Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.

Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.Đặc điểm lâm sàng, nội soi, mô bệnh học và đột biến gen KRAS ở mức độ RNA của bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước trên 10 mm.

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y === *** === TRẦN THANH HÀ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, NỘI SOI, MÔ BỆNH HỌC VÀ ĐỘT BIẾN GEN KRAS Ở MỨC ĐỘ RNA CỦA BỆNH NHÂN POLYP ĐẠI TRỰC TRÀNG KÍCH THƯỚC TRÊN 10 MM LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Hà Nội - 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y === *** === TRẦN THANH HÀ ĐẶC ĐIỂM LÂM SÀNG, NỘI SOI, MÔ BỆNH HỌC VÀ ĐỘT BIẾN GEN KRAS Ở MỨC ĐỘ RNA CỦA BỆNH NHÂN POLYP ĐẠI TRỰC TRÀNG KÍCH THƯỚC TRÊN 10 MM Chuyên ngành : Nội khoa Mã số : 9720107 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS NGUYỄN QUANG DUẬT GS.TS NGUYỄN LĨNH TOÀN Hà Nội - 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Những kết số liệu luận án trung thực, xác, chưa cơng bố cơng trình nghiên cứu khoa học khác Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Nghiên cứu sinh Trần Thanh Hà LỜI CẢM ƠN Tôi xin trân trọng cảm ơn Đảng ủy, Ban Giám đốc, Phòng Đào tạo Sau Đại học, Phịng kế hoạch tổng hợp, Bộ mơn - Khoa Nội tiêu hóa - Bệnh viện Quân y 103 - Học viện Quân y; Đảng ủy, Ban giám đốc, Phòng kế hoạch tổng hợp, Khoa Thăm dò chức năng, Trung tâm Tiêu hóa Gan mật Bệnh viện Bạch Mai Bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Trung ương; Bạn bè đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi tận tình thời gian học tập nghiên cứu.  Đặc biệt, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Quang Duật GS.TS Nguyễn Lĩnh Toàn người thầy tận tình, hết lịng học trị, trực tiếp hướng dẫn, bảo, cung cấp cho kiến thức phương pháp luận quý báu suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án.  Tôi xin trân trọng cảm ơn tập thể Trung tâm Giải phẫu bệnh - Tế bào học Bệnh viện Bạch Mai; Bộ môn - Khoa giải phẫu bệnh lý - Bệnh viện Qn y 103; Phịng Cơng nghệ Gen Di truyền tế bào - Viện nghiên cứu Y Dược học quân - Học viện Quân y tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành nghiên cứu mình.  Tơi xin chân thành cảm ơn Thầy, Cơ Bộ mơn Nội tiêu hóa Học viện Qn y Hội đồng chấm luận án cấp đóng góp nhiều ý kiến quý báu cho luận án tơi hồn thiện.  Tơi xin bày tỏ cảm ơn tới bệnh nhân thân yêu tin tưởng đồng ý tham gia, hỗ trợ hợp tác giúp tơi hồn thành nghiên cứu này.  Cuối tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình – Bố Mẹ vợ tôi, người thân bạn bè, dành cho yêu thương vô bờ hỗ trợ tối suốt trình thực đề tài này.  Hà Nội, ngày tháng năm 2023 Tác giả Trần Thanh Hà MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Một số đặc điểm dịch tễ học, phân loại polyp dựa hình ảnh nội soi, mơ bệnh học chẩn đoán polyp đại trực tràng 1.1.1 Dịch tễ học 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Chẩn đoán 13 1.2 Gen KRAS, đột biến gen KRAS phương pháp xác định đột biến gen KRAS người 19 1.2.1 Gen KRAS 19 1.2.2 Đột biến gen KRAS chế sinh ung thư 23 1.2.3 Các phương pháp sinh học phân tử xác định đột biến gen KRAS .25 1.3 Đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng .37 1.3.1 Vai trò đột biến gen KRAS tiền trình biến đổi từ polyp sang ung thư đại trực tràng 37 1.3.2 Tình hình nghiên cứu đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng giới Việt Nam .39 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .43 2.1 Đối tượng nghiên cứu 43 2.1.1 Nhóm bệnh nhân polyp đại trực tràng 43 2.1.2 Nhóm bệnh nhân ung thư đại trực tràng 44 2.2 Phương pháp nghiên cứu .44 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu .44 2.2.2 Cỡ mẫu phương pháp chọn mẫu .44 2.2.3 Địa điểm nghiên cứu 44 2.2.4 Thời gian nghiên cứu 45 2.3 Các bước tiến hành nghiên cứu 45 2.3.1 Nhóm bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 45 2.3.2 Nhóm bệnh nhân ung thư ĐTT 48 2.3.3 Xét nghiệm mô bệnh học 48 2.3.4 Xét nghiệm đột biến gen KRAS mức độ RNA 49 2.4 Các tiêu nghiên cứu tiêu chuẩn chẩn đoán kèm 61 2.4.1 Chỉ tiêu lâm sàng 61 2.4.2 Chỉ tiêu polyp hình ảnh nội soi 62 2.4.3 Chỉ tiêu polyp mô bệnh học 63 2.4.4 Đánh giá kết xét nghiệm đột biến gen KRAS mức độ RNA 64 2.6 Đạo đức nghiên cứu 65 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .67 3.1 Đặc điểm số triệu chứng lâm sàng nhóm nghiên cứu .67 3.1.1 Đặc điểm tuổi 67 3.1.2 Đặc điểm giới 68 3.1.3 Đặc điểm tiền sử gia đình 68 3.1.4 Đặc điểm triệu chứng lâm sàng 69 3.2 Đặc điểm hình ảnh nội soi mô bệnh học polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 70 3.2.1 Đặc điểm hình ảnh nội soi 71 3.2.2 Đặc điểm mô bệnh học 75 3.2.3 Mối liên quan mô bệnh học với lâm sàng hình ảnh nội soi 79 3.3 Đột biến gen KRAS mức độ RNA bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 85 3.3.1 Tỷ lệ đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng 85 3.3.2 Mối liên quan đột biến gen KRAS với số hình ảnh nội soi bệnh nhân polyp đại trực tràng 88 3.3.3 Mối liên quan đột biến gen KRAS với mô bệnh học polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 90 3.3.4 Mối liên quan đột biến gen KRAS với nguy ung thư đại trực tràng .92 Chương BÀN LUẬN 97 4.1 Đặc điểm lâm sàng đối tượng nghiên cứu 97 4.1.1 Đặc điểm tuổi 97 4.1.2 Đặc điểm giới tính .99 4.1.3 Đặc điểm tiền sử bệnh .100 4.1.4 Triệu chứng lâm sàng 101 4.2 Đặc điểm hình ảnh nội soi, mơ bệnh học polyp đại trực tràng kích thước > 10mm 103 4.2.1 Đặc điểm hình ảnh nội soi 103 4.2.2 Đặc điểm mô bệnh học 109 4.2.3 Mối liên quan mô bệnh học với đặc điểm lâm sàng nội soi polyp đại trực tràng ≥ 10mm 114 4.3 Đột biến gen KRAS bệnh nhân polyp đại trực tràng kích thước >10mm .117 4.3.1 Tỷ lệ đột biến gen KRAS mối liên quan với tuổi giới tính .119 4.3.2 Mối liên quan đột biến gen KRAS mức độ RNA với số đặc điểm hình ảnh nội soi mô bệnh học bệnh nhân polyp đại trực tràng 124 4.3.3 Mối liên quan đột biến gen KRAS mức độ RNA với nguy ung thư đại trực tràng 129 KẾT LUẬN 132 KIẾN NGHỊ .134 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TT Phần viết tắt ARMS Phần viết đầy đủ Amplification Refractory Mutation System (Hệ thống khuyếch đại đột biến) BN Bệnh nhân CEA Carcinoembryonic antigen CA19.9 Cancer Antigen 19-9 CS Cộng DNA Deoxyribonucleic acide ddNTP dideoxynucleotid ĐTT Đại trực tràng ExBP-RT Extendable blocking probe in reverse transcription (Phiên mã ngược với mẫu dị khóa kéo dài) 10 EGFR Epidermal growth factor receptor (Thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì) 11 FOBT Feacal Occult Blood Test (Xét nghiệm tìm máu ẩn phân) 12 FIT Feacal Immunochemical Test (Xét nghiệm hóa miễn dịch phân) 13 KRAS Kirsten rat sarcoma virus 14 LST Laterally spreading tumor (U lan rộng sang bên) 15 MAPK Mitogen-activated protein kinase 16 MBH Mô bệnh học 17 OR Ood ratio (Tỷ suất chênh) 18 RE Restriction enzyme (Enzym cắt giới hạn) 19 RNA Ribonucleic acide TT 20 Phần viết tắt PCR Phần viết đầy đủ Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi Polymarase) 21 RFLP Restriction fragment length polymorphism (Đa hình độ dài đoạn cắt giới hạn) 22 STB Số tiêu 23 WHO World Health Organization (Tổ chức y tế giới) DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Tên bảng Trang Các yếu tố nguy u tuyến, polyp cưa ung thư đại trực tràng .5 2.1 Danh mục mồi sử dụng .50 2.2 Danh mục hóa chất sử dụng 51 2.3 Danh mục máy móc thiết bị sử dụng 52 2.4 Thành phần phản ứng bước phiên mã ngược làm giàu gen đích 56 2.5 Nồng độ mồi phiên mã ngược (mồi đặc hiệu đột biến mẫu dị khóa) hỗn hợp mồi RT1 RT2 5X 57 2.6 Chu trình nhiệt phiên mã ngược làm giàu gen đích .58 2.7 Thành phần phản ứng qPCR khuếch đại cDNA KRAS tổng số .59 2.8 Thành phần phản ứng qPCR khuếch đại cDNA đột biến KRAS gen quản gia GAPDH 59 2.9 Chu trình nhiệt phản ứng qPCR phân tích đột biến 60 2.10 Giá trị cut-off quy trình phát đột biến gen KRAS mức độ RNA .61 3.1 Đặc điểm tuổi nhóm bệnh nhân nghiên cứu 67 3.2 Đặc điểm giới nhóm bệnh nhân nghiên cứu 68 3.3 Đặc điểm tiền sử gia đình nhóm nghiên cứu 68 3.4 Đặc điểm số triệu chứng lâm sàng nhóm bệnh nhân nghiên cứu 69 3.5 Thời gian xuất triệu chứng 70 3.6 Đặc điểm vị trí polyp 71 3.7 Đặc điểm hình dạng bề mặt polyp 72