KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA DỊCH TRÍCH SAPONIN TRITERPENOID TỪ LÁ ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HĨA CỦA DỊCH TRÍCH SAPONIN TRITERPENOID TỪ LÁ ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN GVHD: THS TRẦN CHÍ HẢI SVTH: NGUYỄN KHÁNH LÂM 2005150158 HỒ THỊ PHƯỢNG LOAN 2005159960 LỚP: 06DHTP5 LỚP: 06DHTP1 TP.HỒ CHÍ MINH, 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VÀ KHÁNG OXY HĨA CỦA DỊCH TRÍCH SAPONIN TRITERPENOID TỪ LÁ ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN KL06DH.036: KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA DỊCH TRÍCH SAPONIN TRITERPENOID TỪ LÁ ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN KL06DH.035: KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME αAMYLASE CỦA DỊCH TRÍCH SAPONIN TRITERPENOID TỪ LÁ ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN GVHD: THS TRẦN CHÍ HẢI SVTH: NGUYỄN KHÁNH LÂM 2005150158 LỚP: 06DHTP5 HỒ THỊ PHƯỢNG LOAN 2005159960 LỚP: 06DHTP1 TP HỜ CHÍ MINH, 2019 BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM BẢN NHẬN XÉT Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: 02) (1) NGUYỄN KHÁNH LÂM (2) HỒ THỊ PHƯỢNG LOAN MSSV: 2005150158 Lớp: 06DHTP5 MSSV: 2005159960 Lớp: 06DHTP1 Tên đề tài:(1) Khảo sát thay đổi khả kháng oxy hóa dịch trích saponin triterpenoid từ đinh lăng trình bảo quản (2) Khảo sát thay đổi khả kháng enzyme α-amylase dịch trích saponin triterpenoid từ đinh lăng trình bảo quản Nhận xét giảng viên hướng dẫn: - Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: - Về nội dung kết nghiên cứu: - Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc SV bảo vệ trước Hội đồng: Đồng ý Không đồng ý TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2019 GVHD LỜI CAM ĐOAN Chúng cam đoan báo cáo khóa luận tốt nghiệp thực hướng dẫn thầy Trần Chí Hải Các số liệu kết phân tích báo cáo trung thực, không chép từ đề tài nghiên cứu khoa học TP.HCM, tháng 06 năm 2019 SINH VIÊN THỰC HIỆN (Kí ghi rõ họ tên) TÓM TẮT KHÓA LUẬN Trong nghiên cứu này, dịch trích đinh lăng trích ly cô đặc chân không nhiệt độ khác (45oC, 55oC, 65oC) để thu cao chiết; sau đó, cao chiết bảo quản điều kiện nhiệt độ (10oC, 30oC, 60oC) 30 ngày Đầu tiên, với mục đích giữ lại nhiều hàm lượng saponin triterpenoid tổng, polyphenol tổng, chất khơ, hoạt tính kháng oxy hóa kháng enzyme α-amylase.của dịch trích, thơng số cơng nghệ q trình đặc là: nhiệt độ 55 oC với hệ số cô đặc 10 (thời gian 30 phút) Kế đến, nghiên cứu đưa điều kiện bảo quản phù hợp cho cao chiết từ đinh lăng Sau 30 ngày bảo quản, điều kiện nhiệt độ 10 oC, hao hụt thành phần hợp chất hoạt tinh sinh học thấp so với điều kiện bảo quản khác; tổn thất hàm lượng saponin triterpenoid tổng, polyphenol tổng, khả kháng enzyme α-amylase khả kháng oxy hóa Hơn nữa, nghiên cứu cịn nhận thấy có tương quan chặt chẽ hàm lượng saponin triterpenoid, hàm lượng polyphenol tổng hoạt tính kháng oxy hóa, kháng enzyme α-amylase theo phương trình bậc LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận này, trước hết chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy, cô giáo khoa Công nghệ thực phẩm trường Đại học Cơng nghiệp thực phẩm Tp Hồ Chí Minh truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho chúng em suốt trình học tập rèn luyện trường Trong trình thực đề tài chúng em gặp khơng khó khăn Nhưng với động viên giúp đỡ quý thầy cô, người thân bạn bè, chúng em hoàn thành tốt đề tài nghiên cứu có kinh nghiệm, kiến thức hữu ích cho thân Cảm ơn thầy Trung tâm thí nghiệm thực hành tạo điều kiện thuận lợi để chúng em hồn thành thí nghiệm Đặc biệt chúng em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy Trần Chí Hải, người trực tiếp hướng dẫn tận tình giúp đỡ chúng em suốt thời gian thực đề tài Dù cố gắng khơng thể tránh khỏi sai sót Rất mong thơng cảm đóng góp ý kiến q thầy bạn để khóa luận hồn thiện Cuối cùng, xin kính chúc q thầy bạn sức khỏe, thành công công việc sống Chúng em xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, tháng 06 năm 2019 MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i TÓM TẮT KHÓA LUẬN ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC BẢNG BIỂU .vii CHƯƠNG MỞ ĐẦU 1.1 Lý chọn đề tài 1.2 Mục tiêu đề tài 1.3 Mục đích nghiên cứu: 1.4 Ý nghĩa đề tài CHƯƠNG 2.1 TỔNG QUAN Tổng quan đinh lăng .3 2.1.1 Nguồn gốc phân bố 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.1.3 Các hợp chất có hoạt tính sinh học đinh lăng 2.2 Giá trị sử dụng đinh lăng 2.2.1 Theo y học cổ truyền 2.2.2 Theo y học đại 2.2.3 Một số thuốc y học cổ truyền 2.2.4 Tình hình nghiên cứu đinh lăng nước 2.3 Hợp chất saponin triterpenoid .9 2.3.1 Tổng quan saponins 2.3.2 Phân loại .11 2.3.3 Tính chất hóa lý saponin 12 2.3.4 Hoạt tính sinh học saponin triterpenoid ứng dụng 13 2.4 Các hợp chất Polyphenol 14 2.5 Enzyme α-amylase 15 2.5.1 Khái quát hệ enzyme amylase 15 2.5.2 Đặc tính Enzyme a-amylase 16 2.5.3 Cơ chế tác dụng enzyme α-amylase .17 2.5.4 Chất ức chế enzyme α-amylase 18 2.6 Sơ lược DPPH 19 2.7 Cô quay chân không 20 2.7.1 Cơ sở khoa học 20 2.7.2 Thiết bị cô quay chân không .21 2.7.3 Ưu điểm nhược điểm cô quay chân không 22 2.8 Bảo quản gia tốc ứng dụng bảo quản gia tốc 22 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 3.1 Thời gian địa điểm làm đề tài .24 3.2 Đối tượng nghiên cứu 24 3.3 Phương pháp nghiên cứu 24 3.3.1 Sơ đồ quy trình cơng nghệ sản xuất cao chiết từ đinh lăng .24 3.3.2 Thuyết minh quy trình 26 3.3.3 Nội dung nghiên cứu 26 3.3.4 Hóa chất - Thiết bị 27 3.3.5 Phương pháp bố trí thí nghiệm 29 3.3.6 Phương pháp xử lí số liệu 31 CHƯƠNG 4.1 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 33 Khảo sát q trình đặc 33 4.1.1 Sự thay đổi hàm lượng chất khô, polyphenol tổng saponin triterpenoid tổng 33 4.1.2 Sự thay đổi hoạt tính kháng oxy hóa 35 4.1.3 4.2 Sự thay đổi khả ức chế enzyme α-amylase 36 Khảo sát trình bảo quản 38 4.2.1 Sự thay đổi hàm lượng mối tương quan hàm lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa 38 4.2.2 Sự thay đổi hàm lượng mối tương quan hàm lượng saponin triterpenoid hoạt tính oxy hóa .41 4.2.3 Sự thay đổi khả kháng enzym α-amylase mối tương quan hoạt tính với hàm lượng saponin triterpenoid .43 4.2.4 Xác định thời gian bảo quản .45 CHƯƠNG KẾT LUẬN 48 5.1 Kết luận .48 5.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 PHỤ LỤC 26 27 27 28 28 29 29 30 30 0.017 0.016 0.016 0.015 0.015 0.016 0.016 0.016 0.016 0.449 0.449 0.447 0.446 0.444 0.445 0.445 0.443 0.445 0.453 0.449 0.451 0.446 0.448 0.445 0.445 0.444 0.441 0.8300 0.8291 0.8254 0.8245 0.8208 0.8217 0.8217 0.8189 0.8226 0.8374 0.8291 0.8328 0.8245 0.8282 0.8226 0.8217 0.8208 0.8152 0.7995 ± 0.003 0.7967 ± 0.0 0.7930 ± 0.001 0.7893 ± 0.003 Bảng 18 Khảo sát trình bảo quản 60oC hàm lượng polyphenol Ngày Blank OD OD HL Polyphenol HL Polyphenol 0.019 0.503 0.505 0.8947 0.8984 2 3 4 5 6 7 8 9 10 10 11 11 12 12 13 13 0.019 0.017 0.017 0.015 0.015 0.018 0.018 0.020 0.020 0.018 0.018 0.015 0.015 0.012 0.012 0.011 0.011 0.010 0.010 0.013 0.013 0.015 0.015 0.017 0.017 0.501 0.499 0.499 0.495 0.497 0.491 0.492 0.486 0.487 0.483 0.484 0.478 0.478 0.472 0.471 0.468 0.469 0.464 0.466 0.463 0.466 0.462 0.465 0.462 0.466 0.503 0.500 0.498 0.495 0.493 0.490 0.490 0.485 0.486 0.483 0.485 0.477 0.480 0.471 0.474 0.467 0.469 0.463 0.464 0.463 0.463 0.463 0.462 0.464 0.463 0.8910 0.8910 0.8910 0.8873 0.8910 0.8744 0.8771 0.8614 0.8633 0.8596 0.8614 0.8550 0.8550 0.8503 0.8485 0.8448 0.8457 0.8393 0.8429 0.8328 0.8374 0.8263 0.8319 0.8226 0.8300 0.8947 0.8929 0.8892 0.8873 0.8836 0.8735 0.8725 0.8596 0.8614 0.8596 0.8633 0.8540 0.8587 0.8485 0.8540 0.8429 0.8466 0.8374 0.8393 0.8328 0.8328 0.8282 0.8263 0.8263 0.8245 80 Hàm lượng polyphenol (mgGAE/g) 0.8947 ± 0.003 0.8910 ± 0.001 0.8873 ± 0.003 0.8743 ± 0.002 0.8614 ± 0.001 0.8605 ± 0.002 0.8554 ± 0.002 0.8503 ± 0.002 0.8447 ± 0.001 0.8392 ± 0.002 0.8337 ± 0.002 0.8281 ± 0.002 0.8245 ± 0.003 14 14 15 15 16 16 17 17 18 18 19 19 20 20 21 0.016 0.016 0.015 0.015 0.017 0.017 0.018 0.018 0.014 0.014 0.009 0.009 0.013 0.013 0.019 0.460 0.463 0.457 0.459 0.459 0.461 0.461 0.462 0.456 0.457 0.450 0.451 0.449 0.451 0.451 0.460 0.461 0.456 0.459 0.459 0.460 0.461 0.460 0.455 0.454 0.449 0.448 0.451 0.448 0.453 0.8198 0.8254 0.8171 0.8208 0.8180 0.8208 0.8189 0.8208 0.8171 0.8189 0.8152 0.8171 0.8060 0.8097 0.7995 0.8208 0.8226 0.8152 0.8208 0.8171 0.8189 0.8189 0.8171 0.8161 0.8143 0.8134 0.8115 0.8097 0.8041 0.8023 21 22 22 23 23 24 24 25 25 26 26 27 27 28 28 29 29 30 30 0.019 0.024 0.024 0.021 0.021 0.018 0.018 0.018 0.018 0.017 0.017 0.016 0.016 0.015 0.015 0.016 0.016 0.016 0.016 0.453 0.453 0.455 0.446 0.446 0.438 0.436 0.437 0.434 0.436 0.431 0.434 0.432 0.431 0.432 0.429 0.431 0.427 0.430 0.450 0.454 0.451 0.446 0.446 0.437 0.441 0.437 0.441 0.436 0.441 0.435 0.435 0.433 0.429 0.430 0.430 0.426 0.431 0.8032 0.7930 0.7967 0.7847 0.7847 0.7764 0.7727 0.7755 0.7690 0.7746 0.7653 0.7718 0.7681 0.7690 0.7709 0.7644 0.7681 0.7598 0.7653 0.7967 0.7949 0.7893 0.7847 0.7856 0.7746 0.7819 0.7746 0.7829 0.7746 0.7838 0.7736 0.7746 0.7727 0.7653 0.7653 0.7662 0.7579 0.7672 0.8217 ± 0.002 0.8189 ± 0.002 0.8189 ± 0.001 0.8189 ± 0.001 0.8170 ± 0.002 0.8150 ± 0.002 0.8065 ± 0.003 0.7997 ± 0.003 0.7930 ± 0.003 0.7847 ± 0.0 0.7764 ± 0.003 0.7754 ± 0.005 0.7745 ± 0.007 0.7717 ± 0.002 0.7690 ± 0.003 0.7662 ± 0.001 0.7634 ± 0.004 Bảng 19 Lượng polyphenol tổn thất 30 ngày (%) Ngày Bảo quản 10 độ C 0,0000 0,0088 0,0175 Bảo quản 30 độ C 0,0000 0,0034 0,0067 81 Bảo quản 60 độ C 0,0000 0,4133 0,8265 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 0,2262 0,4348 0,5163 0,6780 0,8397 0,9409 1,0422 1,7505 2,4588 2,4987 2,6810 2,8633 3,4703 4,0774 4,1789 4,2804 4,6106 5,2649 5,9192 6,0106 6,1020 6,1020 6,1020 6,6078 7,1135 7,4168 7,7200 1,0406 2,0744 2,1724 2,3308 2,4893 3,1117 3,7342 3,9417 4,1491 4,3391 4,6590 4,9790 4,9721 4,9652 4,9724 4,9797 5,4372 6,6608 7,8843 8,8181 9,7519 9,8551 9,9584 10,2698 10,5813 10,9959 11,4106 2,2731 3,7196 3,8190 4,3891 4,9591 5,5788 6,1984 6,8182 7,4381 7,8434 8,1573 8,4711 8,4716 8,4720 8,6782 8,8843 9,8538 10,6087 11,3637 12,2934 13,2232 13,3265 13,4298 13,7397 14,0496 14,3595 14,6694 Phụ lục 6:Các đường chuẩn sử dụng cho tính tốn Đường chuẩn ESCIN C OD OD-B ĐƯỜNG CHUẨN ESCIN 0,1 0,2 0,3 0,025 0,152 0,268 0,335 0,127 0,243 0,31 82 0,4 0,516 0,491 0,5 0,557 0,532 0.6 0.5 f(x) = 1.12127272727273 x R² = 0.994400051351688 0.532 0.491 OD 0.4 0.31 0.3 0.243 0.2 0.1 0 0.127 0.1 0.2 0.3 Series2 0.4 0.5 Linear (Series2) Hình Đường chuẩn ESCIN 83 0.6 Đường chuẩn Acarbose C 2,5 10 MẪU 0,99 0,866 0,859 0,652 0,382 ĐC 0,231 0,167 0,245 0,236 0,297 ĐC- MẪU 0,759 0,699 0,614 0,416 0,085 % Ức chế 1,81 9,57 20,57 46,18 89,00 100 87.19 90 80 f(x) = 8.683913850488 x R² = 0.998938683187623 70 OD 60 44.37 50 40 30 18.76 20 10 0.00 0 7.76 Series2 Linear (Series2) Hình Đường chuẩn Acarbose 84 10 12 Đường chuẩn Trolox 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 C OD % Ức chế 0,536 0,457 10 0,332 15 0,198 20 0,061 14,73880 38,05970 63,05970 88,61940 f(x) = 4.23009950248756 x R² = 0.994413666695897 10 15 Đường chuẩn Trolox 20 Linear (Đường chuẩn Trolox) Hình Đường chuẩn Trolox 85 25 Đường chuẩn GAE ĐƯỜNG CHUẨN GAE C OD 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.0008 0.129 0.229 0.367 0.486 0.589 0.1282 0.2282 0.3662 0.4852 0.5882 OD-B 0.7 0.6 f(x) = 5.96818181818182 x R² = 0.999503926381757 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0.02 0.04 0.06 0.08 Hình Đường chuẩn GAE 86 0.1 0.12 Phụ lục 7: Hình ảnh trình thực thiết bị sử dụng Nguyên liệu thu hái, phơi khô tự nhiên ánh nắng Hình Phơi khơ ngun liệu Sau nguyên liệu khô, tiến hành xử lý nguyên liệu cách loại bỏ cành, tạp chất , giữ lại đinh lăng Hình Loại bỏ tạp chất 87 Khi thu hoàn toàn đinh lăng, tiến hành xay rây ngun liệu để có bột khơ đinh lăng Hình Xay rây nguyên liệu Sau có bột đinh lăng, tiến hành trích ly với nước theo tỉ lệ 1:15 đồng hồ Hình Trích ly mẫu 88 Dịch sau cô quay đựng Vial tối màu Hình Vial đựng mẫu cô quay Một số thiết bị sử dụng q trình thí nghiệm: Hình Máy đo pH Hình Cân phân tích 89 Hình Máy ly tâm Hình Bể ổn nhiệt 90 Hình 10 Máy đo quang 6100VIS Hình 11 Máy đo quang phổ khả kiến Optima 91 Xác định hàm lượng Polyphenol Các ống nghiệm sau ủ 700C Các ống nghiệm ủ 700C 15 phút Xác định khả bắt góc tự Khả ức chế enzyme amylase Ly tâm mẫu 92 93 94 ... ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN KL06DH.036: KHẢO SÁT SỰ THAY ĐỔI KHẢ NĂNG KHÁNG OXY HÓA CỦA DỊCH TRÍCH SAPONIN TRITERPENOID TỪ LÁ ĐINH LĂNG TRONG QUÁ TRÌNH BẢO QUẢN KL06DH.035: KHẢO SÁT SỰ THAY. .. Khảo sát thay đổi khả kháng oxy hóa dịch trích saponin triterpenoid từ đinh lăng trình bảo quản (2) Khảo sát thay đổi khả kháng enzyme α-amylase dịch trích saponin triterpenoid từ đinh lăng trình. .. bảo quản. ” 1.2 Mục tiêu đề tài Khảo sát thay đổi khả kháng oxy hóa dịch trích saponin triterpenoid từ đinh lăng trình bảo quản Khảo sát thay đổi khả kháng enzyme α-amylase dịch trích saponin triterpenoid