Nghiên Cứu, Thu Nhận Protein Từ Sinh Khối Rong Nước Lợ (Chaetomorpha Sp.) Để Ứng Dụng

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - BẠCH NGỌC MINH NGHIÊN CỨU, THU NHẬN PROTEIN TỪ SINH KHỐI RONG NƯỚC LỢ (Chaetomorpha sp.) ĐỂ ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Tp Hồ Chí Minh - 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Bạch Ngọc Minh NGHIÊN CỨU, THU NHẬN PROTEIN TỪ SINH KHỐI RONG NƯỚC LỢ (Chaetomorpha sp.) ĐỂ ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã sỗ: 42 02 01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS Hoàng Kim Anh PGS.TSKH Ngơ Kế Sương Tp Hồ Chí Minh - 2020 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu khoa học độc lập riêng tơi hướng dẫn khoa học PGS.TS Hoàng Kim Anh PGS.TSKH Ngô Kế Sương Các số liệu sử dụng phân tích luận án có nguồn gốc rõ ràng, công bố theo quy định Các kết nghiên cứu luận án tự bố trí thí nghiệm, phân tích số liệu cách trung thực, khách quan Các kết chưa công bố nghiên cứu khác Nghiên cứu sinh Bạch Ngọc Minh ii LỜI CẢM ƠN Để hồn thành luận án tiến sĩ này, tơi xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Hồng Kim Anh PGS.TSKH Ngơ Kế Sương tận tình hướng dẫn suốt trình nghiên cứu thực nghiệm q trình chỉnh sửa nội dung luận án Tơi chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo đồng nghiệp Viện Sinh học Nhiệt đới tạo điều kiện thuận lợi để giúp tơi hồn thành luận án Tôi đặc biệt cảm ơn PGS.TS Nguyễn Thị Phương Thảo bạn Phòng Quản lý Tổng hợp hỗ trợ tơi thủ tục hành dể hoàn thành trinhg học tập thực luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn đến Học viện Khoa học Công nghệ hỗ trợ tơi mặt hành tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình học tập thực luận án Học viện Tôi xin cảm ơn đồng nghiệp Phịng Cơng nghệ Biến đổi Sinh học, nơi công tác, hộ trợ cơng việc tạo nhiều điều kiện thuận lợi để tơi có thời gian học tập thực luận án Tôi chân thành gửi lời cảm ơn đến đơn vị hợp tác: Đại học Khoa học Tự nhiên Tp.Hồ Chí Minh, Bệnh viện 115, Trung tâm phân tích Kỹ thuật cao Sài Gịn, Viện Cơng nghệ Nano, Trung tâm Sâm Dược liệu hỗ trợ tơi q trình thực luận án Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến gia đình, ln bên cạnh nguồn động viên to lớn cho tơi để hồn thành q trình học tập nghiên cứu Trân trọng Bạch Ngọc Minh iii MỤC LỤC Trang LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC CÁC BẢNG viii DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ x MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan rong 1.1.1 Tổng quan rong biển 1.1.2 Rong lục 1.1.3 Rong Chaetomorpha 1.2 Protein thu nhận từ rong 1.2.1 Đặc điểm protein thu nhận từ rong 1.2.2 Thành phần acid amin rong 10 1.2.3 Protein có hoạt tính sinh học 11 1.2.4 Khả tiêu hoá protein 12 1.3 Kỹ thuật thu nhận protein 13 1.3.1 Kỹ thuật trích ly protein 13 1.3.2 Kỹ thuật tinh protein 15 1.3.2.1 Phương pháp kết tủa 15 1.3.2.2 Phương pháp thẩm tích 17 1.3.2.3 Phương pháp sắc kí 18 1.3.2.4 Phương pháp lọc membrane 18 1.4 Phân tích tính chất chế phẩm protein concentrate 19 1.4.1 Tính chất sinh học chế phẩm protein concentrate 19 1.4.2 Tính chất chức chế phẩm protein concentrate 20 1.4.2.1 Khả hòa tan protein 21 iv 1.4.2.2 Khả hấp thu nước protein 21 1.4.2.3 Khả tạo gel 21 1.4.2.4 Khả tạo bọt 22 1.4.2.5 Khả tạo làm bền nhũ tương 22 1.4.3 Giá trị dinh dưỡng chế phẩm protein concentrate 23 1.4.3.1 Tiêu hóa protein hấp thu protein 23 1.4.3.2 Đánh giá giá trị dinh dưỡng protein điều kiện in vitro 24 1.4.2.3 Đánh giá giá trị dinh dưỡng protein điều kiện in vivo 24 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 27 2.1 Vật liệu nghiên cứu 27 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 27 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị, hoá chất 27 2.2 Sơ đồ nghiên cứu 28 2.3 Phương pháp bố trí thí nghiệm 30 2.3.1 Xác định nhóm protein rong 30 2.3.2 Khảo sát ảnh hưởng trình xử lý nguyên liệu đến hiệu suất trích ly protein 31 2.3.3 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố đến q trình trích ly protein tan nước có hỗ trợ enzyme cellulase 31 2.3.4 Tối ưu hóa q trình trích ly protein tan kiềm có hỗ trợ enzyme 33 2.3.5 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố đến q trình trích ly nhóm protein tan kiềm dung môi NaOH 34 2.3.6 Tối ưu hóa q trình trích ly nhóm protein tan kiềm dung mơi NaOH 34 2.3.7 Nghiên cứu trình tinh protein 35 2.3.7.1 Khảo sát trình kết tủa đẳng điện 35 2.3.7.2 Khảo sát trình kết tủa protein ethanol 35 2.3.7.3 Khảo sát trình kết tủa protein muối (NH4)2SO4 36 2.3.7.4 Nâng cao hàm lượng protein phương pháp thẩm tích 36 2.3.8 Nghiên cứu đặc điểm hình thái cấu trúc chế phẩm protein từ rong 36 2.3.9 Xác định tính chất sinh học chế phẩm protein concentrate 37 2.3.9.1 Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn 37 2.3.9.2 Thử nghiệm khả kháng oxy hoá 37 v 2.3.10 Xác định tính chất chức protein 38 2.3.11 Đánh giá giá trị dinh dưỡng điều kiện in vitro 38 2.3.11.1 Khả tiêu hóa – in vitro protein digestibility (IVPD) 38 2.3.11.2 Chỉ số AAS – Amino acid score 39 2.3.11.3 Chỉ số PDCAAS (Protein Digestibility Corrected Amino Acid Scoring) 39 2.3.12 Đánh giá giá trị dinh dưỡng điều kiện in vivo 39 2.4 Phương pháp phân tích 40 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 41 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 3.1 Thành phần protein rong 42 3.1.1 Xác định thành phần sinh hóa rong 42 3.1.2 Xác định nhóm protein rong 44 3.2 Khảo sát ảnh hưởng trình xử lý nguyên liệu đến hiệu suất trích ly protein 46 3.3 Q trình trích ly nhóm protein tan nước với hỗ trợ cellulase 47 3.3.1 Ảnh hưởng yếu tố đến q trình trích ly protein với hỗ trợ cellulase 47 3.3.2 Tối ưu hóa q trình trích ly nhóm protein tan nước 52 3.4 Khảo sát q trình trích ly nhóm protein tan kiềm dung môi NaOH 55 3.4.1 Ảnh hưởng yếu tố cơng nghệ đến q trình trích ly protein NaOH 55 3.4.2 Tối ưu hố q trình trích ly nhóm protein tan kiềm 58 3.5 Đánh giá hiệu trích ly protein phương pháp 61 3.6 Nghiên cứu trình tinh protein 64 3.6.1 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố đến trình kết tủa đẳng điện 64 3.6.2 Khảo sát ảnh hưởng yếu tố đến trình kết tủa protein ethanol 66 3.6.3 Khảo sát trình kết tủa protein (NH4)2SO4 67 3.6.4 So sánh hiệu phương pháp kết tủa protein 70 3.7 Xác định tính chất chế phẩm protein concentrate 72 3.7.1 Thành phần protein chế phẩm protein concentrate 72 3.7.2 Thành phần acid amin chế phẩm protein 72 3.7.3 Hình thái cấu trúc chế phẩm protein concentrate 74 3.8 Xác định tính chất sinh học chế phẩm protein concentrate 81 3.8.1 Thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn 81 vi 3.8.2 Thử nghiệm khả kháng oxy hóa chế phẩm protein từ rong 83 3.8.2.1 Khả bắt gốc tự DPPH 83 3.8.2.2 Khả trung hoà gốc tự ABTS•+ 85 3.8.2.3 Đánh giá khả kết hợp với ion Fe2+ 86 3.8.2.4 Đánh giá hoạt tính ức chế peroxy hóa lipid tế bào (thử nghiệm MDA) 87 3.9 Xác định tính chất chức protein 89 3.9.1 Khả hòa tan 89 3.9.2 Khả hấp thu nước 90 3.9.3 Khả tạo bọt ổn định hệ bọt thực phẩm 92 3.9.4 Khả tạo gel 93 3.9.5 Khả tạo nhũ 94 3.10 Đánh giá giá trị dinh dưỡng điều kiện in vitro 96 3.10.1 Khả tiêu hóa – in vitro protein digestibility (IVPD) 96 3.10.2 Chỉ số AAS PDCAAS 97 3.11 Đánh giá giá trị dinh dưỡng chế phẩm APC-K điều kiện in vivo 99 3.11.1 Nhóm sử dụng thức ăn không chứa protein 100 3.11.2 Nhóm sử dụng thức ăn chứa protein 100 3.11.3 Hệ số tăng trọng (PER) tỷ lệ hấp thu protein tịnh (NPR) 102 3.11.4 Giá trị sinh học (Biological value – BV) 103 3.11.5 Các số máu chuột thí nghiệm 105 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 106 Kết luận 106 Đề nghị 107 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 108 TÀI LIỆU THAM KHẢO 109 PHỤ LỤC 123 vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT APC algae protein concentrate protein cô đặc từ rong PC protein concentrate protein cô đặc PI protein isolate protein lập SFE supercritical fluid extraction trích ly CO2 siêu tới hạn PLE pressurized liquid extraction trích ly dung mơi lỏng SEM scanning electron microscope kính hiển vi điện tử quét MF micro filtration vi lọc NF nano filtration lọc nano UF ultra filtration siêu lọc RO reverse osmosis thẩm thấu ngược BV biological value giá trị sinh học PER protein efficiency ratio hệ số tăng trọng lượng NPR Net Protein Ratio tỉ lệ hấp thu protein tịnh AAS điểm acid amin amino acid score PDCAAS Protein Digestibility Corrected Amino Acid Scoring số tiêu hoá protein dựa theo acid amin ATCC American Type Culture Collection Bảo tàng giống chuẩn vi sinh vật Mỹ viii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Trang Bảng 2.1 Bố trí thí nghiệm cho trình tiền xử lý nguyên liệu 31 Bảng 2.2 Bố trí thí nghiệm khảo sát q trình trích ly protein có hỗ trợ enzyme 32 Bảng 2.3 Mơ hình tối ưu hóa yếu tố với thí nghiệm tâm 33 Bảng 2.4 Bố trí thí nghiệm nghiên cứu trình trích ly protein tan kiềm dung mơi NaOH 34 Bảng 2.5 Mơ hình tối ưu hóa yếu tố với thí nghiệm tâm 35 Bảng 2.6 Thành phần thức ăn thiết kế theo AIN 93 dành cho chuột trưởng thành [101] 40 Bảng 3.1 Kết phân tích thành phần sinh hóa rong 43 Bảng 3.2 Kết phân tích nhóm protein rong Chaetomorpha sp 45 Bảng 3.3 Ảnh hưởng pH đến hàm lượng Phycocyanin protein tan nước 48 Bảng 3.4 Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi nồng độ enzyme đến hàm lượng Phycocyanin protein tan nước 49 Bảng 3.5 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hàm lượng Phycocyanin protein tan nước 50 Bảng 3.6 Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng Phycocyanin protein tan nước 51 Bảng 3.7 Mơ hình quy hoạch thực nghiệm kết q trình trích ly nhóm protein tan nước hỗ trợ enzyme 53 Bảng 3.8 Ảnh hưởng biến độc lập đến hiệu suất trích ly protein 54 Bảng 3.9 Ảnh hưởng nồng độ tỷ lệ dung môi đến hiệu suất trích ly nhóm protein tan kiềm 56 Bảng 3.10 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hiệu suất trích ly nhóm protein tan kiềm 57 Bảng 3.11 Ảnh hưởng thời gian đến hiệu suất trích ly nhóm protein tan kiềm 58 Multiple Range Tests Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết protein tan nước Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 40% 37.3378 X 90% 38.8167 X 50% 44.9403 X 80% 46.5181 XX 60% 51.4091 X 70% 58.7595 X B21.3 Ảnh hưởng nồng độ muối đến hiệu suất thu hồi protein tan kiềm ANOVA Table Ảnh hưởng nồng độ muối đến hiệu suất thu hồi protein tan kiềm Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 909.901 181.98 30.83 0.0000 Within groups 70.8423 12 5.90352 Total (Corr.) 980.743 17 Multiple Range Tests Ảnh hưởng nồng độ muối đến hiệu suất thu hồi protein tan kiềm Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 90% 41.9165 X 40% 55.4269 X 80% 58.0667 XX 50% 58.2556 XX 60% 61.9067 XX 70% 63.8985 X B21.4 Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết protein tan kiềm ANOVA Table Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết protein tan kiềm Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 863.511 172.702 26.13 0.0000 Within groups 79.3269 12 6.61058 Total (Corr.) 942.838 17 Multiple Range Tess Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết protein tan kiềm Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 90% 39.4006 X 80% 54.1358 X 40% 56.1417 XX 50% 57.4088 XX 70% 58.66 XX 60% 60.135 X B21.5Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết phycocyanin Nồng độ muối Hàm lượng PC Hiệu suất thu STT Tỉ số A620/A280 (%) (mg/g rong) hồi (%) a a 40 (0,222±0,017) (0,95±0,021) (35,98±2,827)a 50 (0,286±0,005)b (1,13±0,040)b (46,22±0,814)b 60 (0,371±0,006)c (1,19±0,026)c (60,03±0,901)c 70 (0,416±0,008)d (1,24±0,032)cd (67,31±1,284)d d d 80 (0,421±0,009) (1,27±0,035) (68,12±1,411)d ANOVA Table Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết phycocyanin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.183373 0.0458433 45.84 0.0000 Within groups 0.01 10 0.001 Total (Corr.) 0.193373 14 Multiple Range Tests Ảnh hưởng nồng độ muối đến độ tinh khiết phycocyanin Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 40% 0.953333 X 50% 1.13 X 60% 1.19 X 70% 1.23333 XX 80% 1.26667 X B21.6 Ảnh hưởng nồng độ muối đến hiệu suất thu hồi phycocyanin ANOVA Table Ảnh hưởng nồng độ muối đến hiệu suất thu hồi phycocyanin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2359.97 589.993 225.03 0.0000 Within groups 26.2181 10 2.62181 Total (Corr.) 2386.19 14 Multiple Range Tests Ảnh hưởng nồng độ muối đến hiệu suất thu hồi phycocyanin Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 40% 35.9763 X 50% 46.2244 X 60% 60.0324 X 70% 67.3139 X 80% 68.123 X B22 Khảo sát ảnh hưởng thời gian tủa muối đến trình tủa protein Protein tan nước Protein tan kiềm Thời gian tủa Hiệu suất Độ tinh khiết Hiệu suất Độ tinh khiết (phút) thu hồi (%) (%) thu hồi (%) (%) (39,21 ± 2,04)a (34,87 ± 3,62)a (41,59 ± 1,76)a (39,51 ± 3,06)a (48,49 ± 2,42)b (46,06 ± 3,54)b (52,96 ± 1,86)b (52,61 ± 2,28)b 10 20 (53,11 ± 1,41)c (53,39 ± 4,46)bc (57,92 ± 1,73)c (56,03 ± 2,66)bc 30 (62,86 ± 1,84)d (58,77 ± 3,79)c (61,58 ± 1,32)cd (60,05 ± 1,42)cd 40 (63,47 ± 0,96)d (60,79 ± 4,16)c (65,29 ± 1,57)d (62,29 ± 2,62)d (63,59 ± 4,98)d (59,05 ± 7,25)c (63,62 ± 3,47)d (63,31 ± 4,80)d 50 60 (64,35 ± 1,67)d (57,59 ± 3,46)c (58,31 ± 2,68)c (62,47 ± 4,01)d B22.1 Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến hiệu suất thu hồi protein tan nước ANOVA Table Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến hiệu suất thu hồi protein tan nước Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1727.0 287.833 45.86 0.0000 Within groups 87.8608 14 6.27577 Total (Corr.) 1814.86 20 Multiple Range Tests Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến hiệu suất thu hồi protein tan nước Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups phút 39.2063 X 10 phút 48.4918 X 20 phút 53.1107 X 30 phút 62.865 X 40 phút 63.4668 X 50 phút 63.5884 X 60 phút 64.3551 X B22.2 Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến độ tinh khiết protein tan nước ANOVA Table Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến độ tinh khiết protein tan nước Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1585.52 264.253 13.03 0.0001 Within groups 283.893 14 20.2781 Total (Corr.) 1869.41 20 Multiple Range Tests Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến độ tinh khiết protein tan nước Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups phút 34.8726 X 10 phút 46.0634 X 20 phút 53.3929 XX 60 phút 57.5922 X 30 phút 58.7699 X 50 phút 59.0471 X 40 phút 60.792 X B22.3 Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến hiệu suất thu hồi protein tan kiềm ANOVA Table Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến hiệu suất thu hồi protein tan kiềm Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1167.61 194.602 41.26 0.0000 Within groups 66.0347 14 4.71676 Total (Corr.) 1233.65 20 Multiple Range Tests Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến hiệu suất thu hồi protein tan kiềm Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups phút 41.5937 X 10 phút 52.9639 X 20 phút 57.9176 X 60 phút 58.3147 X 30 phút 61.5852 XX 50 phút 63.6221 X 40 phút 65.2986 X B22.4 Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến độ tinh khiết protein tan kiềm ANOVA Table Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến độ tinh khiết protein tan kiềm Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 1296.07 216.011 21.70 0.0000 Within groups 139.369 14 9.95491 Total (Corr.) 1435.44 20 Multiple Range Tets Ảnh hưởng thời gian tủa muối đến độ tinh khiết protein tan kiềm Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups phút 39.5109 X 10 phút 52.6115 X 20 phút 56.0301 XX 30 phút 60.0495 XX 40 phút 62.2927 X 60 phút 62.4715 X 50 phút 63.3063 X B22.5 Ảnh hưởng thời gian tủa đến độ tinh khiết phycocyanin STT Thời gian tủa (phút) 10 20 30 40 50 60 Hàm lượng PC (mg/g rong) (0,233±0,008)a (0,256±0,006)b (0,345±0,007)c (0,425±0,005)d (0,427±0,003)d (0,428±0,005)d (0,430±0,003)d Tỉ số A620/A280 (0,89±0,031)a (0,98±0,032)b (1,17±0,026)c (1,26±0,029)e (1,23±0,035)de (1,20±0,030)cd (1,24±0,020)de Hiệu suất thu hồi (%) (37,70±1,298)a (41,42±1,010)b (55,83±1,169)c (67,64±0,815)d (68,77±0,494)d (69,58±0,762)d (70,06±0,403)d ANOVA Table Ảnh hưởng thời gian tủa đến độ tinh khiết phycocyanin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.366629 0.0611048 70.90 0.0000 Within groups 0.0120667 14 0.000861905 Total (Corr.) 0.378695 20 Multiple Range Tests Ảnh hưởng thời gian tủa đến độ tinh khiết phycocyanin Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups phút 0.893333 X 10 phút 0.983333 X 20 phút 1.17 X 50 phút 1.2 XX 40 phút 1.23333 XX 60 phút 1.24 XX 30 phút 1.25667 X B22.6 Ảnh hưởng thời gian tủa đến hiệu suất thu hồi phycocyanin ANOVA Table Ảnh hưởng thời gian tủa đến hiệu suất thu hồi phycocyanin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3574.18 595.697 728.36 0.0000 Within groups 11.4501 14 0.817862 Total (Corr.) 3585.63 20 Multiple Range Tests Ảnh hưởng thời gian tủa đến hiệu suất thu hồi phycocyanin Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups phút 37.65 X 10 phút 41.4233 X 20 phút 55.8267 X 30 phút 68.7167 X 40 phút 69.15 X 50 phút 69.31 X 60 phút 69.6333 X B23 Kết hiệu ức chế vi khuẩn chế phẩm protein Hàm lượng protein (mg/ml) 10 Kanamycin 10µg/ml S aureus Vùng ức chế vi khuẩn (cm) E coli APC.N APC.K APC.N APC.K 0 0 0,167 ± 0,115 0 0,367 ± 0,057 0,467 ± 0,057 0,600 ± 0,100 0 0 0,233 ± 0,057 0 0 0,467 ± 0,115 0,567 ± 0,115 0,3 ± 0,1 1,0 ± 0,1 P aeruginosa APC.N 0 0 0 0,67 ± 0,15 APC.K 0 0 0,533 ± 0,057 0,633 ± 0,115 Hình Vịng vơ khuẩn chế phẩm protein APC.K với ba chủng vi khuẩn S aureus, E coli P aeruginosa nồng độ 10mg/ml B24 Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein B24.1 Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein APC.N ANOVA Table Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein APC.N Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 8101.65 2025.41 91.48 0.0000 Within groups 221.404 10 22.1404 Total (Corr.) 8323.05 14 Multiple Range Tests Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein APC.N Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 4.66 µg/ml 15.64 X 9.31 µg/ml 29.0443 X 19.531 µg/ml 64.2804 X 39.063 µg/ml 67.3818 XX 78.125 µg/ml 73.9742 X B24.2 Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein APC.K ANOVA Table Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein APC.K Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 6359.14 1589.79 177.35 0.0000 Within groups 89.6418 10 8.96418 Total (Corr.) 6448.78 14 Multiple Range Tests Tỷ lệ % hoạt tính bắt gốc tự DPPH chế phẩm protein APC.K Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 19.531 µg/ml 5.66533 X 39.063 µg/ml 8.263 X 78.125 µg/ml 23.2182 X 156.25 µg/ml 49.6957 X 312.5 µg/ml 55.1767 X B25 Tỷ lệ % hoạt tính trung hồ gốc tự ABTS•+ ANOVA Table Tỷ lệ % hoạt tính trung hồ gốc tự ABTS•+của chế phẩm protein APC.N Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 7357.19 1839.3 131.94 0.0000 Within groups 139.399 10 13.9399 Total (Corr.) 7496.59 14 Multiple Range Tests Tỷ lệ % hoạt tính trung hồ gốc tự ABTS•+của chế phẩm protein APC.N Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 11.46 (µg/ml) 12.766 X 22.92 (µg/ml) 30.8798 X 45.83 (µg/ml) 53.9965 X 91.67 (µg/ml) 68.4301 X 183.33 (µg/ml) 69.6377 X B26 Tỷ lệ % hoạt tính kết hợp ion Fe2+ ANOVA Table Tỷ lệ % hoạt tính kết hợp ion Fe2+của chế phẩm protein APC.N Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 7179.69 1794.92 126.10 0.0000 Within groups 142.337 10 14.2337 Total (Corr.) 7322.03 14 Multiple Range Tests Tỷ lệ % hoạt tính kết hợp ion Fe2+của chế phẩm protein APC.N Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 8.59 (µg/ml) 19.3642 X 17.19 (µg/ml) 36.7052 X 34.38 (µg/ml) 54.3353 X 68.75 (µg/ml) 69.3642 X 137.50 (µg/ml) 80.0578 X B27 Tỷ lệ % hoạt tính ức chế peroxy hóa lipid tế bào ANOVA Table Tỷ lệ % hoạt tính ức chế peroxy hóa lipid tế bào chế phẩm protein APC.N Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2910.71 727.677 278.48 0.0000 Within groups 26.1299 10 2.61299 Total (Corr.) 2936.84 14 Multiple Range Tests Tỷ lệ % hoạt tính ức chế peroxy hóa lipid tế bào chế phẩm protein APC.N Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups 4.30 (µg/ml) 29.8447 X 8.59 (µg/ml) 33.755 X 17.19 (µg/ml) 45.8309 X 34.38 (µg/ml) 58.8269 X 68.75 (µg/ml) 65.9574 X B28 Cơng suất tạo bọt (FC) độ bền bọt (FS) protein B28.1 Công suất tạo bọt (FC) protein ANOVA Table Công suất tạo bọt (FC) protein Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 128.25 42.75 7.43 0.0106 Within groups 46.0 5.75 Total (Corr.) 174.25 11 Multiple Range Tests Công suất tạo bọt (FC) protein Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups APC.K 40.0 X Protein từ đậu nành 40.0 X APC.N 43.0 X Casein 48.0 X B28.2 Độ bền bọt (FS) protein ANOVA Table Độ bền bọt (FS) protein Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 4160.25 1386.75 346.69 0.0000 Within groups 32.0 4.0 Total (Corr.) 4192.25 11 Multiple Range Tests Độ bền bọt (FS) protein Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Casein 40.0 X Protein từ đậu nành 75.0 X APC.N 78.0 X APC.K 90.0 X B29 Khả hoà tan protein B29.1 Khả hoà tan protein pH3.0 ANOVA Table Khả hoà tan protein pH3.0 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 5433.31 1811.1 399.54 0.0000 Within groups 36.2641 4.53301 Total (Corr.) 5469.57 11 Multiple Range Tests Khả hoà tan protein pH3.0 Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups APC.N 1.3 X APC.K 2.4 X Protein từ đậu nành 6.8 X Casein 6.93333 X B29.2 Khả hoà tan protein pH7.0 ANOVA Table Khả hoà tan protein pH7.0 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 12234.6 4078.21 1357.48 0.0000 Within groups 24.0341 3.00426 Total (Corr.) 12258.7 11 Multiple Range Tests Khả hoà tan protein pH7.0 Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Casein 0.366667 X Protein từ đậu nành 7.66667 X APC.N 7.66667 X APC.K 10.3333 X B29.3 Khả hoà tan protein pH10.0 ANOVA Table Khả hoà tan protein pH10.0 Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 12158.4 4052.79 1340.50 0.0000 Within groups 24.1867 3.02333 Total (Corr.) 12182.5 11 Multiple Range Tests Khả hoà tan protein pH10.0 Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups APC.N 7.9 X Casein 9.1 X APC.K 12.4667 X Protein từ đậu nành 13.9 X B30 Khả hấp thu nước protein ANOVA Table Khả hấp thu nước protein Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 4781.83 1593.94 932.83 0.0000 Within groups 13.6698 1.70873 Total (Corr.) 4795.5 11 Multiple Range Tests Khả hấp thu nước protein Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Casein 10.5 X APC.K 18.5 X Protein từ đậu nành 49.33 X APC.N 57.8 X B31 Khả tạo nhũ protein B31.1 Chỉ số hoạt động nhũ tương (EAI) ANOVA Table số hoạt động nhũ tương (EAI) protein Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 701.803 233.934 295.92 0.0000 Within groups 6.32427 0.790533 Total (Corr.) 708.127 11 Multiple Range Tests số hoạt động nhũ tương (EAI) protein Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups APC.N 54.2 X Casein 65.7333 X Protein từ đậu nành 67.0 X APC.K 75.7 X B31.2 Chỉ số ổn định nhũ tương (ESI) ANOVA Table Chỉ số ổn định nhũ tương (ESI) protein Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2023.46 674.486 448.03 0.0000 Within groups 12.0436 1.50545 Total (Corr.) 2035.5 11 Multiple Range Tests Chỉ số ổn định nhũ tương (ESI) protein Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Casein 14.16 X Protein từ đậu nành 15.76 X APC.N 34.5 X APC.K 45.1 X B32 Khả tiêu hóa – in vitro protein digestibility (IVPD) ANOVA Table Khả tiêu hóa Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 238.82 79.6066 29.53 0.0001 Within groups 21.5635 2.69544 Total (Corr.) 260.383 11 Multiple Range Tests Khả tiêu hóa Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups APC-N 79.0133 X APC-K 83.8067 X Protein đậu nành 84.2 X Casein 91.5 X B33 Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn protein APC ANOVA Table Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn protein APC Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 404.208 101.052 255.47 0.0000 Within groups 7.9112 20 0.39556 Total (Corr.) 412.119 24 Multiple Range Tests Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn protein APC Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Ban đầu 18.882 X Nuôi tuần 21.656 X Nuôi tuần 23.84 X Nuôi tuần 28.034 X Nuôi tuần 29.818 X B34 Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn protein đậu nành ANOVA Table Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn protein đậu nành Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 461.841 115.46 206.63 0.0000 Within groups 11.1756 20 0.558782 Total (Corr.) 473.017 24 Multiple Range Tests Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn protein đậu nành Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Ban đầu 18.768 X Nuôi tuần 21.198 X Nuôi tuần 24.728 X Nuôi tuần 28.032 X Nuôi tuần 30.516 X B35 Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn thức ăn thường ANOVA Table Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn thức ăn thường Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 328.979 82.2448 187.65 0.0000 Within groups 8.766 20 0.4383 Total (Corr.) 337.745 24 Multiple Range Tests Trọng lượng chuột sau tuần nuôi nguồn thức ăn thường Method: 95.0 percent LSD Count Mean Homogeneous Groups Ban đầu 18.758 X Nuôi tuần 21.0 X Nuôi tuần 23.202 X Nuôi tuần 26.096 X Nuôi tuần 29.004 X B36 Hệ số tăng trọng (PER) ANOVA Table Hệ số tăng trọng Source Sum of Squares Df Between groups 6.11044 Within groups 0.35192 12 Total (Corr.) 6.46236 14 Multiple Range Tests Hệ số tăng trọng Method: 95.0 percent LSD AIN-93 với thức ăn thường AIN-93 với APC AIN-93 với protein đậu nành Mean Square 3.05522 0.0293267 Count 5 Mean 0.848 2.116 2.274 B37 Tỷ lệ hấp thu protein tịnh (NPR) ANOVA Table Tỷ lệ hấp thu protein tịnh Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 13.6367 6.81833 Within groups 0.74048 12 0.0617067 Total (Corr.) 14.3771 14 Multiple Range Tests Tỷ lệ hấp thu protein tịnh Method: 95.0 percent LSD Count Mean AIN-93 với thức ăn thường 1.352 AIN-93 với APC 3.282 AIN-93 với protein đậu nành 3.456 F-Ratio 104.18 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X F-Ratio 110.50 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X B37 Giá trị sinh học (Biological value – BV) ANOVA Table Giá trị sinh học Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 1616.54 808.268 Within groups 163.099 12 13.5916 Total (Corr.) 1779.64 14 Multiple Range Tests Giá trị sinh học Method: 95.0 percent LSD Count Mean AIN-93 với thức ăn thường 54.214 AIN-93 với protein đậu nành 70.254 AIN-93 với APC 79.322 B38 Các số máu chuột thí nghiệm B38.1 Nồng độ glucose ANOVA Table Nồng độ glucose Source Sum of Squares Df Between groups 58.5387 Within groups 0.128549 Total (Corr.) 58.6673 Multiple Range Tests Nồng độ glucose Method: 95.0 percent LSD Mean Square 29.2694 0.0214249 Count 3 Mean 2.2 3.55667 8.15933 Protein đậu nành APC Thức ăn thường B38.2 Nồng độ Triglyceride ANOVA Table Nồng độ Triglyceride Source Sum of Squares Df Mean Square Between groups 0.150365 0.0751823 Within groups 0.0117273 0.00195456 Total (Corr.) 0.162092 Multiple Range Tests Nồng độ Triglyceride Method: 95.0 percent LSD Count Mean Protein đậu nành 1.19033 APC 1.36 Thức ăn thường 1.50667 F-Ratio 59.47 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X F-Ratio 1366.14 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X F-Ratio 38.47 P-Value 0.0004 Homogeneous Groups X X X B38.3 Nồng độ HDL-C ANOVA Table Nồng độ HDL-C Source Sum of Squares Df Between groups 0.195489 Within groups 0.0204667 Total (Corr.) 0.215956 Multiple Range Tests Nồng độ HDL-C Method: 95.0 percent LSD Protein đậu nành APC Thức ăn thường B38.4 Nồng độ LDL-C ANOVA Table Nồng độ LDL-C Source Sum of Squares Df Between groups 1.06416 Within groups 0.0297333 Total (Corr.) 1.09389 Multiple Range Tests Nồng độ LDL-C Method: 95.0 percent LSD Protein đậu nành APC Thức ăn thường Mean Square 0.0977444 0.00341111 Count 3 Mean 1.15 1.30667 1.51 Mean Square 0.532078 0.00495556 Count 3 Mean 1.62667 1.87 2.44667 F-Ratio 28.65 P-Value 0.0009 Homogeneous Groups X X X F-Ratio 107.37 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X ... Minh NGHIÊN CỨU, THU NHẬN PROTEIN TỪ SINH KHỐI RONG NƯỚC LỢ (Chaetomorpha sp.) ĐỂ ỨNG DỤNG TRONG CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM Chuyên ngành: Công nghệ Sinh học Mã sỗ: 42 02 01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH. .. 8 1.2 Protein thu nhận từ rong 1.2.1 Đặc điểm protein thu nhận từ rong Các nhà nghiên cứu rong biển chứa nhiều nguồn dinh dưỡng có lợi carbohydrate, protein, khống chất vitamin Protein rong biển... [71] Sử dụng siêu lọc để thu nhận protein mục tiêu nhiều nghiên cứu để tìm quy trình tối ưu ứng dụng vào thực tiễn sản xuất Đặc biệt người ta sử dụng phương pháp để thu loại protein từ rong Protein