Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá gan trâu, bò (fasciolosis) tại huyện yên sơn, tỉnh tuyên quang và lựa chọn thuốc điều trị hiệu quả

bổ sung chế phẩm t-emb-1

Phần 1

MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết của đề tài

Từ xưa đến nay, trâu và bò luôn là vật nuôi không thể thiếu trong mỗigia đình Trâu, bò là loài vật không có tính cạnh tranh thức ăn với con người

và có thể chuyển đổi từ thức ăn đơn giản như cỏ rơm, rạ thành sữa và thịt.Không những thế, chúng còn cung cấp sức kéo và phân bón cho cây trồngtrong trồng trọt, góp phần làm giàu cho cuộc sống của người dân

Hiện nay, nước ta đang chuyển dần cơ cầu từ chăn nuôi trâu, bò càykéo sang chăn nuôi trâu, bò theo hướng kiêm dụng vừa lấy sữa vừa lấy thịt.Nhu cầu tiêu thụ thịt và sữa trâu, bò ngày càng tăng cao Thịt trâu béo cungcấp 2558 Kcal/kg, loại trung bình cung cấp 2080 Kcal/kg Sữa được xếp vàoloại thực phẩm cao cấp vì nó hoàn chỉnh về dinh dưỡng và dễ tiêu hóa Đàntrâu, bò của nước ta ở thời điểm 1/4/2011 ước đạt 8,5 triệu con giảm 4,6% socùng kỳ Tuy số lượng đầu con giảm, nhưng sản lượng thịt sản xuất tại thờiđiểm 1/4/2011 lại tăng cụ thể: Thịt bò tăng 4,8%, thịt trâu tăng 9,3% Chính vìvậy, việc tăng số lượng đàn trâu, bò ở nước ta là rất quan trọng Hiện nay đàntrâu, bò ở nước ta đang tăng chậm không chỉ bởi vì do lai tạo trong truyềngiống, khả năng chống chịu giá rét trong mùa đông, kỹ thuật chăm sóc củangười dân mà còn do các loại bệnh Ngoài những bệnh truyền nhiễm phổ biếnnhư Lở mồm long móng, Nhiệt thán, Tụ huyết trùng đàn trâu, bò ở nước tacòn giảm bởi các bệnh ký sinh trùng

Bệnh sán lá gan (Fasciolosis) do sán Fasciola hepatica và Fasciola gigantica ký sinh trong gan và ống dẫn mật gây ra, ở nước ta chủ yếu là do Fasciola gigantica Bệnh thường xảy ra ở thể mãn tính, ít gây chết, nhưng

làm gia súc gầy ốm, tiêu chảy kéo dài, giảm năng suất, dễ mắc các bệnhtruyền nhiễm khác Do nước ta là nước nhiệt đới gió mùa nên bệnh xảy raquanh năm, thời tiết nóng ẩm mưa nhiều tạo điều kiện cho ký chủ trung gianphát triển Vì vậy, bệnh được phát hiện ở khắp các tỉnh từ miền Bắc đến miềnNam nước ta Bình quân tỷ lệ nhiễm sán ở các vùng điều tra như sau: Vùngđồng bằng từ 19,6 % đến 61,3 %, vùng trung du từ 16,4 % đến 50,2 %, vùngven biển từ 13,7 % đến 39,6 %, vùng núi từ 14,7 % đến 44,0 % (theo PhanĐịch Lân, 1994 [13])

Gần đây, bệnh sán lá gan lớn trên người đã được phát hiện ở khắpcác tỉnh thành trong cả nước Vì vậy, việc xác định tình hình bệnh sán lágan trên đàn trâu, bò để có biện pháp điều trị bệnh đạt kết quả cao là mộtyêu cầu cấp thiết.

Xuất phát từ yêu cầu thực tế của sản xuất chăn nuôi trâu, bò, chúng tôi

thực hiện đề tài: “Nghiên cứu dặc điểm dịch tễ bệnh Sán lá gan trâu, bò (Fasciolosis) tại huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang và lựa chọn thuốc điều trị hiệu quả”.

1.2 Mục đích của đề tài

- Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá gan trâu, bò tại một số xãcủa huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang

- Lựa chọn thuốc đặc hiệu điều trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò

1.3 Ý nghĩa của đề tài

- Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học: Kết quả đề tài lànhững thông tin khoa học bổ sung và làm sáng tỏ hơn những yếu tố liên quanđến sự phát sinh, phát triển của bệnh sán lá gan ở trâu, bò

- Ý nghĩa thực tiễn: Xác định được một số thuốc có hiệu lực và độ antoàn cao trong điều trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò, đề phòng được sự phát tán

và lây lan của mầm bệnh, từ đó giúp người chăn nuôi hạn chế được thiệt hại

do bệnh gây ra

Phần 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cơ sở khoa học của đề tài

2.1.1 Sán lá gan ký sinh ở trâu, bò

+ Ký chủ trung gian: Các loài ốc nước ngọt thuộc họ Lymnaea: Lymnaea auricularia, L swinhoei, L viridis, Radix ovata

- Vị trí ký sinh: Sán thường ký sinh ở ống dẫn mật, đôi khi thấy sán kýsinh ở tim, phổi, hạch lâm ba, tuyến tụy

2.1.1.2 Đặc điểm sinh học của sán lá Fasciola

* Vị trí của sán lá Fasciola trong hệ thống phân loại động vật học

Theo Skrjabin và cs (1963), Nguyễn Thị Lê và cs (1996), sán lá gan kýsinh và gây bệnh cho gia súc nhai lại được xếp trong hệ thống phân loại độngvật như sau:

Ngành Plathelminthes Schneider, 1873

Phân ngành Platodes Leuckart, 1854

Lớp Trematoda Rudolphi, 1808 Phân lớp Prosostomadidea Skrjabin và Guschanskaja, 1962

Bộ Fasciolida Skrjabin et Schulz, 1937 Phân bộ Fasciolata Skrjabin et Schulz, 1937

Họ Fasciolidae Railliet, 1895 Phân họ Fasciolinae Stiles et Hassall, 1898 Giống Fasciola Linnaeus, 1758

Loài Fasciola hepatica (Linnaeus, 1758) Loài Fasciola gigantica (Cobbold, 1885)

* Đặc điểm hình thái của sán lá Fasciola

Sán lá gan lưỡng tính, có thể thụ tinh chéo hoặc tự thụ tinh Sán có giácmiệng và giác bụng, giác bụng không nối với cơ quan tiêu hoá Sán không có

hệ hô hấp, tuần hoàn và cơ quan thị giác (ở giai đoạn mao ấu có dấu vết sắc tốmắt) Hệ sinh dục rất phát triển với cả bộ phận sinh dục đực và cái trong cùngmột sán Tử cung sán chứa đầy trứng

Có hai loài sán lá gan thuộc giống Fasciola là: F gigantica, F hepatica.

- Fasciola gigantica (Linnaeus, 1758) có chiều dài thân gấp ba lần

chiều rộng, “vai” không có hoặc nhìn không rõ rệt, nhánh ruột chia toả ranhiều nhánh ngang

Fasciola gigantica dài 25 - 75 mm, rộng 3 - 12 mm, u lồi hình nón của đầu là phần tiếp theo của thân, vì vậy nó không có “vai” như loài F.hepatica của giống Fasciola Hai rìa bên thân sán song song với nhau, đầu cuối của

thân tù Giác bụng tròn lồi ra, ruột, tuyến noãn hoàng, buồng trứng và tinhhoàn đều phân nhánh Trứng hình bầu dục, màu vàng nâu, phôi bào to xếp kín

vỏ Kích thước trứng 0,125 - 0,170 × 0,06 - 0,10 mm

- Fasciola hepatica (Linneaus, 1758): Trái với loài trên, loài này thân

rộng và nhô ra phía trước làm cho sán có “vai”, nhánh ruột chia ít nhánhngang hơn

Fasciola hepatica dài 18 - 51 mm, rộng 4 - 13 mm, phần thân trước

nhô ra, tạo cho sán có vai bè ra hai bên Hai rìa bên thân sán không song songvới nhau mà phình ra ở chỗ vai rồi thót lại ở đoạn cuối thân Những ống dẫntuyến noãn hoàng chạy ngang, chia vùng giữa của sán thành phần trước vàphần sau thân Phần sau thân có tinh hoàn và bộ phận sinh dục đực Tinh hoànphân nhiều nhánh xếp phía sau thân Tử cung ở giữa phần thân trước tạo nênmột mạng lưới dày đặc Buồng trứng phân nhánh nằm ở sau tử cung

Trứng sán có hình thái, màu sắc tương tự trứng của loài F gigantica, kích

thước 0,13 - 0,145 × 0,07 - 0,09 mm (Nguyễn Thị Kim Lan và cs, 2008 [11])

* Đặc điểm vòng đời của sán lá Fasciola

Chu kỳ sinh học của sán lá Fasciola đã được Leukart (1882) nghiên

cứu ở Đức và Thomas (1882) nghiên cứu ở Anh

Fasciola trưởng thành ký sinh trong ống dẫn mật của trâu, bò, dê Sau

khi thụ tinh, mỗi sán đẻ hàng chục vạn trứng Những trứng này cùng dịch mậtvào ruột, sau đó theo phân ra ngoài gặp điều kiện thuận lợi: được nước mưacuốn trôi xuống các vũng nước, hồ, ao, suối, ruộng nước… nhiệt độ 15 -

30oC, pH = 5 - 7,7, có ánh sáng thích hợp… sau 10 - 25 ngày trứng nở thành

Miracidium bơi tự do trong nước Nếu thiếu ánh sáng, Miracidium không có khả năng thoát vỏ nhưng vẫn tồn tại đến 8 tháng trong vỏ, Miracidium có hình

tam giác, xung quanh thân có lông di chuyển được trong nước Khi gặp vật

chủ trung gian thích hợp (ốc Lymnaea), Miracidium xâm nhập vào cơ thể ốc

và phát triển thành bào ấu (Sporocyst) Những Miracidium không gặp vật chủ

trung gian thì rụng lông, rữa dần và chết

Bào ấu (Sporocyst) hình túi, màu sáng, được bao bọc bởi lớp màng

mỏng, các tế bào ngọn lửa hoạt động hình thành hầu, ống ruột và các đámphôi Trong một ốc có thể có 1 - 2 ấu trùng Khoảng 3 - 7 ngày, bào ấu sinh

sản vô tính cho ra nhiều Redia (lôi ấu) Một bào ấu sinh ra từ 5 - 15 lôi ấu.

Redia hình suốt chỉ, ít hoạt động, có miệng, hầu, ruột, hình túi đơn giản, Có hai hệ: Redia thế hệ I và Redia thế hệ II cùng phát triển trong ốc - vật

chủ trung gian Ở nhiệt độ 16oC hoặc thấp hơn, lôi ấu chỉ sản sinh Redia I và

dừng phát triển Ở nhiệt độ phù hợp (20 - 30oC), sau 29 - 35 ngày, lôi ấu biến

thành vĩ ấu (Cercaria) Một Redia có thể sinh ra 12 - 20 Cercaria.

Cercaria (vĩ ấu) là ấu trùng ở pha sống tự do của sán lá gan, có cấu tạo

thân hình tròn lệch, đuôi dài hơn thân, giúp vĩ ấu vận chuyển được dễ dàngtrong nước Cấu tạo của vĩ ấu gồm giác miệng, giác bụng, hầu, thực quản vàruột phân thành hai nhánh

Từ khi Miracidium chui vào ốc đến khi phát triển thành Cercaria cần khoảng 50 - 80 ngày Sau khi thành thục, Cercaria thoát khỏi ốc, ra môi

trường ngoài bơi tự do trong nước, có kích thước 0,28 - 0,30 mm chiều dài và

0,23 mm chiều rộng Sau vài giờ bơi trong nước, Cercaria rụng đuôi, tiết chất

nhầy xung quanh thân, chất nhầy gặp không khí khô rất nhanh Lúc này

Cercaria đã biến thành Adolescaria.

Adolescaria hình khối tròn, bên trong chứa phôi hoạt động Phôi có giác miệng, giác bụng, ruột phân nhánh và túi bài tiết, Adolescaria thường ở

trong nước hoặc bám vào cây cỏ thuỷ sinh Nếu trâu, bò, dê nuốt phải

Adolescaria, vào đến dạ dày và ruột, lớp vỏ ngoài bị phân huỷ, ấu trùng được

giải phóng và di chuyển đến ống mật bằng ba con đường:

- Một số ấu trùng dùng tuyến xuyên chui qua niêm mạc ruột, vào tĩnhmạch ruột, qua tĩnh mạch gan, xuyên qua nhu mô vào ống mật

- Một số ấu trùng khác cũng dùng tuyến xuyên chui qua thành ruột vàoxoang bụng, đến cửa gan, xuyên qua vỏ gan vào ống mật

- Một số ấu trùng từ tá tràng ngược dòng dịch mật để lên ống dẫn mật.Sau khi vào ống dẫn mật, ấu trùng ký sinh ở đó và phát triển thành sán

lá gan trưởng thành Theo Skerman (1996), thời gian sán lá gan hoàn thành

vòng đời là 92 - 117 ngày, Fasciola trưởng thành có thể ký sinh trong ống dẫn

mật của súc vật nhai lại từ 3 - 5 năm, có khi tới 11 năm

Tóm tắt sơ đồ vòng đời của sán lá Fasciola

Nang ấu

Rời KCTG sau2giờ

20-28 ngày

Vĩ ấu

(lơ lửng trong nước hoặc bám vàocây cỏ thuỷ sinh)

2.1.2 Đặc điểm của bệnh do sán lá Fasciola gây ra ở trâu, bò

Trâu, bò bị bệnh sán lá gan thể hiện những biến đổi cơ bản ở gan và

ống dẫn mật do tác động của Fasciola gây ra.

2.1.2.1 Đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá Fasciola ở trâu, bò

Bệnh sán lá gan phổ biến khắp các châu lục và nhiều nước trên thế giới

Ở Việt Nam, bệnh thấy ở khắp các tỉnh thành trong cả nước

Houmeder (1938) đã điều tra và thấy, trâu, bò, dê, cừu, thỏ ở miền Bắc

Việt Nam đều nhiễm sán lá F gigantica theo tỷ lệ thứ tự là 64,7 %; 23,5 %;

37 %; 52,94 %; 14,28 %

Đoàn Văn Phúc và cs (1980) [21] đã kiểm tra phân của 64 bò tại trại

bò sữa Hà Nội, thấy tỷ lệ nhiễm sán Fasciola là 73,43% Tác giả còn cho

biết, bệnh sán lá gan đã ảnh hưởng rõ rệt đến sức khoẻ và sản lượng sữacủa đàn bò

Đoàn Văn Phúc và cs (1995) [22] cho biết, trâu bò thuộc khu vực HàNội nhiễm sán lá gan với tỷ lệ 53,41 %

Kết quả điều tra trâu, bò ở một số địa phương xung quanh Hà Nội, BắcGiang, Thái Nguyên, Hoà Bình, tỷ lệ nhiễm sán lá gan là 44,53 % Trong đó,trâu nhiễm 33,92 %, bò nhiễm 54,21 % (Lương Tố Thu và Bùi Khánh Linh,

1996 [29])

Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan ở trâu, bò phụ thuộc vào những yếu

tố sau:

- Yếu tố thời tiết, khí hậu và mùa vụ

Thời tiết, khí hậu của một vùng, một khu vực có liên quan trực tiếp đến

sự tồn tại và phát triển của ốc - vật chủ trung gian của sán lá gan Điều kiện

ẩm ướt, mưa nhiều, tạo môi trường thuận lợi giúp ốc nước ngọt sống và sinhsản thuận lợi

Trịnh Văn Thịnh (1963) [26], Trịnh Văn Thịnh và cs (1978) [27], PhạmVăn Khuê và Phan Lục (1996) [5], Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [9]…đều cho biết, trâu, bò nhiễm sán lá gan thường tăng lên vào mùa vật chủ trunggian phát triển Những năm mưa nhiều, tỷ lệ nhiễm sán lá gan tăng lên so vớinhững năm nắng ráo khô hạn Mùa vụ gắn liền với sự thay đổi thời tiết khíhậu Mùa hè thu, số gia súc bị nhiễm sán lá gan tăng cao hơn các mùa kháctrong năm Cuối mùa thu và mùa đông bệnh thường phát ra

- Yếu tố vùng và địa hình

Vùng và địa hình là hai khái niệm khác nhau, song có liên quan chặtchẽ với nhau Các vùng khác nhau có địa hình không giống nhau Địa hình làyếu tố quan trọng quyết định sự khác nhau giữa các vùng

Các vùng khác nhau trên thế giới nói chung và Việt Nam nói riêng đều

có bốn loại địa hình: ven biển, đồng bằng, trung du và miền núi

Hầu hết các nhà ký sinh trùng học thống nhất rằng, gia súc nhai lại ởvùng đồng bằng nhiễm sán lá gan nhiều nhất, tỷ lệ và cường độ nhiễm giảmdần đối với đàn gia súc ở vùng ven biển, vùng trung du và vùng núi Nguyênnhân dẫn đến quy luật này, các tác giả Trịnh Văn Thịnh, 1963 [25]; PhạmVăn Khuê và cs, 1996 [5]; Soulsby, 1982 [39]; Kaufmann, 1996 [38] đều chorằng: vùng đồng bằng có nhiều hồ, ao, kênh rạch, tạo điều kiện thuận lợi cho

ốc - vật chủ trung gian sống và sinh sản Các kiểu địa hình khác thì vấn đềnày hạn chế hơn so với đồng bằng

- Yếu tố loài và tuổi vật chủ cuối cùng

Súc vật nhai lại đã được thuần hoá như trâu, bò, dê, cừu đều nhiễm sán

lá gan Fasciola Ngoài ra, súc vật hoang dã cũng nhiễm sán lá này (hươu, nai, hoẵng…) Cũng có những trường hợp thỏ, ngựa, lợn nhiễm Fasciola, ngay cả

người cũng có thể nhiễm sán

Theo Trịnh Văn Thịnh và cs (1978) [27], Phạm Văn Khuê và cs (1996)[5], loài súc vật nhiễm sán nhiều nhất là trâu (79,6%), bò ít hơn (36%), dê ítnhất (20%) Sở dĩ trâu nhiễm sán lá gan nhiều nhất là do đặc tính ưa nước củachúng (thích ăn gần chỗ có nước, đằm tắm trong nước và uống nước ở vũng,

ao, kênh rạch), trong khi đặc điểm của bò và dê ít ưa nước hơn

Về mối liên quan giữa tỷ lệ, cường độ nhiễm sán lá gan với tuổi vậtchủ, các tác giả đều thống nhất rằng, tuổi súc vật càng cao thì tỷ lệ và cường

độ nhiễm càng tăng lên Súc vật tuổi càng tăng lên (thời gian sống càng dài)thì sự tiếp xúc với môi trường ngoại cảnh càng nhiều, cơ hội gặp và nuốt phải

nang ấu (Adolescaria) càng cao Mặt khác, sán Fasciola trưởng thành có thời

gian ký sinh ở súc vật nhai lại tương đối dài (3 - 5 năm, thậm chí tới 11 năm)

Đó chính là cơ sở khoa học giải thích cho quy luật nhiễm theo tuổi vật chủ

của sán lá Fasciola spp.

Phan Địch Lân (1994) [13] ; (2004) [14], cho biết: Ở trâu dưới 3 tuổi tỷ

lệ nhiễm sán nhiễm sán lá gan từ 17,20 - 22,00%; trâu 3 - 5 tuổi nhiễm từ31,20 - 40,20%, trâu 5 - 8 tuổi nhiễm từ 42,40% - 57,50%, trâu trên 8 tuổinhiễm từ 56,80 - 66,30%, trâu ở độ tuổi phế thải (loại thải), khi mổ khám thấy

tỷ lệ cao tới 84,60% (những trâu này bị bệnh rất nặng, gan phải huỷ bỏ toàn

bộ do có quá nhiều sán ký sinh)

Nguồn reo rắc bệnh chủ yếu là súc vật nuôi (trâu, bò, dê, cừu…) và

những dã thú mang Fasciola Trứng sán lá gan theo phân của súc vật ra ngoài

tự nhiên Hàng năm, mỗi sán lá gan ký sinh đẻ khoảng 6000 trứng Vì vậy,mỗi súc vật mang sán hàng năm thải khối lượng trứng khá lớn ra đồng cỏ vàcác bãi chăn thả Những đồng cỏ ẩm thấp, lầy lội là những nơi cần thiết đểmầm bệnh phát triển và xâm nhập vào súc vật, đồng thời thuận lợi cho trứng

nở thành Miracidium và thuận lợi cho vật chủ trung gian của Fasciola tồn tại

và phát triển

- Vật chủ trung gian

Sự phân bố các loài ốc - vật chủ trung gian của sán lá gan phụ thuộcvào các vùng địa lý khác nhau Theo Phạm Văn Khuê và Phan Lục (1996) [5],Kaufmann (1996) [38], vật chủ trung gian của sán lá gan là các loài ốc nước

ngọt họ Lymnaea: L auricularia, L swinhoei, L siridis, Galba truncatula, Radix ovata…

Theo Jorgen Hansen và cs (1994) [37], nhiệt độ thích hợp nhất cho sựphát triển của ốc là 15 - 260C, khi ở nhiệt độ này chúng đẻ số lượng rất lớn.Trứng nở trong vòng 2 tuần và sau 1 tháng thành ốc trưởng thành Một con ốctrong vòng 10 - 12 tuần có thể sinh sản ra hàng ngàn con ốc Dưới 100C, ốckhông phát triển và ngừng hoạt động Tuy nhiên, ốc có thể chui vào bùn vàsống trong điều kiện bất lợi nhiều tháng

Nguyễn Trọng Kim (1997) [7] đã khảo sát đặc điểm sinh học của ốc

-vật chủ trung gian của F gigantica ở miền Bắc Việt Nam Tác giả cho biết, vật chủ trung gian của sán lá Fasciola là hai loài ốc nước ngọt thuộc giống Lymnaea với tên gọi là ốc vành tai (L swinhoei) và ốc chanh (L viridis) Loài

L swinhoei có vỏ mỏng, dễ vỡ, không có nắp miệng, kích thước 20 mm, vòng

xoắn cuối cùng rất lớn, chiếm gần hết phần thân, vỏ loe ra như vành tai Loài

L viridis cũng có vỏ mỏng, không có nắp miệng, kích thước 10 mm, vỏ dễ

vỡ, có 4 - 5 vòng xoắn, vòng xoắn cuối cùng lớn

Ốc L viridis thường sống ở những nơi nước xâm xấp, đẻ 7 - 10 trứng, sau 7 ngày nở thành ốc con Ốc L swinhoei thường sống trôi nổi ở cống rãnh,

ao, hồ, đẻ trứng quanh năm và quanh năm có ốc con được nở ra

Phan Địch Lân (1994, 2004), ([13], [14]) cho biết: Ốc L swinhoei phân

bố nhiều nơi ở vùng đồng bằng, trong khi ốc L viridis phân bố nhiều ở vùng

núi, trung du và ven biển Theo kết quả nghiên cứu của tác giả thì hai loài ốcnày đều xuất hiện trong cả 12 tháng của năm, nhưng mật độ (tính trên 1m2)

khác nhau theo vùng: Vùng đồng bằng, mật độ ốc L swinhoei cao hơn và phân bố đều trong năm, còn ốc L viridis thì xuất hiện với mật độ cao hơn ở các vùng núi, trung du, ven biển Từ đó, tác giả nhận xét rằng, L swinhoei chịu nước hơn, còn L.viridis chịu cạn hơn.

Sự tồn tại và phát triển quanh năm, ở tất cả các vùng của ốc - vật chủtrung gian là điều kiện quan trọng nhất làm cho tỷ lệ nhiễm sán lá gan của súcvật nhai lại ở nước ta cao và phổ biến ở tất cả các vùng

- Sức đề kháng của trứng và ấu trùng sán lá gan

Trứng sán lá gan được thải theo phân súc vật nhai lại ra môi trườngngoại cảnh Trứng sán rất nhạy cảm với điều kiện khô hạn và tác động trựctiếp của ánh sáng mặt trời Ở trong phân khô, phôi ngừng phát triển, trứng bịchết sau 8 - 9 ngày

Trong điều kiện khô hạn, vỏ trứng bị nhăn nheo, biến đổi hình dạng

Miracidium bị chết trong vỏ trứng sau 1 - 1,5 ngày Ở môi trường ẩm ướt,

trứng có khả năng sống khá lâu (trong phân hơi ẩm, trứng tồn tại đến 8tháng) Dưới ánh nắng chiếu trực tiếp, trứng chết nhanh Phôi bị chết sau 2ngày ở nhiệt độ thấp (- 50C → - 150C) Nhiệt độ 10 - 200C trứng ngừng pháttriển Nhiệt độ 40 - 500C, phôi chết sau vài phút (Phạm Văn Khuê và cs, 1996[5])

Khi phát triển đến giai đoạn nang ấu (Adolescaria), sức đề kháng của chúng tăng lên rõ rệt, Adolescaria có khả năng tồn tại ở nhiệt độ - 40C → -

60C Ở điều kiện nhiệt độ bình thường, những Adolescaria có trong cỏ khô bị

ẩm và trong môi trường nước có thể tồn tại đến trên 5 tháng

2.1.2.2 Cơ chế sinh bệnh của bệnh sán lá Fasciola

Theo các nhà ký sinh trùng học, sán lá gan gây bệnh ở vật chủ bằng cáctác động cơ học, tác động của độc tố, sự chiếm đoạt chất dinh dưỡng và tácđộng mang trùng Khi súc vật mới bị bệnh, sán non di hành trong cơ thể làmtổn thương ở ruột, thành mạch máu, nhu mô gan Một số ấu trùng có thể theomáu di chuyển “lạc chỗ” đến phổi, lách, cơ hoành, tuyến tuỵ… gây tổnthương và xuất huyết (nặng hoặc nhẹ) Sán non xuyên qua các nhu mô gan,làm tổ chức gan bị phá hoại, tạo ra những đường di hành đầy máu và mảnh tổchức gan bị phá huỷ Gan bị viêm từ nhẹ đến nặng tùy theo số lượng ấu trùngnhiễm vào cơ thể Súc vật bị thiếu máu do xuất huyết, có thể chết do mất máu.

Tác động cơ giới của sán còn tiếp tục khi sán đã vào ống dẫn mật, sántiếp tục tăng lên về kích thước và phát triển thành sán trưởng thành Sántrưởng thành thường xuyên kích thích lên niêm mạc ống dẫn mật bằng các gaicutin trên cơ thể, gây viêm ống dẫn mật Số lượng sán nhiều có thể làm tắcống dẫn mật, dịc mật ứ lại không xuống ruột được sẽ tràn vào máu, gây hiệntượng hoàng đản

Trong quá trình ký sinh, sán thường tiết độc tố, độc tố tác động vàothành ống dẫn mật và nhu mô gan, gây biến đổi đại thể và vi thể, làm tăng quátrình viêm Đồng thời, độc tố của sán còn hấp thu vào máu, gây hiện tượngtrúng độc toàn thân, gây huỷ hoại máu, làm biến chất protein trong máu, làmgiảm Albumin, và tăng globulin Độc tố của sán còn làm tăng nhiệt độ cơ thể,tăng bạch cầu (đặc biệt là bạch cầu ái toan), tác động vào thần kinh, làm chocon vật có triệu chứng thần kinh (run rẩy, đi xiêu vẹo…) Độc tố của sán lágan tác động vào thành mạch máu, làm tăng tính thấm của thành mạch, gâyhiện tượng thủy thũng, làm cho máu đặc lại Cũng do tác động của độc tố nêngiữa những tiểu thuỳ gan có hiện tượng thấm nhiễm huyết thanh và tế bào,hình thành nên các mô liên kết mới dọc theo các vách ngăn của tiểu thuỳ gan

và quanh ống mật, vì vậy những ống mật này cũng dày lên Quá tình viêm kéodài làm cho các tế bào tổ chức tăng sinh, thay thế những tế bào nhu mô gan,gây hiện tượng xơ gan và teo gan Khi súc vật nhiễm sán lá gan nặng, hiệntượng xơ gan chiếm diện tích lớn của gan, làm cho chức năng của gan bị pháhủy Từ đó dẫn đến hàng loạt rối loạn khác như: rối loạn cơ năng dạ dày -ruột, thiếu máu, suy nhược, gầy dần, cổ chướng, xoang phúc mạc tích nước

Một tác động quan trọng của Fasciola khi ký sinh ở vật chủ là chiếm

đoạt dinh dưỡng Dinh dưỡng của sán lá gan là máu của súc vật mà nó kýsinh Bằng phương pháp phóng xạ người ta đã thấy mỗi sán ký sinh ở ống dẫnmật lấy 0,2 ml máu mỗi ngày Như vậy, nếu súc vật nhiễm ít sán thì vai tròchiếm đoạt chất dinh dưỡng không rõ, nhưng nếu súc vật có hàng trăm, hàngnghìn sán ký sinh thì lượng máu mất đi rất nhiều

Ngoài các tác động gây bệnh trên, trong khi di hành, sán non còn mangtheo các loại vi trùng từ bên ngoài vào máu, gan và những cơ quan khác, gâynhững bọc mủ hoặc gây bệnh truyền nhiễm khác

Tất cả những tác động trên của sán lá Fasciola làm cho sức đề kháng

của cơ thể trâu, bò giảm sút nghiêm trọng, dễ mắc các bệnh khác, hoặc làmcho các bệnh đang có trong cơ thể súc vật nặng thêm

2.1.2.3 Triệu chứng bệnh sán lá Fasciola ở trâu, bò

Triệu chứng lâm sàng là biểu hiện ra bên ngoài bởi các tác động gây

bệnh của sán Fasciola Triệu chứng ở trâu, bò biểu hiện nặng hay nhẹ còn phụ

thuộc vào cường độ nhiễm sán, tình trạng sức khoẻ và tuổi của súc vật, tìnhtrạng chăm sóc quản lý…

- Thể cấp tính thường gặp ở trâu, bò 1,5 - 2 năm tuổi (Phạm Văn Khuê

và cs, 1996 [5]), trong giai đoạn sán non di hành hoặc khi nuôi dưỡng chămsóc kém

Trâu, bò biểu hiện: Ăn uống kém, suy nhược, chướng bụng, ỉa chảy,miệng hôi, sốt, gan sưng to và đau, thiếu máu, vàng da, đôi khi có triệu chứngthần kinh (lảo đảo, xiêu vẹo) Súc vật có thể chết do xuất huyết nặng, trúngđộc và suy nhược cơ thể

- Thể mãn tính thấy phổ biến ở trâu, bò trưởng thành, khi trâu, bò đượcnuôi dưỡng tốt và sán đã ở giai đoạn trưởng thành, ký sinh trong ống dẫn mậtvới số lượng ít

Trâu, bò biểu hiện: Ăn uống kém, suy nhược, niêm mạc nhợt nhạt, lông

xù và dễ rụng (nhất là lông ở vùng dọc hai bên sườn và dọc xương ức) Xuấthiện thủy thũng ở mí mắt, yếm, ngực, bộ phận sinh dục Con vật nhai lại yếu,khát nước, ỉa chảy xen kẽ táo bón, gầy yếu dần Giai đoạn sau đi tháo nhiềuhơn và gầy rất nhanh Kiểm tra lâm sàng thấy gan sưng to và đau Có thể thấyhiện tượng sảy thai ở bò cái bị bệnh, lượng sữa có thể giảm 30 - 50% Triệu

chứng thần kinh cũng có thể gặp song rất hiếm Bệnh kéo dài nhiều tháng,con vật có thể chết do suy nhược toàn thân

Nhìn chung, khi súc vật bị bệnh sán lá gan kéo dài, cơ thể suy nhượcnặng, nếu không được điều trị kịp thời thì xúc vật thường chết

2.1.2.4 Bệnh tích của trâu, bò mắc bệnh sán lá Fasciola

Đối với trâu, bò nhiễm nặng, bệnh tích thấy rõ là viên gan cấp tính, gansưng to, màu vàng sẫm, xung huyết Trên mặt gan có thể thấy những đường dihành của sán non tạo thành những vệt đỏ thẫm, dài 2 - 4 mm, trong đó sánnon với số lượng nhiều Lớp thanh mạc xuất huyết nhẹ, đôi khi có tơ huyết.Khi nhiễm nặng thấy viêm phúc mạc, gan xuất huyết nhiều, niêm mạc mắtnhợt nhạt

Ở những trâu, bò nhiễm sán lá gan đã lâu, gan viêm mãn tính, nhữngchỗ nhu mô gan bị phá hủy có sẹo mầu vàng xám Gan xơ cứng, niêm mạcống dẫn mật dày, có hiện tượng canxi hoá mặt trong thành ống Lòng ống dẫn

mật dãn rộng, chứa đầy dịch mật màu nâu và sán Fasciola Khi ống dẫn mật

bị canxi hoá nhiều, sán ở chỗ đó thường bị chết hoặc chuyển đến chỗ ít biếnđổi hơn

Ngoài gan và ống mật, đôi khi còn thấy sán ở phổi trâu, bò Trường hợpnày sán lá ở trong những bọc bằng quả trứng gà hoặc nhỏ hơn, trong chứadịch màu nâu (Vũ Đức Hạnh, 2009 [1])

Quan sát biến đổi vi thể do sán F gigantica ở dê được Nguyễn Thị

Kim Lan (2000) [10] mô tả như sau:

Sán lá gan ký sinh ở ống dẫn mật với số lượng nhiều làm tắc ống mật,làm cho dịch mật ứ lại xung quanh các huyết quản, gây ra huyết khối trongcác mạch quản gian thùy

Sán lá gan ký sinh ở ống dẫn mật làm cho dịch mật ứ lại, kích thích tếbào biểu mô ống dẫn mật tăng sinh, hình thành các ống dẫn mật phụ

Thành ống dẫn mật bị sơ hoá, dày và xù xì Tế bào biểu mô của ống

mật bị đứt nát do tác động của sán Fasciola.

Do ống dẫn mật bị tắc, dịch mật ứ lại ở quãng cửa, quan sát thấy rõmàu vàng của dịch mật

Tác động cơ học và độc tố của sán Fasiola kích thích, là tăng sinh các

tế bào viêm và các tế bào xơ xung quanh ống mật, đặc biệt là tăng sinh nhiềubạch cầu ái toan

Thành ống dẫn mật cũng có những biến đổi rõ rệt Đó là sự tăng sinhcác tế bào xơ và tế bào viêm ở thành ống mật Sự có mặt của rất nhiều bạchcầu ái toan ở thành ống mật rất đặc trưng cho phản ứng của cơ thể đối với tácđộng của giun sán

Theo Nguyễn Hữu Hưng (2011) [4], bệnh tích vi thể của gan nhiễm sánqua phương pháp làm tiêu bản vi thể tại phòng thí nghiệm cho thấy: Sán non

cư trú trong nhu mô gan và ăn tổ chức, số lượng ống dẫn mật tăng sinh Nhu

mô gan xuất huyết, ứ huyết Gan vàng, một số vùng trên nhu mô gan bị hoại

tử Xuất hiện các nốt mủ trong nhu mô gan, các hạt mỡ to nhỏ chứa đầy trong

tế bào gan Trong nhu mô gan xuất hiện các tổ chức xơ

Nghiên cứu bệnh sán lá gan ở trâu, bò, Phan Địch Lân (1994, 2004),([13], [14]), cho biết: khi mổ khám trâu, bò bị bệnh sán lá gan thấy có bệnh tíchđặc biệt là gan to hơn nhiều so với bình thường (gấp 2 - 3 lần) Gan màu đỏsẫm, biểu hiện sung huyết, dưới vỏ gan thấy ứ nước, trên mặt gan còn giữ lạinhững đường ngoằn nghèo do sán di hành Tổ chức liên kết phát triển tạo nênnhững sẹo đặc biệt Trong gan còn thấy những sán non không đến được ốngdẫn mật, đóng kén to bằng hạt đậu và chết trong kén Cắt tổ chức gan thấy lạoxạo do biến chất thoái hoá Do tăng sinh tổ chức liên kết nên gan cứng và xơgan Trường hợp viêm phúc mạc bụng chứa nhiều nước (cổ chướng)

2.1.2.5 Chẩn đoán bệnh sán lá Fasciola ở trâu, bò

Việc chẩn đoán có thể được tiến hành trên súc vật còn sống hoặc đãchết Tùy điều kiện thực tế mà áp dụng biện pháp phù hợp

- Đối với súc vật còn sống:

Để chẩn đoán bệnh do Fasciola gây ra, thường áp dụng các biện pháp

như: chẩn đoán lâm sàng, kết hợp đặc điểm dịch tễ, xét nghiệm phân con vậtnghi bệnh và chẩn đoán miễn dịch học

Triệu chứng lâm sàng của bệnh sán lá gan thường dễ thấy nhất là: Kiệtsức, suy nhược, rụng lông, phù thũng ở ngực, ức… Tuy nhiên, các biểu hiện

trên không chỉ thấy ở bệnh do Fasciola gây nên Vì vậy, triệu chứng lâm sàng

không phải là căn cứ duy nhất để kết luận bệnh

Những dẫn liệu dịch tễ học của bệnh cần xem xét là: yếu tố mùa vụ,vùng và tuổi súc vật bệnh Song, những dẫn liệu này chỉ là những thông tincần xem xét trong chẩn đoán chứ không phải là sở cứ quan trọng nhất trongchẩn đoán

Việc xét nghiệm phân tìm trứng Fasciola là biện pháp có tính quyết

định trong chẩn đoán Thường dùng phương pháp gạn rửa nhiều lần TheoPhạm Văn Khuê và cs (1996) [5], phương pháp này phổ biến nhưng chưa phát

hiện được tất cả mọi gia súc nhiễm sán Fasciola, nhất là ở những trâu, bò

nhiễm ít hoặc ở giai đoạn sán còn non Khi xét nghiệm phân, cần phân biệt

trứng Fasciola với trứng Paramphistomum ký sinh ở dạ cỏ (phân biệt về màu

sắc, hình dạng, tế bào noãn hoàng và kích thước)

Đặc điểm hình thái Trứng Fasiola Trứng Paramphistomum

To đều và xếp kín trong vỏ trứng, ranh giới giữa các phôi bào rõ ràng

0,13 - 0,16 × 0,06 - 0,10 mm

Màu tro nhạt Hình trứng, phình rộng ở giữa, thon về hai đầu không đều nhau, đầu nhỏ có nắp trứng Phôi bào trong trứng xếp không đều nhau, có khi dồn lại thành đám lớn,

0,13 - 0,15 × 0,16 - 0,08 mm

Phương pháp miễn dịch học để phát hiện súc vật nhiễm Fasciola đã

được sử dụng là: dùng kháng nguyên tiêm nội bì, căn cứ vào phản ứng nơitiêm để kết luận Các phương pháp như: phương pháp miễn dịch men ELISA,phương pháp miễn dịch huỳnh quang… Tuy nhiên, do khó khăn về phươngtiện và việc chế kháng nguyên chuẩn nên các phương pháp này còn ít đượcdùng trong bệnh ký sinh trùng nói chung và bệnh sán lá gan nói riêng

Phương pháp kiểm tra phân có một số hạn chế là không pháp hiện đượcsán non, ấu trùng của sán và độ đặc hiệu không cao Hiện nay các nhà khoa

học đang nghiên cứu ứng dụng phương pháp sinh học phân tử sử dụng chỉ thị

di truyền là AND hệ gen của nhân tế bào hoặc là hệ gen ty thể cho kết quả có

độ tin cậy cao, rất phù hợp để xác định chính xác loài Fasciola kí sinh tại gia

súc ở nước ta

- Đối với trâu, bò chết:

Khi trâu, bò chết, mổ khám tìm sán Fasciola ở giai đoạn ấu trùng và

trưởng thành trong ống dẫn mật, gan, xoang bụng… Phương pháp này chínhxác hơn cả, vì tìm thấy cả sán non ở giai đoạn di hành

2.1.2.6 Phòng và tri bệnh sán lá Fasciola cho trâu, bò

* Điều trị bệnh

Hiện nay, có thể tẩy sán lá gan cho trâu bò bằng một trong các loạithuốc sau:

- Thuốc Dertil: Dertil là thuốc có tác dụng đặc hiệu với sán lá gan

Fasciola, tên gọi khác: Menichlofolan, Bayer ME 3625, Bayer 9015A,

Bilevon M Dertil được bào chế thành viên to, màu xanh lá cây đậm ViênDertil “O” có chứa 100 mg hoạt chất, viên Dertil ”B” chứa 300 mg hoạt chất

Dertil có tác dụng diệt sán lá gan trưởng thành ở trâu bò, với liều caocòn diệt được cả sán non đang di hành trong nhu mô gan Thuốc chỉ cần dùngmột lần, không cần điều trị lặp lại Được chỉ định điều trị bệnh sán lá gan cấptính và mãn tính cho trâu, bò

Liều lượng:

Bò: 5 - 6 mg/kg TT; Trâu: 8 - 9 mg/kg TT

Cho từng cá thể uống thuốc, hoặc gói thuốc vào lá chuối non, đưa sâuvào miệng cho con vật nuốt

- Thuốc Fasiolid (tên khác: Fasciolidum)

Thuốc được bào chế dưới dạng dung dịch màu vàng nâu, chứa 25%

hoạt chất là Nitroxynil, Fasiolid có tác dụng tẩy sán lá gan Fasciola dạng

trưởng thành và các giun tròn đường tiêu hoá loài nhai lại, được chỉ định tẩysán lá gan cho trâu, bò

Liều lượng: 0,04 ml/ kg TT (1 ml /25 kg TT, tương đương 1mg hoạtchất/kg TT Tiêm dưới da Để tẩy sán lá gan, nên dùng thuốc 2 - 3 lần, cáchnhau 25 - 30 ngày.

- Thuốc Tolzan - F (chế phẩm của Oxyclozanid), được bào chế dướidạng dung dịch hoặc viên nén, dùng với liều 10 - 11 mg / kg TT Thuốc có tác

dụng đặc hiệu với sán Fasciola trưởng thành và sán non ở trâu, bò, dê, cừu.

- Thuốc Fasinex (chế phẩm của Trilabendazole): Thuốc có tác dụngdiệt cả sán non và sán trưởng thành ký sinh ở ống dẫn mật hoặc đang di hànhtrong các nhu mô gan

Fasinex được chỉ định dùng điều trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò

Liều lượng: 10 - 12 mg / kg TT Cho uống một lần duy nhất Thuốc cóhiệu lực cao và an toàn cho gia súc dùng thuốc

Ngoài các thuốc trên, Albendazole, Bithionol, Closantel cũng có tác

dụng tẩy sán lá Fasciola ở trâu, bò.

Lương Tố Thu và cs, 1997 [30] đã nhận định về các thuốc trị sán lágan và kết quả thử nghiệm ở trâu, bò Việt Nam Các tác giả khuyến cáorằng, trên thị trường Việt Nam hiện nay nên sử dụng Fasinex - 900 dạngviên (1 viên/75 - 100 kg TT) hoặc Fasinex - 900 dạng sữa (10 ml / 100 kgTT), cho hiệu lực cao

* Phòng bệnh

Cơ sở khoa học đề ra quy trình phòng ngừa tổng hợp bệnh sán lá gan

cho trâu, bò là: Phải nắm được cụ thể chu kỳ sinh học của sán lá Fasciola,

sinh học của ốc - vật chủ trung gian và tình hình dịch tễ của bệnh

- Ủ phân theo phương pháp sinh học, lợi dụng quá trình lên men sinhnhiệt các chất hữu cơ trong phân của hệ vi sinh vật để tiêu diệt trứng sán lágan trong phân trâu, bò Biện pháp này có hiệu quả và đơn giản nhất để phòng

bệnh do sán Fasciola gây ra.

- Xử lý các cơ quan có sán ký sinh: Nếu gan nhiễm nhiều sán phải huỷ

bỏ (chôn, rắc vôi bột, đốt) hoặc không huỷ bỏ mà để lại chế biến chín làmthức ăn gia súc

- Diệt vật chủ trung gian của sán lá Fasciola: Tháo cạn nước, làm khô

những đồng cỏ, bãi chăn lầy lội, ẩm ướt Dùng một số chất hoá học có khảnăng diệt ốc (vôi bột, sulfas đồng…), đẩy mạnh chăn nuôi thuỷ cầm (vịt,ngan, ngỗng) và cá trắm đen

- Tăng cường vệ sinh thức ăn, nước uống Không chăn thả trâu, bò ởnhững bãi chăn lầy lội, ẩm thấp, Nếu khó khăn về bãi chăn thả thì chỉ chănthả ở bãi chăn lầy lội, ẩm ướt 1,5 - 2 tháng, rồi phải chuyển sang chăn ở bãikhác Nếu lấy cỏ ở những chỗ ẩm ướt thì phải cắt cao hơn mặt nước để tránh

Adolescaria, sau đó phơi khô, bảo quản trong 6 tháng rồi cho gia súc ăn Nguồn nước uống phải sạch, không có vật chủ trung gian và Adolescaria.

- Không nhập trâu, bò từ vùng có bệnh, khi chưa kiểm tra và điều trịtriệt để

2.2 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước

2.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước

Theo kết quả của Nguyễn Đức Tân và cs (2010) [23] ở các tỉnh Namtrung bộ cho thấy tỷ lệ trâu, bò nhiễm sán lá gan là: Ở bò, bê là 47,16 %; ở

trâu là 37,74 % và tỷ lệ ốc Lymnaea viridis nhiễm ấu trùng sán là 1,03 %, tỷ

lệ nhiễm ấu trùng sán ở ốc Lymnaea swinhoei là 0,59 %.

Theo Trịnh Văn Thịnh (1962) thì tỷ lệ nhiễm sán lá gan trâu bò là 50 70% và kích thước trứng sán là 1,62 - 1,73 mm x 86 - 93 mm

Trịnh Văn Thịnh (1978) [27] cho biết, trâu trưởng thành mắc bệnh sán

lá gan do F.gigantica, tỷ lệ nhiễm tới 50 - 70% Theo Phan Địch Lân (1980)

mổ khám 1043 trâu ở Thái Nguyên, số trâu nhiễm sán lá gan là 57%, trong đó

có nhiều gan phải huỷ bỏ do số lượng sán quá nhiều Kết quả điều tra ở huyệnBình Lục - Nam Hà, tỷ lệ nhiễm sán lá gan ở trâu là 51,2 - 57,5%.

Phan Địch Lân (1994) [13] đã điều tra 7359 trâu, bò ở một số tỉnhmiền Bắc Việt Nam, kết quả thấy: Trâu, bò ở vùng đồng bằng nhiễm sán lágan cao nhất, sau đó đến vùng trung du, ven biển và miền núi (bình quân tỷ lệnhiễm sán ở các vùng điều tra như sau: Vùng đồng bằng từ 19,6% đến 61,3%,vùng trung du từ 16,4% đến 50,2%, vùng ven biển từ 13,7% đến 39,6%, vùngnúi từ 14,7% đến 44,0%)

Phan Địch Lân (1994) [13]; (2004) [14], đã tổng hợp và cho biếtnước ta được xếp vào một trong 5 nước ở châu Á trồng lúa nước có đàntrâu, bò nhiễm bệnh sán lá gan với tỷ lệ cao nhất Kết quả điều tra ở một sốvùng cho thấy:

Ở 11 tỉnh miền núi, tỷ lệ nhiễm sán lá gan của trâu, bò là 39%

Ở 4 tỉnh trung du, tỷ lệ nhiễm sán lá gan của trâu, bò là 42,2%

Ở 5 tỉnh thuộc vùng đồng bằng, tỷ lệ nhiễm sán lá gan là 57,5%

Ở 6 tỉnh thuộc vùng ven biển, tỷ lệ nhiễm sán lá gan là 36,7%

Kết quả điều tra trong nhiều năm của Nguyễn Thị Kim Thành và cs(1996) [25] ở Cổ Nhuế, Hà Nội cũng cho kết quả tương tự, tỷ lệ nhiễm ấutrùng sán lá gan ở 2 loài ốc từ 0,7 - 3,0%

Nghiên cứu của Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân (1997) [15] cho biết ởnước ta sán lá gan phát hiện khắp mọi nơi từ Bắc vào Nam Tỉ lệ nhiễm sán lágan trâu bò ở miền núi là 30-35%, vùng đồng bằng trung du nhiễm 40 - 70%

Kết quả nghiên cứu của Lê Hữu Khương và cs (2001) [6] cho thấy tỷ lệnhiễm sán lá gan trung bình trên cả nước ở trâu là 46,23%, dao động từ 8,74 -61,09%, ở bò là 30,64%, tỷ lệ này tăng dần từ Nam ra Bắc

Phạm Sỹ Lăng, Lê Văn Tạo (2002) [16] cho biết tại các cơ sở chănnuôi bò sữa, tỉ lệ nhiễm sán của bò sữa từ 28-30%

Theo Vũ Đức Hạnh, Nguyễn Thị Kim Lan (2009) [2] tỉ lệ nhiễm sán lágan tại 9 xã thuộc huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang là 51,6%

Hoàng Văn Hiền và cs (2011) [3] cho biết tình hình nhiễm sán lá gantrâu bò ở Việt Nam là 35%

Phan Lục và cs (1996) [18] cho biết khi sử dụng Fasinex liều 12 mg/kg

TT tẩy sán lá gan cho trâu, thuốc có hiệu lực và hiệu lực tẩy sạch sán đều đạt100%

Theo Phan Thế Việt và cs (1977) [32] cho biết có hai loài sán lá gan ký

sinh ở đường tiêu hoá gia súc nhai lại Việt Nam, đó là Fasciola gigantica và Fasciola hepatica.

Theo Đỗ Đức Ngái và cs (2006) [30], tỷ lệ nhiễm ấu trùng Fasiola của

ốc L swinhoei ở ĐắkLắk là 0,45%

2.2.1 Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài

Bệnh sán lá gan là bệnh phổ biến ở nhiều nước trên thế giới Ở cácnước chăn nuôi trâu bò phát triển thì việc kiểm tra tình hình nhiễm sán lá ganđược coi là công việc thường xuyên

Qua các tài liệu điều tra cho thấy tỉ lệ nhiễm sán lá gan trâu, bò ở cácnước phụ thuộc các yếu tố: Điều kiện khí hậu, tập quán chăn thả, trình độ dântrí đặc biệt phụ thuộc vào khả năng thực hiện các biện pháp phong trừ tổnghợp bệnh sán lá gan ở vật nuôi

Trịnh Văn Thịnh và Đỗ Dương Thái (1978) [27], đã tổng hợp công

trình nghiên cứu ký sinh trùng cho biết sán lá gan Fasciola hepatica đã được

Johanbe Bric miêu tả từ năm 1397 Năm 1752, Swammerrdam phát hiện

những vĩ ấu (Cercaria) của loài sán này ở một con ốc Gastoropoda Nhưng

130 năm sau (1882) Thomas và Leuckart gần như cùng một lúc người xácđịnh được vòng đời phát triển của sán lá gan

Theo dẫn liệu của Phan Địch Lân (1980), sán lá gan F hepatica đã

được Yohade Bric mô tả từ năm 1379

Theo Nguyễn Kim Thành và cs (1996) [25] cho biết: Stephenson(1947) và Urquahart (1950) khẳng định tác hại của sán lá gan đối với trâu bò

là gây thiếu máu và dị ứng khi nhiễm nặng Ở Nhật Bản Ono (1958) đã dùngnhiều biện pháp để diệt trứng sán và kí chủ trung gian như: sử dụng chất hóahọc Natri 0,5 - 0,8 %, Đồng Sunphat 0,5 - 1,0%, Penta Chlorophenol 0,1 %trộn với đất khô để rắc

Về vật chủ chính, F hepatica và F gigantica có chung nhiều loài vật

chủ ăn cỏ và ăn tạp (Mas-Coma S., 1995 [35]) Tính mẫn cảm và đặc điểmbệnh lý do sán lá gan gây ra khác nhau đáng kể ở các vật chủ khác nhau(Chen và cs, 2000; Roberts và cs, 1997; Yadav và cs, 1999; Zhang và cs,

2004) Nghiên cứu về Enzyme cho thấy, F hepatica và F gigantica khác

nhau (Irving và cs, 2003) Sự khác biệt giữa 2 loài chỉ có 5 vị khác khác nhau

ở ITS-1 và 5 vị trí khác nhau ở ITS-2 (Mas-Coma và Bargues, 2008;

Remigio và Blair, 1997) Có nhiều bằng chứng cho thấy, F hepatica có liên quan với nhóm Galba nguồn gốc từ Bắc cực, Trung và Nam Mỹ với G truncatula là vật chủ trung gian Ngược lại, F gigantica dường như liên quan đến nhóm ốc Radix, chủ yếu là loài R natalensis ở châu Phi và loài R auricularia ở Palaearctic (Bargues và cs, 2001; 2005; 2007) Sự chuyên biệt

về ốc vật chủ trung gian này giải thích sự phân bố địa lý của 2 loài sán lá gan

Trái lại, F hepatica có thể lan rộng từ châu Âu đến tất cả 5 lục địa, F gigantica chỉ giới hạn ở châu Phi và châu Á (kể cả Hawaii) Yêu cầu sinh thái của ốc cũng giải thích tại sao F hepatica lại phổ biến ở vùng ôn đới và như vậy phổ biến ở châu Âu, Mỹ và châu Đại dương, trong khi F gigantica thích

nghi ở vùng nhiệt đới và ẩm ở châu Phi và châu Á

Mas-Coma và cs (2005) [36] cho biết: Trâu, bò bị nhiễm sán lá gan cótriệu chứng gầy yếu, tăng trọng chậm, sản lượng thịt sữa thấp, rất nhiều buồnggan không sử dụng được do sán làm viêm, xơ cứng

Sự phát triển của ấu trùng F gigantica trong ốc L auricularia được mô

tả bởi Dinnik J A., Dinnik N N (1964) [33]: Ở 26°C 1 Miracidium phát triển thành 1 Sporocyst sau 6 - 8 ngày Sporocyst chứa tới 6 túi phôi, sản sinh thế

hệ Rediae đầu tiên, từ mỗi Rediae này lại sản sinh Rediae thế hệ thứ 2 sau

20-22 ngày Cercariae phát triển sau 26 ngày sau khi nhiễm Sự phát triển ấu

trùng trong ốc sẽ chậm hơn khi nhiệt độ giảm và cuối cùng là ngừng phát

triển Ở nhiệt độ dưới 16°C, chỉ 1 thế hệ Redia con được sản sinh, nhưng chúng sẽ sản sinh Cercariae khi nhiệt độ tăng lên đến 20°C

Mặc dù là động vật thủy sinh, nhưng ốc - vật chủ của sán lá gan

F.gigantica có thể sống qua một giai đoạn khô, vì thế Mahato S N và cs

(1995) [34] kết luận rằng, sự ngủ hè có thể đóng vai trò quan trọng trong dịch

tễ của bệnh sán lá gan ở Nepal Họ quan sát thấy ốc L Viridis sống ở bùn khô

ít nhất 1 tháng Tuy nhiên, những loài ốc này thường không vùi mình xuốngbùn khi nước khô, mà vẫn nằm trên bề mặt Vì vậy, chúng dễ bị khô nhiềuhơn và bị vật ăn mồi ăn nhiều hơn so với khi chúng vùi mình xuống đất Tuynhiên, khi không tiếp xúc với mặt trời, chúng vẫn sống và sản sinh trứngtrong một số tuần sau khi môi trường của chúng bị khô

Ở đồng lúa, mật độ ốc không bị ảnh hưởng trực tiếp bởi dòng nước,nhưng bị ảnh hưởng bởi mức nước tưới tiêu và mùa vụ Ốc và trứng củachúng sống từ mùa trước có thể phát triển ở mùa vụ mới hoặc chúng có thểđược đưa vào cùng với nước Sau đó, số lượng của chúng tăng lên qua vàitháng tiếp theo, sau đó giảm xuống vài tuần trước khi thu hoạch (WidjajantiS., 1989) [42])

Theo kết quả của Vareille M C và cs (1994) [41], tìm thấy

Adolescaria trong môi trường nước với tỷ lệ dưới 10%.

Theo thông báo của Ripert C và cs (1987) [40] cho biết, bệnh sán lágan lớn thường phát triển theo mùa Vào mùa mưa tỷ lệ nhiễm sán lá gan lớn

ở gia súc cao hơn nhiều so với mùa khô Vì trong vòng đời của sán lá gan cóvai trò của thực vật thủy sinh, nên sự nhiễm bệnh còn phụ thuộc vào mùa pháttriển của chúng

Phần 3 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG

VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu

3.1.1 Đối tượng nghiên cứu

- Trâu, bò các lứa tuổi nuôi tại nông hộ ở một số xã của huyện YênSơn, tỉnh Tuyên Quang

- Bệnh sán lá gan ở trâu, bò

3.1.2 Địa điểm nghiên cứu

- Địa điểm thu thập mẫu: Các nông hộ chăn nuôi trâu, bò tại các xã:Kim Phú, Chân Sơn, Thắng Quân, Lang Quán thuộc huyện Yên Sơn, tỉnhTuyên Quang

- Địa điểm xét nghiệm mẫu: Bộ môn Bệnh Động vật và phòng Chẩnđoán bệnh - Khoa Chăn nuôi thú y - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên

3.1.3 Thời gian nghiên cứu

Từ 26/12/2011 đến 11/06/2012

3.2 Vật liệu nghiên cứu

3.2.1 Mẫu nghiên cứu

- Mẫu phân tươi của trâu, bò, bê, nghé

- Mẫu đất (cặn) nền chuồng và mẫu đất bề mặt xung quanh chuồngtrâu, bò

- Mẫu đất bề mặt và mẫu nước đọng trên bãi chăn trâu, bò

- Mẫu ốc nước ngọt thu thập ở các ao, ruộng vũng nước đọng

- Mẫu cỏ thủy sinh thu thập ở khu vực chăn thả trâu, bò

3.2.2 Dụng cụ và hoá chất

- Kính hiển vi quang học, buồng đếm trứng giun sán Mc.Master

- Dụng cụ xét nghiệm mẫu: cốc thuỷ tinh, lam kính, la men, lưới lọcphân và các dụng cụ thí nghiệm khác

- Thuốc Han-Dertil B, Fasciolid-25%, Bio-Alben

3.3 Nội dung nghiên cứu

3.1.1 Điều tra về công tác phòng chống bệnh ký sinh trùng cho trâu, bò ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang

3.3.2 Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ của bệnh sán lá gan trâu, bò

3.3.2.1 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan trâu, bò ở các xã thuộc huyệnYên Sơn, tỉnh Tuyên Quang

3.3.2.2 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo tuổi trâu, bò

3.3.2.3 Tỷ lệ và cường độ nhiễm sán lá gan theo mùa

3.3.3 Nghiên cứu sự ô nhiễm trứng và ấu trùng sán lá gan ở ngoại cảnh và trong ký chủ trung gian

3.3.3.1 Sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở chuồng và khu vực xung quanh chuồng nuôi trâu, bò

3.3.3.2 Sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở bãi chăn thả trâu, bò (ở đất bề mặt, ở vũng nước trên bãi chăn)

3.3.3.3 Xác định loài và sự phân bố của ốc nước ngọt, ký chủ trung gian của sán lá gan

3.3.3.4 Tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan của ốc nước ngọt

3.3.3.5 Tỷ lệ mẫu cỏ thủy sinh nhiễm Adolescaria

3.3.4 Nghiên cứu biện pháp phòng chống bệnh sán lá gan trâu, bò ở huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang

- Xác định lại hiệu lực tẩy sán lá gan trâu, bò của thuốc Han - Dertil B,Fasciolid-25%

- Thử nghiệm hiệu lực và độ an toàn của thuốc Bio - Alben tẩy sán lágan cho trâu

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh sán lá gan trâu, bò ở một số xã thuộc huyện Yên Sơn, tỉnh Tuyên Quang

3.4.1.1 Quy định một số yếu tố cần xác định liên quan đến tình hình nhiễm sán lá gan trâu, bò

* Tuổi trâu, bò: Kết hợp xem răng và hỏi chủ gia súc để xác định tuổitrâu, bò

Tuổi trâu, bò nghiên cứu ở huyện được phân ra theo 4 lứa tuổi

- ≤ 2 năm tuổi

- > 2 - 5 năm tuổi

- > 5 - 8 năm tuổi

- > 8 năm

Trâu, bò từ 6 tháng đến 2 năm tuổi : đủ 8 răng sữa

Trâu, bò 2 năm tuổi : 2 răng khôn

Trâu, bò 3 năm tuổi : 4 răng khôn

Trâu, bò trên 8 năm : mòn cả hàm

* Mùa: Mùa trong năm được theo dõi gồm:

- Mùa Đông (từ tháng 12/2011 đến tháng 1/2012)

- Mùa Xuân (từtháng 2/2012 đến tháng 4/2012)

- Mùa Hè (từ tháng 5/2012 đến 11/6/2012)

3.4.1.2 Thu nhập mẫu phân trâu, bò

Lấy mẫu theo phương pháp lấy mẫu chùm nhiều bậc, lấy mẫu ở 4 xã

Để riêng mỗi mẫu vào một túi nilon nhỏ, mỗi túi đều có nhãn ghi: loại gia súc(trâu, bò), địa điểm lấy mẫu, tuổi trâu, bò, trạng thái phân, thời gian lấy mẫu

và các biểu hiện lâm sàng của trâu, bò Ngoài ra căn cứ vào những yếu tố cầnxác định có liên quan đến đặc điểm dịch tễ để lấy mẫu cho tương đối đồngđều về các yếu tố khác

3.4.1.3 Phương pháp xét nghiệm mẫu

Xét nghiệm bằng phương pháp lắng cặn Benedek (1943)

Nguyên lý: Tỷ trọng của trứng sán lá gan nặng hơn tỷ trọng của nước

lã, nên trứng sẽ bị lắng xuống có thể tách trứng sán lá gan ra khỏi nước

Cách tiến hành: Lấy một lượng phân khoảng 5 - 10g cho vào cốc thủytinh, cho khoảng 100 - 150ml nước lã vào, dùng đũa thủy tinh khuấy đều rồidùng lưới lọc lọc cặn bã trong phân đi, để cho lắng xuống Gạn nước ở trên

đi, tiếp tục cho nước vào, để yên 20-30 phút cho lắng xuống, rồi lại gạn nước

ở trên đi Làm liên tục nhiều lần cho đến khi nước trong hẳn rồi gạn từ từnước ở trên đi và lấy cặn ra lam kính, đem soi kính hiển vi để quan sát với độphóng đại 100 lần.

Phương pháp xác định cường độ nhiễm:

Xác định cường độ nhiễm sán lá gan bằng phương pháp đếm trứng Mc.Master (đếm số trứng/g phân trên buồng đếm Mc Master theo tài liệu củaJorgen Hansen và cs, 1994 [37])

Cường độ nhiễm sán lá gan được quy định như sau:

Nếu không tìm thấy trứng sán lá gan là (-)

Nếu trung bình ≤ 200 trứng/g phân là nhiễm nhẹ (+)

Nếu trung bình có > 200 - 500 trứng/g phân là nhiễm trung bình (++)Nếu trung bình có > 500 trứng/g phân là nhiễm nặng (+++)

3.4.2 Phương pháp nghiên cứu sự ô nhiễm trứng và ấu trùng sán lá gan ở ngoại cảnh và trong ký chủ trung gian

3.4.2.1 Phương pháp nghiên cứu sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở chuồng nuôi, khu vực xung quanh chuồng nuôi trâu, bò

* Phương pháp thu thập mẫu

- Mẫu đất hoặc cặn nền chuồng trâu, bò: Tại mỗi ô chuồng, lấy mẫu đất(cặn) ở 4 góc chuồng và ở giữa chuồng, trộn đều được một mẫu xét nghiệm(khoảng 80 - 100g/mẫu) Mỗi mẫu được để riêng trong túi nilon có nhãn ghi

rõ địa điểm và thời gian lấy mẫu

- Mẫu đất bề mặt xung quanh chuồng nuôi: Lấy mẫu đất bề mặt tương

tự như cách lấy mẫu cặn nền chuồng

* Phương pháp xét nghiệm mẫu

Xét nghiệm bằng phương pháp lắng cặn để phát hiện trứng sán lá gan

3.4.2.2 Phương pháp nghiên cứu sự ô nhiễm trứng sán lá gan ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò

* Phương pháp thu thập mẫu ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò.

- Mẫu đất bề mặt ở khu vực bãi chăn thả trâu, bò: Tại mỗi khu vực chănthả, cứ khoảng 20 - 30 m2 lấy ngẫu nhiên ở vị trí 4 góc và ở giữa, trộn đềuđược một mẫu xét nghiệm (khối lượng khoảng 150 - 200g/ mẫu) Mỗi mẫuđược để riêng trong túi nilon có nhãn ghi rõ địa điểm và thời gian lấy mẫu

- Mẫu nước ở những vũng nước đọng trên khu vực bãi chăn thả:Dùng que khuấy đều vũng nước, lấy cốc thủy tinh múc khoảng 150 - 200ml/ vũng Mỗi mẫu được chứa trong túi nilon, có nhãn ghi địa điểm và thờigian lấy mẫu.

* Phương pháp xét nghiệm mẫu

- Xét nghiệm mẫu bằng phương pháp lắng cặn để phát hiện trứngsán lá gan

3.4.2.3 Phương pháp xác định loài và sự phân bố của ốc nước ngọt - ký chủ trung gian của sán lá gan

Thu thập mẫu ốc (ốc không có nắp miệng) ở ruộng lúa, mương nước,

ao trong khu vực chăn thả trâu, bò Định loại theo khóa định loại của ĐặngNgọc Thanh và cs, 1980 [24]

3.4.2.4 Phương pháp xác định tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán lá gan của ốc nước ngọt

* Phương pháp thu thập mẫu ốc nước ngọt

Bắt ốc nước ngọt ở các rãnh nước xung quanh chuồng trâu, bò, cácvũng nước trên bãi chăn thả trâu, bò, các ao, kênh mương… ở các xã KimPhú, Chân Sơn, Thắng Quân, Lang Quán thuộc huyện Yên Sơn, tỉnhTuyên Quang

* Phương pháp xét nghiệm các dạng ấu trùng sán lá gan trong ốc

Sử dụng 2 lam kính sạch Dùng kẹp nhẹ nhàng đặt ốc vào giữa 2 lamkính, dùng tay ép nhẹ 2 lam kính đến khi vỏ ốc vỡ và ốc nát ra Cuối cùng đưalam kính kiểm tra dưới kính hiển vi để phát hiện các dạng ấu trùng Chú ý:dùng pipet nhỏ 1 - 2 giọt nước sạch vào mẫu ốc vừa ép để mẫu không bị khô

và kiểm tra dưới kính hiển vi dễ dàng hơn

3.4.2.5 Phương pháp xác định tỷ lệ mẫu cỏ thủy sinh nhiễm Adolescaria

* Phương pháp lấy mẫu

Lấy mẫu cỏ thủy sinh ở rìa bờ ao, kênh, mương, rãnh nước gần chuồnghoặc trên bãi chăn thả trâu, bò Lấy ở các vị trí khác nhau, mỗi mẫu lấykhoảng 30 - 40 cây cỏ Đựng mẫu trong túi nilon sạch có nhãn ghi thời gian

và địa điểm lấy mẫu

* Phương pháp xét nghiệm

Dùng kính lúp soi kĩ từng cây cỏ trong một mẫu để tìm kénAdolescaria bám trên thân và lá cỏ, kiểm tra hình thái Adolescaria trên kínhhiển vi với độ phóng đại 4 x 10 lần, từ đó xác định sự phát tán ấu trùng sán láFasciola ở cỏ thủy sinh

3.4.3 Phương pháp nghiên cứu biện pháp điều trị bệnh sán lá gan cho trâu, bò

3.4.3.1 Xác định tác dụng của một số thuốc tẩy sán lá gan đã sử dụng trong nhiều năm qua

Sau khi xét nghiệm phân, phát hiện được những trâu, bò bị nhiễm sán

lá gan, chúng tôi dùng hai loại thuốc tẩy sán lá gan đã được sử dụng trongnhiều năm qua để tẩy cho trâu, bò nhiễm sán (Han-Dertil B, Fasciolid-25%)

Trước khi dùng thuốc, xác định cường độ nhiễm sán lá gan bằng cáchđếm số trứng/gam phân Sau khi dùng thuốc 15 ngày, xác định hiệu lực thuốcbằng phương pháp xét nghiệm lại phân trâu, bò tìm trứng sán và đếm sốlượng trứng sán/gam phân

Từ đó xác định được hiệu lực tẩy của thuốc còn tốt hay không

3.4.3.2 Xác định hiệu lực tẩy sán lá gan và độ an toàn của thuốc mới Bio-Alben

Thử nghiệm được tiến hành trên diện hẹp, sau đó tiến hành trên diệnrộng

Để đảm bảo sử dụng thuốc đúng liều lượng, tránh trúng độc, chúng tôixác định khối lượng trâu, bò bằng công thức:

- Đối với trâu: P(kg) = 88,4 x (vòng ngực)2 x dài thân chéo (± 5%)

- Đối với bò: P(kg) = 90 x (vòng ngực)2 x dài thân chéo (± 5%)

(Đơn vị chiều dài là m)

+ Vòng ngực là chu vi vòng ngực sát sau xương bả vai

+ Dài thân chéo: Đo từ điểm trước khớp xương bả vai đến điểm sau ungồi (xương ngồi) (Nguyễn Văn Thiện, 2008) [28]

* Trước khi dùng thuốc, xác định cường độ nhiễm bằng cách đếm sốtrứng sán/gam phân Sau khi dùng thuốc 15 ngày, xác định hiệu lực thuốc

bằng phương pháp xét nghiệm lại phân trâu, bò, tìm trứng sán lá Fasciola

bằng phương pháp lắng cặn

* Để đánh giá độ an toàn của thuốc, chúng tôi xác định một số chỉ tiêusinh lý trước và sau khi dùng thuốc 1 giờ (Hồ Văn Nam, 1997) [19] Các chỉtiêu theo dõi gồm:

- Thân nhiệt: dùng nhiệt kế 430C, đo nhiệt độ ở trực tràng, sau 5 phútđọc kết quả

- Tần số hô hấp: đếm số lần trâu, bò thở trong 1 phút (kể cả hít vào vàthở ra)

- Tần số mạch đập: xác định bằng cách dùng tay bắt mạch ở động mạchđuôi (đếm số lần mạch đập trong 1 phút)

- Nhu động dạ cỏ: kiểm tra số lần nhu động trong 5 phút

Theo Nguyễn Xuân Tịnh và cs (1996) [31], các chỉ tiêu sinh lý khỏemạnh của gia súc như sau:

x x

x

X

n i

i

=

= + + +

X X

n: Dung lượng mẫu

* Một số công thức tính tỷ lệ, cường độ nhiễm, hiệu lực của thuốc tẩy:

- Tỷ lệ nhiễm (%) = Số trâu, bò nhiễm × 100

Số trâu, bò kiểm tra

- Cường độ nhiễm (%) = Số trâu, bò nhiễm (+),(++),(+++)Tổng số trâu, bò nhiễm × 100

(đếm số trứng/g phân để quy định các mức + → +++)

- Hiệu lực của thuốc tẩy (%) = Số trâu, bò (-) sau tẩy × 100

Tổng số trâu, bò (+) được tẩy

* So sánh mức độ sai khác giữa hai số trung bình

Đối với các tính trạng định lượng như số lượng trứng… các bước tiếnhành như sau:



 +

− +

−

−

=

2 1 2

1

2 1 2

2 1 1

2 1

1 1 ).

1 ( 1

n n n

n

S n S n

X X

t TN

Trong đó: X1 và X2 : Số trung bình của nhóm 1 và nhóm 2

n 1 và n 2 : Dung lượng mẫu của nhóm 1 và nhóm 2

S 1 và S 2 : Độ lệch tiêu chuẩn của nhóm 1 và nhóm 2