Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiên mao trùng do trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò tại huyện đồng hỷ tỉnh thái nguyên và đề xuất biện pháp phòng, trị bệnh

Khóa Luận cực hay và bổ ích !!!!!!!

Phần 1

MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề

Trong những năm qua, Việt Nam đã thực hiện nhiều chính sách pháttriển nông nghiệp, nông dân các địa phương hăng hái sản xuất xóa đói giảmnghèo, làm giàu trên mảnh đất của mình Nhờ vậy, nông nghiệp đã có nhiềuthành tựu góp phần thực hiện nhiệm vụ xây dựng đất nước Ngành chăn nuôingày càng có vị trí quan trọng trong nền kinh tế quốc dân, tổng đàn gia súcngày càng tăng, nhiều giống mới được nhập vào nuôi thuần hóa để cải tạo đàn

có hiệu quả Các kết quả nghiên cứu khoa học thú y đã được gắn liền với việcphát triển chăn nuôi trâu, bò và ngày càng được thực tế sản xuất tiếp thu, ápdụng hoàn chỉnh hơn

Mặt khác, Việt Nam đã là thành viên của OIE, do đó đòi hỏi về trình độkhoa học kỹ thuật trong chẩn đoán xác định các bệnh cho vật nuôi cũng tươngđương với các nước khác Phương pháp chẩn đoán, ngoài vấn đề có độ chínhxác cao được thế giới công nhận, còn đòi hỏi nhanh chóng về thời gian

Tuy nhiên, cuộc đấu tranh chống lại bệnh nói chung và những bệnh do

ký sinh trùng nói riêng của con người và thế giới động vật không bao giờ làkết thúc Điều kiện tự nhiên và môi trường sống của con vật luôn luôn thayđổi, nhiều khi trở nên bất lợi cho một mầm bệnh nên chúng bị mất đi Nhưngngược lại cũng có thể căn nguyên gây bệnh lại thích nghi với hoàn cảnh mớinên có những bệnh tưởng như đa được dập tắt lại bùng nổ Do vây, bệnh dịchtrên đàn gia súc vẫn thường xuyên xảy ra, gây nhiều thiệt hại cho người chănnuôi Ngoài những bệnh truyền nhiễm nguy hiểm như: Tụ huyết trùng, Lở

mồm long móng, Leptospira; thì bệnh do tiên mao trùng (Tripanosoma evansi) gây ra trên đàn trâu, bò cũng gây thiệt hại rất lớn.

Bệnh do Trypanosoma (Trypanosomiasis) là bệnh truyền lây giữa người

và gia súc do ký sinh trùng đơn bào (Protozoa) lớp trùng roi (Flagellata) gây ra.

Có nhiều loài thuộc giống Trypanosoma, như: Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Trypanosoma evansi, Trypanosoma congolense, Trypanosoma gambiense, Trypanosoma vavax,…

Bệnh tiên mao trùng hay còn gọi là bệnh ngã nước Trâu bò mắc bệnh ởthể mãn tính, con vật ngày càng gầy, sức khỏe suy yếu dần, giảm khả năngsản xuất Nếu ở thể cấp tính, con vật đột ngột sốt cao, bụng chướng to rồilăn ra chết, gây tổn thất to lớn về kinh tế cho người chăn nuôi.

Theo số liệu của Phạm Sỹ Lăng (1982) [7], Phan Văn Chinh (2006) [2],bệnh tiên mao trùng xuất hiện ở nhiều vùng trên cả nước, với tỷ lệ mắc khácao: trên trâu là 13 - 30%, trên bò là 7 - 14%, trong đó tỷ lệ gia súc chết/giasúc mắc lên tới 6,3 - 20%

Bên cạnh đó, tỷ lệ mắc Trypanosoma evansi trên gia súc ở vùng núi và

trung du cao hơn ở các vùng đồng bằng và ven biển Trong khi đó, ở nước ta,chăn nuôi gia súc nhai lại để cung cấp sức kéo, thịt, sữa lại tập trung chủ yếu

ở các tỉnh miền núi và trung du - là các vùng có điều kiện tự nhiên thích hợpcho sự phát triển chăn nuôi gia súc nhai lại, nhưng cơ sở hạ tầng phục vụ côngtác chẩn đoán và điều trị tại địa phương còn yếu kém; dẫn tới hệ quả là bệnhtiên mao trùng trở nên phổ biến hơn, nghiêm trọng hơn và gây thiệt hại lớnhơn, ảnh hưởng lớn tới kinh tế của người nông dân

Xuất phát từ nhu cầu thực tế sản xuất, giúp người dân có biện phápphòng, điều trị bệnh tiên mao trùng một cách hiệu quả nhất, đồng thờinâng cao năng suất chăn nuôi và hiệu quả kinh tế, chúng em tiến hành

nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiên mao trùng do

Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò tại huyện Đồng Hỷ

- tỉnh Thái Nguyên và đề xuất biện pháp phòng, trị bệnh”.

1.2 Mục tiêu nghiên cứu

- Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh do Trypanosoma evansi gây ra ở

đàn trâu, bò tại một số xã thuộc huyện Đồng Hỷ - tỉnh Thái Nguyên

- Xác định đặc điểm bệnh lý, lâm sàng của bệnh tiên mao trùng trongđiều kiện chăn nuôi

- Lựa chọn phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng có hiệu quả, phù hợpvới điều kiện miền núi

- Xây dựng quy trình phòng, trị bệnh góp phần hạn chế những thiệthại do bệnh tiên mao trùng gây ra cho đàn trâu, bò thuộc huyện Đồng Hỷ -tỉnh Thái Nguyên.

1.3 Ý nghĩa của đề tài

- Ý nghĩa khoa học

Kết quả của đề tài là những thông tin khoa học về đặc điểm dịch tễ của

bệnh tiên mao trùng do T evansi gây ra và quy trình phòng chống bệnh tiên

mao trùng ở trâu, bò

- Ý nghĩa thực tiễn

Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học để khuyến cáo người chăn nuôi ápdụng quy trình phòng, trị bệnh tiên mao trùng nhằm hạn chế tỷ lệ nhiễm và

thiệt hại do T evansi gây ra; góp phần nâng cao năng suất chăn nuôi; thúc đẩy

ngành chăn nuôi trâu, bò phát triển

Phần 2

TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.1 Cơ sở khoa học của đề tài

Bệnh tiên mao trùng được Blanchard (1888) phát hiện đầu tiên ở Việt Nam.Sau đó, bệnh được xác định là phổ biến ở hầu hết các tỉnh thành trong cả

nước Bệnh do loài tiên mao trùng Trypanosoma evansi gây ra Trâu, bò, ngựa

mắc bệnh dễ chết hoặc thiếu máu, suy nhược, giảm hoặc mất khả năng sinhsản và sức sản xuất

2.1.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc và phân loại tiên mao trùng

2.1.1.1 Vị trí của tiên mao trùng Trypanosoma evansi trong hệ thống phân loại động vật học

Theo Levine và cs (1980) (dẫn theo Lương Văn Huấn và cs, (1997)

[4]), vị trí của tiên mao trùng trong hệ thống phân loại nguyên bào (Protozoa)

Họ Trypanosomatidae Donein, 1901 Giống Trypanosoma Gruby, 1843 Giống phụ Megatrypanum Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (M) theileria Giống phụ Herpetosoma Donein, 1901 Loài Trypanosoma (H) leisi

Giống phụ Schizotrypanum Chagas, 1909 Loài Trypanosoma (S) cruzi

Giống phụ Duttonella Chalmers, 1918 Loài Trypanosoma (D) vivax

Loài Trvpanosoma (D) uniform

Giống phụ Nalmomonas Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (N) congolense Loài Trypanosoma (N) siminae Loài Trypanosoma (N) vanhogi Giống phụ Trypanozoon Liihe, 1906 Loài Trypanosoma (T) brucei Loài Trypanosoma (T) gambience Loài Trypanosoma (T) rhodesiense Loài Trypanosoma (T) equiperdum Giống phụ Pycnomonas Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (P) suis

Giống phụ Trypanosoma Gruby, 1843 Loài Trypanosoma evansi (Steel, 1885)

Trong các loài tiên mao trùng trên, có 7 loài được tổ chức dịch tễquốc tế (OIE) thông báo là có khả năng gây bệnh cho người và động vật

có vú, đó là: T brucei, T congolense, T cruzi, T evansi, T gambiense,

T siminae, T vivax.

2.1.1.2 Đặc điểm hình thái, cấu tạo của T evansi

Tiên mao trùng T evansi được xếp vào loại đơn hình thái, cơ thể chỉ là

một tế bào, có kích thước nhỏ, chiều dài 18 - 34 μm (trung bình là 25 μm),chiều rộng 1,5 - 2μm Cơ thể có hình suốt chỉ mảnh hoặc hình thoi, cuối thân

nhọn Nhìn chung, cấu trúc cơ bản của T evansi cũng giống như cấu trúc của các loài tiên mao trùng khác thuộc họ Trypanosomatidae Cấu trúc từ ngoài

vào trong được chia thành 3 phần chính:

- Vỏ: Ngoài cùng là lớp vỏ dày 10 - 15 nm, vỏ được chia làm 3 lớp (lớpngoài và lớp trong cùng tiếp giáp với nguyên sinh chất dầy hơn lớp giữa) Lớp

vỏ ngoài cùng được cấu tạo từ các phân tử glycoprotein luôn biến đổi (VGS).Tiếp giáp với lớp trong cùng là 9 cặp vi ống xếp song song dọc theo chiều dàithân tiên mao trùng Chính nhờ sự sắp xếp của các cặp vi ống nên tiên maotrùng có dạng hình suốt chỉ mảnh (Hoare, 1972 [30]; Phạm Sỹ Lăng, 1982 [7];Nguyễn Quốc Doanh, 1999 [3])

- Nguyên sinh chất: Gồm lớp trong và lớp ngoài Trong nguyên sinhchất có chứa các nội quan: ribosome có màu thẫm xen kẽ vùng không bàomàu sáng, kinetoplast (thể cơ động), mitochrondno, reticulum (lưới nội bào)

và mạng lưới golgi

- Nhân: Nhân tiên mao trùng có chứa ADN, hình bầu dục hoặc hìnhtrứng Nhân thường nằm ở vị trí trung tâm hoặc gần vị trí trung tâm cơ thể.Ngoài nhân, về phía cuối thân còn có thể kinetoplast chứa AND (KADN) Từkinetoplast có một roi chạy vòng quanh thân lên đầu và ra phía ngoài cơ thểthành một roi tự do

- Roi của tiên mao trùng có lớp vỏ ngoài cùng giống lớp vỏ của thân.Trong roi có 9 cặp vi ống ở xung quanh và một cặp ở trung tâm, xếp songsong dọc chiều dài roi (Hoare, 1972 [30]; Nguyễn Quốc Doanh, 1999 [3])

2.1.1.3 Cấu trúc kháng nguyên của T evansi

Kháng nguyên của T evansi gồm hai loại: kháng nguyên ổn định

(kháng nguyên không biến đổi) và kháng nguyên biến đổi

* Kháng nguyên ổn định (kháng nguyên không biến đổi)

Phần lớn các thành phần kháng nguyên tiên mao trùng không biến đổitrong quá trình sống ký sinh Bằng phương pháp điện di miễn dịch huyết

thanh thỏ tối miễn dịch với T evansi, Kageruka (1982) đã phát hiện tới 30

thành phần kháng nguyên khác nhau Có ba loại kháng nguyên không biếnđổi ở màng nguyên sinh chất tế bào (ISG): ISG 65, ISG 75 và ISG 100 Docấu trúc không gian ba chiều và đặc tính ưa nước, các loại này không kết hợpvới kháng thể của vật chủ

* Kháng nguyên biến đổi

Cần đề cập đến sự biến đổi lớp vỏ bề mặt VSG, những quan điểm mới

về sự xuất hiện kháng nguyên biến đổi của tiên mao trùng và cơ chế di truyềncủa kháng nguyên biến đổi

Nhờ kháng thể đặc hiệu được đánh dấu mà Vickerman và Luckins(1969) [46] đã phát hiện ra sự biến đổi của lớp kháng nguyên bề mặt Nhiềutác giả nghiên cứu về miễn dịch học cho rằng, tiên mao trùng biến đổi kháng

nguyên bề mặt để né tránh miễn dịch đặc hiệu của vật chủ Tuy nhiên, VanMeirvenne (1975) [45] cho rằng sự biến đổi kháng nguyên bề mặt của ký sinhtrùng đã có ngay ở pha đầu tiên của quá trình nhiễm (trước khi xuất hiện đápứng miễn dịch của cơ thể vật chủ) Nhưng cho đến nay, quan điểm về sự biếnđổi kháng nguyên lớp vỏ của tiên mao trùng vẫn chưa được làm sáng tỏ.

* Cơ chế di truyền của kháng nguyên biến đổi

Khi kháng thể đặc hiệu kết hợp với phân tử của kháng nguyên bề mặt(VSG), làm tiêu tan tiên mao trùng thì đó cũng là nguyên nhân chính thúc đẩy

sự hoạt hoá của gen Kết quả là các phân tử kháng nguyên VSG được thay đổihoàn toàn bằng các phân tử VSG mới Lúc này, kháng thể đặc hiệu lúc trước

đã không còn tác dụng đối với kháng nguyên mới này

Theo Barry và Tumer (1991) [27], Vanhamme và cs (1995) [44], cácVSG được mã hoá nhờ các gen chuyên biệt từ kho chứa hàng nghìn các genkhác nhau, một gen VSG được hoạt hoá một cách chọn lọc, dẫn đến tổng hợp

ra một loại kháng nguyên VSG Mỗi bên VSG mới tạo ra một loại khángnguyên VSG mới Trong bộ gen của tiên mao trùng tồn tại một số lớn genVSG, các gen này sử dụng nhiều cơ chế sắp xếp khác nhau, do vậy tiên maotrùng đã tạo ra nhiều VSG khác nhau ở gia súc bị bệnh mãn tính Cơ chế biếnđổi kháng nguyên theo 2 cách: cách thứ nhất là, sử dụng lần lượt các điểm biểuhiện khác nhau, không có sự sắp xếp của ADN Các điểm biểu hiện khác nhau

sẽ mang các gen VSG khác nhau, sự luân phiên này dẫn đến sự thay đổi typekháng nguyên Cơ chế này quan sát được chủ yếu ở giai đoạn đầu của quá trìnhcảm nhiễm Có lẽ ở giai đoạn đầu này chưa có đáp ứng miễn dịch của vật chủđối với VSG, chính điều này không gây ra một cản trở hoạt hoá tự nhiên củacác điểm biểu hiện gen này Cách thứ hai là, tập hợp lại các đoạn ADN khácnhau để tái tổ hợp gen, mà việc tái tổ hợp này cho phép thay thế hoàn toàn hoặctừng phần gen; hoặc việc thay thế diễn ra dựa vào sự chuyển đổi gen chứkhông phải dựa vào tái tổ hợp gen Trường hợp này được diễn giải như sau:Một gen hoạt hoá được thay thế bằng bản sao chép của một gen khác Do có sựthay thế một phần của gen nên đã tạo ra loại gen phức hợp và đặc trưng

2.1.2 Dịch tễ học bệnh Trypanosoma evansi

2.1.2.1 Phân bố bệnh Trypanosoma evansi

Bệnh tiên mao trùng phân bố rất rộng, từ phía Tây sang phía Đông báncầu Phía Tây bán cầu thuộc châu Mỹ, phía Đông bán cầu trải dài từ châu Phicho đến Philippine

Ở châu Phi, bệnh trải dài từ Tây sang Đông, phía Bắc qua vùng sa mạcSahara, dọc theo bờ biển Atlantique Địa trung hải

Bệnh tiên mao trùng xảy ra với tên gọi "bệnh Surra” ở Ả rập Saudi,

Yêmen, Sultanate, Ả Rập thống nhất, Thổ Nhĩ Kỳ, Israel, Syrie, Afganistan,Pakistan

Ở châu Á, bệnh xuất hiện ở Trung Á (thuộc Liên Xô cũ), Ấn Độ,Malaysia, bán đảo Đông Dương, Trung Quốc, Indonexia, Philippine

Ở châu Âu, bệnh xuất hiện ở Bungaria (nay đã được thanh toán), hiệnchỉ còn ở vùng Volga và Nam Capcase (Liên Xô cũ)

Ở châu Mỹ, bệnh xuất hiện ở Trung Mỹ, Nam Mỹ, đặc biệt phổ biến ởBrazil, Mexico, Venezuela, Colombia

Châu Úc cũng đã được xác định là có bệnh tiên mao trùng (Reid, 2002[36]; Losos, 1972 [31]) cho rằng, bệnh tiên mao trùng phổ biến nhất ởchâu Á và châu Phi, từ Ấn Độ đến Srilanca, Trung Quốc, Indonexia, TháiLan, Lào, Camphuchia, Iran, Philippine

Ở Việt Nam, bệnh tiên mao trùng thấy ở hầu hết các vùng sinh tháikhác nhau: miền núi, trung du, đồng bằng, ven biển Theo Phạm Sỹ Lăng(1982) [7], bệnh tiên mao trùng có ở tất cả các tỉnh miền Bắc (Bắc Kạn, LạngSơn, Tuyên Quang, Thái Nguyên, Ninh Bình, Hà Tây) Trâu, bò nhiễm bệnhvới tỷ lệ cao và thay đổi giữa các vùng khác nhau (trâu, bò ở đồng bằngnhiễm tiên mao trùng cao hơn vùng trung du và miền núi, đặc biệt ở trâu, bò

có nguồn gốc từ miền núi chuyển xuống vùng đồng bằng)

2.1.2.2 Vật chủ và vật môi giới truyền T evansi

Trong tự nhiên, tiên mao trùng ký sinh ở hầu hết các loài thú nuôi vàthú hoang, thấy nhiều hơn ở trâu, bò, ngựa, trâu bò rừng, hươu, nai, hổ, báo,

sư tử, chó, mèo, lạc đà, voi thỏ, chuột cống, chuột lang, chuột bạch, nhưngkhông ký sinh ở người

Sự lây truyền tiên mao trùng từ trâu, bò ốm sang trâu, bò khoẻ là nhờ

các loài ruồi hút máu (thuộc họ phụ Stomoxydinae) và các loài mòng hút máu (thuộc họ Tabanidae) Ruồi và mòng hút máu của gia súc bị bệnh, hút luôn cả

tiên mao trùng vào vòi hút, sau đó lại hút máu gia súc khoẻ, trong khi hút máu

sẽ truyền tiên mao trùng từ vòi hút vào máu con vật khoẻ Sự lây truyền nàymang tính chất cơ học Như vậy, ruồi và mòng hút máu là những vật môi giớitruyền bệnh tiên mao trùng quan trọng

Theo Phan Địch Lân (1974) [9], Phan Địch Lân (1994 - 2004) [10],phần lớn các loài mòng tập trung ở khu vực miền núi và trung du Trong 53loài mòng thì có tới 44 loài phân bố ở vùng rừng núi có độ cao dưới 1.000m

so với mặt nước biển, càng lên cao số loài càng ít dần (độ cao trên 1.000m chỉ

có 26 loài) Ở vùng trung du (rừng thưa, độ cao không quá 500m so với mặtnước biển có 27 loài; vùng đồi trọc chỉ có 9 - 11 loài; vùng rừng núi ven biểnphát hiện chỉ có 8 loài Những loài mòng phổ biến ở tất cả các vùng là:

Tabanus rubidus, Tabanus striatus, Chrysops dispar, Chrysozoma assamensis.

Những loài mòng chỉ gặp ở vùng núi là: Tabanus flavistriatus, Tabanus fumifer, Chrysops vander Miền Bắc nước ta có 4 loài ruồi hút máu, hai loài phổ biến ở tất cả các vùng là Stomoxys calcitrans và Liperosis exigua; hai loài chỉ thấy ở những vùng sinh cảnh đặc biệt: loài Bdellolarynx sanguinolentus (chỉ xuất hiện ở vùng có độ cao dưới 1.000m), loài Stomoxys indica

(chỉ thấy ở vùng núi Cẩm Thuỷ - Thanh Hoá)

Tác giả Phan Địch Lân (1994 - 2004) [10] kiểm tra ở nhiều địa điểm

thấy hai loài mòng Tabanus rubidus và Tabanus striatus mang tiên mao trùng với tỷ lệ 15,2% và 14,0%; ruồi hút máu Stomoxys calcitrans mang tiên mao

trùng với tỷ lệ 12,5% Ở những vùng đang có bệnh tiên mao trùng, kiểm traruồi và mòng hút máu dễ dàng tìm thấy tiên mao trùng Sau khi theo máu vàovòi hút ruồi và mòng, tiên mao trùng vẫn sống đến giờ thứ 53, thời gian hoạtđộng mạnh nhất là từ giờ thứ nhất đến giờ thứ 34, trung bình là 24 giờ Sự hoạtđộng của tiên mao trùng yếu dần từ giờ thứ 35 đến 42 Từ 46 - 53 giờ thì tiênmao trùng ngừng hoạt động

Hình thái tiên mao trùng khi ở trong vòi ruồi, mòng biến đổi theo thờigian: Từ 1 - 34 giờ có hình thái, kích thước bình thường; từ 35 - 45 giờ: Tiên

mao trùng có hình dạng thay đổi, tăng kích thước chiều rộng và thô dần; từ 46

-53 giờ: Tiên mao trùng trương to, duỗi thẳng, mất khả năng di động và ngừnghẳn hoạt động

Thực nghiệm đã chứng minh khả năng gây bệnh của tiên mao trùng sau

khi xâm nhập vào mòng Tabanus rubidus như sau: Thời gian từ giờ thứ 1 đến

thứ 5, tiên mao trùng có khả năng gây bệnh và làm chết chuột bạch tương tựnhư khi truyền thẳng máu có tiên mao trùng cho chuột; từ giờ thứ 6 đến thứ 7chỉ còn 30% số chuột thí nghiệm phát bệnh, thời gian gây bệnh kéo dài vàthời gian chết của chuột cũng dài Điều này có thể giải thích là do độc lực củatiên mao trùng giảm dần và số lượng tiên mao trùng còn hoạt lực gây bệnh

cũng giảm dần sau khi chúng xâm nhập vào mòng Tabanus rubidus Kết quả

này cũng phù hợp với nghiên cứu của Phạm Sỹ Lăng (1982) [7] cho rằng, thờigian xâm nhập của tiên mao trùng càng lâu thì tỷ lệ gây bệnh càng giảm, điều

này có thể do giảm số lượng và độc tính của Trypanosoma evansi trong máu

của ruồi, mòng

2.1.2.3 Tuổi vật chủ, mùa mắc T evansi

Trâu, bò và các loài gia súc khác ở mọi lứa tuổi đều nhiễm tiên maotrùng và đều phát bệnh, có thể dẫn đến tử vong hoặc suy nhược, thiếu máu,giảm sức đề kháng, giảm khả năng sinh đẻ và sức sản xuất

Phan Địch Lân (1994 - 2004) [10] đã tổng hợp kết quả điều tra 3.172trâu ở các tỉnh đồng bằng: Trâu dưới 3 năm tuổi nhiễm thấp nhất (3,2 - 6,l%),trâu 3 - 5 tuổi nhiễm cao hơn (6 - 12,7%), trâu 6 - 8 tuổi nhiễm cao nhất (12,9

- 14,8%), trâu trên 9 năm tuổi tỷ lệ nhiễm giảm thấp hơn trâu 3 - 8 năm tuổi

Phan Văn Chinh (2006) [2] cho biết, tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng caonhất ở 4 - 8 năm tuổi (trâu: 12,71%; bò: 5,77%), thấp nhất là trâu, bò dưới 3năm tuổi (6,92% và 2,31%) Mùa lây lan bệnh thường xảy ra trong các thángnóng ẩm, mưa nhiều (từ tháng 4 đến tháng 9) Thời gian này điều kiện sinhthái thuận lợi cho các loài ruồi, mòng phát triển, hoạt động mạnh, chúng hútmáu súc vật và truyền tiên mao trùng

Theo Luckins (1988) [32], sự xuất hiện lượng lớn ruồi, mòng trongmùa mưa nóng ẩm luôn có liên quan đến tình hình dịch tễ bệnh tiên mao trùng

ở trâu, bò, dê, lạc đà Từ cuối mùa thu, mùa đông và đầu mùa xuân, trâu bò

nhiễm tiên mao trùng phải sống trong điều kiện thời tiết lạnh, thiếu thức ănnên sức đề kháng giảm, bệnh thường phát ra vào thời gian này và trâu bò bị

đổ ngã hàng loạt Tiên mao trùng có sức đề kháng yếu, dễ chết khi tiếp xúcvới nước cất, cồn và thuốc sát trùng

2.1.3 Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng của T evansi

ở tại chỗ viêm này

Vào máu, tiên mao trùng nhân lên theo cấp số nhân ở trong máu, trongbạch huyết và ở trong các mô khác của cơ thể vật chủ theo cách phân chiatheo chiều dọc Số lượng tiên mao trùng trong máu không phải lúc nào cũngnhư nhau Mật độ tiên mao trùng thay đổi theo ngày Biểu đồ sóng tiên maotrùng cho thấy, xen kẽ giữa những sóng tiên mao trùng mạnh là những đợtsóng yếu Mỗi đợt sóng tiên mao trùng bắt đầu bằng sự tăng số lượng tiênmao trùng trong máu, sau đó giảm và khó phát hiện thấy tiên mao trùng Mỗiđợt tiên mao trùng tăng lên trong máu là biểu hiện sự xuất hiện một quần thểtiên mao trùng có tính kháng nguyên bề mặt mới, quần thể này có thể tiếp tụcsinh sản và tồn tại một thời gian cho đến khi cơ thể xuất hiện kháng thể đặchiệu với chúng

Tiên mao trùng phát triển nhanh trong máu, tiêu thụ glucose và các chấtđạm, chất béo và khoáng chất trong máu ký chủ bằng phương thức thẩm thấuqua bề mặt cơ thể để duy trì hoạt động và sinh sản Ở súc vật bị bệnh, trong1ml máu có thể có 10.000 - 30.000 tiên mao trùng Với số lượng nhiều nhưvậy, tiên mao trùng chiếm đoạt dinh dưỡng nhiều, làm cho súc vật bệnh gầycòm, thiếu máu và mất dần khả năng sản xuất sữa, thịt, mất dần khả năng sinhsản và giảm sức đề kháng với các bệnh khác

Sống trong máu vật chủ, tiên mao trùng còn tạo ra độc tố Trypanotoxin,

độc tố này gồm: Độc tố do tiên mao trùng tiết ra qua màng thân trong quátrình sống và độc tố do xác chết của tiên mao trùng phân huỷ trong máu sau

15 - 30 ngày Độc tố của tiên mao trùng tác động lên hệ thần kinh trung ươnglàm rối loạn trung khu điều hoà thân nhiệt, gây sốt cao và gián đoạn (lúc sốt,lúc hết sốt xen kẽ nhau) Khi sốt thường có rối loạn về thần kinh (kêu rống,run rẩy, ngã vật xuống) Độc tố cũng phá huỷ hồng cầu, ức chế cơ quan tạomáu làm cho vật chủ thiếu máu và suy nhược dần Độc tố còn tác động tới bộmáy tiêu hoá, gây rối loạn tiêu hoá, làm con vật ỉa chảy Hội chứng tiêu chảythường xảy ra khi xuất hiện tiên mao trùng trong máu con vật bệnh

Khi tăng lên với số lượng lớn trong máu, tiên mao trùng còn làm tắccác mao mạch, làm tăng tính thấm thành mạch, dần dần tạo ra các ổ thuỷthũng chất keo vàng dưới da

2.1.3.2 Triệu chứng lâm sàng của bệnh T evansi ở trâu, bò

Trâu, bò bị bệnh thể hiện các triệu chứng lâm sàng chủ yếu như sau:

- Sốt cao và gián đoạn: Sau 14 - 30 ngày bị ruồi, mòng hút máu truyềntiên mao trùng, trâu bò thường đột ngột lên cơn sốt (40 - 41,70C) kéo dài 2 - 4ngày rồi giảm, thời gian sau nhiệt độ lại tăng lên Thời gian gián đoạn giữahai cơn sốt dài hay ngắn tuỳ theo thể trọng con vật Khi sốt, kiểm tra máuthường thấy tiên mao trùng

- Hội chứng thần kinh: Ở một số trâu, bò khi lên cơn sốt còn thể hiệnhội chứng thần kinh như điên loạn, mắt đỏ ngầu, húc đầu vào tường, chạyvòng quanh kêu rống lên Trường hợp nhẹ thấy run rẩy từng cơn, mắt trợnngược rồi đổ ngã vật xuống, sùi bọt mép giống như trâu bị cảm nắng Sau 20 -

30 phút con vật lại đứng dậy đi lại được Những trâu bò mắc bệnh có triệuchứng lâm sàng như trên thường là mắc bệnh ở thể cấp tính

Trâu, bò bị bệnh mạn tính thường kéo dài, cơ thể suy yếu, liệt hai chânsau, nằm tư thế quỳ và không đi lại được Mặc dù nằm liệt nhưng vẫn ăn vànhai lại cho đến khi sắp chết

- Phù thũng dưới da: Phù thũng thường thấy ở vùng thấp của cơ thể như

ở bốn chân (từ khớp khuỷu trở xuống), phần yếm, ngực, bộ phận sinh dục

- Viêm giác mạc và kết mạc mắt: Triệu chứng này thấy ở hầu hết trâu,

bò bệnh Mắt có dử trắng hay vàng, chảy liên tục, nếu nặng thì mắt sưng đỏngầu Khi khỏi bệnh, mắt có màng trắng (cùi nhãn) keo che kín giác mạc

- Hội chứng tiêu hoá: Một số trâu, bò bệnh bị ỉa chảy nặng, phân lỏng,màu vàng, sau chuyển màu xám, có lẫn bọt và chất nhầy Các đợt ỉa chảy tiếptheo những cơn sốt cách quãng Ỉa chảy trong bệnh tiên mao trùng thường daidẳng và con vật vẫn ăn được

- Gầy yếu, suy nhược: Ở thể bệnh cấp tính trâu, bò gầy sút nhanh, chỉsau 7 - 14 ngày từ khi phát bệnh con vật đã gầy rộc, mắt trũng sâu Nếu bệnhkéo dài thì con vật gầy xơ xác, lông dựng ngược, da khô nhăn nheo, niêm mạcmắt nhợt nhạt, lông dễ rụng, dần dần suy nhược cơ thể nặng, mất khả năngcày kéo và sinh sản Nếu gặp điều kiện bất lợi như thiếu ăn, trời rét thì trâu,

bò dễ chết Trong thực tế, có khoảng 3% trâu bệnh ở thể ẩn vẫn béo khoẻ, làmviệc bình thường khi được chăm sóc, nuôi dưỡng tốt

Tình trạng thiếu máu thể hiện rõ trong bệnh do T evansi gây ra Theo

Silva Rams (1995) [37], số lượng hồng cầu và hàm lượng huyết sắc tố giảm,

số lượng bạch cầu tăng, thành phần bạch cầu thay đổi: Bạch cầu lympho, bạchcầu ái toan tăng nhưng bạch cầu trung tính giảm, protein tổng số và albumingiảm rõ rệt

Khi protein tổng số và albumin giảm thì các thành phần α, β và γglobulin đều tăng, chỉ số A/G < 0,5 (Phạm Sỹ Lăng, Lê Ngọc Mỹ (1984) [8])

2.1.3.3 Bệnh tích

Trâu, bò bị bệnh tiên mao trùng khi chết gầy xơ xác, mổ khám thấy cónhững biến đổi bệnh tích đại thể rõ rệt ở hệ tuần hoàn và hô hấp: Tim nhão,xoang bao tim tích nước vàng; phổi sung huyết và tụ máu từng đám nhỏ; gansưng to, nhạt màu; lách sưng, mềm nhũn và nhạt màu; hạch lâm ba sưng và có

tụ máu trong hạch; cơ nhão, màu nhợt nhạt, nhát cắt rỉ nước; xoang ngực vàxoang bụng tích dịch màu vàng nhạt; có những đám keo nhầy vàng dưới vùng

da thuỷ thũng

2.1.4 Chẩn đoán bệnh tiên mao trùng

2.1.4.1 Chẩn đoán lâm sàng

Các biểu hiện lâm sàng đặc trưng của bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò,không phải lúc nào cũng phát hiện được Rất nhiều gia súc mang bệnh nhưngkhó phát hiện các triệu chứng đặc trưng, nhất là đối với những gia súc mắcbệnh tiên mao trùng mãn tính Đối với gia súc mắc bệnh ở thể cấp tính, cácbiểu hiện bệnh đặc trưng là sốt cao, bỏ ăn, có triệu chứng thần kinh (điênloạn) và chết nhanh Trâu bị bệnh mãn tính có thể thấy triệu chứng: Sốt giánđoạn, gầy còm, thiếu máu kéo dài, viêm giác mạc, phù thũng ở bụng và chânsau, chết do kiệt sức (Phạm Sỹ Lăng, 1982 [7]) Triệu chứng sẩy thai có thểthấy ở trâu, bò bị bệnh tiên mao trùng (Nguyễn Đăng Khải, 1995 [5])

2.1.4.2 Chẩn đoán thí nghiệm

Có nhiều phương pháp chẩn đoán tiên mao trùng trong phòng thínghiệm, mục đích là phát hiện tiên mao trùng trong máu gia súc Tùy từngtrường hợp bệnh, tuỳ điều kiện mà có thể làm cùng lúc một số phương pháphoặc lựa chọn một phương pháp phù hợp và có độ chính xác cao

* Phương pháp phát hiện tiên mao trùng trực tiếp:

Muốn phát hiện tiên mao trùng trực tiếp, có thể áp dụng những phươngpháp sau:

- Phương pháp xem tươi (Direct smear)

Khi bệnh súc sốt, T evansi thường xuất hiện trong mao quản ngoại vi.

Vì vậy, nên lấy máu vùng ngoại vi để xem tươi

Cách làm: Cho 1 giọt máu nhỏ lên phiến kính đã có sẵn 1 giọt chấtchống đông Đậy la men lên để máu dàn theo la men thành một lớp mỏng Soidưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x 10 và 10 x 20) để phát hiện tiên maotrùng sống

- Phương pháp nhuộm Giemsa tiêu bản máu khô (Romanovsky)

+ Phương pháp giọt dầy: Đặt 1 giọt máu to vào giữa phiến kính, dùngmột góc của đầu một phiến kính khác ria tròn giọt máu với đường kínhkhoảng 1 - 1,25 cm Để khô tự nhiên trong khoảng 1 giờ, rồi cố định bằng cồn

Methanol, nhuộm Giemsa [1 giọt Giemsa + 1ml dung dịch PBS (Phosphat

Buffered Saline) pH = 7,2] trong 25 phút Rửa tiêu bản dưới vòi nước chảymạnh, để khô rồi soi dưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x 100 hoặc 10 x 90)

Phương pháp này có nhược điểm là dễ làm tổn thương tiên mao trùng.

Do đó, khó phân biệt được các loài khác nhau trong trường hợp nhiễm nhiềuloài tiên mao trùng cùng một lúc

+ Phương pháp giọt mỏng: Đặt 1 giọt máu cách một đầu phiến kính2cm, dùng la men ria máu thành một lớp mỏng Để khô, cố định bằng cồn

Methanol trong 2 phút Nhuộm Giemsa trong 25 phút (l giọt Giemsa + 1ml

dung dịch PBS pH = 7,2) Rửa tiêu bản dưới vòi nước chảy mạnh, để khô, soidưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x 100 hoặc 10 x 90)

Ưu điểm của phương pháp giọt mỏng là có thể phân biệt được hình tháicác loài tiên mao trùng khác nhau

+ Phương pháp làm tan hồng cầu: Dung dịch SDS (Sodium DodecylSulfat) là chất làm tan hồng cầu Nhờ dung dịch SDS, tiên mao trùng dễ dàngđược phát hiện trong máu Dung dịch SDS rất độc nên tránh tiếp xúc với da

và tránh hút bằng pipet Dung dịch SDS dễ bảo quản ở nhiệt độ thường trongnhiều tháng (Van Meirvenne, 1989 [44])

* Phương pháp tập trung tiên mao trùng:

Người ta đã sử dụng phương pháp ly tâm tập trung tiên mao trùng bằngống Haematocrit hoặc tách tiên mao trùng bằng gen DEAE - cellulose

- Phương pháp ly tâm tập trung bằng ống Haematocrit (Woo, 1971[45]): Cho máu động vật nghi mắc bệnh vào ống Haematocrit, một đầu ốngđược bịt kín bằng chất dẻo matit, một đầu ống để hở Ly âm với tốc độ 14.000vòng/phút trong 5 phút Sau đó kiểm tra sự tập trung của tiên mao trùng tại vịtrí tiếp giáp giữa huyết tương và hồng cầu (độ phóng đại 10 x 10)

Phương pháp này đơn giản, phát hiện tiên mao trùng tốt hơn phươngpháp xem tươi và nhuộm Giemsa Song, tỷ lệ phát hiện chưa cao

Với ống Haematocrit trên, có thể thực hiện phương pháp Darkground:Dùng cưa y tế cắt ống ở vị trí tiên mao trùng tập trung (ranh giới giữa huyếttương và hồng cầu), nhỏ 1 giọt huyết tương lên phiến kính, đậy la men vàkiểm tra dưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x 40)

* Phương pháp tiêm truyền động vật thí nghiệm:

Đây là phương pháp phổ biến, hiệu quả, chính xác và thường được ứngdụng nhiều để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng ở Việt Nam Phương pháp này

có ưu điểm là chính xác, do trực tiếp phát hiện thấy tiên mao trùng sau khinhân chúng lên trong động vật thí nghiệm mẫn cảm Song, nhược điểm củaphương pháp tiêm truyền động vật thí nghiệm là khi cần chẩn đoán nhanh, với

số lượng nhiều và thời gian ngắn thì phương pháp này không thể đáp ứngđược (Lê Ngọc Mỹ và cs, 1994 [13]; Đoàn Văn Phúc và cs, 1994 [24])

* Phương pháp chẩn đoán huyết thanh học:

Bằng phương pháp huyết thanh học, có thể phát hiện kháng thể hoặckháng nguyên tiên mao trùng Đây là các phương pháp huyết thanh họcđặc hiệu

- Các phương pháp phát hiện kháng thể kháng tiên mao trùng

Khi tiên mao trùng ký sinh, cơ thể vật chủ sinh ra kháng thể đặc hiệuchống lại tiên mao trùng Những phương pháp sau cho phép phát hiện khángthể kháng tiên mao trùng trong máu vật chủ:

+ Phương pháp ngưng kết trên phiến kính (SAT: Slice Agglutination Test)

Theo Đoàn Văn Phúc và cs (1989) [22]; Lê Ngọc Vinh (1992) [26],phương pháp được tiến hành như sau: Hoà tan 1 giọt huyết thanh trâu, bò nghimắc bệnh vào 1 giọt nước muối sinh lý trên phiến kính, sau đó cho 1 giọt máuchuột bạch có nhiều tiên mao trùng vào, trộn đều, đậy la men và soi dưới kínhhiển vi (độ phóng đại 200 - 400 lần) Nếu thấy ngưng kết hình hoa cúc làdương tính và ngược lại là âm tính Phương pháp này đơn giản, dễ làm và cóthể áp dụng trên diện rộng

+ Phương pháp LATEX (Latex Agglutination Test)

LATEX là phương pháp được dùng để phát hiện kháng thể lưu động cótrong máu của gia súc mắc bệnh tiên mao trùng

Nguyên lý của phương pháp LATEX: Khi kháng nguyên bề mặt T evansi

gắn lên các hạt latex kết hợp với kháng thể đặc hiệu kháng tiên mao trùng ởtrên bản nhựa, sẽ xảy ra phản ứng ngưng kết giữa kháng nguyên với khángthể Hiện tượng ngưng kết có thể quan sát được bằng mắt thường, và đượcgiải thích là do kháng nguyên bề mặt tiên mao trùng được gắn lên các hạtlatex là loại kháng nguyên hữu hình, có nhiều điểm quyết định tính khángnguyên bề mặt (epitop surface) Còn kháng thể đặc hiệu kháng tiên mao trùnglại có nhiều điểm thụ thể (receptor) tương ứng đặc hiệu với các điểm quyết

định của kháng nguyên Do đó, khi kháng nguyên tiên mao trùng gặp khángthể đặc hiệu kháng tiên mao trùng, sẽ có hiện tượng một phân tử kháng thểđặc hiệu liên kết với nhiều phân tử kháng nguyên và ngược lại Kết quả là cáchạt latex cùng với kháng nguyên chụm lại, tạo thành đám ngưng kết có thểquan sát bằng mắt thường Kháng nguyên dùng cho phản ứng là kháng

nguyên bề mặt được tinh chế từ chủng T evansi không nhuộm màu.

Phương pháp này có thể ứng dụng trong kiểm tra dịch tễ và có thể ứngdụng ở cơ sở Tuy nhiên, tỷ lệ phát hiện bệnh không cao do phương pháp nàycho kết quả dương tính cả khi con vật khỏi bệnh nhưng vẫn còn kháng thể tồntại trong huyết thanh Mặt khác, đối với những súc vật mới nhiễm bệnh tiênmao trùng, trong huyết thanh chưa có kháng thể nên khi kiểm tra bằngphương pháp LATEX sẽ cho kết quả âm tính

+ Phương pháp CATT (Card Agglutination Test for Trypanosomiasis)

Đây là phương pháp ngưng kết trực tiếp giữa kháng nguyên và khángthể trên bản nhựa, được dùng để phát hiện kháng thể lưu động trong máuđộng vật nhiễm bệnh

Nguyên lý: Kháng nguyên tiên mao trùng đã được nhuộm màu kết hợpvới kháng thể tạo thành những đám kết tủa li ti màu xanh

Cách tiến hành: Dùng ống hút 2,5ml dung dịch buffer cho vào lọ khángnguyên chuẩn đã được nhuộm màu (CATT reagent), lắc đều Cho vào lọkháng nguyên đối chứng (đối chứng dương, đối chứng âm) mỗi lọ 0,5ml dungdịch buffer, lắc đều Dùng micropipette pha loãng huyết thanh theo tỷ lệ cầnchẩn đoán (1/8) Cho các mẫu huyết thanh cần chẩn đoán đã được pha loãnglần lượt vào các vòng tròn của bản CATT, cho kháng nguyên đối chứng vàohai vòng tròn khác của bản, mỗi loại 1 giọt (tương đương 45µl) Sau đó chovào tất cả các vòng tròn trên bản CATT 1 giọt kháng nguyên chuẩn Dùngque nhựa trộn đều Cuối cùng cho lên máy lắc 5 phút (60 - 70 lần/phút) vàđánh giá kết quả

Ứng dụng phương pháp CATT ở Việt Nam để điều tiết bệnh tiên maotrùng, Lương Tố Thu và cs (1996) [19] đã cho biết phương pháp này dễ sửdụng, có độ nhạy, độ đặc hiệu cao Theo tác giả, ứng dụng IFAT chẩn đoáncác mẫu thu thập ở địa phương cho biết độ nhạy của CATT gần gấp đôi

phương pháp tiêm truyền chuột bạch (độ nhạy CATT 73,75%; tiêm truyềnchuột bạch 40%).

+ Phương pháp kháng thể huỳnh quang gián tiếp IFAT (Indirect Fluorescent Antibody Test)

Phản ứng này là phản ứng huyết thanh học đặc hiệu có độ nhạy cao,được ứng dụng rộng rãi trong phòng thí nghiệm và thực địa Ngoài việc đượcdùng làm phản ứng chuẩn để so sánh với các phương pháp huyết thanh khác,phương pháp IFAT còn được dùng trong nghiên cứu các dòng kháng nguyên,phát hiện kháng thể (Luckins, 1988 [32]; Davison, 1999 [29])

Trong phương pháp IFAT, huyết thanh dương chuẩn được lấy từ trâu

bò mắc bệnh tiên mao trùng, huyết thanh âm chuẩn được lấy từ trâu bò khoẻmạnh, huyết thanh cần chẩn đoán là huyết thanh lấy từ gia súc nghi mắc bệnh

Ứng dụng phương pháp này ở Việt Nam, Lương Tố Thu và cs (1994)[20] đã chế tạo conjugate huỳnh quang trên thỏ kháng IgG của bò để chẩnđoán bệnh tiên mao trùng Độ pha loãng của conjugate tự chế sử dụng chophản ứng là 1/8 và huyết thanh chuẩn pha loãng ớ 1/40 Theo Lương Tố Thu

và Lê Ngọc Mỹ (1996) [19], độ nhạy của phương pháp IFAT là 71,25

Để tinh chế kháng nguyên T evansi dùng trong phản ứng miễn dịch

huỳnh quang gián tiếp để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng ở trâu bò, Vương

Thị Lan Phương (2004) [25] đã nghiên cứu kháng nguyên bề mặt T evansi

phân lập từ trâu, bò ở 6 tỉnh phía Bắc Việt Nam và cho biết: Đã thu được 6mẫu tiên mao trùng từ 6 tỉnh, tiến hành phân dòng, phân VAT và thu được 26VAT thuộc 6 kho kháng nguyên khác nhau Bằng phản ứng dung giải miễndịch và phương pháp thấm miễn dịch, tác giả đã xác định được sự thay đổi

kháng nguyên bề mặt của T evansi: Đa số các VAT của các kho kháng

nguyên khác nhau là khác nhau, chỉ có 8/26 VAT có hiệu giá kháng thể đơngiá đặc hiệu, có phản ứng chéo với các VAT của các kho kháng nguyên khác.Các VAT trội xuất hiện sớm trong 4 tuần lễ đầu nhiễm bệnh, có tính khángnguyên mạnh có thể nghiên cứu ứng dụng chế kháng nguyên chẩn đoán Từ đó,tác giả đã tinh chế kháng nguyên theo phương pháp tách tiên mao trùng đểdùng trong phản ứng miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, chẩn đoán bệnh tiênmao trùng cho độ nhạy và độ đặc hiệu cao

+ Phương pháp ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Assay)

Phương pháp ELISA là một trong những phương pháp hiện đại nhấtđược ứng dụng để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng

Nguyên lý: Dùng kháng thể hoặc kháng thể kháng Globulin (khángkháng thể) có mang một enzym (phosphatase hoặc Peroxydase) được gắn trênmảnh Fc, cho kết hợp trực tiếp hoặc gián tiếp với kháng nguyên Sau đó, cho

cơ chất sinh màu vào, cơ chất sẽ kết hợp với enzym và bị enzym phân huỷ tạonên màu So sánh với màu của quang phổ kế sẽ định lượng được mức độ củaphản ứng

Phương pháp ELISA hiện đang được sử dụng rộng rãi ở các nước trên thếgiới Ở Việt Nam, Lê Ngọc Mỹ và cs (1994) [13] đã bước đầu chế kháng nguyêntiên mao trùng và ứng dụng để chẩn đoán bệnh tiên mao trùng ở nước ta

- Các phương pháp phát hiện kháng nguyên tiên mao trùng

+ Phương pháp ELISA kháng nguyên (Ag - ELISA)

Đây là phương pháp sử dụng phản ứng ELISA kháng nguyên để pháthiện kháng nguyên lưu động trong máu của gia súc nhiễm bệnh Phản ứngdựa trên kháng thể đơn dòng đặc hiệu với tiên mao trùng Lê Ngọc Mỹ và cs(1994) [14] đã bước đầu ứng dụng phương pháp này để chẩn đoán bệnh tiênmao trùng ở Việt Nam Tuy nhiên, theo cơ quan năng lượng nguyên tử thếgiới (IAEA) (1997), phương pháp ELISA kháng nguyên có độ nhậy kém hơn

so với các phương pháp phát hiện tiên mao trùng cổ điển Vì vậy, phươngpháp này đã không được phổ biến trong thời gian hiện tại và tương lai (IAEA

đã không sản xuất đĩa Ag - ELISA cho nhiều nước trên thế giới)

+ Phản ứng Suratex:

Phản ứng Suratex là phản ứng ngưng kết giữa các hạt latex được gắnkháng thể đơn dòng với kháng nguyên lưu động trong máu động vật nhiễmtiên mao trùng (Nantulya, 1994 [33]) Phản ứng này hiện đang được thửnghiệm và đánh giá ở thực địa

2.1.5 Phòng chống T evansi và điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò

2.1.5.1 Phòng bệnh

Để phòng ngừa bệnh tiên mao trùng có hiệu quả cao, các nhà khoa học

đã đề nghị áp dụng 3 biện pháp sau:

* Diệt tiên mao trùng trên cơ thể ký chủ:

Diệt tiên mao trùng ký sinh ở vật chủ không những ngăn chặn được táchại gây bệnh của chúng mà còn làm cho bệnh mất khả năng lây lan Các biệnpháp cụ thể là:

- Phát hiện gia súc nhiễm tiên mao trùng ở vùng có bệnh và nhữngvùng lân cận, nhốt riêng trong chuồng có lưới để ngăn côn trùng và điều trịtriệt để cho gia súc bệnh

- Ở những vùng không có bệnh thì không nhập gia súc từ vùng có bệnh

về Nếu thật cần thiết thì chỉ nhập những gia súc khoẻ (có kết quả kiểm tra âmtính với tiên mao trùng), song vẫn cần nhốt riêng để theo dõi Nếu không bịbệnh mới cho nhập đàn Phát hiện và diệt những loài thú hoang nghi là nguồntàng trữ mầm bệnh, hoặc không chăn thả gia súc trong những khu vực cónhững loài đó sinh sống

* Diệt côn trùng môi giới truyền bệnh:

Hội nghị lần thứ VI của Uỷ ban khoa học Quốc tế nghiên cứu về tiênmao trùng đã đề ra những biện pháp tiêu diệt côn trùng như sau:

- Diệt côn trùng bằng thay đổi sinh thái:

Thay đổi sinh thái là thay đổi điều kiện sống, làm cho côn trùng khôngsinh sản, không thực hiện được chu kỳ phát triển

Phát quang cây cối ở từng khu vực, không để nước tù đọng, ủ phân để diệttrứng và ấu trùng ruồi, mòng, làm chuồng gia súc có lưới ngăn côn trùng là cácbiện pháp hữu hiệu, tạo ra những điều kiện bất lợi cho đời sống của côn trùng.Tuy nhiên, do côn trùng có khả năng di chuyển khá mạnh nên các biện pháptrên phải thực hiện đồng thời trên phạm vi rộng mới có hiệu quả

Theo Challier (1974), ở Nigieria, việc phát quang cây cối xung quanh

hồ và các con sông trong một khu vực rộng 400 - 800 mét, dài 10.000 mét chỉhạn chế được một phần hoạt động của những côn trùng môi giới truyền bệnhtiên mao trùng ở đó

- Diệt côn trùng bằng hoá dược:

Có thể dùng các hoá dược tiêu diệt côn trùng môi giới của tiên maotrùng Các hoá dược đã được dùng là: Endosulfan, Brophos, Dieldrine,Tetracloreinphos,…

- Diệt côn trùng bằng phương pháp sinh học:

Các nhà khoa học đã phát hiện được 25 loài ong và côn trùng ký sinh gây hạicho các loài ruồi, mòng môi giới truyền bệnh tiên mao trùng

Một số loài vi khuẩn có thể xâm nhập vào cơ thể ruồi hút máu làm chúngmắc bệnh và chết

Laird (1974) đã phân lập được một số loài vi khuẩn như: Bacillus thuringiensis, B.mathisi để tiêu diệt các loài ruồi hút máu Đây là biện pháp diệt côn

trùng có nhiều ưu điểm: không ảnh hưởng đến môi trường Tuy nhiên, biện phápnày mới đang ở giai đoạn thử nghiệm

Jordan và cs (1974) đã gây đột biến ruồi hút máu bằng một số hoá chất và tiasáng có bước sóng ngắn, bằng phương pháp di truyền quần thể, đã tạo ra nhữngruồi đực vô tính rồi thả với ruồi cái trong tự nhiên Kết quả là làm cho ruồi khôngsinh sản được Phương pháp này có nhiều khả năng thành công nhưng rất tốn kém

Nhìn chung, các biện pháp tiêu diệt côn trùng môi giới có hiệu quả nhất địnhnhưng cũng còn nhiều hạn chế

* Phòng bệnh cho gia súc bằng hoá dược:

Hội nghị chuyên đề quốc tế về phòng bệnh tiên mao trùng (1978) đã kếtluận: Hiện nay, biện pháp sử dụng hoá dược để tiêm phòng rộng rãi cho gia súc ởnhững vùng bệnh tiên mao trùng lưu hành cần phải được tiếp tục trong nhiều năm(Touratier và cs, (1979) [43])

Từ năm 1934, tổ chức dịch tễ gia súc đã đề nghị sử dụng Novarsenobenzol

để tiêm phòng cho toàn đàn ngựa ở những vùng có bệnh tiên mao trùng Hiện nay,

thuốc Trypamidium, liều 0,5 mg/kg TT, được khuyên dùng để phòng bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò Theo Touratier (1979) [43] dùng Trypamidium tiêm bắp, thời

gian phòng bệnh có thể tới 4 - 6 tháng; trong khi đó tiêm tĩnh mạch chỉ phòng bệnhđược 2 tháng

2.1.5.2 Điều trị T evansi

Một số loại hoá dược đã được dùng để điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu,

bò, ngựa ở nước ta từ những năm 60 đến nay gồm:

- Naganin, liều 10 mg/kgTT Pha thuốc với dung dịch nước muối sinh lýhoặc nước cất thành dung dịch 10%, tiêm tĩnh mạch

Phan Địch Lân và cs (1962), Phạm Sỹ Lăng và cs (1965) đã thử nghiệm

Naganin và cho biết, thuốc có tác dụng tốt trong điều trị bệnh do T evansi

trên trâu, bò ở nước ta

- Berenyl, liều 3 mg/kgTT Pha thuốc với nước cất theo tỷ lệ cứ 0,8gam thuốc trong 5 ml nước cất Tiêm sâu bắp thịt (không dùng quá 9 gam chomột gia súc)

Hồ Thị Thuận (1980) đã dùng Berenyl trị bệnh tiên mao trùng cho trâu

bò, thấy kết quả điều trị tốt

Phan Văn Chinh (2006) [2] dùng Berenyl điều trị bệnh tiên mao trùngcho trâu, bò ở các tỉnh miền Trung và cho biết, thuốc đạt hiệu lực 100% vớinhững trâu, bò bị bệnh

Nguyễn Quốc Doanh và cs (1997) đã dùng Trypamidium samorin liều

1 mg/kgTT Tiêm sâu bắp thịt điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò và xácđịnh, thuốc có hiệu lực và độ an toàn rất cao 100%

Phan Văn Chinh (2006) [2], sử dụng thuốc Trypamidium, liều1mg/kgTT, cho tỷ lệ diệt hết tiên mao trùng là 100%

Điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò bằng Trypazen với liều 3,5mg/kgTT, Nguyễn Quốc Doanh và cs, (1997) cho rằng thuốc rất an toàn, tỷ

lệ khỏi bệnh là 100%

2.2 Tình hình nghiên cứu về bệnh T evansi

2.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước

Ở Việt Nam, các bệnh về ký sinh trùng đường máu ở gia súc là mộtnguyên nhân gây thiệt hại lớn cho ngành chăn nuôi Hàng năm, ở miền Bắc có

một số lượng lớn trâu bò chết vào các vụ đông xuân, mà nguyên nhân chính là

do tiên mao trùng; có những thời điểm chúng đã gây thành ổ dịch lớn ở cácđịa phương như: ở Thanh Hóa năm 1983, ngoại thành Hà Nội năm 1985.Ngoài gây ra bệnh ở trâu bò, chúng còn gây bệnh cho lợn, ngựa, dê,… gâynhững tổn thất không nhỏ, đặc biệt với lợn nái sinh sản

Trong những năm 1960 trở về trước, ở nước ta bệnh do T evansi chỉ

được coi như bệnh của ngựa ở miền núi Nhưng từ những năm sau đó, bệnh

do T evansi đã trở thành một bệnh quan trọng gây tác hại lớn cho đàn trâu bò

cày kéo ở các vùng đồng bằng miền Bắc Việt Nam

Phạm Sỹ Lăng (1978-1979) [6], công bố, ổ dịch do tiên mao trùng xảy

ra tại hai địa điểm là Hoàng Long và Kim Thanh gây chết trâu bò với tỷ lệ caodao động từ 6,3 - 16,2% tổng đàn Tỷ lệ nhiễm theo điều tra, ở trâu là 7 -13%,

ở bò là 2 - 7%; nhiễm nặng nhất là ở trâu lứa tuổi từ 6 - 8 năm tuổi Thườngtrâu bò càng già, tỷ lệ mắc càng cao

Tổng hợp từ báo cáo của Chi cục Thú y các tỉnh miền Bắc, thấy số trâu,

bò bị bệnh tiên mao trùng như sau: Từ năm 1960-1965, số trâu bò bị mắcbệnh là 1776 con, chết 520 con; từ năm 1979-1983, số gia súc ốm là 4629con, chết 3243; từ năm 1984-1988, số gia súc ốm là 4028, chết 3710

Lê Ngọc Mỹ và cs (1994) [13] đã điều tra tình hình nhiễm T evansi ở trâu bò Việt Nam Kết quả điều tra cho thấy, trâu bò nhiễm T evansi

với tỷ lệ cao (21,27%), trong đó trâu bò nuôi ở các tỉnh miền núi phía Bắc

nhiễm T evansi cao hơn ở đồng bằng

Theo Lê Đức Quyết và cs (1995) [15], Phạm Chiến và cs (1999) [1], tỷ

lệ nhiễm T evansi trên đàn trâu ở một số tỉnh miền Nam và Tây Nguyên là

22,12%; ở bò là 6,6 - 10,3%

Phan Lục và cs (1996) [11], cho biết: tỷ lệ nhiễm T evansi của bò ở

một số địa phương miền Bắc là 5,9% Khi nghiên cứu tình hình nhiễm đơnbào của trâu bò một số tỉnh trung du và đồng bằng phía Bắc Việt Nam thấy, tỷ

lệ nhiễm T evansi ở trâu là 28,8%; ở bò là 9,9% Trong đó, trâu dưới 2 tuổi

nhiễm 2,8%; từ 2 - 8 tuổi nhiễm 30,7% và trên 8 tuổi nhiễm tới 40,3%; bò dưới

2 tuổi nhiễm 1,5%; từ 2 - 8 tuổi nhiễm 11,5% và bò trên 8 tuổi nhiễm 28%

Nghiên cứu sự khác biệt về vùng miền, Phan Lục và cs (1996) [11], chobiết: Vùng đồi núi, trâu nhiễm tiên mao trùng 22,0%; bò nhiễm 29% Vùngtrung du, trâu nhiễm 33,8%; bò nhiễm 11,2% Vùng đồng bằng, trâu nhiễm18,3%; bò nhiễm 8,7%.

Hoàng Thạch và cs (1996) [17], nghiên cứu về tình hình nhiễm tiênmao trùng ở trâu và bò sữa khu vực phía Nam cho biết: Với 1830 mẫu nghiêncứu tại các tỉnh Sông Bé, Đồng Nai, Lâm Đồng, Long An và Thành phố HồChí Minh phát hiện 146 mẫu nhiễm tiên mao trùng, chiếm tỷ lệ 7,97% Trong

đó, tỷ lệ nhiễm của trâu là 9,98% và ở bò là 12,60%

Hồ Thị Thuận, Phan Hoàng Dũng (1996) [21] điều tra tình hình nhiễm

T evansi ở một số đàn bò sữa các tỉnh phía Nam như: An Phước (Đồng Nai),

Đức Trong (Lâm Đồng), Tân Thắng và các hộ chăn nuôi ở thành phố Hồ ChíMinh, huyện Đức Hòa (Long An), Bến Cát (Sông Bé) bằng phương pháp MI

và ELISA thấy tỷ lệ nhiễm trung bình là 7,97% Trong đó: Trâu, bò ở Bến Cátnhiễm 9,98%; ở An Phước là 12,60%; Lâm Đồng là 2,09%; còn ở các nơikhác không có

Lê Ngọc Mỹ và cs (1994) [14], nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ bệnh

tiên mao trùng do T evansi gây ra cho biết: Hiện tượng sảy thai ở trâu bò mắc

tiên mao trùng rất cao, dao động từ 19,23 - 47,82% Các tác giả cho biết,trong thời gian nghiên cứu, ghi nhận được số trâu bò mắc tiên mao trùng màkhông biểu hiện triệu chứng lâm sàng chiếm tỷ lệ rất cao Với 121 mẫu kiểmtra trâu bò khỏe mạnh, không biểu hiện triệu chứng lâm sàng, phát hiện36,17% có tiên mao trùng trong máu

Theo Nguyễn Đức Tân và cs (2004) [16], điều tra tình hình nhiễm kýsinh trùng đường máu ở một số đàn bò thuộc một số tỉnh Nam Trung bộ vàTây Nguyên cho biết: Nghiên cứu tổng số 557 mẫu phát hiện 49 mẫu có tiênmao trùng, chiếm 8,8% Trong đó nhiễm nặng nhất là đàn bò nuôi tại tỉnh ĐắcLắc, nhiễm 10,3%; nhiễm thấp nhất là đàn bò nuôi tại tỉnh Phú Yên, nhiễm6,6%; đàn bò nuôi tại Khánh Hòa nhiễm 8,5%

Theo Hà Viết Lượng (1998) [12], tỷ lệ bò nhiễm T evansi ở các tỉnh

miền Trung là 8,99%

2.2.2 Tình hình nghiên cứu ở nước ngoài

Năm 1880, Laveran là người đầu tiên phát hiện Trypanosoma evansi

trong máu lạc đà ở bang Punjab (Ấn Độ)

Năm 1885, Steel phát hiện ký sinh trùng này trong máu la ở Miến Điện,

mô tả đặc điểm hình thái và đặt tên là Trypanosoma evansi

Năm 1886, Blanchard cũng tìm thấy T evansi trong máu la nhập nội

vào Bắc bộ Việt Nam và mô tả các thể bệnh ở la, ngựa, bò

Forde (1901) phát hiện Trypanosoma gambiense và Chagas (1907) phát hiện Trypanosoma cruizi

Năm 1893, Smith và Kilborne đã nghiên cứu về vai trò truyền bệnh của

ve trong bệnh tiên mao trùng

Ở Trung Quốc, T evansi gây bệnh cho hầu hết các loài động vật như

trâu, bò, ngựa, la, chó…

Theo Sukanto (1992) [41]: Tỷ lệ lưu hành bệnh tiên mao trùng ở trâuIndonesia cao hơn ở bò, tỷ lệ lưu hành bệnh này ở bò lại cao hơn ở ngựa

Ở Thái Lan, trâu bò của hầu hết khắp các tỉnh trong cả nước đều

nhiễm T evansi nhưng tỷ lệ nhiễm bệnh ở bò cao hơn ở trâu (Nishikawa,

Tuntasuvan (1990) [42])

Simukoko và cs (2007) [38], nghiên cứu về dịch tễ bệnh tiên mao trùng

ở các vật nuôi như bò, lợn và dê ở Đông Zambia cho thấy, với 734 bò nghiêncứu phát hiện tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng là 13,5%; trong đó với 324 lợnnghiên cứu, có 0,9% trong số đó bị nhiễm; không phát hiện Tiên mao trùng ở

33 dê nghiên cứu

Goossens và cs (2006) [28], nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở

bò thuộc khu vực Mafia Island (Tanzania) cho biết: trong 970 mẫu, phát hiện

0,8% có tiên mao trùng trong máu.

Sinshaw và cs (2006) [40], nghiên cứu về tỷ lệ nhiễm Trypanosoma vivax ở 3 khu vực thuộc Ethiopia thấy: Bò nhiễm 6,1%; trong đó mùa mưa

nhiễm 9,6%; mùa khô nhiễm 3,6% Phát hiện 1/122 mẫu cừu có tiên maotrùng, chiếm 0,81%; có 1/676 mẫu nhiễm ở dê, chiếm tỷ lệ là 0,14%

Sinyangwe và cs (2004) [39], nghiên cứu tình hình nhiễm tiên maotrùng ở khu vực Đông Zambia, cho biết: Trong tổng số 1526 mẫu huyết thanhnghiên cứu, phát hiện 14,4% mẫu có kháng thể tiên mao trùng Trong đó,

nhiễm Trypanosoma congolense chiếm 96%, 2% nhiễm Trypanosoma vivax

và Trypanosoma brucei là 2%.

Phần 3 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

3.1 Đối tượng và vật liệu nghiên cứu

3.1.1 Đối tượng nghiên cứu

- Đàn trâu, bò của 5 xã trong huyện Đồng Hỷ - Thái Nguyên

- Bệnh tiên mao trùng do Trymanosoma evansi gây ra trên trâu, bò.

- Tiên mao trùng

3.1.2 Vật liệu nghiên cứu

- Mẫu máu trâu, bò lấy tại 5 xã thuộc huyện Đồng Hỷ - Thái Nguyên

- Tiên mao trùng (Trypanosoma evansi): Được thu thập từ trâu, bò mắc

bệnh tiên mao trùng tại các địa phương nghiên cứu và được nhân lên trênđộng vật thí nghiệm

- Động vật gây nhiễm:

Chuột bạch đều khoẻ mạnh, không có bệnh và được kiểm tra giun sán.Chuột bạch làm thí nghiệm phải tương đối đồng đều về thể trọng, lứa tuổi,tính biệt và chế độ chăm sóc nuôi dưỡng

Số lượng: 20 con Khối lượng: 18 - 20 g/con

* Hoá chất nghiên cứu:

- Thuốc nhuộm giemsa

- Chất chống đông Natri citrat 3,8%

- Thuốc điều trị bệnh tiên mao trùng: Trypamidium, Azidin

* Dụng cụ dùng trong nghiên cứu:

- Kính hiển vi quang học

- Lam kính

- Lamen

- Một số dụng cụ thông thường khác trong phòng thí nghiệm.

3.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu

* Địa điểm nghiên cứu:

- Địa phương triển khai lấy mẫu: xã Hóa Thượng, Quang Sơn, HóaTrung, Minh Lập và thị trấn Sông Cầu

- Địa điểm xét nghiệm mẫu: Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên.Viện Công nghệ sinh học

* Thời gian nghiên cứu:

Từ ngày 29/08/2011 đến ngày 12/02/2012

3.3 Nội dung nghiên cứu

3.3.1 Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ T evansi ở trâu, bò

3.3.1.1 Điều tra tình hình nhiễm T evansi ở trâu, bò

- Tỷ lệ nhiễm T evansi ở trâu, bò tại các xã nghiên cứu

- Tỷ lệ nhiễm T evansi ở trâu, bò theo lứa tuổi

- Tỷ lệ nhiễm T evansi ở trâu, bò theo mùa

3.3.1.2 Nghiên cứu về côn trùng môi giới truyền T evansi

- Biến động thành phần loài ruồi, mòng ở các xã nghiên cứu

- Quy luật hoạt động của các loài ruồi, mòng ở các xã nghiên cứu

3.3.2 Khả năng gây bệnh của T evansi trên chuột bạch

- Khả năng gây bệnh của T evansi trên chuột bạch

+ Thời gian T evansi xuất hiện trong máu của chuột bạch sau gây nhiễm.

+ Thời gian chết của chuột bạch sau gây nhiễm

- Triệu chứng ở chuột bạch bị T evansi do gây nhiễm

- Bệnh tích ở chuột bạch bị T evansi do gây nhiễm

3.3.3 Điều trị T evansi cho trâu, bò

Điều trị bệnh tiên mao trùng cho đàn trâu, bò tại huyện Đồng Hỷ

-tỉnh Thái Nguyên

- Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh T evansi cho trâu, bò.

3.4 Phương pháp nghiên cứu

3.4.1 Phương pháp thu thập mẫu

Lấy mẫu máu:

Lấy mẫu máu trâu bò vào tháng 10 và tháng 11 trong năm, là nhữngtháng khả năng phát hiện tiên mao trùng rất cao, theo dịch tễ về thời gian vàquy luật phát bệnh

Lượng trâu, bò tiến hành lấy 491 con, trong đó có 121 trâu và 14 bò ở

xã Quang Sơn; 54 trâu và 10 bò ở thị trấn Sông Cầu; 95 trâu ở xã Minh Lập;

109 trâu và 5 bò ở xã Hóa Trung; 112 trâu ở xã Hóa Thượng

Vị trí lấy máu: Tĩnh mạch tai hoặc tĩnh mạch cổ

Sát trùng vùng tai (cổ) trâu, bò bằng cồn 700, lau sạch vùng tĩnh mạch,

để khô Dùng kim trích máu vô trùng chọc ngang một tĩnh mạch tai (cổ), chomáu chảy vào tube có tráng chất chống đông

Ghi ký hiệu mẫu theo các nội dung: thể trạng trâu, bò; triệu chứng lâmsàng (nếu có); tên chủ hộ; địa chỉ; ngày lấy mẫu Bảo quản mẫu ở 40C

3.4.2 Phương pháp phát hiện T evansi trong mẫu

3.4.2.1 Phương pháp soi tươi (Direct smear)

T evansi là loại ký sinh trùng sống ở máu và trong tổ chức Trong

trường hợp mật độ ký sinh trùng trong máu thấp, tiên mao trùng sống ở trongcác vi mạch nhỏ Vì vậy, nên lấy máu ở vùng ngoại vi để chẩn đoán

Nhỏ 1 giọt máu tươi lên phiến kính đã có sẵn 1 giọt EDTA, đậy lamenlên dàn máu thành một lớp mỏng Sau đó, soi dưới kính hiển vi (10 x 40) để phát

hiện T evansi qua sự di chuyển của các hồng cầu.

Kết quả:

- Dương tính: Khi thấy tiên mao trùng di động, bơi trong huyết tương

- Âm tính: Chỉ nhìn thấy hồng cầu

3.4.2.2 Phương pháp nhuộm Giemsa tiêu bản máu khô (Romanovsky)

Đặt một giọt máu cách 1 đầu phiến kính 2cm, dùng lamen phết máu giànthành một lớp mỏng trên lam kính theo góc 300 Để tiêu bản khô tự nhiên Sau đó,

cố định bằng cách nhỏ cồn Methanol lên mặt máu đã phết, để trong 2 - 5 phút chokhô tự nhiên

Nhuộm Giemsa: Pha dung dịch giemsa với nước cất theo tỷ lệ 1/9 vàocốc nhuộm, ngâm tiêu bản máu đã cố định vào cốc nhuộm trong 25 - 30 phút.Sau đó, lấy tiêu bản ra rửa dưới vòi nước chảy Để khô, nhỏ một giọt dầu soikính lên tiêu bản và soi dưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x 100) quan sát

tìm T evansi.

Kết quả: Dương tính khi tìm thấy tiên mao trùng bắt màu xanh lơ,nguyên sinh chất bắt màu tím hoặc xanh thẫm Tiên mao trùng có một nhânchính và một nhân phụ, roi Hồng cầu bắt màu hồng đều, bạch cầu nhân bắtmàu sẫm

3.4.2.3 Phương pháp tiêm truyền T evansi cho chuột bạch

Nguyên lý: Dựa vào khả năng sống, nhân lên trong động vật thí nghiệm

mẫn cảm với tiên mao trùng Đây là một phương pháp cơ sở có độ chính xáccao nhất trong phương pháp nêu trên

3.4.3 Phương pháp nghiên cứu khả năng gây bệnh của T evansi trên động vật gây nhiễm

3.4.3.1 Phương pháp xác định thời gian T evansi bắt đầu xuất hiện trong máu chuột bạch

Sau khi gây nhiễm T evansi cho 20 chuột bạch, hàng ngày lấy máu của

cả 20 chuột bạch đã gây nhiễm, xét nghiệm bằng phương pháp xem tươi để

phát hiện T evansi Khi nào có mẫu máu thấy T evansi xuất hiện, xác định đó

là thời gian T evansi xuất hiện sớm nhất trong máu chuột sau gây nhiễm Tiếp tục xét nghiệm cho đến khi thấy T evansi xuất hiện trong máu cả 20 chuột gây nhiễm để xác định thời gian T evansi xuất hiện muộn nhất trong

máu chuột sau gây nhiễm

3.4.3.2 Phương pháp theo dõi thân nhiệt và triệu chứng lâm sàng

Phương pháp theo dõi triệu chứng lâm sàng: Hàng ngày quan sátnhững biểu hiện của chuột bạch: Thể trạng, da và lông, niêm mạc, phân, ănuống, vận động

Qua quá trình quan sát thấy: Chuột bị bệnh có thể trạng yếu, biểu hiện

xù lông, giảm ăn uống, nằm một chỗ, ít vận động Con vật yếu dần rồi chết

3.4.3.3 Phương pháp xác định thời gian chuột bạch chết sau gây nhiễm

Theo dõi 20 chuột bạch được gây nhiễm T evansi, khi nào có chuột

bạch chết, xác định đó là thời gian chết sớm nhất của chuột sau gây nhiễm.Tiếp tục theo dõi cho đến khi cả 20 chuột đều chết hết, xác định đó là thờigian chết muộn nhất của chuột sau gây nhiễm

3.4.3.4 Phương pháp mổ khám bệnh tích

Mổ khám những chuột bạch bị chết có triệu chứng lâm sàng sau khigây nhiễm, quan sát bằng mắt thường và kính lúp các khí quan trong cơ thể,chụp ảnh những vùng có bệnh tích điển hình, cụ thể như: lách, phổi, túi mật…

3.4.4 Phương pháp nghiêm cứu về côn trùng môi giới truyền bệnh tiên mao trùng

3.4.4.1 Phương pháp thu thập ruồi, mòng

Dùng vợt làm bằng vải thưa, miệng vợt bằng sắt có đường kính 30cm, bắt ruồi,mòng ở những nơi như chuồng nuôi gia súc, bãi chăn thả, nơi làm việc và nghỉ ngơicủa gia súc Mẫu ruồi, mòng thu thập được ngâm trong dung dịch formol để bảo quản

3.4.4.2 Phương pháp xác định thành phần loài rồi, mòng

Mẫu ruồi, mòng thu thập tại 5 xã nghiên cứu được đưa về định loài tạiViện Công nghệ sinh học Quy định đánh giá tần suất xuất hiện các loài ruồi,mòng như sau:

Tần suất xuất hiện nhiều : +++

Tần suất xuất hiện vừa : ++

Tần suất xuất hiện thấp : +

Không xuất hiện :

-3.4.4.3 Phương pháp xác định quy luật hoạt động của các loài ruồi, mòng

Theo dõi quy luật hoạt động của các loại côn trùng môi giới truyền bệnhtiên mao trùng theo tháng và trong ngày Quy định đánh giá quy luật hoạt độngcủa ruồi, mòng như sau:

Tháng hoạt động cao điểm : +++

Tháng hoạt động bình thường : ++

Tháng hoạt động ít : +

Tháng nghỉ trong năm :

-Giờ hoạt động cao điểm : +++

Giờ hoạt động vừa : ++

Giờ hoạt động ít : +

Giờ nghỉ trong ngày :

-3.4.5 Một số quy định trong nghiên cứu đặc điểm dịch tễ

3.4.5.1 Quy định về tuổi trâu, bò

Tuổi trâu, bò nghiên cứu được phân ra theo 4 lứa tuổi:

+ ≤ 2 năm tuổi+ > 2 - 5 năm tuổi+ > 5 - 8 năm tuổi+ Trên 8 năm tuổi

3.4.6 Điều trị T evansi

Tiến hành điều trị bệnh tiên mao trùng cho những trâu mắc bệnh tạimột số xã thuộc huyện Đồng Hỷ - tỉnh Thái Nguyên bằng hai loại thuốc:Trypamidin 1mg/kg TT, Azidin liều 5mg/kg TT

Azidin còn có tên gọi khác là Berenil, Veriben Thuốc có tác dụngphòng và chữa bệnh ký sinh trùng đường máu: Tiên mao trùng, lê dạng trùng,

tê lê trùng ở trâu, bò, ngựa, chó

Mỗi lọ 1,18g pha với 7ml nước cất, khi tiêm lắc đều cho tan Tiêm sâuvào bắp thịt Thuốc chỉ tiêm một lần, nếu gia súc chưa khỏi thì tiêm nhắc lạilần 2 sau một tuần, liều tiêm cũng như lần đầu Liều cơ bản dùng trong điềutrị tiêm 5mg/kg thể trọng

Thuốc Trypamidium cũng có tác dụng đối với ký sinh trùng đườngmáu Thuốc pha với nước sinh lý 0,9%; chỉ tiêm một lần, tiêm sâu bắp thịt cổ.Liều tiêm 1mg/kg thể trọng

Trong đó: m là số trâu, bò nhiễm T evansi

n là tổng số trâu, bò lấy mẫu

- Sai số của số trung bình:

mp = mq =  √p.q n =  √p(1− p) n

Trong đó: mp và mq là sai số của p và q.

p và q là tỷ lệ % số trâu, bò nhiễm và không nhiễm T evansi

n là dung lượng mẫu

Phần 4

KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN

4.1 Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh T evansi ở trâu, bò tại 5 xã thuộc

huyện Đồng Hỷ - tỉnh Thái Nguyên

4.1.1 Kết quả điều tra tình hình nhiễm T evansi ở trâu, bò tại huyện Đồng Hỷ tỉnh Thái Nguyên

-Đánh giá tình hình nhiễm tiên mao trùng tại một số xã thuộc huyệnĐồng Hỷ - tỉnh Thái Nguyên, chúng em cùng cán bộ thú y xã tiến hành lấymẫu máu ngẫu nhiên trên đàn trâu phân bố đều trong xã Trong tổng số 491trâu và 29 bò kiểm tra tại 5 xã (Hóa Thượng, Hóa Trung, Minh Lập, Sông Cầu,Quang Sơn) Kết quả tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng được trình bày ở bảng 4.1

Bảng 4.1 Tỷ lệ nhiễm T evansi ở trâu, bò tại 5 xã thuộc huyên Đồng Hỷ

Địa phương

(xã)

Số trâu kiểm tra (con)

Số trâu nhiễm (con)

Tỷ lệ nhiễm (%)

Số bò kiểm tra (con)

Số bò nhiễm (con)

Tỷ lệ nhiễm (%)

Địa phương (xã)

Biểu đồ 4.1: Tỷ lệ nhiễm T evansi ở trâu, bò

tại 5 xã thuộc huyên Đồng Hỷ