BÁO CÁO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH TRÍCH LY DỊCH CHIẾT LÁ ĐINH LĂNG CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ĐỒNG HÓA CƠ

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM BÁO CÁO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU Q TRÌNH TRÍCH LY DỊCH CHIẾT LÁ ĐINH LĂNG CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ĐỒNG HĨA CƠ GVHD: TRẦN CHÍ HẢI SVTH: TP HỒ CHÍ MINH, 2019 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU Q TRÌNH TRÍCH LY DỊCH CHIẾT LÁ ĐINH LĂNG CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME αAMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ĐỒNG HÓA CƠ GVHD: TRẦN CHÍ HẢI SVTH: TRẦN THÁI BẢO MSSV: 2005150356 TP HỒ CHÍ MINH, 2019 LỚP: 06DHTP6 BỘ CƠNG THƯƠNG CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP Độc lập – Tự – Hạnh phúc THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM BẢN NHẬN XÉT Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài: (Số lượng sinh viên: 1) (2) Trần Thái Bảo .MSSV: 2005150356 .Lớp: 06DHTP6 Tên đề tài:“nghiên cứu q trình trích ly dịch chiết đinh lăng có khả kháng enzyme α-amylase với hỗ trợ đồng hóa cơ” Nhận xét giảng viên hướng dẫn: - Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: - Về nội dung kết nghiên cứu: - Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc SV bảo vệ trước Hội đồng: Đồng ý Khơng đồng ý TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2019 GVHD (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CAM ĐOAN Chúng xin cam đoan là cơng trình nghiên cứu của chúng tơi Các kết quả nghiên cứu và các kết luận luận án này là trung thực, và không chép từ bất cứ một nguồn nào và dưới bất kỳ hình thức nào Việc tham khảo các nguồn tài liệu đã được thực hiện trích dẫn và ghi nguồn tài liệu tham khảo đúng theo yêu cầu Sinh viên thực (Ký tên, ghi rõ họ tên) Trần Thái Bảo i TÓM TẮT LUẬN VĂN Xã hội ngày phát triển thi nhu cầu cải thiện sức khỏe phải tăng theo Bên cạnh việc phòng chữa trị bệnh theo Tây y, có nhiều thuốc dân gian Đơng y sử dụng sử dụng nguồn dược liệu từ thiên nhiên Trong số có đinh lăng xem loại dược liệu quý Lá đinh lăng chứa nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học saponin triterpenoid, alcaloid, vitamin B1, B2, B6, vitamin C, 20 acid amin, glycosid, phytosterol, tanin, acid hữu cơ, tinh dầu, nhiều nguyên tố vi lượng, đường, acid oleanolic Đặc biệt, hợp chất Saponin triterpenoid ý vid cấu trúc đặc biệt tác dụng sinh học đa dạng Saponin có khả chữa loại bện hạ đường huyết, hạ cholesterol, tăng cường hệ miễn dịch,… kiểm chứng Trong nghiên cứu này, tơi xây dựng quy trình sản xuất sử dụng đồng hóa để thu nhận dịch trích đinh lăng giàu hợp chất có hoạt tính sinh học đặc biệt saponin triterpenoid Nghiên cứu ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu:dung môi, thời gian, công suất đồng hóa ảnh hưởng đến hàm lượng saponin triterpenoid có dịch chiết từ đinh lăng khô Kết thu sử dụng tỷ lệ nguyên liệu:nước 1:30, đồng hóa 6000 vịng/phút thời gian phút thu dịch đặc có hàm lượng 1.349 mg saponin triterpenoid/1g mẫu, khả kháng enzyme α-amylase tương đương 10.077 mg Acabose/g mẫu, khả kháng oxy hóa tương đương 5.607 mg Trolox/g mẫu Sau đó,tìm vùng tối ưu hóa cho q trình, thực khảo sát mơ hình bề mặt, với hỗ trợ phần mềm Modde 5.0, nhằm tìm điều kiện trích ly với hàm lượng Saponin triterpenoid có hoạt tính kháng enzyme α-amylase cao ii LỜI CẢM ƠN Là sinh viên năm cuối, trải nhiệm vụ cuối thực nghiên cứu đề tài khóa luận tốt nghiệp để hồn tất chương trình đào tạo đại học Chúng tơi gặp khơng khó khăn Tuy nhiên, hội để chúng tơi ứng dụng học vào thực tế, tích lũy thêm nhiều kiến thức có liên quan thuộc chuyên ngành, có chuẩn bị sau trường Để có kết khơng thể khơng kể đến hỗ trợ, giúp đỡ quan trọng từ nhiều phía dành cho Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến: Ban Giám Hiệu trường Đại học Công Nghiệp Thực Phẩm thành phố Hồ Chí Minh, Ban lãnh đạo Khoa Công Nghệ Thực Phẩm quý Thầy (Cô) đã tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian học tập rèn luyện trường Các cán Trung tâm thí nghiệm trường Đại học Cơng Nghiệp Thực Phẩm thành phố Hồ Chí Minh nhiệt tình hỗ trợ dụng cụ, hóa chất, thiết bị phịng thí nghiệm để chúng tơi hồn thành q trình nghiên cứu thực nghiệm Đặc biệt Th.S Trần Chí Hải, khoa Cơng nghệ thực phẩm, trường Đại học Công Nghiệp Thực Phẩm Tp Hồ Chí Minh Người tận tình hướng dẫn, bảo dõi theo chúng tơi q trình hồn thiện báo cáo khóa luận tốt nghiệp Các bạn sinh viên trường Đại học Công Nghiệp Thực Phẩm Tp Hồ Chí Minh nghiên cứu hỗ trợ, giúp đỡ chúng tơi q trình làm thực đề tài Chúng tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè động viên ủng hộ nhiều trình học tập nghiên cứu Một lần xin chân thành cảm ơn giúp đỡ tất người! iii MỤC LỤC BẢN NHẬN XÉT iii LỜI CAM ĐOAN i TÓM TẮT LUẬN VĂN ii LỜI CẢM ƠN iii MỤC LỤC iv DANH MỤC HÌNH ẢNH vii DANH MỤC BẢNG .ix MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài .2 1.3 Nội dung nghiên cứu 1.4 Bố cục luận văn CHƯƠNG TỔNG QUAN .4 1.1 Tổng quan đinh lăng 1.1.1 Tên gọi 1.1.2 Phân loại 1.1.3 Nguồn gốc – Phân bố 1.1.4 Đặc điểm sinh học 1.1.5 Các hợp chất tự nhiên có Đinh lăng 1.1.6 Các nghiên cứu đinh lăng 10 1.1.7 Tác dụng dược lý 11 iv 1.2 Tổng quan saponin 14 1.2.1 Khái niệm chung saponin 14 1.2.2 Phân bố thực vật 15 1.2.3 Cấu trúc hóa học 15 1.2.4 Phân loại saponin 18 1.2.5 Tính chất saponin 19 1.2.6 Tác dụng sinh học ứng dụng saponin 20 1.2.7 Định tính saponin 21 1.2.8 Định lượng saponin .23 1.3 Tổng quan đồng hóa ứng dụng công nghệ thực phẩm .23 1.3.1 Khái niệm 23 1.3.2 Mục đích q trình đồng hóa 24 1.3.3 Vật liệu 25 1.3.4 Biến đổi ngun liệu sau q trình đồng hóa 25 CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 2.1 Vật liệu thiết bị 27 2.1.1 Lá đinh lăng khô 27 2.1.2 Thiết bị 27 2.2 Quy trình thu nhận dịch chiết từ đinh lăng .30 2.2.1 Sơ đồ quy trình 30 2.2.2 Thuyết minh quy trình 32 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu 32 2.3.1 Nội dung nghiên cứu .32 2.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 35 2.4 Các phương pháp phân tích xử lý số liệu 39 v 2.4.1 Các phương pháp phân tích 39 2.4.2 Phương pháp xử lý số liệu .39 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .41 3.1 Kết khảo sát thành phần nguyên liệu .41 3.2 Kết ảnh hưởng tỉ lệ mẫu:nước đến khả trích ly saponin triterpenoid với hỗ trợ đồng hóa 41 3.3 Kết ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu dung môi đến khả kháng enzyme αamylase .43 3.4 Kết ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu dung môi đến khả kháng oxy-hóa 45 3.5 Kết ảnh hưởng tốc độ đồng hóa đến khả trích ly saponin triterpenoid 46 3.6 Kết ảnh hưởng tốc độ đồng hóa đến khả kháng enzyme α-amylase 48 3.7 Kết ảnh hưởng tốc độ đồng hóa đến khả kháng oxy-hóa 49 3.8 Kết ảnh hưởng thời gian đồng hóa đến khả trích ly saponin triterpenoid 50 3.9 Kết ảnh hưởng thời gian đồng hóa đến khả kháng enzyme α-amylase 52 3.10 Kết ảnh hưởng thời gian đồng hóa đến khả kháng oxi hóa 53 3.11 Kết quả tới ưu hoá các thông số công nghệ của quá trình trích ly 55 3.11.1 Tối ưu hóa với hàm lượng saponin triterpenoid 55 3.11.2 Tối ưu hóa khả kháng enzyme α-amylase 64 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 73 4.1 Kết luận 73 4.2 Kiến nghị .74 CHƯƠNG TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 PHỤ LỤC vi vii OD DC- MẪU -0.331 -0.321 -0.293 -0.31 -0.31 OD 0% 0.796 0.796 0.796 0.796 0.796 OD 100% 0.232 0.232 0.232 0.232 0.232 OD 0%-100% 0.564 0.564 0.564 0.564 0.564 TỈ LỆ ỨC CHẾ 40.2482 42.73 50.887 43.794 43.085 TỈ LỆ ỨC CHẾ 35.9929 43.972 46.454 42.908 40.78 TỈ LỆ ỨC CHẾ 41.3121 43.085 48.05 45.035 45.035 TỈ LỆ ỨC CHẾ TB hệ số 39.1844 43.262 48.463 43.913 42.967 10 10 8.08077 8.9218 9.9943 9.0558 8.8608 pha loãng 10 10 10 mgAcabose/ ml Số liệu thực nghiệm thí nghiệm khả bắt thời gian 1 % ỨC gốc tự (mg Blank OD CHẾ Trolox/ml) 0.684 0.179 73.830 5.001 0.684 0.163 76.170 5.159 0.684 0.167 75.585 5.120 0.684 0.157 77.047 5.219 60 5.015 2 3 0.684 0.196 71.345 4.833 0.684 0.183 73.246 4.961 0.684 0.175 74.415 5.041 0.684 0.201 70.614 4.783 0.684 0.177 74.123 5.021 0.677 0.161 76.219 5.163 0.677 0.147 78.287 5.303 0.677 0.156 76.957 5.213 0.677 0.140 79.321 5.373 0.677 0.194 71.344 4.833 0.677 0.154 77.253 5.233 0.677 0.178 73.708 4.993 0.677 0.161 76.219 5.163 0.677 0.185 72.674 4.923 0.723 0.117 83.817 5.678 0.723 0.124 82.849 5.612 0.723 0.133 81.604 5.528 0.723 0.135 81.328 5.509 0.723 0.124 82.849 5.612 61 5.133 5.607 4 5 0.723 0.120 83.402 5.649 0.723 0.115 84.094 5.696 0.723 0.125 82.711 5.603 0.723 0.128 82.296 5.574 0.684 0.152 77.778 5.268 0.684 0.146 78.655 5.328 0.684 0.149 78.216 5.298 0.684 0.140 79.532 5.387 0.684 0.132 80.702 5.466 0.684 0.148 78.363 5.308 0.684 0.151 77.924 5.278 0.684 0.136 80.117 5.427 0.684 0.166 75.731 5.130 0.695 0.157 77.410 5.244 0.695 0.139 80.000 5.419 0.695 0.159 77.122 5.224 0.695 0.164 76.403 5.175 0.695 0.153 77.986 5.282 0.695 0.141 79.712 5.399 62 5.321 5.290 0.695 0.135 80.576 5.458 0.695 0.147 78.849 5.341 0.695 0.175 74.820 5.068 Số liệu thực nghiệm tối ưu hóa saponin triterpenoid tỉ lệ số vịng thời gian thể tích blank OD OD OD Hàm lượng saponin triterpenoid 25 5000 108 0.024 0.151 0.162 0.139 0.673 35 5000 162 0.024 0.131 0.125 0.137 0.853 25 7000 108 0.024 0.166 0.153 0.181 0.758 35 7000 162 0.024 0.142 0.166 0.118 0.940 25 5000 108 0.024 0.215 0.193 0.238 1.017 35 5000 162 0.024 0.152 0.142 0.164 1.025 25 7000 108 0.025 0.229 0.216 0.245 1.089 35 7000 162 0.025 0.153 0.162 0.149 1.033 25 6000 108 0.025 0.259 0.253 0.268 1.249 35 6000 162 0.025 0.184 0.195 0.176 1.275 30 5000 130 0.025 0.215 0.218 0.215 1.222 30 7000 130 0.025 0.226 0.197 0.259 1.294 30 6000 130 0.022 0.201 0.204 0.193 1.134 63 30 6000 130 0.022 0.217 0.216 0.213 1.236 30 6000 130 0.022 0.239 0.241 0.232 1.377 30 6000 130 0.022 0.243 0.22 0.251 1.381 30 6000 130 0.022 0.240 0.249 0.226 1.384 Số liệu thực nghiệm tối ưu hóa khả kháng enzyme amylase mẫu DCMẪU DCDCMẪU MẪU 0.594 0.594 -0.409 -0.408 -0.415 0.639 0.629 0.65 -0.435 -0.434 -0.439 0.22 0.622 0.612 0.623 -0.391 -0.388 -0.395 0.17 0.188 0.18 0.593 0.606 0.602 -0.419 -0.418 -0.422 0.24 0.245 0.23 0.574 0.582 0.572 -0.333 -0.337 -0.335 5000 0.19 0.186 0.18 0.592 0.606 0.609 -0.400 -0.420 -0.425 25 7000 0.22 0.23 0.23 0.541 0.533 0.545 -0.312 -0.303 -0.308 35 7000 0.17 0.186 0.18 0.58 0.59 0.586 -0.401 -0.404 -0.399 Vận Tỉ lệ tốc Thời gian DC DC DC mẫu mẫu 25 5000 0.18 0.186 0.17 0.594 35 5000 0.20 0.195 0.21 25 7000 0.23 0.224 35 7000 25 5000 35 64 25 6000 0.24 0.251 0.23 0.546 0.552 0.535 -0.301 -0.301 -0.296 35 6000 0.22 0.231 0.21 0.583 0.606 0.601 -0.359 -0.375 -0.383 30 5000 0.21 0.234 0.22 0.55 0.573 0.557 -0.335 -0.339 -0.336 30 7000 0.23 0.226 0.22 0.558 0.537 0.552 -0.322 -0.311 -0.331 30 6000 0.20 0.219 0.22 0.557 0.568 0.562 -0.353 -0.349 -0.342 30 6000 0.22 0.27 0.25 0.556 0.593 0.584 -0.332 -0.323 -0.333 30 6000 0.24 0.262 0.25 0.55 0.558 0.554 -0.304 -0.296 -0.297 30 6000 0.25 0.242 0.24 0.549 0.54 0.55 -0.298 -0.298 -0.302 30 6000 0.26 0.239 0.24 0.548 0.532 0.565 -0.284 -0.293 -0.318 0% 100% 0%-100% Tỉ lệ ức Tỉ lệ ức Tỉ lệ ức TB chế chế chế mgAca/g 0.785 0.217 0.568 27.993 28.169 26.937 27.700 4.751 0.785 0.217 0.568 23.415 23.592 22.711 23.239 5.979 65 0.785 0.217 0.568 31.162 31.690 30.458 31.103 5.335 0.785 0.217 0.568 26.232 26.408 25.704 26.115 6.719 0.796 0.221 0.575 42.087 41.391 41.739 41.739 7.159 0.796 0.221 0.575 30.435 26.957 26.087 27.826 7.159 0.796 0.221 0.575 45.739 47.304 46.435 46.493 7.974 0.796 0.221 0.575 30.261 29.739 30.609 30.203 7.770 0.773 0.205 0.568 47.007 47.007 47.887 47.300 8.113 0.773 0.205 0.568 36.796 33.979 32.570 34.448 8.863 0.773 0.205 0.568 41.021 40.317 40.845 40.728 8.408 0.773 0.205 0.568 43.310 45.246 41.725 43.427 8.966 0.781 0.215 0.566 37.633 38.339 39.576 38.516 7.952 0.781 0.215 0.566 41.343 42.933 41.166 41.814 8.633 0.781 0.215 0.566 46.290 47.703 47.527 47.173 9.739 0.781 0.215 0.566 47.350 47.350 46.643 47.114 9.727 0.781 0.215 0.566 49.823 48.233 43.816 47.291 9.763 PHỤ LỤC C: HÌNH ẢNH  Một số hình ảnh trình thực trang thiết bị sử dụng 66 Hình Xử lý ngun liệu đinh lăng khơ Hình Rây bột đinh lăng 67 Hình Phối trộn mẫu với nước, chuẩn bị cho trích ly Hình Ủ mẫu 700C Hình Mẫu phân tích hàm lượng saponin sau ủ 700C 68 69 Hình Mẫu xác định khả kháng oxy hóa Hình Mẫu xác định khả kháng enzyme α-amylase Hình Cân phân tích số Hình Cân phân tích số 70 Hình 10 Máy đo pH để bàn Hình 11 Máy ly tâm Hình 12 Bể ơn nhiệt Hình 13 Máy vi sóng gia dụng 71 Hình 14 Tủ sấy Hình 15 Máy đo quang UV-Vis 6100 Hình 16 Máy đo quang Optima Hình 17 Micropipet 72 Hình 18 Bể ổn nhiệt 73 74 ... gọi monodesmosid bidesmosid desmos = mạch) Ở monodesmosid, phần đường gắn vào sapogenin hầu hết vị trí C3 dây nối glycosid Saponin có thêm mạch đường thứ hai Những saponin có mạch đường (bidesmosid)... polyacetylen từ đinh lăng panaxynol; panoxydol; heptadeca1,8(E)-dien-4,6 diyn-3,10 diol; heptadeca-1,8(E)-dien-4,6 dien-3 ol-10 ol; heptadeca1,8(Z)-dien-4,6 diyn-3,10 diol Hai hợp chất sau tìm... 30 2.2.2 Thuyết minh quy trình 32 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu 32 2.3.1 Nội dung nghiên cứu .32 2.3.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 35 2.4