ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THẢO NHI Tên đề tài NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE VÀ HAEMOPHILUS INFLUENZAE GÂY BỆNH VIÊM PHỔI Ở TRẺ EM DƯỚI[.]
ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THẢO NHI Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE VÀ HAEMOPHILUS INFLUENZAE GÂY BỆNH VIÊM PHỔI Ở TRẺ EM DƯỚI TUỔI TẠI BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Ngành : Công nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2015 - 2019 THÁI NGUYÊN, NĂM 2019 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THẢO NHI Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE VÀ HAEMOPHILUS INFLUENZAE GÂY BỆNH VIÊM PHỔI Ở TRẺ EM DƯỚI TUỔI TẠI BỆNH VIỆN TRUNG ƯƠNG THÁI NGUYÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Ngành : Công nghệ Sinh học Lớp : K47 - CNSH Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2015 - 2019 Người hướng dẫn: BS CKI Nguyễn Thị Huyền TS Nguyễn Xuân Vũ THÁI NGUYÊN, NĂM 2019 i LỜI CẢM ƠN Qua trình học tập rèn luyện Trường Đại học Nông Lâm – Đại học Thái Nguyên, đồng ý Ban Giám hiệu, Ban Chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm em phân công đến thực tập Khoa Vi sinh - Bệnh viện TW Thái Nguyên với đề tài: “Nghiên cứu khả kháng kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae gây bệnh viêm phổi trẻ em tuổi bệnh viện Trung ương Thái Nguyên” Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới BS CKI Nguyễn Thị Huyền toàn thể anh, chị kỹ thuật viên làm việc Khoa Vi sinh - Bệnh viện Trung Ương Thái Nguyên ln tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện giúp đỡ em trình thực tập Em xin trân trọng gửi lời cảm ơn tới TS Nguyễn Xuân Vũ - Giảng viên Khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em suốt trình thực đề tài Đồng thời, em xin chân thành cảm ơn Thầy/Cô Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên dạy dỗ, truyền đạt kiến thức kinh nghiệm nghiên cứu khoa học suốt thời gian học tập Với điều kiện thời gian có hạn kinh nghiệm kiến thức hạn chế nên đề tài em không tránh khỏi thiếu sót Em mong nhận đươc bảo, đóng góp ý kiến q Thầy/Cơ để em có điều kiện bổ sung, nâng cao kiến thức phục vụ cho việc học tập, công việc sau Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng Sinh viên Lê Thảo Nhi năm 2019 ii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Phân loại kháng sinh theo cấu trúc hóa học [ ] Bảng 2.2 Kháng sinh thử nghiệm giới hạn vịng vơ khuẩn .14 Bảng 2.3 Các nghiên cứu gần bệnh viêm phổi trẻ em Việt Nam 16 Bảng 3.1 Môi trường nuôi cấy cho loại bệnh phẩm 20 Bảng 4.1.Tỉ lệ vi khuẩn phân lập từ bệnh nhân nhi Bệnh viện TW Thái Nguyên .26 Bảng 4.2 Tỉ lệ phân lập S pneumoniae H influenzae theo mẫu bệnh phẩm .27 Bảng 4.3 Tỷ lệ phân lập đc loại vi khuẩntheo nhóm tuổi Bệnh viện TW Thái Nguyên .27 Bảng 4.4 Tỷ lệ kháng kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae phân lập Bệnh viện TW Thái Nguyên 28 Bảng 4.5 Tỷ lệ kháng kháng sinh vi khuẩn Haemophilus influenzae phân lập Bệnh viện TW Thái Nguyên 30 iii DANH MỤC HÌNH Hình 4.1 Kháng sinh thử nghiệm chủng vi khuẩn Streptococcus pneumoniae 28 Hình 4.2 Kháng sinh thử nghiệm chủng vi khuẩn Haemophilus influenzae 30 iv DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT TW Trung Ương CNSH – CNTP Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm WHO World Health Organization (Tổ chức Y tế Thế giới) UNICEF Quỹ nhi đồng liên hơp quốc CLSI Clinnical and Laboratory standards Institude (Viện Tiêu chuẩn phịng thí nghiệm Lâm sàng) OP Optochin V Nicotinamide Adenine Dinucleotide VP Voges-Proskauer X Haemin MHA Mueller – Hinton S Suceptible (Nhạy cảm) R Resistant (Đề kháng) I Intermediate (Trung gian) HI Hemophilus influenza VPCĐ Viêm phổi cộng đồng v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC BẢNG ii DANH MỤC HÌNH iii DANH MỤC CÁC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT iv MỤC LỤC v Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu, yêu cầu đề tài 1.2.1.Mục tiêu đề tài 1.2.2.Yêu cầu đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1.Ý nghĩa khoa học đề tài 1.3.2.Ý nghĩa thực tiễn đề tài Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan bệnh viêm phổi 2.1.1 Khái niệm bệnh viêm phổi cộng đồng 2.2.2 Đặc điểm sinh lí vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae tác nhân gây bệnh viêm phổi 2.2.3.Thuốc kháng sinh chế tác dụng 2.2.4 Sự kháng kháng sinh vi khuẩn 2.2.5 Sử dụng thuốc kháng sinh cho trẻ em 10 2.6 Kỹ thuật khoanh giấy kháng sinh khuếch tán (kháng sinh đồ) Kirby- Bauer 12 2.6.1 Nguyên lý kỹ thuật kháng sinh đồ khoanh giấy khuếch tán 12 2.6.2 Trang thiết bị, sinh phẩm 12 2.6.3 Môi trường 13 2.6.4 Khoanh kháng sinh 13 2.7 Phương pháp kháng sinh đồ tự động máy Vitek Compact 14 vi 2.7.1 Giới thiệu chung máy Vitek Compact 14 2.7.2 Phương pháp kháng sinh đồ tự động máy Vitek Compact 15 2.8 Tình hình nghiên cứu nước giới .16 2.8.2 Tình hình nghiên cứu giới 17 Phần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .18 3.1 Đối tượng, phạm vi vật liệu nghiên cứu 18 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 18 3.1.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 18 3.1.3 Dụng cụ, thiết bị hóa chất 18 3.2 Nội dung nghiên cứu 18 3.3 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 18 3.4 Xử lý số liệu .19 3.5 Phương pháp thí nghiệm 19 3.5.1 Phương pháp thu mẫu bệnh phẩm 19 3.5.2 Phương pháp phân lập 19 3.5.3 Các kĩ thật nghiên cứu 20 3.5.4 Các phương pháp định danh vi khuẩn 21 3.5 Phương pháp khoanh giấy kháng sinh khuếch tán Kibry-Barer 23 3.6 Kháng sinh đồ hệ thống tự động máy Vitek Compact 24 Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .26 4.1 Kết phân lập định danh chủng vi khuẩn gây bện bệnh nhân nhi Bệnh viện Trung Ương Thái Nguyên 26 4.2 Tỷ lệ kháng kháng sinh vi khuẩn gây bệnh viêm phổi bệnh viện phân lập Bệnh viện TW Thái Nguyên .28 4.2.1 Tỷ lệ kháng kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae phân lập Bệnh viện TW Thái Nguyên 28 4.2.2 Tỷ lệ kháng kháng sinh vi khuẩn Haemophilus influenza phân lập Bệnh viện TW Thái Nguyên 30 vii Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 32 5.1 Bàn luận .32 5.2 Kết luận Error! Bookmark not defined 5.2 Kiến nghị 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 PHỤ LỤC PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Viêm phổi dạng nghiêm trọng nhiễm trùng đường hô hấp cấp tính đặc biệt ảnh hưởng đến phổi, gây tổn thương nhu mô phổi dẫn đến suy hô hấp rối loạn trao đổi khí [29 ] cịn bệnh lý có tỷ lệ tử vong đứng đầu số 10 bệnh lý nhiễm khuẩn hầu giới có Việt Nam [ 1] Theo tổ chức y tế giới UNICEF, năm 2015, khoảng 16% trẻ tử vong tuổi viêm phổi., ước tính năm giới có khoảng 155 triệu trẻ em tuổi chẩn đốn viêm phổi, 151 triệu trường hợp thuộc nước phát triển [39] Ở Việt Nam theo thống kê sở y tế viêm phổi nguyên nhân hàng đầu mà trẻ em đến khám điều trị bệnh viện nguyên nhân tử vong hàng đầu trẻ em.Theo số liệu báo cáo năm 2004 UNICEF WHO nước ta có khoảng 7,9 triệu trẻ < tuổi với tỷ lệ tử vong chung 23‰ năm có khoảng 38.000 trẻ tử vong viêm phổi chiếm 12% trường hợp Như năm có khoảng 4500 trẻ < tuổi tử vong viêm phổi [5] Việt Nam nằm 15 nước có trẻ em viêm phổi nhiều với triệu trường hợp năm[ 29] Viên phổi trẻ em virus, vi khuẩn vi sinh vật khác Theo WHO tác nhân thường gặp Streptococcus pneumoniae (phế cầu) tiếp đến Haemophilus influenzae (HI) sau loại vi khuẩn khác (Branhamella catarrhalis, Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogens Respiratoy Synticyal (RSV) [29] Streptococcus pneumoniae (phế cầu) Haemophilus influenzae (HI) nguyên nhân hàng đầu gây viêm phổi cộng đồng trẻ em tuổi[6] Kháng sinh giúp điều trị bệnh góp phần hạ thấp tỷ lệ tử vong Tuy nhiên, điều trị viêm phổi có xu hướng sử dụng rộng rãi phối hợp kháng sinh thường xuyên cách không cần thiết.Việc chọn lựa kháng sinh hợp lý yếu tố quan trọng, định kinh phí thành cơng trình điều trị Do vậy, việc hiểu biết đặc điểm tình hình kháng kháng sinh vi khuẩn gây bệnh viêm phổi quan trọng nhằm bảo đảm điều trị kháng sinh trúng đích cải thiện tử vong bệnh nhân Xuất phát từ thực tiễn đó, chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu khả kháng kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumonia Haemophilus influenzae gây bệnh viêm phổi trẻ em tuổi Bệnh viện Trung Ương Thái Nguyên” 1.2 Mục tiêu, yêu cầu đề tài 1.2.1.Mục tiêu đề tài - Nghiên cứu nhằm khảo sát khả đề kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae gây bệnh viêm phổi trẻ em tuổi Bệnh viện Trung Ương Thái Nguyên 1.2.2 Yêu cầu đề tài - Thu mẫu bệnh phẩm trẻ em tuổi chẩn đoán mắc bệnh viêm phổi Bệnh viện viện Trung Ương Thái Nguyên - Xác định vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae phân lập từ mẫu bệnh phẩm - Khảo sát tình hình kháng kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae 1.3 Ý nghĩa đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học đề tài - Kết đề tài tài liệu tham khảo, cho nghiên cứu vi khuẩn gây bệnh viêm phổi trẻ em tuổi khả kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn đề tài Kết đề tài góp phần vào q trình điều trị bệnh viêm phổi vi khuẩn gây ra, cung cấp thơng tin cần thiết góp phần hỗ trợ bác sĩ lựa chọn kháng sinh phù hợp để điều trị đạt hiệu tối ưu cho bệnh viêm phổi trẻ em tuổi 3 Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan bệnh viêm phổi 2.1.1 Khái niệm bệnh viêm phổi cộng đồng Viêm phổi cộng đồng (VPCĐ) viêm nhu mô phổi, biểu lâm sàng nhiễm khuẩn hô hấp (NKHH) NKHH xem nhiễm khuẩn đường hô hấp xảy mốc hai dây âm NKHH hội chứng bao gồm viêm phế quản, viêm phổi phối hợp ba bệnh này, khó phân biệt lâm sàng [ ] 2.2.2 Đặc điểm sinh lí vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenza tác nhân gây bệnh viêm phổi 2.2.2.1.Vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Thuật ngữ Diplococcus pneumoniae sử dụng năm 1926 đặc tính vi khuẩn xuất nhuộm Gram mẫu bệnh phẩm đờm bệnh nhân (cầu khuẩn nối đôi) Năm 1928, nghiên cứu vi khuẩn Pneumococcus gây bệnh viêm phổi chuột giúp nhà sinh học đến kết luận vật liệu chứa thông tin di truyền DNA Sau vào năm 1974, qua ni cấy phân lập môi trường nhân tạo, nhà khoa học phát vi khuẩn mọc thành chuỗi môi trường lỏng đổi tên thành Streptococcus pneumoniae (liên cầu gây viêm phổi hay phế cầu) Đặc điểm sinh học Hình thể tính chất bắt màu: -Phế cầu vi khuẩn hình nến, thường đứng thành thành đơi, hai đầu trịn quay vào nhau, đứng riêng lẻ mơi trường ni cấy xếp thành chuỗi ngắn (dễ nhầm với liên cầu) Bắt mầu Gram dương - Phế cầu không di động, khơng sinh nha bào, có vỏ thể người Tính chất ni cấy: - Phế cầu khó ni mơi trường dinh dương thơng thường, mọc tốt mơi trường có máu, huyết khí trường 5-10% 𝐶𝑂2 - Trên môi trường lỏng, phế cầu phát triển chậm, nuôi cấy môi trường lỏng có mật sau 48h phế cầu khuẩn bị tan rã - Trên môi trường đặc (môi trường thạch máu) cở điều kiện 37℃/24h Phế cầu khuẩn phát triển thành khuẩn lạc dạng S, nhỏ trong, bóng, trịn có đinh nhọn, xung quanh có vịng tan máu alpha - Môi trường thạch máu Gentamycin môi trường chọn lọc Phế cầu khuẩn Tính chất sinh vật học: - Phế cầu bị ly giải mật muối mật, khơng mọc mơi trường có ethylhydrocuprein (test optochin dương tính) Men catalase âm tính Cấu trúc kháng nguyên: - Kháng nguyên thân: loại protein đặc hiệu polysaccharide chung cho loại phế cầu - Kháng nguyên vỏ: loại polysaccharide mang tính đặc hiệu type Tiêu chuẩn chẩn đoán: + Song cầu phải hình nến, Gram (+) + Khuẩn lạc có đỉnh môi trường thạch máu Gentamycin, tan máu + Thử nghiệm Optochin dương tính + Bị ly giải muối mật(thử nghiệm Neufeld dương tính) 2.2.2.2 Vi khuẩn Haemophilus influenza Haemophilus influenzae Richard Pleiffer phân lập lần từ bệnh nhân bị chết vụ dịch cúm lớn năm 1982 (nên gọi trực khuẩn Pleiffer) người ta tin ngun gây bệnh cúm (influenzae) đặt tên bacterium influenzae Mãi đến năm 1933 phát virus cúm (second invader) Đặc điểm sinh học Hình thể kích thước: H influenzae trực khuẩn Gram âm,đa hình thái, xếp thành chuỗi,vi khuẩn khơng sinh nha bào, có vỏ vỏ trình ni cấy vi khuẩn tự ly giải Tính chất ni cấy: H influenzae vi khuẩn hiếu khí tùy tiện, khó ni cấy mơi trường dinh dưỡng thông thường hai yếu tố cần thiết cho phát triển vi khuẩn môi trường nhân tạo là: Yếu tố X (Heamin): Bền vững với nhiệt độ, chất heamin máu yếu tố cần thiết cho phát triển số men,yếu tố có máu (trong huyết tương) hồng cầu, điều kiện kỵ khí vi khuẩn khơng địi hỏi yếu tố ln tái tạo Yếu tố V(NAD = Nicotinamide- Adenine-Diniucleotide): Không bề với nhiệt chất Nicotinamide Adenin Dinucleotide (NAD) coenzyme dehydrogenase, yếu tố nhiều máu có nhiều cao men - Điều kiện ni cấy thích hợp Ph 7,6, khí trường 5-10%CO2, nhiệt độ 37℃ - Trên môi trường đặc (môi trường chocolate), vi khuẩn mọc tốt, sau 42 vi khuẩn phát triển tạo thành khuẩn lạc dạng S - Trên môi trường lỏng vi khuẩn mọc chậm - Tính chất sinh vật học: lên men đường glucose, không lên men đường lactose(thương dùng để phân loại cá type sinh học) 2.2.3.Thuốc kháng sinh chế tác dụng 2.2.3.1 Tổng quan thuốc kháng sinh Năm 1928, nhà khoa học Alexander Flemming người Scotland lần thấy môi trường nuôi cấy tụ cầu vàng có lẫn nấm penicilium khuẩn lạc gần nấm khơng phát triển được, sau chất peniciline chiết xuất từ nấm để dùng điều trị Vào năm 1941, peniciline trở thành kháng sinh tìm sản xuất để dùng lâm sàng Khi đó, kháng sinh coi chất vi sinh vật tiết (vi khuẩn, vi nấm), có khả kìm hãm phát triển vi sinh vật khác, từ gốc Hy Lạp antibiotic, nghĩa chống lại sống Kháng sinh nhóm thuốc đặc biệt việc sử dụng chúng không ảnh hưởng đến người bệnh mà ảnh hưởng đến cộng đồng Với nước phát triển Việt Nam, nhóm thuốc quan trọng bệnh lý nhiễm khuẩn nằm số bệnh đứng hàng đầu tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ tử vong Sự lan tràn chủng vi khuẩn kháng kháng sinh vấn đề cấp bách Sự xuất chủng vi khuẩn kháng ảnh hưởng đến hiệu điều trị sức khỏe người bệnh Việc hạn chế phát sinh vi khuẩn kháng kháng sinh nhiệm vụ không ngành Y tế mà cộng đồng nhằm bảo vệ nhóm thuốc này.[ 1] Kháng sinh định nghĩa: “Kháng sinh (antibiotics) chất kháng khuẩn (antibacterial substances) tạo chủng vi sinh vật (vi khuẩn, nấm, Actinomycetes), có tác dụng ức chế phát triển vi sinh vật khác.[1 ] Hiện từ kháng sinh mở rộng đến chất kháng khuẩn có nguồn gốc tổng hợp sulfonamid quinolon.Để bảo đảm sử dụng thuốc hợp lý, cần nắm vững kiến thức liên quan đến kháng sinh, vi khuẩn gây bệnh người bệnh Kháng sinh dùng điều trị bệnh nhiễm trùng điều trị dự phịng bệnh có khả gây thành dịch dự phòng ca phẫu thuật nhằm chống nhiễm trùng từ môi trường ngoại cảnh Các nhóm kháng sinh xếp theo cấu trúc hoá học Theo cách phân loại này, kháng sinh chia thành nh óm sau:[ 1] Bảng 2.1 Phân loại kháng sinh theo cấu trúc hóa học [ ] TT Tên nhóm Beta-lactam Phân nhóm Các penicillin Các cephalosporin Các beta-lactam khác Carbapenem Monobactam Các chất ức chế beta-lactamase Aminoglycosid Macrolid Lincosamid Phenicol Tetracyclin Thế hệ Thế hệ Glycopeptid Peptid Polypetid Lipopeptid Quinolon Thế hệ Các fluoroquinolon: Thế hệ 2, 3, Các nhóm kháng sinh khác Sulfonamid Oxazolidinon 5-nitroimidazol 2.2.3.2 Cơ chế tác dụng kháng sinh [1] Sau vào tế bào, kháng sinh đưa tới đích tác động vào thành phần cấu tạo tế bào phát huy tác dụng: kìm hãm sinh trưởng phát triển tiêu diệt vi khuẩn, đặc biệt có hiệu vi khuẩn sinh trưởng phát triển mạnh cách: + Ức chế sinh tổng hợp vách tế bào vi khuẩn: kháng sinh nhóm betalactam,fosfomycin vancomycin ngăn cản sinh tổng hợp lớp peptidoglycan nên không tạo khung murein - tức vách khơng hình thành Tế bào sinh khơng có vách, vừa khơng sinh sản vừa dễ bị tiêu diệt bị li giải, đặc biệt vi khuẩn Gram-dương Như vậy, kháng sinh có tác dụng diệt khuẩn với tế bào phát triển (degenerative bactericide) + Gây rối loạn chức màng bào tương: chức đặc biệt quan trọng màng bào tương thẩm thấu chọn lọc; bị rối loạn thành phần (ion) bên tế bào bị ngồi nước từ bên ngồi ạt vào trong, dẫn tới chết, ví dụ polymyxin B, colistin Với chế tác động này, polymyxin có tác dụng diệt khuẩn tuyệt đối (absolute bactericide), tức giết tế bào nhân lên tế bào trạng thái nghỉ - không nhân lên + Ức chế sinh tổng hợp protein: tham gia sinh tổng hợp protein ngồi ribosom cịn có ARN thơng tin ARN vận chuyển Điểm tác động ribosom 70S vi khuẩn: tiểu phần 30S ví dụ aminoglycosid (nơi ARN thông tin trượt qua), tetracyclin (nơi ARN vận chuyển mang acid amin tới) tiểu phần 50S (nơi acid amin liên kết tạo polypeptid) erythromycin, cloramphenicol, clindamycin Kết phân tử protein khơng hình thành tổng hợp khơng có hoạt tính sinh học làm ngừng trệ q trình sinh trưởng phát triển + Ức chế sinh tổng hợp acid nucleic gồm ba cấp độ: - Ngăn cản chép ADN mẹ tạo ADN con, ví dụ kháng sinh gắn vào enzym gyrase làm ADN khơng mở vịng xoắn, nhóm quinolon - Ngăn cản sinh tổng hợp ARN, ví dụ gắn vào enzym ARN-polymerase rifampicin - Ức chế sinh tổng hợp chất chuyển hóa cần thiết cho tế bào: trình sinh tổng hợp acid folic – coenzym cần cho trình tổng hợp purin pyrimidin (và số acid amin) bị ngăn cản sulfamid trimethoprim Như vậy, kháng sinh tác động lên vị trí định thành phần cấu tạo, ảnh hưởng đến khâu định phản ứng sinh học khác tế bào vi khuẩn, dẫn đến ngừng trệ sinh trưởng phát triển tế bào.[ 1] 2.2.4 Sự kháng kháng sinh vi khuẩn 2.2.4.1 Khái niệm Kháng thuốc (AMR) tình trạng vi sinh vật (như vi khuẩn, vi rút, nấm ký sinh trùng) kháng lại thuốc kháng sinh nhạy cảm với vi sinh vật trước Sinh vật đề kháng (vi khuẩn, vi rút, ký sinh trùng) chịu cơng thuốc chống vi khuẩn (như thuốc kháng sinh, thuốc kháng vi rút, thuốc chống sốt rét) dẫn đến việc áp dụng phương pháp, thuốc điều trị đặc hiệu trở nên không hiệu quả, nhiễm khuẩn kéo dài (thậm chí gây tử vong) lây lan cho người khác AMR hệ tất yếu trình sử dụng thuốc điều trị đặc biệt gia tăng việc lạm dụng thuốc kháng sinh ngày phổ biến hơn.[9 ] Sử dụng kháng sinh có lợi ích to lớn điều trị, chăm sóc người bệnh thú y kê đơn điều trị Tuy nhiên, loại thuốc sử dụng rộng rãi, kéo dài, lạm dụng, làm cho vi sinh vật thích nghi với thuốc, tạo điều kiện cho nhiều loại vi khuẩn trở thành kháng thuốc, làm cho thuốc hiệu khơng hiệu Tình trạng kháng thuốc khơng mối lo ngại bác sỹ lâm sàng điều trị mà mối quan tâm chung toàn xã hội sức khỏe cộng đồng 2.2.4.2 Cơ chế kháng thuốc vi khuẩn Kháng sinh có tác dụng ức chế tiêu diệt vi khuẩn mơi trường có kháng sinh mà vi khuẩn phát triển coi đề kháng kháng sinh [19].Kháng thuốc thật gồm kháng thuốc tự nhiên kháng thuốc thu được: Kháng thuốc tự nhiên: Là kháng thuốc vi khuẩn không nằm phổ tác dụng kháng sinh kháng thuốc tự nhiên đặc thù cấu trúc sinh lý tế bào vi khuẩn, tự nhiên bền vững Ví dụ: E coli khơng chịu tác động Erythromycin, tụ cầu kháng lại Colistin, trực khuẩn lao kháng lại Penicillin… Kháng thuốc thu được: Là kháng thuốc vi khuẩn nằm phổ tác dụng kháng sinh trở nên kháng lại kháng sinh 10 2.2.4.3.Tình hình kháng thuốc giới Trên giới, đặc biệt nước phát triển, vấn đề kháng thuốc trở nên báo động Gánh nặng chi phí điều trị bệnh nhiễm khuẩn gây lớn việc thay kháng sinh cũ kháng sinh mới, đắt tiền Năm 2011, tình hình lao kháng thuốc xảy hầu hết quốc gia Toàn cầu có khoảng 640.000 trường hợp lao đa kháng thuốc (MDR - TB), số khoảng 9% siêu kháng thuốc[3] 2.2.4.4 Tình hình kháng thuốc Việt Nam Điểm lại kết báo cáo tính nhạy cảm kháng sinh tiến hành từ năm 2003-2006 cho thấy tỉ lệ đề kháng Klebsiella spp kháng sinh cephalosporins hệ 3, hệ 4, fluoroquinolon aminosid tăng nhanh từ >30% năm 2003 lên >40% năm 2006; Pseudomonas spp từ >40% năm 2004 lên >50% năm 2006 Acinetobacter spp.từ>50% năm 2004 lên >60% năm 2006 Trong imipenem/cilastatin, carbapenem đưa vào thị trường Việt Nam gần 10 năm, giảm nhạy cảm trực khuẩn gram âm không sinh men Tỷ lệ đề kháng imipenem/cilastatin Pseudomonas spp tăng dần qua năm 12,5% (2003), 15,5% (2005) 18,4% (2006)[3 ] Theo số liệu báo cáo 15 bệnh viện trực thuộc Bộ, bệnh viện đa khoa tỉnh Hà Nội, Hải Phòng, Huế, Đà Nẵng, Hồ Chí Minh,… sử dụng kháng sinh kháng kháng sinh giai đoạn 2008 - 2009 cho thấy: năm 2009, 30 - 70% vi khuẩn gram âm kháng với cephalosporin hệ hệ 4, gần 40-60% kháng với aminoglycosid fluoroquinolon Gần 40% chủng vi khuẩn Acinetobacter giảm nhạy cảm với imipenem.[ 20 ] 2.2.5 Sử dụng thuốc kháng sinh cho trẻ em[1] Việc lựa chọn kháng sinh điều trị viêm phổi trẻ em chủ yếu dựa vào đặc điểm lâm sàng, lứa tuổi, tình trạng miễn dịch, mức độ nặng nhẹ bệnh 11 tình hình kháng kháng sinh vi khuẩn gây bệnh thường gặp để có định thích hợp.[1 ] Theo tuổi nguyên nhân: - Đối với trẻ sơ sinh < tháng tuổi: Nguyên nhân thường gặp liên cầu B, tụ cầu, vi khuẩn Gram-âm, phế cầu (S pneumoniae) H influenzae - Trẻ từ tháng đến tuổi nguyên nhân hay gặp phế cầu (S pneumoniae) H influenzae - Trẻ tuổi S pneumoniae H influenzae cịn có thêm Mycoplasma pneumoniae, Chlamydia pneumoniae, Legionella pneumophila Theo tình trạng miễn dịch: -Trẻ bị suy giảm miễn dịch bẩm sinh hay mắc phải đặc biệt trẻ bị HIV AIDS thường bị viêm phổi ký sinh trùng Pneumocystis carini., Toxoplasma, nấm Candida spp, Cryptococcus spp, virus Cytomegalo virus, Herpes simplex vi khuẩn S aureus, vi khuẩn Gram âm Legionella spp Theo mức độ nặng nhẹ bệnh: Các trường hợp viêm phổi nặng nặng (suy hơ hấp, sốc, tím tái, bỏ bú, khơng uống được, ngủ li bì khó đánh thức, co giật, mê tình trạng suy dinh dưỡng nặng thường vi khuẩn Gram-âm tụ cầu nhiều phế cầu H influenzae Theo mức độ kháng thuốc: Mức độ kháng kháng sinh tùy theo địa phương, vùng (thành thị có tỷ lệ kháng kháng sinh cao nông thôn, bệnh viện tỷ lệ kháng thuốc cao cộng đồng, nơi lạm dụng sử dụng kháng sinh có tỷ lệ kháng thuốc cao nơi sử dụng kháng sinh an toàn hợp lý ) ... Khoa Vi sinh - Bệnh vi? ??n TW Thái Nguyên với đề tài: ? ?Nghiên cứu khả kháng kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae gây bệnh vi? ?m phổi trẻ em tuổi bệnh vi? ??n Trung ương Thái. ..ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ THẢO NHI Tên đề tài: NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE VÀ HAEMOPHILUS INFLUENZAE GÂY BỆNH VI? ?M PHỔI Ở TRẺ... tiêu đề tài - Nghiên cứu nhằm khảo sát khả đề kháng thuốc kháng sinh vi khuẩn Streptococcus pneumoniae Haemophilus influenzae gây bệnh vi? ?m phổi trẻ em tuổi Bệnh vi? ??n Trung Ương Thái Nguyên 1.2.2