KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT VÀ TỐI ƯU HÓA QUÁ TRÌNH THỦY PHÂN PROTEIN TỪ RONG NƯỚC LỢ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM LÊ THỊ HỒNG ÁNH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT VÀ TỐI ƯU HĨA Q TRÌNH THỦY PHÂN PROTEIN TỪ RONG NƯỚC LỢ GVHD: ThS Nguyễn Bảo Tồn ThS Trần Chí Hải SVTH: 1/ Phan Thị Yến Nhi Lớp: 04DHTP4 MSSV: 2005130109 2/ Phạm Thị Mỹ Tiên Lớp: 04DHTP2 MSSV: 2005130177 TP HỜ CHÍ MINH, NĂM 2017 BỘ CƠNG THƯƠNG CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP Độc lập – Tự – Hạnh phúc THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM BẢN NHẬN XÉT Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: ) (1) Phan Thị Yến Nhi MSSV: 2005130109 Lớp: 04DHTP4 (2) Phạm Thị Mỹ Tiên MSSV: 2005130177 Lớp: 04DHTP2 Tên đề tài: Khảo sát tối ưu hóa q trình thủy phân protein từ rong nước lợ Nhận xét giảng viên hướng dẫn: - Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: - Về nội dung kết nghiên cứu: - Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc SV bảo vệ trước Hội đồng: Đồng ý Không đồng ý TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 20 GVHD (Ký ghi rõ họ tên) CÔNG THƯƠNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP Độc lập – Tự – Hạnh phúc THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM PHIẾU GIAO NHIỆM VỤ Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp (Phiếu phải đóng vào trang báo cáo) Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: ) (1) Phan Thị Yến Nhi MSSV: 2005130109 Lớp: 04DHTP4 (2) Phạm Thị Mỹ Tiên MSSV: 2005130177 Lớp: 04DHTP2 Tên đề tài: Khảo sát tối ưu hóa trình thủy phân protein từ rong nước lợ Mục tiêu đề tài: - Đưa quy luật tác động số thông số công nghệ trình thủy phân protein với hỗ trợ enzyme Alcalase - Xác định điều kiện tối ưu trình thủy phân thu nhận peptide Nội dung nghiên cứu chính: - Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ enzyme:cơ chất - Khảo sát ảnh hưởng pH thủy phân - Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân - Khảo sát ảnh hưởng thời gian thủy phân - Xác định thông số tác động ảnh hưởng đến thủy phân thu nhận peptide - Tối ưu hóa thơng số phương pháp bề mặt đáp ứng Ngày giao đề tài: 20/03/2017 Ngày nộp báo cáo: /06/2017 TP.Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2017 Trưởng khoa Trưởng môn PGS TS Đống Thị AS Nguyễn Hữu Phúc Giảng viên hướng dẫn LỜI CAM ĐOAN Chúng xin cam đoan là cơng trình nghiên cứu của bản thân Các kết quả nghiên cứu và các kết luận khóa luận này là trung thực, và không chép từ bất cứ một nguồn nào và dưới bất kỳ hình thức nào Việc tham khảo các nguồn tài liệu đã được thực hiện trích dẫn và ghi nguồn tài liệu tham khảo đúng theo yêu cầu Tác giả luận án (Ký tên, ghi rõ họ tên) Phạm Thị Mỹ Tiên Phan Thị Yến Nhi i TÓM TẮT KHÓA LUẬN Hiện nay, rong tảo nghiên cứu sử dụng thực phẩm, công nghiệp dược phẩm nhiều nước giới Gần đây, nhà khoa học quan tâm nhóm rong sống vùng nước lợ Đã có nhiều nghiên cứu chứng minh lợi ích từ peptide có hoạt tính sinh học có nguồn gốc từ thực vật điều hòa miễn dịch, kháng khuẩn, chống đông máu, giảm cholesterol máu, chống tăng huyết áp đặc biệt số peptide chứng minh có hoạt tính chống oxy hóa Việc thủy phân protein enzyme protease xem phương pháp hiệu quả, đơn giản có khả mở rộng với quy mô công nghiệp Đồng thời phương pháp thủy phân enzyme chứng minh làm tăng hiệu suất thu hồi peptide khả chống oxi hóa Trong nghiên cứu tập trung vào yếu tố ảnh hưởng đến trình thủy phân protein từ rong Chaetomorpha sp enzyme Alcalase để tạo thành peptide có hoạt tính sinh học Các thơng số tỷ lệ enzyme chất, pH môi trường, nhiệt độ thủy phân, thời gian thủy phân khảo sát Kết thủy phân tốt tỷ lệ enzyme:cơ chất 1%, pH dung dịch protein 8, nhiệt độ thủy phân 40 oC, thời gian thủy phân 2h Khi hiệu suất thu hồi peptide/protein tăng từ đến 82%, khả kháng oxi hóa đạt giá trị cao 36,5 mg TE/g protein Sau đó, tiến hành tối ưu hóa q trình thủy phân protein rong Cheatomorpha sp với yếu tố: pH, nồng độ enzyme thời gian thủy phân, nhiệt độ thủy phân theo thiết kế Plackett-Burman phương pháp bề mặt đáp ứng để thu dịch thủy phân có khả kháng oxi hóa cao Kết cho thấy, điều kiện thủy phân tối ưu để thu dịch thủy phân có khả kháng oxi hóa cao nồng độ enzyme Alcalase 0,7% thời gian thủy phân 1,8h Khi khả bắt gốc tự dịch thủy phân thu 38,01 mg TE/g protein ii LỜI CÁM ƠN Được phân công khoa Công nghệ thực phẩm Trường Đại học Cơng nghiệp Thực phẩm Tp Hồ Chí Minh, đồng ý giáo viên hướng dẫn ThS Nguyễn Bảo Tồn ThS Trần Chí Hải chúng tơi thực đề tài: “Khảo sát tối ưu hóa trình thủy phân protein từ rong nước lợ.” Để hồn thành nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn thầy giáo tận tình hướng dẫn, giảng dạy suốt trình học tập, nghiên cứu rèn luyện Trường Đại học Công nghiêp Thực phẩm Tp Hồ Chí Minh Xin chân thành cảm ơn giáo viên hướng dẫn ThS Nguyễn Bảo Tồn, ThS Trần Chí Hải tận tình, chu đáo hướng dẫn chúng tơi thực đề tài Mặc dù có nhiều cố gắng để thực đề tài cách hoàn chỉnh Song buổi đầu làm quen với công tác nghiên cứu khoa học, hạn chế kiến thức kinh nghiệm nên tránh khỏi thiếu sót định mà thân chưa thấy Chúng tơi mong góp ý quý Thầy, Cô giáo bạn đồng nghiệp để khóa luận hồn chỉnh Tơi xin chân thành cảm ơn! iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i TÓM TẮT KHÓA LUẬN .ii LỜI CÁM ƠN ii DANH MỤC HÌNH ẢNH .vi DANH MỤC BẢNG BIỂU vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT .viii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1.TỔNG QUAN .4 1.1 Giới thiệu Rong Chaetomorpha sp 1.1.1 Phân loại .4 1.1.2 Đặc điểm chung 1.1.3 Phân bố 1.1.4 Vòng đời Chaetomorpha sp 1.1.7 Ứng dụng protein từ rong 1.2 Enzyme Alcalase 1.3 Thủy phân protein thu nhận peptide có hoạt tính sinh học 10 1.3.1 Peptide có hoạt tính sinh học 10 1.3.2 Thủy phân protein từ rong phương pháp enzyme để thu peptide có hoạt tính sinh học 11 1.3.3 Các peptide có hoạt tính chống oxi hóa 12 1.3.4 Cơ chế hình thành hoạt tính sinh học peptide 16 1.3.5 Khả ứng dụng sinh học peptide có hoạt tính sinh học 17 1.4 Các phương pháp đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa 20 CHƯƠNG 2.VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Vật liệu .22 2.1.1 Protein từ rong Chaetomorpha sp 22 2.1.2 Enzyme 24 2.1.3 Hóa chất sử dụng 24 2.1.4 Các thiết bị sử dụng 25 2.2 Nội dung nghiên cứu 28 2.2.1 Sơ đồ nghiên cứu 28 2.2.2 Thuyết minh sơ đồ nghiên cứu 28 2.2.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng yếu tố tới trình thủy phân protein thu peptide sinh học .28 2.2.2.2 Tối ưu hóa trình thủy phân 31 2.3 Phương pháp phân tích .33 2.3.1 Xác định mức độ thuỷ phân 33 2.3.2 Xác định khả kháng oxi hoá 34 iv 2.3.3 Xác định hàm lượng Phenolic tổng 34 2.3.4 Hiệu suất thu hồi peptide/protein .35 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 35 CHƯƠNG 3.KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .36 3.1 Ảnh hưởng yếu tố tới trình thủy phân protein thu peptide sinh học enzyme Alcalase 36 3.1.1 Ảnh hưởng nồng độ enzyme đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp .36 3.1.2 Ảnh hưởng pH mơi trường đến q trình thủy phân protein từ rong Chaetomorpha sp để thu peptide sinh học 40 3.1.3 Ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp .43 3.1.4 Ảnh hưởng thời gian thủy phân đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp .46 3.2 Chọn lựa yếu tố ảnh hưởng đến trình thủy phân protein từ rong Chaetomorpha sp enzyme Alcalase 50 3.3 Tối ưu hóa q trình thủy phân protein từ rong Chaetomorpha sp enzyme Alcalase 51 CHƯƠNG 4.KẾT LUẬN, KIẾN NGHỊ 55 4.1 Kết luận 55 4.2 Kiến nghị 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 PHỤ LỤC 62 iv DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Phân bố rong Chaetomorpha sp Hình 1.2 Sự tương tác peptide có hoạt tính sinh học màng tế bào .17 Hình 2.1 Chế phẩm protein từ rong Chaetomporpha sp 22 Hình 2.2: Quy trình cơng nghệ thu nhận chế phẩm protein từ rong Chaetomorpha sp 23 Hình 2.3 Các thiết bị sử dụng 27 Hình 3.1 Khả oxy hóa (a), mức độ thủy phân hiệu suất thu hồi peptide/protein (b) dịch thủy phân từ protein rong Chaetomorpha sp Alcalase nồng độ enzyme khác .40 Hình 3.2 Khả kháng oxi hóa(a), mức độ thủy phân hiệu suất thu hồi peptide/protein dịch thủy phân protein (b) rong Chaetomorpha sp Alcalase pH mội trường khác .43 Hình 3.3 Khả kháng oxi hóa(a), mức độ thủy phân hiệu suất thu hồi peptide/protein dịch thủy phân protein (b) rong Chaetomorpha sp Alcalase nhiệt độ thủy phân khác .46 Hình 3.4 Khả oxy hóa (a), mức độ thủy phân dịch thủy phân hiệu suất thu hồi thủy phân protein (b) rong Chaetomorpha sp Alcalase theo thời gian thủy phân 49 Hình 3.5 Đồ thị đáp ứng bề mặt khả kháng oxi hóa a) chiều b) chiều dịch protein thủy phân 54 vi 3 0,708 0,713 X X Summary Statistics cho Mức độ thủy phân (Alcalase) Standard Variation deviation 12,09 0,74 6,12% 22,59 1,49 6,60% 26,79 1,87 6,98% 3 28,88 0,79 2,74% 29,94 0,95 3,17% 33,09 1,06 3,20% Total 18 25,5633 7,08717 27,72% Multiple Range Tests cho Ảnh hưởng nồng độ enzyme Alcalase đến mức độ thủy phân Method: 95.0 percent LSD Homogeneous Nồng độ enzyme Alcalase Count Mean Groups 12,09 X 22,59 X 26,79 X 3 28,88 XX 29,94 X 33,09 X Nồng độ enzyme Alcalase Count Average Summary Statistics cho Hiệu suất thu hồi protein (Alcalase) Standard Variation deviation 0 % 80 0,6 0,73% 82 0,8 1,00% 3 81 1,4 1,73% 82 0,9 1,10% 81 1,8 2,22% Total 18 67,6667 31,1599 46,05% Multiple Range Tests cho Ảnh hưởng nồng độ enzyme Alcalase đến hiệu suất thu hồi protein Method: 95.0 percent LSD Homogeneous Nồng độ enzyme Alcalase Count Mean Groups X 82 X 82 XX 3 81 XX 82 X Nồng độ enzyme Alcalase Count Average 69 80 X PL2 Kết Ảnh hưởng pH mơi trường đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp Enzyme Hàm mục tiêu pH Alcalase 10 Khả kháng Oxi hóa (mg TE/ g protein) Hàm lượng Phenolic tổng (gGAE/g protein) Mức độ thủy phân (%) 21,96 22,63 21,29 23,67 24,06 23,28 25,96 26,16 25,76 31,08 31,17 30,99 37,87 37,92 37,82 36,51 36,61 36,41 31,87 32,01 31,73 28,14 28,61 27,67 0701 0,682 0,72 0,69 0,71 0,67 0,72 0,78 0,66 0,717 0,727 0,707 0,711 0,737 0,685 0,708 0,722 0,694 0,697 0,716 0,678 0,693 0,71 0,676 8,84 9,289 8,391 10,996 11,795 10,197 12,05 12,61 11,49 20,84 20,85 20,83 24,63 24,86 24,4 22,59 22,76 2242 19,04 19,34 18,74 16,91 16,764 17,056 70 Hiệu suất thu hồi protein (%) 64,36 64 63,64 67,46 67 66,54 71 71,15 70,85 75 75,3 74,7 80 80,7 79,3 82 82,4 81,6 90 90,1 89,9 91 91,26 90,74 PL2a Kết phân tích ANOVA ảnh hưởng pH mơi trường đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp Summary Statistics cho Khả kháng oxi hóa pH dịch protein Count Average ,6 10 Total 3 3 3 3 24 21,96 23,67 25,96 31,08 37,87 36,51 31,87 28,14 29,6325 Standard deviation 0,67 0,39 0,2 0,09 0,05 0,1 0,14 0,47 5,51235 Variation 3,051% 1,647% 0,77% 0,29% 0,13% 0,27% 0,44% 1,67% 18,6037% Multiple Range Tests cho ảnh hưởng pH dịch protein đến Khả kháng oxi hóa Method: 95.0 percent LSD pH dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 3 21,96 X 23,67 X 25,96 X 10 28,14 X 31,08 X 31,87 X 36,51 X 37,87 X Summary Statistics cho Hàm lượng Phenolic tổng Standard pH dịch protein Count Average Variation deviation 3 0,701 0,019 2,71% 0,69 0,02 2,99% 0,72 0,06 8,33% 0,717 0,01 1,39% 0,711 0,026 3,66% 0,708 0,014 1,98% 0,697 0,019 2,73% 10 0,693 0,017 2,4531% Total 24 0,705 0,0249974 3,5697% Multiple Range Tests cho Arnh hưởng pH đến hàm lượng Phenolic tổng Method: 95.0 percent LSD pH dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 0,69 X 10 0,693 X 71 Summary Statistics cho Mức độ thủy phân 3 3 3 0,697 0,701 0,708 0,711 0,717 0,72 X X X X X X Standard Variation deviation 3 8,84 0,449 5,079% 10,996 0,799 7,266% 12,05 0,56 4,65% 20,84 0,01 0,05% 24,63 0,23 0,93% 22,59 0,17 0,75% 19,04 0,3 1,58% 10 16,91 0,146 0,863% Total 24 16,9875 5.55296 32,6901% Multiple Range Tests cho ảnh hưởng pH dịch protein đến mức độ thủy phân Method: 95.0 percent LSD pH dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 3 8,84 X 10,99 X 12,05 X 10 16,91 X 19,04 X 20,84 X 22,59 X 24,63 X Summary Statistics cho Hiệu suất thu hồi (Alcalase) Standard pH dịch protein Count Average Variation deviation 3 64 0,36 0,562% 67 0,46 0,687% 71 0,15 0,21% 75 0,3 0,40% 80 0,7 0,88% 82 0,4 0,49% 90 0,1 0,11% 10 91 0,26 029% Total 24 77,5 9,60155 12,3891% Multiple Range Tests cho ảnh hưởng pH dịch protein đến hiệu suất thu hồi protein Method: 95.0 percent LSD pH dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 3 64 X 67 X pH dịch protein Count Average 72 10 3 3 3 71 75 80 82 90 91 X X X X X X PL3 Kết ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp Hàm mục tiêu Enzyme Nhiệt độ (0C) 30 Alcalase 40 50 60 70 Hiệu suất thu hồi protein (%) Khả kháng Oxi hóa (mg TE/ g protein) Hàm lượng Phenolic tổng (g GAE/g protein) Mức độ thủy phân (%) 26,91 0,71 17,02 71 27,59 0,736 17,154 71,42 26,23 0,684 16,886 70,58 38,65 0,69 23,31 82 39,20 0,702 23,663 81,535 38,1 0,678 22,957 82,465 37,2 0,703 22,91 83,66 37,63 0,705 22,51 84,47 36,77 0,701 23,31 82,85 35,23 0,705 20,14 79,41 35,611 34,849 32,66 33,308 0,7137 0,696 0,7 0,720 19 20,14 17,63 18,34 79,664 79,156 78,67 79,41 32,012 0,679 16,92 77,93 PL3a Kết phân tích ANOVA ảnh hưởng nhiệt độ thủy phân đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp Summary Statistics cho Khả kháng oxi hóa (Alcalase) Nhiệt độ dịch protein Count Average 30 40 50 60 3 3 73 26,91 38,65 37,2 35,23 Standard deviation 0,68 0,55 0,43 0,381 Variation 2,526% 1,423% 1,156% 1,081% 70 Total 15 32,66 34,13 0,648 4,30194 1,98% 12,6046% Multiple Range Tests cho ảnh hưởng pH dịch protein đến Khả kháng oxi hóa Method: 95.0 percent LSD Nhiệt độ dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 30 26,91 X 70 38,65 X 60 37,2 X 50 35,23 X 40 32,66 X Summary Statistics cho Hàm lượng Phenolic tổng (Alcalase) Standard Nhiệt độ dịch protein Count Average Variation deviation 30 0,71 0,026 3,662% 40 0,69 0,012 1,739% 50 0,703 0,002 0,284% 60 0,705 0,0087 1,234% 70 0,7 0,0205 2,929% Total 15 0,7016 0,01536 2,1894% Multiple Range Tests cho Arnh hưởng pH đến hàm lượng Phenolic tổng Method: 95.0 percent LSD Nhiệt độ dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 40 0,71 X 70 0,69 X 50 0,703 X 60 0,705 X 30 0,7 X Summary Statistics cho Mức độ thủy phân (Alcalase) Standard Nhiệt độ dịch protein Count Average Variation deviation 30 17,02 0,134 0,78% 40 23,31 0,353 1,51 % 50 22,91 0,3995 1,75% 60 19,76 0,574 3,33% 70 17,63 0,710 4,02% Total 15 20,126 2,79263 13,554% Multiple Range Tests cho ảnh hưởng pH dịch protein đến mức độ thủy phân Method: 95.0 percent LSD Nhiệt độ dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 30 17,02 X 70 17,63 X 60 19,76 X 50 22,91 X 40 23,31 X Summary Statistics cho Hiệu suất thu hồi (Alcalase) 74 Standard Variation deviation 30 71 0,420 0,5915% 40 82 0,465 0,567% 50 83,66 0,810 0,968% 60 79,4 0,254 0,320% 70 78,67 0,74 0,941% Total 15 78,086 4,78759 5,7476% Multiple Range Tests cho ảnh hưởng pH dịch protein đến hiệu suất thu hồi peptide/protein Method: 95.0 percent LSD pH dịch protein Count Mean Homogeneous Groups 30 71 X 60 79,4 X 70 78,67 X 40 82 X 50 83,66 X Nhiệt độ dịch protein Count Average PL4 Kết ảnh hưởng thời gian thủy phân đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp Enzym e Thời gian (h) Alcalase Khả kháng Oxi hóa (mg TE/ g protein) 25,96 26,8 25,12 31,08 31,31 30,85 37,87 39,1 36,64 34,56 36,34 32,78 31,87 32,77 30,97 28,3 29,5 27.1 Hàm lượng Phenolic tổng (gGAE/g protein) 0,721 0,732 0,71 0,719 0,728 0,71 0,711 0,757 0,665 0,703 0,79 0,616 0,689 0,741 0,637 0,69 0,783 0,597 Mức độ thủy phân (%) 12,05 13,51 10,59 20,84 21,85 19,83 24,63 25,86 23,4 30,29 31.01 29,57 35,34 36,36 34,32 38,56 39,41 37,71 Hiệu suất thu hồi protein 0 49 49,5 48,5 82 82,9 81,1 82 83,6 80,4 83 84,1 81,9 83 83,8 82,2 PL.4a Kết phân tích ANOVA ảnh hưởng thời gian thủy phân đến hoạt tính sinh học dịch thủy phân protein thu nhận từ rong Chaetomorpha sp 75 Summary Statistics cho Khả kháng OXH Enzyme Alcalase 76 Thời gian (giờ) Count Average Total 3 3 3 18 25,96 31,08 37,87 34,56 31,87 28,3 31,6067 Standard deviation 0,84 0,23 1,23 1,78 0,9 1,2 4,12119 Variation 3,24% 0,74% 3,25% 5,15% 2,82% 424% 13,04% Multiple Range Tests cho Khả kháng OXH Enzyme Alcalase Method: 95.0 percent LSD Thời gian (giờ) Count Mean Homogeneous Groups 25,96 X 28,3 X 31,08 X 31,87 X 3 34,56 X 37,87 X Summary Statistics cho Hàm lượng Phenolic tổng Enzyme Alcalase Standard Thời gian (giờ) Count Average Variation deviation 0,721 0,011 1,53% 0,719 0,009 1,25% 0,711 0,046 6,47% 3 0,703 0,087 12,38% 0,689 0,052 7,55% 0,69 0,093 13,48% Total 18 0,7055 0,0516746 7,32% Multiple Range Tests cho Hàm lượng Phenolic tổng Enzyme Alcalase Method: 95.0 percent LSD Thời gian (giờ) Count Mean Homogeneous Groups 0,689 X 0,69 X 3 0,703 X 0,711 X 0,719 X 0,721 X Summary Statistics cho Mức độ thủy phân Enzyme Alcalase Thời gian (giờ) Count 77 Average Standard deviation Variation 12,05 1,46 12,12% 20,84 1,01 4,85% 24,63 1,23 4,99% 3 30,29 0,72 2,38% 35,34 1,02 2,89% 38,56 0,85 2,20% Total 18 26,9517 9,25802 34,35% Multiple Range Tests cho Mức độ thủy phân Enzyme Alcalase Method: 95.0 percent LSD Thời gian (giờ) Count Mean 3 3 3 12,05 20,84 24,63 30,29 35,34 38,56 Homogeneous Groups X X X X X X Summary Statistics cho Hiệu suất thu hồi Enzyme Alcalase Thời gian (giờ) Count Average 3 49 82 3 82 83 83 Total 18 63,1667 Multiple Range Tests cho Hiệu suất thu hồi Enzyme Alcalase Method: 95.0 percent LSD Thời gian (giờ) Count Mean 78 Standard deviation 0,5 0,9 1,6 1,1 0,8 31,6892 Variation % 1,02% 1,10% 1,95% 1,33% 0,96% 50,17% Homogeneous Groups 3 3 3 79 49 82 82 83 83 X X X X X X PL5 Bảng kết thí nghiệm: xác định yếu tố ảnh hưởng theo mơ hình PlackettBurman Exp No Exp Name Run Order Incl/ Excl Nồng độ Enzyme (%) 10 11 12 13 14 15 16 N1 N2 N3 N4 N5 N6 N7 N8 N9 N10 N11 N12 N13 N14 N15 N16 13 10 12 16 15 14 11 Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl 2 2 2 0 0 0 80 pH 8 8 8 6 6 Thời gian thủy phân (h) 1 3 3 3 1 1 Nhiệt độ thủy phân (oC) 30 30 30 50 50 50 50 30 50 30 50 50 30 30 50 30 Kháng OXH (mg TE/g Protein) 19,89 24,27 14,72 16,45 24,05 11,25 30,47 10,94 31,01 21,08 23,17 23,11 27,26 23,63 28,79 21,87 PL5a: Bảng kết xử lý thống kê thí nghiệm: xác định yếu tố ảnh hưởng theo mơ hình Plackett-Burman DPPH Coeff SC Std Err P Conf int(±) Constant 21,9975 0,76263 1,02196e-011 1,67852 Non -3,0425 0,76263 0,00212407 1,67852 pH 1,66625 0,76263 0,0514262 1,67852 Tho -3,83625 0,76263 0,000383781 1,67852 1,54 0,76263 0,0684954 1,67852 Q2 = 0,619 Cond no = 1,0000 R2 = 0,820 Y-miss = R2 Adj = 0,754 RSD = 3,0505 N = 16 DF = 11 PL6 Bảng kết thí nghiệm: tối ưu hóa q trình thủy phân protein enzyme Exp No Exp Name Run Order Incl/Excl Nồng độ enzyme (%) N1 N2 N3 N4 N5 N6 N7 N8 N9 12 11 Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl Incl 2 2,414 1 81 Thời gian thủy phân (h) 1 3 2 0,586 3,414 Khả kháng oxi hóa (mg TE/g protein) 34,76 34,39 35,2 31,22 36,66 31,59 36,2 32,4 37,9 10 11 12 13 N10 N11 N12 N13 13 10 Incl Incl Incl Incl 1 1 82 2 2 37,86 37,98 37,87 37,89 PL6a Bảng kết xử lý thống kê thí nghiệm: tối ưu hóa q trình thủy phân protein enzyme kha nang bat goc tu Constant Non Tho non*non tho*tho non*tho N = 13 DF = Coeff SC Std Err P Conf int(±) 37,9 -1,44 -1,013 -1,968 -1,88 -0,903 0,2439 0,1928 0,1928 0,2068 0,2068 0,2726 1,20E-13 0,00014 0,00118 2,96E-05 3,99E-05 0,01294 0,5766 0,4559 0,4559 0,489 0,489 0,6447 Q2 = R2 = R2 Adj = 0,805 0,973 0,953 Cond no = Y-miss = RSD = Conf lev = 2,8971 0,5453 0,95 83 ... vận chuyển cho peptide [48] Kết nghiên cứu peptide từ đến acid amine hấp thu dễ dàng so với protein acid amine tự [49] Roberts cộng cho thấy peptide nhỏ (dipeptide tripeptide) lớn (10-51 amino... hoạt động glutathione peroxidase (GSH-Px) superoxide dismutase (SOD) giảm nồng độ malondialdehyde (MDA) in vivo Đặc tính chống oxi hóa peptide có liên quan đến thành phần, cấu trúc, tính kị nước... hợp, vị trí chúng chuỗi peptide đóng vai trị quan trọng hoạt động chống oxi hóa peptide [33] M Chen cộng (1996) tiến hành tổng hợp 28 peptide theo cấu trúc peptide chống oxy hóa (Leu-Leu-Pro-His-His)