Khảo sát tác dụng giảm đau, hạ sốt, kháng viêm của các cao chiết từ lá sa sâm nam ( launaea sarmentosa ( willd ) sch bip ex kuntze )

ĐÀO TRẦN MỘNG BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHĨA 2019 - 2021 ĐÀO TRẦN MỘNG KHẢO SÁT TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, HẠ SỐT, KHÁNG VIÊM CỦA CÁC CAO CHIẾT TỪ LÁ SA SÂM NAM (LAUNAEA SARMENTOSA (WILLD.) SCH - NGÀNH: DƯỢC LÝ VÀ DƯỢC LÂM SÀNG - BIP EX KUNTZE) LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH ĐÀO TRẦN MỘNG KHẢO SÁT TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, HẠ SỐT, KHÁNG VIÊM CỦA CÁC CAO CHIẾT TỪ LÁ SA SÂM NAM (LAUNAEA SARMENTOSA (WILLD.) SCH - BIP EX KUNTZE) NGÀNH: DƯỢC LÝ VÀ DƯỢC LÂM SÀNG MÃ SỐ: 8720205 LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS NGUYỄN THỊ THU HƯƠNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH, NĂM 2021 ỡ chữ 14, Times New Roman) LỜI CAM ĐOAN Tôi tên Đào Trần Mộng, học viên khóa 2019 – 2021 Trường Đại học Y dược Thành phố Hồ Chí Minh, chuyên ngành Dược lý Dược lâm sàng, xin cam đoan: Đây luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn PGS TS Nguyễn Thị Thu Hương Cơng trình khơng trùng lắp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Các số liệu nghiên cứu hoàn toàn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nghiên cứu Tôi xin chịu hoàn toàn trách nhiệm cam kết Tp Hồ Chí Minh, ngày 15 tháng 10 năm 2021 Người viết cam đoan (Ký ghi rõ họ tên) Đào Trần Mộng I Luận văn thạc sĩ dược học – Khóa: 2019 – 2021 Ngành Dược lý Dược lâm sàng – Mã số 87202075 KHẢO SÁT TÁC DỤNG GIẢM ĐAU, HẠ SỐT, KHÁNG VIÊM CỦA CÁC CAO CHIẾT TỪ LÁ SA SÂM NAM Học viên: Đào Trần Mộng Người hướng dẫn: PGS TS Nguyễn Thị Thu Hương Sa sâm nam sử dụng theo truyền thống thuốc thảo dược cho nhiều bệnh vàng da, lợi tiểu, lọc máu có hoạt tính bảo vệ gan Nghiên cứu khảo sát diện xác định hàm lượng polyphenol cao chiết nước (ALS), cao chiết ethanol 45% (ELS) sa sâm nam Thêm vào đó, nghiên cứu khảo sát tác dụng ALS ELS thực nghiệm xoắn bụng acid acetic, thực nghiệm gây sốt nấm men thực nghiệm viêm cấp gây carrageenan Kết sắc ký lớp mỏng định lương cho thấy lá, ALS, ELS có chứa polyphenol (Rf 0,36 0,14) hàm lượng polyphenol 14,6, 47,88, 64,20 mg GAEs/g mẫu Liều an toàn cao chiết từ sa sâm nam chọn tương đương 1,25 g 2,5 g dược liệu/kg thể trọng chuột Kết cho thấy ALS ELS liều tương ứng 0,6 g/kg, 1,2 g/kg 0,54 g/kg, 1,08 g/kg có tác dụng giảm đau cách làm giảm trung bình số lần xoắn bụng chuột Ngoài ra, ALS ELS liều tương ứng 0,6 g/kg, 1,2 g/kg 0,54 g/kg, 1,08 g/kg thể tác dụng hạ sốt thông qua giảm nhiệt độ trực tràng chuột tác dụng kháng viêm thông qua giảm thể tích chân chuột Nghiên cứu chứng minh tác dụng giảm đau, hạ sốt, kháng viêm cao chiết từ sa sâm nam mơ hình chuột bị đau, sốt, viêm Từ khóa: sa sâm nam, tác dụng giảm đau, tác dụng hạ sốt, tác dụng kháng viêm II Final assay for the Master of Pharmacology – Course: 2019 – 2021 Specialization: Pharmacology and Clinical Pharmacy – Code: 8720205 ANALGESIC, ANTI-PYRETIC AND ANTI-INFLAMMATORY EFFECTS OF THE EXTRACTS FROM LAUNAEA SARMENTOSA LEAVES Student: Dao Tran Mong Supervisor: Assoc Prof PhD Nguyen Thi Thu Huong Launaea sarmentosa (Willd.) Sch - Bip Ex Kuntze has been traditionally used as a folk herbal remedy for many diseases such as jaundice, diuretic, blood purifier, and hepatoprotective action The study investigated the presence and determined the content of polyphenol of the material and the aqueous and 45 % ethanol extract from L sarmentosa leaves In addition, the study also investigated the effects of the aqueous and 45 % ethanol extract from L sarmentosa leaves (ALS and ELS) in acetic acid-induced writhing test, Brewer’s yeast-induced pyrexia test, and carrageenan-induced hind paw edema test The result of thin-layer chromatography and quantitative determination showed that the leaves of L sarmentosa, ALS, and ELS contained polyphenol (Rf 0.36 and 0.14) and amount of polyphenol compounds 14.6, 47.88, 64.20 mg GAEs/g extract respectively The oral doses of L sarmentosa leaf extracts were chosen in equivalent to 1.25 g and 2.5 g of raw materials/kg mouse body weight The results showed that ALS and ELS at respective doses of 0.6 g/kg, 1.2 g/kg, and 0.54 g/kg, 1.08 g/kg had an analgesic effect by reducing the number of writhing In addition, ALS and ELS at respective doses of 0.6 g/kg, 1.2 g/kg, and 0.54 g/kg, 1.08 g/kg also expressed antipyretic effect by reducing the rectal temperature and anti-inflammatory effect by reducing the inflamed hind paw volume The study demonstrated the analgesic, antipyretic and anti-inflammatory effects of aqueous and ethanol extracts from L sarmentosa leaves on mouse models of pain, fever, and inflammation Keywords: Launaea sarmentosa Leaves, Analgesic effect, Antipyretic effect, Anti-inflammatory effect III MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i MỤC LỤC iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG ix DANH MỤC CÁC HÌNH, SƠ ĐỒ xi MỞ ĐẦU Mục tiêu nghiên cứu Chương 1.1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU Tổng quan sa sâm nam 1.1.1 Phân loại thực vật 1.1.2 Đặc điểm hình thái, cơng dụng 1.1.3 Thành phần hóa học 1.1.4 Tình hình nghiên cứu 1.1.5 Một số sản phẩm thị trường 1.2 Đau, sốt, viêm số mơ hình thực nghiệm 1.2.1 Đau 1.2.2 Sốt 12 1.2.3 Viêm 17 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Nguyên liệu 27 2.2 Động vật thử nghiệm 27 2.3 Thiết bị, dụng cụ - hóa chất 27 2.3.1 Thiết bị, dụng cụ 27 2.3.2 Hóa chất 28 2.4 Phương pháp nghiên cứu 29 2.4.1 Chiết xuất dược liệu 29 2.4.2 Thử tinh khiết 30 2.4.3 Định tính hợp chất polyphenol 31 IV 2.4.4 Định lượng polyphenol tổng phương pháp UV-Vis 31 2.4.5 Xác định liều an toàn cho thử nghiệm 32 2.4.6 Khảo sát tác dụng giảm đau thực nghiệm gây xoắn bụng acid acetic (Acetic acid-induced writhing test) 33 2.4.7 Khảo sát tác dụng hạ sốt thực nghiệm gây sốt nấm men (Brewer’s Yeast) 34 2.4.8 Khảo sát tác dụng kháng viêm 34 2.4.9 Khảo sát tác động ức chế myeloperoxidase cao chiết tiềm 36 2.4.10.Phương pháp đánh giá kết 36 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 37 3.1 Chiết xuất cao 37 3.2 Thử tinh khiết 37 3.2.1 Mất khối lượng làm khô 37 3.2.2 Độ tro 37 3.3 Định tính hợp chất polyphenol 38 3.3.1 Định tính phản ứng màu 38 3.3.2 Định tính sắc ký lớp mỏng 39 3.4 Định lượng polyphenol tổng phương pháp UV – Vis 40 3.4.1 Kết xây dựng đường chuẩn 40 3.4.2 Kết định lượng polyphenol tổng bột dược liệu cao chiết sa sâm nam 41 3.5 Liều an toàn cho thử nghiệm 42 3.6 Tác dụng giảm đau thực nghiệm xoắn bụng gây acid acetic 43 3.6.1 Liều 43 3.6.2 Liều lặp lại ngày 45 3.6.3 So sánh tác dụng giảm đau thực nghiệm xoắn bụng gây acid acetic liều lặp lại ngày uống cao chiết sa sâm nam 47 3.7 Tác dụng hạ sốt thực nghiệm gây sốt nấm men 47 3.8 Tác dụng kháng viêm 49 V 3.8.1 Tác dụng kháng viêm in vitro phương pháp ổn định màng tế bào 49 3.8.2 Tác dụng kháng viêm cấp thực nghiệm carrageenan 51 3.9 Chọn cao chiết tiềm 53 3.10 Tác động ức chế myeloperoxidase cao chiết tiềm 54 3.10.1.Khảo sát tác động ức chế myeloperoxidase thời điểm 54 3.10.2.Tác động cao chiết nước sa sâm nam hoạt tính myeloperoxidase 54 Chương BÀN LUẬN 56 4.1 Thử tinh khiết, định tính, định lượng hợp chất polyphenol 56 4.2 Tác dụng giảm đau 58 4.3 Tác dụng hạ sốt 61 4.4 Tác dụng kháng viêm 62 4.5 Tác dụng ức chế hoạt tính myeloperoxidase 66 4.6 Bàn luận chung 66 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 68 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ CỦA TÁC GIẢ 69 TÀI LIỆU THAM KHẢO 70 PHỤ LỤC i VI DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Tên Tiếng Anh Tên Tiếng Việt 5-HT 5-hydroxytryptamine 5-hydroxytryptamin 5-LOX 5-lipoxygenase 5-lipoxygenase CAM Cellular adhesion molecule Phân tử kết dính tế bào CD31 Cluster of differentiation-31 Cụm biệt hóa 31 COX Cyclooxygenase Cyclooxygenase ED50 Effective Dose 50 Liều hữu hiệu trung bình GOT GPT HTAB IASP Glutamic-oxaloacetic Enzym GOT Transaminase Glutamic-pyruvic Transaminase Enzym GPT Hexadecyltrimethylammonium Hexadecyltrimethylammonium bromide bromid The International Association for Hiệp hội nghiên cứu đau Quốc the Study of Pain tế ICAM-1 Intercellular adhesion molecule-1 Phân tử kết dính liên bào -1 IL-1 Interleukine-1 Interleukin – IL-6R Membrane-bound receptor Thụ thể gắn với màng iNOS Inducible nitric oxide synthase Enzym NO cảm ứng LD Lethal dose Liều gây chết LT Leukotriene Leukotrien MAPK7 Mitogen-activated protein kinase MCP-1 MPO NSAIDs Protein hoạt hóa kinase chemoattractant Protein hóa ứng động bạch cầu Monocyte protein-1 đơn nhân Myeloperoxidase Myeloperoxidase Non-steroidal anti-inflammatory Thuốc drug steroid VII mitogen chống viêm không OVLT PAF PAMP Organum laminae Cơ quan chứa đựng mạch máu vasculosum terminalis phiến tận Platelet-activating factor Yếu tố hoạt hóa tiểu cầu Pathogen-associated molecular Kiểu phân tử liên quan đến tác pattern nhân gây bệnh PBS Phosphate buffered saline Đệm phosphat PG Prostaglandin Prostaglandin PMN Polymorphonuclear neutrophils Bạch cầu đa nhân trung tính RBC Red Blood Cells Tế bào hồng cầu sIL-6R SOCS STAT Soluble isoforms of the interleukin Các isoform tan thụ thể receptor interleukin Suppressor of cytokine signaling Chất ức chế tín hiệu cytokin Signal transducer and activator of Chất chuyển tín hiệu kích transcription hoạt phiên mã TI Therapeutic index Chỉ số điều trị TLR-4 Toll-like receptor Thụ thể Toll-like TMB 3,3′,5,5′-Tetramethylbenzidine 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidin TNF-α Tumor necrosis factor α Yếu tố hoại tử khối u α VCAM-1 Vascular cell adhesion molecule-1 Phân tử kết dính tế bào mạch -1 WHO World Health Organization Tổ chức Y tế Thế giới VIII Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 Samina Yesmin, et al (2020), "Membrane stabilization as a mechanism of the anti-inflammatory activity of ethanolic root extract of Choi (Piper chaba)", Clinical Phytoscience 6(59), pp 1-10 Samriti F., et al (2016), "Comparative analysis of analgesic and anti inflammatory activity of bark and leaves of Acacia ferruginea DC", Journal of Basic and Applied Sciences 5, pp 70-78 Sangeeta Sankhalkar, Vrunda Vernekar (2016), "Quantitative and Qualitative Analysis of Phenolic and Flavonoid Content in Moringa oleifera Lam and Ocimum tenuiflorum L.", Pharmacognosy Research 8(1), pp 1621 Sarveswaran R., Jayasuriya W J A B., Suresh T.S (2017), "In Vitro Assays To Investigate The Anti-Inflammatory Activity Of Herbal Extracts A Review", World Journal of Pharmaceutical Research 6, pp 133-134 Shalahuddin Millat, et al (2016), "Screening of in-vitro Thrombolytic and Membrane stabilizing activities of methanolic extract of Launaea sarmentosa", World Journal of Pharmaceutical Sciences 4(10), pp 97-101 Shalahuddin Millat, et al (2017), "Antibacterial profiling of Launaea sarmentosa (Willd.) and Bruguiera cylindrica (L.): Two distinct Ethno medicinal plants of Bangladesh", European Journal of Experimental Biology 7(6) Shehu A., Olurishe T O., Zezi A U (2016), "Saponin and flavonoid-rich fractions of Laggera aurita Linn F produce cental analgesia in murine models of pain", Nigerian Journal of Pharmaceutical Sciences 15(1), pp 60-69 Sindani Akumu Veronica, et al (2017), "Antiinflammatory, analgesic and antipyretic effects of dichloromethane stem bark extract of Acacia mellifera", The Journal of Phytopharmacology 6(4), pp 239-246 Tesfaye Yimer, et al (2020), "Evaluation of Analgesic and AntiInflammatory Activities of 80% Methanol Root Extract of Echinops kebericho M (Asteraceae)", Journal of Inflammation Research 2020(13), pp 647–658 Thanh Q C Nguyen, et al (2020), "Effects of Launaea sarmentosa Extract on Lipopolysaccharide-Induced Inflammation via Suppression of NFκB/MAPK signaling and Nrf2 Activation", Nutrients 12, pp 1-16 Wahid A M., et al (2010), "Evaluation of antiinflammatory and analgesic activities of ethanolic extract of roots Adhatoda vasica Linn", International Journal of PharmTech Research 2(2), pp 1364-1368 Yousef A Taher, et al (2015), "Experimental evaluation of antiinflammatory, antinociceptive and antipyretic activities of clove oil inmice", The Libyan Journal of Medicine 10(1) Tài liệu internet https://sasamviet.vn/collections/all, 10/09/2021 74 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh PHỤ LỤC Phụ lục Thực nghiệm xoắn bụng gây acetic acid liều Lô chứng uống nước cất STT AVR SEM Số lần xoắn bụng - 10 phút 10 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 20 10 33 11.00 22 13 15 50 16.67 21 15 43 14.33 19 32 10.67 20 10 36 12.00 20 15 39 13.00 17 11 30 10.00 23 10 38 12.67 20.25 10.50 6.88 37.63 12.54 0.65 1.44 1.42 2.31 0.77 Lô đối chiếu uống diclofenac liều 15 mg/kg STT - 10 phút AVR SEM 1 1.75 0.453163484 Số lần xoắn bụng 10 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng 0 1 0 0.25 1.13 0.25 0.35 3 2 3.13 0.40 Trung bình 1.33 1.00 1.00 0.67 0.67 1.33 0.67 1.67 1.04 0.13 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 0,6 g/kg STT AVR SEM Số lần xoắn bụng - 10 phút 10 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 14 17 5.67 10 18 6.00 14 12 26 8.67 13 4.33 21 24 8.00 15 5.00 13 18 6.00 13 11 25 8.33 12.75 4.38 2.38 19.50 6.50 1.44 1.68 0.94 1.72 0.57 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 1,2 g/kg STT AVR SEM Số lần xoắn bụng - 10 phút 10 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 10 16 5.33 12 18 6.00 1 2.33 12 4.00 3.00 5 10 3.33 15 5.00 17 5.67 7.63 4.00 1.38 13.00 4.33 0.86 0.89 0.50 1.44 0.48 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 0,54 g/kg STT - 10 phút AVR SEM 10 10 6.38 1.15 Số lần xoắn bụng 10 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 11 3.67 19 6.33 2.67 14 4.67 11 3.67 2.33 15 5.00 16 5.33 5.25 1.00 12.63 4.21 0.65 0.50 1.45 0.48 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 1,08 g/kg STT - 10 phút AVR SEM 15 17 10 11 11 10 11.00 1.24 Số lần xoắn bụng 10 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 21 7.00 26 8.67 16 5.33 20 6.67 15 5.00 12 23 7.67 12 4.00 25 8.33 7.00 1.75 19.75 6.58 1.07 0.84 1.77 0.59 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Thực nghiệm xoắn bụng gây acetic acid lặp lại ngày uống Lô chứng uống nước cất STT AVR SEM - 10 phút 19 15 25 25 20 20 17.25 2.54 Số lần xoắn bụng 11 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 10 38 12.67 14 37 12.33 35 11.67 17 50 16.67 10 36 12.00 15 39 13.00 20 35 11.67 18 13 36 12.00 14.13 6.88 38.25 12.75 1.46 1.26 1.75 0.58 Lô đối chiếu uống diclofenac liều 15 mg/kg STT - 10 phút AVR SEM 1 1.75 0.45 Số lần xoắn bụng 11 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng 0 1 0 0.25 1.13 0.25 0.35 3 2 3.13 0.40 Trung bình 1.33 1.00 1.00 0.67 0.67 1.33 0.67 1.67 1.04 0.13 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 0,6 g/kg STT AVR SEM - 10 phút 10 3 15 16 7.25 2.05 Số lần xoắn bụng 11 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 17 5.67 3.00 15 5.00 11 17 5.67 12 4.00 19 6.33 0 16 5.33 3.00 4.75 2.25 14.25 4.75 1.32 0.56 1.35 0.45 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 1,2 g/kg STT - 10 phút AVR SEM 5 5.50 0.78 Số lần xoắn bụng 11 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng 1 3 1 2.00 1.50 0.53 0.38 10 10 12 12 9.00 0.87 Trung bình 2.00 3.33 2.00 3.33 4.00 3.00 2.33 4.00 3.00 0.29 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 0,54 g/kg STT - 10 phút AVR SEM 12 11 10 6.75 1.53 Số lần xoắn bụng 11 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 16 5.33 11 17 5.67 12 4.00 3.00 12 4.00 17 5.67 15 5.00 4 10 3.33 4.75 2.00 13.50 4.50 1.03 0.87 1.12 0.37 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 1,08 g/kg STT - 10 phút AVR SEM 8 9 6.88 0.74 Số lần xoắn bụng 11 - 20 phút 21 - 30 phút Tổng Trung bình 3.00 2.00 13 4.33 14 4.67 12 4.00 10 3.33 10 3.33 13 4.33 1.88 2.13 10.88 3.63 0.61 0.88 0.93 0.31 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Thực nghiệm gây sốt nấm men Lô chứng STT AVR SEM m (g) 22 21 19 23 20 20 20 22 20.9 0.5 To 37.1 36.6 37.1 36.9 37.7 37.1 36.3 36.4 36.9 0.2 37.1 36.3 37.2 36.7 37.5 37.1 36.2 36.5 36.8 0.2 T16 37.6 37.3 37.9 37.4 38.2 38.4 37.1 37.1 37.6 0.2 37.7 37.4 37.9 37.6 38.3 38.2 37.8 37.2 37.8 0.1 T17 37.8 37.5 37.6 37.4 37.9 38.6 37.1 37.3 37.7 0.2 37.7 37.6 37.6 37.4 38.2 38.7 36.9 37.0 37.6 0.2 T19 37.6 37.6 36.8 37.0 37.4 37.4 37.7 37.9 37.9 38.0 38.3 38.3 37.1 37.2 36.7 37.0 37.4 37.6 0.2 0.2 AT0s AT16 37.1 37.7 36.5 37.4 37.2 37.9 36.8 37.5 37.6 38.3 37.1 38.3 36.3 37.5 36.5 37.2 36.86 37.69 0.16 0.15 AT17 AT19 37.8 37.6 37.6 36.9 37.6 37.4 37.4 37.8 38.1 38.0 38.7 38.3 37.0 37.2 37.2 36.9 37.64 37.49 0.19 0.18 AT0s AT16 37.2 37.8 36.9 37.8 37.5 38.1 36.9 37.7 37.2 37.7 37.2 38.1 36.6 38.2 36.7 37.5 36.99 37.84 0.10 0.09 AT17 AT19 36.8 37.0 36.7 36.8 37.1 36.7 36.9 37.0 37.2 37.0 36.9 36.9 37.0 36.8 37.3 37.0 36.95 36.88 0.08 0.04 AT0s AT16 35.7 37.4 37.3 38.0 36.9 37.8 37.1 38.0 36.8 37.6 37.0 37.6 36.5 37.1 37.0 37.9 36.75 37.64 0.17 0.11 AT17 AT19 36.4 36.7 37.2 37.1 37.0 36.8 37.6 36.6 37.3 36.7 37.6 37.2 37.5 37.7 37.6 37.3 37.24 37.00 0.15 0.13 AT0s AT16 35.7 36.4 35.3 36.0 36.1 36.9 37.0 38.1 36.5 38.3 36.4 38.1 37.0 38.3 37.0 38.4 36.35 37.54 0.23 0.35 AT17 AT19 35.8 35.5 35.9 35.1 36.9 36.7 37.4 37.4 37.5 37.4 36.8 36.8 37.2 36.7 37.8 37.5 36.90 36.63 0.26 0.31 Lô đối chiếu uống paracetamol liều 100 mg/kg STT AVR SEM m (g) 21 25 24 29 20 21 20 20 22.5 1.1 To 37.1 36.8 37.6 36.8 37.1 37.3 36.6 36.6 37.0 0.1 37.3 36.9 37.3 36.9 37.2 37.0 36.6 36.8 37.0 0.1 T16 37.7 37.9 37.8 37.7 38.1 38.1 37.6 37.7 37.8 37.6 38.0 38.2 38.1 38.2 37.3 37.6 37.8 37.9 0.1 0.1 T17 36.6 36.9 36.7 36.6 37.1 37.0 36.8 36.9 37.3 37.1 36.9 36.8 37.0 36.9 37.2 37.4 37.0 37.0 0.1 0.1 T19 36.9 37.1 36.7 36.8 36.6 36.8 37.1 36.9 37.1 36.8 37.0 36.8 36.8 36.8 36.9 37.0 36.9 36.9 0.1 0.0 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 0,6 g/kg STT AVR SEM m (g) 20 19 33 24 19 20 22 20 22.1 1.7 To 35.6 37.3 36.8 36.9 36.8 37 36.4 37.1 36.7 0.2 35.8 37.2 36.9 37.2 36.7 36.9 36.5 36.9 36.8 0.2 T16 37.2 37.9 37.8 37.8 37.5 37.7 37.1 37.9 37.6 0.1 37.5 38.0 37.8 38.1 37.6 37.5 37.0 37.8 37.7 0.1 T17 36.5 37.1 36.8 37.5 37.2 37.5 37.5 37.5 37.2 0.1 36.3 37.2 37.1 37.7 37.3 37.6 37.5 37.6 37.3 0.2 T19 36.6 36.8 37.0 37.2 36.9 36.6 36.5 36.7 36.6 36.8 37.2 37.2 37.6 37.7 37.3 37.3 37.0 37.0 0.1 0.1 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 1,2 g/kg STT AVR SEM m (g) 20 22 20 21 24 23 22 22 21.8 0.5 To 35.6 35.2 35.9 36.8 36.5 36.4 36.9 37.1 36.3 0.2 35.7 35.3 36.2 37.1 36.5 36.4 37.1 36.9 36.4 0.2 T16 36.3 36.4 35.9 36.0 36.9 36.9 38.0 38.2 38.1 38.4 38.0 38.1 38.2 38.4 38.5 38.3 37.5 37.6 0.3 0.4 T17 35.7 35.9 35.8 35.9 36.9 36.9 37.4 37.3 37.5 37.5 36.9 36.7 37.2 37.2 37.6 38.0 36.9 36.9 0.3 0.3 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn T19 35.6 35.4 35.1 35.1 36.6 36.8 37.3 37.5 37.4 37.4 36.8 36.8 36.6 36.8 37.3 37.6 36.6 36.7 0.3 0.3 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Lơ thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 0,54 g/kg STT AVR SEM m (g) 21 20 21 23 21 23 23 23 21.9 0.4 To 36 36.8 35.5 36.4 35.3 36.7 37.4 37.2 36.4 0.3 36.2 36.8 35.6 36.1 35.3 36.8 37.3 36.9 36.4 0.2 T16 36.9 38.1 37.3 37.7 37.7 37.7 37.9 37.8 37.6 0.1 36.7 38.3 37.4 37.8 37.6 37.8 37.9 37.8 37.7 0.2 T17 36.0 37.2 35.9 36.1 37.9 36.6 37.9 37.4 36.9 0.3 36.2 37.4 35.9 36.3 37.7 36.7 37.6 37.4 36.9 0.3 T19 36.3 36.5 37.1 37.3 35.9 35.9 36.7 36.7 37.7 37.8 35.8 35.9 37.2 37.4 36.9 37.1 36.7 36.8 0.2 0.2 AT0s AT16 36.1 36.8 36.8 38.2 35.6 37.4 36.3 37.8 35.3 37.7 36.8 37.8 37.4 37.9 37.1 37.8 36.39 37.65 0.26 0.15 AT17 AT19 36.1 36.4 37.3 37.2 35.9 35.9 36.2 36.7 37.8 37.8 36.7 35.9 37.8 37.3 37.4 37.0 36.89 36.76 0.27 0.24 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 1,08 g/kg STT AVR SEM m (g) 20 20 20 22 24 25 20 22 21.6 0.7 To 35.6 37.3 36.5 36.8 36.6 36.4 37.5 37.2 36.7 0.2 35.8 37.2 36.7 36.8 36.4 36.0 37.4 37.0 36.7 0.2 T16 37.2 37.9 37.5 37.9 38.1 37.3 38.1 37.7 37.7 0.1 37.5 37.8 37.5 37.9 38.0 37.0 38.0 37.7 37.7 0.1 T17 36.5 37.6 36.9 37.2 37.7 36.1 36.8 37.3 37.0 0.2 36.3 37.3 36.7 37.3 37.9 35.9 36.9 37.4 37.0 0.2 T19 36.6 36.7 37.0 37.2 36.4 36.4 37.0 37.2 37.3 37.5 36.2 36.1 36.7 36.7 37.3 37.5 36.8 36.9 0.1 0.2 AT0s AT16 35.7 37.4 37.3 37.9 36.6 37.5 36.8 37.9 36.5 38.1 36.2 37.2 37.5 38.1 37.1 37.7 36.70 37.69 0.20 0.12 AT17 AT19 36.4 36.7 37.5 37.1 36.8 36.4 37.3 37.1 37.8 37.4 36.0 36.2 36.9 36.7 37.4 37.4 36.99 36.86 0.21 0.16 Phụ lục Thực nghiệm ổn định màng tế bào Mẫu thử nghiệm Nồng độ mẫu (mg/ml) Control Cao nước Sa sâm Cao cồn Sa sâm Aspirin 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.0 2.5 5.0 7.5 10.0 OD 540 nm OD tb 2.558 2.549 2.583 2.56 2.095 2.056 2.381 2.18 1.834 1.680 2.082 1.87 1.648 1.400 1.218 1.42 1.270 1.289 0.972 1.18 0.602 0.636 0.670 0.64 2.056 2.117 2.185 2.12 1.898 1.709 1.930 1.85 1.472 1.363 1.508 1.45 0.976 0.832 1.067 0.96 0.665 0.602 0.704 0.66 2.231 2.016 1.989 2.08 1.978 1.670 1.718 1.79 1.326 1.251 1.409 1.33 0.675 0.529 0.620 0.61 0.257 0.218 0.220 0.23 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn SEM 0.01 0.10 0.12 0.12 0.10 0.02 0.04 0.07 0.04 0.07 0.03 0.08 0.10 0.05 0.04 0.01 Phần trăm ức chế 15.06 27.23 44.53 54.08 75.19 17.32 28.00 43.52 62.61 74.37 18.91 30.22 48.17 76.28 90.96 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Thực nghiệm viêm cấp gây carrageenan Lô chứng uống nước cất STT Trước tiêm V chân phải L1 L2 TB 20.00 22.00 21.00 20.00 19.00 19.50 21.00 21.00 21.00 21.00 22.00 21.50 22.00 23.00 22.50 18.00 18.00 18.00 19.00 20.00 19.50 24.00 23.00 23.50 L1 33.00 32.00 40.00 32.00 36.00 31.00 31.00 41.00 SAU 6H V chân phải L2 TB 32.00 32.50 30.00 31.00 38.00 39.00 33.00 32.50 36.00 36.00 32.00 31.50 31.00 31.00 42.00 41.50 L1 30.00 32.00 31.00 29.00 36.00 27.00 34.00 42.00 SAU 48H V chân phải L2 TB 29.00 29.50 33.00 32.50 32.00 31.50 30.00 29.50 37.00 36.50 28.00 27.50 35.00 34.50 41.00 41.50 V (%) 54.76 58.97 85.71 51.16 60.00 75.00 58.97 76.60 V (%) 40.48 66.67 50.00 37.21 62.22 52.78 76.92 76.60 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn SAU 3H V chân phải L1 L2 TB 38.00 40.00 39.00 40.00 40.00 40.00 40.00 41.00 40.50 35.00 34.00 34.50 40.00 41.00 40.50 29.00 29.00 29.00 34.00 35.00 34.50 39.00 40.00 39.50 L1 33.00 32.00 39.00 31.00 36.00 29.00 35.00 40.00 SAU 24H V chân phải L2 TB 32.00 32.50 33.00 32.50 38.00 38.50 30.00 30.50 37.00 36.50 29.00 29.00 36.00 35.50 41.00 40.50 L1 29.00 26.00 31.00 31.00 32.00 27.00 32.00 40.00 SAU 72H V chân phải L2 TB 28.00 28.50 27.00 26.50 30.00 30.50 30.00 30.50 33.00 32.50 26.00 26.50 33.00 32.50 41.00 40.50 V (%) 85.71 105.13 92.86 60.47 80.00 61.11 76.92 68.09 V (%) 54.76 66.67 83.33 41.86 62.22 61.11 82.05 72.34 V (%) 35.71 35.90 45.24 41.86 44.44 47.22 66.67 72.34 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Lơ đối chiếu uống celecoxib liều 25 mg/kg STT L1 23.00 22.00 24.00 23.00 24.00 22.00 20.00 18.00 Trước tiêm V chân phải L2 TB 23.00 23.00 23.00 22.50 24.00 24.00 24.00 23.50 26.00 25.00 23.00 22.50 22.00 21.00 21.00 19.50 L1 31.00 30.00 30.00 26.00 33.00 32.00 26.00 26.00 SAU 6H V chân phải L2 TB 30.00 30.50 29.00 29.50 31.00 30.50 27.00 26.50 32.00 32.50 30.00 31.00 27.00 26.50 27.00 26.50 L1 26.00 28.00 27.00 26.00 28.00 25.00 24.00 25.00 SAU 48H V chân phải L2 TB 27.00 26.50 27.00 27.50 26.00 26.50 26.00 26.00 27.00 27.50 24.00 24.50 25.00 24.50 26.00 25.50 L1 33.00 32.00 33.00 28.00 36.00 33.00 28.00 28.00 SAU 3H V chân phải L2 TB 33.00 33.00 32.00 32.00 33.00 33.00 28.00 28.00 36.00 36.00 33.00 33.00 29.00 28.50 29.00 28.50 L1 26.00 28.00 30.00 26.00 33.00 26.00 27.00 26.00 SAU 24H V chân phải L2 TB 27.00 26.50 29.00 28.50 31.00 30.50 25.00 25.50 33.00 33.00 26.00 26.00 28.00 27.50 25.00 25.50 L1 25.00 27.00 26.00 24.00 28.00 25.00 23.00 24.00 SAU 72H V chân phải L2 TB 24.00 24.50 26.00 26.50 25.00 25.50 25.00 24.50 27.00 27.50 24.00 24.50 24.00 23.50 25.00 24.50 V (%) 32.61 31.11 27.08 12.77 30.00 37.78 26.19 35.90 V (%) 15.22 22.22 10.42 10.64 10.00 8.89 16.67 30.77 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 0,6 g/kg Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn V (%) 43.48 42.22 37.50 19.15 44.00 46.67 35.71 46.15 V (%) 15.22 26.67 27.08 8.51 32.00 15.56 30.95 30.77 V (%) 6.52 17.78 6.25 4.26 10.00 8.89 11.90 25.64 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh STT L1 18.00 23.00 19.00 22.00 18.00 22.00 23.00 26.00 Trước tiêm V chân phải L2 TB 20.00 19.00 25.00 24.00 20.00 19.50 23.00 22.50 20.00 19.00 22.00 22.00 23.00 23.00 25.00 25.50 L1 27.00 28.00 26.00 30.00 24.00 25.00 32.00 32.00 SAU 6H V chân phải L2 TB 26.00 26.50 29.00 28.50 25.00 25.50 31.00 30.50 25.00 24.50 24.00 24.50 32.00 32.00 32.00 32.00 L1 27.00 25.00 26.00 27.00 26.00 25.00 26.00 27.00 SAU 48H V chân phải L2 TB 26.00 26.50 26.00 25.50 25.00 25.50 28.00 27.50 27.00 26.50 24.00 24.50 25.00 25.50 28.00 27.50 V (%) 39.47 18.75 30.77 35.56 28.95 11.36 39.13 25.49 V (%) 39.47 6.25 30.77 22.22 39.47 11.36 10.87 7.84 L1 31.00 32.00 32.00 33.00 24.00 32.00 35.00 35.00 SAU 3H V chân phải L2 TB 31.00 31.00 34.00 33.00 33.00 32.50 35.00 34.00 25.00 24.50 31.00 31.50 35.00 35.00 35.00 35.00 L1 26.00 26.00 26.00 29.00 24.00 25.00 31.00 31.00 L1 22.00 25.00 25.00 23.00 24.00 24.00 24.00 28.00 SAU 24H V chân phải L2 TB 25.00 25.50 27.00 26.50 27.00 26.50 28.00 28.50 25.00 24.50 26.00 25.50 32.00 31.50 32.00 31.50 SAU 72H V chân phải L2 TB 21.00 21.50 26.00 25.50 24.00 24.50 24.00 23.50 25.00 24.50 23.00 23.50 26.00 25.00 26.00 27.00 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 1,2 g/kg Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn V (%) 63.16 37.50 66.67 51.11 28.95 43.18 52.17 37.25 V (%) 34.21 10.42 35.90 26.67 28.95 15.91 36.96 23.53 V (%) 13.16 6.25 25.64 4.44 28.95 6.82 8.70 5.88 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh STT L1 23.00 22.00 25.00 20.00 23.00 24.00 23.00 19.00 L1 29.00 27.00 28.00 24.00 31.00 33.00 25.00 23.00 Trước tiêm V chân phải L2 TB 22.00 22.50 20.00 21.00 26.00 25.50 21.00 20.50 24.00 23.50 25.00 24.50 23.00 23.00 20.00 19.50 SAU 48H V chân phải L2 TB 30.00 29.50 26.00 26.50 26.00 27.00 23.00 23.50 32.00 31.50 34.00 33.50 24.00 24.50 22.00 22.50 V (%) 31.11 26.19 5.88 14.63 34.04 36.73 6.52 15.38 L1 32.00 36.00 40.00 33.00 35.00 40.00 31.00 31.00 L1 22.00 23.00 25.00 24.00 28.00 32.00 25.00 22.00 SAU 3H V chân phải L2 TB 34.00 33.00 34.00 35.00 39.00 39.50 33.00 33.00 36.00 35.50 40.00 40.00 32.00 31.50 32.00 31.50 SAU 72H V chân phải L2 TB 23.00 22.50 22.00 22.50 26.00 25.50 23.00 23.50 30.00 29.00 32.00 32.00 24.00 24.50 23.00 22.50 V (%) 46.67 66.67 54.90 60.98 51.06 63.27 36.96 61.54 V (%) 0.00 7.14 0.00 14.63 23.40 30.61 6.52 15.38 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 0,54 g/kg STT L1 17.00 18.00 18.00 19.00 22.00 22.00 16.00 19.00 Trước tiêm V chân phải L2 TB 18.00 17.50 18.00 18.00 18.00 18.00 20.00 19.50 20.00 21.00 24.00 23.00 17.00 16.50 20.00 19.50 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn L1 26.00 34.00 27.00 26.00 31.00 32.00 32.00 32.00 SAU 3H V chân phải L2 TB 26.00 26.00 33.00 33.50 27.00 27.00 27.00 26.50 29.00 30.00 32.00 32.00 33.00 32.50 33.00 32.50 V (%) 48.57 86.11 50.00 35.90 42.86 39.13 96.97 66.67 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh L1 26.00 27.00 26.00 27.00 26.00 26.00 26.00 27.00 SAU 6H V chân phải L2 TB 26.00 26.00 26.00 26.50 26.00 26.00 27.00 27.00 25.00 25.50 27.00 26.50 27.00 26.50 28.00 27.50 L1 26.00 26.00 25.00 23.00 25.00 27.00 26.00 24.00 SAU 48H V chân phải L2 TB 26.00 26.00 25.00 25.50 26.00 25.50 24.00 23.50 24.00 24.50 28.00 27.50 27.00 26.50 25.00 24.50 V (%) 48.57 47.22 44.44 38.46 21.43 15.22 60.61 41.03 V (%) 48.57 41.67 41.67 20.51 16.67 19.57 60.61 25.64 SAU 24H V chân phải L2 TB 27.00 26.50 24.00 24.50 24.00 23.50 27.00 26.50 24.00 24.50 32.00 31.50 26.00 25.50 26.00 25.50 L1 26.00 25.00 23.00 26.00 25.00 31.00 25.00 25.00 L1 25.00 27.00 23.00 24.00 24.00 27.00 24.00 24.00 SAU 72H V chân phải L2 TB 26.00 25.50 26.00 26.50 24.00 23.50 25.00 24.50 23.00 23.50 28.00 27.50 25.00 24.50 25.00 24.50 V (%) 51.43 36.11 30.56 35.90 16.67 36.96 54.55 30.77 V (%) 45.71 47.22 30.56 25.64 11.90 19.57 48.48 25.64 Lô thử uống cao chiết ethanol 45% Sa sâm nam liều 1,08 g/kg STT L1 22.00 22.00 22.00 18.00 19.00 20.00 20.00 20.00 Trước tiêm V chân phải L2 TB 23.00 22.50 23.00 22.50 22.00 22.00 18.00 18.00 18.00 18.50 19.00 19.50 21.00 20.50 21.00 20.50 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn L1 32.00 26.00 34.00 32.00 33.00 33.00 35.00 26.00 SAU 3H V chân phải L2 TB 33.00 32.50 26.00 26.00 33.00 33.50 32.00 32.00 32.00 32.50 32.00 32.50 36.00 35.50 27.00 26.50 V (%) 44.44 15.56 52.27 77.78 75.68 66.67 73.17 29.27 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh L1 32.00 29.00 32.00 25.00 26.00 25.00 24.00 24.00 SAU 48H V chân phải L2 TB 32.00 32.00 29.00 29.00 31.00 31.50 26.00 25.50 25.00 25.50 24.00 24.50 25.00 24.50 25.00 24.50 V (%) 42.22 28.89 43.18 41.67 37.84 25.64 19.51 19.51 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn L1 26.00 26.00 32.00 24.00 25.00 24.00 24.00 25.00 SAU 72H V chân phải L2 TB 27.00 26.50 25.00 25.50 31.00 31.50 25.00 24.50 24.00 24.50 23.00 23.50 25.00 24.50 25.00 25.00 V (%) 17.78 13.33 43.18 36.11 32.43 20.51 19.51 21.95 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Phụ lục Thực nghiệm xác định tác động ức chế MPO cao chiết tiềm Lô chứng STT m(g) 30 28 27 30 27 27 AVR SEM OD 450/min m tissue (g) 3.229 2.930 3.102 2.748 1.899 2.248 2.693 0.212 0.33 0.26 0.24 0.27 0.25 0.24 0.27 0.01 MPO act (OD/g wet tissue 9.836 11.196 13.061 10.107 7.453 9.347 10.17 0.77 Lô đối chiếu uống celecoxib liều 25 mg/kg STT m(g) 27 28 27 26 27 27 AVR SEM OD 450/min 1.760 1.084 1.696 2.271 1.925 1.721 1.743 0.158 m tissue (g) 0.32 0.27 0.23 0.31 0.27 0.29 0.28 0.01 MPO act (OD/g wet tissue 5.474 4.054 7.251 7.359 7.218 6.032 6.23 0.54 Lô thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 0,6 g/kg STT m(g) AVR SEM 32 25 29 26 25 26 27.167 1.138 OD 450/min 2.925 2.847 2.139 1.784 1.674 1.674 2.174 0.236 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn m tissue (g) 0.26 0.30 0.24 0.25 0.23 0.25 0.26 0.01 MPO act (OD/g wet tissue 11.32 9.41 8.89 7.00 7.26 6.70 8.43 0.73 Bản quyền tài liệu thuộc Thư viện Đại học Y Dược TP.Hồ Chí Minh Lơ thử uống cao chiết nước Sa sâm nam liều 1,2 g/kg STT m(g) AVR SEM 26 27 28 28 25 26 26.67 0.49 OD 450/min 2.806 2.276 2.517 2.069 2.152 1.446 2.211 0.188 Tuân thủ Luật sở hữu trí tuệ Quy định truy cập tài liệu điện tử Ghi rõ nguồn tài liệu trích dẫn m tissue (g) 0.28 0.22 0.27 0.26 0.25 0.24 0.26 0.01 MPO act (OD/g wet tissue 9.97 10.37 9.21 7.90 8.48 5.94 8.65 0.66