Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẩn đoán bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra ở trâu, bò một số tỉnh miền núi phía Bắc và đề xuất biện pháp phòng trị (LA tiến sĩ)
Trang 1
DO THI VAN GIANG
INGHIEN CU'U DAC DIEM DICH TE, UNG DUNG KIT CHAN DOAN BENH TIEN MAO TRUNG DO TRYPANOSOMA
EVANSI GAY RA Ở TRÂU, BO MOT SO TINH MIEN NUI PHiA BAC VA DE XUAT BIEN PHAP PHONG TRI
LUAN AN TIEN SI THU Y
THAI NGUYEN
Trang 2
DO THI VAN GIANG
NGHIEN CUU DAC DIEM DICH TE, UNG DUNG KIT CHAN DOAN BENH TIEN MAO TRUNG DO TRYPANOSOMA EVANSI
GAY RA O TRAU, BO MOT SO TINH MIEN NUI PHÍA BAC VA DE XUAT BIEN PHAP PHONG TRI
Chuyên ngành: Ký sinh tring va vi sinh vat hoc thú y
Mã số: 62 64 01 04
LUAN AN TIEN Si THU Y
Người hướng dẫn khoa học: 1 GS TS Nguyễn Thị Kim Lan 2 TS Nguyễn Quốc Doanh
THÁI NGUYÊN - 2014
Trang 3
kết quả nghiên cứu trong luận án này là hoàn toàn trung thực và chưa được công bố trong bắt kỳ cơng trình nào khác Mọi thơng tin trích dẫn trong luận án đều được chỉ ro nguồn gốc
Tôi xin cam đoan mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện đề tài nghiên cứu và
hoàn thành Luận án đều đã được cảm ơn
TÁC GIÁ
Trang 4LOI CAM ON
Để hoàn thành Luận án này, cho phép tôi được bày tỏ lịng kính trọng và biết ơn sâu sắc toi GS TS Nguyén Thi Kim Lan - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên và TS Nguyễn Quốc Doanh - Viện Thú y Quốc gia đã trực tiếp hướng dẫn, chỉ bảo tôi hết sức tận tình trong suốt quá trình nghiên cứu và hoàn thành Luận án
Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giảm đốc, Ban Đào tạo Sau Đại học - Đại
học Thái Nguyên; Ban Giám hiệu, Phòng Quản lý Đào tạo Sau đại học, Khoa Chăn nuôi thú Y - Trường Đại học Nông Lâm - Đại học Thái Nguyên và Viện Khoa học su song đã tạo điều kiện thuận lợi cho tơi trong q trình thực hiện đề tài
Tôi xin trân trọng cảm ơn các thây cơ trong nhóm thực hiện đề tài cấp Nhà nước: «Nghiên cứu sản xuất protein tái tổ hợp phục vụ chế tạo các bộ kit phát hiện ký sinh trùng Trypanosoma evansi ký sinh trên gia súc ở Việt Nam» đã kết hợp với tôi trong quá trình triển khai đề tài
Tôi xin trân trọng cảm ơn Chỉ cục Thú y, các trạm Thủ y thuộc các tỉnh Thái Nguyên, Hòa Bình, Lạng Sơn, Lai Cháu và các hộ chăn nuôi trâu, bò trên dia ban
các tỉnh nghiên cứu đã tạo điều kiện giúp đỡ tơi trong q trình thực hiện dé tdi Toi xin tran trong cam on: PGS TS Phan Dich Lan - nguyên Viện trưởng Viện Thú y Quốc gia, PGS TS Tô Long Thành - Giám đốc Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung Uong, TS Phạm Thị Tâm - Phó chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học -
Viện Đại Học Mở đã giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện dé tai
Tôi xin chân thành cảm ơn các em sinh viên Khóa 39, 40, 41 chuyên ngành
Thú y và Chăn nuôi Thú y đã giúp tôi thực hiện đề tài
Xin chân thành cảm ơn Ban Giám hiệu, Ban chủ nhiệm Khoa cùng các thay, cô Khoa Kỹ thuật Nông Lâm - trường CÐ Kinh tế - Kỹ thuật - ĐH Thái Nguyên đã tạo
mọi diéu kiện giúp đỡ để tôi được theo học và hoàn thành chương trình đào tạo
Tơi vô cùng biết ơn các thành viên trong gia đình, bạn bè và đồng nghiệp đã luôn ở bên tôi, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình nghiên cứu và hồn thành Luận án
Thái Nguyên, ngày tháng năm 2013
Trang 5% CS Nxb TMT DC SGN EPC ENC mg kg TT TP spp VSG SDS VSG SAT T evansi T rubidus T kiangsuensis : S calcitrans Dén Tỷ lệ phan trăm Cộng sự Nhà xuất bản Tiên mao trùng Đối chứng
Sau gây nhiễm
Kháng thê đối chứng dương
Kháng thể đối chứng âm
Miligam kg thé trong
Thanh phé
species plural
Trang 6TT bảng Bang 3.1 Bang 3.2 Bang 3.3 Bang 3.4 Bang 3.5 Bang 3.6 Bang 3.7 Bang 3.8 Bang 3.9 Bang 3.10 Bang 3.11 Bang 3.12 Bang 3.13 Bang 3.14 Bang 3.15 Bang 3.16 Bang 3.17 Bang 3.18 Bang 3.19 Bang 3.20 Bang 3.21 Bang 3.22 Bang 3.23
DANH MUC BANG BIEU
Nội dung bảng
Kết quả định danh loài tiên mao trùng ở 4 tỉnh miền núi phía Bắc
Tý lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu, bò tại 4 tỉnh miền núi phía Bắc
Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu, bò theo lứa tuổi
Tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu theo mùa vụ Tỷ lệ phát bệnh tiên mao trùng ở trâu theo mùa vụ
Kết quả định danh, sự phân bố và tần suất xuất hiện
các lồi ruồi, mịng hút máu
Tỷ lệ lồi ruồi, mịng trong số mẫu thu thập ở các địa phương nghiên cứu
Quy luật hoạt động theo tháng của các loài ruồi, mòng hút máu Quy luật hoạt động của các loài ruồi, mòng hút máu
Thời gian 7: evansi xuất hiện trong máu chuột bach sau gây nhiễm Thời gian chết của chuột bạch sau gây nhiễm 7: evznsi
Tý lệ các triệu chứng lâm sàng chủ yếu của chuột bạch gây nhiễm Bệnh tích đại thể ở chuột bạch bị bệnh tiên mao trùng do gây nhiễm
So sánh khối lượng cơ thể và các nội quan của chuột đối chứng và
gây nhiễm 7 evansi
Thời gian 7 evansi xuất hiện trong máu của thỏ sau gây nhiễm Tần suất xuất hiện 7: evznsi trong máu thỏ gây nhiễm
và thời gian thỏ chết
Thời gian xuất hiện và triệu chứng lâm sàng chủ yếu ở thỏ gây nhiễm Bệnh tích dai thé chủ yếu của thỏ bị bệnh TMT do gây nhiễm
Thời gian 7 evansi bắt đầu xuất hiện và thời gian trâu gây nhiễm có biểu hiện lâm sàng
Triệu chứng lâm sàng chủ yếu ở trâu gây nhiễm
Sự thay đổi một số chỉ tiêu sinh lý máu trâu sau gây nhiễm Công thức bạch cầu của trâu đối chứng và gây nhiễm
Bệnh tích đại thể chủ yếu của trâu bị bệnh TMT do gây nhiễm
Trang 7Bảng 3.26 Bảng 3.27 Bảng 3.28 Bảng 3.29 Bảng 3.30 Bang 3.31
qua ứng dụng kit huyết thanh chân đoán
Thời gian sạch 7; evansi trong chuột khi sử dụng thuốc trypanosoma Thời gian sạch T evansi trong chuột khi sử đụng thuốc azidin Thời gian sạch 7 evansi trong chuột
khi sử dụng thuốc trypamidium samorin
Thời gian sạch 7: evansi trong chuột khi sử dụng thuốc diminavet Hiệu lực của 3 phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò
Trang 8DANH MỤC CÁC HÌNH, BIÊU ĐỊ, ĐỊ THỊ
TT hình Nội dung hình Trang
Hình 3.1 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm TMT ở trâu, bò tại 4 tỉnh miền núi phía Bắc 64
Hình 3.2 Đồ thị tý lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu, bò theo lứa tuổi 66 Hình 3.3 Biểu đồ tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng ở trâu theo mùa vụ 68
Hình 3.4 Biểu đồ tỷ lệ phát bệnh tiên mao trùng ở trâu theo mùa vụ 70
Hình 3.5 Biểu đồ tỷ lệ loài ruồi, mòng hút máu trong số mẫu thu thập 79
Hình 3.6 Đồ thị diễn biến thân nhiệt của trâu đối chứng và gây nhiễm 7: evansi 99
Biểu đồ tỷ lệ các loại bach cầu của trâu gây nhiễm 7 evansi
Hình 3.7 105
so với trâu đối chứng
Trang 9MUC LUC
h9) \MNELdaa.óớ.iaddidddầdd 1
1 Tính cấp thiét ctia d6 tai cesseesseesseessesssessessssssssesssessssseessesssecssssssesseesssessee 1 bàn ác NN 44 3
3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài ¿- cccse+cxesrxesrxerree 3 4 Những đóng góp mới của để tài . 2¿©2+22+++EE2EE2EE221221122212211211.212 2 xe 3
Chương 1: TÖNG QUAN TÀI LIỆU 2222222+22S++22S+z2Exeetzxeerxee 4 1.1 CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐÈ TÀI 2-©22¿22++22E+E2EEEEeEEEeerrxrerrrrerrev 4
1.1.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc và phân loại tiên mao trùng - 4
1.1.2 Dịch tễ học bệnh tiên mao trùng -¿- 2 + + ©x+SE+EE+EE+E2E2EerEerxerxerxrree 8 1.1.3 Dac diém bénh ly va lam sang cua bénh
1.1.4 Chân đoán bệnh tiên mao tring woes eeseessesseesesssesseessessesseessesseesesseesees 1.1.5 Phòng, trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò, ngựa .- ‹ x+ex+cs+xs+ 22
1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG 27
1.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nƯỚC - - ¿+ + ++x+sE+Evretreteereerrerrrrerrvre
1.2.2 Tình hình nghiên cứu trên thế giới
Chương 2: ĐÓI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
) 9:10) 1500000257Ẻ ‹.‹1 46
2.1 ĐỐI TƯỢNG VÀ VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU - 2-2 x+cx+x++Eerxeee 46
2.1.1 Đối tượng nghiên cứu -2 2¿©2++++£+2+E£2EE22E1221122112211711211211 211.1 46
2;1:2; Vật liệu nghiên GỮUs:¿sessssotitisoitti6og16G0SBGĐSGNSGDEHSG2wnxgS0seusassusẻ 46
2.2 ĐỊA ĐIỀM, THỜI GIAN NGHIÊN CỨU -c¿¿+22-cccz++cvcveecee 47 P8) (989)0)1€8)/6)2000)19600057 47
2.3.1 Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò tại 4 tỉnh miền
"")8)H 8: NA“ -‹-3 47
2.3.2 Khả năng gây bệnh của 7 evansi trên một số động vật gây nhiễm 48
2.3.3 Ứng dụng kit trong chân đoán bệnh tiên mao trùng ở các địa phương 49
2.3.4 Xác định khả năng mẫn cảm của 7: evznsi với một sỐ loại thuốc trên
(0) 01 FLO] 020) 6 10202 1 1 21621 cv ng nh kh hưu 49 2.3.5 Xây dựng phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng và đề xuất biện pháp phòng chống bệnh - 2 +£++++++E£+EE+2EE2EE22E12212711711711211711111711111711 111.1 xe 49
Trang 102.4.1 Phương pháp thu thập mẫiu . 22 5¿+S£+EE+EE+2EE+EEeEEE+EEerxrzxezrxerxeee 49 2.4.2 Phương pháp phát hiện tiên mao trùng trong mẫu . - 2-2-5: 51 2.4.3 Phuong pháp định danh tiên mao trùng Street 51 2.4.4 Phương pháp nghiên cứu đặc điểm bệnh lý, lam sang bénh do T evansi gây ra trên động vật gây nhiễm 2 2£ £++2+EE£SE2EEEEEEEE12E171121127171121171712 211210, 52 2.4.5 Phuong phap dinh loai rudi, mong hit mau - mdi giới truyền bệnh tiên mao 0ì): ã0;90:x)ì 00T 56 2.4.6 Phương pháp ứng dụng kit huyết thanh phát hiện trâu, bò bị bệnh tiên mao
bì 5 3Ư 56
2.4.7 Phương pháp nghiên cứu khả năng mẫn cảm của 7: evansi với một số loại thuốc trên 00108519 0011 7 58 2.4.8 Xây dựng phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò - 59 2.4.9 Một số quy định trong nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiên mao trùng .60
2.5 Phương pháp xử lý số liệu . -2- 22+2+2+2EEE2EEE2EE12211271127112711 21121 60
Chương 3: KÉT QUÁ NGHIÊN CỨU 2- 2 +22+E+2EEE22E1221122112211.21xe2 6l 3.1 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIÊM DỊCH TẾ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG Ở TRÂU, BÒ TẠI 4 TỈNH MIỄN NÚI PHÍA BẮC - ¿2 2+ +EE££E+E2EEeEEErrkerkerex 61
3.1.1 Định danh loài tiên mao trùng phân lập từ trâu, bò ở 4 tỉnh mién nui phia Bac 61
3.1.2 Tình hình nhiễm tiên mao trùng ở trâu, bò tại 4 tỉnh miền núi phía Bắc
3.1.3 Nghiên cứu về ruồi, mòng hút máu truyền bệnh tiên mao trùng
3.2 KHẢ NĂNG GÂY BỆNH CỦA 7: EVANSI TREN MOT SO DONG VAT
69001000 05 84
3.2.1 Khả năng gây bệnh của 7 evansi trên chuột bạch - -¿ ++-++c<+xs++ 84 3.2.2 Khả năng gây bệnh của 7: evans¡ trên thỏ
3.2.3 Khả năng gây bệnh của 7 evansi trên trâu - 5+ 5+ + +zsexsexerrrrerrerre
3.3 UNG DUNG KIT TRONG CHAN DOAN BENH TIEN MAO TRUNG 6 CAC
DIA PHUONG ou sc csscsssesssesssecssessscssecssecssecssesssecssessssessesssecssesssecssesssecssesssecssecnseceses 107 3.3.1 Ty lệ phát hiện của kit trong số mẫu huyết thanh đương tính 107
3.3.2 Ứng dụng kit trong chân đoán bệnh tiên mao trùng
Trang 113.4.1, Xdc dinh kha ning man cam cta T evansi véi thuéc trypanosoma trên chuột bach oo cece ccc ec cece eee eeseeeeeeeeeeeeeseeeeeeeteeegseeseseeeeeeeueegeeeeeeeneees 110 3.4.2 Xác định khả năng mẫn cảm của T evansi véi thuốc azidin trên chuột
bạch .- C22002 00000021201 21 21 HE KT n nn nn TK nh cv cế 112 3.4.3 Xác định khả năng mẫn cảm của 7: evznsi với thuốc trypamidium samorin trên chuột bạch -c c2 2222002020212 2021010 111111 11 1x11 xe 113 3.4.4 Xác định khả năng mẫn cảm của 7' evansi voi thuốc diminavet trên chuột
001515 ằÄẼ 114
3.5 XAY DUNG PHAC DO DIEU TRI BENH TIEN MAO TRÙNG VÀ ĐÈ
XUẤT BIEN PHAP PHONG CHONG BENH ccsscsscssesssssessessesssesseseeeeseesensenees 115 3.5.1 Xác định phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng đạt hiệu quả cao 115
3.5.2 Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh 7: evans¿ cho trâu, bò ở các tỉnh miền núi I 17
KÉT LUẬN VÀ ĐÈ NGHỊ, 6 tt tt EEEkEEEEEEEEEt21111111121151111111x E1 cce 12119
Trang 121 Tính cấp thiết của đề tài
Bệnh do Trypanosoma (Trypanosomosis) \a bệnh do ký sinh trùng đơn bào (Protozoa) lớp trùng roi (Flagellafa) gây ra Có nhiều loài thuộc giống Trypanosoma: Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Trypanosoma evansi, Trypanosoma congolense, Trypanosoma gambiense, Trypanosoma vivax, Trypanosoma simiae
H6 Van Nam (1963) [28] va Trinh Van Thinh (1982) [41] cho biết: trâu bị bệnh cấp tính có triệu chứng sốt cao, bỏ ăn, điên loạn, chết nhanh Trâu nhiễm bệnh thé man tính thường sốt gián đoạn, gầy còm, thiếu máu kéo đài, viêm giác mạc, phù
thũng ở bụng, liệt chân sau, chết do kiệt sức Đối với bệnh tiên mao trùng bò, những
biểu hiện lâm sàng gần giống như ở trâu, ít thấy các trường hợp cấp tính, con vật có triệu chứng sốt gián đoạn, chậm chạp, hạch lâm ba trước đùi sưng, một số con thủy thũng ở vùng hàm, vùng cổ nhưng không đau, gần chết thì bại liệt
Theo số liệu của Phạm Sỹ Lăng (1982) [15], Phan Dich Lan (2004) [23], Phan Văn Chinh (2006) [1], bệnh tiên mao trùng xuất hiện ở nhiều vùng trên cả nước, với tỷ lệ mắc khá cao: trên trâu là 13 - 30 %, trên bò là 7 - 14 %, trong đó tỷ lệ gia súc chết/gia súc mắc lên tới 6,3 - 20 %
Cũng theo báo cáo của các tác giả trên, ty 16 mac Trypanosoma evansi ở gia
súc vùng núi và trung du cao hơn các vùng đồng bằng và ven biển Trong khi đó, ở
nước ta, chăn ni gia súc nhai lại để cung cấp sức kéo, thịt, sữa lại tập trung chủ
yếu ở các tỉnh miền núi và trung du - là các vùng có điều kiện tự nhiên thích hợp để
chăn nuôi gia súc nhai lại, nhưng cơ sở hạ tầng phục vụ công tác chân đoán và điều trị tại địa phương còn yếu kém, dẫn tới hệ quả là bệnh tiên mao trùng trở nên phô
biến hơn, nghiêm trọng hơn và gây thiệt hại lớn hơn
Trang 13EI Rayah I E va cs (1999) [75] đã thử nghiệm khả năng điều trị bệnh tiên mao trùng của suramin, một loại thuốc đã không được sử dụng ở Sudan kế từ năm 1975 Kết quả cho thấy khả năng điều trị bệnh tiên mao trùng của Suramin không cao Kết quả nghiên cứu của Payne R C và cs (1994) [138], Laha R va Sasmal N K (2008) [101], Desquesnes M và cs (2011) [69] đều thấy, có sự tái nhiễm bệnh sau khi sử dụng một số loại thuốc trị tiên mao trùng Có nhiều nguyên nhân dẫn đến hiệu quả điều trị của thuốc khơng cao, trong đó khả năng kháng thuốc của tiên mao trùng là điều mà nhiều tác giả trong và ngoài nước quan tâm
Khả năng phát sinh và phát triển bệnh tiên mao trùng phụ thuộc vào điều kiện thời tiết, khí hậu, tập quán chăn nuôi và chế độ làm việc của gia súc Sự thay đổi các
điều kiện trên ảnh hưởng đến khả năng gây bệnh cũng như đặc điểm dịch tễ bệnh
Hiện nay, việc mở cửa thương mại, phát triển du lịch cũng dẫn tới sự du nhập các tác nhân gây bệnh mới, hoặc có thể tạo nên các biến chủng gây bệnh mới làm cho tình hình bệnh ngày càng phức tạp hơn
Từ những năm 1964 - 2006 các tác giả Trịnh Văn Thịnh, Đoàn Văn Phúc, Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Lê Ngọc Mỹ, Lương Tố Thu, Vương Thị Lan Phương, Phan Văn Chinh đã nghiên cứu về bệnh tiên mao trùng ở vùng đồng bằng và ven
biển Tuy nhiên, những nghiên cứu về bệnh tiên mao trùng ở các tỉnh miền núi còn
hạn chế
Qua những phân tích ở trên về mức độ phổ biến và những thiệt hại do bệnh
tiên mao trùng gây ra trên gia súc ở Việt Nam, đặc biệt là trên trâu, bò miễn núi, những biến đổi về dịch tễ có thê tao ra cdc bién ching Trypanosoma spp gay bénh cho gia súc, những khó khăn trong cơng tác chân đốn và chủ động phòng ngừa
bệnh, chúng tôi thực hiện đề tài: “Wghiên cứu đặc điểm dịch tễ, ứng dụng kit chẵn
Trang 14đặc điểm dịch tễ và bệnh học; sử dụng kit chân đoán và đề xuất biện pháp phòng trị
bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò
3 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học
Kết quả của đề tài là những thông tin khoa học về đặc điểm dịch tễ, bệnh học,
hiệu quả của kit huyết thanh học trong chẩn đoán bệnh do 7 evzns¡ và biện pháp phòng chống bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò
3.2 Ý nghĩa thực tiễn
Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học khuyến cáo người chăn nuôi áp dụng các biện pháp phòng trị bệnh tiên mao trùng, nhằm hạn chế tỷ lệ nhiễm và thiệt hại do T evansi gay ra, gop phan nâng cao năng suất chăn nuôi, thúc đây ngành chăn ni
trâu, bị phát triển
4 Những đóng góp mới của đề tài
- Là cơng trình đầu tiên nghiên cứu có hệ thống về đặc điểm dịch tễ, bệnh học,
chân đoán và biện pháp phòng trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò ở một số tỉnh
miền núi phía Bắc Việt Nam
- Xác định được khả năng mẫn cảm của 7: evznsi với một số loại thuốc diệt tiên mao trùng
- Xác định được hiệu qua cua kit huyết thanh trong chan đoán bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò
Trang 151.1 CƠ SỞ KHOA HỌC CỦA ĐÈ TÀI
Bệnh tiên mao trùng được Blanchard (1888) phát hiện đầu tiên ở Việt Nam Sau
đó, bệnh được thấy phổ biến ở hầu hết các tỉnh thành trong cả nước Bệnh do loài tiên
mao tring Trypanosoma evansi gay ra Trâu, bò, ngựa mắc bệnh bị thiếu máu, suy nhược, giảm hoặc mat kha năng sinh sản và sức sản xuất, nếu mắc bệnh nặng súc vật
dễ chết
1.1.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc và phân loại tiên mao trùng 1.1.1.1 Phân loại tiên mao trùng ký sinh ở gia súc
Theo Levine (1980) (dẫn theo Lương Văn Huấn và Lê Hữu Khương, 1997) [9], vị trí của tiên mao trùng trong hệ thống phân loai nguyén bao (Protozoa) nhu sau:
Ngành Sarcomastigophora Phân ngành Masfigophora Lop Zoomastigophorasida Bộ Kinetoplastorida Phân bộ 7rypanosomatorina Ho Trypanosomatidae Donein, 1901 Giéng Trypanosoma Gruby, 1843
Giống phu Megatrypanum Hoare, 1964 Loai Trypanosoma (M) theileria Giéng phu Herpetosoma Doflein, 1901
Loai Trypanosoma (H) lewisi Giéng phu Schizotrypanum Chagas, 1909
Loai Trypanosoma (S) cruzi Giéng phy Duttonella Chalmers, 1918
Loai Trypanosoma (D) vivax Loai Trypanosoma (D) uniforme Giống phụ Nannomonas Hoare, 1964
Trang 16Loai Trypanosoma (T) brucei Loai Trypanosoma (T) gambiense Loai Trypanosoma (T) rhodesiense Loai Trypanosoma (T) equiperdum Loai Trypanosoma evansi (Steel, 1885) Giéng phu Pycnomonas Hoare, 1964
Loai Trypanosoma (P) suis Giéng phu Trypanosoma Gruby, 1843
Loai Trypanosoma rotatorium
Trong các loài tiên mao trùng trên, có 3 lồi được tổ chức dịch té thé gidi (OIE) thơng báo là có khả năng gây bệnh cho người và động vật có vú, đó là: 7: rhodesiense, T cruzi, T gambiense
1.1.1.2 Dac diém hinh thdi, cấu tạo ctia tién mao tring Trypanosoma evansi Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [11]: đặc điểm hình thái, cấu tạo của tiên mao trùng như sau: Cơ thể có hình thoi, dài 18 - 34 um Giữa có một nhân, phía cuối cơ thể có một roi, roi này chạy dọc theo thân và tạo thành nhiều màng rung động, cuối cùng roi lơ lửng ở phần đầu và thành roi tự do Tiên mao trùng di chuyền được là nhờ roi và màng rung động Trên tiêu bản máu tươi, tiên mao trùng di chuyển nhanh trong huyết tương Khi phết kính, nhuộm Giemsa thấy nguyên sinh chất của tiên mao trùng bắt màu xanh nhạt, nhân bắt màu hồng
Phạm Sỹ Lăng và Lê Văn Tạo (2002) [18] cho biết: tiên mao trùng có kích
thước: 18 - 34 x 2,5 um, có hình mũi khoan, di động được trong máu nhờ một roi tự
do xuất phát từ phía sau thân, chạy vòng quanh thân tạo thành một mảng rung Khi rung động, roi tự do vung ra phía trước và màng rung chuyên động giúp cho tiên mao trùng di chuyên nhanh trong máu vật chủ
Trang 17đổi (Variant Glycoprotein Surface -VGS) Tiếp giáp với lớp trong cùng là 9 cặp vi ống xếp song song dọc theo chiều dài thân tiên mao trùng Chính nhờ sự sắp xếp của các cặp vi ống nên tiên mao trùng có dạng hình suốt chỉ mảnh
Nguyên sinh chất (gồm lớp trong và lớp ngoài): trong nguyên sinh chất có chứa ribosome (có màu thẫm xen kẽ vùng không bào màu sáng), kinetoplast (thể cơ động), mitochrondno, reticulum (lưới nội bảo) và mạng lưới golg1
Nhân: Nhân tiên mao trùng có chứa AND, hình bầu dục hoặc hình trứng Nhân thường nằm ở vị trí trung tâm hoặc gần vị trí trung tâm cơ thể Ngoài nhân, về phía cuối thân cịn có thể kinetoplast chứa AND (KAND) Từ kinetoplast có một roi chạy vòng quanh thân lên đầu và ra phía ngồi cơ thể thành một roi ty do Roi cua tiên mao trùng có lớp vỏ ngoài cùng giống lớp vỏ của thân Trong roi có 9 cặp vi ống ở xung quanh và một cặp ở trung tâm, xếp song song dọc chiều dài roi (Hoare,
1972 [90]; Nguyễn Quốc Doanh, 1999 [6])
1.1.1.3 Cấu trúc kháng nguyên của tiên mao trang Trypanosoma evansi
Kháng nguyên của 7: evznsi gồm hai loại: kháng nguyên ổn định (kháng nguyên không biến đổi) và kháng nguyên biến đổi (dẫn theo Nguyễn Thị Kim Lan, 2008 [12])
* Kháng nguyên ốn định (kháng nguyên không biến đổi)
Phần lớn các thành phần kháng nguyên tiên mao trùng khơng biến đổi trong q trình sống ký sinh Bằng phương pháp điện di huyết thanh thỏ tối miễn dịch với T evansi, Kageruka (1982) đã phát hiện 30 thành phần kháng nguyên khác nhau Có ba loại kháng nguyên không biến đổi ở màng nguyên sinh chất tế bào (ISG: Invariant Surface Glycoprotein): ISG 65, ISG 75 và ISG 100 Do cấu trúc không gian ba chiều và đặc tính ưa nước, các loại này không kết hợp với kháng thé cua vật chủ (Nolan, 1997)
* Kháng nguyên biến đổi
Về kháng nguyên biến đổi, cần đề cập đến sự biến đổi lớp vỏ bề mặt VSG
Trang 18bào bằng một lớp phân tử giống nhau (mỗi tiên mao trùng có 107 phân tử) Lớp áo
bề mặt này kích thích cơ thê vật chủ tạo ra kháng thê đặc hiệu với từng type kháng nguyên biến đổi VAT (Variable Antigen Type) Chỉ có kháng nguyên biến đổi mới có khả năng kích thích vật chủ tạo miễn dịch chủ động Người ta ước lượng rằng, một con tiên mao trùng có ít nhất vài trăm hoặc vài nghìn VSG, nghĩa là 5 - 10% số gen của tiên mao trùng được biểu hiện ở kháng nguyên bề mặt này
- Cơ chế di truyền của kháng nguyên biến đổi
Khi kháng thể đặc hiệu kết hợp với phân tử của kháng nguyên bề mặt (VSG),
làm tiêu tan tiên mao trùng thì đó cũng là nguyên nhân chính thúc đây sự hoạt hoá của gen Kết quả là các phân tử kháng nguyên VSG được thay đổi hoàn toàn bằng các phân tử VSG mới Lúc này, kháng thể đặc hiệu lúc trước đã không còn tác dụng
đối với kháng nguyên mới này
Theo Barry J D và Tumer C M R (1991) [49], Vanhamme và cs (1995) [165], cac VSG được mã hoá nhờ các gen chuyên biệt Mỗi gen VSG được hoạt hoá một cách chọn lọc, dẫn đến tổng hợp ra một loại kháng nguyên VSG Mỗi gen VSG mới tạo ra một loại kháng nguyên VSG mới Trong bộ gen của tiên mao trùng tồn tại một số lớn gen VSG, các gen này có nhiều cơ chế sắp xếp khác nhau, do vậy ở gia
súc bị bệnh mãn tính tiên mao trùng có thể tạo ra nhiều VSG khác nhau Cơ chế biến
đổi kháng nguyên theo 2 cách: cách thứ nhất là, sử dung lần lượt các điểm biểu hiện
Trang 19Tây bán cầu thuộc châu Mỹ, phía Đơng bán cầu trải dài từ châu Phi đến Philippine
Theo Euzeby (1984), bệnh phổ biến ở trâu, bò, ngựa các nước nhiệt đới ở châu
Phi, châu Á và Nam Mỹ
Ở châu Phi, bệnh trải dài từ Tây sang Đơng, phía Bắc qua vùng sa mạc Sahara, dọc theo bờ biển Atlantique Dia trung hải
Bệnh tiên mao trùng xảy ra với tên gọi “bệnh Surra” ở Ả rập Saudi, Yêmen,
Sultanate, Ả Rập thống nhất, Thổ Nhĩ Ky, Israel, Syrie, Afganistan, Pakistan
O chau A, bénh xuất hiện ở Trung Á (thuộc Liên Xô cũ), Ấn Độ, Malaysia, bán đảo Đông Dương, Trung Quốc, Indonexia, Philippine
Ở châu Âu, bệnh xuất hiện ở Bungaria (nay đã được thanh toán), hiện chỉ còn ở vùng Volga và Nam Capcase (Liên Xô cũ)
Ở châu Mỹ, bệnh xuất hiện ở Trung Mỹ, Nam Mỹ, đặc biệt phô biến ở Brazil, Mexico, Venezuela, Colombia
Châu Úc cũng đã được xác định là có bệnh tiên mao trùng (Reid, 2002 [144])
Losos G T và Ikede B O 1972 [103] cho rằng, bệnh tiên mao trùng phổ biến
nhất ở châu Á và châu Phi, từ Ấn Độ đến Srilanca, Trung Quốc, Indonexia, Thái
Lan, Camphuchia, Lao, Iran, Philippines
O Philippine, bénh tién mao tring da xảy ra tai 13 khu vực Trong đó, lồi trâu sống ở vùng đầm lầy có tỷ lệ nhiễm bệnh cao nhất, sau đó đến ngựa Tuy nhiên, tỷ lệ chết cao nhất lại là ở ngựa và ít hơn ở trâu, bò (Manuel M E., 1998 [108])
Mekata H và cs (2009) [109] đã phân lập được 10 chủng 7 evansi gay bệnh cho trâu tại Philippines và cho biết, độc lực của mỗi chủng là khác nhau khi gây bệnh cho chuột thí nghiệm
Ở Việt Nam, bệnh tiên mao trùng thấy ở hầu hết các vùng sinh thái khác nhau:
Trang 20hoang, thấy nhiều hơn ở trâu, bò, ngựa, trâu rừng, bỏ rừng, hươu, nai, hồ, báo, sư tử, chó, mèo, lạc đà, voi, thỏ, chuột cống, chuột lang, chuột bạch Trâu, bò mọi lứa tuổi đều nhiễm tiên mao trùng Theo tô chức dịch té thế giới, tiên mao trùng 7: evansi và một số loài khác còn ký sinh ở người (Phạm Sỹ Lăng và cs., 2008 [19]) Mặc dù đều là vật chủ của 7: evansi, song các lồi có đặc điểm sinh học khác nhau
rất nhiều Sau đây là đặc điểm sinh học của một số loài vật chủ được nghiên cứu
trong đề tài:
- Đặc điểm sinh học của trâu:
Trâu Việt Nam thuộc nhóm trâu đầm lầy Về cơ bản trâu nội thuộc một giống, nhưng tuỳ theo điều kiện nuôi dưỡng của từng nơi mà trâu được phân hố thành hai loại hình và quen được gọi theo tầm vóc là trâu ngố (to) và trâu gié (nhỏ hơn) Tuy nhiên sự phân biệt này cũng khơng có ranh giới cụ thể
Trâu có ngoại hình vạm vỡ, đầu hơi nhỏ; trán và sống mũi thẳng, có con hơi võng; tai mọc ngang, hay ve vẫy; sừng dài, dẹt, hình cánh cung, hướng về phía sau và hơi vénh lên trên Cổ con đực to tròn, con cái nhỏ và hẹp, khơng có yếm Trâu khơng có u vai, lưng thắng, mông xuôi, ngực nở Đuôi trâu đài đến kheo, tận cùng có chịm lơng Đa số trâu có lơng và da màu đen xám, dưới hầu và trước ức có khoang lơng màu trắng Có một số trâu (5 - 10 %) có lơng và da màu trắng (trâu bạc)
Tầm vóc trâu khá lớn: khối lượng sơ sinh khoảng 28 - 30 kg, trưởng thành đạt khối lượng 400 - 500 kg Khả năng sinh sản của trâu nói chung kém, hiện tượng động dục biểu hiện không rõ và mang tính mùa vụ Trâu cái thường đẻ 3 năm 2 lứa, sức sản xuất sữa thấp, chỉ đủ cho con bú, nhưng tỷ lệ mỡ sữa rất cao (9 - 12 %) Trâu Việt Nam có khả năng lao tác tốt
Trâu có khả năng thích nghỉ tốt, khả năng chống bệnh tật cao Tuy nhiên, trâu cũng đễ mắc các bệnh truyền nhiễm và bệnh ký sinh trùng nói chung, trong đó có bệnh tiên mao trùng
- Đặc điểm sinh hoc cua bo:
Ở nước ta hiện nay có hai giống bị là bò nội và bò nhập nội Tuy nhiên, giống
Trang 21phân bồ rộng và thường được gọi theo tên địa phương như bò Thanh Hố, bị Nghệ
An, bò Lạng Sơn, bò Phú Yên Mặc đù có sự khác nhau nhất định về một vài đặc
điểm màu lông và thể vóc, nhưng chưa có cơ sở nào khẳng định đó là những giống bò khác nhau, cho nên các loại bò nội của ta được gọi chung là bò Vàng Việt Nam Bò nội thường có sắc lơng màu vàng, vàng nhạt hoặc vàng cánh đán và khơng có thiên hướng sản xuất rõ rệt
Ngoại hình bị Vàng cân xứng: đầu con cái thanh, sừng ngắn; con đực đầu to, sừng dài chĩa về phía trước; mạch máu và gân mặt nồi rõ; mắt tinh, lanh lợi Cổ con cái thanh, cổ con đực to; lông cổ thường đen; yếm kéo dải từ hầu đến xương ức; đa có nhiều nếp nhăn U vai con đực cao, con cái không có; lưng và hơng thẳng, hơi rộng; bắp thịt nở nang Bụng to, trịn nhưng khơng sệ Bốn chân thanh, cứng cáp; 2 chân trước thăng, 2 chân sau đi thường chạm kheo
Bị nội có nhược điểm là tầm vóc nhỏ: khối lượng sơ sinh khoảng 14 - 15 kg, lúc trưởng thành con cái nặng 160 - 200 kg, con đực nặng 250 - 280 kg Tuổi phối
giống lần đầu khoảng 20 - 24 tháng Tỉ lệ đẻ hàng năm khoảng 50 - 80 %, kha nang cho sữa thấp (chỉ đủ cho con bú) nhưng tỷ lệ mỡ sữa rất cao (5 - 5,5 %) Bị Vàng
có khả năng làm việc dẻo dai ở những chân đất nhẹ, có tốc độ đi khá nhanh
Bị Vàng có ưu điểm nổi bật là có khả năng thích nghỉ tốt, khả năng chống
bệnh tật cao
- Đặc điểm sinh học của chuột bạch:
Chuột bạch thuộc loài chuột nâu Rattus norvegicus và thường có bộ lơng màu trắng Chuột bạch tính hiền, khả năng sinh sản rất tốt nên được nuôi và nhân đàn một cách dễ dàng Chuột bạch được sử dụng phổ biến trong các thí nghiệm khoa học về lĩnh vực y học, sinh học và thú y do đặc tính mẫn cảm với các mầm bệnh của loài này Chuột bạch còn được dùng dé thir tac dụng bảo hộ và tác dụng phụ của vắc-xin, thử tác dụng chữa bệnh của thuốc, của các tia xạ, tác dụng và ảnh hưởng của một loại thức ăn
- Đặc điểm sinh học của thỏ:
Thỏ là loài vật nhạy cảm với các tác nhân ngoại cảnh, ở nước ta nhiệt độ môi
trường thích hợp nhất với thỏ là 20 - 29 °C Tần số hô hấp của thỏ là 60 - 90 lần/ phút Nhịp đập tim thỏ rất nhanh và yếu, trung bình từ 100 - 120 lần/ phút Thỏ ít
Trang 22hô hấp Nếu nhiệt độ khơng khí tăng nhanh và nóng kéo dai trén 35 °C thì thỏ thở
nhanh và nông để thải nhiệt, khi đó thỏ đễ bị cảm nóng
Cấu tạo khoang mũi của thỏ rất phức tạp, có nhiều vách ngăn chỉ chít, lẫn các rãnh xoang ngóc ngách, vì vậy khi hít thở phải bụi bẩn thì thỏ đễ bị viêm xoang mũi
Thỏ rất thính và tỉnh, trong đêm tối thỏ vẫn có thé phát hiện được tiếng động nhỏ
xung quanh, do thỏ rất nhát nên cần nuôi thỏ ở những nơi yên tĩnh, hạn chế tiếng ồn Thỏ là loài dạ đày đơn, có khả năng tiêu hóa chất sơ nhờ hệ vi sinh vật ở manh tràng Thỏ có thể ăn 100% thức ăn thô xanh nhưng không ăn được 100% thức ăn tinh trong khẩu phần
Thỏ thường được động dục lúc 2,5 - 3 tháng tuôi tuỳ thuộc vào giống và nuôi dưỡng Thời gian mang thai của thỏ 1a 28 - 32 ngày Trước khi đẻ thỏ mẹ thường cắp, nhặt cỏ
lá vào ô và nhồ lông ở bụng tạo thành tổ ấm mềm mại, mỗi lứa thường đẻ 6 - 9 con
Thỏ mẹ vừa có chức năng tiết sữa, vừa có khả năng đưỡng thai nên thỏ mẹ vừa đẻ được I - 3 ngày cũng có thé cho phối giống được và chửa đẻ bình thường
* Cơn trùng môi giới truyền bệnh tiên mao trùng:
Sự lây truyền tiên mao trùng từ trâu, bò ốm sang trâu, bò khoẻ là nhờ các loài ruồi hút máu (thuộc họ phụ S/ømoxydinae) và các lồi mịng hút máu (thuộc họ Tabanidae) Ruồi và mòng hút máu gia súc bị bệnh, hút luôn cả tiên mao trùng vào vịi hút, sau đó lại hút máu gia súc khoẻ, trong khi hút máu sẽ truyền tiên mao trùng từ vòi hút vào máu con vật khoẻ Sự lây truyền này mang tính chất cơ học Như vậy, ruồi và mòng hút máu là những vật môi giới truyền bệnh tiên mao trùng quan trọng
Trang 23
- Vi trí của một số loài ruồi, mong trong hệ thong phan loại động vật học Giới Animalia Nganh Arthropoda Lop Insecta Bo Diptera Ho Tabanidae Giống Tabanus
Loài Tabanus rubidus Wiedemann, 1821 Loai Tabanus kiangsuensis Krober, 1933
Loai Tabanus flavistriatus Schuurmans Stekhoven, 1926 Loai Tabanus fumifer Walker, 1856
Loai Tabanus striatus Fabricius, 1787
Ho Muscidae Giéng Stomoxys
Loai Stomoxys calcitrans Linnaeus, 1758 - Chu kp phat trién ctia rudi, mong:
Theo Michael W DuPonte va Linda Burnham Larish (2003) [111]: ruồi, mong
nói chung và ruồi, mịng hút máu đều có chu kỳ phát trién trai qua 4 giai đoạn là trứng, ấu trùng (dòï), nhộng và trưởng thành Giai đoạn ấu trùng trải qua 3 thời kỳ rồi mới phát triển thành nhộng
< s er by 2 ~~ f 2
Trang 24John B Campbell (2006) [95] cho rang, ho Stomoxys phat sinh tir chau Phi,
trên thế giới có 18 loai thudc giéng Stomoxys
Don Rutz và cs (2007) [74] cho biết, thời gian hồn thành vịng đời của Sfomoxys caleitrans là 21 ngày, tuổi thọ khoảng 20 - 30 ngày
- Thành phần lồi ri, mịng hút mắu ở nước ta:
Theo Phan Địch Lân (1974) [20], (2004) [23], phần lớn các lồi mịng tập trung ở khu vực miễn núi và trung du Trong 53 lồi mịng thì có tới 44 lồi phân bố ở vùng rừng núi có độ cao dưới 1.000 mét so với mặt nước biển, càng lên cao số lồi càng ít dần (độ cao trên 1.000 mét chỉ có 26 lồi) Ở vùng trung đu (rừng thưa, độ cao không quá 500 mét so với mặt nước biển có 27 lồi; vùng đổi trọc chỉ có 9 - 11 loài; vùng
rừng núi ven biên chỉ phát hiện được 8 lồi Những lồi mịng phổ biến ở tất cả các
vung la: Tabanus rubidus, T striatus, Chrysops dispar, Chrysozoma assamensis Những loài mong chi gap 6 ving nui la: Tabanus flavistriatus, Tabanus fumifer,
Chrysops vander
Miền Bắc nước ta có 4 loài ruồi hút máu, 2 loài phổ biến ở tất cả các vùng là
Stomoxys calcitrans va Liperosis exigua; 2 loài chỉ thấy ở những vùng sinh cảnh đặc biệt: loài Bđellolarynx sanguinolenus (chỉ xuất hiện ở vùng có độ cao đưới 1.000 mét), loai Stomoxys indica (chi thay 6 ving nui Cam Thuy - Thanh Hod)
- Vai tro truyén bénh tién mao tring ctia rudi, mong:
Phạm Sỹ Lăng (1982) [15] cho rang, thời gian xâm nhập của tiên mao trùng càng
lâu thì tý lệ gây bệnh càng giảm, điều này có thể do thời gian càng lâu thì số lượng và
độc lực của Trypanosoma evansi trong ruồi, mòng càng giảm dần
Phan Địch Lân (2004) [23] cho biết: hình thái tiên mao trùng khi ở trong vòi
ruồi, mòng biến đổi theo thời gian: từ 1 - 34 giờ có hình thái, kích thước bình
thường; 35 - 45 giờ: tiên mao trùng có hình dạng thay đổi, tăng kích thước chiều rộng và thô dần; 46 - 53 giờ: tiên mao trùng trương to, duỗi thắng, mất khả năng di động và ngừng hắn hoạt động
- Thời gian hoạt động của ri, mịng hút máu:
Trang 25Ruồi S/omoxys calcitrans hoạt động quanh năm từ tháng 1 đến tháng 12, đạt cao
điểm từ tháng 5 đến tháng 8
Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [14] cho biết: mùa phát sinh bệnh tiên mao trùng có liên quan chặt chẽ với mùa côn trùng hoạt động Ruồi và mòng thường hoạt động mạnh từ tháng 5 đến tháng 9 hàng năm, sau đó giảm đi
1.1.3 Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng của bệnh 1.1.3.1 Đặc điểm bệnh lý
Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) [12] cho biết: khi ruồi, mòng đốt, hút máu
và truyền tiên mao trùng vào trâu, bò, ngựa, tiên mao trùng xâm nhập vào da, gây ra vết viêm trên mặt da Có thể quan sát được phản ứng viêm ở da của thỏ, cừu, dê và bò gây nhiễm thực nghiệm tiên mao trùng, kích thước chỗ viêm phụ thuộc vào số lượng tiên mao trùng được tiêm truyền (ước chừng khoảng 108 tiên mao trùng có thé gây viêm da ở vị trí tiêm truyền), một số lượng lớn tiên mao trùng phát triển tại chỗ viêm này
Vào máu, tiên mao trùng nhân lên theo cấp số nhân trong máu, trong bạch
huyết và các mô khác của cơ thể vật chủ theo cách phân chia theo chiều đọc Số
lượng tiên mao trùng trong máu không phải lúc nào cũng như nhau Mật độ tiên mao trùng thay đổi theo ngày Biểu đỗ sóng tiên mao trùng cho thấy, xen kẽ giữa những sóng tiên mao trùng mạnh là những đợt sóng yếu Mỗi đợt sóng tiên mao trùng bắt đầu bằng sự tăng số lượng tiên mao trùng trong máu, sau đó giảm và khó phát hiện thấy tiên mao trùng Mỗi đợt tiên mao trùng tăng lên trong máu là biểu hiện sự xuất hiện một quần thể tiên mao trùng có kháng nguyên bề mặt mới, quần thé này có thể tiếp tục sinh sản và tồn tại một thời gian cho đến khi cơ thể xuất hiện
kháng thê đặc hiệu với chúng
Trang 26Sống trong máu vật chủ, tién mao tring cén san sinh ra déc t6 Trypanotoxin, độc tố này gồm: độc tố do tiên mao trùng tiết ra qua màng thân trong quá trình sống và độc tố do xác chết của tiên mao trùng phân huỷ trong máu Độc tố của tiên mao trùng tác động lên hệ thần kinh trung ương làm rối loạn trung khu điều hoà thân nhiệt, gây sốt cao và gián đoạn (lúc sốt, lúc hết sốt xen kẽ nhau) Khi sốt cao thường có rối loạn về thần kinh (run rấy, bại chân ) Độc tổ phá huỷ hồng cầu, ức chế cơ quan tạo máu làm cho vật chủ thiếu máu và suy nhược dần Độc tố còn tác động tới bộ máy tiêu hoá, gây rồi loạn tiêu hoá, làm con vật ia chảy Hội chứng tiêu chảy có thể xảy ra khi xuất hiện tiên mao trùng trong máu con vật bệnh
Khi tăng lên với số lượng lớn trong máu, tiên mao trùng còn làm tắc các mao mạch, gây ứ máu, làm tăng tính thấm thành mạch, dần dần tạo ra các ô thuỷ thũng chất keo vàng dưới da
1.1.3.2 Triệu chứng lâm sàng của trâu, bò bị bệnh tiên mao trùng
* Triệu chứng ở trâu, bò:
Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (2008) [12]: trâu, bò bị bệnh thể hiện các triệu chứng lâm sàng chủ yếu như sau:
- Sốt cao và gián đoạn: sau 14 - 30 ngày bị ruồi, mòng hút máu truyền tiên mao trùng, trâu, bò thường đột ngột lên cơn sốt (40 - 41,7°C) kéo dai 2 - 4 ngày rồi giảm, thời gian sau nhiệt độ lại tăng lên Thời gian gián đoạn giữa hai cơn sốt dài hay ngắn tuỳ theo thê trạng con vật Khi sốt, kiểm tra máu thường thấy tiên mao trùng
- Hội chứng thần kinh: một số trâu, bò khi lên cơn sốt còn thể hiện hội chứng
thần kinh như điên loạn, mắt đỏ ngầu, hic đầu vào tường, chạy vòng quanh, kêu rồng lên Trường hợp nhẹ thấy run ray tig cơn, mắt trợn ngược rồi ngã vật xuống, sùi bọt mép giống như trâu bị cảm nẵng Sau 20 - 30 phút con vật lại đứng dậy đi lại được Những trâu, bò mắc bệnh ở thê cấp tính thường có triệu chứng lâm sàng như trên
Trâu, bò bị bệnh mạn tính thường kéo dai, co thể suy yếu, liệt hai chân sau,
nằm tư thế quỳ và không đi lại được Mặc dù nằm liệt nhưng vẫn ăn và nhai lại cho
đến khi sắp chết
- Phù thũng dưới da: phù thũng thường thấy ở vùng thấp của cơ thể như ở bốn
Trang 27- Viêm giác mạc và kết mạc mắt: triệu chứng này thấy ở hầu hết trâu, bị bệnh Mắt có đử trắng hay vàng, chảy liên tục, nếu nặng thì mắt sưng, đỏ ngầu Khi khỏi bệnh, mắt có màng trắng (cùi nhãn) kéo che kín giác mạc
- Hội chứng tiêu hoá: một số trâu, bò bệnh bị ia chảy nặng, phân lỏng, màu vàng, sau chuyển màu xám, có lẫn bọt và chất nhay Cac dot ia chay tiép theo những cơn sốt cách quãng Ïa chảy trong bệnh tiên mao trùng thường dai dẳng và con vật vẫn ăn được
- Gay yếu, suy nhược: ở thể bệnh cấp tính trâu, bò gầy sút nhanh, chỉ sau 7 -
14 ngày từ khi phát bệnh con vật đã gầy rộc, mắt trũng sâu Nếu bệnh kéo dài thì
con vật gầy xơ xác, lông dựng ngược, da khô nhăn nheo, niêm mạc mắt nhợt nhạt, lông dễ rụng, dần dần suy nhược cơ thể nặng, mất khả năng cày kéo và sinh sản Nếu gặp điều kiện bất lợi như thiếu ăn, rét must thì trâu, bị dé chết Trong thực tế,
có khoảng 3 % số trâu bị bệnh ở thê ân vẫn béo khoẻ, làm việc bình thường khi
được chăm sóc ni dưỡng tốt
Tình trạng thiếu máu thể hiện rõ trong bệnh do 7 evansi gây ra Theo Silva Rams và cs (1995), Smith R D (1995), số lượng hồng cầu và hàm lượng huyết sắc tố giảm, số lượng bạch cầu tăng, thành phần bạch cầu thay đổi: bạch cầu lymphé va bạch cầu ái toan tăng nhưng bạch cầu trung tính giảm, protein tong s6 va albumin giam 16 rét
Pham S¥ Lang (1982) [15] cho biết, khi protein tổng số và albumin giảm thì
các thành phần ø, B và y - globulin đều tang, chi sé A/G < 0,5
Theo Nguyễn Thị Kim Lan và cs (1999) [11]: trâu, bò bị bệnh thường thể hiện
ở thể mạn tính với những triệu chứng sau: sốt lên xuống với nhiệt độ 40 - 41°C trong
vòng l - 2 ngày, sau đó nghỉ sốt 2 - 6 ngày, rồi lại sốt Có trường hợp con vật sốt
liên miên trong 18 ngày Niêm mạc mắt nhợt nhạt, mi mắt sưng, có hiện tượng
hoàng đản Thuỷ thũng ở những vùng thấp của cơ thể, hồng cầu, huyết sắc tố giảm
Gia súc có chửa dễ bị sảy thai
Phạm Sỹ Lăng và Lê Văn Tạo (2002) [18] cho biết, trâu, bò bị thiếu máu và
suy nhược trong suốt quá trình bị bệnh Hồng cầu giảm thấp chỉ còn 3 triệu /1 mm?
Trang 28* Triệu chứng ở động vật khác:
Theo Aquino L P va cs (1999) [47], chó nhiễm 7: evznsi có triệu chứng sốt gián đoạn, niêm mạc nhợt nhạt, phù nề, con vật gầy yếu, các hạch bạch huyết sưng to
Theo Sarah Womack và cs (2006) [150], dấu hiệu lâm sàng của bệnh có thể
khác nhau tùy theo cá thể hoặc tùy theo loài Các đấu hiệu lâm sàng bao gồm giảm cân, ủ rũ, lười vận động, thiếu máu, suy nhược, các hạch bạch huyết sưng, phù thũng, nổi mề đay, rụng lông và sốt không liên tục Hiện tượng sảy thai và thai chết lưu cũng là triệu chứng thường xảy ra Động vật nhiễm 7 evznsi có thể khơng thể hiện các triệu chứng lâm sàng
1.1.3.3 Bệnh tích của trâu, bò bị bệnh tién mao trang
Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2011) [13]: Trâu, bò bị bệnh tiên mao trùng khi
chết gầy xơ xác, mổ khám thấy có những biến đổi bệnh tích dai thé rõ rệt ở hệ tuần
hồn và hơ hấp: tim nhão, xoang bao tim tích nước vàng: phổi sung huyết và tụ máu từng đám nhỏ; gan sưng to, nhạt màu; lách sưng, mềm nhũn và nhạt màu; hạch lâm ba sưng và tụ máu trong hạch; cơ nhão, màu nhợt nhạt, nhát cắt rỉ nước; xoang ngực và xoang bụng tích dịch màu vàng nhạt; có những đám keo nhằy màu vàng dưới vùng da thuỷ thũng
1.1.4 Chân đoán bệnh tiên mao trùng 1.1.4.1 Phương pháp chẵn đốn lâm sàng
Có thể căn cứ vào các dấu hiệu lâm sàng của con vật mắc bệnh để chân đoán bệnh tiên mao trùng Tuy nhiên, các biểu hiện lâm sàng đặc trưng của bệnh tiên mao trùng ở trâu, bị, ngựa khơng phải lúc nào cũng phát hiện được Rất nhiều gia súc mang bệnh nhưng khó phát hiện các triệu chứng đặc trưng, nhất là đối với những gia súc mắc bệnh tiên mao trùng mạn tính Đối với gia súc mắc bệnh ở thể cấp tính, các biểu hiện bệnh đặc trưng là sốt cao, bỏ ăn, có triệu chứng thần kinh và chết nhanh Trâu bị bệnh mạn tính có thê thấy: sốt gián đoạn, gầy còm, thiếu máu kéo dài, viêm giác mạc, phù thũng ở bụng và chân sau, chết đo kiệt sức (Phạm Sỹ Lăng, 1982 [15]) Triệu chứng sấy thai có thể thấy ở trâu, bò bị bệnh tiên mao trùng (Nguyễn Đăng Khải, 1995 [10])
Trang 291.1.4.2 Các phương pháp chẩn đốn thí nghiệm * Phương pháp phát hiện tiên mao tring:
Muốn phát hiện tiên mao trùng trực tiếp, có thê áp dụng những phương pháp sau: - Phương pháp xem tươi (Direct smear)
- Phương pháp nhuộm Giemsa tiêu bản máu khơ (Đomanovsky)
- Phương pháp làm tan hồng cầu: dung địch SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) là chất làm tan hồng cầu Nhờ dung dịch SDS, tiên mao trùng dễ đàng được phát
hiện trong máu Dung dịch SDS rất độc nên tránh tiếp xúc với da và tránh hút
bằng pipet Dung dịch SDS dễ bảo quản ở nhiệt độ thường trong nhiều tháng (Van Meirvenne, 1989)
- Phuong phap tap trung tién mao tring:
Người ta đã sử dụng phương pháp ly tâm tập trung tiên mao trùng bằng ống Haematocrit hoặc tách tién mao tring bang gel DEAE - cellulose
Phuong phap ly tam tap trung bang éng Haematocrit (WOO, 1971): cho mau động vật nghi mắc bệnh vào ống Haematocrit, một đầu ống được bịt kín bằng chất dẻo matit, một đầu ống để hở Ly tâm với tốc độ 14.000 vòng/phút trong 5 phút Sau đó kiểm tra sự tập trung của tiên mao trùng tại vị trí tiếp giáp giữa huyết tương
và hồng cầu (độ phóng đại 10 x 10)
Phương pháp này đơn gián, phát hiện tiên mao trùng tốt hơn phương pháp xem tươi và nhuộm Giemsa Song, tỷ lệ phát hiện chưa cao
Sau khi ly tâm máu trong ống Hematocrit, có thể thực hiện phương pháp Darkground: dùng cưa y tế cắt ống ở vị trí tiên mao trùng tập trung (ranh giới giữa huyết tương và hồng cầu), nhỏ 1 giọt huyết tương lên phiến kính, đậy la men và
kiểm tra dưới kính hiển vi (độ phóng dai 10 x 40) để tìm tiên mao trùng
- Phương pháp tiêm truyền động vật thí nghiệm:
Trang 30* Phương pháp chân đoán huyết thanh học:
Bằng các phương pháp huyết thanh học đặc hiệu có thể phát hiện kháng thể hoặc kháng nguyên tiên mao trùng
- Các phương pháp phát hiện kháng thể kháng tiên mao trùng
Khi tiên mao trùng ký sinh, cơ thê vật chủ sinh ra kháng thể đặc hiệu chống lại tiên mao trùng Những phương pháp sau cho phép phát hiện kháng thể kháng tiên mao trùng trong máu vật chủ:
+ Phương pháp ngưng kết trén phién kinh (SAT: Slide Agglutination Test): hoà 1 giọt huyết thanh của gia súc nghỉ mắc bệnh vào 1 giọt nước muối sinh lý trên phiến kính, sau đó cho I giọt máu chuột bạch có nhiều tiên mao trùng vảo, trộn đều, đậy la
men và soi dưới kính hiển vi (độ phóng đại 10 x 20 hoặc 10 x 40) Nếu thấy ngưng
kết hình hoa cúc là (+) và ngược lại là (-) Phương pháp này đơn giản, đễ làm và có
thé ap dụng trên diện rộng (Đoàn Văn Phúc, 1989 [30]; Lê Ngọc Vinh, 1992 [42])
Phạm Sỹ Lăng (1982) [15] cho biết, ngưng kết trên phiến kính giữa kháng
nguyên tiên mao trùng sống có sẵn, với kháng thể có trong máu động vật nghỉ nhiễm có độ chính xác là 70 - 80%
+ Phuong phap LATEX (Latex Agglutination Test)
LATEX là phương pháp được dùng để phát hiện kháng thê lưu động có trong máu của gia súc mắc bệnh tiên mao trùng
Nguyên lý của phương pháp LATEX: khi kháng nguyên bề mặt 7 evansi gan lên các hạt latex kết hợp với kháng thể đặc hiệu kháng tiên mao trùng ở trên bản nhựa, thì sẽ xảy ra phản ứng ngưng kết giữa kháng nguyên và kháng thể Hiện tượng ngưng kết có thể quan sát được bằng mắt thường, và được giải thích là do kháng nguyên bề mặt tiên mao trùng được gắn lên các hạt latex là loại kháng ngun hữu hình, có nhiều điểm quyết định tính kháng nguyên bề mặt (epitop surface) Còn
kháng thê đặc hiệu kháng tiên mao trùng lại có nhiều điểm thụ thể (receptor) tương
ứng, đặc hiệu với các điểm quyết định của kháng nguyên Do đó, khi kháng nguyên tiên mao trùng gặp kháng thể đặc hiệu kháng tiên mao trùng, sẽ có hiện tượng một
phân tử kháng thể đặc hiệu liên kết với nhiều phân tử kháng nguyên và ngược lại Kết
Trang 31Phương pháp này có thê ứng dụng trong kiểm tra dịch tễ và có thê ứng dụng ở cơ sở Tuy nhiên, tỷ lệ phát hiện bệnh không cao, do phương pháp này cho kết quả dương tính cả khi con vật khỏi bệnh nhưng vẫn còn kháng thê tồn tại trong huyết thanh Mặt khác, đối với những súc vật mới nhiễm tiên mao trùng, trong huyết thanh chưa có kháng thể nên khi kiểm tra bằng phương pháp LATEX sẽ cho kết quả âm tính
+ Phương pháp kháng thể huỳnh quang gián tiép IFAT (Indirect Fluorescent Antibody Test):
Đây là phản ứng huyết thanh học đặc hiệu có độ nhạy cao, được ứng dung rộng rãi trong phòng thí nghiệm và trên thực địa Ngồi mục đích dùng làm phản ứng chuẩn để so sánh với các phương pháp huyết thanh học khác, phương pháp IFAT còn được dùng trong nghiên cứu các dòng kháng nguyên và phát hiện kháng thé (Luckins, 1988 [104]; Davison, 1999 [66])
Trong phương pháp IFAT, huyết thanh đương chuẩn được lấy từ trâu, bò mắc bệnh tiên mao trùng, huyết thanh âm chuân được lấy từ trâu bò khoẻ mạnh, huyết thanh cần chân đoán là huyết thanh lấy từ gia súc nghi mắc bệnh
Cách tiến hành: sử dụng huyết thanh dương chuẩn đã gắn với thuốc nhuộm huỳnh quang trộn với huyết thanh của động vật nghi mắc bệnh, rồi cố định trên
slide Sau đó, rửa sạch slide dé loại bỏ những kháng thể huỳnh quang không gắn với
kháng nguyên rồi đem soi dưới kính hiển vi huỳnh quang Nếu thấy kháng nguyên phát sáng dưới kính hiển vi huỳnh quang là đương tính, không phát sáng là âm tính (Gary E Kaiser, 2012 [81])
Ung dụng phương pháp này ở Việt Nam, Lương Tố Thu (1994) [37] đã chế
tạo conjugate huỳnh quang trên thỏ kháng IgG của bò đề chân đoán bệnh tiên mao trùng Độ pha loãng của conjugate tự chế sử dụng cho phản ứng là 1/8 và huyết
thanh chuẩn pha loãng ớ 1/40 Theo Lương Tổ Thu và Lê Ngọc Mỹ (1996) [38], độ
nhậy của phương pháp IFAT là 71,25
Trang 32được 26 VAT thuộc 6 kho kháng nguyên khác nhau Bằng phản ứng dung giải miễn dịch và phương pháp thấm miễn dịch, tác giá đã xác định được sự thay đổi kháng nguyên bề mặt của 7 evznsi: đa số các VAT của các kho kháng nguyên khác nhau là khác nhau, chỉ có 8/26 VAT có hiệu gia khang thé don giá đặc hiệu, có phản ứng chéo với các VAT của các kho kháng nguyên khác Các VAT trội xuất hiện sớm trong 4 tuần lễ đầu nhiễm bệnh, có tính kháng nguyên mạnh, có thể nghiên cứu ứng dụng chế kháng nguyên chẩn đốn Từ đó, tác giả đã tỉnh chế kháng nguyên theo phương pháp tách tiên mao trùng để dùng trong phản ứng miễn dịch huỳnh quang gián tiếp, ứng dụng chẵn đoán bệnh tiên mao trùng cho độ nhạy và độ đặc hiệu cao
+ Phuong phap ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay)
Phương pháp ELISA là một trong những phương pháp hiện đại được ứng dụng để chân đoán bệnh tiên mao trùng
Nguyên lý: dùng kháng thê hoặc kháng thể kháng globulin (kháng kháng thể)
có mang một enzym (phosphatase hoặc peroxydase) được gắn trên mảnh Fc, cho kết hợp trực tiếp hoặc gián tiếp với kháng nguyên Sau đó, cho cơ chat sinh mau vao Cơ chất này sẽ kết hợp với enzym và bị enzym phân huỷ tạo nên màu So sánh với màu của quang phô kế sẽ định lượng được mức độ của phản ứng
Phương pháp ELISA hiện đang được sử dụng rộng rãi ở các nước trên thế giới và Việt Nam
* Các phương pháp phát hiện kháng nguyên tiên mao tring - Phương pháp ELISA kháng nguyén (Ag - ELISA)
Đây là phương pháp sử dụng phản ứng ELISA kháng nguyên để phát hiện kháng nguyên lưu động trong máu của gia súc nhiễm bệnh Phản ứng dựa trên kháng thể đơn dòng đặc hiệu với tiên mao trùng
- Phản ứng Suratex: là phản ứng ngưng kết giữa các hạt latex được gắn kháng thể đơn dòng với kháng nguyên lưu động trong máu động vật nhiễm tiên mao trùng (Nantulya, 1994) Phản ứng này hiện đang được thử nghiệm và đánh giá ở thực địa
Trang 33* Phương pháp phát hiện ADN của tiên mao trùng bằng phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction)
PCR là phương pháp hiện đại nhất được đưa vào ứng dụng đề chẩn đoán bệnh tiên mao trùng trong những năm gần đây
Nguyên lý: dựa vào phản ứng chuỗi Polymerase để xác định sự có mặt AND của tiên mao trùng trong máu động vật nhiễm bệnh
1.1.5 Phòng, trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò, ngựa 1.1.5.1 Phòng bệnh
Để phòng ngừa bệnh tiên mao trùng có hiệu quả cao, các nhà khoa học đã đề nghị áp dụng 3 biện pháp sau:
* Diệt tiên mao trùng trên cơ thể ký chủ:
Diệt tiên mao trùng ký sinh ở vật chủ không những ngăn chặn được tác hại gây bệnh của chúng mà còn làm cho bệnh không lây lan Các biện pháp cụ thể là:
- Phát hiện gia súc nhiễm tiên mao trùng ở vùng có bệnh và những vùng lân cận, nhốt riêng trong chuồng có lưới để ngăn côn trùng và điều trị triệt để cho gia súc bệnh
- Ở những vùng khơng có bệnh thì khơng nhập gia súc từ vùng có bệnh về Nếu thật cần thiết thì chỉ nhập những gia súc khoẻ (có kết quả kiểm tra âm tính với tiên mao trùng), song vẫn cần nhốt riêng dé theo đối Nếu không bị bệnh mới cho
nhập đàn Phát hiện và diệt những loài thú hoang nghỉ là nguồn tàng trữ mầm bệnh,
không chăn thả gia súc trong khu vực có những lồi đó sinh sống * Diệt rudi, mong mdi giới truyền bệnh:
- Diệt ruồi, mòng hút máu bằng biện pháp thay đổi sinh thái:
Thay đổi sinh thái là thay đổi điều kiện sống, làm cho ruồi, mịng khơng sinh
sản, khơng thực hiện được chu kỳ phát triển
Phát quang cây cối ở từng khu vực, không để nước tù đọng, ủ phân để diệt trứng và ấu trùng ruồi, mong, làm chuồng gia súc có lưới ngăn là các biện pháp hữu hiệu, tạo ra những điều kiện bất lợi cho đời sống của ri, mịng
Tuy nhiên, do ruồi, mịng có khả năng di chuyên khá mạnh nên các biện pháp trên phải thực hiện đồng thời trên phạm vi rộng mới có hiệu quả
Trang 34- Diệt ruồi, mòng bằng hố dược:
Có thể dùng các hoá được tiêu diệt ruồi, mịng mơi giới của tiên mao trùng Các hoá dược đã được dùng là: endosulfan, brophos, dieldrine, tetracloreinphos
- Diệt ruồi, mòng hút máu bằng phương pháp sinh học:
Các nhà khoa học đã phát hiện được 25 loài ong và côn trùng ký sinh gây hại cho các loài ruồi, mịng mơi giới truyền bệnh tiên mao trùng Một số lồi vi khuẩn có thể xâm nhập vào cơ thể ruồi, mòng làm chúng mắc bệnh và chết
Laird (1974) đã thử nghiệm và phân lập được một số loài vi khuẩn như:
Bacillus thuringiensis, B mathisi dé tiêu điệt các loài ruồi hút máu Biện pháp này
có ưu điểm là không ảnh hưởng đến môi trường sinh thái
Jordan A N và cs (1974) đã gây đột biến gen của ruồi hút máu bằng một số hoá chất và tia sáng có bước sóng ngắn, bằng phương pháp di truyền quần thé, da tạo ra những ruồi đực vơ tính rồi thả với ruồi cái trong tự nhiên Kết quả là làm cho ruồi không sinh sản được Phương pháp này có nhiều khả năng thành công nhưng rất tốn kém
Nhìn chung, các biện pháp tiêu diệt ruồi, mịng mơi giới đã có hiệu quả nhất
định nhưng cũng còn nhiều hạn chế
* Phòng bệnh cho gia súc bằng hoá dược:
Năm 1978, tại hội thảo quốc tế chuyên đề về phòng chống bệnh tiên mao trùng cho vật nuôi, các nhà khoa học đã kết luận, biện pháp sử dụng hoá dược để phòng bệnh rộng rãi cho gia súc ở những vùng có bệnh tiên mao trùng lưu hành cần phải được tiếp tục trong nhiều năm (Touratier L và cs., 1979 [160])
Hiện nay, thuốc Typamidium, liều 0,5 mg /KgTT được khuyên dùng để phòng bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò
1.1.5.2 Điều trị bệnh
Một số loại hoá dược đã được dùng để điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu,
bò, ngựa ở nước ta từ những năm 60 đến nay, gồm:
- Naganin, liều 10 mg /kgTT Pha thuốc với dung dịch nước muối sinh lý hoặc nước cất thành dung dịch 10 %, tiêm tĩnh mạch
Phan Địch Lân và cs (1962), Phạm Sỹ Lăng và cs (1965) đã thử nghiệm naganin và cho biết, thuốc có tác dụng tốt trong điều trị bệnh do 7 evansi gây ra trên
Trang 35- Novarsenobenzol, liều 10 mg /kgTT
Phạm Sỹ Lăng và cs (1965) đã sử dụng novarsenobenzol 2 lần cách nhau 2 ngày,
thấy hiệu lực thuốc đạt 80 %, tỷ lệ an toàn 80 - 82 %
- Trypamidium, liều 1 mg /kgTT, pha với nước cất thành dung dịch 1 - 2 %,
tiêm sâu vào bắp thịt thành 2 - 3 điểm
Đoàn Văn Phúc và cs (1981) [29] đã thử nghiệm trypamidium điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò và cho biết, tỷ lệ an toàn và khỏi bệnh đều đạt 100 %
- Berenil, liều 5 mg /kgTT, pha thuốc với nước cất theo tỷ lệ cứ 0,8 gam thuốc trong 5 ml nước cất Tiêm sâu bắp thịt (không đùng quá 9 gam cho một gia súc)
Phan Văn Chinh (2006) [1] đã đùng berenil điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò ở các tỉnh miền Trung và cho biết, thuốc đạt hiệu lực 100 % với những trâu, bò bị bệnh
- Trypamidium samorin, liều I mg /kgTT Tiêm sâu bắp thịt
Nguyễn Quốc Doanh và cs (1996) [3] đã dùng trypamidium samorin điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò và xác định, thuốc có hiệu lực và độ an toàn rất cao (100 %)
Theo Phan Văn Chinh (2006) [1], thuốc trypamidium (liều 1 mg /kgTT) cho tỷ lệ diệt hết tiên mao trùng là 100 %
- Trypazen liều 3,5 mg /kgTT
Điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò bằng trypazen với liều trên, Nguyễn
Quốc Doanh và Phạm Sỹ Lăng (1997) [4] nhận thấy, thuốc rất an toàn, tỷ lệ khỏi
bệnh là 100 %
Phạm Sỹ Lăng và Lê Văn Tạo (2002) [18] đã cho biết về thành phan, chỉ định,
liều lượng và cách sử dụng của một số loại thuốc điều trị bệnh tiên mao trùng như sau: * Berenil (Hãng Intervet - Hà lan):
Berenil là dung dịch tiêm, được hoàn nguyên từ dạng hạt, dùng điều trị bệnh đơn bào ký sinh trong máu của gia súc
Thành phần: mỗi gam dạng hạt chứa 445 mg diminazene aceturate và 555 mg phenuldimethyl parazolone (antipyrin) Sau khi pha, I ml chứa 70 mg diminazene aceturate va 87,3 mg phenuldimethyl parazolone (antipyrin)
Trang 36Liều áp dụng chung là 3,5 mg /kg TT Tùy thuộc vào thể trọng của gia súc mà liều áp dụng có thể đến § mg /kg TT, nhưng liều tối đa cho mỗi gia súc không vượt quá 4 gam /con
Đường tiêm: pha thuốc với nước cắt, tiêm bắp thịt
Quy cách: gói lớn gồm 100 gói nhỏ (23,6 g /gói), mỗi gói nhỏ chứa 10,5 g hoạt chất
Chống chỉ định: khơng dùng cho chó và lạc đà
* Azidin (Cong ty Hanvet): trong | lo azidin 1,18 g chứa 525 mg diminazene
aceturate
- Tác dụng: chữa và phòng bệnh ký sinh trùng đường máu cho trâu, bò, ngựa - Liều lượng và cách sử dụng: Pha | lo azidin 1,18 g voi 7 ml nude cat, lac cho đến khi tan hết, dùng cho 150 kg TT Tiêm sâu vào bắp thịt
Chú ý:
+ Nếu tiêm lượng thuốc lớn, nên tiêm 2 điểm khác nhau
+ Nếu cần thiết có thể tăng liều gấp đôi, song tổng liều không quá 7 lọ + Nếu thân nhiệt không giảm, tiêm nhắc lại sau 24 giờ
+ Dung dịch pha rồi có thể bảo quản ở nhiệt độ bình thường 5 ngày, trong tủ lạnh 4 - 8 °C bao quan duoc 14 ngay
Han dung: 5 nam
Bảo quản: nơi khô, râm mát
* Naganin (Tên khác: naganol): Thuốc được hãng Bayer chế tạo, sau đó nhiều nước đã sản xuất để sử dụng điều trị bệnh tiên mao trùng cho gia súc
Biệt dược: suramin, bayer 205, moranin, furno 309
- Tính chất: tên hóa học N - amino - benzoin - m - amino - pmetio - benzoin - 1 - naptilamin - 4 - 6 - 8 trisunfonat natri Là loại bột trắng mịn, màu hơi vàng chanh (naganol) hoặc hơi hồng (naganin), nhẹ, dễ hut 4m, tan trong nước, không bị phá hủy trong nước đun sôi (100 °C) Khi pha, dung dich trong, hơi ánh vàng chanh (naganol) hoặc hơi hồng, chuyển thành nâu nhạt (naganin)
Trang 37- Chỉ định: thuốc được chỉ định để điều trị các bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò, ngua do Trypanosoma evansi, T brucei, T vivax, T congolense
- Liều dùng: dùng cho trâu, bò, ngựa với liều dùng và liệu trình như sau: + Ngày thứ nhất: dùng liều 0,01 g /kg TT
+ Ngày thứ hai, thứ ba: cho súc vật nghỉ
+ Ngày thứ tư: dùng liều 0,01 g /kg TT
Thuốc pha với nước cất theo tỷ lệ 10 %, có thê tiêm bắp thịt hoặc tiêm tĩnh mạch Khi tiêm thuốc vào tĩnh mạch cần tiêm trước thuốc trợ tim (cafein hoặc long não nước)
- Chú ý:
+ Một SỐ SÚC vật có thể xuất hiện phản ứng cục bộ sau khi tiêm vào bắp thịt như: nơi tiêm sưng, thủy thũng kéo dài vài ngày Có thê tiêm cafein, vitamin BI trong ba ngày, chỗ sưng sẽ hết dần
+ Một số súc vật có phản ứng toàn thân (khoảng 1%) như: chảy nước dãi, run ray, tim đập nhanh Có thể xử lý bằng cách cho gia súc vào nơi mát, tiêm vitamin BI, vitamin C và long não nước Khoảng một giờ sau phản ứng sẽ hết
+ Thuốc pha xong chỉ dùng trong thời gian 6 - 8 giờ
* Trypamidium (Tên khác: 1sometamidium): hãng Rhone - Merleux của Pháp sản xuất
Biệt được: samorin (đo các hãng thuốc của Anh sản xuất) Tên hóa học: isometamidium hydrochlorur
- Tính chất: trypamidium là bột màu đỏ, mịn, tan đễ đàng trong nước thành dung dịch màu hồng Thuốc được đóng gói | g trong giấy thiếc, lọ chứa 10 g hoặc 25 g
- Tác dụng: thuốc có tác dụng diệt các loại tiên mao trùng trên gia súc (trâu, bị, ngựa ) Ngồi tác dụng điều trị bệnh tiên mao trùng cấp và mạn tính, thuốc cịn có khả năng tồn dư trong gan và tô chức của động vật trong thời gian 50 - 60 ngày Do vậy thuốc có tính phịng nhiễm bệnh tiên mao trùng cho vật nuôi
- Chỉ định: thuốc được dùng để phòng và trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò,
ngựa do T7: evansi, T vivax, T brucei, T congolense
+ Liều phòng bệnh cho trâu, bò, ngựa: 0,5 mg /kg TT + Liều điều trị bệnh cho trâu, bò, ngựa: l mg /kg TT
Trang 38tiêm 1 lần Nếu súc vật chưa khỏi bệnh thì sau 15 - 20 ngày tiêm nhắc lại lần thứ hai
với liều như lần thứ nhất
- Chú ý:
+ Khi tiêm thuốc cần cho súc vật nghỉ lao tác
+ Chăm sóc súc vật, cho ăn uống tốt, không cần nhịn ăn khi dùng thuốc + Dung dịch thuốc đã pha chỉ dùng trong ngày
+ Khi súc vật sử dụng thuốc có phản ứng phụ (run rây, chảy dãi dớt) thì tiêm thuốc trợ tim và cho uống nước đường
1.2 TINH HINH NGHIEN CUU VE BỆNH TIÊN MAO TRÙNG
1.2.1 Tình hình nghiên cứu trong nước
Theo Phạm Sỹ Lăng và Đào Trọng Đạt (1991) [16] tỷ lệ nhiễm tiên mao tring ở bò tại các tỉnh phía Bắc dao động từ 7 - 13 %
Theo Nguyễn Đăng Khải (1995) [10], bệnh tiên mao trùng do 7 evansi là một
bệnh ký sinh trùng đường máu khá phổ biến ở trâu, bò miền Bắc Việt Nam
Pham S¥ Lang va cs (1995) [17] đã kiểm tra 155 bò cày kéo ở một số địa
phương thuộc Hà Bắc (cũ), thấy 32 bò cho kết quả dương tính với tiên mao trùng
(chiếm 20,64%) Kiểm tra 168 bò sữa ở một số địa phương thuộc Hà Nội, thấy 20
bò cho kết quả dương tính với tiên mao trùng (chiếm 11,90%)
Theo Lê Đức Quyết (1995) [34], trâu ở một số tỉnh miền Nam và Tây Nguyên
nhiễm tiên mao trùng là 22,12%; bò là 6,6 - 10,3%
Phan Lục và Nguyễn Văn Thọ (1995) [24] cho biết, tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng
ở bò tại một số địa phương thuộc các tỉnh phía Bac 1a 26,92 %
Nguyễn Quốc Doanh và cs (1996) [3] đã kiểm tra máu 73 trâu ở xã Tả Thanh Oai - Thanh trì - Hà Nội bằng phương pháp tiêm truyền chuột bạch, phát hiện 13 trâu có 7: evansi trong máu (chiếm 17,80 %) Kiểm tra máu 83 trâu ở xã Phấn Mễ bằng phương pháp Card - test, đã phát hiện 25 trâu nhiễm bệnh (chiếm 30,12 %)
Theo Hà Viết Lượng (1998) [26], tỷ lệ bò nhiễm tiên mao trùng ở các tỉnh
miền Trung là 8,99 %
Nguyễn Quốc Doanh và Phạm Sỹ Lăng (2001) [7] đã kiểm tra 760 cá thể bò sát
(gồm 670 rắn và 90 ba ba), thấy tỷ lệ nhiễm 7: evznsi trung bình là 7,89 % Tỷ lệ
Trang 39Phan Địch Lân (2004) [23] đã tổng hợp kết quả điều tra 3.172 trâu ở các tỉnh
đồng bằng và cho biết: trâu dưới 3 năm tuổi nhiễm thấp nhất (3,2 - 6,l %), trâu 3 - 5
năm tuổi nhiễm cao hơn (10,6 - 12,7 %), trâu 6 - 8 năm tuổi nhiễm cao nhất (12,9 -
14,8 %), trâu trên 9 năm tuôi tỷ lệ nhiễm giảm thấp hơn trâu 3 - 8 năm tuổi
Theo Phan Văn Chinh (2006) [1], tỷ lệ nhiễm tiên mao trùng cao nhất ở trâu, bò 4
- 8 năm tuổi (trâu: 12,71 %; bò: 5,77 %), thấp nhất ở trâu, bò đưới 3 năm tuổi (6,92 %
và 2,31 %) Bệnh thường lây lan trong các tháng nóng âm, mưa nhiều (từ tháng 4 đến
tháng 9) Thời gian này điều kiện sinh thái thuận lợi cho các loài ruồi, mòng phát triển,
hoạt động mạnh, hút máu súc vật và truyền tiên mao trùng
Nguyen Q D va cs (2013) [126] cho biét: trong 585 mẫu huyết thanh trâu thu thập tại Thái Nguyên và Cao Bằng có I3I mẫu dương tính với tiên mao trùng,
chiếm tỷ lệ 22,4 % Trong đó, tỷ lệ nhiễm thấp nhất ở trâu nhỏ hơn 3 năm tuổi
Phạm Sỹ Lăng và Đào Trọng Đạt (1991) [16] cho biết, trong điều kiện nóng 4m của Việt Nam, ruồi hút máu mang mầm bệnh tiên mao trùng với tỷ lệ từ 5,61 -
19,34 % và mòng với tỷ lệ 3,84 - 24,9 %
Theo dẫn liệu của Nguyễn Đăng Khải (1995) [10], những ca sảy thai đầu tiên do tiên mao trùng đã được ghi nhận trên đàn trâu Murrah nuôi tại trung tâm Phùng Thượng vào năm 1987 Tổng số có 28 trâu bj say thai, chiếm 46,6 % số trâu chửa đẻ của trung tâm Qua xét nghiệm toàn đản, thấy 34/78 trâu đương tính với 7' evansi St
dụng naganin đề điều trị bệnh, hiện tượng say thai đã được ngừng lại nhanh chóng
Theo Nguyễn Thị Kim Lan (2012) [14]: ở ngựa có 3 thể bệnh là cấp tính, á
cấp tính và mạn tính Thời kỳ nung bệnh ở thể cấp tính và á cấp tính dài 1 - 1,5
tháng Thể mạn tính thì thời gian nung bệnh tới 4 - 6 tháng Ở ngựa thường có
triệu chứng điển hình như: Sốt cao, thủy thũng (phù), xuất hiện triệu chứng thần kinh, thời kỳ cuối bốn chân bị tê liệt, con vật chết
Theo Nguyễn Quốc Doanh (1999) [6], các triệu chứng lâm sàng chủ yếu ở thỏ nhiễm 7: evansi gồm: thủy thing tai, thủy thũng bẹn, thủy thũng mi mắt, mắt có nhử, khó thở và phân nhão
Theo Nguyễn Quang Sức và cs (2002) [35], dê mắc bệnh tiên mao trùng thiếu máu, suy yếu kéo dài làm giảm khối lượng cơ thể và sản lượng sữa Nếu không
Trang 40Phan Địch Lân và cs (2002) [22] cho biết, bệnh được truyền đi do vật môi
giới gieo truyền là ruồi trau (Stomoxys) va mong (Tabanus) Tién mao tring khong có sự phát triển và sinh sản ở vật mơi giới, nó chỉ được truyền đi một cách cơ giới T evansi có thê duy trì sức sống ở vật môi giới trong khoảng 24 - 44 giờ, nếu ruồi trâu và mòng chưa kịp mang căn bệnh đi truyền cho những súc vật khác thì căn bệnh sẽ chết trong vòi hút của chúng Vì vậy, mùa phát bệnh có liên quan chặt chẽ với mùa côn trùng hoạt động (tháng 5 - 9)
Phan Văn Chinh (2006) [1] cho biết: triệu chứng, bệnh tích bệnh tiên mao trùng do gây nhiễm không khác biệt với bệnh tiên mao trùng tự nhiên ở thể cấp và mạn tính, số lượng hồng cầu giảm, số lượng bạch cầu tăng ở trâu bệnh so với trâu khỏe
Nguyễn Quốc Doanh và cs (1997) [5] cho biết: 7: evznsi gây cho thỏ một thé
bệnh toàn thân, khi mồ thỏ bệnh ở ngày 70 thấy bệnh tích đại thể như sau: bao tim có
dịch màu vàng; gan cứng: lách nhữn; phối bám dính màu vàng, có vùng bị khí thũng;
một số khớp bị viêm, trong có dịch màu vàng Tác giả còn cho biết, bệnh tích vi thé 6
thỏ nhiễm 7' evansi gồm: vân các sợi cơ tìm bị mỡ rất khó nhận biết, bào tương nở to, thối hóa đạng hốc và dạng hạt; các xoang gan và tĩnh mạch giãn, tế bào gan thối hóa mơ rải rác, tế bào Kupffer tăng sinh, tế bào Limpho và một số ống mật giãn, trong lòng ống phát hiện thấy ký sinh trùng: thận: sung huyết, một số ống thận giãn; lách: một số nang Limpho bị sơ hóa, các xoang giãn, có nhiều đại thực bào
Lê Ngọc Mỹ (2002) [27] đã sử dụng phản ứng huyết thanh học để kiểm tra tỷ lệ nhiễm tiên mao tring ở trâu Việt Nam, thay tỷ lệ nhiễm tương đối cao (53,33 %), trong
đó, trâu ở các tỉnh vùng núi phía Bắc và trung du nhiễm cao hơn ở vùng đồng bằng Vương Thị Lan Phương và cs (2004) [33] đã áp dụng phương pháp IFAT (phản ứng kháng thể huỳnh quang gián tiếp) để chắn đoán bệnh tiên mao trùng cho bò Brahman tại cơ sở sản xuất bò thịt Phú Ba - Ninh Bình Kết quả cho thấy, có
10/167 mẫu dương tính với tiên mao trùng, chiếm 5,99 %
Trần Đức Hạnh và cs (2009) [8] đã sử dụng phương pháp ELISA chân đoán
bệnh tiên mao trùng ở trâu, bò tại huyện Phổ Yên, tỉnh Thái Nguyên Kết quả cho
thấy: trong số 239 mẫu huyết thanh trâu kiêm tra có 36 mẫu đương tính, chiếm 15,06
%; trong số 246 mẫu huyết thanh bò kiểm tra có 43 mẫu dương tính, chiếm 17,48 %
Phạm Sỹ Lăng và Lê Văn Tạo (2002) [18] đã đề xuất biện pháp phòng chống