Đánh giá sự phục hồi miễn dịch tế bào ở trẻ em nhiễm HIV 1 được điều trị thuốc kháng HIV tại bệnh viện nhi trung ương

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN HÀ THỊ PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SỰ PHỤC HỒI MIỄN DỊCH TẾ BÀO Ở TRẺ EM NHIỄM HIV-1 ĐƯỢC ĐIỀU TRỊ THUỐC KHÁNG HIV TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Hà Nội - 2018 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - HÀ THỊ PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SỰ PHỤC HỒI MIỄN DỊCH TẾ BÀO Ở TRẺ EM NHIỄM HIV-1 ĐƯỢC ĐIỀU TRỊ THUỐC KHÁNG HIV TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 8420101.14 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS NGUYỄN THANH BÌNH TS LÊ HỒNG ĐIỆP Hà Nội - 2018 BẢNG CHÚ THÍCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt ADCC Tiếng Anh Antibody Dependent Cell Tiếng Việt Độc tế bào phụ thuộc kháng thể Cytotoxicity AIDS Acquried Immunodeficiency Hội chứng suy giảm miễn dịch Syndrome mắc phải người APC Antigen Presenting Cells Tế bào trình diện kháng nguyên ART Antiretroviral Therapy Liệu pháp kháng virus ARV Antiretroviral Thuốc kháng virus BCTT Bạch cầu trung tính CD Cluster of Defferentiation Cụm biệt hoá CDC Centers for Disease Control Cục phòng chống bệnh tật Hoa and Prevention Kỳ Cs Cộng FCM Flowcytometry Đếm tế bào dòng chảy HIV Human Immunodeficiency Virus gây suy giảm miễn dịch Virus người IL Interleukin KDa Kilo Dalton KST LAV MAIT Ký sinh trùng Lymphodenopathy Virus liên quan với bệnh lý Associated Virus lympho Mucosal – associated Tế bào T niêm mạc invariant T cells MHC Major Histocompatibility Phức hợp hòa hợp tổ chức chủ Complex yếu NK Natural Killer cell Tế bào diệt tự nhiên ABC Abacavir 3TC Lamivudine TDF Tenofovir Disoproxil Fumarate Thuốc kháng HIV, nhóm ức chế EFV Efavirenz enzyme phiên mã ngược FTC Emtricitabine NVP Nevirapine LPV/r Lopinavir/ritonavir Thuốc kháng HIV, nhóm ức chế protease Non -nucleoside reverse Thuốc ức chế enzyme phiên mã transcriptase inhibitor ngược non –nucleoside Nucleoside reverse Thuốc ức chế enzyme phiên mã transcriptase inhibitor ngược nucleoside SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn Th1 T-helper Tế bào T hỗ trợ Th2 T-helper Tế bào T hỗ trợ Th17 T-helper 17 Tế bào T hỗ trợ 17 Treg T-regulator cells Tế bào T điều hòa Tfh T follicular helper Tế bào T hỗ trợ nang TNF Tumor necrosis factor Yếu tố hoại tử u UNAIDS United Nations Programme Chương trình Phối hợp Liên on HIV/AIDS Hợp Quốc HIV/AIDS NNRTI NRTI LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn tơi nhận nhiều giúp đỡ thầy cô, bạn bè đồng nghiệp quan Với lòng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn: - Đảng ủy, Ban giám hiệu, Phòng sau đại học, Bộ mơn Hóa sinh Sinh học phân tử Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên - ĐHQG Hà Nội - Ban Giám đốc Bệnh viện Nhi Trung Ương - Các cán bộ, nhân viên khoa Huyết học - Bệnh viện Nhi Trung Ương - Phòng khám ngoại trú, khoa Truyền nhiễm, Bệnh viện Nhi Trung Ương Đã tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập nghiên cứu Tơi xin bày tỏ lòng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Thanh Bình - giảng viên Bộ môn Miễn Dịch - Sinh Lý Bệnh trường Đại Học Y Hà Nội, Phó Trưởng Khoa Huyết Học Bệnh viện Nhi Trung Ương, người thầy hết lòng hướng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành nghiên cứu Tôi xin trân thành cảm ơn TS Lê Hồng Điệp - giảng viên mơn Hóa sinh Sinh học phân tử, Trường Đại Học Khoa Học Tự Nhiên - Đại Học Quốc Gia Hà Nội đóng góp ý kiến bổ ích giúp đỡ tơi q trình học tập hồn thành luận văn Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lòng biết ơn tới bố mẹ, anh chị, chồng tất người thân gia đình, bạn bè đồng nghiệp động viên, chia sẻ khó khăn với tơi suốt trình học tập nghiên cứu Xin trân trọng cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 08 năm 2018 Hà Thị Phương LỜI CAM ĐOAN Tôi Hà Thị Phương, học viên cao học khóa 24, Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên - Đại Học Quốc Gia Hà Nội, chuyên ngành Sinh học thực nghiệm, xin cam đoan: Đây Luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn TS Nguyễn Thanh Bình Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm cam kết Hà Nội, ngày 20 tháng 08 năm 2018 Người viết cam đoan Hà Thị Phương MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1.1 Lịch sử phát tình hình nhiễm HIV .3 1.1.1 Sự phát tình hình nhiễm HIV giới .3 1.1.2 Tình hình nhiễm HIV Việt Nam 1.2 Đặc điểm HIV 1.2.1 Hình dạng cấu trúc 1.2.2 Sự xâm nhập nhân lên virus tế bào vật chủ 1.3 Những tế bào tham gia đáp ứng miễn dịch HIV 12 1.3.1 Tế bào lympho T 12 1.3.2 Đáp ứng hệ miễn dịch sau nhiễm HIV 21 1.4 Thuốc kháng HIV 24 1.5 Nghiên cứu phục hồi miễn dịch sau điều trị ARV 26 1.5.1 Tình hình nghiên cứu giới 26 1.5.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam .27 1.6 Phương pháp thăm dò tế bào miễn dịch Flow cytometry 28 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 Đối tượng nghiên cứu .29 2.1.1 Tiêu chuẩn lựa chọn 29 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 29 2.1.3 Cỡ mẫu nghiên cứu .29 2.2 Địa điểm nghiên cứu .29 2.3 Thời gian nghiên cứu 30 2.4 Phương pháp nghiên cứu 30 2.4.1 Thiết kế nghiên cứu 30 2.4.2 Các số biến số nghiên cứu 30 2.4.3 Quy trình thu thập xử lý mẫu bệnh phẩm 30 2.5 Phân tích số liệu 35 2.6 Đạo đức nghiên cứu 35 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 37 3.1 Phân bố tuổi, giới đối tượng nghiên cứu 37 3.2 Sự thay đổi tế bào miễn dịch trẻ em khỏe mạnh theo lứa tuổi 39 3.3 Sự thay đổi miễn dịch tế bào trẻ HIV theo thời gian điều trị 40 3.3.1 Sự thay đổi TCD4 theo thời gian điều trị .40 3.3.2 Sự thay đổi số lượng tế bào Th1 theo thời gian điều trị .44 3.3.3 Sự thay đổi tế bào Th2 theo thời gian điều trị 45 3.3.4 Sự thay đổi tế bào Th17 theo thời gian điều trị 47 3.3.5 Sự thay đổi tế bào Treg theo thời gian điều trị .49 3.4 Sự thay đổi tỉ lệ tế bào nhóm TCD4 theo thời gian điều trị 51 3.5 Sự thay đổi tế bào TCD8 tỉ lệ TCD8 hoạt hoá theo thời gian điều trị .53 3.6 Sự thay đổi tế bào MAIT tỉ lệ tế bào MAIT hoạt hoá theo thời gian điều trị 55 KẾT LUẬN .59 KIẾN NGHỊ 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Phân bổ tuổi giới đối tượng nghiên cứu .37 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc HIV Hình 1.2 Vòng đời virus HIV Hình 1.3 Diễn biến tự nhiên sau nhiễm virus HIV 11 Hình 1.4 Sơ đồ biệt hố dòng lympho .13 Hình 1.5 Sự biệt hố nhóm TCD4 15 Hình 1.6 Sự hoạt hoá tế bào MAIT 20 Hình 1.7 Cơ chế phá huỷ tế bào TCD4 nhiễm HIV .22 Hình 1.8 Biến đổi TCD4 TCD8 nhiễm HIV .23 Hình 1.9 Sơ đồ tác động thuốc kháng HIV .24 Hình 3.1 Sự thay đổi số lượng tế bào T nhóm trẻ bình thường .39 Hình 3.2 Sự thay đổi số lượng TCD4 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 40 Hình 3.3 Sự thay đổi tỉ lệ TCD4 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 43 Hình 3.4 Sự thay đổi số lượng Th1 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 44 Hình 3.5 Sự thay đổi số lượng Th2 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 45 Hình 3.6 Sự thay đổi số lượng Th17 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV .47 Hình 3.7 Sự thay đổi số lượng Treg theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 49 Hình 3.8 Sự thay đổi tỉ lệ tế bào nhóm TCD4 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 51 Hình 3.9 Sự thay đổi số lượng TCD8 theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 53 Hình 3.10 Sự thay đổi tỉ lệ TCD8 hoạt hoá theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 53 Hình 3.11 Sự thay đổi tế bào MAIT theo thời gian điều trị thuốc kháng HIV 56 Mặc dù nghiên cứu nghiên cứu Nguyễn Thị Dun số lượng MAIT tăng khơng có ý nghĩa thống kê theo thời gian điều trị số lượng tế bào MAIT trẻ HIV trước điều trị trẻ khỏe mạnh không chênh lệch nhiều Tuy nhiên kết cho thấy trẻ em nhiễm HIV có suy giảm tế bào MAIT lại có phục hồi tốt người lớn Do việc phát điều trị ARV sớm cho trẻ nhiễm HIV quan trọng, làm giảm đáng kể mức độ suy giảm miễn dịch trẻ, ngăn ngừa nhiễm trùng hội Sự giảm tế bào MAIT liên quan đến việc khơng thể sửa chữa hoàn toàn khiếm khuyết chuyển vị vi khuẩn, tình trạng viêm mơ tế bào diễn ảnh hưởng HIV, thất bại việc biệt hoá từ tế bào MAIT tiền thân, thiếu tế bào non từ tuyến ức, thiếu chất thiết yếu cho trình tăng sinh mở rộng quần thể tế bào MAIT Các nghiên cứu gần cho thấy tế bào MAIT dễ bị suy giảm hậu đồng nhiễm HIV/viêm gan C hay HIV/lao [54] Cho đến nay, chế tế bào MAIT HIV không phục hồi tế bào MAIT sau điều trị thuốc kháng HIV chưa hoàn toàn hiểu rõ Trong tương lai, cần có nghiên cứu sâu vấn đề Sự tế bào MAIT nhiễm HIV làm tăng nguy nhiễm vi khuẩn lao Nguy nhiễm lao tăng gấp đôi sau năm nhiễm HIV, số lượng TCD4 ổn định [21] Tổn thất tế bào MAIT ảnh hưởng đến miễn dịch niêm mạc, tăng tính nhạy cảm với nhiễm trùng hội trình nhiễm HIV [54] 58 KẾT LUẬN Đặc điểm miễn dịch tế bào bệnh nhi HIV chưa điều trị thuốc kháng HIV - Số lượng tế bào TCD4 nhóm TCD4 với tế bào MAIT bệnh nhi nhiễm HIV trước điều trị thấp so với trẻ khoẻ mạnh - Số lượng tế bào TCD8, tỉ lệ tế bào TCD8 MAIT hoạt hóa bệnh nhi nhiễm HIV trước điều trị cao so với trẻ khoẻ mạnh Sự phục hồi miễn dịch tế bào bệnh nhi HIV điều trị thuốc kháng HIV - Số lượng tế bào TCD4 tế bào nhóm TCD4 Th1, Th2 bệnh nhi nhiễm HIV phục hồi sau 24 tháng điều trị với thuốc ARV trì ổn định đến 60 tháng Sau tế bào TCD4 Th2 giảm so với trước điều trị so với trẻ bình thường - Số lượng tế bào Th17, tế bào Treg có xu hướng tăng nhẹ chưa hồi phục hoàn toàn sau 60 tháng điều trị thuốc ARV Thành phần tế bào nhóm TCD4 khơng thay đổi theo thời gian điều trị - Số lượng tế bào TCD8, tỷ lệ % TCD8 hoạt hóa giảm dần phục hồi trẻ bình thường sau 60 tháng điều trị với thuốc ARV - Số lượng tế bào MAIT tăng nhẹ tỷ lệ % MAIT hoạt hóa có xu hướng giảm theo thời gian điều trị khơng có ý nghĩa thống kê 59 KIẾN NGHỊ Qua thời gian nghiên cứu dựa kết thu được, chúng tơi có số kiến nghị sau:  Cần có thêm nghiên cứu sâu tế bào T hiệu ứng, đại thực bào, mối quan hệ loại tế bào nhóm TCD4 HIV Th1 Th2 hay Th17 Treg để xác định rõ vai trò loại tế bào đáp ứng chúng, từ phát triển phương pháp điều trị tối ưu  Cần nghiên cứu toàn diện hơn, bao gồm đánh giá tải lượng virus xem xét mối liên quan với triệu chứng lâm sàng, phục hồi miễn dịch để xác định hiệu điều trị thuốc kháng HIV tỉ lệ kháng thuốc  Cần phát điều trị sớm cho trẻ em nhiễm HIV, số loại tế bào miễn dịch trẻ em có phục hồi tốt người lớn 60 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bộ y tế (2017), Báo cáo cơng tác phòng, chống HIV/AIDS tháng đầu năm 2017 nhiệm vụ trọng tâm tháng cuối năm 2017 Bộ Y tế (2015), Quyết định 3047/2015/QĐ-BYT việc ban hành "Hướng dẫn quản lý, điều trị chăm sóc HIV/AIDS" Bộ y tế (2015), Số liệu HIV/AIDS tử vong đến hết năm 2015 Nguyễn Trần Chính (2008), Hiệu điều trị phác đồ ARV bậc Bệnh viện Nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh, Luận văn thạc sĩ y học, Trường Đại học Y dược thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Thị Duyên (2017), Đánh giá phục hồi miễn dịch tế bào trẻ em nhiễm HIV1 điều trị thuốc kháng HIV bệnh viện Nhi Trung Ương, Luận văn thạc sỹ y học, Trường Đại học Y Hà Nội Phan Bích Liên (2005), Nghiên cứu số lượng lympho T: CD4, CD8, CD3 người bình thường biến đổi chúng bệnh nhân nhiễm HIV AIDS, Luận án tiến sĩ Y học, Học viện Quân Y Đỗ Thị Nhàn (2014), Đáp ứng lâm sàng miễn dịch bệnh nhân người lớn điều trị ARV giai đoạn 2005-2009 Việt Nam, Tài liệu hội nghị khoa học bệnh truyền nhiễm HIV-AIDS toàn quốc năm 2014 Khổng Minh Quang (2011), Ðánh giá hiệu điều trị bệnh nhân HIV - AIDS phòng khám ngoại trú Bệnh viện Nhiệt đới Trung Ương, Luận văn thạc sĩ, Trường Đại học Y Hà Nội Trần Văn Sơn, Nguyễn Văn Kính (2010), Đánh giá thực trạng sử dụng thuốc kháng virus ARV Việt Nam, Các cơng trình nghiên cứu khoa học HIV-AIDS giai đoạn 2006-2010, Báo cáo hội nghi khoa học Quốc Gia ARV Hà Nội, ngày 12/12/2010, 649-653 61 10 Nguyễn Hữu Trí (2007), Hiệu dung nạp phác đồ Stavudine, Lamivudine Nepirapine bệnh nhân điều trị HIV-AIDS Bệnh viện Nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh, Luận văn thạc sĩ y học, Trường Đại học Y dược Thành Phố Hồ Chí Minh Tiếng Anh 11 Abbas AK, Lichtman AH, Pilla S (2015), Basic Immunology - Functions and Disorders of the Immune System, Elsevier, Hà Lan 12 AIDS.gov (2016), A timeline of HIV/AIDS 13 Al-Harthi L, MaWhinney S, Connick E, Schooley RT, Forster JE, Benson C, Thompson M, Judson F, Palella F, Landay A (2007), "Immunophenotypic alterations in acute and early HIV infection", Clinical Immunology, 125(3), 299-308 14 Ananworanich J, Apornpong T, Kosalaraksa P (2010), "Characteristics of lymphocyte subsets in HIV-infected, long-term nonprogressor, and healthy Asian children through 12 years of age", Journal of Allergy and Clinical Immunology, 126(6), 12941301 15 Apostolova N, Blas-García A, Esplugues JV (2011), “Mitochondrial interference by anti-HIV drugs: mechanisms beyond Pol-γ inhibition”, Trends pharmacological sciences, 32(12), 715-725 16 Asfaw A, Ali D, Eticha T, Alemayehu A, Alemayehu M, Kindeya F (2015), “CD4 Cell Count Trends after Commencement of Antiretroviral Therapy among HIV-Infected Patients in Tigray, Northern Ethiopia: A Retrospective Cross-Sectional Study”, PLoS One, 10(3), e0122583 17 Benito JM, López M, Soriano V (2004), "The Role of CD8+ Tcell responses in HIV infection", AIDS Reviews, 6(2), 79-88 18 Bi X, Ishizaki A et al (2016), "Impact of HIV Infection and Anti-Retroviral Therapy on the Immune Profile of and Microbial Translocation in HIV-Infected Children in Vietnam", International Journal of Molecular Sciences, 17(8), 1245 19 Broere F, Apasov SG, Sitkovsky MV, Eden W (2011), "T cell subsets and T cellmediated immunity", Principles of Immunopharmacology, 15-27 62 20 Corbeau P, Reynes J (2011), “Immune reconstitution under antiretroviral therapy: the new challenge in HIV-1infection”, Blood, 117(21), 5582-5590 21 Cosgrove C, Ussher JE, Klenerman P (2013), "Early and nonreversible decrease of CD161++/MAIT cells in HIV infection", Blood, 121, 951-961 22 Desmonde S, Dicko F, Koueta F, Eboua T, Balestre E, Amani Bosse C, Aka EA; Evi KL, Folquet AM, Kouakou K, Koumakpai S, Renner L, Sy HS, Valériane L, (2014), "Association between age at antiretroviral therapy initiation and 24-month immune response in West-African HIV-infected children", AIDS, 28(11), 1645-1655 23 Eberhard JM, Hartjen P, Kummer P, Schmidt RE, Bockhorn M, Lehmann C, Balagopal A, Hauber J, Lunzen J, Wiesch JS (2014), "CD161+ MAIT cells are severely reduced in peripheral blood and lymph nodes of HIV-infected individuals independently of disease progression", PLoS One, 9(11), e111323 24 Falivene J, Ghiglione Y, Laufer N, Socias ME, Holgado MP, Ruiz MJ, Maeto C, Figueroa MI, Giavedoni LD, Cahn P, Salomon H, Sued O, Turk G, Gherardi MM (2015), “Th17 and Th17/Treg ratio at early HIV infection associate with protective HIV-specific CD8+ T-cell responses and disease progression”, Scientific reports, 5(11511), 1-14 25 Fevrier M, Dorgham K, Rebollo A (2011), "CD4+ T cell depletion in human immunodeficiency virus (HIV) infection: role of apoptosis", Viruses, 3(5), 586-612 26 Gao Y, Rae W, Ramakrishnan KA, Barcenas-Morales G, Döffinger R, Eren E, Faust SN, Ottensmeier CH, Williams AP (2016), "Mucosal-Associated Invariant T (MAIT) Cells Are Impaired in Th17 Associated Primary and Secondary Immunodeficiencies", PLoS One, 11(5), e0155059 27 Goicoechea M, Smith DM, Liu L, May S, Tenorio AR, Ignacio CC, Landay A, Haubrich R (2006), "Determinants of CD4+T Cell Recovery during Suppressive Antiretroviral Therapy: Association of Immune Activation, T Cell Maturation Markers, and Cellular HIV-1 DNA", The Journal of Infectious Diseases, 194(1), 2937 28 Golubovskaya V, Wu L (2016), "Different Subsets of T Cells, Memory, Effector Functions, and CAR-T Immunotherapy", Cancers (Basel), 8(3), 36 63 29 Gonzalez SM, Taborda NA, and Rugeles MT (2017), " Role of Different Subpopulations of CD8+ T Cells during HIV Exposure and Infection", Frontiers in Immunology, 8, 936 30 Honeycutt JB, Thayer WO, Baker CE, Ribeiro RM, Lada SM, Cao Y, Cleary RA, Hudgens MG, Richman DD, Garcia JV (2017), “HIV persistence in tissue macrophages of humanized myeloid-only mice during antiretroviral therapy”, Nature Medicine, 23, (638-643) 31 Hunt PW, Cao HL, Muzoora C, Ssewanyana I, Bennett J, Emenyonu N, Kembabazi A, Neilands TB, Bangsberg DR, Deeks SG, Martin JN (2011), "Impact of CD8+ Tcell activation on CD4+ T-cell recovery and mortality in HIV-infected Ugandans initiating antiretroviral therapy", AIDS, 25(17), 2123-2131 32 Ji Q, Cheng G, Ma N, Huang Y, Lin Y, Zhou Q, Que B, Dong J, Zhou Y, Nie S (2017), "Circulating Th1, Th2, and Th17 Levels in Hypertensive Patients", Diseases Markers, 2017, 1-12 33 Jimoh OS, Naidoo M (2014), “Immune reconstitution in human immunodeficiency virus-positive patients on highly active antiretroviral therapy at an urban public sector district hospital”, Southern African Journal of Infectious Diseases, 29(3), 105-109 34 Kamps BS, Hoffman C, Rockstroh JK (2007), HIV Medicine, Flying Fublisher, Anh 35 Kaur R, Dhakad MS, Goyal R, Bhalla P, Dewan R (2016), “Study of Th1/Th2 cytokine profiles in HIV/AIDS patients in a Tertiary Care Hospital in India”, Medical Microbiology & Diagnosis, 5(1), 214-219 36 Kestens L, Vanham G, Gigase P, Young G, Hannet I, Vanlangendonck F, Hulstaert F, Bach BA (1992), "Expression of activation antigens, HLA-DR and CD38, on CD8 lymphocytes during HIV-1 infection", AIDS, 6(8), 793-797 37 Khaitan A, Kilberg M, Kravietz A, Ilmet T, Tastan C, Mwamzuka M, Marshed F, Liu M, Ahmed A, Borkowsky W, Unutmaz D (2016), "HIV-Infected Children Have Lower Frequencies of CD8+ Mucosal-Associated Invariant T (MAIT) Cells that Correlate with Innate, Th17 and Th22 Cell Subsets", PLoS One, 11(8), e0161786 38 King C, Tangye SG, Mackay CR (2008), “T follicular helper (TFH) cells in normal and dysregulated immune responses”, Annual Review of Immunology, 26, 741-766 64 39 Luckheeram RV, Zhou R, Verma AD, Xia B (2012) "CD4(+)T cells: differentiation and functions", Clinical and Developmental Immunology, vol 2012 , 1-12 40 Macal M, Sankaran S, Chun TW, Reay E, Flamm J, Prindiville TJ, Dandekar S (2008), “Effective CD4+ T-cell restoration in gut-associated lymphoid tissue of HIV-infected patients is associated with enhanced Th17 cells and polyfunctional HIV-specific Tcell responses”, Mucosal Immunol, 1, 475–488 41 Maina EK, Bukusi EA, Martha S, Lartey M, and Ampofo WK (2014), “The Relative Balance between Th17 and Regulatory T cell subsets is Critical for Progression of HIV Infection”, Journal of AIDS & Clinical Research, 5(12), 395-402 42 Manosuthi W, Chimsuntorn S, Likanonsakul S, Sungkanuparph S (2007), "Safety and efficacy of a generic fixed-dose combination of stavudine, lamivudine and nevirapine antiretroviral therapy between HIV-infected patients with baseline CD4 or = 50 cells/mm3", AIDS Research and Therapy, 4(1), 43 Mocroft A, Bofill M, Lipman M, Medina E, Borthwick N, Timms A, Batista L, Winter M, Sabin CA, Johnson M, Lee CA, Phillips A, Janossy G (1997), "CD8+, CD38+lymphocyte percents: a useful immunological marker for monitoring HIV-1 infected patients", AIDS, 14(2), 158-162 44 Moore RD, Chaisson RE (1999), "Natural history of HIV infection in the era of combination antiretroviral therapy", AIDS, 13(14), 1933-1942 45 National Institute of Allergy and Infectious Diseases (2008), HIV Replication Cycle, Hoa Kỳ 46 Ndhlovu LC, Chapman JM, Jha AR, Snyder-Cappione JE, Pagán M, Leal FE, Boland BS, Norris PJ, Rosenberg MG, Nixon DF (2008), “Suppression of HIV-1 plasma viral load below detection preserves IL-17 producing T cells in HIV-1 infection”, AIDS, 22, 990-992 47 Notermans DW, Pakker NG, Hamann D, Foudraine NA, Kauffmann RH, Meenhorst PL, Goudsmit J, Roos MTL, Schellekens PTA, Miedema F (1999), "Immune Reconstitution after Years of Successful Potent Antiretroviral Therapy in 65 Previously Untreated Human Immunodeficiency Virus Type 1–Infected Adults", The Journal of Infectious Diseases, 180(4), 1050-1056 48 Ondoa P, Koblavi-Deme S, Borget SY, Nolan ML, Nkengasong JN, Kestens L (2005), "Assessment of CD8 T cell immune activation markers to monitor response to antiretroviral therapy among HIV-1 infected patients in Cote d'Ivoire", Clinical and Experimental Immunology, 140(1), 138-148 49 Parathyras J, Gebhardt S, Hillermann-Rebello R, Grobbelaar N, Venter M, Wamich L (2009), "A pharmacogenetic study of CD4 recovery in response to HIV antiretroviral therapy in two South African population groups", Journal of Human Genetics, 54(5), 261-265 50 Perelson AS, Nelson PW (1999), “Mathematical analysis of HIV-1 dynamics in vivo”, Siam , 41(1), 3-44 51 Posch W, Lass-Florl C, Wilflingseder D (2011), "Innate Immune Responses in HIVInfection", HIV-Host Interactions, 100-126 52 Puthanakit T, Saphonn V, Ananworanich J et al (2012) Early versus deferred antiretroviral therapy for children older than year infected with HIV (PREDICT): a multicentre, randomised, open-label trial The Lancet Infectious Diseases, 12(12), 933-941 53 Rainwater-Lovett K, Nkamba HC, Mubiana-Mbewe M, Margolick JB, Moss WJ (2014), "Changes in cellular immune activation and memory T-cell subsets in HIVinfected Zambian children receiving HAART", Journal of Acquired Immune Deficiency Syndromes, 67(5), 455-462 54 Saeidi A, Ellegard R, Yong YK, Tan HY, Velu V, Ussher JE, Larsson M, Shankar EM (2016), "Functional role of mucosal-associated invariant T cells in HIV infection", Journal of Leukocyte Biology, 100(2), 305-314 55 Schmid I (2012), Flow cytometry recent perspectives, Intech 56 Severe P, Leger P, Charles M, Noel F, Bonhomme G, Bois G, George E, Kenel-Pierre S, Wright PF, Gulick R, Johnson WD Jr, Pape JW, Fitzgerald DW (2005), "Antiretroviral Therapy in a Thousand Patients with AIDS in Haiti" The New England Journal of Medicine, 353(22), 2325-2334 66 57 Sorrenti V, Marenda B, Fortinguerra S, Cecchetto C, Quartesan R, Zorzi G, Zusso M, Giusti P, Buriani A (2016), "Reference Values for a Panel of Cytokinergic and Regulatory Lymphocyte Subpopulations", Immune Network, 16(6), 344-357 58 UNAIDS (2017), UNAIDS data 2017 59 Ussher JE, Klenerman P, Willberg CB (2014), "Mucosal-associated invariant T-cells: new players in anti-bacterial immunity", Frontiers in Immunology, 5, 450 60 Ussher JE, Phalora P, Cosgrove C, Hannaway RF, Rauch A, Günthard HF, Goulder P, Phillips RE, Willberg CB, Klenerman P (2015), "Molecular Analyses Define Valpha7.2-Jalpha33+ MAIT Cell Depletion in HIV Infection: A Case-Control Study", Medicine (Baltimore), 94(29), e1134 61 Valverde-Villegas JM, Cotta Matte MC, Medeiros RM, Bogo Chies JA (2015), “New Insights about Treg and Th17 Cells in HIV Infection and Disease Progression”, Journal of Immunology Research, vol 2015(2015), 1-14 62 Vinikoor MJ, Joseph J, Mwale J, Marx MA, Goma FM, Mulenga LB, Stringer JS, Eron J, Chi B (2014), "Age at antiretroviral therapy initiation predicts immune recovery, death, and loss to follow-up among HIV-infected adults in urban Zambia", AIDS Research and Human Retroviruses, 30(10), 949-955 63 Walker B, McMichael A (2012), "The T-cell response to HIV", Cold Spring Harbor Perspectives Medicine, 2(11) 64 WHO (2013), The use of antiretroviral drugs for treating and preventing HIV infection 65 Wong EB, Akilimali NA, Govender P, Sullivan Z, Cosgrove C, Pillay M, Lewinsohn DM, Bishai WR, Walker B, Ndung'u T, Klenerman P, Kasprowicz VO (2013), "Low levels of peripheral CD161++CD8+ mucosal associated invariant T (MAIT) cells are found in HIV and HIV/TB co-infection", PLoS One, 8(12), e83474 66 Wong EB, Ndung'u T, Kasprowicz VO (2017), "The role of mucosal-associated invariant T cells in infectious diseases", Immunology, 150(1), 45-54 67 PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: MẪU BỆNH ÁN NGHIÊN CỨU I Hành Họ tên: Mã số bệnh nhân: Mã số nghiên cứu: Giới:  Nam  Nữ Địa chỉ: Điện thoại: Tên bố (mẹ): Chiều cao: Cân nặng: BMI: Các thuốc sử dụng gần đây: II Kết xét nghiệm miễn dịch Chỉ số Bạch cầu (G/l) Lympho (%) TCD3 (tb/µl) TCD4 (tb/µl) % TCD4 Th1 (tb/µl) Th1 (%) Th2 (tb/µl) Th2 (%) Th17 (tb/µl) Th17 (%) Treg (tb/µl) Treg (%) TCD8 (tb/µl) % TCD8 %TCD8 hoạt hố MAIT (tb/µl) %MAIT hoạt hố Trước điều trị Sau 24 tháng điều trị Sau 36 tháng điều trị Sau 48 tháng điều trị Sau 60 tháng điều trị PHỤ LỤC 2: DANH SÁCH BỆNH NHÂN ĐANG ĐIỀU TRỊ ARV STT Mã nghiên cứu B004.ARV24 Họ tên Giới Ngày sinh Mã y tế Lê Minh Đ Nam 02/05/2011 12353595 B019.ARV24 Đinh Huy V Nam 14/09/2012 12017422 B022.ARV24 Nguyễn Thị Thu H Nữ 05/11/2001 08165131 B023.ARV24 Võ Thanh T Nữ 01/01/2008 13206302 B025.ARV24 Đào Tấn D Nam 16/07/2007 09172478 B070.ARV24 Phan Hoa Gia P Nam 24/01/2012 14165681 B071.ARV24 Nguyễn Ngọc A Nữ 09/01/2007 14174205 B085.ARV24 Đặng Minh H Nam 25/12/2007 12258139 B095.ARV24 Đậu Công T Nam 17/08/2010 13380159 10 B116.ARV24 Nguyễn Trường A Nam 24/01/2013 14041490 11 B126.ARV24 Nguyễn Duy H Nam 06/10/2005 12 A001.ARV24 Ngô Minh A Nữ 22/01/2011 14206960 13 A003.ARV24 Lương Đình T Nam 06/03/2002 14281741 14 A004.ARV24 Nguyễn Ngọc N Nam 01/11/2013 14238237 15 A005.ARV24 Nguyễn Hiền T Nữ 29/07/2012 13169108 16 A006.ARV24 Hoàng Xuân Q Nữ 26/02/2013 14306142 17 A008.ARV24 Trần Duy A Nam 30/08/2006 11040643 18 A015.ARV24 Đào Thị Ngọc M Nữ 28/09/2013 15082057 19 A017.ARV24 Trần Văn S Nam 06/04/2005 15132778 20 A016.ART24 Phùng Thế V Nam 08/12/2005 11076359 21 B005.ARV36 Nguyễn Mạnh B Nam 02/11/2009 11095320 22 B009.ARV36 Trương Thu H Nữ 18/08/2005 10153448 23 B016.ARV36 Lê Thanh H Nam 23/11/2004 09118059 24 B044.ARV36 Hồ Thanh T Nữ 15/07/2012 12317761 25 B047.ARV36 Nguyễn Thị Thu T Nữ 11/10/2007 11263253 26 B068.ARV36 Nguyễn Đức C Nam 26/03/2008 13901412 27 B086.ARV36 Bạch Văn L Nam 26/10/2006 13037486 8183825 28 B090.ARV36 Triệu Văn C Nam 16/10/2008 13184839 29 B100.ARV36 Nguyễn Thu N Nữ 31/10/2012 12394440 30 B106.ARV36 Cao Nguyên C Nữ 07/03/2012 13217867 31 B111.ARV36 Nguyễn Đức N Nam 23/03/2010 11188442 32 B018.ARV48 Trần Phạm Linh C Nam 26/06/2010 10190734 33 B010.ARV48 Bùi Tuấn T Nam 20/10/2010 10199431 34 B021.ARV48 Lại Yến T Nữ 06/10/2003 11155077 35 B024.ARV48 Nguyễn Quang T Nam 12/06/2007 11137220 36 B032.ARV48 Trần Ngọc A Nữ 30/08/2004 08089304 37 B035.ARV48 Vũ Đức Đ Nam 08/11/2006 08226743 38 B036.ARV48 Nguyễn Huyền Trang A Nữ 23/11/2009 11218185 39 B043.ARV48 Nguyễn Ngọc Khanh L Nữ 15/10/2008 10227069 40 B056.ARV48 Hoàng Anh T Nam 28/11/2006 07236576 41 B058.ARV48 Vũ Hoàng L Nam 25/04/2012 14121567 42 B081.ARV48 Đồng Quang D Nam 21/12/2009 10040392 43 B088.ARV48 Phạm Việt D Nam 05/10/2006 06209592 44 B089.ARV48 Lê Bá Đ Nam 17/12/2010 13430875 45 B092.ARV48 Nguyễn Phương C Nữ 28/01/2010 12243983 46 B096ARV48 Đỗ Hoàng A Nam 05/02/2007 13316922 47 B099.ARV48 Hoàng Thảo N Nữ 09/01/2007 08119229 48 B140.ARV48 Dương Thị L Nữ 19/10/2006 90106240 49 B002.ARV60 Nguyễn Đức N Nữ 27/08/2006 07077010 50 B013.ARV60 Nguyễn Thị Ngọc M Nữ 01/10/2004 04118858 51 B017.ARV60 Phạm Tiến A Nam 26/10/2001 10095628 52 B020.ARV60 Nguyễn Thị Ngọc H Nữ 14/08/2004 10236752 53 B037.ARV60 Mai Nhật M Nam 25/10/2008 10442139 54 B042.ARV60 Phạm Văn Q Nam 20/04/2006 14324172 55 B045.ARV60 Nguyễn Thủy T Nữ 27/09/2007 08033286 56 B049.ARV60 Đặng Trần Hải M Nam 06/01/2005 57 B052.ARV60 Dương Danh H Nam 03/05/2009 10229393 0516817 58 B059.ARV60 Hoàng Gia H Nữ 22/06/2006 11761818 59 B062.ARV60 Hoàng Thị Y Nữ 24/10/2000 10324058 60 B063.ARV60 Trần Ngọc M Nữ 21/05/2002 61 B064.ARV60 Nguyễn Thị Trà M Nữ 17/10/2002 11009144 62 B065.ARV60 Nguyễn Phùng Nhật V Nữ 14/06/2005 11013359 63 B072.ARV60 Trịnh Thị N Nữ 12/05/2005 11059653 64 B074.ARV60 Phạm Khánh L Nữ 12/05/2010 10235747 65 B083.ARV60 Nguyễn Hoàng A Nam 01/07/2007 10248142 66 B094.ARV60 Bùi Hải Y Nữ 01/04/2003 10143118 67 B098.ARV60 Phong Ngọc D Nam 12/05/2000 10066147 68 B105.ARV60 Kiều Thu L Nữ 10/08/2006 70042451 69 B103.ARV60 Trần Phạm Linh C Nữ 24/06/2010 10190734 70 B117.ARV60 Nguyễn Thị Thanh X Nữ 22/12/2000 10152235 71 B120.ARV60 Phùng Phương A Nữ 27/12/2010 631203 1005645 PHỤ LỤC 3: DANH SÁCH BỆNH NHÂN HIV TRƯỚC ĐIỀU TRỊ STT Mã nghiên cứu A001.ARV0 Ngô Minh A Nữ 22/01/2011 14206960 A003.ARV0 Lương Đình T Nam 06/03/2002 14281741 A005.ARV0 Nguyễn Hiền T Nữ 29/07/2012 13169108 A006.ARV0 Hoàng Xuân Q Nam 26/02/2013 14306142 A007.ARV0 Lê Ngọc Bảo A Nữ 19/06/2010 14370268 A008.ARV0 Trần Duy A Nam 30/08/2006 11040643 A009.ARV0 Nguyễn Văn Đ Nam 03/01/2013 15027549 A010.ARV0 Lương Hoàng M Nam 06/02/2008 15892542 A015.ARV0 Đào Thị Ngọc M Nữ 28/09/2013 15082057 10 A016.ARV0 Phùng Thế V Nam 08/12/2005 11076359 11 A017.ARV0 Trần Văn S Nam 06/04/2005 15132778 12 A021.ARV0 Vi Phương L Nữ 11/01/2004 15305987 13 A022.ARV0 Nguyễn Hoàng A Nam 15/05/2015 15255460 14 A023.ARV0 Đỗ Công N Nam 30/05/2015 15371884 15 A024.ARV0 Trần Thị Kim N Nữ 19/02/2006 13181676 16 A025.ARV0 Đỗ Ngọc A Nam 13/06/2015 15364836 17 A026.ARV0 Đinh Ngọc B Nam 01/08/2014 15401305 18 A027.ARV0 Ngô Hải V Nữ 05/04/2006 15998695 19 A029.ARV0 Trần Việt H Nam 24/12/2011 15988998 20 A032.ARV0 Vũ Thúy N Nữ 27/06/2010 15486496 Họ tên Giới Ngày sinh Mã y tế ... TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHI N - HÀ THỊ PHƯƠNG ĐÁNH GIÁ SỰ PHỤC HỒI MIỄN DỊCH TẾ BÀO Ở TRẺ EM NHI M HIV- 1 ĐƯỢC ĐIỀU TRỊ THUỐC KHÁNG HIV TẠI BỆNH VIỆN NHI TRUNG ƯƠNG Chuyên ngành: Sinh... dịch tế bào trẻ em nhi m HIV- 1 điều trị thuốc kháng HIV Bệnh viện Nhi Trung Ương với mục tiêu sau: Mô tả thay đổi số tế bào lympho T nhóm chúng trẻ em nhi m HIV- 1 điều trị thuốc kháng HIV thời... lên virus tế bào vật chủ 1. 3 Những tế bào tham gia đáp ứng miễn dịch HIV 12 1. 3 .1 Tế bào lympho T 12 1. 3.2 Đáp ứng hệ miễn dịch sau nhi m HIV 21 1.4 Thuốc kháng HIV