KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT QUÁ TRÌNH TRÍCH LY PROTEIN TỪ BÈO TẤM VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT Q TRÌNH TRÍCH LY PROTEIN TỪ BÈO TẤM VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME GVHD: ThS Trần Chí Hải SVTH: Phạm Văn Đông Vy Thị Minh MSSV: 2022140345 Lớp:05DHDB2 MSSV: 2022140080 Lớp:05DHDB1 TP HỜ CHÍ MINH, 2018 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT Q TRÌNH TRÍCH LY PROTEIN TỪ BÈO TẤM VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME KL05DH.121: Khảo sát ảnh hưởng số thông số cơng nghệ q trình trích ly protein từ bèo với hỗ trợ enzyme KL05DH.126: Tối ưu hóa q trình trích ly protein từ bèo với hỗ trợ enzyme GVHD: ThS Trần Chí Hải SVTH: Phạm Văn Đông MSSV: 2022140345 Lớp:05DHDB2 Vy Thị Minh MSSV: 2022140080 Lớp:05DHDB1 TP HỒ CHÍ MINH, 2018 BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM BẢN NHẬN XÉT Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: 02) (1) (2) PHẠM VĂN ĐÔNG MSSV: 2022140345 Lớp: 05DHDB2 VY THỊ MINH MSSV: 2022140080 Lớp: 05DHDB1 Tên đề tài: KHẢO SÁT Q TRÌNH TRÍCH LY PROTEIN TỪ BÈO TẤM VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME Nhận xét giảng viên hướng dẫn: - Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: - Về nội dung kết nghiên cứu: - Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc SV bảo vệ trước Hội đồng: Đồng ý Khơng đồng ý TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2018 GVHD (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CAM ĐOAN Chúng cam đoan báo cáo khóa luận tốt nghiệp chúng tơi thực hướng dẫn thầy ThS Trần Chí Hải Các số liệu kết phân tích báo cáo trung thực, không chép từ đề tài nghiên cứu khoa học TP.HCM, tháng 07 năm 2018 Sinh viên thực (Kí ghi rõ họ tên) i TÓM TẮT KHÓA LUẬN Bèo tấm chứa hàm lượng protein tương đối cao, dao động khoảng 6,8-45% với đầy đủ axit amin thiết yếu cho thể Trong nghiên cứu này, chúng tiến hành khảo sát sự ảnh hưởng của các thông số công nghệ (tỉ lệ enzyme:cơ chất, pH, nhiệt độ và thời gian) đến quá trình trích ly protein từ bèo tấm với hỗ trợ enzyme cellulase Đây sở cho thí nghiệm tối ưu hoá các thông số để đạt được hiệu quả trích ly protein tốt nhất Bên cạnh đó, phương trình động học được xây dựng nhằm phản ánh cụ thể tốc độ trích ly protein Trong nghiên cứu này, enzyme cellulase được sử dụng để hỗ trợ quá trình trích ly protein từ bèo tấm Sau tiến hành các thí nghiệm khảo sát ảnh hưởng của một số thông số công nghệ (tỉ lệ enzyme:cơ chất, pH, nhiệt độ và thời gian) đến quá trình trích ly, kết quả cho thấy các mẫu có xử lí enzyme cho hiệu suất trích ly protein tăng xấp xỉ lần so với mẫu không được xử lí enzyme Điều kiện hoạt động phù hợp nhất của enzyme cellulase thí nghiệm là pH 5,5; nhiệt độ xử lí mẫu 45oC thời gian 90 phút với tỉ lệ enzyme:cơ chất 30µL/g nguyên liệu Tại điều kiện này, hàm lượng protein tổng dịch trích đạt 131,00 mg/g cao gấp 2,29 lần so với mẫu không sử dụng enzyme ở cùng điều kiện Thí nghiệm sàng lọc bốn yếu tố (tỉ lệ enzyme:cơ chất, pH, nhiệt độ và thời gian) quá trình trích ly được tiến hành mô hình Plackett Burman với hàm mục tiêu là hiệu suất thu hồi protein Kết quả thu được, cho thấy tác động của thời gian khoảng khảo sát 60-90 phút là không có sự khác biệt ở mức ý nghĩa P≤0,05 Các biến còn lại (tỉ lệ enzyme:cơ chất, pH và nhiệt độ) với mức tác động có ý nghĩa được tối ưu hoá bằng phương pháp bề mặt đáp ứng Response Surface Modeling (RSM) Các thông số tối ưu nhất được ghi nhận là với tỉ lệ enzyme:cơ chất 30,45 µL/g, môi trường pH 5,55, nhiệt độ 46,11oC sau thời gian trích ly 90 phút sẽ đem lại hiệu quả trích ly đạt 55,07% (tương đương hàm lượng protein trích ly 133,428 mg/g nguyên liệu), cao gấp 2,29 lần so với không xử dụng enzyme ở cùng điều kiện Quá trình trích ly protein từ bèo tấm với sự hỗ trợ của enzyme cellulsae cho kết quả khai thác prtein tốt Đây là tiền đề cho các nghiên cứu tiếp theo về khai thác, thu nhận và tinh sạch protein từ bèo tấm, nguồn nguyên liệu đầy tiềm chưa được quan tâm đúng mức ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận này, trước hết chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy, cô giáo khoa Công nghệ thực phẩm trường Đại học Cơng nghiệp thực phẩm Tp Hồ Chí Minh truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho chúng em suốt trình học tập rèn luyện trường Trong trình thực đề tài chúng em gặp khơng khó khăn Nhưng với động viên giúp đỡ quý thầy cô, người thân bạn bè, chúng em hoàn thành tốt đề tài nghiên cứu có kinh nghiệm, kiến thức hữu ích cho thân Cảm ơn thầy Trung tâm thí nghiệm thực hành tạo điều kiện thuận lợi để chúng em hồn thành thí nghiệm Đặc biệt chúng em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Trần Chí Hải, người trực tiếp hướng dẫn tận tình giúp đỡ chúng em suốt thời gian thực đề tài Dù cố gắng khơng thể tránh khỏi sai sót Rất mong thơng cảm đóng góp ý kiến q thầy bạn để khóa luận hồn thiện Cuối cùng, xin kính chúc q thầy bạn sức khỏe, thành công công việc sống Chúng em xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, tháng 07, năm 2018 Sinh viên thực hiện Phạm Văn Đông Vy Thị Minh iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i TÓM TẮT KHÓA LUẬN ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC BẢNG BIỂU .vii DANH MỤC VIẾT TẮT viii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan bèo 1.1.1 Mô tả thực vật 1.1.2 Nguồn gốc phân bố .3 1.1.3 Các hướng nghiên cứu ứng dụng bèo 1.1.4 Nguồn thực phẩm cho người thức ăn chăn nuôi .5 1.1.5 Tình hình nghiên cứu Việt Nam bèo 1.1.6 Tình hình nghiên cứu nước ngồi bèo 1.2 Tổng quan về protein 1.2.1 Giới thiệu và phân loại .7 1.2.2 Tính chất của protein 1.2.3 Protein bèo 1.3 Tổng quan enzyme cellulase 11 1.3.1 Giới thiệu chung enzyme cellulase 11 1.3.2 Phân loại chế hoạt động 12 1.3.3 Cấu trúc tính chất cellulase 13 1.3.4 Cơ chất enzyme cellulase 15 1.3.5 Ứng dụng cellulase công nghiệp thực phẩm .16 1.4 Các phương pháp tối ưu trình trích ly protein 17 1.4.1 Sàng lọc yếu tố ảnh hưởng theo mơ hình Plackett-Burman .17 1.4.2 Tối ưu hóa q trình phương pháp bề mặt RSM-CCD 17 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Thời gian địa điểm làm đề tài .19 2.2 Vật liệu nghiên cứu 19 2.2.1 Nguyên liệu 19 2.2.2 Enzyme cellulase .20 2.2.3 Hóa chất 21 2.2.4 Thiết bị .22 2.3 Phương pháp nghiên cứu 23 2.3.1 Sơ đồ nội dung nghiên cứu 23 iv 2.3.2 Quy trình trích ly protein từ bèo với hỗ trợ enzyme cellulase .24 2.4 Phương pháp bố trí thí nghiệm 25 2.4.1 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của tỉ lệ enzyme:cơ chất đến quá trình trích ly 25 2.4.2 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của pH đến quá trình trích ly 26 2.4.3 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của nhiệt độ đến quá trình trích ly 27 2.4.4 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của thời gian đến quá trình trích ly 28 2.4.5 Thí nghiệm sàng lọc các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly protein .29 2.4.6 Thí nghiệm tối ưu hoá các thông số công nghệ quy trình trích ly 30 2.4.7 Thí nghiệm xây dựng động lực học quá trình trích ly 30 2.5 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 32 2.5.1 Phương pháp phân tích .32 2.5.2 Phương pháp xử lý số liệu 32 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 33 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng của một số thông số công nghệ đến quá trình trích ly protein từ bèo tấm với sự hỗ trợ của enzyme cellulase 33 3.1.1 Kết quả khảo sát ảnh hưởng của tỉ lệ enzyme:cơ chất đến quá trình trích ly33 3.1.2 Kết quả khảo sát sự ảnh hưởng của pH đến quá trình trích ly protein 35 3.1.3 Kết quả khảo sát sự ảnh hưởng của nhiệt độ đến quá trình trích ly 36 3.1.4 Kết quả khảo sát sự ảnh hưởng của thời gian đến quá trình trích ly 38 3.2 Kết quả tối ưu hoá các thông số công nghệ quy trình trích ly protein từ bèo tấm với sự hỗ trợ của enzyme cellulase 40 3.2.1 Kết quả sàng lọc các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình trích ly protein từ bèo tấm với sự hỗ trợ của enzyme cellulase 40 3.2.2 Kết quả tối ưu hoá các thông số công nghệ của quá trình trích ly 42 3.3 Động học quá trình trích ly protein từ bèo tấm với sự hỗ trợ của enzyme 47 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 51 4.1 Kết luận 51 4.2 Kiến nghị 51 v 30 5,5 45 27,5 1,43 1,199 9,992 56,701 B7, Xây dựng động học q trình trích ly protein từ bèo với hỗ trợ enzyme Cellulase Thời gian (phút) Khối lượng mẫu (g) Thể tích dịch trích ly (ml) OD 0 10 10 10 20 20 20 30 30 30 40 40 40 50 50 50 60 60 60 70 70 70 80 80 80 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 29 28,5 29 28,5 28,5 29 30,5 30 30 30 29,5 30 30 30 29,5 29 29,5 29 29,5 29 29,5 29,5 30 30 29,5 29 29,5 0,430 0,426 0,420 0,514 0,518 0,512 0,552 0,557 0,555 0,626 0,621 0,629 0,694 0,691 0,698 0,761 0,759 0,775 0,829 0,836 0,834 0,876 0,865 0,862 0,945 0,953 0,950 Hàm lượng protein (mg/g nguyên liệu) Có enzyme 51,958 50,588 50,750 61,038 61,513 61,867 70,150 69,625 69,375 78,250 76,331 78,625 86,750 86,375 85,796 91,954 93,294 93,646 101,898 101,017 102,513 107,675 108,125 107,750 116,156 115,154 116,771 13 Hiệu suất trích ly protein (%) Giá trị nghịch đảo (phút*g/mg) 21,444 20,878 20,945 25,191 25,387 25,533 28,952 28,735 28,632 32,295 31,503 32,449 35,803 35,648 35,409 37,951 38,503 38,649 42,054 41,691 42,308 44,439 44,624 44,470 47,939 47,525 48,193 0,000 0,000 0,000 0,164 0,163 0,162 0,285 0,287 0,288 0,383 0,393 0,382 0,461 0,463 0,466 0,544 0,536 0,534 0,589 0,594 0,585 0,650 0,647 0,650 0,689 0,695 0,685 69,911 90 90 90 100 100 100 110 110 110 120 120 120 2 2 2 2 2 2 29 29 29,5 29 29 29,5 29,5 29 29,5 29 29 29 0 10 10 10 20 20 20 30 30 30 40 40 40 50 50 50 60 60 60 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 28 27,5 28 29 29 29,5 29,5 29 29 29 30 29,5 29 30 29,5 29,5 29,5 29 29,5 30 29,5 1,097 132,554 1,090 131,708 1,078 132,504 1,076 130,017 1,083 130,863 1,069 131,398 1,070 131,521 1,078 130,258 1,066 131,029 1,083 130,863 1,080 130,500 1,078 130,258 Không enzyme 0,398 46,433 0,394 45,146 0,391 45,617 0,396 47,850 0,389 47,004 0,395 48,552 0,404 49,658 0,409 49,421 0,400 48,333 0,427 51,596 0,431 53,875 0,434 53,346 0,438 52,925 0,445 55,625 0,439 53,960 0,451 55,435 0,455 55,927 0,459 55,463 0,462 56,788 0,465 58,125 0,460 56,542 14 54,707 54,358 54,686 53,659 54,008 54,229 54,280 53,759 54,077 54,008 53,859 53,759 0,679 0,683 0,679 0,769 0,764 0,761 0,836 0,844 0,840 0,917 0,920 0,921 19,164 18,632 18,827 19,748 19,399 20,038 20,495 20,397 19,948 21,294 22,235 22,016 21,843 22,957 22,270 22,879 23,082 22,890 23,437 23,989 23,335 0,000 0,000 0,000 0,209 0,213 0,206 0,403 0,405 0,414 0,581 0,557 0,562 0,756 0,719 0,741 0,902 0,894 0,902 1,057 1,032 1,061 70 70 70 80 80 80 90 90 90 100 100 100 110 110 110 120 120 120 2 2 2 2 2 2 2 2 2 30 29,5 29,5 29,5 29 29,5 29,5 29,5 29 29,5 29 29,5 29,5 29,5 30 29,5 30 29,5 0,468 0,477 0,482 0,484 0,489 0,482 0,494 0,492 0,499 0,501 0,510 0,507 0,514 0,513 0,518 0,521 0,515 0,527 58,500 58,631 59,246 59,492 59,088 59,246 60,721 60,475 60,296 61,581 61,625 62,319 63,179 63,056 64,750 64,040 64,375 64,777 24,144 24,198 24,451 24,553 24,386 24,451 25,060 24,959 24,885 25,415 25,433 25,720 26,075 26,024 26,723 26,430 26,568 26,734 15 1,197 1,194 1,182 1,345 1,354 1,350 1,482 1,488 1,493 1,624 1,623 1,605 1,741 1,744 1,699 1,874 1,864 1,853 PHỤ LỤC C: KẾT QUẢ C1 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của tỉ lệ enzyme:cơ chất đến quá trình trích ly Summary Statistics for Hieu suat trich ly carbohydrate nong enzyme Count Average Standard deviation Coeff, of variation Min Max Range Stnd, skewness 10 20 30 40 50 Total 3 3 3 18 5,15 7,10333 10,3033 10,89 10,8067 10,7333 9,16444 0,105357 0,197569 0,051316 0,183303 0,113725 0,185562 2,29652 2,04576% 2,78135% 0,498053% 1,68322% 1,05236% 1,72884% 25,059% 5,05 6,89 10,26 10,73 10,68 10,54 5,05 5,26 7,28 10,36 11,09 10,9 10,91 11,09 0,21 0,39 0,1 0,36 0,22 0,37 6,04 0,299299 -0,570202 0,770952 0,6613 -0,85253 -0,283491 -1,66155 Multiple Range Tests for Hieu suat trich ly carbohydrate by nong enzyme Method: 95,0 percent LSD nong enzyme 10 20 50 40 30 Count 3 3 3 Mean 5,15 7,10333 10,3033 10,7333 10,8067 10,89 Homogeneous Groups X X X X X X Summary Statistics for Hieu suat trich ly protein nong enzyme 10 20 30 40 50 Total Count Average 3 3 3 18 22,4033 27,26 32,6867 42,71 42,9533 42,2 35,0356 Standard deviation 1,2384 0,280535 0,328684 0,446766 0,237978 0,185203 8,39966 Coeff, of variation 5,52775% 1,02911% 1,00556% 1,04605% 0,554038% 0,438869% 23,9747% Min Max Range 21,38 26,99 32,41 42,21 42,74 42,01 21,38 23,78 27,55 33,05 43,07 43,21 42,38 43,21 2,4 0,56 0,64 0,86 0,47 0,37 21,83 Multiple Range Tests for Hieu suat trich ly protein by nong enzyme Method: 95,0 percent LSD nong enzyme 10 20 50 30 40 Count 3 3 3 Mean 22,4033 27,26 32,6867 42,2 42,71 42,9533 Homogeneous Groups X X X X X X 16 Stnd, skewness 0,833961 0,225698 0,780684 -0,899202 0,560196 -0,17131 -0,706862 C2 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của pH đến quá trình trích ly Summary Statistics for Hieu suat trich ly carbohydrate pH Count Average 4,5 5,5 6,5 Total 3 3 3 18 6,77333 10,6933 11,6667 9,85667 9,13333 7,81 9,32222 Standard deviation 0,0665833 0,204042 0,0832666 0,184752 0,090185 0,1249 1,70924 Coeff, of variation 0,983021% 1,90813% 0,713714% 1,87439% 0,987427% 1,59923% 18,3351% Min Max Range 6,7 10,47 11,6 9,75 9,04 7,71 6,7 6,83 10,87 11,76 10,07 9,22 7,95 11,76 0,13 0,4 0,16 0,32 0,18 0,24 5,06 Stnd, skewness -0,746586 -0,689685 0,914531 1,22474 -0,233933 0,914531 -0,295883 Multiple Range Tests for Hieu suat trich ly carbohydrate by pH Method: 95,0 percent LSD pH 4,5 6,5 5,5 Count 3 3 3 Mean 6,77333 7,81 9,13333 9,85667 10,6933 11,6667 Homogeneous Groups X X X X X X Summary Statistics for Hieu suat trich ly protein pH Count Average 4,5 5,5 6,5 Total 3 3 3 18 25,29 43,0167 53,1933 41,2 38,3967 39,1733 40,045 Standard deviation 0,225167 0,260064 0,689227 0,468935 0,778481 0,249867 8,4563 Coeff, of variation 0,890338% 0,604566% 1,2957% 1,13819% 2,02747% 0,637849% 21,117% Min Max Range 25,03 42,76 52,43 40,77 37,5 38,9 25,03 25,42 43,28 53,77 41,7 38,9 39,39 53,77 0,39 0,52 1,34 0,93 1,4 0,49 28,74 Multiple Range Tests for Hieu suat trich ly protein by pH Method: 95,0 percent LSD pH Count 4,5 6,5 5,5 Mean 25,29 38,3967 39,1733 41,2 43,0167 53,1933 Homogeneous Groups X X X X X X 17 Stnd, skewness -1,22474 0,0815155 -0,798578 0,464404 -1,19729 -0,684518 -0,515796 C3 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của nhiệt độ đến quá trình trích ly Summary Statistics for hieu suat trich ly carbohydrate Nhiet (oC) 35 40 45 50 55 60 Total Count Average 3 3 3 18 7,74333 10,0633 11,7833 9,17 8,27667 8,69 9,28778 Standard deviation 0,425715 0,0493288 0,300056 0,56107 0,286764 0,331813 1,40139 Coeff, of variation 5,49783% 0,490184% 2,54644% 6,11854% 3,46472% 3,81833% 15,0885% Min Max Range 7,44 10,03 11,48 8,59 8,01 8,38 7,44 8,23 10,12 12,08 9,71 8,58 9,04 12,08 0,79 0,09 0,6 1,12 0,57 0,66 4,64 Stnd, skewness 1,11618 1,16836 -0,0706627 -0,225698 0,400208 0,378013 1,32663 Multiple Range Tests for hieu suat trich ly carbohydrate by nhiet Method: 95,0 percent LSD Nhiet Count 35 55 60 50 40 45 Mean 7,74333 8,27667 8,69 9,17 10,0633 11,7833 Homogeneous Groups X XX XX X X X Summary Statistics for Hieu suat trich ly protein Nhiet (oC) 35 40 45 50 55 60 Total Count Average 3 3 3 18 26,9567 42,83 54,0767 48,85 39,25 30,42 40,3972 Standard deviation 0,109697 0,631744 0,378726 0,646452 0,378021 0,305123 9,82323 Coeff, of variation 0,406937% 1,475% 0,70035% 1,32334% 0,963111% 1,00303% 24,3166% Min Max Range 26,87 42,12 53,66 48,23 38,97 30,08 26,87 27,08 43,33 54,4 49,52 39,68 30,67 54,4 0,21 1,21 0,74 1,29 0,71 0,59 27,53 Multiple Range Tests for Hieu suat trich ly protein3 by nhiet Method: 95,0 percent LSD Nhiet (oC) Count 35 60 55 40 50 45 Mean 26,9567 30,42 39,25 42,83 48,85 54,07 Homogeneous Groups X X X X X X 18 Stnd, skewness 0,944762 -0,940855 -0,736543 0,244639 1,06382 -0,856908 -0,0849596 C4 Thí nghiệm khảo sát sự ảnh hưởng của thời gian đến quá trình trích ly Summary Statistics for hieu suat trich ly carbohydrate Thoi gian Standard Count Average (phút) deviation 4,35 0,0984886 30 6,77 0,34176 60 9,12 0,509215 90 12,2733 0,12741 120 12,5067 0,369098 150 13,1267 0,447921 180 14,4067 0,312143 Total 21 10,3648 3,53699 Coeff, of variation 2,26411% 5,04816% 5,5835% 1,03811% 2,95121% 3,4123% 2,16666% 34,1252% Min Max 4,27 6,41 8,71 12,19 12,11 12,62 14,14 4,27 4,46 7,09 9,69 12,42 12,84 13,47 14,75 14,75 Stnd, skewness 0,19 0,879314 0,68 -0,367321 0,98 0,901099 0,23 1,19088 0,73 -0,529919 0,85 -1,00602 0,61 0,734391 10,48 -1,12963 Range Multiple Range Tests for hieu suat trich ly carbohydrate by thoi gian Method: 95,0 percent LSD Thoi gian Count 30 60 90 120 150 180 Mean 4,35 6,77 9,12 12,2733 12,5067 13,1267 14,4067 Homogeneous Groups X X X X X X X Summary Statistics for hieu suat trich ly protein4 Thoi gian (phút) 30 60 90 120 150 180 Total Count Average 3 3 3 21 21,9333 28,72 43,37 54,0667 54,1367 53,9667 53,8867 44,2971 Standard deviation 0,513842 0,661211 1,05674 0,807548 1,10573 0,160104 0,304357 12,9841 Coeff, of variation 2,34274% 2,30227% 2,43657% 1,49361% 2,04247% 0,296672% 0,56481% 29,3113% Min Max Range 21,34 28,0 42,28 53,18 52,86 53,81 53,54 21,34 22,23 29,3 44,39 54,76 54,79 54,13 54,11 54,79 0,89 1,3 2,11 1,58 1,93 0,32 0,57 33,45 Multiple Range Tests for hieu suat trich ly protein4 by thoi gian Method: 95,0 percent LSD Thoi gian Count 30 60 180 90 150 120 Mean 21,9333 28,72 43,37 53,8867 53,9667 54,0667 54,1367 Homogeneous Groups X X X X X X X 19 Stnd, skewness -1,22474 -0,643526 -0,209854 -0,718128 -1,22373 0,132267 -1,07769 -1,59888 C5 Thí nghiệm đánh giá mức ảnh hưởng của các yếu tố đến quá trình trích ly protein Ma trận bố trí thí nghiệm và kết quả Tỉ lệ enzyme:cơ chất (µL/g) X1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 pH môi trường Nhiệt độ (oC) Thời gian (phút) Hiệu suất trích ly protein (%) X2 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 X3 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 X4 -1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 Y 30,23 35,21 43,72 43,59 41,02 39,29 36,14 40,18 36,06 38,62 37,69 30,47 32,98 36,16 29,6 29,75 30,63 35,1 43,72 40,49 40,95 39,05 36,45 39,9 36,11 38,68 37,59 30,33 33,04 36,02 29,67 29,47 30,33 37,69 43,74 20 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 -1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 -1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 -1 1 1 -1 -1 1 -1 -1 -1 43,88 41,01 39,31 36,18 40,14 35,63 38,52 37,59 30,24 33,03 36,12 29,41 29,62 Coefficient list Hieu suat trich ly protein, Constant Coeff, SC Std, Err, P Conf, int(±) 36,2573 0,176136 0,355213 X1 1,04701 0,178 5,43E-07 0,358972 X2 2,1637 0,178 1,68E-15 0,358972 X3 3,65515 0,178 7,57E-24 0,358972 X4 0,318965 0,178 0,0801818 0,358972 N = 48 Q2 =0,913 Cond, no, =1,0106 DF = 43 R2 =0,934 Y-miss =0 Comp, = R2 Adj, =0,928 RSD =1,2203 Conf, lev, =0,95 C6 Thí nghiệm tối ưu hóa yếu tố ảnh hưởng tới q trình trích ly protein từ bèo với hỗ trợ enzyme Cellulase Mơ hình thí nghiệm tối ưu hóa STT Ti lệ Enzyme:cơ chất 4 4 pH Nhiệt độ 5 6 5 6 40 40 40 40 50 50 50 50 Hiệu suất trích ly protein 30,076 29,901 36,546 37,196 40,245 40,943 40,294 39,569 STT 27 28 29 30 31 32 33 34 21 Ti lệ Enzyme:cơ chất 3 3 3 pH Nhiệt độ 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 45 45 45 40 50 45 45 45 Hiệu suất trích ly protein 54,323 41,374 47,309 45,966 49,181 57,341 54,158 54,633 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 3 3 3 4 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5 6 5 45 45 45 45 40 50 45 45 45 40 40 40 40 50 50 50 51,549 52,358 43,283 48,968 43,575 49,353 56,239 53,260 55,355 31,300 29,323 35,380 36,880 39,338 40,237 40,012 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 4 4 3 3 3 5 6 5 6 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 5,5 40 40 40 40 50 50 50 50 45 45 45 45 40 50 45 45 31,008 29,419 37,763 36,903 39,347 39,247 39,315 40,195 49,216 53,254 43,431 46,365 45,501 48,184 56,330 54,431 25 26 5,5 50 45 39,242 51,505 51 5,5 45 56,701 C7 Xây dựng động học qúa trình trích ly protein từ bèo Multiple Range Tests for Ham luong protein by Thoi gian Method: 95,0 percent LSD đánh giá hàm lượng có sử dụng enzyme Homogeneous Thoi gian Count LS Mean LS Sigma Groups X 51,1 0,389939 X 10 61,4733 0,389939 X 20 69,72 0,389939 X 30 77,7367 0,389939 X 40 86,31 0,389939 X 50 92,9633 0,389939 X 60 101,81 0,389939 X 70 107,853 0,389939 80 116,027 0,389939 X 120 130,54 0,389939 X 100 130,76 0,389939 X 110 130,937 0,389939 X 90 132,253 0,389939 X 22 23 Multiple Range Tests for Ham luong protein by Thoi gian Method: 95.0 percent LSD đánh giá hàm lượng không sử dụng enzyme Thoi gian 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 Count 3 3 3 3 3 3 LS Mean 45.7333 47.8 49.1367 52.9433 54.1733 55.61 57.1533 58.7933 59.2767 60.5 61.8433 63.6633 64.4 LS Sigma 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 0.425332 Homogeneous Groups X X X X X X X X XX X X X X Multiple Range Tests for gia tri nghich dao by thoi gian Method: 95.0 percent LSD đánh giá giá trị hàm lượng nghịch đảo thoi gian Count Mean Homogeneous Groups X 0.0 X 10 0.16 X 20 0.29 X 30 0.383333 X 40 0.463333 X 50 0.536667 X 60 0.59 X 70 0.65 X 90 0.68 X 80 0.69 X 100 0.763333 X 110 0.84 X 120 0.92 Multiple Range Tests for gia tri nghich dao by thoi gian 16 Method: 95.0 percent LSD đánh giá giá trị nghịch đảo thoi gian 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 Count 3 3 3 3 3 3 Mean 0.0 0.21 0.403333 0.566667 0.74 0.896667 1.05 1.19 1.34667 1.48667 1.61333 1.72667 1.86 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X 17 PHỤ LỤC D: HÌNH ẢNH Một số thiết bị sử dụng nghiên cứu Máy ly tâm Bể ổn nhiệt Tủ sấy Máy đo quang Máy đo pH Cân sấy ẩm 16 - Một số hình ảnh thực nghiệm trình trích ly Bèo tươi ngun liệu Phơi bèo Chuẩn bị dịch trích ly Đong mẫu dịch trích Trữ mẫu trích ly Pha lỗng mẫu Xác định cellulose Đo quang cacbohyrate Đo quang protein 17 ... khả cắt mối liên kết β-1,4-Oglycoside phân tử cellulose, oligosaccharide, disaccharide số chất tương tự khác thành phân tử monosaccharides β-glucose, polysaccharides ngắn Cellulase số enzyme sản... fructooligosaccharide – 17 oligosaccharide chức (prebiotic) sản xuất để bổ sung vào phần ăn17 Các phế phụ phẩm nông nghiệp lõi ngô, bã mía, bã sắn, vỏ trấu chất lý tưởng cho việc sản xuất oligosaccharide Các... pháp phenol sulfuric acid Nguyên tắc: Các hợp chất carbohydrate (monosaccharides, oligosaccharides, polysaccharides dẫn xuất chúng) phản ứng môi trường acid mạnh, nhiệt độ cao sẽ tạo dẫn