BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HÀ HUY THÁI NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI 2022 BỌ YTE TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HÀ HUY THÁI MA SINH VIE[.]
BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HÀ HUY THÁI NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI - 2022 BỌ YTE TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HÀ HUY THÁI MA SINH VIEN: 1701502 NGHIÊN CỬU BÀO CHÊ VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ Người hưởng dân: PGS TS Nguyên Thị Thanh Duyên Nơi thực hiện: Bộ môn Công nghiệp dược HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc xin gửi lời cảm ơn chân thành đến người thầy - PSG TS Nguyễn Thị Thanh Duyên, người ân cần quan tâm, tận tình hướng dẫn, động viên truyền cảm hứng cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu để hồn thành khóa luận Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến ThS Phạm Vàn Hùng, người thầy dành nhiều quan tâm, giúp đỡ cho lời khuyên quý giá suốt trình thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu, thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội, đặc biệt thầy cô, anh chị kỹ thuật viên Bộ môn Công Nghiệp Dược đà tận tình giảng dạy cho tơi kiến thức q báu năm học qua trình làm khóa luận tốt nghiệp Tơi xin dành biết ơn sâu sắc tới bố mẹ người thân gia đình yêu thương, quan tâm, động viên ủng hộ vô điều kiện bước đường để tơi có ngày hôm Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến anh chị dược sĩ khóa 71, bạn bè sinh viên khóa 72 em khóa 73 nhóm nghiên cứu, ln gắn bó, chia sẻ, bên cạnh quan tâm, động viên, giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 27 tháng 06 năm 2022 Sinh viên Hà Huy Thái MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẤT DANH MỤC CẮC BẢNG, BIẾU DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỐNG QUAN 1.1 TỐNG QUAN VÈ DILTIAZEM HYDROCLORID 1.1.1 Cơng thức hóa học 1.1.2 Tính chất hóa lý đặc tính sinh dược học 1.1.3 Độ ổn định 1.1.4 Một số chế phẩm viên nén diltiazem hydroclorid thị trường 1.2 TỐNG QUAN VỀ HỆ CÔT THÂN NƯỚC VÃ HỆ CÔT TRO 1.2.1 Sơ lược • hệ• cốt thân nước • số đặc • điểm tá dược • HPMC 1.2.2 Sơ lược hệ cốt trơ số nguyên liệu tạo cốt 1.3 pH VI MÔI TRƯỜNG 1.3.1 Khái niệm pH vi môi trường 1.3.2 Lựa chọn chất điều chỉnh pH vi môi trường 10 1.3.3 Các kỹ thuật đánh giá pH vi môi trường 10 1.4 MỘT SỔ NGHIÊN cứu VỀ VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID.il CHƯƠNG 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DƯNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 2.1 NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ 14 2.1.1 Nguyên liệu 14 2.1.2 Thiết bị 14 2.1.3 Chế phẩm đối chiếu 15 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CÚƯ 15 2.3 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 16 2.3.1 Phương pháp bào chế 16 2.3.2 Phương pháp quy hoạch thực nghiệm tối ưu hóa cơng thức viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt thân nước 17 2.3.3 Phương pháp đánh giá 17 2.3.4 Phương pháp xử lý số liệu trình bày kết 21 CHƯƠNG 3: THỤC NGHIỆM, KẾT QƯẲ VÀ BÃN LUẬN 22 3.1 KẾT QUA NGHIÊN cúư TIỀN CÔNG THÚ C 22 3.1.1 Kết xây dựng thấm định số tiêu phương pháp định lượng dược chất viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg 22 3.1.2 Kết xây dựng thấm định số tiêu phương pháp thử độ hòa tan viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg 22 3.1.3 Kết đánh giá số tính chất nguyên liệu diltiazem hydroclorid dùng nghiên cứu 23 3.1.4 Kết đánh giá số đặc tính chế phẩm đối chiếu 24 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN cứu XÂY DựNG CÔNG THỨC VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG DẠNG CỐT THÂN NƯỚC 26 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng loại HPMC đến khả kiếm sốt giải phóng dược chất 26 3.2.2 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ HPMC E15LV HPMC K4M công thức đến khả kiếm sốt giải phóng dược chất 27 3.2.3 Quy hoạch thực nghiệm tối ưu hóa cơng thức viên nén diltiazem hydroclorid dạng cốt thân nước 28 3.2.4 Đề xuất số tiêu chất lượng cho viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt thân nước 33 3.3 KẾT QUẢ NGHIÊN cửu XÂY DựNG CÔNG THỨC VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG DẠNG CỐT TRO 34 3.3.1 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ Compritol 888 ATO dicalci phosphat dihydrat đến khả kiểm sốt giải phóng dược chất 34 3.3.2 Khảo sát ảnh hưởng lactose monohydrat phối hợp với Compritol 888 ATO dicalci phosphat dihydrat đến khả kiểm sốt giải phóng dược chất 35 3.3.3 Khảo sát ảnh hưởng loại tá dược độn khác đến khả kiếm sốt giải phóng dược chất 36 3.3.4 Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ Compritol 888 ATO lactose monohydrat đến khả kiểm sốt giải phóng dược chất 38 3.3.5 Khảo sát ảnh hưởng acid succinic cách phối họp acid đến khả cải thiện độ hòa tan dược chất môi trường đệm phosphat pH 6,8 40 £ « i , 3.3.6 Đánh giá đê xuât sô tiêu chât lượng cho viên nén diltiazem \ r hydroclorid 60 mg dạng cốt trơ 42 3.4 BÀN LUẬN 44 3.4.1 trình xây dựng cơng thức viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg 44 3.4.2 so sánh khả phát triến thuốc generic hai viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt thân nước cốt trơ 46 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 TÃI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỦ VIẾT TẮT Phần viết tắt BCS Phần viết đầy đủ Biopharmaceutics classification system (Hệ thống phân loại sinh dược học) BĐM Bình định mức COM Compritol 888 ATO CT Cơng thức DC Dược chất DCP Dicalci phosphat dihydrat DĐVN Dược điển Việt Nam ĐHT Độ hòa tan DTZ Diltiazem hydroclorid EtOH Ethanol GPBĐ Giải phóng biến đổi GPDC Giải phóng dược chất GPKD Giải phóng kéo dài NTK, H2O Nước tinh khiết HPC Hydroxypropyl cellulose HPMC Hydroxypropyl methylcellulose kl/tt Khối lượng thể tích KSGP Kiểm sốt giải phóng KTTP Kích thước tiểu phân MgSt Magnesi stearat PVP Polyvinyl pyrrolidon RSD Relative Standard deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) SD Standard deviation (Độ lệch chuẩn) STT Số thứ tự TB Trung bình TCNSX Tiêu chuẩn nhà sản xuất TDKD Tác dụng kéo dài TKHH Tinh khiết hóa học USP United States Pharmacopeia (Dược điển Mỹ) Vđ Vừa đủ VĐC Viên đối chiếu, thuốc đối chiếu DANH MỤC CÁC BANG, BIÉU Bảng 1.1 Một số chế phấm viên nén chứa diltiazem hydroclorid thị trường Bảng 1.2 Đặc tính lý hóa số acid hữu [36] 10 Bảng 2.1 Các nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 14 Bảng 2.2 Các thiết bị sử dụng nghiên cứu 14 Bảng 2.3 Thành phần dự kiến công thức viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt thân nước 16 Bảng 2.4 Thành phần dự kiến cúa công thức viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt trơ 16 Bảng 2.5 Giá trị tối ưu giới hạn biến đầu .17 Bảng 2.6 Tương quan số Carr độ trơn chảy hạt/bột [1] 18 Bảng 3.1 Tóm tắt kết thấm định số tiêu phương pháp định lượng 22 Bảng 3.2 Tóm tắt kết thẩm định số tiêu phương pháp thử độ hòa tan 23 Bảng 3.3 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ viên đối chiếu viên đối chiếu 24 Bảng 3.4 Các phương trình động học mơ tả q trình giải phóng dược chất từ viên đối chiếu 25 Bảng 3.5 Công thức viên nén chứa loại HPMC khác 26 Bảng 3.6 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT1, CT2, CT3 26 Bảng 3.7 Công thức viên nén chứa tỷ lệ loại HPMC khác 27 Bảng 3.8 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT4, CT5 27 Bảng 3.9 Các biến đầu vào lựa chọn quy hoạch thực nghiệm 28 Bảng 3.10 Các công thức thiết kế quy hoạch thực nghiệm kết giá trị thực nghiệm biến đầu 29 Bảng 3.11 Kết phân tích phương sai phương trình hồi quy tìm 29 Bảng 3.12 Hệ số phương trình hồi quy tìm 30 Bảng 3.13 Kết đánh giá số tiêu chất lượng cốm viên 33 Bảng 3.14 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ cơng thức tối ưu CTR 33 Bảng 3.15 Một số tiêu chất lượng đề xuất cho viên nén diltiazemhydroclorid 60 mg dạng cốt thân nước 33 Bảng 3.16 Công thức viên chứa Compritol 888 ATO dicalci phosphat dihydrat với tỷ lệ khác 34 Bảng 3.17 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT1’, CT2’, CT3’, CT4’, CT5’ 34 Bảng 3.18 Công thức viên phối hợp lactose monohydrat với Compritol 888 ATO dicalci phosphat dihydrat 35 Bảng 3.19 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT6’, CT7’, CT8’ 36 Bảng 3.20 Công thức viên chứa loại tá dược độn khác .37 Bảng 3.21 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT9’, CT10’, CT1 r, CT12’, CT13’ 37 Bảng 3.22 Công thức viên chứa Compritol 888 ATO lactose monohydrat với tỷ lệ khác 38 Bảng 3.23 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT9’, CT14’, CT15’, CT16’ 38 Bảng 3.24 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên CT9’ CT14’ môi trường pH khác 39 Bảng 3.25 Công thức viên chứa acid succinic với tỷ lệ khác 40 Bảng 3.26 Hệ số tương đồng mơi trường thử độ hịa tan khác .40 Bảng 3.27 Tỷ lệ dược chất giải phóng từ mẫu viên chứa acid succinic môi trường đệm phosphat pH 6,8 40 Bảng 3.28 Kết đánh giá số tiêu chất lượng cốm viên 43 Bảng 3.29 Một số tiêu chất lượng đề xuất cho viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt trơ 43 DANH MỤC CÁC HÌNH VẺ, ĐỊ THỊ Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo cùa diltiazem hydroclorid Hình 1.2 Đồ thị biểu diễn độ tan diltiazem hydroclorid theo pH [34] Hình 1.3 Q trình xâm nhập mơi truờng hòa tan vào bên hệ cốt thân nước Hình 1.4 Cấu tạo phân tử HPMC Hình 1.5 Q trình xâm nhập mơi trường hịa tan vào bên hệ cốt trơ Hình 1.6 Cơ chế điều chỉnh pH vi môi trường chất điều chỉnh pH (a), mơ hình lớp khuếch tán hòa tan thuốc (b) [40] Hình 3.1 Hình dạng tinh thể diltiazem hydroclorid quan sát kính hiển vi quang học 24 Hình 3.2 Đồ thị giải phóng dược chất viên đối chiếu 25 Hình 3.3 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT1, CT2, CT3 môi trường nước tinh khiết 26 Hình 3.4 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT4, CT5 môi trường nước tinh khiết 27 Hình 3.5 Các đường đồng mức biểu diễn mối quan hệ biến đầu Y1 (độ hòa tan thời điểm 30 phút) biến đầu vào 30 Hình 3.6 Các đường đồng mức biểu diễn mối quan hệ biến đầu Y2 (độ hòa tan thời điểm 180 phút) biến đầu vào 31 Hình 3.7 Khơng gian thiết kế viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg dạng cốt thân nước 32 Hình 3.8 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT1’, CT2’, CT3’, CT4’, CT5' môi trường nước tinh khiết 34 Hình 3.9 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT1 CT6’, CT7’, CT8’ môi trường nước tinh khiết 36 Hình 3.10 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT9’, CT10’, CT11’, CT12’, CT13’ môi trường nước tinh khiết 37 Hình 3.11 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT9’, CT14’, CT15’, CT16’ môi trường nước tinh khiết 38 Hình 3.12 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên CT9’ CT14’ mơi trường thử độ hịa tan 39 Hình 3.13 Đồ thị giải phóng dược chất mẫu viên chứa acid succinic môi trường đệm phosphat pH 6,8 41 Bảng PL.1.4 Kết thấm định độ lạp lại độ xác trung gian Tỷ lệ dược chất tìm (%) Lần đỉnh lượng STT Ngày Ngày 1 101,98 100,89 2 101,75 101,36 3 101,89 101,23 4 101,93 101,56 5 101,75 101,26 101,96 102,09 _ Trung bình 101,90 101,38 RSD (%) 0,35 0,13 p (so sánh giá trị trung bình) 0,276 A 1 PL Phụ lục PHƯƠNG PHÁP, KẾT QUẢ XÂY DỤNG VÀ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP THÚ Độ HÒA TAN VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG PL2.1 PHƯƠNG PHÁP, CÁCH CHUẨN BỊ MẪU TRONG XÂY DỤNG THẤM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP THỦ Độ HÒA TAN VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG PL2.1.1 Phương pháp thẩm định số tiêu phương pháp thử độ hòa tan viên nén diltiazem hydroclorid 60 mg Qua tham khảo chuyên luận “ The dissolution procedure: development and validation ” ƯSP 43, tiến hành thẩm định phương pháp thử độ hòa tan thời điểm lấy mẫu theo yêu cầu dược điển Mỹ với mục tiêu thiết lập sau: Thời điểm 30 phút: 50 % DTZ giải phóng (yêu cầu ƯSP 43: < 60%); thời điềm 180 phút: 100 % DTZ giải phóng (yêu cầu ƯSP 43: > 75%) > Tỉnh đặc hiệu Dung dịch dược chất C1 C2: dung dịch diltiazem hydroclorid dung môi pha mẫu, nồng độ xác lằn lượt khoảng 6,67 pg/mL 13,33 pg/mL Dung dịch tá dược P1 P2: chuẩn bị từ hỗn hợp tá dược với tỷ lệ nhau, pha chế đến nồng độ giả định tá dược xác khoảng 6,67 pg/mL 13,33 pg/mL (nếu tá dược tan hoàn toàn dung mồi pha mẫu) Dung dịch thử TI T2: gồm có diltazem hydroclorid tá dược với tỷ lệ nhau, nồng độ DTZ nồng độ dung dịch dược chất c C2, nồng độ tá dược nồng độ dung dịch tá dược P1 P2 Mầu trắng (O): dung mơi pha mẫu nước tinh khiết dung dịch đệm pH 1,2; 4,5; 6,8 Tiến hành: Đo hiệu độ hấp thụ (AA) dung dịch Cl, C2, Pl, P2, Tl, T2 bước sóng 236 nm 250 nm với mẫu trắng (O) Đánh giá ảnh hưởng tá dược đến độ hấp thụ: Tá dược coi không ảnh hưởng đến độ hấp thụ dược chất giá trị hiệu độ hấp thụ dung dịch P1 P2 không 2% so với giá trị hiệu độ hấp thụ dung dịch C1 C2 (ngoài ra, đề xuất thêm yêu cầu: giá trị độ hấp thụ dung dịch TI T2 bang giá trị độ hấp thụ dung dịch C1 C2) > Tính tuyến tính Pha dãy dung dịch chuẩn diltiazem hydroclorid có nồng độ xác khoảng 0,1, 1, 2, 4, 6, 8, 12, 14 pg/mL môi trường NTK; đệm pH 1,2; 4,5 pH 6,8 Đo độ hấp thụ dung dịch bước sóng 236 nm 250 nm, mẫu trắng dung mơi pha mẫu Xây dựng mơ hình tuyến tính biểu diễn mối tương quan hiệu PL độ hấp thụ (AA236-250) nồng độ dung dịch c Hệ số tương quan (R2) phản ánh độ tuyến tính phương pháp Mơ hình tuyến tính coi phù họp R2 > 0,98 > Độ Chuẩn bị loại mẫu tự tạo có hàm lượng dược chất xác khoảng 30,0 %; 50,0 %; 75 %; 100,0 %; 120,0 % (ký hiệu IT, T2’, T3’, T4’, T5’) so với hàm lượng dược chất cơng thức bào chế Xử lí mẫu pha lỗng dung môi pha mẫu đến nồng độ dược chất thích hợp (nằm khoảng tuyến tính đà xây dựng), định lượng dược chất mẫu, xác định tý lệ thu hồi Với loại mẫu, định lượng lặp lại lần Yêu cầu: phương pháp đánh giá đạt độ tỷ lệ thu hồi trung bình nồng độ phải nằm khoảng 95,0 - 105,0% > Độ lập lại Tiến hành thẩm định mẫu tự tạo T2’ T4’ chuẩn bị Xử lí mẫu pha lỗng dung môi pha mẫu đến nồng độ dược chất thích hợp (nằm khoảng tuyến tính xây dựng được), định lượng dược chất mẫu, thực mẫu lặp lại lần liên tiếp, xác định độ lệch chuấn tương đối Yêu cầu: Phương pháp đánh giá đạt độ lặp lại độ lệch chuẩn tương đối (RSD) hai mẫu tự tạo < 2,0% > Độ xác trung gian Thực phương pháp phần đánh giá độ lặp lại, thực ngày khác Xác định độ lệch chuẩn tương đối so sánh giá trị kết trung bình Yêu cầu: Phương pháp đánh giá đạt độ xác trung gian độ lệch chuấn tương đối ngày < %, giá trị ĐHT trung bình ngày thời diêm 30 phút (tương ứng với mẫu tự tạo chứa 50% dược chất) chênh lệch không 10 % giá trị ĐHT trung bình ngày thời điểm 180 phút (tương ứng với mẫu tự tạo chứa 100 % dược chất) chênh lệch không % PL2.1.2 Các dung dịch chung - Dung dịch đệm HCl pH 1,2: Hòa tan 8,5 mL acid hydrocloric đặc nước tinh khiết vừa đủ 1000 mL - Dung dịch đệm phosphat 0,05 MpH 4,5: Hòa tan 6,805 g kali dihydrophosphat nước tinh khiết vừa đủ 1000 mL - Dung dịch đệm phosphat 0,05 M pH 6,8: Hòa tan 6,805 g kali dihydrophosphat 0,896 g natri hydroxyd nước tinh khiết vừa đù 1000 mL PL2.1.3 Các dung dịch dùng để thẩm định tính đặc hiệu a, Mẩu 50% dược chất - Dung dịch dược chất gốc 1: Cân lượng DTZ xác khoảng 33,33 mg chuyển vào BĐM 1000 mL thêm khoảng 900 mL dung dịch môi trường, siêu âm 30 phút 37 °C Để nguội, thêm môi trường vừa đủ đến vạch, lắc Hút khoảng 20,0 mL dịch PL từ BĐM 1000 mL thiết bị hút mẫu máy thử độ hòa tan Lablndia DS8000 cho vào ống nghiệm thu dung dịch dược chất gốc - Dung dịch dược chất Cl: Hút xác 10,0 mL dung dịch dược chất gốc cho vào BĐM 50 mL, thêm dung dịch môi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu) thu dung dịch dược chất C1 (nồng độ diltiazem hydroclorid xác khoảng 6,67 pg /mL) - Dung dịch tả dược gốc ỉ: Cân tá dược cơng thức lượng xác khoảng 66,66 mg chuyển vào BĐM 1000 mL, thêm khoảng 900 mL dung dịch môi trường, siêu âm khoảng 30 phút 37 °C để thành phần tan hết phân tán Để nguội, thêm môi trường vừa đủ đến vạch, lắc Sau tiến hành hút 20,0 mL dịch từ BĐM 1000 mL thiết bị hút mẫu máy thử độ hòa tan Lablndia DS8000 cho vào ống nghiệm thu dung dịch tá dược gốc - Dung dịch tá dược Pl: Hút xác 10,0 mL dung dịch tá dược gốc cho vào BĐM 50 1Ì1L, thêm dung dịch mơi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu) thu dung dịch tá dược Pl - Dung dịch thử Tl: Hút xác 10,0 mL dung dịch dược chất gốc 10,0 mL dung dịch tá dược gốc cho vào BĐM 50 mL, thêm dung dịch môi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu) thu dung dịch tá dược T I (nồng độ diltiazem hydroclorid xác khoảng 6,67 |ig /mL) - Mầu trắng O: tương ứng với môi trường thử hòa tan b, Mầu 100% dược chất - Dung dịch dược chất gốc 2: Cân lượng DTZ xác khoảng 66,66 mg chuyển vào BĐM 1000 mL thêm khoảng 900 mL dung dịch môi trường đem siêu âm 30 phút 37 °C Đe nguội, thêm mơi trường vừa đủ, lắc Sau tiến hành hút khoảng 20,0 ĨĨ1L dịch từ BĐM 1000 1Ĩ1L thiết bị hút mẫu máy thử độ hòa tan Lablndia DS8000 cho vào ống nghiệm thu dung dịch dược chất gốc - Dung dịch dược chất C2: Hút xác 10,0 mL dung dịch dược chất gốc cho vào BĐM 50 mL, thêm dung dịch môi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu) thu dung dịch dược chất C1 (nồng độ diltiazem hydroclorid xác khoảng 13,33 pg /mL) - Dung dịch tá dược gốc 2: Cân tá dược công thức lượng xác khoảng 66,66 mg chuyển vào BĐM 1000 mL, thêm khoảng 900 mL dung dịch môi trường, siêu âm khoảng 30 phút 37 °C để thành phần tan hết phân tán Để nguội, thêm nước tinh khiết vừa đủ, lắc Sau tiến hành hút 20,0 IĨ1L dịch từ BĐM 1000 mL thiết bị hút mẫu máy thử độ hòa tan Lablndia DS8000 cho vào ống nghiệm thu dung dịch tá dược gốc PL - Dung dịch tá dược P2: Hút xác 10,0 mL dung dịch tá dược gốc cho vào BĐM 50 mL, thêm dung dịch môi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu) thu dung dịch tá dược Pl - Dung dịch thử T2: Hút xác 10,0 mL dung dịch dược chất gốc 10,0 mL dung dịch tá dược gốc cho vào BĐM 50 mL, thêm dung dịch môi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu) thu dung dịch tá dược T2 (nồng độ diltiazem hydroclorid xác khoảng 13,33 pg /mL) - Mầu trắng O: tương ứng với mơi trường thử hịa tan PL2.1.4 Các dung” dịch độ• đúng, • dùng để thẩm định • ơ' độ• lặp • lại • độ• xác trung gian Cân lượng diltiazem hydroclorid xác khoảng 20,00 mg, 33,33 mg, 50,00 mg, 66,66 mg, 80,00 mg (tương ứng với mẫu thử chứa 30 %, 50 %, 75 %, 100 %, 120 % so với hàm lượng dược chất dạng bào chế quy đối tương ứng từ việc thử ĐHT viên nén chứa 60,00 mg DTZ 900 mL môi trường thành 66,66 mg DTZ 1000 mL môi trường), chuyển vào BĐM 50 ĩĩìL (lần lượt mẫu thử IT, T2’, T3’, T4’, T5’) Cân tá dược công thức, tá dược xác khoảng 66,66 mg chuyên vào BĐM 1000 mL, thêm khoảng 900 mL dung dịch môi trường, siêu âm khoảng 30 phút 37 °C để thành phần tan hết phân tán Đẻ nguội, thêm môi trường vừa đủ, lắc Sau tiến hành hút khoảng 20,0 mL dịch từ BĐM 1000 mL thiết bị hút mẫu máy thử độ hòa tan Lablndia DS8000 cho vào ống nghiệm Hút xác 10,0 mL dịch từ ống nghiệm cho vào BĐM 50 mL, thêm dung dịch môi trường vừa đủ, lắc đều, lọc qua giấy lọc (bỏ 15-20 mL dịch lọc đầu), thu dung dịch thử IT, T2’, T3’, T4’, T5’ có có nồng độ diltiazem hydroclorid xác khoảng 4,0 pg/mL, 6,67 pg/mL, 10,0 Ịig/mL, 13,33 pg/mL, 16,0 pg/mL PL PL2.2 KẾT QUẢ THẲM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP THỬ ĐHT VIÊN NÉN DILTIAZEM HYDROCLORID 60 MG Bảng PL.2.1 Kết thắm Mẩu 50% NTK Mầu Dung dịch (Pl) đo lần 0,000 Dung dịch (Pl) đo lần 0,000 Dung dịch (P1) lần 0,000 0,000 Trung bình ± 0,0000 Dung dịch (Cl) lần 0,144 Dung dịch (Cl) lần 0,144 Dung dịch (Cl) lần 0,143 0,144 Trung bình ± 0,0006 Dung dịch (T1) lần 0,143 Dung dịch (Tl) lần 0,143 Dung dịch (Tl) lần 0,142 0,143 Trung bình ± 0,0006 pl (so sánh mẫu TI vói Cl) 0,1012 % chênh lệch mẫu Pl so vói C1 0,0000 Mẩu 100% NTK Mau Dung dịch (P2) lần 0,000 Dung dịch (P2) lần 0,000 Dung dịch (P2) lần 0,000 0,000 Trung bình ± 0,0000 Dung dịch (C2) đo lần 0,296 Dung dịch (C2) lần 0,295 Dung dịch (C2) đo lần 0,296 0,296 Trung bình ± 0,0006 Dung dịch (T2) lần 0,295 Dung dịch (T2) lần 0,295 Dung dịch (T2) đo lần 0,296 0,295 Trung bình ± 0,0006 p2 (so sánh mẫu T2 vói C2) 0,5185 % chênh lệch mẫu P2 so vói C2 0,0000 PL 10 định tính đặc hiệu pH 1,2 0,001 0,000 0,000 0,000 ± 0,0006 0,139 0,139 0,139 0,139 ± 0,0000 0,139 0,138 0,138 0,138 ± 0,0006 0,1161 0,2398 pH 4,5 pH 6,8 0,000 0,000 0,000 0,001 0,000 0,000 0,000 0,000 ± 0,0000 ± 0,0006 0,145 0,135 0,145 0,135 0,146 0,136 0,145 0,135 ± 0,0006 ± 0,0006 0,147 0,137 0,145 0,136 0,146 0,136 0,146 0,136 ± 0,0010 ± 0,0006 0,1012 0,3739 0,0000 J 0,2463 pH 1,2 0,001 0,000 0,000 0,000 ± 0,0006 0,310 0,310 0,309 0,310 ± 0,0006 0,309 0,309 0,309 0,309 ± 0,0000 0,1161 0,1076 pH 4,5 0,000 0,000 0,000 0,000 ± 0,0000 0,297 0,297 0,296 0,297 ± 0,0006 0,295 0,296 0,296 0,296 ± 0,0006 0,1012 0,0000 pH 6,8 0,000 0,001 0,000 0,000 ± 0,0006 0,290 0,290 0,291 0,290 ± 0,0006 0,289 0,289 0,290 0,289 ± 0,0006 0,1012 0,1148 Bảng PL.2.2 Kết thấm định tính tuyến tính pH 4,5 NTK pH 1,2 pH 6,8 Nồng độ Nồng độ Nồng độ Nồng độ Hiệu Hiệu Hiệu Hiệu độ hấp độ hấp độ hấp độ hấp DTZ’ DTZ DTZ DTZ (pg/mL) thụ (pg/mL) (pg/mL) (pg/mL) thụ thụ thụ 0,004 0,105 0,005 0,098 0,003 0,100 0,003 0,101 0,022 0,024 0,990 1,089 0,026 1,050 1,136 0,029 0,046 2,010 0,048 2,005 0,048 1,985 0,045 1,970 3,950 0,090 4,025 0,098 4,015 0,096 3,990 0,096 7,980 0,185 0,196 8,012 8,038 0,193 0,190 8,050 11,970 0,278 12,020 0,288 12,010 0,283 12,000 0,281 0,384 16,030 0,376 16,050 0,389 15,990 16,050 0,383 Bảng PL.2.3 Các phương trình đường chu ân tương ủng với mơi trường Khoảng tuyến tính Phuong trình đưịng chuẩn STT Môi trường R2 (pg/mL) NTK y = 0,0233 X- 0,0004 0,105- 16,030 0,9998 y = 0,0242 X- 0,0001 pH 1,2 0,098-16,050 0,9999 pH 4,5 0,100- 15,990 y = 0,0238 X + 0,0007 0,9998 pH 6,8 0,101-16,050 y = 0,0237 X + 0,0001 0,9998 0,400 - 0,500 -| • 2-0,300 £ ’ y = 0,0233x - 0,0004 R2 = 0,9998 5- •