BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN QUÁ QUÁ TRÌNH TRÍCH LY THU DỊCH CHIẾT LÁ ĐINH LĂNG CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME CELLULASE

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM BÁO CÁO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: NGHIÊN Q Q TRÌNH TRÍCH LY THU DỊCH CHIẾT LÁ ĐINH LĂNG CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME CELLULASE GVHD: TRẦN CHÍ HẢI SVTH: Trần Hồi Hậu MSSV:2005150286 Lớp: 06DHTP3 TP.HCM, THÁNG NĂM 2019 BỘ CƠNG THƯƠNG CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM PHIẾU GIAO NHIỆM VỤ  Khóa luận tốt nghiệp  Đồ án tốt nghiệp (Phiếu phải đóng vào trang báo cáo) Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: 01) (1)Trần Hoài Hậu MSSV: 2005150286 Lớp:06DHTP3 Tên đề tài: Nghiên q q trình trích ly thu dịch chiết đinh lăng có khả kháng enzyme α-amylase với hỗ trợ enzyme cellulase Mục tiêu đề tài: Thu nhận dịch chiết đinh lăng có hàm lượng saponin triterpenoide khả kháng enzyme α-amylase cao với hỗ trợ enzyme cellulase Nội dung nghiên cứu chính: - Nghiên cứu ảnh hưởng thơng số cơng nghệ đến q trình trích ly enzyme cellulase: + Ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: dung môi + Ảnh hưởng tỉ lệ enzyme: chất + Ảnh hưởng thời gian xử lí enzyme - Tối ưu hóa/xây đựng động học cho trình Ngày giao đề tài: 09/12/2018 Trưởng khoa Ngày nộp báo cáo: 16/06/2019 TP Hồ Chí Minh, ngày 09 tháng 12 năm 2018 Trưởng mơn TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP Giảng viên hướng dẫn CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BẢN NHẬN XÉT Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài: (Số lượng sinh viên: 1) (1) Trần Hoài Hậu MSSV: 2005150286 .Lớp: 06DHTP3 Tên đề tài: “Nghiên q trình trích ly thu dịch chiết đinh lăng có khả kháng enzyme α-amylase với hỗ trợ enzyme cellulase.” Nhận xét giảng viên hướng dẫn: - Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: - Về nội dung kết nghiên cứu: - Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc SV bảo vệ trước Hội đồng: Đồng ý Khơng đồng ý TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2019 GVHD (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CAM ĐOAN Chúng xin cam đoan là cơng trình nghiên cứu của chúng tơi Các kết quả nghiên cứu và các kết luận luận án này là trung thực, và không chép từ bất cứ một nguồn nào và dưới bất kỳ hình thức nào Việc tham khảo các nguồn tài liệu đã được thực hiện trích dẫn và ghi nguồn tài liệu tham khảo đúng theo yêu cầu Sinh viên thực (Ký tên, ghi rõ họ tên) i TÓM TẮT ĐỀ TÀI Lá đinh lăng chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học saponin triterpenoid, alcaloid, vitamin B1, B2, B6, vitamin C, 20 acid amin, glycosid, phytosterol, tanin, acid hữu cơ, tinh dầu, nhiều nguyên tố vi lượng, đường, acid oleanolic Trong nghiên cứu này, xây dựng quy trình sản xuất sử hỗ trợ enzyme cellulase để thu nhận dịch trích đinh lăng giàu hợp chất có hoạt tính sinh học đặc biệt saponin triterpenoid Nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu:dung mơi, tỷ lệ enzyme:cơ chất, thời gian trích ly (ủ enzyme) đến hàm lượng saponin triterpenoid có dịch chiết từ đinh lăng khô Kết thu sử dụng tỷ lệ nguyên liệu:nước 1:30, tỉ lệ enzyme cellulase nồng độ 1% 45 oC pH=5 thời gian 40 phút thu dịch trích ly có hàm lượng saponin triterpenoide đạt 2,246 mg/g, khả kháng enzyme α-amylase đạt khoảng 15,241 mg Acarbose/g khả kháng oxi hóa DPPH đạt 3,226mgTrolox/g Từ số liệu thự nghiệm xử lý phần mềm Modde 5.0 để tối ưu hóa q trình trích lý kết sau sau: Để đạt hàm lượng saponin triterpenoide kháng enzyme α-amylase cao điều kiện nhiệt độ 45 C pH=5 2,33 mg/g 15,71 mg Acarbose/g thì: Tỉ lệ nguyên luyện: nước 1/28 Tỉ lệ enzyme/cơ chất 0,97/100 Thời gian trích ly (ủ enzyme) 42 phút ii LỜI CẢM ƠN Là sinh viên năm cuối, trải nhiệm vụ cuối thực nghiên cứu đề tài khóa luận tốt nghiệp để hồn tất chương trình đào tạo đại học Chúng tơi gặp khơng khó khăn Tuy nhiên, hội để ứng dụng học vào thực tế, tích lũy thêm nhiều kiến thức có liên quan thuộc chuyên ngành, có chuẩn bị sau trường Để có kết khơng thể khơng kể đến hỗ trợ, giúp đỡ quan trọng từ nhiều phía dành cho chúng tơi Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Ban Giám Hiệu trường Đại học Công Nghiệp Thực Phẩm thành phố Hồ Chí Minh, Ban lãnh đạo Khoa Cơng Nghệ Thực Phẩm quý Thầy (Cô) tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian học tập rèn luyện trường Các cán Trung tâm thí nghiệm trường Đại học Cơng Nghiệp Thực Phẩm thành phố Hồ Chí Minh nhiệt tình hỗ trợ dụng cụ, hóa chất, thiết bị phịng thí nghiệm để chúng tơi hồn thành trình nghiên cứu thực nghiệm Đặc biệt Th.S Trần Chí Hải, khoa Cơng nghệ thực phẩm, trường Đại học Cơng Nghiệp Thực Phẩm Tp Hồ Chí Minh Người tận tình hướng dẫn, bảo dõi theo chúng tơi q trình hồn thiện báo cáo khóa luận tốt nghiệp Các bạn sinh viên trường Đại học Cơng Nghiệp Thực Phẩm Tp Hồ Chí Minh nghiên cứu hỗ trợ, giúp đỡ q trình làm thực đề tài Chúng tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên ủng hộ nhiều trình học tập nghiên cứu Một lần xin chân thành cảm ơn giúp đỡ tất người! iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i TÓM TẮT ĐỀ TÀI .ii LỜI CẢM ƠN iii Danh mục bảng vi Danh mục hình ảnh đồ thị vii CHƯƠNG Mở đầu 1.1 Về trạng .1 1.1.1 Sự cấp thiết đề tài 1.1.2 Mục tiêu đề tài .3 1.1.3 Mục đích nghiên cứu: .3 1.2 Ý nghĩa đề tài 1.2.1 Ý nghĩa khoa học 1.2.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG tổng quan 2.1 Tổng quan đinh lăng .4 2.1.1 Mô tả thực vật 2.1.2 Nguồn gốc phân bố 2.1.3 Đặc điểm thực vật học 2.1.4 Các hợp chất có hoạt tính sinh học đinh lăng 2.2 Giá trị sử dụng đinh lăng 2.2.1 Theo y học cổ truyền 2.2.2 Theo y học đại 2.2.3 Một số thuốc y học cổ truyền 2.2.4 Tình hình nghiên cứu đinh lăng nước 2.2.5 Một số sản phẩm từ đinh lăng 11 2.3 Hợp chất saponin triterpenoid dịch chiết đinh lăng 11 2.3.1 Khái niệm chung saponin 11 2.3.2 Phân bố thực vật 12 2.3.3 Câu trúc hóa học 12 2.3.4 Phân loại 14 2.3.5 Tính chất Saponin 15 2.3.6 Công dụng saponin: .16 2.3.7 Phương pháp định tính saponin 16 2.3.8 Hoạt tính sinh học saponin triterpenoid ứng dụng .17 2.4 Tổng quan q trình trích ly enzyme 18 2.4.1 Khái niệm enzyme 18 2.4.2 Phân loại 19 2.4.3 Cơ chất celllulose 20 2.4.4 Cấu trúc cellulase 21 2.4.5 Tính chất cellulase 22 2.4.6 Cơ chế xúc tác cảu cellulase 23 2.4.7 Ứng dụng cellulase công nghiệp thực phẩm 25 CHƯƠNG Vật liệu phương pháp .27 3.1 Vật liệu phạm vi nghiên cứu 27 iv 3.1.1 Thời gian địa điểm làm đề tài 27 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 27 3.1.3 Vật liệu nghiên cứu 27 3.2 Quy trình thu nhận dịch chiết đinh lăng 32 3.2.1 Quy trình trích ly có hỗ trợ enzyme cellulase enzyme termamyl 32 3.3 Thuyết minh quy trình .33 3.3.1 Xử lý nguyên liệu: 33 3.3.2 Trích ly 33 3.3.3 Ly tâm 33 3.3.4 Lọc .33 3.4 Nội dung nghiên cứu 34 3.5 Phương pháp bố trí thí nghiệm 35 3.5.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: dung môi 35 3.5.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ enzyme cellulase/ nguyên liệu 36 3.5.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng thời gian trích ly enzyme cellulase 37 3.5.4 Tối ưu hóa trình trích ly enzyme cellulase 38 3.6 Phương pháp phân tích số liệu 39 3.6.1 Phương pháp phân tích 39 3.6.2 Phương pháp sử lý số liệu 40 CHƯƠNG Kết bàn luận 41 4.1 Ảnh hưởng ngun liệu: dung mơi đến q trình trích ly 41 4.1.1 Ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: nước đến hàm lượng hợp chất có dịch chiết đinh lăng .41 4.1.2 Nhận xét: 42 4.2 Ảnh hưởng thông số cơng nghệ q trình trích ly enzyme cellulase 43 4.2.1 Ảnh hưởng tỉ lệ enzyme cellulase 43 4.2.2 Ảnh hưởng thời gian trích ly enzyme cellulase .44 4.2.3 Đánh giá tác động q trình trích ly enzyme cellulase 45 4.2.4 Tối ưu hóa q trình trích ly saponin triterpenoid từ đinh lăng có khả kháng enzyme amylase cao với kết hợp enzyme celllulase 46 CHƯƠNG kết luận kiến nghị 53 5.1 Kết luận .53 5.2 Kiến nghị 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 PHỤ LỤC v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Mô tả thực vật đinh lăng Bảng 2.1 Các cơng trình nghiên cứu đinh lăng giới Bảng 2.2 Các cơng trình nghiên cứu đinh lăng Việt Nam 10 Bảng 2.3 Phân loại saponin theo cấu trúc hóa học 15 Bảng 3.1 Các tiêu chất lượng nguyên liệu 27 Bảng 3.2 Thông số công nghệ enzyme Termamyl® 120L dùng nghiên cứu 28 Bảng 3.3 Các loại hóa chất sử dụng nghiên cứu 28 Bảng 3.4 Danh mục thiết bị sử dụng nghiên cứu 30 Bảng 3.5 Một số thiết bị sử dụng nghiên cứu 31 Bảng 3.6 Bố trí thí nghiệm thơng số khảo sát ma trận qui hoạch thực nghiệm 38 Bảng 4.1 Các biến thí nghiệm tối ưu hóa q trình trích ly saponin triterpenoid khả kháng enzyme α-amylase dịch trích .46 Bảng 4.2 Kết bố trí thí nghiệm tối ưu hóa 47 Bảng 4.3 Kết hồi quy đa biến q trình trích ly saponin triterpenoid 48 Bảng 4.4 Kết hồi quy đa biến q trình trích ly saponin triterpenoid 48 Bảng 4.5 Kết quả kiểm tra thực nghiệm với thơng số tối ưu từ phương trình hồi quy 52 vi DANH MỤC HÌNH ẢNH VÀ ĐỒ THỊ Hình 2.1 Cây đinh lăng Hình 2.2 Các sản phẩm đinh lăng có mặt thị trường 11 Hình 2.3 Cấu trúc saponin 13 Hình 2.4 Cấu trúc aglycone khác saponin 14 Hình 2.5 Hình ảnh mơ hình xếp chuỗi cellulose thành tế bào thực vật [81] .20 Hình 2.6 Hình ảnh cấu trúc phân tử số cellulase 22 Hình 2.7 Hai chế xúc tác phức hệ cellulase [103] 24 Hình 2.8 Cơ chế thủy phân phân tử cellulose (A) và phức hệ cellulose (B) [104] 25 Hình 3.1 Sơ đồ quy trình trích ly dịch chiết đinh lăng 32 Hình 4.1 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: nước đến hàm lượng saponin triterpenoid khả kháng enzyme α-amylase dịch trích .41 Hình 4.2 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu: nước đến kháng oxy hóa DPPH dịch trích ly .42 Hình 4.3 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ enzyme cellulase đến trích ly hàm lượng Saponine trierpenoid khả kháng enzyme α-amylase 43 Hình 4.4 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng tỉ lệ enzyme cellulase đến khả kháng oxy hóa DPPH dịch trích ly .43 Hình 4.5 Biểu đồ biểu diễn ảnh hưởng thời gian ủ enzyme cellulase đến trích ly hàm lượng Saponine trierpenoid khả kháng enzyme α-amylase 44 Hình 4.6 Đồ thị biểu diễn ảnh hưởng thời gian ủ enzyme cellulase đến khả kháng oxi hóa DPPH dịch trích ly 44 Hình 4.7 Đồ thị biểu diễn hàm lượng saponin triterpenoid khả kháng enzyme mẫu đối chứng không bổ sung enzyme .45 Hình 4.8 Đồ thị đáp ứng bề mặt hàm lượng saponin triterpenoid theo phương tình hồi quy khơng gian chiều chiều hai yếu tố tố tỉ lệ enzyme : chất thời gian trích ly (ủ enzyme) 49 Hình 4.9 Đồ thị đáp ứng bề mặt hàm lượng saponin triterpenoid theo phương tình hồi quy không gian chiều chiều hai yếu tố tố tỉ lệ nguyên liệu: dung môi tỉ lệ enzyme: chất .50 Hình 4.10 Đồ thị đáp ứng bề mặt hàm lượng saponin triterpenoid theo phương tình hồi quy khơng gian chiều chiều hai yếu tố tố tỉ lệ nguyên liệu: dung mơi thời gian trích ly (ủ enzyme) 50 Hình 4.11 Đồ thị đáp ứng bề mặt khả ức chế enzyme theo phương trình hồi quy khơng gian chiểu chiều yếu tố tỉ lệ enzyme : chất thời gian trích ly (ủ enzyme) 51 vii 102 Kháng enzyme α-amylase MẪU 1/25 0.5% 20' 1/35 0.5% 20' 1/25 1.5% 20' 1/35 1.5% 20' 1/25 0.5% 60' 1/35 0.5% 60' 1/25 1.5% 60' 1/35 1.5% 60' KHÁNG ENZYME α-AMYLASE OD % ức chế 0% 100% mau OD dc enzyme 0.732 0.161 0.336 0.212 78.284 0.699 0.154 0.341 0.223 78.349 0.722 0.169 0.352 0.232 78.300 0.732 0.161 0.519 0.211 46.060 0.699 0.154 0.51 0.216 46.055 0.722 0.169 0.507 0.208 45.931 0.732 0.161 0.36 0.211 73.870 0.699 0.154 0.351 0.209 73.950 0.722 0.169 0.351 0.207 74.007 0.732 0.161 0.528 0.205 43.518 0.699 0.154 0.511 0.203 43.486 0.722 0.169 0.519 0.206 43.400 0.732 0.161 0.309 0.230 86.246 0.699 0.154 0.307 0.231 86.083 0.722 0.169 0.308 0.232 86.227 0.732 0.161 0.527 0.198 42.382 0.699 0.154 0.517 0.203 42.385 0.722 0.169 0.504 0.189 43.038 0.732 0.161 0.339 0.235 81.710 0.699 0.154 0.335 0.235 81.697 0.722 0.169 0.337 0.236 81.724 0.732 0.161 0.516 0.196 43.958 0.699 0.154 0.499 0.194 44.037 0.722 0.169 0.492 0.183 44.123 103 mgAcarbose/ g 11.487 11.497 11.489 10.595 6.758 6.740 10.839 10.851 10.859 10.010 10.003 9.983 12.655 12.631 12.653 9.749 9.749 9.900 11.990 11.988 11.992 10.111 10.129 10.149 MẪU 1/25 1% 40' 1/35 1% 40' 1/30 0,5% 40' 1/30 1,5% 40' 1/30 1% 20' 1/30 1% 60' 1/30 1% 40' 1/30 1% 40' KHÁNG ENZYME α-AMYLASE OD % ức chế mgAcarbose/ 0% 100% mau OD dc enzyme g 0.27 0.732 0.161 13.791 0.239 93.987 0.27 0.154 13.795 0.699 0.239 94.009 0.27 0.722 0.169 13.799 0.240 94.039 0.44 0.732 0.161 12.730 0.189 55.342 0.43 0.154 12.704 0.699 0.193 55.229 0.44 0.722 0.169 12.686 0.194 55.154 0.43 0.732 0.161 13.302 0.261 69.877 0.45 0.154 13.308 0.699 0.287 69.908 0.41 0.722 0.169 13.322 0.253 69.982 0.45 0.732 0.161 12.568 0.263 66.025 0.43 0.154 12.539 0.699 0.245 65.872 0.43 0.722 0.169 12.565 0.243 66.004 0.732 0.161 0.44 13.269 0.267 69.702 0.40 0.154 13.273 0.699 0.243 69.725 0.40 0.722 0.169 13.253 0.241 69.620 0.41 0.732 0.161 13.835 0.261 72.680 0.38 0.154 13.832 0.699 0.236 72.661 0.36 0.722 0.169 13.838 0.214 72.694 0.42 0.732 0.161 15.569 0.287 76.532 0.38 0.154 15.565 0.699 0.254 76.514 0.39 0.722 0.169 15.561 0.263 76.492 0.732 0.161 0.41 0.279 76.357 15.535 104 0.699 1/30 1% 40' 0.154 0.722 0.169 0.732 0.161 0.699 0.722 0.154 0.169 0.41 0.39 0.37 0.35 0.37 105 0.286 76.330 0.263 76.311 0.243 77.233 0.233 77.248 0.247 77.215 15.530 15.527 15.702 15.705 15.699 PHỤ LỤC C: XỬ LÝ KẾT QUẢ KHẢO SÁT BẰNG PHẦN MỀM STATGRAPHICS CENTURION XVII C.1 Thí nghiệm 1: tỉ lệ nguyên liệu: dung môi Summary Statistics for Ham luong saponin triterpenoid (mg/g) Tỉ lệ mẫu: nước Count 10 15 20 25 30 35 40 3 3 3 21 Total Average 0.47788 0.69325 0.93606 1.09518 1.3191 1.0708 0.86523 0.9225 Standard Coeff of deviation variation Minimum Maximum Range 0.02327 4.87% 0.45342 0.49975 0.04633 0.01564 2.26% 0.67534 0.70416 0.02882 0.01025 1.10% 0.92496 0.94518 0.02021 0.02441 2.23% 1.06939 1.11793 0.04854 0.01591 1.21% 1.30467 1.33616 0.03149 0.00726 0.68% 1.06288 1.07714 0.01427 0.05219 6.03% 0.81304 0.91742 0.10438 0.26434 28.65% 0.45342 1.33616 0.88274 Multiple Range Tests for Ham luong saponin triterpenoid (mg/g) by Ty le mau: dung moi tile 10 15 40 20 35 25 30 Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 0.477883 X 0.693251 X 0.865232 X 0.93606 X 1.0708 X 1.09518 X 1.3191 X Summary Statistics for Khang ezyme anpha amylase (mg/g) tile 10 15 20 25 30 35 40 Total Count 3 3 3 21 Average 3.06349 3.32313 5.13528 6.81083 9.70891 8.9986 7.95151 6.42739 Standard deviatio Coeff of n variation Minimum Maximum Range 0.06942 2.27% 2.986 3.12 0.134 0.09102 2.74% 3.2394 3.42 0.1806 0.09021 1.76% 5.05183 5.231 0.17917 0.017 0.25% 6.7912 6.821 0.0298 0.01702 0.18% 9.69 9.723 0.033 0.11553 1.28% 8.89 9.12 0.23 0.05816 0.73% 7.896 8.012 0.116 2.52479 39.28% 2.986 9.723 6.737 106 Multiple Range Tests for kháng enzyme anpha amylase by tile Method: 95.0 percent LSD Mẫu:nước Count Mean Homogeneous Groups 10 3.06349 X 15 3.32313 X 20 5.13528 X 25 6.81083 X 40 7.95151 X 35 8.9986 X 30 9.70891 X tile Count 10 15 20 25 30 35 40 Total 21 Summary Statistics for kháng oxi hóa Standard Coeff of Average deviation variation Minimum Maximum Range 0.37307 0.0340357 9.12% 0.34608 0.41131 0.06523 0.41003 0.110261 26.89% 0.32236 0.53382 0.21146 0.43097 0.0155641 3.61% 0.41339 0.44297 0.02959 0.46432 0.0120235 2.59% 0.45465 0.47778 0.02313 0.49042 0.019874 4.05% 0.46823 0.50657 0.03834 0.27793 0.0418402 15.05% 0.25108 0.32614 0.07506 0.21302 0.0288633 13.55% 0.18548 0.24305 0.05756 0.37997 0.10412 27.40% 0.18548 0.53382 0.34834 Multiple Range Tests for kháng oxi hóa by tile Method: 95.0 percent LSD tile Count Mean Homogeneous Groups 40 0.213016 X 35 0.277929 X 10 0.373074 X 15 0.410033 XX 20 0.430972 XX 25 0.464317 X 30 0.490423 X 107 C.2 Thí nghiệm 2: tỉ lệ enzyme: nguyên liệu Summary Statistics for Ham luong saponin triterpenoide Enzyme Coun : chất t 0.5 1.5 3 15 Total Averag Standard Coeff of Minimu Maximu e deviation variation m m 1.34862 0.0159058 1.18% 1.33419 1.36568 1.80516 0.0133948 0.74% 1.79466 1.82025 0.0045445 2.00653 0.23% 2.00129 2.00916 1.76908 0.0375439 2.12% 1.73366 1.80844 0.0078713 1.53097 0.51% 1.5231 1.53885 1.69207 0.237306 14.02% 1.33419 2.00916 Range 0.03149 0.02558 0.00787 0.07478 0.01574 0.67497 Multiple Range Tests for Ham luong saponin triterpenoide by nong Method: 95.0 percent LSD Enzyme: Count Mean Homogeneous Groups chất 1.34862 X 1.53097 X 1.5 1.76908 X 0.5 1.80516 X 2.00653 X Enzym e: chất 0.5 1.5 Total Summary Statistics for kháng enzyme anpha amylase Standar Coeff d of Cou Averag deviatio variatio Minimu Maximu nt e n n m m Range 12.388 3 0.00115 0.01% 12.387 12.389 0.002 13.337 3 0.00231 0.02% 13.336 13.34 0.004 14.486 3 0.01501 0.10% 14.469 14.495 0.026 13.724 0.00289 0.02% 13.723 13.728 0.005 12.974 0.01905 0.15% 12.952 12.985 0.033 13.382 15 0.73093 5.46% 12.387 14.495 2.108 Multiple Range Tests for kháng enzyme anpha amylease by enzyme: chất Method: 95.0 percent LSD Enzyme: Count Mean Homogeneous Groups chất 12.3883 X 108 0.5 1.5 3 3 12.974 13.3373 13.7247 14.4863 X X X X Summary Statistics for kháng oxi hóa Enzyme: Count Average Standard Coeff of Minimum chất deviation variation 2.32903 0.0214371 0.920429% 2.30439 0.5 2.64049 0.00436997 0.165498% 2.63701 2.98469 0.0175723 0.588748% 2.96574 1.5 2.75752 0.00308208 0.11177% 2.75397 2.52002 0.00138829 0.0550904% 2.51862 Total 15 2.64635 0.228687 8.64159% 2.30439 Maximum Range 2.34341 2.6454 3.00044 2.75953 2.52139 3.00044 0.0390208 0.00838668 0.0347023 0.00555461 0.00277619 0.696052 Multiple Range Tests for kháng oxi hóa by Enzyme: chất Method: 95.0 percent LSD Enzyme: Count Mean Homogeneous Groups chẩt 2.32903 X 2.52002 X 0.5 2.64049 X 1.5 2.75752 X 2.98469 X C.3 Thí nghiệm 3: thời gian ủ enzyme cellulase Summary Statistics for Ham luong saponintriterpenoide Time Count Average 20 40 60 80 Total 3 3 12 1.56903 2.24597 1.90883 1.7881 1.87798 Standard deviation 0.0406306 0.0210253 0.00340637 0.0178557 0.256643 Coeff of variation 2.58953% 0.936136% 0.178453% 0.998581% 13.6659% Minimum Maximum Range 1.5408 2.2276 1.9049 1.76908 1.5408 1.6156 2.2689 1.9108 1.8045 2.2689 0.0748 0.0413 0.0059 0.035421 0.7281 Multiple Range Tests for Ham luong saponintriterpenoide by time Method: 95.0 percent LSD Time Coun Mean Homogeneous Groups t 20 1.56903 X 80 1.7881 X 109 60 40 3 1.90883 2.24597 X X 110 Summary Statistics for kháng enzyme anpha amylase Time Count Average Standard Coeff of Minimum Maximum deviation variation 20 12.956 0.0137477 0.106111% 12.944 12.971 40 14.8583 0.00776745 0.0522767% 14.852 14.867 60 14.5437 0.120869 0.831077% 14.467 14.683 80 13.9347 0.0888388 0.637538% 13.866 14.035 Total 12 14.0732 0.760431 5.40341% 12.944 14.867 Range 0.027 0.015 0.216 0.169 1.923 Multiple Range Tests for kháng enzyme anpha amylase by time Method: 95.0 percent LSD Time Count Mean Homogeneous Groups 20 12.956 X 80 13.9347 X 60 14.5437 X 40 14.8583 X Summary Statistics for kháng oxi hóa Time Count Average Standard Coeff of Minimum deviation variation 20 2.31984 0.126993 5.4742% 2.17428 40 3.22606 0.00282514 0.0875724% 3.22393 60 2.97721 0.103134 3.4641% 2.85976 80 2.75353 0.0106 0.384959% 2.74194 Total 12 2.81916 0.355004 12.5925% 2.17428 Multiple Range Tests for kháng oxi hóa by time Method: 95.0 percent LSD Time Count Mean Homogeneous Groups 20 2.31984 X 80 2.75353 X 60 2.97721 X 40 3.22606 X 111 Maximum 2.40799 3.22926 3.05299 2.76274 3.22926 C.4 Tối ưu hóa q trình trích ly có hỗ trợ enzyme celluase Summary Statistics for saponin triterpenoid TOI UU Count Average 10 11 12 13 14 15 16 17 Total 3 3 3 3 3 3 3 3 51 1.76563 1.2286 1.661 1.3482 1.78233 1.76193 1.9037 1.5622 2.24197 2.1234 2.06817 1.9521 2.15283 2.15283 2.26693 2.28073 2.19413 1.90863 Standard deviation 0.01365 0.351547 0.0240763 0.0143 0.0139005 0.01425 0.00697209 0.0143 0.0172436 0.0218 0.0360496 0.0625782 0.0180248 0.0180248 0.0329037 0.0148944 0.0345708 0.324737 Coeff of variation 0.773095% 28.6137% 1.44951% 1.06067% 0.779903% 0.808772% 0.366239% 0.915376% 0.76913% 1.02666% 1.74307% 3.20569% 0.837259% 0.837259% 1.45146% 0.653053% 1.5756% 17.0141% Minimum Maximum Range 1.752 1.0011 1.6337 1.3339 1.7702 1.7477 1.8976 1.5479 2.2298 2.1044 2.0367 1.895 2.1371 2.1371 2.2374 2.2669 2.1548 1.0011 1.7793 1.6335 1.6792 1.3625 1.7975 1.7762 1.9113 1.5765 2.2617 2.1472 2.1075 2.019 2.1725 2.1725 2.3024 2.2965 2.2197 2.3024 Multiple Range Tests for saponin triterpenoid by TOI UU Method: 95.0 percent LSD TOI UU Count Mean Homogeneous Groups 1.2286 X 1.3482 X 1.5622 X 3 1.661 XX 1.76193 XX 1.76563 XX 1.78233 XX 1.9037 XX 12 1.9521 XX 11 2.06817 XX 10 2.1234 XX 14 2.15283 XXX 13 2.15283 XXX 17 2.19413 XXX 2.24197 XX 15 2.26693 XX 16 2.28073 X 112 0.0273 0.6324 0.0455 0.0286 0.0273 0.0285 0.0137 0.0286 0.0319 0.0428 0.0708 0.124 0.0354 0.0354 0.065 0.0296 0.0649 1.3013 PHỤ LỤC D: PHỤ LỤC D: HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THỰC HIỆN Nguyên liệu thu hái phơi khô tự nhiên ánh nắng Hình D.1 Phơi khơ ngun liệu Sau nguyên liệu khô, tiến hành xử lý nguyên liệu cách loại bỏ cành, tạp chất, giữ lại đinh lăng Hình D.2 Loại bỏ tạp chất 113 Khi thu hoàn toàn đinh lăng, tiến hành xay rây ngun liệu để có bột khơ đinh lăng Hình D.3 Xay rây nguyên liệu Sau có bột đinh lăng, tiến hành trích ly với nước theo tỉ lệ 1:30 đồng hồ Hình D.4 Trích ly mẫu 114 Hình D.5 Dịch sau trích ly đựng Vial tối màu Hình D.6 Một số hình ảnh thử nghiệm Các ống nghiệm sau ủ 700C Trong thí nghiệm kiểm tra tổng hàm lượng saponin triterpenoid Các ống nghiệm ủ 700C 15 phút Xác định khả bắt góc tự Thí nghiệm test kháng enzyme α-amylase 115 Hình D.7 Giấy kiểm nghiệm Công ty TNHH DV Khuê Nam 116