Đặc điểm xét nghiệm máu và tủy xương người bệnh lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính tại viện huyết học – truyền máu trung ương năm 2020 2021

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG TRƯƠNG THỊ HIÊN H P ĐẶC ĐIỂM XÉT NGHIỆM MÁU VÀ TỦY XƯƠNG NGƯỜI BỆNH LƠXÊMI KINH DÒNG BẠCH CẦU HẠT GIAI ĐOẠN MẠN TÍNH TẠI VIỆN HUYẾT HỌC – TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG NĂM 2020 - 2021 U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 HÀ NỘI - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG TRƯƠNG THỊ HIÊN H P ĐẶC ĐIỂM XÉT NGHIỆM MÁU VÀ TỦY XƯƠNG NGƯỜI BỆNH LƠXÊMI KINH DỊNG BẠCH CẦU HẠT GIAI ĐOẠN MẠN TÍNH TẠI VIỆN HUYẾT HỌC – TRUYỀN MÁU TRUNG ƯƠNG NĂM 2020 - 2021 U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN NGỌC DŨNG HÀ NỘI - 2022 i LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập thực luận văn này, xin trân trọng cảm ơn Ban giám hiệu, Phòng đào tạo sau đại học trường Đại học Y tế Công cộng, Viện Huyết học – Truyền máu Trung ương tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu Xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Ngọc Dũng - Trưởng khoa Tế bào- tổ chức học Viện Huyết học – Truyền máu Trung ương Là người Thầy ln tận tình bảo, hướng dẫn chia sẻ cho kiến thức phương pháp nghiên cứu khoa học quý báu suốt trình tơi cịn sinh viên đại học ngày trở thành tân Thạc sĩ thời gian tới H P Xin trân trọng cảm ơn Thầy Ths Lê Tự Hoàng – Khoa Khoa học Trường Đại học Y tế Công cộng Người giúp nhiều phương pháp nghiên cứu khoa học phân tích số liệu, định hướng giúp tơi có bước đắn nhà nghiên cứu Xin chân thành cảm ơn thầy cô, anh chị đồng nghiệp khoa Tế bào- Tổ U chức học, Viện Huyết học- Truyền máu Trung ương trang bị cho tơi kiến thức, hành trang, nhiệt tình giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Xin gửi lời cảm ơn đến người bạn học lớp Thạc sĩ KTXNK1-1B, người H tiếp thêm cho động lực, niềm vui giúp tơi hồn thành tốt đề tài Và thiếu, vơ biết ơn gia đình người thân u ln quan tâm, động viên, khích lệ tơi vượt qua khó khăn q trình học tập Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Trương Thị Hiên ii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT ABL : Abelson (gen ABL) BCR : Breakpoit Cluster Region (gen BCR) BCR – ABL1 : Breakpoit Cluster Region –Abelson1 (gen BCR-ABL1) BN : Người bệnh DNA : Deoxy Ribonucleic Axit FAB : French - American – British g/l : Gam/lít G/l : Giga/lít (đơn vị 109/lít) % : Tỷ lệ phần trăm ISO 15189:2012 H P : International Organization for Standarlization 15189:2012 (tiêu chuẩn quốc tế 15189:2012) L/L : Lít/lít LXM : Lơxêmi LXMKDBCH : Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt M/E : Myeloid/Erythroid ratio (tỷ lệ dòng bạch cầu hạt/dòng hồng U cầu) MTC : Mẫu tiểu cầu NC : Nghiên cứu NST p210, p190, p230 Ph PLT RBC RNA RT-PCR H : Nhiễm sắc thể : Protein 210, Protein 190, Protein 230 : Philadelphia : Platelet (số lượng tiểu cầu) : Red blood cell (số lượng hồng cầu) : Ribonucleic axit : Reverse transcription polymerase chain reaction (Phản ứng tổng hợp chuỗi polymerase chép ngược) TKI : Tyrosine Kinase Inhibitors (thuốc ức chế Tyrosine Kinase) T/l : Tetra/lít (đơn vị 1012/lít) WBC : White blood cell (số lượng bạch cầu) WHO : World Health Organization (tổ chức y tế giới) iii MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU .3 Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt 1.1.1 Khái niệm bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt 1.1.2 Vài nét lịch sử bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt .4 1.1.3 Dịch tễ bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt .5 1.1.4 Bệnh nguyên bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt 1.1.5 Cơ chế bệnh sinh bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt .6 H P 1.1.5.1 Sự hình thành nhiễm sắc thể Philadelphia .6 1.1.5.2 Gen BCR-ABL1 1.1.5.3 Protein p210 1.1.6 Đặc điểm lâm sàng 1.1.7 Biểu cận lâm sàng Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính9 1.1.8 Tiêu chuẩn chẩn đốn Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính 13 1.1.9 Điều trị Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính .14 1.2 Các xét nghiệm máu, tủy xương sử dụng chẩn đoán bệnh Lơxêmi U H kinh dịng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính 15 1.2.1 Tổng phân tích tế bào máu ngoại vi máy đếm tự động .15 1.2.2 Huyết đồ .15 1.2.3 Tế bào học tủy xương 16 1.2.4 Xét nghiệm công thức NST 16 1.2.5 Kỹ thuật sinh học phân tử RT-PCR .17 1.3 Các nghiên cứu giới Việt nam bệnh LXMKDBCH 17 1.3.1 Nghiên cứu đặc điểm tế bào máu ngoại vi bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt 17 1.3.2 Nghiên cứu đặc điểm xét nghiệm tủy xương di truyền tế bào bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt 18 1.4 Đặc điểm địa điểm nghiên cứu 20 iv Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .21 2.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu .22 2.3 Thiết kế nghiên cứu 22 2.4 Cỡ mẫu .23 2.5 Phương pháp chọn mẫu .23 2.6 Phương pháp thu thập số liệu 23 2.7 Các biến số nghiên cứu .24 2.8 Các quy trình kỹ thuật, kiểm soát chất lượng, tiêu chuẩn đánh giá sử dụng nghiên cứu 26 2.8.1 H P Xét nghiệm tổng phân tích tế bào máu ngoại vi máy đếm tế bào tự động 26 2.8.2 Xét nghiệm Huyết đồ 26 2.8.3 Xét nghiệm tế bào học tủy xương 27 2.8.4 Xét nghiệm công thức nhiễm sắc thể tủy xương 27 2.9 Phương pháp phân tích số liệu 28 2.10 Vấn đề đạo đức nghiên cứu 28 U Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 29 H 3.1 Đặc điểm tuổi giới tính người bệnh 29 3.2 Đặc điểm xét nghiệm tế bào máu ngoại vi 29 3.2.1 Đặc điểm dòng hồng cầu 29 3.2.2 Đặc điểm dòng bạch cầu 32 3.2.3 Đặc điểm số lượng tiểu cầu 35 3.2.4 Mối tương quan số số tế bào máu 36 3.3 Đặc điểm xét nghiệm tế bào tủy xương di truyền tế bào 38 3.3.1 Đặc điểm tế bào tủy xương .38 3.3.2 Đặc điểm di truyền tế bào .41 3.3.3 So sánh số số tế bào máu nhóm người bệnh Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt có NST Ph .42 Chương 4: BÀN LUẬN 44 v 4.1 Đặc điểm tuổi giới tính người bệnh .44 4.1.1 Tuổi người bệnh .44 4.1.2 Giới tính người bệnh .44 4.2 Đặc điểm xét nghiệm tế bào máu ngoại vi 45 4.2.1 Đặc điểm dòng hồng cầu 45 4.2.2 Đặc điểm dòng bạch cầu 46 4.2.3 Đặc điểm dòng tiểu cầu 48 4.2.4 Mối tương quan số số tế bào máu 49 4.3 Đặc điểm xét nghiệm tế bào tủy xương di truyền tế bào 49 4.3.1 Đặc điểm tế bào tủy xương 49 4.3.2 Đặc điểm di truyền tế bào 51 4.3.3 So sánh số số tế bào máu nhóm người bệnh Lơxêmi kinh dịng bạch H P cầu hạt có NST Ph .53 4.4 Hạn chế nghiên cứu, sai số biện pháp khắc phục sai số .54 KẾT LUẬN 55 U KHUYẾN NGHỊ 56 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤ LỤC I: PHIẾU THU THẬP SỐ LIỆU NGHIÊN CỨU .66 H PHỤ LỤC II: CÁC BIẾN SỐ NGHIÊN CỨU .69 PHỤ LỤC III: KHOẢNG THAM CHIẾU TẾ BÀO MÁU NGOẠI VI VÀ 75 TẾ BÀO HỌC TỦY XƯƠNG 75 vi DANH MỤC HÌNH ẢNH, SƠ ĐỒ Hình 1 Hình ảnh chuyển đoạn NST 22 tạo NST Philadelphia Hình Hình ảnh gen ABL, BCR bình thường gen kết hợp BCR-ABL1 Hình Hình ảnh tế bào máu ngoại vi bệnh LXMKDBCH tiêu nhuộm Giemsa với độ phóng đại 500 lần .11 Hình Hình ảnh tế bào tủy xương bệnh LXMKDBCH tiêu nhuộm Giemsa với độ phóng đại 500 lần (hình A) 1000 lần (hình B,C) (A) Tủy giàu tế bào, tỷ lệ M/E > 10/1; (B) Dòng bạch cầu hạt tăng sinh đủ lứa tuổi; (C) Mẫu tiểu cầu kích thước thường nhỏ, nhân giảm múi .12 Hình Hình ảnh cơng thức nhiễm sắc thể có đột biến chuyển đoạn tạo nhiễm sắc H P thể Philadelphia (mũi tên đỏ) bệnh LXMKDBCH 13 Sơ đồ Sơ đồ nghiên cứu 22 H U vii DANH MỤC BẢNG Bảng Phân nhóm số biến số nghiên cứu 25 Bảng Phân bố người bệnh theo nhóm tuổi (n=264) 29 Bảng Đặc điểm số lượng hồng cầu lượng huyết sắc tố (n=264) 29 Bảng 3 So sánh lượng huyết sắc tố theo giới tính (n=264) 30 Bảng Phân bố người bệnh theo số số hồng cầu (n=264) .31 Bảng Đặc điểm số lượng công thức bạch cầu máu ngoại vi (n=264) 32 Bảng So sánh số lượng bạch cầu theo giới tính (n=264) 33 Bảng Phân bố người bệnh theo tỷ lệ tế bào non máu ngoại vi (n=264) 34 Bảng Phân bố người bệnh theo số lượng bạch cầu ưa axit, ưa bazơ (n=264) 34 H P Bảng Phân bố người bệnh theo số lượng tiểu cầu (n=264) .35 Bảng 10 So sánh số lượng tiểu cầu theo giới tính (n=264) 35 Bảng 11 Phân bố người bệnh theo số lượng tế bào tủy xương (n=264) 38 Bảng 12 Đặc điểm cơng thức dịng bạch cầu tủy xương (n=264) .38 Bảng 13 Phân bố người bệnh theo tỷ lệ tế bào non tủy xương (n=264) 39 U Bảng 14 Phân bố người bệnh theo thành phần tế bào dòng hồng cầu (n=264) 39 Bảng 15 Phân bố người bệnh theo tỷ lệ hồng cầu lưới (n=264) 39 Bảng 16 Phân bố người bệnh theo mật độ mẫu tiểu cầu (n=264) 40 H Bảng 17 Đặc điểm hình thái dịng mẫu tiểu cầu (n=264) 40 Bảng 18 Kết người bệnh có NST Ph (n=236) .41 Bảng 19 Tỷ lệ người bệnh có biến thể Ph (n=225) 41 Bảng 20 Tỷ lệ người bệnh có bất thường NST khác Ph (n=225) 42 Bảng 21 So sánh số số tế bào máu nhóm người bệnh Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt có biến thể Ph khơng có biến thể Ph (n=225) 42 Bảng 22 So sánh số số tế bào máu nhóm người bệnh Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt có thêm bất thường NST ngồi Ph khơng có thêm bất thường NST ngồi Ph (n=225) .43 viii DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ Phân bố người bệnh theo mức độ giảm lượng huyết sắc tố (n=264) 30 Biểu đồ Phân bố người bệnh theo số lượng bạch cầu (n=264) 33 Biểu đồ 3 Mối tương quan số lượng bạch cầu lượng huyết sắc tố (n=264) 36 Biểu đồ Mối tương quan số lượng tiểu cầu lượng huyết sắc tố (n=264) 37 Biểu đồ Mối tương quan số lượng bạch cầu số lượng tiểu cầu (n=264) 37 H P H U 75 PHỤ LỤC III KHOẢNG THAM CHIẾU TẾ BÀO MÁU NGOẠI VI VÀ TẾ BÀO HỌC TỦY XƯƠNG Khoảng tham chiếu tế bào máu ngại vi người ≥ 16 tuổi (75) Tên số Khoảng tham chiếu Tên số Số lượng hồng Nam: 4,2 – 5,4 T/l Bạch cầu (RBC) đoạn Nữ : 4,0– 4,9 T/l Khoảng tham chiếu cầu 55 đến 70% (2.8 - 5.5 G/L) trung tính Lượng huyết Nam: 130 – 160 sắc tố (HGB) g/l Bạch cầu ưa - 8% (0 – 0.5 G/l) H P axit Nữ: 125 – 142 g/l Tỷ lệ hồng cầu 0,5 – 1,5% Bạch cầu ưa – 1,2 % (0 – 0.12 G/l) lưới bazơ Bạch U cầu 1-4 % (0,05 – 0,3 G/l) monocyte Số lượng tiểu 150-450 G/l cầu (PLT) H Số lượng bạch – 10 G/l cầu (WBC) Bạch cầu 25 đến 40% (1.2 đến 3.0 Lymphocyte G/L) Bình thường máu khơng có tế bào non, tế bào trung gian dòng bạch cầu hồng cầu có nhân 76 Khoảng tham chiếu tế bào học tủy xương người ≥ 16 tuổi (86) Khoảng Tên số Khoảng tham Tên số chiếu Số lượng tế bào tủy tham chiếu 30 – 100 Bạch cầu ưa axit (%) 1-4 0,5 – 1,5 Bạch cầu ưa bazơ (%) 0-1 Bạch cầu lymphocyte (%) 8-25 0-2 xương (G/l) Tỷ lệ hồng cầu lưới (%) Tế bào blast (%) Nguyên tủy bào (%) 0-2 Bạch cầu monocyte (%) Tiền tủy bào (%) 0-3 Tỷ lệ M/E H P 3:1 đến 4:1 Tủy bào (%) 5-10 Nguyên tiền hồng cầu (%) Hậu tủy bào (%) 5-12 Nguyên hồng cầu ưa bazơ (%) 1-4 Bạch cầu đũa (%) 5-12 Nguyên hồng cầu đa sắc (%) 3-10 Bạch cầu đoạn trung 20-40 Nguyên hồng cầu ưa axít (%) 7-15 U tính (%) H 0-0,3 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG Biểu mẫu BIÊN BẢN GIẢI TRÌNH CHỈNH SỬA CÁC GĨP Ý ĐỀ CƯƠNG/LUẬN VĂN/LUẬN ÁN/CHUYÊN ĐỀ LUẬN ÁN Họ tên học viên: Trương Thị Hiên Tên đề tài: Một số đặc điểm xét nghiệm máu tủy xương bệnh nhân Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính Viện Huyết học – Truyền máu trung ương năm 2020- 2021 TT Nội dung góp ý Phần giải trình học viên (Liệt kê nội dung góp ý theo thứ tự phần đề cương/luận văn/luận án/chuyên đề) (Nêu rõ chỉnh sửa nào, phần nào, trang Nếu khơng chỉnh sửa,giải thích lý không chỉnh sửa) Định hướng chuyên ngành Phù hợp luận văn/luận án Tên đề tài luận văn/luận án/chun đề H P Tên đề tài khơng nên có từ Bỏ từ “Một số”, thay từ “Bệnh nhân” từ “người “Một số” bệnh” U Tên đề tài: Đặc điểm xét nghiệm máu tủy xương người bệnh Lơxêmi kinh dịng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính Viện Huyết học – Truyền máu trung ương năm 2020- 2021 Tóm tắt Đặt vấn đề H Phù hợp Nêu rõ ý nghĩa, tầm quan Đã viết lại theo góp ý hội đồng (trang 2, mục Đặt trọng nghiên cứu vấn đề) lĩnh vực xét nghiệm Mục tiêu nghiên cứu Tổng quan tài liệu Phù hợp Cần thực tổng quan tài Đã chỉnh sửa lại theo góp ý hội đồng liệu theo mục tiêu nghiên cứu Phần dịch tễ học bệnh Đã chỉnh sửa lại theo góp ý hội đồng (trang 5, mục nên đưa vào mục riêng 1.1.3) Đặc điểm địa bàn nghiên Đã chỉnh sửa lại theo góp ý hội đồng (trang 20, mục cứu: mơ tả phương 1.4) pháp, quy trình xét nghiệm sử dụng Viện nguyên tắc/chỉ định xét nghiệm với bệnh Lơxêmi kinh dòng bạch cầu hạt giai đoạn mạn tính Viện Huyết học – Truyền máu trung ương Khơng đưa trích dẫn TLTK Đã chỉnh sửa lại theo góp ý hội đồng tất tên bảng, biểu Cần để hình ảnh tham khảo (trang 7,8,11,12,13) nguồn tài liệu chân bảng/biểu đồ Đối tượng phương pháp nghiên cứu Sơ đồ nghiên cứu: mô tả Đã vẽ lại sơ đồ nghiên cứu theo góp ý hội đồng cách thức thu thập (trang 22, mục 2.3) liệu bệnh nhân H P Cỡ mẫu sử dụng tỷ lệ p phù Đã tính lại cỡ mẫu theo “xác định trung bình cho hợp với mục tiêu nghiên số lượng huyết sắc tố” (trang 23, mục 2.4) cứu Chọn số số nghiên cứu để tính toàn chọn cỡ mẫu lớn U Biến số: bảng chi tiết đưa Đã chỉnh sửa lại theo góp ý hội đồng (trang 24, mục phụ lục Phần 2.7) luận văn nêu nhóm biến H Hạn chế nghiên cứu cần Đã đưa hạn chế nghiên cứu vào phần bàn luận (trang đưa vào bàn luận 54, mục 4.4) Kết nghiên cứu Phiên giải kết Đã viết lại theo góp ý hội đồng (tồn mục kết bảng, biểu đồ: cân nhắc lựa nghiên cứu, trang 29-43) chọn thông tin quan trọng để phiên giải, không nhắc lại tất kết bảng, biểu đồ Bàn luận Không đưa bảng vào bàn Đã viết lại theo góp ý hội đồng (tồn mục bàn luận luận trang 44-53) 10 Kết luận 11 Khuyến nghị Phù hợp Bám sát kết nghiên cứu Đã viết lại theo góp ý hội đồng (trang 56, mục Nêu khả áp dụng kết Khuyến nghị) nghiên cứu với tuyến 12 Tài liệu tham khảo Cần rà soát đảm bảo Đã rà soát chỉnh sửa tài liệu tham khảo theo quy định quy định 13 Công cụ nghiên cứu Phù hợp 14 Các góp ý khác Khơng Lưu ý: - Có dịng kẻ góp ý phần giải trình thẳng hàng với góp ý - Học viên/NCS giải trình theo thứ tự phần (nếu có) đề cương/luận văn/luận án/chuyên đề, không nêu tên chức danh người góp ý - Đối với giải trình Hội đồng bảo vệ luận án cấp sở cần có thêm xác nhận phản biện chủ tịch hội đồng - Đối với giải trình Hội đồng luận án cấp trường, cần có thêm xác nhận chủ tịch hội đồng Ngày 27 tháng 11 năm 2022 Học viên H P (ký ghi rõ họ tên) U Xác nhận GV hướng dẫn (ký ghi rõ họ tên) H Trương Thị Hiên Xác nhận GV hỗ trợ (nếu có) (ký ghi rõ họ tên) Ths Lê Tự Hoàng TS Nguyễn Ngọc Dũng Ý kiến thành viên HĐ/chủ tịch HĐ (Nếu phân công): ………………………………………………………………………………………… …… ………………………………………………………………………………………… …… Ngày 06 tháng 12 năm 2022 Đại diện hội đồng (ký ghi rõ họ tên) H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U H P H U