Xây dựng giá trị tham chiếu của cystatin c và tỷ số cystatin c creatinin huyết tương cho trẻ em tại bệnh viện nhi trung ương

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO - BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾ CÔNG CỘNG -*** - ĐÀO THỊ LAN DUNG H P XÂY DỰNG GIÁ TRỊ THAM CHIẾU CỦA CYSTATIN C VÀ TỶ SỐ CYSTATIN C/CREATININ HUYẾT TƯƠNG CHO TRẺ EM TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 HÀ NỘI - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO- BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y TẾCÔNG CỘNG -*** ĐÀO THỊ LAN DUNG H P XÂY DỰNG GIÁ TRỊ THAM CHIẾU CỦA CYSTATIN C VÀ TỶ SỐ CYSTATIN C/CREATININ HUYẾT TƯƠNG CHO TRẺ EM TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG U H LUẬN VĂN THẠC SĨ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM Y HỌC MÃ SỐ CHUYÊN NGÀNH: 8720601 HÀ NỘI - 2022 i MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Thiết lập khoảng tham chiếu 1.1.1 Khoảng tham chiếu thuật ngữ liên quan 1.1.2 Phương pháp xây dựng khoảng tham chiếu 1.1.3 Lựa chọn cá thể tham chiếu .8 1.1.4 Các yếu tố trước xét nghiệm xét nghiệm .9 1.1.5 Phân tích giá trị tham chiếu 10 H P 1.2 Creatinin .13 1.2.1 Nguồn gốc creatinin 13 1.2.2 Ý nghĩa lâm sàng creatinin .13 1.3 Cystatin C 16 1.4 Tình hình nghiên cứu giới Việt Nam .20 U CHƯƠNG 25 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tượng nghiên cứu .25 H 2.1.1 Mẫu nghiên cứu .25 2.1.2 Tiêu chuẩn lựa chọn 25 2.1.3 Tiêu chuẩn loại trừ 25 2.2 Phương pháp nghiên cứu 25 2.2.1 Phương pháp Error! Bookmark not defined 2.2.2 Cỡ mẫu nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.2.3 Thời gian địa điểm nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.2.4 Mẫu bệnh phẩm .28 2.2.5 Nguyên lý kỹ thuật 28 2.2.6 Hóa chất thiết bị sử dụng nghiên cứu .29 2.2.7 Sơ đồ nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.2.8.Quy trình nghiên cứu .30 ii 2.3 Xử lý số liệu .31 2.4 Đạo đức nghiên cứu 31 CHƯƠNG 32 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .32 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 32 3.2 Phân bố Cystatin C theo nhóm tuổi 33 3.3 Giới hạn tham chiếu Cystatin C………………………………………… 31 3.4 Mối liên quan Cystatin C creatinin máu .36 3.5 Phân bố tỷ lệ Cystatin C/Creatinin huyết tương theo nhóm tuổi 38 CHƯƠNG 42 H P BÀN LUẬN 42 KẾT LUẬN……………………………………………………………………… 46 TÀI LIỆU THAM KHẢO 47 H U iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CI : Confidence interval - Khoảng tin cậy CLSI : Clinical and Laboratory Standards institute -Viện tiêu chuẩn lâm sàng xét nghiệm CysC/Cr : Cystatin C/Creatinin CysC : Cystatin C eGFR : Estimated GFR - Mức lọc cầu thận ước tính GFR : Glomerular filtration rate - Mức lọc cầu thận IFCC : The International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory H P Medicine – Liên đồn Quốc tế Hóa học Lâm sàng phòng xét nghiệm Y học IQR : Interquatile Range - Khoảng tứ phân vị KTC : Khoảng tham chiếu H U iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Các yếu tố trước xét nghiệm cần xem xét 10 Bảng 3.1 Đặc điểm chung đối tượng nghiên cứu 32 Bảng 3.2 Đặc điểm tuổi đối tượng nghiên cứu 32 Bảng 3.3 Phân bố nồng độ Cystatin C theo nhóm tuổi .33 Bảng 3.4 Phân bố nồng độ Cystatin C theo nhóm tuổi giới 33 Bảng 3.5 Kết đánh giá tính chuẩn Cystatin C nhóm nghiên cứu 34 Bảng 3.6 Khoảng hạn tham chiếu Cystatin C nhóm tuổi 35 Bảng 3.7 Phân bố Tỷ số Cystatin C/ creatinin huyết tương theo nhóm tuổi (kiểm định che-square) 38 H P Bảng 3.8 Phân bố tỷ lệ Cystatin C/creatinin theo nhóm tuổi giới 38 Bảng 3.9 Kết đánh giá tính chuẩn Cystatin C/creatinin nhóm nghiên cứu .39 Bảng 3.10 Khoảng hạn tham chiếu Cystatin C/Creatinin nhóm tuổi .41 DANH MỤC HÌNH H U v DANH MỤC HÌNH, BIỂU ĐỒ Hình 1.1 Quy trình thiết lập khoảng tham chiếu cộng đồng Hình 1.2 Chuyển hóa creatine, creatine phosphate creatinin(19) 13 Hình 1.3 Cấu trúc phân tử cystatin C .17 Hình 3.1 Đồ thị phân bố kết Cystatin C nhóm tuổi 34 Hình 3.2 Đồ thị phân bố nồng độ Cystatin C theo nhóm tuổi (đồ thị box plot) 35 Hình 3.3 Mối liên quan Cystatin C creatinin huyết tương trẻ em 37 Hình 3.4 Đồ thị phân bố kết Cystatin C/creatinin nhóm tuổi 39 Hình 3.5 Đồ thị phân bố tỷ lệ Cystatin C/creatinin theo nhóm tuổi (đồ thị box plot)40 H P H U vi TÓM TẮT NGHIÊN CỨU Cystatin C gần chứng minh điểm huyết nhạy ước tính mức lọc cầu thận so với nồng độ creatinin huyết tương Một số nghiên cứu cho mức cystatin C đánh giá thấp chức thận số bệnh nhi Do , Tỷ số CysC/Cr thích hợp trường hợp Nghiên cứu thực với mục tiêu thiết lập khoảng tham chiếu cho số Cystatin C tỷ số Cystatin C/Creatinin huyết tương trẻ em Bệnh viện Nhi trung ương Nghiên cứu xây dựng khoảng tham chiếu Cystatin C huyết tương tỷ số Cystatin C/Creatinin huyết tương theo hướng dẫn CLSI Số liệu thu thập xử lý excel phần mềm SPSS20 Tổng số 454 trẻ khơng mắc bệnh lý thận, có H P mức nồng độ creatinin huyết tương giới hạn bình thường, đáp ứng đủ tiêu chuẩn ghi danh vào nghiên cứu Đối tượng nghiên cứu chia theo nhóm tuổi 0-4 tháng tuổi, 5-12 tháng tuổivà 12 tháng tuổi Giá trị tham chiếu Cystatin C nhóm tuổi 0-4 tháng, 5-12 tháng 12 tháng 0.749 – 1.989 mg/L, 0.66 – 1.50mg/L 0.634 – 1.174 mg/L Giá trị tham chiếu tỷ lệ Cystatin U C/creatinin nhóm tuổi 0-4 tháng, 5-12 tháng 12 tháng 0.0199 – 0.0655, 0.0221 – 0.0513 0.0089 – 0.0304(mg/µmol) Khoảng tham chiếu Cystatin C huyết tương tỷ số Cystatin C/Creatinin huyết tương nghiên cứu H tương tự kết khoảng tham chiếu tác giả khác công bố Nghiên cứu xây dựng thành công khoảng tham chiếu Cystatin C huyết tương tỷ số Cystatin C/Creatinin huyết tương áp dụng thực hành hóa sinh lâm sàng Bệnh viện Nhi trung ương ĐẶT VẤN ĐỀ Đánh giá mức lọc cầu thận (glomerular filtration rate - GFR) quan trọng cho chẩn đoán bệnh lý thận điều chỉnh liều thuốc liệu pháp điều trị Tính tốn mức lọc cầu thận xác dựa vào độ thải inulin nhiên việc thực tốn thời gian khó thực bệnh nhân Việc định lượng creatinin huyết tương huyết với đặc điểm dễ thực hiện, lựa chọn để ước tính đánh giá chức thận người lớn trẻ em Nồng độ creatinin (Cr) huyết tương bị ảnh hưởng sản xuất creatinin, phụ thuộc vào khối lượng không nhạy trường hợp giảm nhẹ chức thận Thêm nhiều chất nội sinh H P ngoại sinh ảnh hưởng đến phương pháp định lượng creatinin phòng xét nghiệm Ở trẻ em, khối lượng tăng lên đáng kể trẻ tăng trưởng, nồng độ creatinin phải điều chỉnh theo chiều cao, khối lượng giới tính (sau bước vào tuổi dậy thì) để gián tiếp phản ánh chức thận nhóm tuổi trẻ em(1) U Khơng giống creatinin, cystatin C không bị ảnh hưởng khối lượng cơ, giới tính, tuổi chủng tộc Cystatin C (CysC) protein nội sinh có trọng lượng phân tử thấp khoảng13 kDa, tế bào có nhân thể sản xuất với tốc độ H định Cystatin C dễ dàng qua màng lọc cầu thận, dị hố tế bào ống thận khơng tái hấp thu Cystatin C gần chứng minh điểm huyết nhạy ước tính mức lọc cầu thận so với nồng độ creatinin huyết tương(2) Một số nghiên cứu cho mức cystatin C đánh giá thấp chức thận số bệnh nhi Do đó, Tỷ số CysC/Cr thích hợp trường hợp Khoảng tham chiếu sinh học định nghĩa theo tiêu chuẩn quốc gia TCVN ISO15189:2014 khoảng xác định phân bố giá trị lấy từ tổng thể chuẩn sinh học(3) Khoảng tham chiếu nhiều số sinh học thay đổi theo tuổi, giới, chủng tộc phương pháp xét nghiệm, khoảng tham chiếu đặc hiệu quan trọng phân tích diễn giải xét nghiệm cách xác Để xây dựng khoảng tham chiếu cho mộ t xét nghiệm để đánh giá tình trạng bệnh cần thực nhóm đối tượng tham chiếu người khỏe mạnh Tuy nhiên việc thu thập mẫu từ người coi “khỏe mạnh” khó khăn đặc biệt trẻ nhỏ Do vậy, việc xây dựng khoảng tham chiếu cho quần thể trẻ em, lựa chọn trẻ mắc bệnh lý không làm ảnh hưởng đến kết xét nghiệm thực xây dựng khoảng tham chiếu Tại Việt Nam, phòng xét nghiệm sử dụng khoảng tham chiếu từ nhiều nguồn khác không qua xác nhận Khoảng tham chiếu áp dụng cho xét nghiệm cystatin C bệnh viện Nhi Trung Ương tham khảo từ nhà sản xuất hóa chất Vì vậy, việc xây dựng giá trị tham chiếu phù hợp với trẻ em Việt Nam, với phương pháp sử dụng phòng xét nghiệm việc vô cần thiết Do tiến hành nghiên cứu “Xây dựng giá trị H P tham chiếu Cystatin C tỷ số CystatinC/Creatinin huyết tương cho trẻ em Bệnh viện Nhi Trung Ương” H U 57 PHỤ LỤC HÓA CHẤT, THIẾT BỊ SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU - Mẫu nghiên cứu thực máyCobas 6000 bệnh viện nhi trung ương - Trang thiết bị, vật tư khác: + Bộ lấy máu (Bông, băng, cồn 70˚, cồn iot, hộp chất thải y tế sắc nhọn, găng tay y tế, phanh, kẹp, kéo y tế, hộp lạnh bảo quản mẫu) + Ống mẫu chống đông heparin + Tủ lạnh y tế H P + Pipette, ống eppendorf - Hóa chất nghiên cứu: + Bộ thuốc thử hãng Sysmex cho số nghiên cứu U + Chất chuẩn (Calibrator) cho số nghiên cứu + Chất kiểm tra chất lượng ( qc) + Hóa chất, vật tư phục vụ vận hành, bảo trì, bảo dưỡng máy cobas 6000 H 58 H P H U 59 H P H U 60 H P H U 61 H P H U 62 H P H U 63 H P H U 64 H P U H \ 65 H P H U 66 H P H U 67 H P H U 68 H P H U 69 H P H U 70 H P H U 71 H P H U