Đánh giá tồn lưu tối thiểu bằng phương pháp đếm tế bào dòng chảy thế hệ mới trên người bệnh đa u tủy xương tại viện huyết học truyền máu trung ương (2021 2022)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG LÊ THỊ HỒNG NHUNG H P ĐÁNH GIÁ TỒN LƯU TỐI THIỂU BỆNH BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM TẾ BÀO DÒNG CHẢY THẾ HỆ MỚI TRÊN NGƯỜI BỆNH ĐA U TUỶ XƯƠNG TẠI VIỆN HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG (2021-2022) U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 HÀ NỘI, 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG LÊ THỊ HỒNG NHUNG H P ĐÁNH GIÁ TỒN LƯU TỐI THIỂU BỆNH BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM TẾ BÀO DÒNG CHẢY THẾ HỆ MỚI TRÊN NGƯỜI BỆNH ĐA U TUỶ XƯƠNG TẠI VIỆN HUYẾT HỌC - TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG (2021-2022) U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS LÊ XUÂN HẢI GIẢNG VIÊN HỖ TRỢ Ths NGUYỄN THỊ T HU H HÀ NỘI, 2023 H P H U i LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập thực luận văn này, xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng đào tạo sau đại học trường Đại học Y tế Công cộng, Viện Huyết học – Truyền máu Trung ương tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Lê Xuân Hải - Trưởng khoa Miễn dịch Viện Huyết học – Truyền máu Trung ương Là người Thầy tận tình bảo, hướng dẫn, chia sẻ cho tơi kiến thức phương pháp nghiên cứu khoa học q báu suốt q trình hồn thành đề tài nghiên cứu trở thành tân H P Thạc sĩ thời gian tới Xin trân trọng cảm ơn cô Ths Nguyễn Thị Thu Hà –Trường Đại học Y tế Công cộng Người giúp nhiều phương pháp nghiên cứu khoa học, định hướng, bảo tơi bước đắn để hồn thành nghiên cứu cách tốt U Xin chân thành cảm ơn thầy cô, anh chị đồng nghiệp khoa Miễn dịch, Viện Huyết học- Truyền máu Trung ương nhiệt tình quan tâm giúp đỡ hỗ trợ tơi suốt hai năm học H Xin gửi lời cảm ơn đến bạn bè học lớp Thạc sĩ KTXNK1-1B, người tiếp thêm cho động lực, niềm vui để tơi hồn thành tốt đề tài Tơi xin chân thành thể lịng biết ơn với gia đình ln bên tơi, giúp đỡ tơi vượt qua khó khăn, nguồn động viên cổ vũ lớn lao cho tơi q trình học tập Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 28 tháng năm 2023 Lê Thị Hồng Nhung ii MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Bệnh lý đa u tuỷ xương 1.1.1 Khái niệm 1.1.1.1 Đa u tuỷ xương 1.1.1.2 Tương bào dấu ấn miễn dịch tương bào 1.1.1.3 Thuật ngữ MRD (Minimal Residual Disease) 1.1.1.4 Phương pháp đếm tế bào dòng chảy H P 1.1.2 Dịch tễ 1.1.3 Tiêu chuẩn chẩn đoán 1.1.4 Triệu chứng lâm sàng 1.1.5 Cận lâm sàng 1.2 Kỹ thuật đếm tế bào dòng chảy ứng dụng chẩn đoán, theo dõi sau điều U trị bệnh nhân đa u tuỷ xương 1.2.1 Các kỹ thuật chẩn đoán đa u tuỷ xương 1.2.2 Lịch sử cấu tạo máy đếm tế bào dòng chảy H 1.2.3 Ứng dụng kỹ thuật đếm tế bào dòng chảy theo dõi MRD cho bệnh nhân đa u tuỷ xương 10 1.3 Tình hình nghiên cứu bệnh lý đa u tuỷ xương giới Việt Nam 13 1.4 Địa điểm nghiên cứu 15 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.2 Thời gian nghiên cứu địa điểm nghiên cứu 17 2.3 Thiết kế nghiên cứu 17 2.5 Phương pháp chọn mẫu 19 2.6 Phương pháp thu thập số liệu 19 2.7 Các biến số nghiên cứu 19 2.8 Quy trình kỹ thuật thực 21 iii 2.8.1 Phương pháp đo 21 2.8.2 Đánh giá kết 21 2.9 Phương pháp phân tích số liệu 26 2.10 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 26 2.11 Sai số biện pháp khắc phục sai số 26 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 27 3.1 Đặc điểm dấu ấn miễn dịch tổ hợp dấu ấn miễn dịch nhóm bệnh nhân đa u tuỷ xương nhóm chứng nghiên cứu 27 3.1.1 Đặc điểm thông tin chung bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu 27 3.1.2 Đặc điểm dấu ấn miễn dịch tổ hợp dấu ấn miễn dịch bệnh nhân đa u tuỷ H P xương nghiên cứu 28 3.2.Tồn lưu tối thiểu bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu sau điều trị công ……………………………………………………………………………… 32 3.2.1 Đặc điểm thông tin chung bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu sau điều trị công 32 3.2.2 Đặc điểm dấu ấn miễn dịch tổ hợp dấu ấn miễn dịch bệnh nhân đa u tuỷ xương U nghiên cứu sau điều trị công 33 3.2.3 Tồn lưu tối thiểu bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu sau điều trị H công 35 Chương BÀN LUẬN 37 4.1 Đặc điểm chung nhóm đối tượng nghiên cứu 37 4.1.1 Tuổi trung bình giới tính 37 4.1.2 Đặc điểm dấu ấn miễn dịch tổ hợp dấu ấn miễn dịch bệnh nhân đa u tủy xương nghiên cứu 38 4.2 Tồn lưu tối thiểu bệnh nhân tăng sinh tương bào đơn dòng nghiên cứu sau đợt điều trị 44 4.2.1 Đặc điểm thông tin chung bệnh nhân tăng sinh tương bào đơn dòng nghiên cứu sau đợt điều trị 44 4.2.2 Đặc điểm dấu ấn miễn dịch tổ hợp dấu ấn miễn dịch nghiên cứu sau đợt điều trị 45 iv 4.2.3 Tồn lưu tối thiểu bệnh nhân đa u tủy xương nghiên cứu sau đợt điều trị công 46 4.3 Bàn luận hạn chế nghiên cứu 50 KẾT LUẬN 51 Đặc điểm dấu ấn miễn dịch tổ hợp dấu ấn miễn dịch bất thường bệnh nhân đa u tủy xương nghiên cứu 51 Tồn lưu tối thiểu bệnh nhân tăng sinh đơn dòng sau đợt điều trị nghiên cứu 51 H P H U v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CD: Cluster of differentiation: Dấu ấn biệt hoá FSC: Forward Scatter: Chùm tán xạ thẳng IMWG: International Myeloma Working Group: Nhóm đa u tuỷ xương Quốc tế ISS: International Staging System: Hệ thống phân giai đoạn Quốc tế LAIP: Leukemia Associated Immunophenotype: Kiểu hình miễn dịch bạch cầu liên quan bạch cầu cấp MGUS: Monoclonal gammopathy of undetemined significance: Bệnh tăng gamma đơn dòng chưa có biểu lâm sàng MM: Multiple Myeloma : Đa u tuỷ xương MRD: Minimal Residual Disease: Tồn lưu tối thiểu bệnh MRI: Magnetic Resonance Imaging: Chụp cộng hưởng từ SMM: Smouldering multiple myeloma: Đa u tuỷ xương tiềm tàng SSC: Side Scatter: Chùm tán xạ bên WHO: Tổ chức Y tế giới H U H P vi DANH MỤC BẢNG Bảng Đặc điểm tuổi, giới tính bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu27 Bảng Đặc điểm khác biệt CD45, CD38, CD138 nhóm đơn tăng sinh đơn dịng tăng sinh đa dòng 28 Bảng 3 Đặc điểm khác biệt dấu ấn CD19, CD27, CD56, CD200 nhóm tăng sinh đơn dịng nhóm tăng sinh đa dịng .29 Bảng Đặc điểm khác biệt CD Kappa CD Lambda nhóm tăng sinh đơn dịng nhóm tăng sinh đa dòng 29 Bảng Tỉ lệ biểu kháng nguyên CD hai nhóm 30 H P Bảng Các tổ hợp kiểu hình miễn dịch thu từ nhóm tăng sinh đa dòng 31 Bảng Các tổ hợp miễn dịch thu từ nhóm tăng sinh đơn dịng 31 Bảng Tần suất phát bất thường nhóm tăng sinh đơn dịng kháng nguyên 32 Bảng Đặc điểm nhóm tuổi bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu sau U điều trị công 32 Bảng 10 Đặc điểm tổ hợp kiểu hình miễn dịch bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu sau điều trị công 33 H Bảng 11 Phân nhóm MRD sau chu kỳ điều trị bệnh nhân đa u tuỷ xương nghiên cứu 35 Bảng 12 Số lượng LAIP theo dõi MRD bệnh nhân nghiên cứu 35 Bảng 13 Bảng giá trị theo dõi MRD bệnh nhân nghiên cứu sau đợt điều trị .36 vii DANH MỤC HÌNH Hinh1 1: Cấu tạo máy đếm tế bào dòng chảy 10 Hinh1 Quần thể tế bào Đa u tủy xương 12 Hình Sơ đồ phân tích liệu từ máy đếm tế bào dịng chảy 22 Hình 2 Quần thể tương bào mức độ biểu kháng nguyên 23 Hình Hình ảnh mức độ biểu CD Kappa, CD Lambda 24 Hình Hình ảnh tương bào đơn dòng trước sau điều trị 25 H P H U BỘ CÔNG CỤ NGHIÊN CỨU Mã số phiếu:…………………… Mã số hồ sơ bệnh án:………………………… Nội dung Giá trị Tuổi ……………………………… Giới tính ……………………………… STT Mức độ biểu kháng Giá trị trước điều trị Giá trị sau điều trị ………………… ……………… …………………… ……………… nguyên CD138 Mức độ biểu kháng H P nguyên CD38 Mức độ biểu kháng …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… ………………… …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… …………………… nguyên CD45 Mức độ biểu kháng nguyên CD200 Mức độ biểu kháng U nguyên CD56 Mức độ biểu kháng nguyên CD81 H Mức độ biểu kháng nguyên CD27 10 Mức độ biểu kháng nguyên CD19 11 Mức độ biểu kháng nguyên CD Kappa 12 Mức độ biểu kháng nguyên CD Lambda 13 % MRD …………………… …………………… 14 LAIP …………………… …………………… H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CƠNG CỘNG Biểu mẫu BIÊN BẢN GIẢI TRÌNH CHỈNH SỬA CÁC GÓP Ý ĐỀ CƯƠNG/LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC Họ tên học viên: LÊ THỊ HỒNG NHUNG Tên đề tài: Đánh giá tồn lưu tối thiểu bệnh phương pháp đếm tế bào dòng chảy người bệnh đa u tuỷ xương Viện Huyết học - Truyền máu Trung ương (2021 – 2022) Nội dung góp ý Phần giải trình học viên (Liệt kê nội dung góp ý theo thứ tự phần đề cương/luận văn) (Nêu rõ chỉnh sửa nào, phần nào, trang Nếu khơng chỉnh sửa,giải thích lý khơng chỉnh sửa) TT Định hướng chuyên ngành luận văn H P Đã phù hợp Tên đề tài luận văn Bổ xung chữ “bệnh” “tế bào ác tính” sau từ tối thiểu Tóm tắt U Tóm tắt viết rõ ràng theo đoạn Đặt vấn đề H Học viên bổ xung từ “bệnh” sau từ tồn lưu tối thiểu vào tên đề tài Học viên sửa tóm tắt luận văn theo đoạn Nên viết thêm tồn lưu tối thiểu tế bào ác Học viên viết thêm tồn lưu tối thiểu tính MRD luận văn này, thông phần đặt vấn đề tin MRD sơ sài Mục tiêu nghiên cứu Chỉnh thành “mơ tả” cho mục tiêu (tế bào dịng chảy hệ mới) Học viên chỉnh mục tiêu thành “Mô tả đặc điểm dấu ấn miễn dịch tương bào người bệnh chẩn đoán đa u tuỷ xương phương pháp đếm tế bào dòng chảy hệ mới” Mục tiêu viết cụ thể HHTM Học viên viết rõ HHTM thành “Huyết học – Truyền máu” mục tiêu Tổng quan tài liệu Viết thêm rõ kỹ thuật Đối tượng phương pháp nghiên cứu Học viên chỉnh sửa theo góp ý Bỏ từ thừa khơng lặp lặp lại, dấu Học viên chỉnh sửa lại theo góp ý đầu dịng lề cần chỉnh sửa lại Phương pháp thực hiện: viết không đúng, nghiên cứu hồi cứu nên không thực quy trình cho nghiên cứu Học viên viết lại phần phương pháp thực Hạn chế nghiên cứu chuyển sang cuối phần bàn luận Học viên chuyển hạn chế nghiên cứu sang cuối phần bàn luận Đối tượng nghiên cứu người bệnh, bỏ cụm tự “Hồ sơ bệnh án” Học viên bỏ cụm từ “Hồ sơ bệnh án” phần đối tượng nghiên cứu Xác định rõ thiết kế nghiên cứu: nghiên cứu cắt ngang, hồi cứu” Học viên bổ xung từ “hồi cứu” vào thiết kế nghiên cứu Sửa mục 2.8 thành : “Quy trình kỹ thuật thực hiện” Phương pháp đo: cần nêu rõ đời/seri máy, số màu… Học viên sửa mục 2.8 theo góp ý H P Cần rõ phần ảnh, màu hình 2.1 (trang 23) Kết nghiên cứu Cần fomat lại, ghép biểu đồ cho phù hợp, thuật ngữ chuyên ngành cần sử dụng cho U Các hình chương kết quả: sử dụng kết nhóm nghiên cứu, khơng sử dụng viện, bệnh nhân mã hóa H Học viên chỉnh sửa theo góp ý Học viên sửa lại theo góp ý Học viên bỏ phần hình ảnh phần kết Tên biểu đồ viết biểu đồ tương ứng Học viên chỉnh sửa theo góp ý Hình 3.1-3.4 đưa vào mục 2.8.4 phương pháp nghiên cứu Học viên chỉnh sửa theo góp ý Mức ý nghĩa thống kê “p” Học viên sửa lại mức ý nghĩa thống kê thành “p” bảng kết Bàn luận Cần tăng số lượng bàn luận, lặp lại nhận Học viên viết tăng phần bàn luận lên 14 xét kết (tăng từ 14 trang) trang Mục 4.2.3 “người bệnh đa u tủy xương” Học viên viết lại cho thành “ người bệnh đa u tủy xương” Kết luận Không trình bày tiêu chuẩn phân nhóm Học viên bỏ tiêu chuẩn phân nhóm nguy kết luận 10 nguy kết luận Khuyến nghị Viết lại cho phù hợp với nghiên cứu đề tài không kiến nghị chung chung Học viên viết lại phần khuyến nghị Kỹ thuật đếm tế bào dòng chảy nên sử dụng thường quy để chẩn đoán, đưa chiến lược theo dõi điều trị với bệnh nhân đa u tủy xương 11 Tài liệu tham khảo Viết theo hướng dẫn 12 Học viên chỉnh lại tài liệu tham khảo Công cụ nghiên cứu … 13 H P Các góp ý khác Bổ sung phụ lục cho đầy đủ nội dung nghiên cứu Học viên bổ sung thêm phụ lục Lưu ý: - Có dịng kẻ góp ý phần giải trình thẳng hàng với góp ý - Học viên giải trình theo thứ tự phần (nếu có) đề cương/luận văn, khơng nêu tên chức danh người góp ý Ngày 21 tháng năm 2023 Học viên U H Xác nhận GVHD (ký ghi rõ họ tên) PGS.TS Lê Xuân Hải (ký ghi rõ họ tên) Lê Thị Hồng Nhung Xác nhận GVHD (nếu có) Xác nhận GVHT (nếu có) (ký ghi rõ họ tên) (ký ghi rõ họ tên) Ths Nguyễn Thị Thu Hà Ý kiến thành viên hội đồng/chủ tịch hội đồng (Nếu phân công): Ngày 01 tháng năm 2023 Đại diện hội đồng (ký ghi rõ họ tên)