PPT Báo cáo khóa luận: Nghiên cứu nấm Aspergillus sp hại hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương ở vùng Hà Nội và phụ cận năm 2013

Nghiên cứu xác định thành phần và mức độ nhiễm Aspergillus sp hại hạt lúa, ngô, đậu tương, lạc thu được tại vùng Hà Nội và phụ cận. Thử nghiệm một số biện pháp xử lý hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương trong phòng trừ bệnh.

Trang 2

1 MỞ ĐẦU

2 TỐNG QUAN TÀI LiỆU

3 VẬT LiỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

4 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN

5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ

Trang 3

1.1 Đặt vấn đề

• Lúa, ngô, lạc, đậu tương là những loại cây trồng chính của ngành nông nghiệp nước ta Chúng không chỉ là nguồn lương thực quan trọng trong đời sống con người mà chúng cũng là nguồn thức ăn quan trọng trong chăn nuôi gia súc gia cầm

• Do ý nghĩa nhiều mặt của cây lúa, ngô, lạc, đậu tương nên chúng càng ngày càng được quan tâm hơn

Trang 4

• Tuy nhiên những năm gần đây thời tiết khí hậu diễn biến thất thường tạo điều kiện thuận lợi cho nấm mốc phát triển, điều

đó không chỉ làm giảm giá trị dinh dưỡng của hạt mà còn gây hại tới sức khỏe của người và động vật Đặc biệt loài nấm gây hại nặng nề nhất trên hạt của cây trồng trong giai đoạn hiện

nay là nấm Aspergillus sp, loại nấm này không những làm ảnh

hưởng đến dinh dưỡng, sức nảy mầm của hạt mà còn sinh ra độc tố gây bệnh nghiêm trọng cho sức khỏe của con người và gia súc gia cầm.

• Xuất phát từ nhu cầu thực tiễn chúng tôi tiến hành thực hiện

đề tài:

“Nghiên cứu nấm Aspergillus sp hại hạt lúa, ngô, lạc, đậu

tương ở vùng Hà Nội và phụ cận năm 2013”.

Trang 5

1.2 Mục đích và yêu cầu

1.2.1 Mục đích

• Nghiên cứu xác định thành phần và mức độ nhiễm Aspergillus sp

hại hạt lúa, ngô, đậu tương, lạc thu được tại vùng Hà Nội và phụ cận Thử nghiệm một số biện pháp xử lý hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương trong phòng trừ bệnh

1.2.2 Yêu cầu

• Thu thập các mẫu hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương ở cũng Hà Nội và phụ cận

• Xác định thành phần của nấm Aspergillus sp và mức độ phổ biến

của các loài nấm này trên hạt thóc, ngô, đậu tương, lạc

• Nghiên cứu đặc điểm hình thái, sinh học của nấm Aspergillus sp

hại hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương

• Nghiên cứu xử lý phòng trừ nấm Aspergillus sp hạt lúa, ngô, lạc,

đậu tương bằng một số loại thuốc hóa học và chế phẩm sinh học

T.viride.

Trang 6

2.1 Những nghiên cứu ngoài nước

2.2 Tình hình nghiên cứu trong nước

Trang 7

3.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu

Đối tượng: Nghiên

Trang 8

3.1.2 Địa điểm và thời gian nghiên cứu

- Đề tài được thực hiện tại phòng thực tập bộ môn Bệnh cây - Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội.

- Thời gian: tháng 7/2013 đến tháng 12/2013

Trang 9

Phân lập và nuôi cấy nấm Aspergillus sp.

-Đánh giá thành phần các loài nấm Aspergillus sp.trên các mẫu

hạt thu được.

Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy, nhiệt độ đến

sự phát triển của nấm Aspergillus sp.

Nghiên cứu xử lý phòng trừ nấm Aspergillus sp hạt lúa,

ngô, lạc, đậu tương bằng nước Javel, thuốc hóa học và

Chế phẩm sinh học T viride.

Thu mẫu, nghiên cứu xác định thành phần và mức độ phổ biến của các loài nấm hại trên hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương ở vùng

Hà Nội và phụ cận

Điều tra xác định tình hình nhiễm nấm Aspergillus sp.trên các

mẫu hạt thu được.

Trang 10

3.3.1 Phương pháp thu thập mẫu hạt

• Lấy mẫu theo vùng sinh thái, ở mỗi vùng sẽ chọn đại diện là các xã Mỗi xã thu mẫu ở 3 xóm đại diện, và mỗi xóm sẽ lấy mẫu tại 5 nông

hộ, mỗi nông hộ lấy 1giống Mẫu thu được sẽ trộn theo xã, theo giống của từng xã thành mẫu tổng hợp, lấy mẫu phân tích từ mẫu tổng hợp, mỗi mẫu phân tích 400 hạt Mẫu thu xong ghi tên giống, địa điểm và thời gian thu mẫu.Mẫu được gói kín và bảo quản trong tủ 40C tại phòng thực tập

3.3.2 Phương pháp nghiên cứu trong phòng thí nghiêm

3.3.2.1 Phương pháp giám định nấm bệnh trên hạt

+ Sử dụng phương pháp giấy thấm:Theo phương thức của ISTA (International Seed Testing Association, 1996)

Trang 11

3.3.2.3 Phương pháp phân lập nấm Aspergillus sp

• Đặt hai hạt thóc còn nguyên vào đĩa petri chứa sẵn môi trường WA

• Sau khoảng thời gian nuôi cấy từ 5 – 7 ngày, dùng que cấy vít lấy một ít

bào tử nấm mốc nghi ngờ là Aspergillus sp (dựa trên hình thái và màu sắc

bào tử nấm mốc) cấy trên môi trường PGA trong đĩa petri

3.3.2.4 Đánh giá hiệu lực phòng trừ nấm Aspergillus sp hại hạt lúa, ngô, lạc,

đậu tương khi xử lý bằng nước javel 3%

• + Trên lúa (thương phẩm): các giống BC15, TK97, nếp tẻ, nếp Hà Nội

Thí nghiệm gồm 2 công thức, mỗi công thức 400 hạt, thí nghiệm tiến hành nhắc lại 1 lần

CT 1: đối chứng

CT 2: xử lý hạt lúa bằng nước javel 3%

Cả 2 công thức trên được tiến hành cùng thời gian, tại cùng một địa điểm

và ở cùng nhiệt độ; thời gian ngâm là 8 phút

Trang 12

• Trên ngô (hạt giống): các giống ngô nếp trắng, ngô nếp tím F1, ngô ngọt F1.

• Trên lạc (hạt giống): các giống L12, L26, LD, MD7, S12.

• Trên đậu tương (hạt giống): các giống DT12, DT84, DT96

cả 3 loại hạt trên đều tiến hành thí nghiệm gồm 2 công thức, mỗi công thức 400 hạt, thí nghiệm tiến hành nhắc lại 1 lần.

CT1: đối chứng.

CT2: xử lý hạt lúa bằng nước javel 3%.

Cả 2 công thức trên được tiến hành cùng thời điểm, tại cùng một địa điểm và ở cùng nhiệt độ; thời gian ngâm là 5 phút.

• Tiến hành các bước tương tự như khi đặt ẩm.

• Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ hạt nhiễm nấm Aspergillus sp và hiệu lực

phòng trừ của nấm Aspergillus sp khi xử lý bằng nước javel 3%.

Trang 13

• 3.3.2.5 Đánh giá hiệu lực phòng trừ Aspergillus sp của một số loại

thuốc hóa học, chế phẩm sinh học khi dùng xử lý trên hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương

• Chuẩn bị các dung dịch thuốc: Daconil 75WP 1%, Vicarben 50WP

1%, T viride 10 9 bào tử/ 1g.

• Lấy mỗi loại hạt lạc( ngô, đậu tương) Mỗi loại hạt chia làm bốn phần mỗi phần ứng với một công thức

CT1: ngâm trong nước cất làm đối chứng

CT 2: ngâm trong dung dịch Daconil 75WP 1%

CT 3: ngâm trong dung dịch Vicarben 50WP 1%

CT 4: ngâm trong dung dịch T viride

• Đối với hạt ngô ngâm trong vòng 15 phút còn lạc và đỗ tương thì tối

đa 8 phút Các bước tiếp theo làm giống lúc đặt ẩm

• Chỉ tiêu theo dõi: tỷ lệ hạt nhiễm nấm Aspergillus sp và hiệu lực phòng trừ của nấm Aspergillus sp khi xử lý bằng các loại thuốc hóa

học

Trang 14

• 3.3.2.6 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường nuôi cấy đến

sự phát triển của các isolate của nấm Aspergillus sp phân lập được từ các

mẫu hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương

• Mỗi thí nghiệm là một isolate, gồm 2 công thức mỗi công thức nhắc lại 3 lần

CT1: Cấy isolate trên môi trường PGA

CT2: Cấy isolate trên môi trường PCA

Chỉ tiêu theo dõi: Theo dõi sự phát triển của nấm ở trên môi trường PGA

và PCA sau 7 ngày nuôi cấy về: kích thước tản nấm, màu sắc hình dạng

của nấm Aspergillus flavus và Aspergillus niger trên môi trường.

• 3.3.2.7 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự phát triển của nấm Aspergillus sp

• Các isolate phân lập được: As flavus lúa, As flavus ngô, As flavus lạc,

As flavus đậu tương, As niger lúa, As niger ngô, As niger lạc, As niger

đậu tương

Trang 15

• Mỗi thí nghiệm là một isolate, gồm 3 công thức mỗi công thức nhắc lại 3 lần ( nấm được cấy trên môi trường PGA).

CT1: Cấy nấm ở nhiệt độ 14.50C

• Chỉ tiêu theo dõi: Theo dõi sự phát triển của nấm ở các ngưỡng nhiệt

độ khác nhau sau 7 ngày, đo kích thước tản nấm, màu sắc và hình dạng

của nấm Aspergillus flavus và Aspergillus niger.

3.4 Xử lý số liệu

Số liệu được xử lý trên chương trình Microsofl Excel trong Windows

và irristart 5.0

Trang 16

STT Tên khoa học Bộ MĐPB

Trang 17

Trang 18

STT Tên khoa học Bộ MĐPB

Trang 19

Trang 20

Bảng 4.5 Mức độ nhiễm nấm Aspergillus sp trên các

mẫu hạt lúa thu thập ở vùng Hà Nội và phụ cận.

Trang 21

Tên giống Tỉ lệ % hạt nhiễm nấm

Trang 26

Tên

nấm

Nhiệt độ T( 0 C)

Đường kính tản nấm (mm) sau cấy (ngày)

Trang 27

Môi trường

Trang 28

Môi trường

nuôi cấy Tên nấm

Trang 29

Môi trường nuôi

cấy

Tên nấm

Trang 30

Môi

trường

nuôi cấy

Tên nấm

Trang 31

Tên giống Tên nấm

Đối chứng xử lý nước javel

3%

tỉ lệ % hạt nhiễm

TLHN (%)

HLPT (%)

Trang 32

3%

TLHN (%)

HLPT (%) Ngô ngọt

Trang 33

Đối chứng xử lý nước javel

3%

TLHN (%)

HLPT (%)

Trang 34

Đối chứng Xử lý nước javel

3%

TLHN (%)

HLPT (%)

Trang 35

Tên nấm tên giống

Ngô ngọt F1 Ngô nếp tím F1 Ngô nếp trắng

TLHN (%) HLPT(%) TLHN(%) HLPT(%) TLHN(%) HLPT(%)

T viride

(10 9 bào tử /1g) 0.75 96.15 0 100 0.25 98.75

Trang 36

Tên

nấm công thức

TLHN (%) HLPT (%) N (%)TLH HLPT (%) N (%)TLH HLPT (%) N (%)TLH HLPT (%) TLHN (%) HLPT (%)

Trang 37

Tên

nấm tên giống

TLHN (%)

HLPT (%)

TLHN (%)

HLPT (%)

TLHN (%)

HLPT (%)

As

flavus

Daconil 75WP 1% 6 89.57 4.5 91.67 5 91.388 Vicarben 50WP 1% 1.75 96.97 0.75 98.61 3 94.83

T viride

(10 9 bào tử /1g) 0.25 99.27 0 100 0.75 97.78

Trang 38

5.1 Kết luận

1 Trên các mẫu hạt lúa, ngô, lạc, đậu tương thu thập được thu năm 2013 tại vùng Hà Nội và phụ cận xuất hiện nhiều

loại nấm tuy nhiên nấm As flavus và As niger vẫn luôn đạt

tỷ lệ nhiễm cao nhất Trên hạt lúa nấm Aspergillus sp nhiễm

23.65%, trên ngô là 64.67% Trên hạt đậu tương là 80.25%

và trên lạc là 98.5%.

2 Các isolate của nấm As flavus phân lập được từ hạt lúa,

lạc, ngô, đỗ tương có sự khác biệt không lớn về hình thái và khả năng phát triển trên môi trường Tương tự các isolate của

nấm As niger cũng vậy tuy nhiên giữa các isolate của nấm

As flavus và isolate của nấm As niger lại có sự khác biệt rõ

ràng về màu sắc, hình dạng và đường kính tán nấm trên môi trường.

Trang 39

3 Trong cùng một isolate khi nuôi cấy trên cùng môi trường ở 3 nhiệt độ khác nhau: 14.50C, 24.50C 28.50C thì có sự sai khác lớn

về kích thước đường kính tản nấm Cụ thể ở 14.50C và 28.50C

đường kính tản nấm Aspergillus flavus lần lượt là 21, 87mm còn

Aspergillus niger là 26, 90mm.

4 Thuốc javel 3% có hiệu quả tốt trong việc xử lý hạt lúa, ngô,

lạc, đậu tương, hiệu lực phòng trừ tốt đối với cả 2 loài nấm

Aspergillus niger và Aspergillus flavus.

5 Biện pháp xử lý hạt giống bằng thuốc Daconil 75WP,

Vicacben 50WP với liều lượng khuyến cáo trước khi gieo hạt

cho hiệu quả cao trong phòng trừ As flavus và As niger đặc biệt

là Vicacben 50WP.

6 Nấm đối kháng T.viride cũng cho khả năng phòng trừ As

flavus và As niger trên hạt với hiệu lực cao cụ thể trên ngô hiệu

lực phòng trừ đạt từ 96.15% - 100%, trên lạc: 95.54% - 100% và trên đậu tương hiệu lực phòng trừ đạt từ 97.41% - 100%

Trang 40

1 Do thời gian thực hiện đề tài còn hạn chế nên chúng tôi chỉ bước đầu xác định được thành phần và mức độ nhiễm các loài nấm gây hại trên hạt lúa, lạc, ngô, đậu tương Cần tiếp tục theo dõi, nghiên cứu các loài nấm gây hại có khả năng sản sinh ra

độc tố gây ngộ độc cho con người và gia súc như As flavus.

2.Nghiên cứu, lai tạo, nhập nội có chọn lọc những giống sạch bệnh đưa vào sản xuất, nhằm hạn chế các giống kém chất lượng, bị nhiễm các loài nấm hại truyền qua hạt giống.

3 Nên xử lý hạt giống bằng thuốc hóa học trước khi gieo hạt, một số loại thuốc có thể dùng xử lý hạt trước gieo là Daconil 75WP Vicacben 50WP, T.viride, nước javel theo liều lượng khuyến cáo.

Trang 41

Ảnh 4.1: Nấm Aspergillus flavus

trên hạt Ảnh 4.2: Cành bào tử phân sinh nấm Aspergillus flavus

Trang 42

Ảnh 4.3: Nấm Aspergillus niger trên hạt Ảnh 4.4: Cành bào tử phân sinh nấm Aspergillus niger

Trang 43

Ảnh 4.5: Nấm Aspergillus

ficucum Ảnh 4.6: Cành bào tử phân sinh nấm Aspergillus ficucum

Trang 46

EM XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN!

Định dạng
Số trang	46
Dung lượng	15,58 MB