Giáo trình thực hành sinh lý sinh lý bệnh phần 2 trường đại học nguyễn tất thành

lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH BÀI 4: PHÂN TÍCH HUYẾT ĐỒ Nguyễn Bình Thư MỤC TIÊU Hiểu nguyên tắc đếm số lượng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu phân loại bạch cầu Nắm ý nghĩa 10 thông số huyết học, cơng thức tính Hct, MCH, MCHC Phân tích huyết đồ bình thường I ĐẠI CƯƠNG Huyết đồ (CBC: Complete Blood Count) xét nghiệm cho biết thông tin tế bào máu ngoại biên, đánh giá thay đổi số lượng chất lượng để chẩn đoán bệnh lý máu cung cấp thông tin quan trọng thay đổi khác thể Ví dụ tình trạng thiếu máu bệnh nhân kèm với bệnh mạn tính, viêm mạn tính, thiếu sắt, diện ký sinh trùng làm tăng bạch cầu toan, giảm tiểu cầu miễn dịch… Thực “một huyết đồ trọn vẹn”, tức lấy máu bệnh nhân làm xét nghiệm sau: • Đếm hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu • Đo hematocrit, định lượng hemoglobine • Đo tốc độ lắng hồng cầu • Khảo sát phết máu ngoại biên, tính tỉ số hồng cầu lưới Thực tế, người ta thường lấy máu làm công thức máu, tức không khảo sát phết máu ngoại biên Để hiểu thay đổi huyết học, yêu cầu sinh viên nắm rõ 10 thông số huyết đồ: Số lượng hồng cầu (RBC) Nồng độ Hemoglobin (HGB) Dung tích hồng cầu lắng (Hct) Thể tích trung bình hồng cầu (MCV) Lượng hemoglobin trung bình hồng cầu (MCH) Nồng độ hemoglobin trung bình 100ml hồng cầu (MCHC) 41 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Phân bố thể tích hồng cầu (RDW) Số lượng bạch cầu (WBC) Phân loại bạch cầu (Diff) 10 Số lượng tiểu cầu (PLT) II NGUYÊN TẮC ĐẾM VÀ PHÂN LOẠI CÁC TẾ BÀO MÁU Thời gian trước, để có kết huyết đồ, kỹ thuật viên sau lấy máu phải phết máu lên lam đưa vào buồng đếm để đếm số lượng hồng cầu, bạch cầu… từ số lượng kết cuối Hiện nay, hầu hết kỹ thuật thay máy, kết cho nhanh Hình 1: Máy phân tích huyết đồ tự động 18 thông số 2.1 Đếm tế bào máy dựa nguyên tắc Coulter: cho dòng điện qua hai điện cực đặt hai ngăn đựng dung dịch muối, phân cách khe nhỏ.Khi tế bào qua khe làm dịch chuyển lượng dung dịch muối tương ứng với kích thước tế bào, gây ngắt quãng dòng điện Sự gia tăng điện trở tạo xung điện Biên độ thay đổi dịng điện liên quan đến kích thước hạt Do đó, số lượng biên độ xung điện cho biết số lượng kích thước tế bào 42 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Thường máy huyết đồ tự động dựa nguyên tắc Coulter có hai buồng đếm: ➢ Để đếm số lượng hồng cầu tiểu cầu, máu pha loãng dung dịch đẳng trương Một lượng máu pha loãng định hút vào bình chứa nhỏ Trong bình này, máu xun qua khe nhỏ có đường kính 7-8 m ➢ Để đếm phân loại bạch cầu, máu pha loãng với dung dịch acid để làm vỡ hồng cầu cho qua khe nhỏ có đường kính 100 m Đặc tính bạch cầu (kích thước, số lượng, nhân, hạt,…) định thay đổi xung điện, giúp phân biệt loại bạch cầu hạt, đơn nhân lympho 2.2 Đếm tế bào máy dựa tán xạ tia laser: số máy huyết đồ tự động khác, thay đổi xung điện thay tán xạ tia laser khảo sát tế bào dòng chảy (flow cytometry) Khi đó, dịng tế bào qua đường ống hẹp thành hàng tế bào, chùm laser chiếu qua tế bào, máy nhận dạng tán xạ ánh sáng để phân tích tế bào (như loại tế bào, số lượng…) Tuy nhiên, máy dùng laser cịn nhiều tính khác nên không đơn sử dụng tế bào 43 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH III CÁC THÔNG SỐ HUYẾT ĐỒ Giới hạn bình thường thơng số thay đổi tùy chủng tộc, giới tính tùy theo máy sử dụng Trong giới hạn bình thường lấy theo “Harrison’s principles of internal Medicine” 3.1 Dòng hồng cầu ❖ Số lượng hồng cầu (RBC: red blood cell count) − Là số hồng cầu đếm thể tích máu − Hồng cầu chứa hemoglobin dùng để chuyên chở O2 CO2 Lượng oxy mà thể nhận phụ thuộc vào lượng hồng cầu hemoglobin ✓ RBC tăng: đa hồng cầu, nước 44 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH ✓ RBC giảm : thiếu máu ❖ Hemoglobin (HGB) − Hemoglobin sắc tố khiến cho hồng cầu có màu đỏ Lượng hemoglobin phản ánh tình trạng thiếu máu bệnh nhân ✓ HGB giảm: thiếu máu − HGB thấp thường kèm theo số lượng hồng cầu thấp hematocrit thấp tình trạng thiếu máu ❖ Dung tích hồng cầu (Hct: hematocrit) − Là thể tích chiếm hồng cầu thể tích máu, tính theo cơng thức: Hct (%) = 𝑅𝐵𝐶 (𝑀/𝑙) × 𝑀𝐶𝑉 (𝑓𝐿) 10 − Dung tích hồng cầu phụ thuộc vào số lượng hồng cầu thể tích huyết tương thể nên phản ánh tình trạng tăng/giảm số lượng hồng cầu, tình trạng đặc/pha lỗng máu − Như vậy, có ba thơng số giúp đánh giá tình trạng thiếu máu (RBC, HGB, Hct), HGB yếu tố quan trọng có tính định phụ thuộc vào tình trạng nước thừa nước thể ❖ Thể tích trung bình hồng cầu (MCV: mean corpuscular volume) − MCV phản ánh kích thước hồng cầu, cho biết tình trạng thiếu máu thiếu máu hồng cầu nhỏ, hồng cầu bình thể tích hay hồng cầu to ✓ MCV tăng: hồng cầu to ✓ MCV bình thường: kích thước hồng cầu bình thường (hay hồng cầu bình thể tích hay đẳng bào) ✓ MVC giảm: hồng cầu nhỏ ❖ Lượng hemoglobin trung bình hồng cầu (MCH: mean corpuscular hemoglobin) 45 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH − MCH đo lượng hemoglobin hồng cầu, lượng hemoglobin hồng cầu phản ánh màu sắc hồng cầu Trị số MCH thường tăng giảm đồng thời với MCV, tính theo cơng thức: MCH (pg) = 𝐻𝐺𝐵 (𝑔/𝑑𝐿) 𝑅𝐵𝐶 (𝑀/𝑙) × 10 ✓ MCH tăng: hồng cầu ưu sắc, thường kèm với hồng cầu to ✓ MCH bình thường: bình sắc hay đẳng sắc ✓ MCH giảm: hồng cầu nhược sắc, thường kèm với hồng cầu nhỏ ❖ Nồng độ hemoglobin trung bình 100ml hồng cầu (MCHC: mean corpuscular hemoglobin concentration) − MCHC đo nồng độ hemoglobin 100ml hồng cầu Tương tự MCH, MCHC cho phép phân biệt loại thiếu máu nhược sắc, bình sắc, ưu sắc, tính theo cơng thức: MCHC (g/dL) = 𝐻𝐺𝐵 (𝑔/𝑑𝐿) 𝐻𝑐𝑡(%) ⨯ 100 ✓ MCHC tăng: ưu sắc trường hợp hemoglobin bị cô đặc cách bất thường bên hồng cầu (hồng cầu hình cầu) ✓ MCHC bình thường: bình sắc hay đẳng sắc ✓ MCHC giảm: nhược sắc trường hợp hemoglobin bị pha loãng cách bất thường bên hồng cầu ❖ Phân bố thể tích hồng cầu (RDW: red cell distribution width) − Khảo sát biến thiên thể tích hồng cầu, tính theo cơng thức: RDW = 𝑆𝐷 𝑀𝐶𝑉 (𝑓𝐿) × 100 (SD: standard deviation) Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) 46 lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH ✓ RDW tăng: kích thước hồng cầu khơng ✓ RDW bình thường: kích thước hồng cầu tương đối Tóm lại, phân tích thơng số dịng hồng cầu, sinh viên cần trả lời câu hỏi sau để từ định hướng tìm ngun nhân bệnh lý: Có thiếu máu khơng? Nếu có thiếu máu thuộc nhóm (thiếu máu đẳng sắc đẳng bào, thiếu máu hồng cầu nhỏ nhược sắc, thiếu máu hồng cầu to)? 3.2 Dòng bạch cầu ❖ Số lượng bạch cầu (WBC: white blood cell count) − Là số lượng bạch cầu đếm thể tích máu ❖ Phân loại bạch cầu (Diff: differential white blood cell) Bạch cầu hạt: ✓ Bạch cầu đa nhân trung tính (NEUT: neutrophil): có vai trị quan trọng q trình viêm, nhiễm khuẩn … Ngồi trường hợp bình thường, bạch cầu đa nhân trung tính tăng gấp - lần số lượng bình thường sau tập thể thao, làm việc nặng, chích norepinephrin … trở bình thường sau khoảng 60 phút ✓ Bạch cầu toan (EOS: eosinophil): có vai trị phản ứng dị ứng, nhiễm kí sinh trùng, khử độc protein lạ … ✓ Bạch cầu kiềm (BASO: basophil): vai trò phản ứng dị ứng liên quan đến globulin miễn dịch IgE, gây phản ứng chỗ (phù, ban đỏ, ngứa, đau …) Bạch cầu không hạt ✓ Bạch cầu lympho (LYM: lymphocyte): có vai trị miễn dịch đặc hiệu thể (lympho B đảm nhận miễn dịch dịch thể lympho T đảm nhận miễn dịch tế bào) ✓ Bạch cầu đơn nhân (MONO: monocyte): hình thành đại thực bào, có chức bảo vệ thể cách thực bào, tiêu diệt vi khuẩn … Khi phân loại bạch cầu huyết đồ thường có hai cách trình bày: số lượng tuyệt đối tỉ lệ phần trăm, cách trình bày số lượng tuyệt đối cho thơng tin xác 47 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Tóm lại, phân tích thơng số dịng bạch cầu, sinh viên cần trả lời câu hỏi sau để từ định hướng tìm ngun nhân bệnh lý: Có tăng giảm số lượng bạch cầu? Nếu có thay đổi xảy dòng bạch cầu nào? 3.3 Dòng tiểu cầu ❖ Số lượng tiểu cầu (PLT: platelet count) − Là số tiểu cầu đếm thể tích máu Tiểu cầu có vai trị q trình đơng máu thể Khi phân tích dịng tiểu cầu, sinh viên cần trả lời số lượng tiểu cầu có thuộc giới hạn bình thường hay khơng? 3.4 Bảng tóm tắt trị số bình thường dòng tế bào máu (Theo Harrison’s principles of internal Medicine) Đại học Y Dược TP HCM Trung Tâm Thăm Dị Bộ mơn Sinh Lý Học Chức Năng 217 Hồng Bàng, Q.5, TP HCM Lab trung tâm http://www.sinhlyhocykhoa.com.vn/ Phòng TDCN Huyết Học HUYẾT ĐỒ Các thơng số Giới hạn bình thường Nam Nữ 4.15 – 4.90 RCB (M/L) HGB (g/dL) 13 – 18 12 – 16 HCT 42 – 52 37 – 48 (%) MCV (fL) 86 – 98 MCH (pg) 28 – 33 MCHC (g/dL) 32 – 36 RDW 13 – 15 (%) WBC (K/L) NEU (%) 4.3 – 10.8 45 – 74 48 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH (%) 0–7 BASO (%) 0–2 LYMP (%) 16 – 45 MONO (%) – 10 EOS PLT 130 – 400 (K/L) Đơn vị : M/L: 106/L hay 106/mm3 Pg: (picogram) 10-12 g K/L: 103/L hay 103/mm3 fL: (femtoliter) 10-15 L L: (microliter) 10-6 L Trên thực tế, thông số huyết đồ đọc theo trị số tham khảo riêng cho loại máy, nhà sản xuất đưa (Hình 6) 3.5 Bảng huyết đồ mẫu (Xem trang tiếp theo) 49 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH 50 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Do gia tăng tiêu thụ: đông máu nội mạch … VI THỰC HÀNH Phân tích huyết đồ sau 6.1 Huyết đồ Đại học Y Dược TP HCM Trung Tâm Thăm Dị Bộ mơn Sinh Lý Học Chức Năng 217 Hồng Bàng, Q.5, TP.HCM Lab trung tâm http://www.sinhlyhocykhoa.com.vn/ Phòng TDCN Huyết Học KẾT QUẢ HUYẾT ĐỒ Họ tên BN: Lê Thị A Tuổi: 38 Địa chỉ: Bình Thuận Giới tính: Nữ Tình trạng bệnh nhân: Xanh xao, khơng sốt Kết Giới hạn bình thường Nhận xét RCB 3,37 3,8 – 5,4 (M/L)  HGB 7,2 12 – 16 (g/dL)  HCT 22,6 35 – 48 (%)  MCV 67,3 78 – 100 (fL)  MCH 21,3 27 – 32 (pg)  MCHC 31,7 32 – 36 (g/dL)  RDW 26,9 11,5 – 14,5 (%)  WBC 6,5 4,1 – 10,9 (K/L) BT NEU 3,99 2,0 – 7,8 (K/L) BT 61,3 50 – 75 (%) BT 2,07 0,6 – 4,1 (K/L) BT 31,9 20 – 40 (%) BT 0,12 0,0 – 0,9 (K/L) BT 1,8 3,4 – (%)  Thông số LYMP MONO 55 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH EOS BASO PLT 0,08 0,0 – 0,7 (K/L) BT 1,3 0,0 – (%) BT 0,06 0,0 – 0,2 (K/L) BT 1,0 – 15 (%) BT 114 130 – 400 (K/L)  Kết luận: Bệnh nhân có tình trạng: − Thiếu máu hồng cầu nhỏ nhược sắc, kích thước hồng cầu khơng − Số lượng bạch cầu bình thường, loại bạch cầu bình thường − Số lượng tiểu cầu giảm 6.2 Huyết đồ Đại học Y Dược TP HCM Trung Tâm Thăm Dị Bộ mơn Sinh Lý Học Chức Năng 217 Hồng Bàng, Q.5, TP.HCM Lab trung tâm http://www.sinhlyhocykhoa.com.vn/ Phòng TDCN Huyết Học KẾT QUẢ HUYẾT ĐỒ Họ tên BN: Nguyễn Văn T Tuổi: 30 Địa chỉ: Khánh Hòa Giới tính: Nam Tình trạng bệnh nhân: Sốt cao, tiêu chảy Kết Giới hạn bình thường RBC 3,94 3,8 – 5,4 (M/L) HGB 11,7 12 – 16 (g/dL) HCT 34,8 35 – 48 (%) MCV 88,3 78 – 100 (fL) MCH 29,7 27 – 32 (pg) MCHC 33,6 32 – 36 (g/dL) RDW 15,4 11,5 – 14,5 (%) WBC 15,6 4,1 – 10,9 (K/L) Thông số Nhận xét 56 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH NEU LYMP MONO EOS BASO PLT 14,6 2,0 – 7,8 (K/L) 93,5 50 – 75 (%) 0,6 0,6 – 4,1 (K/L) 3,9 20 – 40 (%) 0,4 0,0 – 0,9 (K/L) 2,3 3,4 – (%) 0,1 0,0 – 0,7 (K/L) 0,08 0,0 – (%) 0,03 0,0 – 0,2 (K/L) 0,2 – 15 (%) 166 130 – 400 (K/L) Kết luận: Bệnh nhân có tình trạng: − Thiếu máu hồng cầu đẳng sắc, đẳng bào, kích thước hồng cầu khơng − Số lượng bạch cầu tăng cao, chủ yếu bạch cầu đa nhân trung tính, loại bạch cầu khác giới hạn bình thường − Số lượng tiểu cầu giới hạn bình thường 6.3 Huyết đồ 3: Đọc kết huyết đồ sau: Vũ Thị H, 49 tuổi, sốt ngày Đại học Y Dược TP HCM Trung Tâm Thăm Dị Bộ mơn Sinh Lý Học Chức Năng 217 Hồng Bàng, Q.5, TP.HCM Lab trung tâm http://www.sinhlyhocykhoa.com.vn/ Phòng TDCN Huyết Học KẾT QUẢ HUYẾT ĐỒ Họ tên BN: Vũ Thị H Tuổi: 49 Địa chỉ: Tiền Giang Giới tính: Nữ Tình trạng bệnh nhân: Sốt ngày Thơng số RBC Kết Giới hạn bình thường 4,26 3,8 – 5,4 (M/L) Nhận xét 57 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH HGB 12,1 12 – 16 (g/dL) HCT 36,9 35 – 48 (%) MCV 86,7 78 – 100 (fL) MCH 28,4 27 – 32 (pg) MCHC 32,8 32 – 36 (g/dL) RDW 14 11,5 – 14,5 (%) WBC 3,1 4,1 – 10,9 (K/L) NEU 1,5 2,0 – 7,8 (K/L) 47,3 50 – 75 (%) 1,4 0,6 – 4,1 (K/L) 44,9 20 – 40 (%) 0,1 0,0 – 0,9 (K/L) 4,8 3,4 – (%) 0,07 0,0 – 0,7 (K/L) 2,2 0,0 – (%) 0,02 0,0 – 0,2 (K/L) 0,8 – 15 (%) 122 130 – 400 (K/L) LYMP MONO EOS BASO PLT Kết luận: 58 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH CÂU HỎI THẢO LUẬN (Sinh viên tự tìm hiểu) Vì đánh giá mức độ tăng, giảm loại bạch cầu, tỉ lệ % xác so với số lượng tuyệt đối? Theo anh/chị, thiếu máu loại RDW tăng? Thiếu máu loại RDW không thay đổi? Trong trường hợp thiếu máu hồng cầu nhỏ nhược sắc, phết máu ngoại biên thấy vòng tròn sáng hồng cầu to lên Anh/chị giải thích tượng Những đối tượng thường hay có đa hồng cầu sinh lý? Tại thiếu sắt thể dẫn đến thiếu máu hồng cầu nhỏ nhược sắc, thiếu B12 acid folic lại gây thiếu máu hồng cầu to? Vì dạng thiếu máu hồng cầu to gặp nhiều so với thiếu máu hồng cầu nhỏ, nhược sắc? Một người phụ nữ bị chấn thương cách giờ, chảy máu nhiều, cho làm huyết đồ Kết ghi nhận thiếu máu hồng cầu nhỏ nhược sắc Theo anh/chị, nguyên nhân thiếu máu trường hợp có phải chấn thương khơng? 59 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH TÀI LIỆU THAM KHẢO Bộ môn Sinh lý học, ĐHYD Tp.HCM (2009), Sinh lý học Y khoa tập I, Nhà Xuất Bản Y Học chi nhánh Tp.HCM Trần Văn Bé (1998) Lâm sàng huyết học, Nhà Xuất Bản Y Học chi nhánh Tp.HCM Tư liệu lâm sàng bệnh nhân Bệnh viện truyền máu huyết học Tp.HCM Benyo Z., Ivabics T., Kollai M (2011), Physiology Laboratory Manual, 2th ed, Semmelweis, Budapest Hall J.E., Guyton A.C (2011), Guyton & Hall: Textbook of Medical Physiology 12th ed Philadelphia, USA Kaushansky K., LichtmanM., BeutlerE., et al (2010), Williams Hematology, 8th ed, The McGraw-Hill Companies, Inc, China LongoD., FauciA., KasperD., HauserS., et al (2008), Harrison’s principles of Internal Medicine, 17th ed, Tha McGraw-Hill Companies, Inc 60 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH BÀI 5: XÁC ĐỊNH NHĨM MÁU Nguyễn Bình Thư MỤC TIÊU Hiểu rõ phương pháp định danh nhóm máu ABO, Rh Xác định nhóm máu I ĐẠI CƯƠNG Khi thể lượng máu cần bù lượng máu tương ứng, người ta thường chủ động truyền máu Nhưng truyền máu từ người sang người khác, gặp phản ứng ngưng kết tiêu huyết, gây tử vong không tuân thủ nguyên tắc truyền máu Những phản ứng màng hồng cầu người khác có kháng nguyên khác nhau, kháng thể huyết tương nhóm máu phản ứng với kháng nguyên bề mặt hồng cầu nhóm máu khác Do cần phải xác định trước kháng nguyên, kháng thể tương ứng máu người cho người nhận để tránh tai biến truyền máu Việc phân loại nhóm máu dựa diện kháng nguyên màng tế bào hồng cầu Có 30 kháng ngun phổ biến hàng trăm kháng nguyên khác bề mặt hồng cầu Có hai loại kháng ngun gây phản ứng truyền máu kháng nguyên hệ nhóm máu ABO hệ nhóm máu Rhesus 1.1 HỆ ABO Trên màng hồng cầu người, có hai loại kháng nguyên A B, huyết tương có hai loại kháng thể tương ứng anti A viết tắt  anti B viết tắt  Dựa vào có mặt kháng nguyên màng hồng cầu mà chia nhóm máu A, B, AB O Trong nhóm máu O khơng có kháng ngun A B bề mặt hồng cầu, nhóm máu AB có kháng nguyên A B Khi có kháng nguyên A bề mặt hồng cầu khơng có kháng thể kháng A (anti A) huyết tương Tương tự vậy, có kháng ngun B khơng có kháng thể kháng B (anti B) Khi kháng nguyên màng hồng cầu gặp kháng thể tương ứng huyết tương gây tượng ngưng kết hồng cầu 61 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Định nhóm máu người xác định kháng nguyên màng hồng cầu người Bảng Đặc tính kháng ngun nhóm máu hệ ABO Nhóm máu Kháng nguyên Kháng thể A A Anti B () B B Anti A () AB A B Không O Không Anti A B ( ) 1.2 Hệ Rh (Rhesus) Năm 1904 Landsteiner tìm thấy loại kháng nguyên hồng cầu khỉ Macacus Rhesus, ông đặt tên kháng nguyên yếu tố Rh Sau đó, người ta nhận thấy số người có hồng cầu chứa đựng yếu tố Rh, số người khác khơng chứa yếu tố Người ta qui ước: máu người có chứa yếu tố Rh gọi Rh+, cịn khơng có gọi Rh- Yếu tố Rh hệ thống gồm 13 kháng nguyên yếu tố D mạnh nhất, có ý nghĩa quan trọng truyền máu Ở Việt Nam, hầu hết Rh+, người Âu Mỹ Rh+  85% Các kháng thể hệ Rh khơng có sẵn máu, mà xuất có tiếp xúc với kháng ngun Vì người ta gọi kháng thể Rh kháng thể miễn dịch Trong kháng thể Rh, anti-D kháng thể quan trọng nhất, kháng thể khác yếu nhiều mức độ gây phản ứng thấp Anti-D loại IgG Bảng Đặc tính kháng nguyên nhóm máu hệ Rh Nhóm máu Kháng nguyên Kháng thể Rh+ D Không Rh- Không Không anti D II THỰC HÀNH ĐỊNH DANH NHÓM MÁU ABO Để xác định nhóm máu hệ ABO, người ta dùng hai phương pháp: ➢ Phương pháp dùng huyết mẫu Beth Vincent 62 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH ➢ Phương pháp dùng hồng cầu mẫu Simonin Cần dùng hai phương pháp xác định nhóm máu để chẩn đốn xác loại tượng giả 2.1 Phương pháp dùng huyết mẫu (phân loại trực tiếp) ❖ Nguyên tắc: dùng huyết mẫu chứa kháng thể đặc hiệu biết để xác định loại kháng nguyên hồng cầu qua phản ứng ngưng kết, từ xác định nhóm máu ❖ Dụng cụ: - Lam kính - đũa thủy tinh hay tăm tre - Dụng cụ sát trùng lấy máu - Ba lọ huyết mẫu: Huyết anti A (màu xanh) Huyết anti B (màu vàng) Huyết anti AB (màu trắng) Hình Ba lọ huyết mẫu ❖ Tiến hành - Chuẩn bị lam kính: 63 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Lam kính phải khơ sạch, đánh dấu vào lam kính bút xóa hay bút lông kim để tránh nhầm lẫn huyết Nhỏ giọt huyết mẫu lên ba vị trí cách lam kính: đầu hai vạch nhỏ (bên trái lam kính) nhỏ huyết anti A, nhỏ huyết anti AB, đầu ba vạch nhỏ (bên phải lam kính) nhỏ huyết anti B (Hình 2) Đường kính giọt huyết khoảng mm - Sát trùng chích máu, không cần bỏ giọt đầu - Dùng đũa thủy tinh lấy máu đầu ngón tay, đặt giọt lên phiến kính, cạnh giọt huyết mẫu, đường kính giọt khoảng 1/3 đường kính giọt huyết Hồng cầu nhóm máu cần định danh Anti A Anti B Anti C Hình Xác định nhóm máu ABO theo phương pháp trực tiếp - Trộn máu với huyết mẫu, ý dùng đầu thủy tinh khác để trộn, không để huyết lẫn sang Đợi phút đọc kết ❖ Kết quả: ✓ Nếu có tượng ngưng kết, hồng cầu bị tụ lại thành đám (có chùm nho) huyết suốt (Hình 3) ✓ Nếu khơng có tượng ngưng kết: hồng cầu phân bố đều, hịa tan với huyết pha lỗng máu 64 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH ✓ Có trường hợp tương ứng với nhóm máu là: Anti A Anti B Anti A, B Nhóm máu + - + A - + + B + + + AB - - - O +: ngưng kết -: không ngưng kết Hình Hình ảnh nhóm máu ABO xác định phương pháp dùng huyết mẫu (trực tiếp) 2.2 Phương pháp dùng hồng cầu mẫu (phân loại gián tiếp) ❖ Nguyên tắc: dùng hồng cầu mẫu chứa kháng nguyên đặc hiệu biết để định loại kháng thể huyết qua phản ứng ngưng kết ❖ Dụng cụ: - Lam kính 65 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH - đũa thủy tinh hay tăm tre - Huyết bệnh nhân loại bổ thể 56oC 30 phút hay 63oC phút - Ba lọ hồng cầu mẫu: Hồng cầu A, Hồng cầu B, Hồng cầu O ❖ Tiến hành: Như trên, thay huyết mẫu hồng cầu mẫu HC A HC B HC C Huyết nhóm máu cần định danh Hình Xác định nhóm máu ABO theo phương pháp gián tiếp ❖ Kết quả: ✓ Quan sát tượng ngưng kết trên; ✓ Có trường hợp tương ứng với nhóm máu là: HC A HC B HC O Nhóm máu - + - A + - - B - - - AB + + - O +: ngưng kết -: không ngưng kết 66 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Bảng Tổng hợp kết hai phương pháp: PP huyết mẫu Nhóm máu PP hồng cầu mẫu Anti A Anti B Anti A, B HC A HC B HC O A + - + - + - B - + + + - - AB + + + - - - O - - - + + - +: ngưng kết -: không ngưng kết 2.3 Các yếu tố gây sai lệch kết − Do kháng nguyên A bề mặt hồng cầu bệnh nhân có chất lượng yếu (hiếm xảy kháng nguyên B) nên nhầm lẫn nhóm máu A thành nhóm máu O, nhóm máu AB thành nhóm máu B − Do có diện loại kháng thể mạnh huyết (cold agglutinin) làm cho tất nhóm máu trở thành nhóm AB Chính thế, việc xác định nhóm máu hai phương pháp cần thiết − Huyết hết hạn sử dụng bảo quản khơng tốt, có chuẩn độ kháng thể yếu, hoạt tính hay bị nhiễm tạp khuẩn − Hồng cầu bị biến chất, máu bị nhiễm trùng bạch cầu nhiều − Nhầm tên bệnh nhân III THỰC HÀNH ĐỊNH DANH NHÓM MÁU Rh ❖ Nguyên tắc: dùng huyết mẫu chứa kháng thể anti D tác dụng với hồng cầu bệnh nhân ❖ Dụng cụ: - Lam kính - Đũa thủy tinh hay tăm tre - Dụng cụ sát trùng lấy máu - Lọ huyết mẫu chứa anti D ❖ Tiến hành: 67 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Như trên, thay huyết khác thành huyết anti D Hồng cầu bệnh nhân Anti D Hình Cách nhỏ giọt huyết mẫu anti D giọt máu cần định danh lên lam để xác định nhóm máu Rh ❖ Kết Anti D Nhóm máu + Rh+ - Rh- +: Ngưng kết -: Khơng ngưng kết − Có ngưng kết: Rh+ − Không ngưng kết: kiểm tra lại kháng nguyên Du (một loại biến thể kháng nguyên D) Du (+): Rh+ Du (-): Rh❖ Các yếu tố gây nhiễu: Huyết kháng D hiệu lực 68 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược –Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH IV MẪU GHI KẾT QUẢ NHÓM MÁU Đại học Y Dược TP HCM Trung Tâm Thăm Dị Bộ mơn Sinh Lý Học Chức Năng 217 Hồng Bàng, Q.5, TP.HCM Lab trung tâm http://www.sinhlyhocykhoa.com.vn/ Phòng TDCN Huyết Học KẾT QUẢ NHÓM MÁU Họ tên BN: Tuổi: Địa chỉ: Giới tính: Hệ ABO Hệ Rh CÂU HỎI THẢO LUẬN (Sinh viên tự tìm hiểu) Qua thực tập này, anh/chị tự thống kê tỉ lệ % nhóm máu lớp Nhóm máu chiếm tỉ lệ cao nhất? Thấp nhất? Tỉ lệ nhóm máu lớp có giới tính hay khơng? Một người nam có nhóm máu Rh+ kết với người nữ có nhóm máu Rh- Theo anh/chị, có cần tư vấn cho họ không? TÀI LIỆU THAM KHẢO Y Học chi nhánh Tp.HCM Thực tập Sinh lý học, 2010, Bộ môn Sinh lý học, ĐHYD Tp.HCM Trần Văn Bé (1998) Lâm sàng huyết học, Nhà Xuất Bản Y Học chi nhánh Tp.HCM Benyo Z., Ivabics T., Kollai M (2011)Physiology Laboratory Manual, 2th ed Semmelweis, Budapest Hall J.E., Guyton A.C (2011), Guyton & Hall: Textbook of Medical Physiology 12th ed Philadelphia, USA Kaushansky K., LichtmanM., BeutlerE., et al (2010), Williams Hematology, 8𝑡ℎ ed,The McGraw-Hill Companies, Inc, China 69 Downloaded by Nguynhavy Ha Vy (Ntkphuong205@gmail.com) ... Dược ? ?Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH HGB 12, 1 12 – 16 (g/dL) HCT 36,9 35 – 48 (%) MCV 86,7 78 – 100 (fL) MCH 28 ,4 27 – 32 (pg) MCHC 32, 8 32 – 36 (g/dL) RDW 14... lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược ? ?Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH Do gia tăng tiêu thụ: đông máu nội mạch … VI THỰC HÀNH Phân tích huyết đồ sau 6.1 Huyết đồ Đại học Y Dược TP... (Ntkphuong205@gmail.com) lOMoARcPSD|16911414 Khoa Dược ? ?Trường ĐH Nguyễn Tất Thành Giáo trình TH Sinh lý & Sinh lý bệnh – ĐH IV MẪU GHI KẾT QUẢ NHÓM MÁU Đại học Y Dược TP HCM Trung Tâm Thăm Dị Bộ mơn Sinh