BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ****** 000 ****** KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM KHUẨN VÀ TÍNH ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN Pseudomonas aeruginosa TRONG NƢỚC UỐNG Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khóa: 2003 – 2007 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN HỒNG THU TRANG Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NƠNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ****** 000 ****** KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM KHUẨN VÀ TÍNH ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN Pseudomonas aeruginosa TRONG NƢỚC UỐNG Giáo viên hƣớng dẫn: Sinh viên thực hiện: ThS PHẨM MINH THU NGUYỄN HOÀNG THU TRANG TS NGUYỄN TRỌNG HIỆP Thành phố Hồ Chí Minh Tháng 8/2007 MINISTRY OF EDUCATION AND TRAINING NONG LAM UNIVERSITY, HCMC FACULTY OF BIOTECHNOLOGY ****** 000 ****** SERVEY OF THE MICROBIOLOGICAL QUALITY AND ANTIBIOTIC - RESISTANCE OF Pseudomonas aeruginosa ISOLATED FROM DRINKING WATER GRADUATION THESIS MAJOR: BIOTECHNOLOGY Professor MSc PHAM MINH THU PhD NGUYEN TRONG HIEP Student NGUYEN HOANG THU TRANG TERM: 2003 - 2007 HCMC, 08/2007 iii LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn: Ban Giám hiệu trường Đại học Nông Lâm TP HCM tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập trường Các thầy cô môn Công Nghệ Sinh Học thầy cô trực tiếp giảng dạy tận tình truyền đạt kiến thức cho suốt bốn năm qua Ban Giám đốc Viện PASTEUR TP.HCM tạo điều kiện thuận lợi để thực khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến: ThS Phẩm Minh Thu, Trưởng phòng Vi Sinh Thực Phẩm, Khoa LAM, Viện PASTEUR TP HCM tận tình hướng dẫn bảo cho nhiều kiến thức quý báo suốt thời gian thực khóa luận TS Nguyễn Trọng Hiệp, Bộ môn Vi Sinh – Ký Sinh, Khoa Dược, Đại học Y Dược TP HCM người thầy khơi dậy niềm đam mê công việc Thầy tận tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn tất khóa luận tốt nghiệp TS Nguyễn Ngọc Hải, Đại Học Nông Lâm TP HCM đóng góp ý kiến chân thành cho tơi bước đầu thực khóa luận Các Phịng vi sinh thực phẩm, Khoa LAM, Viện PASTEUR TP HCM nhiệt tình dẫn cho tơi trình thực tập Xin gửi lời cảm ơn đến tất bạn bè, tập thể lớp Công Nghệ Sinh Học 29 bên tôi, chia động viên suốt thời gian qua Con thành kính ghi ơn ba mẹ tất người thân gia đình ln nguồn động viên khích lệ to lớn cho suốt thời gian học tập Sinh viên Nguyễn Hoàng Thu Trang iv TĨM TẮT KHĨA LUẬN NGUYỄN HỒNG THU TRANG, Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh “Khảo sát tình hình nhiễm khuẩn tính đề kháng kháng sinh vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa nƣớc uống” thực Phòng vi sinh thực phẩm, Khoa LAM, Viện PASTEUR TP HCM từ 03/2007 đến 07/02007 GVHD: ThS PHẨM MINH THU TS NGUYỄN TRỌNG HIỆP Vật liệu dùng để nghiên cứu nước uống phân thành nhóm: nhóm nước uống đóng chai (50 mẫu), nhóm nước uống xử lý (350 mẫu) gồm có nước uống cơng ty (200 mẫu), gia đình (50 mẫu), trường học (50 mẫu), bệnh viện (50 mẫu) Chúng sử dụng phương pháp màng lọc để kiểm tra tiêu vi sinh nước uống dựa theo TCVN 6096:2004, làm kháng sinh đồ để kiểm tra tính đề kháng kháng sinh vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa phương pháp khuếch tán đĩa thạch theo tiêu chuẩn NCCLS 2007 tham khảo thêm tiêu chuẩn CA-SFM 2004 Kết ghi nhận sau: Về tiêu vi sinh Nước uống gia đình khơng đạt tiêu vi sinh nhiều chiếm 52% mẫu kiểm tra Tiếp theo nước uống công ty 28%, nước uống đóng chai 20% , nước uống trường học 6% hầu uống bệnh viện đạt tiêu vi sinh Trong tiêu vi sinh, P aeruginosa tiêu nhiễm nhiều chiếm đến 62% (59 95 mẫu không đạt tiêu vi sinh), Coliform 56%, Coliform fecal 43%, vi khuẩn kỵ khí sinh H2S 21% Streptococcus fecalis 13% Về tính đề kháng kháng sinh vi khuẩn P aeruginosa Trong 16 loại kháng sinh thử nghiệm, vi khuẩn đề kháng tỉ lệ cao với fosfomycin từ 33% đến 50% chủng thu Một số kháng sinh khác ticarcillin/a.clavulanic, cefsulodin, imipenem, aztreonam, sulfamides, tobramycin, amikacin bị kháng với tỉ lệ thấp (≤ 5%) Ngoài ra, chủng vi khuẩn tìm thấy khơng có tượng đề kháng đa kháng sinh 10 Thạch sunphit trytoza Nalidixic acid 0.015 g 12 Môi trƣờng King’s B Trytoza 15 g Soyton 5g Pepton 20 G Cao men 5g Glycerol 10 ml Natri metabisunphit 1g Kaki hydro photphat (K2HPO4) 1.5 g Amoni sắt (III) citrate 1g Magie sunphat (MgSO4.7H2O) 1.5 g Nước 1000 ml 11 Thạch CN Môi trường Thạch 15 g Nước 1000 ml 13 Môi trƣờng canh Acetamide Gelatin pepton 16 g Dung dịch A Casein hydrolysate 10 g Kali dihydrophotphat (KH2PO4) 1g Kali sunphat (K2SO4) 10 g magie sunphat (MgSO4) 0.2 g Acetamide 2g Natri clorua (NaCl) 0.2 g Magie clorua (MgCl2) Glycerol Thạch Nước 1.4 g 10 ml 11-18 g 1000 ml Thành phần CN Hexadecyltrimethyl ammonium bromide (cetrimide) 0.2 g Nước 900 ml Dung dịch B Na2MoO4.2H2O 0.5 g FeSO4.7H2O 0.05 g Nước 100 ml Môi trường hoàn chỉnh Dung dịch A 900 ml Dung dịch B ml Nước 99 ml 14 Môi trƣờng thạch dinh dƣỡng: 15 Thạch 15 g Nước 1000 ml Thuốc thử Nessler HgCl2 Pepton 5g KI Nước chiết thịt 1g NaOH Nước chiết nấm men 2g Nước cất Natri clorua (NaCl) 5g 10 g 7g 16 g thêm đến 100 ml ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO ĐẠI HỌC NÔNG LÂM TP HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC ****** 000 ****** KHẢO SÁT TÌNH HÌNH NHIỄM KHUẨN VÀ TÍNH ĐỀ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA VI KHUẨN Pseudomonas aeruginosa TRONG NƢỚC... Coliform fecal 43%, vi khuẩn kỵ khí sinh H2S 21% Streptococcus fecalis 13% Về tính đề kháng kháng sinh vi khuẩn P aeruginosa Trong 16 loại kháng sinh thử nghiệm, vi khuẩn đề kháng tỉ lệ cao với... phương pháp màng lọc để kiểm tra tiêu vi sinh nước uống dựa theo TCVN 6096:2004, làm kháng sinh đồ để kiểm tra tính đề kháng kháng sinh vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa phương pháp khuếch tán đĩa