(Luận Án Tiến Sĩ) Nghiên Cứu Xác Định Tỷ Lệ Nhiễm Và Chế Tạo Kit Chẩn Đoán Bệnh Tiên Mao Trùng (Trypanosomiasis) Ở Đàn Trâu Tại Tỉnh Tuyên Quang.pdf

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NCS PHẠM THỊ TRANG 1 NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM VÀ CHẾ TẠO KIT CHẨN ĐOÁN BỆNH TIÊN MAO TRÙNG (TRYPANOSOMIASIS) Ở ĐÀN TRÂU TẠI TỈNH TUYÊN QUANG LUẬN ÁN[.]

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NCS PHẠM THỊ TRANG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM VÀ CHẾ TẠO KIT CHẨN ĐOÁN BỆNH TIÊN MAO TRÙNG (TRYPANOSOMIASIS) Ở ĐÀN TRÂU TẠI TỈNH TUYÊN QUANG LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - NĂM 2017 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NCS PHẠM THỊ TRANG NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM VÀ CHẾ TẠO KIT CHẨN ĐOÁN BỆNH TIÊN MAO TRÙNG (TRYPANOSOMIASIS) Ở ĐÀN TRÂU TẠI TỈNH TUYÊN QUANG Ngành: Ký sinh trùng vi sinh vật học thú y Mã số: 9640104 LUẬN ÁN TIẾN SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: GS TS Nguyễn Thị Kim Lan PGS TS Phạm Công Hoạt THÁI NGUYÊN - NĂM 2017 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu chúng tơi Các kết nghiên cứu luận án hoàn toàn trung thực chưa công bố luận án khác Mọi thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực đề tài nghiên cứu hoàn thành Luận án cảm ơn TÁC GIẢ Phạm Thị Trang ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận án này, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS TS Nguyễn Thị Kim Lan PGS TS Phạm Công Hoạt - Nhà khoa học hướng dẫn, bảo tận tình suốt q trình nghiên cứu hồn thành Luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ tạo điều kiện to lớn sở vật chất, nhân lực, vật lực Ban Giám đốc, Ban Đào tạo - Đại học Thái Nguyên; Đảng ủy, Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo, Ban chủ nhiệm Khoa Chăn nuôi thú y, Bộ môn Bệnh động vật, Bộ mơn Dược - An tồn thực phẩm Trường Đại học Nông Lâm – Đại học Thái Nguyên, tập thể cán giảng viên, học viên cao học Trần Nhật Thắng, Nguyễn Thị Thu Hiền, Hoàng Thị Hồng Hạnh sinh viên khóa 39, 40, 41, 42, 43 Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên Đặc biệt, xin trân trọng cảm ơn PGS TS Phạm Thị Tâm cán bộ, giảng viên, học viên sinh viên Khoa Công nghệ sinh học, Viện Đại học Mở Hà Nội tận tình giúp đỡ tơi suốt thời gian triển khai đề tài Tôi xin trân trọng cảm ơn Chi cục Chăn nuôi Thú y tỉnh Tuyên Quang, Trạm Chăn nuôi Thú y, cán bộ, nhân dân địa phương huyện Yên Sơn, Sơn Dương, Hàm Yên Chiêm Hóa - tỉnh Tuyên Quang tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Tôi vô biết ơn thành viên gia đình bạn bè ln bên tôi, giúp đỡ động viên suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành Luận án Thái nguyên, ngày tháng năm 2017 NGHIÊN CỨU SINH Phạm Thị Trang iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT v DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH viii MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài 3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài .3 Những đóng góp đề tài Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học đề tài 1.1.1 Bệnh tiên mao trùng động vật 1.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 20 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 20 1.2.2 Tình hình nghiên cứu nước 24 1.3 Điều kiện tự nhiên, điều kiện kinh tế - xã hội tỉnh Tuyên Quang 35 1.3.1 Điều kiện tự nhiên 35 1.3.2 Điều kiện kinh tế - xã hội 36 Chương 2: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .38 2.1 Đối tượng, thời gian, địa điểm nghiên cứu 38 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 38 2.1.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 38 2.1.3 Vật liệu nghiên cứu 38 2.2 Nội dung nghiên cứu 43 2.2.1 Nghiên cứu xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng đàn trâu tỉnh Tuyên Quang áp dụng phác đồ điều trị 43 iv 2.2.2 Nghiên cứu chế tạo thử nghiệm Kit CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng cho đàn trâu tỉnh Tuyên Quang 44 2.3 Phương pháp nghiên cứu .45 2.3.1 Phương pháp xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng đàn trâu tỉnh Tuyên Quang áp dụng phác đồ điều trị 45 2.3.2 Phương pháp nghiên cứu chế tạo Kit chẩn đoán bệnh 51 2.4 Phương pháp xử lý số liệu .64 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 65 3.1 Tình hình nhiễm tiên mao trùng đàn trâu huyện thuộc tỉnh Tuyên Quang áp dụng phác đồ điều trị hiệu 65 3.1.1 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu huyện thuộc tỉnh Tuyên Quang 65 3.1.2 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng theo lứa tuổi trâu tỉnh Tuyên Quang 67 3.1.3 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo tính biệt 71 3.1.4 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo mùa vụ 72 3.1.5 Kết xác định loài tiên mao trùng gây bệnh đàn trâu tỉnh Tuyên Quang 75 3.1.6 Áp dụng phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng cho đàn trâu tỉnh Tuyên Quang 80 3.2 Nghiên cứu chế tạo thử nghiệm Kit CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng cho đàn trâu tỉnh Tuyên Quang 83 3.2.1 Kết tách dòng xác định trình tự gen mã hóa kháng ngun bề mặt RoTAT 1.2 T evansi 83 3.2.2 Kết biểu gen mã hóa kháng nguyên bề mặt T evansi 92 3.2.3 Kết nghiên cứu chế tạo thử nghiệm Kit CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng 108 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 131 Kết luận 131 Đề nghị 132 TÀI LIỆU THAM KHẢO 133 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CÓ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI .148 v DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT DNA: Acide Deoxyribo Nucleic bp: base pair CATT: Card Agglutination Test for Trypanosomiasis CBB: Coomassie Brilliant Blue DMSO: Di Methyl Sulfoxide EDTA: Ethylene Diamine Tetraacetic acid IPTG: Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside ISG: Invanant Surface Glycoprotein kb: kilobase kDa: kiloDalton kgTT: Kilogram thể trọng LB: Luria Bertani OD: Optical Density PBS: Phosphat Buffered Saline PCA: Plate Count Agar PCR: Polymerase Chain Reaction PMSF: Phenyl Methyl Sulfonyl Fluoride PVDF: Poly Vinylidene Di Fluoride RT - PCR: Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction SDS: Sodium Dodecyl Sulfat SDS - PAGE: Sodium Dodecyl Sulfate Poly Acrylamide Gel Electrophoresis spp.: Species pluralis TEA: Tris - axit acetic - EDTA TMB: Tetra Methyl Benzidine VAT: Variable Antigen Type VSG: Variant Surface Glycoprotein vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần gel Tricine - SDS 41 Bảng 2.2 Các cặp mồi sử dụng nghiên cứu .42 Bảng 2.3 Thành phần chu trình nhiệt phản ứng PCR 48 Bảng 2.4 Thành phần phản ứng PCR khuếch đại đoạn gen mã hóa kháng nguyên RoTAT 1.2 54 Bảng 2.5 Thành phần phản ứng Klewnov cắt đầu sản phẩm PCR 54 Bảng 2.6 Thành phần phản ứng lai tạo vector tái tổ hợp 55 Bảng 2.7 Thành phần phản ứng kiểm tra mang gen vector tái tổ hợp phản ứng PCR với cặp mồi F1.2 R1.2 57 Bảng 2.8 Thành phần phản ứng ghép nối gen ngoại lai vào vector biểu 58 Bảng 3.1 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu huyện thuộc tỉnh Tuyên Quang 65 Bảng 3.2 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng theo tuổi trâu 68 Bảng 3.3 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo tính biệt .71 Bảng 3.4 Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo mùa năm 72 Bảng 3.5 Danh sách chuỗi gen 18S Trypanosoma evansi sử dụng so sánh phân tích nghiên cứu 78 Bảng 3.6 Kết áp dụng phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng diện hẹp 80 Bảng 3.7 Thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng diện rộng .82 Bảng 3.8 Bảng tổng hợp kết so sánh trình tự xác định với trình tự NCBI .92 Bảng 3.9 Kết xác định mật độ hạt latex nồng độ kháng nguyên để tạo phức hợp kháng nguyên - hạt latex .111 Bảng 3.10 Kết xác định nhiệt độ thời gian để tạo phức hợp kháng nguyên - hạt latex 112 Bảng 3.11 Ảnh hưởng chất nhuộm màu đến khả ngưng kết kháng nguyên - kháng thể 113 vii Bảng 3.12 Ảnh hưởng nhiệt độ chất ức chế phân giải protein đến kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 115 Bảng 3.13 Ảnh hưởng nhiệt độ chất ổn định protein đến kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 117 Bảng 3.14 Ảnh hưởng nhiệt độ chất diệt khuẩn đến kháng nguyên tái tổ hợp RoTAT 1.2 118 Bảng 3.15 Xác định độ pha loãng kháng thể, thời gian nhiệt độ phản ứng .121 Bảng 3.16 Kết phản ứng sử dụng Kit CATT phát kháng thể kháng 125 Bảng 3.17 Ảnh hưởng thời gian nhiệt độ bảo quản đến độ nhạy phản ứng sử dụng Kit CATT 127 Bảng 3.18 Ảnh hưởng thời gian nhiệt độ bảo quản đến độ đặc hiệu Kit CATT chế tạo 127 Bảng 3.19 So sánh kết chẩn đoán bệnh tiên mao trùng Kit CATT với kỹ thuật ELISA phương pháp tiêm truyền chuột .128 Bảng 3.20 So sánh hiệu sử dụng Kit CATT với kỹ thuật ELISA phương pháp tiêm truyền chuột 129 viii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc tiên mao trùng T evansi .4 Hình 1.2 Phương thức truyền lây tiên mao trùng T evansi .5 Hình 1.3 Sơ đồ vector pCR 2.1 17 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu tách dịng biểu gen mã hóa kháng ngun bề mặt T evansi .51 Hình 2.2 Sơ đồ nghiên cứu chế tạo thử nghiệm Kit CATT từ kháng nguyên tái tổ hợp T evansi 52 Hình 3.1 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu huyện thuộc tỉnh Tuyên Quang 66 Hình 3.2 Đồ thị biến động nhiễm tiên mao trùng trâu theo lứa tuổi 68 Hình 3.3 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo tính biệt 71 Hình 3.4 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo mùa năm .73 Hình 3.5 Hình ảnh điện di sản phẩm PCR gen 18S mẫu Trypanosoma spp thạch agarose 1% 75 Hình 3.6 Hình ảnh chuyển nạp sản phẩm PCR mẫu Tev-CH-VN; TevHY-VN; Tev-SD-VN Tev-YS-VN vào tế bào E coli chủng DH5α-T 76 Hình 3.7 Điện di kiểm tra sản phẩm cắt DNA plasmid tái tổ hợp mang gen 18S enzyme EcoRI 77 Hình 3.8 Cây phả hệ dựa trình tự nucleotide chuỗi gen 18S rRNA mẫu Tev-CH-VN; Tev-HY-VN; Tev-SD-VN Tev-YS-VN nghiên cứu với mẫu Trypanosoma evansi đăng ký Ngân hàng gen 79 Hình 3.9 Kết điện di DNA tổng số 83 Hình 3.10 Kết điện di sản phẩm PCR mẫu DNA tổng số 84 Hình 3.11 Kết tinh sản phẩm PCR 85 Hình 3.12 Sơ đồ thiết kế vector tái tổ hợp pJET1.2 - RoTAT 1.2 86 148 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CĨ LIÊN QUAN ĐẾN ĐỀ TÀI Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Văn Quang, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh, Phan Thị Hồng Phúc, Phạm Diệu Thùy, Phạm Thị Trang, Trần Nhật Thắng (2014), “Tình hình nhiễm Tiên mao trùng đàn trâu tỉnh Tuyên Quang xác định phác đồ điều trị hiệu quả”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nơng thơn, số tháng 6, tr 91 - 95 Nguyễn Thị Thu Hiền, Phạm Thị Tâm, Trương Quốc Phong, Nguyễn Thị Kim Lan, Phạm Thị Trang (2014), “Nghiên cứu biểu gien mã hóa kháng nguyên bề mặt tiên mao trùng gây bệnh trâu, bị Việt Nam”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển nông thôn, chuyên đề Khoa học công nghệ Nông lâm nghiệp miền núi, số 24, tr 90 - 95 Nguyễn Mạnh Hùng, Phạm Thị Tâm, Phạm Thị Trang, Nguyễn Thị Kim Lan (2015), “Nghiên cứu chế tạo sinh phẩm chẩn đoán nhanh bệnh tiên mao trùng Trypanosoma evansi gây cho trâu, bò Việt Nam”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Tập XXII, số 7, tr 48 - 59 Phạm Thị Trang, Nguyễn Thị Kim Lan, Phạm Công Hoạt (2017), “Thử nghiệm Kit CATT để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng cho trâu tỉnh Tuyên Quang”, Tạp chí Khoa học Công nghệ (Đại học Thái Nguyên), tập 168, số 08, tr 125 - 130 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH THỰC HIỆN ĐỀ TÀI Lấy mẫu máu trâu tỉnh Tuyên Quang Ảnh 1: Lấy mẫu huyện Yên Sơn Ảnh 2: Lấy mẫu huyện Sơn Dương Ảnh 3: Lấy mẫu huyện Chiêm Hoá Ảnh 4: Lấy mẫu huyện Hàm Yên Ảnh 5, 6: Cố định lấy mẫu máu trâu Ảnh 7: Tiêm truyền chuột nhắt trắng Ảnh 8: Ghi chép số liệu lấy mẫu Triệu chứng trâu mắc bệnh tiên mao trùng tỉnh Tuyên Quang Ảnh 9, 10: Trâu gầy yếu, lông xù, dễ rụng Ảnh 11: Trâu bị viêm kết mạc, mắt có dử đặc Ảnh 12: Trâu bị ỉa chảy nặng Xét nghiệm mẫu xác định tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng Ảnh 13, 14: Lấy mẫu máu chuột để xét nghiệm tiên mao trùng Ảnh 15, 16: Soi kính hiển vi kiểm tra tiên mao trùng máu Ảnh 17, 18: Tiên mao trùng máu chuột Thử nghiệm Kit CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng cho trâu Ảnh 19, 20: Sử dụng Kit CATT chẩn đoán bệnh tiên mao trùng Ảnh 21, 22: Đọc kết phản ứng Âm tính Dương tính Ảnh 23, 24: Kết phản ứng Điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu tỉnh Tuyên Quang Ảnh 25: Thuốc azidin Ảnh 26: Thuốc trypamidium samorin Ảnh 27: Thuốc trypanosoma Ảnh 28: Các thuốc trợ sức, trợ lực Ảnh 29, 30: Điều trị cho trâu mắc bệnh tiên mao trùng PHỤ LỤC XỬ LÝ THỐNG KÊ Bảng 3.1: Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu tỉnh Tuyên Quang Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm huyện Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Không Nhiễm nhiễm Total Yên Sơn 28 33,79 0,993 229 223,21 0,150 Hàm Yên35 34,71 0,002 229 264 229,29 0,000 Chiêm Hóa 41 33,14 1,866 211 218,86 0,283 252 Sơn Dương 15 17,36 0,320 117 114,64 0,048 132 786 905 Total 119 257 Chi-Sq = 3,664 DF = P-Value = 0,300 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Yên Sơn, Hàm Yên Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm Không nhiễm 28 31,08 0,305 229 225,92 0,042 257 35 31,92 0,297 229 232,08 0,041 264 63 458 Total Total 521 Chi-Sq = 0,684 DF = P-Value = 0,408 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Chiêm Hóa, Sơn Dương Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 41 36,75 0,491 Không nhiễm 211 215,25 0,084 15 19,25 0,938 117 112,75 0,160 132 Total 56 328 384 Total 252 Chi-Sq = 1,674 DF = P-Value = 0,196 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Yên Sơn, Chiêm Hóa Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 28 34,84 1,342 Không nhiễm 229 222,16 0,211 41 34,16 1,369 211 217,84 0,215 252 Total 69 440 509 Total 257 Chi-Sq = 3,137 DF = P-Value = 0,077 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Yên Sơn, Sơn Dương Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 28 28,41 0,006 Không nhiễm 229 228,59 0,001 15 14,59 0,011 117 117,41 0,001 132 Total 43 346 389 Total 257 Chi-Sq = 0,019 DF = P-Value = 0,889 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Hàm Yên, Chiêm Hóa Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 35 38,88 0,388 Không nhiễm 229 225,12 0,067 41 37,12 0,406 211 214,88 0,070 252 Total 76 440 516 Total 264 Chi-Sq = 0,931 DF = P-Value = 0,334 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Hàm Yên, Sơn Dương Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 35 33,33 0,083 Không nhiễm 229 230,67 0,012 15 16,67 0,167 117 115,33 0,024 132 Total 50 346 396 Total 264 Chi-Sq = 0,286 DF = P-Value = 0,593 Bảng 3.2: Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng theo lứa tuổi Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm lứa tuổi Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Không Nhiễm nhiễm Total 117 125 16,44 108,56 4,330 0,656 36 45,76 2,081 312 302,24 0,315 348 46 42,34 0,316 276 279,66 0,048 322 29 81 110 14,46 95,54 14,608 2,212 Total 119 786 905 Chi-Sq = 24,566 DF = P-Value = 0,000 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm ≤ 2; > - Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 11,63 1,132 Không nhiễm 117 113,37 0,116 36 32,37 0,407 312 315,63 0,042 348 Total 44 429 473 Total 125 Chi-Sq = 1,696 DF = P-Value = 0,193 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm > - 5, > - Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 36 42,59 1,020 Không nhiễm 312 305,41 0,142 46 39,41 1,102 276 282,59 0,154 322 Total 82 588 670 Total 348 Chi-Sq = 2,418 DF = P-Value = 0,120 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm > - 8, > Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 46 55,90 1,754 Không nhiễm 276 266,10 0,369 Total 322 29 19,10 5,135 81 90,90 1,079 110 Total 75 357 432 Chi-Sq = 8,337 DF = P-Value = 0,004 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm ≤ 2; > Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 19,68 6,933 Không nhiễm 117 105,32 1,296 29 17,32 7,878 81 92,68 1,472 110 Total 37 198 235 Total 125 Chi-Sq = 17,579 DF = P-Value = 0,000 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm > - 5, > Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 36 49,39 3,629 Không nhiễm 312 298,61 0,600 29 15,61 11,482 81 94,39 1,899 110 Total 65 393 458 Total 348 Chi-Sq = 17,611 DF = P-Value = 0,000 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm ≤ 2, > - Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Không Nhiễm nhiễm Total 117 125 15,10 3,339 109,90 0,459 46 38,90 1,296 276 283,10 0,178 322 Total 54 393 447 Chi-Sq = 5,272 DF = P-Value = 0,022 Bảng 3.3: Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo tính biệt Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm trâu đực trâu Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Không Nhiễm nhiễm Total Đực 69 467 536 70,48 465,52 0,031 0,005 Cái Total 50 48,52 0,045 319 320,48 0,007 119 786 369 905 Chi-Sq = 0,088 DF = P-Value = 0,767 Bảng 3.4: Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng trâu theo mùa vụ Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm mùa Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 17 27,22 3,836 Không nhiễm 190 179,78 0,581 29 30,77 0,102 205 203,23 0,015 234 36 32,74 0,324 213 216,26 0,049 249 Total 207 37 28,27 2,695 178 186,73 0,408 215 Total 119 786 905 Chi-Sq = 8,011 DF = P-Value = 0,046 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Xuân; Hè Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 17 21,59 0,977 Không nhiễm 190 185,41 0,114 29 24,41 0,864 205 209,59 0,101 234 Total 46 395 441 Total 207 Chi-Sq = 2,055 DF = P-Value = 0,152 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Hè; Thu Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 29 31,49 0,197 Không nhiễm 205 202,51 0,031 36 33,51 0,185 213 215,49 0,029 Total 234 249 Total 65 418 483 Chi-Sq = 0,442 DF = P-Value = 0,506 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Thu, Đông Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 36 39,17 0,257 Không nhiễm 213 209,83 0,048 37 33,83 0,298 178 181,17 0,056 Total 249 215 Total 73 391 464 Chi-Sq = 0,659 DF = P-Value = 0,417 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Xuân, Đông Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 17 26,49 3,399 Không nhiễm 190 180,51 0,499 37 27,51 3,272 178 187,49 0,480 215 Total 54 368 422 Total 207 Chi-Sq = 7,650 DF = P-Value = 0,006 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Hè, Đông Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Nhiễm 29 34,40 0,847 37 31,60 0,921 Không nhiễm 205 199,60 178 183,40 0,159 Total 234 215 Total 66 383 449 Chi-Sq = 2,073 DF = P-Value = 0,150 Chi-Square Test: Nhiễm Không nhiễm Xuân, Thu Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Không Nhiễm nhiễm Total 17 190 207 24,06 182,94 2,071 0,272 36 28,94 1,722 213 220,06 0,226 249 Total 53 403 456 Chi-Sq = 4,292 DF = P-Value = 0,038