đối tượng nghiên cứu 73 v Phụ lục 2: Bộ câu hỏi dành cho người chăm sóc trẻ 76 Phụ lục 3: Phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu 79 Phụ lục 4: Kỹ thuật đếm phân loại bạch cầu 81 Phụ lục 5: Kỹ thuật ELISA tìm kháng thể Toxocara máu 84 Phụ lục 6: Biên giải trình chỉnh sửa sau bảo vệ luận văn 86 H P H U vi DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1.Một đoạn ruột non chó với Toxocara canis trưởng thành …………… Hình 1.2 Hình ảnh trứng Toxocara canis …………………………………………… Hình 1.3 Chu kỳ phát triển Toxocara sp …………………………………… Hình 1.4 Bản đồ hành xã n Lạc, huyện n Định, tỉnh Thanh Hóa ……….24 Hình 3.1 Đối tượng nghiên cứu theo giới ……………………………………………36 Hình 3.2 Tỷ lệ dương tính với ELISA theo tuổi ĐTNC ……………………… 39 H P H U vii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT BCAT Bạch cầu toan ĐTNC Đối tượng nghiên cứu ELISA Enzyme – Linked Immunosorbent Assay (Kỹ thuật miễn dịch gắn men) HGĐ Hộ gia đình H P H U viii TÓM TẮT NGHIÊN CỨU Nhiễm ấu trùng giun đũa chó/mèo – Toxocariasis bệnh lây nhiễm từ động vật sang người hay gọi bệnh ấu trùng di chuyển nội tạng.Nguyên nhân Toxocara canis Toxocara cati gây nên Bệnh ấu trùng giun đũa chó mèo gây gặp lứa tuổi, gặp nhiều trẻ em, trẻ em thường hiếu động, thích chơi đùa, bồng bế chó, mèo, chơi trò chơi tiếp xúc với đất bụi bẩn, ý thức vệ sinh trẻ Nghiên cứu cắt ngang tiến hành 243 trẻ em tiểu học từ 6-11 tuổi xã Yên H P Lạc, huyện n Định, tỉnh Thanh Hóa Mục đích nghiên cứu nhằm tìm hiểu mối liên quan tập qn ni chó, mèo gia đình có trẻ em số hành vi nguy với tình trạng nhiễm giun đũa chó/mèo trẻ em tiểu học Nghiên cứu sử dụng kỹ thuật ELISA xác định tình trạng nhiễm câu hỏi vấn để tìm hiểu tập quán, yếu tố nguy U Kết cho thấy tỷ lệ trẻ dương tính với xét nghiệm ELISA 74,9% Tỷ lệ xét nghiệm ELISA dương tính trẻ em hộ ni chó 78,1%; tỷ lệ xét nghiệm ELISA dương tính trẻ em hộ nuôi mèo 87,3% Kết nghiên cứu có mối H liên quan ni chó với nhiễm giun đũa chó/mèo (OR = 2,9; p < 0,05), có mối liên quan tẩy giun cho chó với nhiễm giun đũa chó/mèo (OR = 8; p < 0,001), có mối liên quan giữ xử lý phân chó/mèo với nhiễm giun đũa chó/mèo (OR = 8,4; p < 0,001) Một số hành vi nguy có liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo chơi đùa với chó/mèo (OR = 3,28; p < 0,001); khơng rửa tay sau chơi với chó/mèo (OR = 18,2; p < 0,001); không vệ sinh sau tiếp xúc đất (OR = 4,2; p < 0,001); không rửa tay trước ăn (OR = 4,5; p < 0,001) Khuyến nghị: Cần có chương trình giáo dục truyền thơng cung cấp đầy đủ thơng tin lời khun phịng chống Toxocariasis kết hợp thú y quan y tế nhằm bảo vệ sức khỏe cho người dân, đặc biệt trẻ em xã 74  Q9 Vuốt ve Cháu chơi với chó, mèo Ơm hôn nào? Cho ngủ Khác……………………… Sau chơi đùa với chó, Có mèo cháu có rửa tay khơng? Khơng Thường xun (lần rửa) Cháu thường xuyên rửa tay Thỉnh thoảng (có lần rửa, có lần khơng? H P không) Rửa nước Cháu rửa tay nào? 10 11 Rửa với xà phòng Cháu có rửa tay trước ăn khơng? U Cháu thường xuyên rửa tay không? H Cách cháu rửa tay nào? Cháu có chơi trị chơi có 12 liên quan tới đất cát khơng? Có Không Thường xuyên (lần rửa) Thỉnh thoảng (có lần rửa, có lần khơng) Rửa tay với nước Rửa tay với xà phịng Có Khơng (đá bóng, bắn bi, nặn đất…) 13 14 Cháu có thường xun chơi trị chơi khơng? Sau chơi xong cháu có rửa tay chân không? 15 Cháu thường xuyên rửa Q12 Thường xuyên (hàng ngày) Thỉnh thoảng Có Khơng Thường xuyên (lần rửa) Q17 75 taychân không? Thỉnh thoảng (có lần rửa, có lần khơng) Rửa nước 16 Cháu rửa tay nào? Rửa với xà phịng Có 17 Cháu có ăn rau sống không? 18 19 20 Không Cháu có thường xun ăn Q19 rau sống khơng? Thường xun (trên lần/tuần) Thỉnh thoảng (1lần, lần/tuần) Cháu có uống nước lã H P khơng? Có Khơng Cháu có thường xun uống nước lã không? Thường xuyên (trên lần/tuần) Thỉnh thoảng (1 lần, lần/tuần) Chú ý: Sau vấn, điều tra viên kiểm tra lại điền đầy đủ thông tin vào phiếu chưa U Rất cảm ơn cháu trả lời câu hỏi cô Họ tên điều tra viên H Kết xét nghiệm Kết xét nghiệm ELISA Dương tính OD: ………… Âm tính Bạch cầu toan ………………… Tăng Bình thường 76 Phụ lục 2: Bộ câu hỏi dành cho người chăm sóc trẻ Xin chào anh/chị cháu Chúng tiến hành nghiên cứu “Thực trạng số yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó, mèo trẻ em từ – 11 tuổi xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa năm 2014” Cảm ơn anh/chị cháu đồng ý tham gia vấn.Chúng đánh giá cao việc anh/chị cháu bỏ thời gian để tham gia với chúng tơi Tơi muốn anh/chị cháu hồn tồn thoải mái nói chuyện tự Cảm ơn anh/chị cháu đồng ý tham gia nghiên cứu, anh/chị cháu có câu H P hỏi trước bắt đầu vấn không? Tên bố/mẹ : Tên trẻ: .Lớp: Địa chỉ: U STT Câu hỏi A Thông tin chung: H Ngày vấn Tuổi Giới tính Trả lời Mã Chuyển _/ _/ _ tuổi (Ghi số tuổi dương lịch) Nam Nữ B Yếu tố môi trường Nhà anh/chị có ni chó khơng? Có ni chó ni Có Khơng Q8 77 con? 2-3 Trên Khác……………………… …… Ni nhốt Cách ni chó? Ni thả Có Nhà anh/chị có tẩy giun Khơng cho chó khơng? H P Nhà anh/chị có ni mèo Có khơng Khơng 2-3 Có ni mèo ni U con? Trên Khác …………………………… H 10 Cách nuôi mèo? 11 12 13 Nhà anh/chị có tẩy giun cho mèo khơng? Nhà anh/chị có cho chó, mèo vào nhà khơng? khơng ni mèo Q12 Nếu ni chó lẫn Q16 Nuôi nhốt Nuôi thả Có Khơng Có Khơng Nhà anh/chị có cho chó, Có mèo lên giường khơng? Khơng 14 Anh/chị có thấy phân chó, Nếu ni chó Có khơng mèo 78 mèo quanh khu vực nhà Khơng khơng? Có Anh, chị xử lý phân chó Khơng 15 mèo khu vực xung quanh Hót cho vào sọt rác Cách xử lý phân chó, mèo nhà anh chị? Chơn lấp Khác……………………… H P Chó mèo nhà hàng xóm có Có 17 chạy sang nhà anh/chị chơi Không không? Anh/chị có thấy phân chó, U Anh chị có xử lý phân chó, 20 H Cách xử lý phân chó, mèo anh/chị nào? khơng ni chó, mèo Khơng khơng? khơng? Các gia đình Có 18 mèo quanh khu vực nhà 19 mèo quanh khu vực nhà thúc vấn nhà không? 16 Kết Có Khơng Hót cho vào thùng rác Chôn lấp Khác……………………… … Chú ý: Sau vấn, điều tra viên kiểm tra lại điền đầy đủ thông tin vào phiếu chưa Rất cảm ơn anh/chị trả lời câu hỏi Họ tên điều tra viên 79 Phụ lục 3: Phiếu đồng ý tham gia nghiên cứu Thông tin giới thiệu nghiên cứu: Đây nghiên cứu nhằm đánh giá thực trạng nhiễm tìm hiểu số yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó, mèo trẻ em từ – 11 tuổi xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa năm 2014 Kết xét nghiệm máu trả lời vấn cháu anh/chị góp phần quan trọng vào việc cho thấy thực trạng nhiễm bệnh địa phương đặc biệt đối tượng trẻ em, để từ xây dựng kế hoạch phịng chống bệnh phù hợp với tình hình thực tế địa phương, nâng cao sức khỏe H P cho cháu cộng đồng Để thu thập đầy đủ thông tin cần thiết, thời gian cho trao đổi dự kiến 20 – 30 phút Sự tham gia vào nghiên cứu tự nguyện: Sự tham gia vào nghiên cứu hoàn toàn tự nguyện Chúng mong nhận U hợp tác từ anh /chị cháu mong thu thơng tin xác từ phía anh/chị cháu Trong trình vấn anh/chị cháu thấy câu hỏi vấn đề khó trả lời đề nghị anh/chị cháu không trả lời, H không nên trả lời cách thiếu xác.Mặt khác anh/chị cháu dùng vấn lúc thấy q bất tiện Chúng tơi đảm bảo tồn thông tin mà anh/chị cháu cung cấp buổi trao đổi giữ bí mật Địa liên hệ cần thiết: Nếu anh/chị muốn biết thêm thơng tin có câu hỏi liên quan đến nghiên cứu hỏi tơi liên hệ trực tiếp với: Nghiên cứu viên: Phạm Thị Thu Hoài Địa chỉ: Viện Sốt rét – Ký sinh trùng – Côn trùng Trung ương, ĐT: 0977970118 80 Sau nghe tất thông tin nghiên cứu trên, anh/chị cháu có đồng ý tham gia vào nghiên cứu không? Đồng ý Từ chối ………… , ngày tháng năm 2014 Chữ ký người chăm sóc trẻ H P H U 81 Phụ lục 4: Kỹ thuật đếm phân loại bạch cầu Nguyên lý Bạch cầu tế bào có nhân, có chức bảo vệ thể, máu ngoại vi bình thường có loại bạch cầu tiêu số khu vực để phản ánh phân bố tỷ lệ loại bạch cầu máu bệnh nhân Chuẩn bị 2.1 Dụng cụ: - Dụng cụ kéo lam - Kính hiển vi - Máy đếm H P 2.2 Hóa chất: - Dung dịch Giemsa cốt - Dầu soi U 2.3 Bệnh phẩm: - Máu tĩnh mạch máu mao mạch Tiến hành H 3.1 Làm tiêu máu đàn - Đối chiếu họ tên, tuổi … bệnh nhân - Mỗi bệnh nhân làm tiêu máu đàn 3.2 Nhuộm Giemsa 10% 3.3 Phân loại đếm: - Lấy vi trường vật kính 10x, 40x để quan sát tìm nơi tế bào rải - Nhỏ giọt dầu lên tiêu chuyển sang vật kính 100x - Xác định loại tế bào dựa vào đặc điểm hình thái, tính chất bắt màu 82 - Đếm nơi hồng cầu rải 1/3 đuôi tiêu (nơi tế bào rải đều, tế bào hồng cầu đứng sát nhau) - Đếm theo hình zíc zắc - Đếm riêng loại tế bào có nhân tổng số 100 tế bào có nhân loại - Đếm tối thiểu 100 tế bào có nhân dừng lại - Ghi lại tỷ lệ phần trăm tính trị tuyệt đối loại bạch cầu - Trong trình đếm có tế bào Blast tế bào non mơ tả kỹ hình thái cấu trúc, có hồng cầu non phải lấy tồn số lượng tế bào có nhân trừ số lượng hồng cầu non để có số lượng bạch cầu thực tế, phải ý xem độ H P tập trung tiểu cầu, ký sinh trùng đường máu có (sốt rét, ấu trùng gun chỉ…) Kết 4.1 Gá trị bình thường - Tỷ lệ % thay đổi theo tuổi bảng sau: Mới đẻ Trung tính 54 – 86 25 – 40 35 – 50 45 – 60 55 – 75 0–2 1–2 1–4 1–4 1–8 0,4 0,2 0,1 0,1 10 – 38 50 – 70 45 – 60 40 – 50 25 – 35 Mono 0–7 6 1–4 Stab 0–2 6 1–4 Axít Bazơ Lympho - U Loại bạch cầu H tháng tuổi 10 tuổi Người lớn Muốn biết số lượng loại bạch cầu tăng hay giảm thực sự, người ta phải tính giá trị tuyệt đối loại 1mm3 máu (hay lít máu) 83 - Bình thường: Trung tính: 2500 – 7000/mm3 Axits: 40 – 250/mm3 Bazơ: 10 – 50/mm3 Lympho: 1200 – 3000/mm3 Mono: 150 – 500/mm3 4.2 Thay đổi loại bạch cầu - Bạch cầu đoạn trung tính H P Tăng: nhiễm khuẩn mủ, viêm khớp, bệnh bạch cầu Giảm: suy tủy, sốt rét nặng - Bạch cầu đoạn ưu axits Tăng: bệnh ký sinh trùng (giun, sán …), bệnh da, dị ứng U Giảm: suy tủy - Bạch cầu đoạn ưa bazơ H Tăng: bệnh bạch cầu, tan máu mạn tính… - Bạch cầu Lympho Tăng: ho gà, lao, sởi, sốt rét, bệnh bạch cầu … Giảm: thương hàn nặng, sốt phát ban - Bạch cầu mono: tăng bệnh nhiễm vi rút … Nguyên nhân sai chệch kết Do bệnh phẩm đông dây, đếm sai nhận biết hình thái sai 84 Phụ lục 5: Kỹ thuật ELISA tìm kháng thể Toxocara máu Nguyên lý Kháng nguyên kết hợp với kháng thể đặc hiệu hiệu có huyết người tác dụng chất làm đổi màu chất Định lượng đo độ quang học (OD) chất chuyển màu Các giai đoạn: Giai đoạn 1: Kháng nguyên gắn vào giếng nhựa (đã gắn sẵn) Giai đoạn 2: Phủ huyết bệnh nhân cần phát kháng thể vào giếng H P Giai đoạn 3: Phủ Enzyme Conjugate lên phức hợp kháng nguyên – kháng thể vừa hình thành Phủ chất (Chromogen) để làm màu phản ứng kết dương tính Cuối phủ dung dịch ngừng phản ứng trước đọc kết U Chuẩn bị - Bộ Kit ELISA Toxocara Mỹ sản xuất - µl huyết người - Bộ Micropipet: – µl, – 20 µl, 20 – 200 µl, 200 – 1000 µl - Tuýp Eppendorf (pha loãng mẫu), đầu tip - Máy lắc - Máy đọc ELISA với bước sóng 450/650 – 620 nm H Tiến hành - Lấy số lượng giếng cần thiết (hai giếng cho chứng cộng với số lượng giếng cho mẫu) đặt vào giá để giữ giếng 85 - Nhỏ 100 µl (hoặc giọt) dung dịch trứng âm vào giếng 1, nhỏ 100 µl dung dịch trứng dương vào giếng 100 µl dung dịch pha loãng (1:64) huyết mẫu vào giếng tương ứng *Chú ý: Dung dịch trứng âm trứng dương pha lỗng sẵn Khơng pha lỗng - Ủ nhiệt độ phịng (15 đến 25 o C) 10 phút - Đổ dung dịch giếng rửa lần với dung dịch rửa pha loãng - Nhỏ giọt Enzyme Conjugate vào giếng - Ủ nhiệt độ phòng phút - Đổ dung dịch giếng rửa lần với dung dịch rửa pha loãng H P Đập plate vào khăn giấy để loại bỏ giếng - Nhỏ giọt Chromogen vào giếng - Ủ nhiệt độ phịng phút (các trường hợp dương tính dung dịch xuất màu xanh cây) - U Nhỏ giọt dung dịch ngừng phản ứng vào giếng trộn lên (các giếng màu xanh chuyển sang màu vàng) - Kết - H Đọc kết máy đọc ELISA 450/650 – 620 nm Chất lượng trứng: Trứng âm OD : 0,0 – 0,3 Trứng dương OD ≥ 0,5 - Mẫu xét nghiệm: Dương tính OD ≥ 0,3 Âm tính OD < 0,3 Nguyên nhân sai chệch kết - Rửa không kỹ làm cho trứng âm lên màu - Khắc phục: Rửa thật sạch, loại bỏ hết dung dịch khỏi giếng sau rửa cách đập mạnh giếng vào giấy thấm giếng khô 86 Phụ lục 6: Biên giải trình chỉnh sửa sau bảo vệ luận văn BIÊN BẢN GIẢI TRÌNH CHỈNH SỬA SAU BẢO VỆ ĐỀ CƯƠNG/BÁO CÁO Họ tên học viên: Phạm Thị Thu Hoài Tên đề tài: Thực trạng số yếu tố liên quan đến nhiễm giun đũa chó/mèo (Toxocara sp.) trẻ em tiểu học từ 6-11 tuổi xã Yên Lạc, huyện Yên Định, tỉnh Thanh Hóa năm 2014 TT Nội dung cần chỉnh sửa theo biên Nội dung chỉnh sửa (mô tả chi tiết, ghi rõ số trang) H P Mục tiêu sửa từ “tìm Học viên thay từ “tìm hiểu” hiểu” thành “mô tả” thành “mô tả” mục tiêu nghiên cứu trang U Bổ sung tài liệu tham Học viên bổ sung tài liệu khảo tham khảo cho đoạn thiếu trang 2, trang 15-22 H Xem lại tài liệu tham Học vien bổ sung thêm số khảo theo quy trang báo tham khảo định theo quy định giáo dục Nội dung không chỉnh sửa (lý không chỉnh sửa) Đối tượng học sinh Học viên khơng bỏ qua nhóm tiểu học bỏ qua nghiên cứu làm tồn nhóm 11 tuổi trẻ học trường tiểu học từ lớp học sinh tiểu học? 1đến lớp học viên chia nhóm tuổi chưa xác nên 87 dễ bị hiểu nhầm bỏ qua nhóm 11 tuổi, học viên sửa chia lại nhóm tuổi cho hợp lý trẻ từ 6-11 tuổi Bổ sung hạn chế nghiên Học viên bổ sung thêm vào cứu nhóm trẻ 6-7 hạn chế nghiên cứu theo tuổi có khác biệt góp ý ủy viên trang 33 vấn với nhóm từ H P tuổi trở lên Bảng kết 3.14 nên Học viên chỉnh sửa lại bảng chỉnh sửa “có ni chó” 3.14 theo góp ý Chủ tịch hội thay “chỉ ni chó” đồng trang 42 Bảng 3.17, 3.25 chỉnh Học viên chỉnh sửa lại sửa lại giá trị p cho hợp bảng 3.17, 3.25 trang 44, trang lý, không để p=1 49 U H Đưa tiêu chí cụ thể Học vien đưa tiêu chí cụ thể xác định tình trạng xác định tình trạng nhiễm nhiễm nghiên cứu nghiên cứu có xét nghiêm ELISA dương tính vào phần “Thiết kế nghiên cứu” trang 25 Khuyến nghị cần cụ thể Học viên sửa phần khuyến xác nghị cho cụ thể xác trang 66 88 Xác nhận giáo viên hướng dẫn (ký ghi rõ họ tên) Tôi xác nhận nội dung chỉnh sửa học viên (ký ghi rõ họ tên) TS Nguyễn Thu Hương Phạm Thị Thu Hoài PGS.TS Lê Xuân Hùng Học viên Ý kiến thành viên HĐ/chủ tịch HĐ(GV phân công đọc lại đề cương sau H P bảo vệ có): …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………………… H U Đại diện hội đồng (ký ghi rõ họ tên)