BỘ YTÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỀN THỊ DIỆU NGHIÊN CỨU BÀO CHÉ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN 500 MG GIẢI PHÓNG KÉO DÀI 24 GIỜ KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ HÀ NỘI 2022 BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI[.]
BỘ YTÉ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỀN THỊ DIỆU NGHIÊN CỨU BÀO CHÉ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN 500 MG GIẢI PHÓNG KÉO DÀI 24 GIỜ KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ HÀ NỘI - 2022 BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ DIỆU Mã sinh viên: 1701081 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN CLARITHROMYCIN 500 MG GIẢI PHÓNG KÉO DÀI 24 GIỜ KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP Dược sĩ Người hướng dẫn: GS.TS Nguyễn Ngọc Chiến Nơi thực hiện: Viện Công nghệ Dược phẩm Quốc Gia HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Với tất lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy: GS.TS Nguyễn Ngọc Chiến người đà hướng dẫn, bảo tận tình truyền đạt kinh nghiệm quý báu để hồn thành khóa luận Tơi xin chân thành cảm ơn thầy ThS Trần Ngọc Bảo có lời khun ln tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình làm thực nghiệm Tơi xin chân thành cảm ơn tồn thể thầy cô giáo, anh chị kĩ thuật viên, bạn sinh viên khóa K72 em sinh viên khóa K73 nghiên cứu khoa học thực khóa luận tốt nghiệp Viện Cơng nghệ Dược phẩm Quốc gia, giúp đờ tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình làm thực nghiệm hồn thành khóa luận Tơi xin cảm ơn Ban giám hiệu, phòng ban, thầy cô giáo cán nhân viên trường Đại học Dược Hà Nội truyền đạt kiến thức, giúp định hướng suốt năm tháng giảng đường Cuối cùng, xin cảm ơn đặc biệt đến gia đình bạn bè tơi, người ln ủng hộ, động viên, giúp đỡ suốt quãng thời gian học tập nghiên cứu vừa qua Hà Nội, ngày 27 tháng 06 năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Diệu MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẤT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐÒ THỊ ĐẶT VẮN ĐỀ CHƯƠNG 1: TÔNG QUAN 1.1 Tổng quan clarithromycin 1.1.1 Cấu trúc 1.1.2 Cồng thức cấu tạo 1.1.3 Tính chất lý hóa 1.1.4 Độ ổn định 1.1.5 Dược động học 1.1.6 Tác dụng dược lý chế 1.1.7 Chỉ định, chống định, tác dụng không mong muốn, liều dùng cách dùng 1.1.8 Một số chế phẩm chứa clarithomycin thị trường 1.2 Thuốc giải phóng kéo dài 1.2.1 Khái niệm 1.2.2 Một số hệ thuốc giải phóng kéo dài chế giải phóng dược chất 1.2.3 Ưu nhược điểm thuốc giải phóng kéo dài 1.2.4 Sơ lược hệ cốt thân nước giải phóng kéo dài 1.2.5 Một số tá dược thường sử dụng hệ cốt thân nước giải phóng kéo dài 1.3 Một số nghiên cứu dạng thuốc giải phóng kéo dài chứa Clarithromycin 12 CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 15 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 15 2.1.1 Nguyên vật liệu 15 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 16 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 16 2.2 Nội dung nghiên cứu 17 2.2.1 Đánh giá độ hòa tan viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg 17 2.2.2 Nghiên cứu bào chế viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 24 17 2.3 Phuong pháp nghiên cún 18 2.3.1 Phương pháp bào chế viên nén clarithromycin giải phóng kéo dài dạng cốt thân nước 18 2.3.2 Phương pháp đánh giá chất lượng 20 2.3.3 Phương pháp đánh giá độ ổn định 24 2.3.4 Phương pháp xử lí số liệu 24 CHƯƠNG 3: THỤC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .25 3.1 Kết thẩm định phương pháp định lượng dược chất viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 25 3.1.1 Tính tương thích hệ thống 25 3.1.2 Độ đặc hiệu 25 3.1.3 Độ tuyến tính 25 3.1.4 Độ lặp lại 25 3.1.5 Độ 25 3.2 Đánh giá độ hịa tan viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg 26 3.3 Kết xây dựng công thức viên nén dạng cốt thân nước giải phóng kéo dài chứa clarithromycin 500 mg 27 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng số yếu tố thuộc công thức đến khả kiểm sốt giải phóng dược chất 27 3.3.1.1 Khảo sát ảnh hưởng lượng HPMC K100LV công thức đến khả kiểm sốt giải phóng dược chất 27 3.3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng acid A công thức đến trình giải phóng dược chất 29 3.3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng lượng acid A công thức đến q trình giải phóng dược chất 31 3.3.1.4 Khảo sát ảnh hưởng HPMC K4M đến kiếm soát giải phóng dược chất phối hợp với HPMC K100LV 33 3.3.2 Một số biện pháp khắc phục tượng tương kỵ clarithromycin acid A 36 3.3.2.1 Thay đổi thành phần vi môi trường 36 3.3.2.2 Thay đổi phương pháp bào chế 37 3.3.2.3 Thay đổi polyme kiểm sốt giải phóng độ nhớt thấp 38 3.4 Đánh giá sơ độ ốn định viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 24 40 3.5 Đánh giá đề xuất số tiêu chất lượng cốm viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 24 40 KÉT LUẬN VÀ ĐÈ XUẤT 42 TÃI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỦ VIẾT TẮT BP : Dược điển Anh (British pharmacopoeia) CLR : Clarithromycin CT : Công thức dd : Dung dịch DĐVN : Dược điển Việt Nam FDA : Cơ quan quản lý thực phẩm dược phẩm (Food anh Drug Administration) GPDC : Giải phóng dược chất GPKD : Giải phóng kéo dài HEC : Hydroxy ethyl celulose HPC : Hydroxy propyl celulose HPLC : Sắc ký lỏng hiệu cao (High performance liquid chromatography) HPMC : Hydroxy propyl methyl celulose kl : Khối lượng MeOH : Methanol MgSt : Magnesi stearat NaCMC : Natri carboxy methyl celulose NaLS : Natri lauryl sulfat PEG : Polyethylen glycol PEO : Polyethylen oxyd PVP : Polyvinyl pyrolidon RSD : Độ lệch chuẩn tương đối SD : Độ lệch chuẩn SDS : Natri dodecyl sulfat TCCS : Tiêu chuẩn sở TKHH : Tinh khiết hóa học tt : Thể tích ƯSP : Dược điển Mỹ (United States pharmacopeia) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Một số chế phẩm chứa clarithromycin thị trường Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất dùng nghiên cứu 15 Bảng 2.2 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 16 Bảng 2.3 Thành phần dự kiến viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 24h 18 Bảng 2.4 Mối liên quan số Carr mức độ trơn chảy 20 Bảng 3.1 % CLR giải phóng từ viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg môi trường đệm acetat pH 4,5 đệm phosphat pH 6,8 (n=6) 26 Bảng 3.2 Mầu viên bào chế chứa tỷ lệ HPMC K100LV khác 28 Bảng 3.3 % CLR giải phóng từ mẫu viên chứa tỷ lệ HPMC K100LV khác môi trường đệm phosphat pH 6,8 28 Bảng 3.4 Mầu viên bào chế viên chứa acid A 29 Bảng 3.5 % CLR giải phóng từ mẫu viên chứa acid A môi trường đệm phosphat pH 6,8 30 Bảng 3.6 Mầu viên bào chế viên chứa tỷ lệ acid A khác 31 Bảng 3.7 % CLR giải phóng từ mẫu viên chứa tỷ lệ acid A khác môi trường đệm phosphat pH 6,8 32 Bảng 3.8 % CLR giải phóng từ viên CT5 viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg môi trường đệm acetat pH 4,5 33 Bảng 3.9 Mầu viên bào chế viên chứa tỷ lệ HPMC K4M khác 34 Bảng 3.10 % CLR giải phóng từ mẫu viên chứa tỷ lệ HPMC K4M khác môi trường đệm acetat pH 4,5 34 Bảng 3.11 % CLR giải phóng từ viên CT11 viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg môi trường đệm phosphat pH 6,8 35 Bảng 3.12 Màu sắc 40°C/3 ngày mẫu viên bào chế chứa thành phần vi môi trường khác giá trị Í2 so với viên đối chiếu 36 Bảng 3.13 Màu sắc cùa cốm với phương pháp bào chế khác 40°C/7 ngày 37 Bảng 3.14 Mầu viên bào chế viên chứa tỷ lệ HPMC K100LV natri alginat khác 38 Bảng 3.15 Màu sắc cốm chứa tỷ lệ HPMC K100LV natri alginat khác 38 Bảng 3.16 % CLR giải phóng từ viên CT18 viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg môi trường đệm phosphat pH 6,8 39 Bảng 3.17 % CLR giải phóng từ viên CT18 viên đối chiếu Klacid®MR 500 mg mơi trường đệm acetat pH 4,5 39 Bảng 3.18 Kết theo dõi độ ổn định CT18 điều kiện thường sau tuần 40 Bảng 3.19 Kết đánh giá số tiêu chất lượng cốm 41 Bảng 3.20 Đề xuất số tiêu chất lượng cho cốm 41 Bảng 3.21 Kết đánh giá đề xuất số tiêu chất lượng cho viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 24 41 DANH MỤC CÁC HÌNH VÊ, ĐỊ THỊ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo clarithromycin .2 Hình 1.2 Đồ thị biểu diễn biến thiên nồng độ dược chất máu theo thời gian số dạng thuốc uống Hình 1.3 Mơ hình hệ cốt ăn mòn .8 Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo HPMC Hình 1.5 Cồng thức cấu tạo natri alginat 11 Hình 2.1 Sơ đồ bào chế viên nén clarithromycin 500 mg GPKD 24h 19 Hình 2.2 Dụng cụ chứa viên q trình hịa tan (sinker) 24 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn tỷ lệ % CLR giải phóng từ viên Klacid®MR 500 mg mơi trường đệm pH 4,5 pH 6,8 26 Hình 3.2 Đồ thị biểu diễn % CLR giải phóng từ viên có tỷ lệ HPMC K100LV khác môi trường đệm phosphat pH 6,8 28 Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn % CLR giải phóng từ viên có chứa acid A mơi trường đệm phosphat pH 6,8 30 Hình 3.4 Đồ thị biểu diễn % CLR giải phóng từ viên chứa tỷ lệ acid A khác môi trường đệm phosphat pH 6,8 32 Hình 3.5 Đồ thị biểu diễn % CLR giải phóng từ viên chứa tỷ lệ HPMC K4M khác môi trường đệm acetat pH 4,5 34 ĐẶT VÁN ĐÈ Clarithromycin (CLR) loại kháng sinh macrolid bán tổng hợp có nguồn gốc từ erythromycin có sinh khả dụng đường uống cao tác dụng phụ đường tiêu hóa so với erythromycin CLR có tác dụng kháng khuẩn cách ức chế tổng hợp protein ribosom vi khuẩn định điều trị nhiều bệnh nhiễm khuẩn khác Đồng thời, CLR sử dụng thuốc đầu tay, kết hợp với amoxicillin thuốc ức chế bơm proton để diệt trừ Helicobacter pylori viêm loét dày [3], [12], [25], [30] CLR hấp thu nhanh gần hoàn toàn qua đường tiêu hóa có độ tan kém, gần không tan nước dẫn đến sinh khả dụng đường uống thấp chuyến hóa lần đầu gan mạnh, có thời gian bán thải ngắn (khoảng 5-7 với liều uống 500 mg) [3], [18] Để khắc phục nhược điểm đòi hỏi phải sử dụng hai đến ba lần ngày với viên nén quy ước Đồng thời, thuốc có vị kim loại đắng khiến bệnh nhân tuân thủ điều trị Vì vậy, nhằm mục đích nâng cao hiệu điều trị, tăng sinh khả dụng, giảm số lần dùng thuốc ngày giảm tác dụng không mong muốn thuốc, hướng nghiên cứu bào chế chế phẩm giải phóng kéo dài chứa CLR cần thiết Hiện nay, ngành công nghiệp dược phấm ngày có nhu cầu dạng bào chế tăng mức độ hấp thu dược chất hòa tan kéo dài thời gian tác dụng dược chất [18] Trong đó, kháng sinh CLR tập trung nghiên cứu tầm quan trọng việc điều trị nhiễm khuẩn vi khuẩn mycobacteria, khả hịa tan kém, tính khơng ổn định với acid sinh khả dụng thấp Trên giới có nhiều nghiên cứu viên nén giải phóng kéo dài chứa CLR Các cơng thức nghiên cứu bào chế viên nén CLR giải phóng kéo dài chủ yếu sử dụng tá dược kiềm sốt giải phóng polyme thân nước Tuy nhiên Việt Nam, dạng thuốc giải phóng kéo dài chứa CLR yếu nhập khẩu, chưa sản xuất nghiên cứu Vì vậy, tơi tiến hành đề tài “Nghiên cứu bào chế viên nén clarithromycin 500 mg giải phóng kéo dài 24 giờ" với mục tiêu: Xây dựng mẫu viên bào chế quy trình bào chế viên nén clarithromycin 500 mg giải phóng kéo dài 24 quy mơ phịng thí nghiệm TÃI LIỆU THAM KHẲO Tiếng Việt Bộ môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội (2005), Một số chuyên đề bào chế đại, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 130 - 154 Bộ mơn Hóa Dược - Trường Đại học Dược Hà Nội (2004), Giáo trình Hóa Dược, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 232-238 Bộ Y tế (2018), Dược thư quốc gia Việt Nam, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 404 - 406 Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất Y học, Hà Nội, tập 1, tr 271 -274 Tiếng Anh Al-Razzak Laman, Crampton Sheri L., et al., Extended release formulations of erythromycin derivatives, 2000, US Patents Broad Neville w., Carmody Alan F., et al., Controlled release formulation for poorly soluble basic drugs, 1998, US Patents Camponeschi Claudio, Colombo Paolo, Compositions and formulations based on swellable matrices for sustained release of poorly soluble drugs such as clarithromycin, 2009, US Patents Convention United States Pharmacopoeia (2018), The United States Pharmacopoeia 41 - National Formulary 36 (USP 41 - NF36), pp 975 - 983 Erah PO, Goddard AF, et al (1997), "The stability of amoxycillin, clarithromycin and metronidazole in gastric juice: relevance to the treatment of Helicobacter pylori infection", The Journal of antimicrobial chemotherapy, 39(1), pp 5-12 10 Fujiki s., Iwao Y., et al (2011), "Stabilization mechanism of clarithromycin tablets under gastric pH conditions", Chem Pharm Bull, 59(5), pp 553-558 11 Inoue Yutaka, Yoshimura Sachie, et al (2007), "Application of ascorbic acid 2- glucoside as a solubilizing agent for clarithromycin: solubilization and nanoparticle formation", International journal ofpharmaceutics, 331(1), pp 38- 45 12 Inukai Koki, Takiyama Kei, et al (2017), "Effect of gel formation on the dissolution behavior of clarithromycin tablets", International journal of pharmaceutics, 521(1-2), pp 33-39 13 Manani R o., Abuga K o., et al (2017), "Pharmaceutical Equivalence of Clarithromycin Oral Dosage Forms Marketed in Nairobi County, Kenya", Scientia Pharmaceutica, 85(2), 20 14 Mandaogade Prashant Manohar, Raghuvanshi Rajeev Singh, Extended release tablets of clarithromycin, 2005, US Patents 15 ONER Levent, Toksoz Ahmet, Sustained release tabletformulations comprising clarithromycin, 2000, US Patents 16 Pereira J M., Mejia-Ariza R., et al (2013), "Interplay of degradation, dissolution and stabilization of clarithromycin and its amorphous solid dispersions", Mol Pharm, 10(12), pp 4640 - 4653 17 Phadtare Dipti, Phadtare Ganesh, et al (World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences), "Hypromellose-a choice of polymer in extended release tablet formulation", World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 3(9), pp 551-566 18 Rampal Ashok, Raghuvanshi Rajeev, et al., Clarithromycin formulations having improved Bioavailability, 2005, US Patents 19 Rampal Ashok, Raghuvanshi Rajeev, et al., Controlled release formulation of clarithromycin or tinidazol, 2005, US Patents 20 Rowe Raymond c., Sheskey Paul, et al (2009), Handbook of pharmaceutical excipients, Libros Digitales-Pharmaceutical Press, pp 94 - 96, 326 - 329 21 Salem Isam Ismail, Duzgunes Nejat, et al (2003), "Efficacies of cyclodextrin- complexed and liposome-encapsulated clarithromycin against Mycobacterium avium complex infection in human macrophages", International journal of pharmaceutics, 250(2), pp 403-414 22 Sutar Rahl, Masareddy Rajashree, et al (2011), "Formulation and evaluation of clarithromycin poorly soluble drug as microemulsion", Int Res J Pharm, 2, pp 153-158 23 Temeljotov Darja Fercej, Mohar Milojka, et al., Directly compressible matrix for controlled release of single daily doses of clarithromycin, 2000, US Patents 24 Tiwari Sandip B., DiNunzio James, et al (2011), "Drug-polymer matrices for extended release", Controlled release in oral drug delivery, Springer, pp 131159 25 Vanderbist Francis, Sereno Antonio, et al., Sustained release composition contraining clarithromycin, 2004, US Patents 26 Wadhwa Hardeep, Controlled release macrolide pharmaceutical formulations, 2003, US Patents 27 Wen Hong, Park Kinam (2011), Oral controlled release formulation design and drug delivery: theory to practice, John Wiley & Sons, United States, pp 71 - 79, 89 - 97 28 Wilson Clive G., Crowley Patrick J (2011), Controlled release in oral drug delivery, springer, United States, pp 131 - 137 29 Zhang X R., Chen X Y., et al (2005), "Evaluation of in-vitro dissolution and in-vivo absorption for two different film-coated pellets of clarithromycin", Arch Pharm Res, 28(8), pp 977- 982 30 Zuckerman J M (2004), "Macrolides and ketolides: azithromycin, clarithromycin, telithromycin", Infect Dis Clin North Am, 18(3), pp 621- 649 PHỤ LỤC Phụ lục Quy trình xử lý mẫu để thẳm định phương pháp định lượng dưọc chất viên nén clarithromycin 500 mg GPKD Phụ lục Bảng hình kết thấm định phưong pháp định lưọng HPLC Phụ lục Sơ đồ số phương pháp bào chế Phụ lục Mẩu viên bào chế viên chứa thành phần vi môi trường khác Phụ lục Một số hình ảnh viên, cốm sau bảo quản điều kiện định Phụ lục Quy trình xử lý mẫu để thẩm định phương pháp định lượng dược chất viên nén clarithromycin 500 mg GPKD Dung dịch chuẩn gốc: Cân xác khoảng 31,25 mg CLR cho vào bình định mức 50 ml, thêm khoảng 35 ml MeOH, siêu âm cho tan hết Đẻ nguội, thêm MeOH vừa đủ 50 ml, lắc Dung dịch chuẩn làm việc: Hút xác 5,0 ml dung dịch chuẩn gốc, cho vào bình định mức 25 ml, thêm MeOH tới vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,45 pm, thu dung dịch chuẩn có nồng độ 125 pg/ml Dung dịch thử gốc: Cân khối lượng 20 viên, tính khối lượng trung bình viên Nghiền thành bột mịn, cân xác lượng bột tương ứng với 200 mg CLR cho vào bình định mức 50 ml Thêm vào khoảng 35 ml MeOH, siêu âm 30 phút Thêm MeOH đến vạch, lắc Ly tâm 10000 vịng/5 phút Dung dịch thử: Hút xác 3,0 ml dịch sau ly tâm dung dịch thử gốc vào bình định mức 100 ml, thêm MeOH tới vạch, lắc đều, lọc qua màng lọc 0,45Ịim (Cthử = 120 pg/ml) Dung dịch trắng: Tiến hành bào chế dung dịch trắng không chứa dược chất tương tự quy trình bào chế dung dịch thử Sau tiến hành xử lý dung dịch trắng tương tự dung dịch thử vừa trình bày Phụ lục Bảng hình kết thấm định phương pháp định lượng HPLC Phụ lục 2.1 Tính tương thích hệ thống phương pháp định lượng Thịi gian lưu Diện tích pic Hệ số bất đối (phút) (mAƯ.s) xứng 5,176 37,3 0,946 5,175 37,3 0,969 5,179 37,1 0,963 5,179 37,4 0,952 5,180 37,0 0,958 5,181 37,7 0,94 Xtb ± SD 5,178 + 0,002 37,3 ± 0,2 0,955 + 0.011 RSD(%) 0,05 0,66 1,13 STT mAU _ -1 í ■• ' ■ I ' • J ’ • L/v ■ • • ■ I •• • • I ' • • ’I ’ ■ • ■ s c sắc kỷ đồ mẫu trắng Phụ lục 2.2 sắc kỷ đồ mẫu chuẩn (a), mẫu thử (b) mẫu trắng (c) I ■ ■ g(M Phụ lục 2.3 Sự phụ thuộc tuyên tính nơng độ CLR diện tích pic Nồng độ CLR Diện tích pic (mAU.s) (Mg/ml) MeOH Đệm pH 4,5 Đệm pH 6,8 28 8,1 8,6 8,5 56 17,1 16,9 16,9 140 42 41,6 42,3 280 84,9 82,6 83,8 560 168,2 168,1 166,2 b Môi trường đệm acetat pH 4,5 y = 0,2963x 4-0,4814 R2= 180 -I 7^150 □ |120 - ĩ 90 ■ I 60 c