Phân tích dư lượng salbutamol có trong thịt lợn

Phân tích dư lượng salbutamol có thịt lợn GVHD: Th.S Phùng Võ Cẩm Hồng TỔNG QUAN TÀI LIỆU Salbutalmol gì? Cấu trúc hóa học Tính chất hố lý Salbutamol Lợi ích tác hại Salbutamol Cách nhận biết thịt có chứa Salbutamol Phần I: Khái quát Salbutamol • • • • • Phần II: Phân tích Salbutamol thịt lợn • Các phương pháp phân tích Salbutamol thịt lợn • Phân tích salbutamol thịt lợn phương pháp sắc ký ghép khối phổ GC/MS Phần I: Tổng quan Salbutamol Salbutalmol gì? - Là chất chủ vận thụ thể β2-adrenergic Salbutamol (INN) Albuterol (Usan) sử đụng để làm giảm co thắt phế quản bệnh hen suyễn bệnh phổi tắc nghẽn mãn tính - Trong sản khoa, hoạt động thụ thể beta làm giãn trơn tử cung có tác dụng làm trì hỗn việc sinh nở 2 Cấu trúc hóa học Salbutamol (1RS)-2-[(1,1Dimethylethyl)amino]-1-[4-hydroxy-(hydroxymethyl)phenyl] ethanol, phải chứa từ 98,0 đến 101,0% C13H21NO3, tính theo chế phẩm làm khơ 3 Tính chất hố lý Sabutamol Lợi ích tác hại Salbutamol a Lợi ích - Salbutamol thuốc có tác dụng giãn khí quản giúp điều trị bệnh lý hô hấp Các loại thuốc Salbutamol thị trường b Tác hại Salbutamol - - - Trong đời sống, việc sử dụng salbutamol sai mục đích, sang lĩnh vực chăn ni gây ảnh hưởng nguy hại đến sức khỏe người Salbutamol tác động lên não, tim, gan, tụy người sử dụng, làm cho tim đập nhanh, tăng huyết áp, run cơ, rối loạn tiêu hóa Salbutamol có khả gây ung thư bị tích lũy nhiều thể 5 Cách nhận biết thịt heo có chứa Salbutamol Thịt lợn sử dụng chất tạo nạc có lớp mỡ mỏng (dưới cm), da căng, mỏng bất thường, màu đỏ đậm màu thịt bò Lớp mỡ lợn ni bình thường dày từ 1,5 – cm Khi thái miếng thịt mềm, không đứng vững Phần liên kết phần nạc phần mỡ tách rời rõ rệt, thường có dịch vàng rỉ Khi ăn thường có cảm giác khơ, khơng có vị béo thịt Phần II: Phân tích Salbutamol thịt lợn Các phương pháp phân tích Salbutamol thịt lợn - Phương pháp sắc ký lỏng phổ khối lượng hai lần (LC-MS/MS) - Phương pháp sắc ký khí ghép khối phổ (GC-MS) GC-MS LC-MS/MS a Phương pháp sắc ký lỏng phổ khối lượng hai lần (LC-MS/MS) - Giới Hạn Định Lượng (LOQ): 2,5ppm - Ưu điểm: + Cho phép tách thành phần khác mẫu + Độ nhạy cao + Xữ lý đa dạng loại mẫu - Nhược điểm: + Giới hạn định lượng salbutamol 2,5 ppm thấp định lượng + Quy trình phức tạp b Phương pháp sắc ký ghép khối phổ GC-MS - Giới Hạn Định Lượng (LOQ): 0.41 ppb - Ưu điểm: + Chỉ cần lượng mẫu nhỏ + Có khả tách tốt cấu tử + độ đồng đưa mẫu + độ nhạy cao, độ xác tối ưu + Kết thu nhanh chóng - Nhược điểm + Mẫu phải bay + Dung môi phải bay nhiệt độ sơi thấp salbutamol Phân tích salbutamol thịt lợn phương pháp sắc ký ghép khối phổ GC/MS - Là phương pháp sắc ký đại - Được sử dụng nghiên cứu phân tích kết hơp - Bản chất kết hợp Sắc ký khí khối phổ a Nguyên lý hoạt động GC-MS b Các thành phần hệ thống sắc khí ghép khối phổ GC/MS Thiết bị gồm hai thành phần GC MS nối với phận kết nối  Phần GC (sắc ký khí) Gồm có tiêm mẩu cột nhồi Mẫu bơm vào tiêm mẫu phân tách, rửa giải cột nhồi  Phần MS (khối phổ) Khối phổ dùng để xác định chất hoá học dựa cấu trúc Các chất tách từ phần GC ion hố sau qua phận phân tích khối lượng đầu dị c Tiến hành phân tích  Thiết bị, dụng cụ hố chất Thiết bị:  Máy sắc ký Agilent 7890A với đầu dị MSD 5975C  Khí mang heli, cột HP – 5MS Agilent  Thành phần pha tĩnh 5% phenyl – 95% dimethylpolysiloxane (30m ì 0,25 mm ì 0,25 àm) Mỏy sắc ký Agilent 7890A Dụng cụ  Máy lắc voltex, máy ly tâm, máy xay, cân  Cột lọc PCX, pipet,…  Và dụng cụ phòng thí nghiệm khác  Hố chất  Dung dịch chuẩn: Sabutamol.HCl  Các hoá chất cần thiết khác: Methanol; Acetonitril; Ethyl; Amonium ;Natri acetat; Acid acetic Lưu ý: Các hoá chất sử dụng phải hố chất có độ tinh khiết cao  Cài đặt thiết bị  Điều kiện tiến hành sắc ký: hệ thống thiết bị Agilent 7890N đầu dò MSD 5975C cột mao quản HP – 5MS  Chế độ quét phổ: SIM;  Chương trình nhiệt: 120oC giữ 0,1 phút, tăng 15oC/phút đến 245oC, tăng 30oC/phút đến 300oC giữ 10 phút;  Chế độ tiêm mẫu: Splitless;  LOD = 0,12 ppb, LOQ = 0,41 ppb  Lấy mẫu, xử lý mẫu dung dịch chuẩn - Lấy mẫu: • Mẫu lấy nhiều nơi chợ, siêu thị,… • Sau lấy mẫu cần đánh dấu hay ghi rõ thông tin cần thiết • Phải chuẩn bị đầy đủ thủ tục, dụng cụ, thiết bị lấy mẫu bảo quản mẫu - Đối với mẫu: cân 10 g mẫu thịt, chiết với methanol môi trường đệm acetat (pH 5,2), lắc voltex, ly tâm 2500 vòng/phút 20oC 15 phút, làm cách cho qua cột PCX, dung dịch rửa giải etylacetat/acetonitril/ammonium hydroxide (90:10:5) Thổi khô dung dịch chiết khí nitơ 40oC, hịa tan mL methanol, chuyển hết vào vial 1,5 mL, thêm 100 µL nội chuẩn salbutamol d3  Lấy mẫu, xử lý mẫu dung dịch chuẩn o Chuẩn bị dung dịch chuẩn: • Từ dung dịch chuẩn Salbutamol.HCl 1000 ppm, pha thành 100 µl dung dịch chuẩn Salbutamol.HCl ppm, thêm 100 µl nội chuẩn salbutamol d3, ml methanol, vào vial 1,5 ml o Tiến hành chạy sắc ký • Tiến hành chạy mẫu dung dịch chuẩn để dựng đường chuẩn • Tiến hành chạy mẫu cần phân tích • Đọc xử lý số liệu ... thường có dịch vàng rỉ Khi ăn thường có cảm giác khơ, khơng có vị béo thịt Phần II: Phân tích Salbutamol thịt lợn Các phương pháp phân tích Salbutamol thịt lợn - Phương pháp sắc ký lỏng phổ khối lượng. .. hố lý Salbutamol Lợi ích tác hại Salbutamol Cách nhận biết thịt có chứa Salbutamol Phần I: Khái quát Salbutamol • • • • • Phần II: Phân tích Salbutamol thịt lợn • Các phương pháp phân tích Salbutamol. .. thịt heo có chứa Salbutamol Thịt lợn sử dụng chất tạo nạc có lớp mỡ mỏng (dư? ??i cm), da căng, mỏng bất thường, màu đỏ đậm màu thịt bị Lớp mỡ lợn ni bình thường dày từ 1,5 – cm Khi thái miếng thịt