0340KHẢO SÁT TÍNH ĐÈ KHÁNG KHÁNG SINH CỦA ESCHERICHIA COLI ĐƯỢC PHÂN LẬP TỪ CÁC MẪU BỆNH PHẢM MÁU VÀ NƯỚC TIỂU TẠI BỆNH VIỆN NHI ĐÔNG II

B GIÁO D C ÀO T O TR NG I H C M TP HCM  BÁO CÁO KHÓA LU N T T NGHI P Tên đ tài: KH O SÁT TÍNH KHÁNG KHÁNG SINH C A ESCHERICHIA COLI C PHÂN L P T CÁC M U B NH PH M MÁU VÀ N C TI U T I B NH VI N NHI NG II T THÁNG 11/2013 N THÁNG 4/2014 KHOA: CÔNG NGH SINH H C CHUYÊN NGÀNH: VI SINH-SHPT GVHD: ThS.BS Tr n Th Ng c Anh SVTH: Lê Nguy n C m Xuân MSSV: 1053010979 KHÓA: 2010_2014 Tp H Chí Minh, ngày tháng05n m2014 KHĨA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH M CL C T V Nă 10 M C TIÊU NGHIÊN C U 12 CH NGăI 13 T NG QUAN TÀI LI U 13 Că I M C A E.COLI 13 I I.1 Ngu n g c E.coli 13 I.2 căđi m hình thái c u trúc 14 I.3 Tính ch t nuôi c y 14 I.4 Tính ch t sinh v t hóa h c 14 I.5.ăKhángănguyênăvƠăđ c t 15 I.6 Ch năđoánăviăsinhăv t 16 I.7 Phòng b nh ch a b nh 16 II M TS B NH DO NHI M E.COLI 16 II.1 Nhi m trùng ti u E.coli gây 16 II.1.1.ă nhăngh a 16 II.1.2 Các tri u ch ng 16 II.1.3 Nguyên nhân 16 II.1.4 Xét nghi m 17 II.2 Nhi m trùng huy tăs ăsinhădoăE.coli gây 17 II.2.1.ă nhăngh a 17 II.2.2 Y u t nguyăc 17 II.2.3.Xét nghi m 18 III TÌNH HÌNH NHI M E.COLI 18 III.1 Trên th gi i 19 III.2 T i Vi t Nam 20 IV KHÁNG SINH 20 Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P IV.1.ă GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH nhăngh a 21 IV.2 Phân lo i kháng sinh 21 IV.3.ăC ăch tácăđ ng 23 IV.3.1 c ch trình t ng h p vách 23 IV.3.2 c ch ch ngăt bào 23 IV.3.3 c ch trình sinh t ng h p protein 24 IV.3.4 c ch sinh t ng h p acid nucleic 24 IV.4 S đ kháng sinh 24 IV.4.1 Hi năt ngăđ kháng kháng sinh 24 IV.4.2 Ngu n g c 25 IV.4.3.ăC ăch đ kháng kháng sinh 26 V TỊNHăHỊNHă KHÁNG KHÁNG SINH C A E.COLI 28 V.1 Trên th gi i 28 V.2 T i Vi t Nam 29 VI ESBLs 31 VI.1 Vài nét v l ch s phát hi n ESBLs 31 VI.2 Men ESBLs 32 VI.3.ăC ăch tácăđ ng c a ESBLs 32 CH NGăII 33 IăT A NG, V T LI UăVẨăPH IăT NG VÀ V T LI U NGHIÊN C U 33 IăT I NGăPHỄPăNGHIểNăC U 33 NG NGHIÊN C U 33 II VI KHU N NGHIÊN C U 33 III TH IăGIANăVẨă IV B NH PH M 33 Aă I M NGHIÊN C U 33 V MỌIăTR NG 34 V.1 Môi tr ng c p phân l p 34 V.1.1.ăMôiătr ng CA 34 V.1.2.ăMôiătr ng blood agar base (BA) 34 Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH V.1.3.ăMôiătr ng Bromocresol purple (BCP) 35 V.1.4.ăMôiătr ng Sabouraund agar (SAD) 35 V.2.ăMôiătr ngăđ nh danh 36 V.2.1.ăMôiătr ng KIA (KLigler Iron Agar) 36 V.2.2.ăMôiătr ng mannitol 37 V.2.3.ăMôiătr ng Citrate Simmons Agar 37 V.2.4.ăMôiătr ng ADH (L_ Agarinine monohydro chloride) 38 V.2.5.ăăMôiătr ng LDC(L_ Lysine monohydro chloride) 39 V.2.6.ăMôiătr ng ODC 39 V.2.7.ăMôiătr ng Ure_ Indol 40 V.3.ăMôiătr VI ngăxácăđ nhăđ nh y c m c aăkhángăsinhăđ i v i vi khu n 41 SINH PH M 42 VII THI T B 42 VIII TRANG THI T B KHÁC 42 B.PH NGăPHỄPăNGHIểNăC U 44 C.K THU T NGHIÊN C U[16,17,18, 24, 25] 45 K THU T L Y M U[24,25] 47 I I.1 Th iăđi m l y m u 47 I.2.ăPh ngăphápăl y m u 47 I.2.1 M u máu 47 I.2.2 M uăn I.3.ăL c ti u 47 ng b nh ph m 48 I.4 V t li u l y m u chuyên ch 48 I.4.1 V t li u l y m u 48 I.4.2 V t li u chuyên ch 49 II K THU T NH NăVẨă NGăKệăM U[9,24,25] 49 II.1 M u máu 49 II.2 M uăn III c ti u 49 K THU T KH OăSỄTă Că I M M U[9,24,25] 49 Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH III.1 M u máu 50 III.1.1 Soi tr c ti p 50 III.1.2 Kh o sát vi th 50 III.2 M uăn IV c ti u 50 K THU T NHU M GRAM18,8] 51 IV.1 Nguyên t c 51 IV.2 Ti n hành 51 IV.3 K t qu 52 V K THU T C Y PHÂN L P[18,24,25] 52 V.1 Nguyên t c 52 V.2 Quy trình 52 V.2.1 M u máu 52 V.2.2 M uăn VI c ti u 53 K THU TăTESTăSINHăHịAă NH DANH[2,16,24,25] 54 VI.1 KIA 55 VI.1.1 Ti n hành 55 VI.1.2.ă c k t qu 55 VI.2 Lên men mannitol 55 VI.2.1 Ti n hành 55 VI.2.2.ă c k t qu 55 VI.3 Citrate 56 VI.3.1 Ti n hành 56 VI.3.2 c k t qu 56 VI.4 Th nghi m decarboxylase 56 VI.4.1 Ti n hành 56 VI.4.2.ă c k t qu 57 VI.5 Urease_ Indol 57 VI.5.1 Ti n hành 57 VI.5.2.ăă c k t qu 57 Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH VII K THU TăXỄCă NHă NH Y C M KHÁNG SINH C A [16,17,24,25] E.COLI 59 VII.1 Nguyên t c 59 VII.2 Cách ti n hành 59 VII.2.1 Chu n b v t li u 59 VII.2.2 Chu n b huy n d ch vi khu n 59 VII.2.3.ăCácăb VIII c ti n hành 60 K THU T TH NGHI M ESBLs[24,25] 61 VIII.1 Ngyên t c 61 VIII.2 Th c hi n 62 IX K THU T THU TH P VÀ X LÝ S LI U 62 Thu th p s li u: Thuăth păvƠănh păd ăli uăvƠoăs ăvƠăExcel 62 CH NGă3 63 K T QU , BÀN LU N, K T LU NăVẨă I NGH 63 K T QU 63 I.1 K t qu chung v t l ni c yăd ngătínhăc a m u b nh ph mămáuăvƠăn c ti u 63 I.2 T l loài vi khu năđ c phân l p t b nh ph mămáuăvƠăn I.3 K t qu phân l p Escherichia coli t m u b nh ph mămáuăvƠăn c ti u 65 c ti u 67 I.4 S phân b NTT, NTH nhi m khu n E.coli theo tu i gi i tính 68 I.5 S phân b NTT, NTH nhi m khu n E.coli theo khoa 71 I.6 M căđ nh y c m c aăkhángăsinhăđ i v i E.coli 73 II BÀN LU N 81 III K T LU N 89 IV NGH 90 TÀI LI U THAM KH O 91 PH L C 94 Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH DANH M C CH VI T T T CA: Chocolate agar BA: Blood agar BCP Bromocresol purpe agar SAD: Sabouraund agar KIA: Kligler Iron Agar ADH: Arginine decarboxylase LDC: Lysine decarboxylase ODC: Ornithine decarboxylase MHA: Mueller Hinton agar CFU: n v hình thành khu n l c ESBL: Extended Spectrum Beta-Lactamases E.coli: Escherichia coli K.pneumoniae: Klebsiella pneumonia B.cepacia: Burkholderia cepacia S.coagualase âm: Staphylococci coagulase âm S.aureus: Staphylococcus aureus E.faecium: Enterrococcus faecium Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH DANH M C HÌNH NH Hình 1.1: K t qu nhu m gram E.coli Hình 1.2: S phân b vi khu n theo m u b nh ph m Hình 1.3: C ch tác đ ng c a kháng sinh Hình 1.4:C ch đ kháng kháng sinh Hình1 5: C ch b m đ y kháng sinh Hình1 6: T l kháng c a lo i vi khu n Gram âm đ i v i vài lo i kháng sinh th h m i Hình 2.1: Mơi tr ng ni c y phân l p: BCP, BA, CA Hình 2.2: chai c y máu Bactec Hình 2.3: L vơ trùng Hình 2.4: K t qu nuôi c y phân l p E.coli mơi tr ng Hình 2.5: K t qu ni c y phân l p E.coli môi tr ng Hình 2.6: Ph n ng KIA Hình 2.7: Ph n ng Manitol Hình 2.8: Ph n ng Citrate Hình 2.9: Ph n ng decarboxylase Hình 2.10: Ph n ng ure Hình 2.11: Ph n ng Indol Hình 2.12: K t qu test sinh hóa đ nh danh E.coli Hình 2.13: K t q a xác đ nh tính nh y c m kháng sinh c a E.coli Hình 2.14: Ph ng pháp đ a đôi k t h p Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH Hình 2.15 : K t qu c a ph ng pháp đ a đôi k t h p DANH M C CÁC B NG B ng 3.1: K t qu ni c y d ng tính c a m u b nh ph m máu B ng 3.2 : K t qu ni c y d ng tính c a m u b nh ph m n c ti u B ng 3.3: T l lo i vi khu n đ c phân l p t m u b nh ph m máu B ng 3.4: T l lo i vi khu n đ c phân l p t m u b nh ph m n B ng 3.5: T l Escherichia coli phân l p t m u máu n c ti u c ti u B ng 3.6: T l phân l p E.coli m u máu n c ti u theo đ tu i B ng 3.7: T l phân l p E.coli m u máu n c ti u theo gi i tính B ng 3.8: T l phân l p E.coli m u máu theo khoa B ng 3.9: T l phân l p E.coli m u n c ti u theo khoa B ng 3.10: M c đ nh y kháng sinh c a E.coli phân l p b nh ph m máu B ng 3.11: M c đ nh y kháng sinh c a E.coli phân l p b nh ph m n B ng 3.12: T l sinh ESBL c a E.coli m u máu n c ti u c ti u Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH DANH M C CÁC BI Uă Bi uăđ 3.1: K t qu ni c y d ng tính c a m u b nh ph m máu Bi uăđ 3.2: K t qu ni c y d ng tính c a m u b nh ph m n c ti u Bi uăđ 3.3: T l lo i vi khu n đ c phân l p t m u b nh ph m máu Bi uăđ 3.4: T l lo i vi khu n đ c phân l p t m u b nh ph m n Bi uăđ 3.5: T l Escherichia coli phân l p t m u máu n Bi uăđ 3.6: T l phân l p E.coli m u máu n c ti u c ti u c ti u theo đ tu i Bi uăđ 3.7: T l phân l p E.coli m u máu n c ti u theo gi i tính Bi uăđ 3.8: T l phân l p E.coli m u máu theo khoa Bi uăđ 3.9: T l phân l p E.coli m u n c ti u theo khoa Bi uăđ 3.10: M c đ nh y kháng sinh c a E.coli phân l p b nh ph m máu Bi uăđ 3.11 :M c đ nh y kháng sinh c a E.coli phân l p b nh ph m n c ti u Bi uăđ 3.12: T l sinh ESBL c a E.coli m u máu Bi uăđ 3.13: T l sinh ESBL c a E.coli m u n c ti u Bi uăđ 3.14: T l đ kháng kháng sinh c a E.coli so v i s li u 2012 2013 Trang SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P - GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH T l kháng Amikacine AK (8.2%) So sánh v i n m 2007 ( 7.5 %), n m 2012 (1.375 ), n m 2013 (7.4% )T l kháng AK khơng có s thay đ i qua n m  i v i kháng sinh thu c h Quinolones: - T l kháng Cipro CIP (57.5%), so sánh v i n m 2007 (42.41%) so sánh v i n m 2007 (42.41%), n m 2012 (53.83%) n m 2013 (64.69% ) t ng so v i n m tr tr T l kháng c Trong n m 2007 CIP m t nh ng l a ch n ng h p b nhi m E.coli - T l kháng Levo LEV (57.5%) so sánh v i s li u n m 2012 (54.2%) n m 2013(69.1%) => t l đ kháng kháng sinh có s u thay đ i qua n m - ây kháng sinh có ph kháng khu n r t r ng, đa s tác đ ng vi khu n Gram âm T l nh y cao m t nh ng l a ch n cho bác s u tr nhi m E.coli nhiên kháng sinh th ng gây tác d ng ph trình u tr  T l kháng v i kháng sinh Trime-sul SXT (79.5%) so v i n m 2007 (79.95%), n m 2012 (57.5% ), n m 2013 (72.87% )T l kháng SXT c a E.coli thay đ i qua n m  T l kháng kháng sinh Norfloxacine( 63.0%) t ng so v i 2011 NOR( 45%), kháng m nh v i Cephalothin (90.4% Trang 87 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH Bi uăđ 3.14: T l đ kháng kháng sinh c a E.coli so v i s li u 2012 2013 100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% Máu 20% N 10% c ti u 2012 0% 2013 Nh n xét: So sánh s đ kháng kháng sinh c a E.coli v i s li u 2012 2013 th y t l đè kháng kháng sinh c a E.coli phù h p v i s li u tr c đây, t l đ kháng kháng sinh tang theo n m II.4 Bàn lu n v kh n ngăsinhăESBLăc a E.coli Xét 29 m u b nh ph m máu 73 m u n c ti u phân l p, đ nh danh E.coli t l E.coli m u máu sinh ESBL 55.2% m u n sinh ESBL 68.5% So sánh v i nghiên c u tr c ti u t l E.coli c c a b nh vi n Nhi ng II Trang 88 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH b nh vi n khác th y k t qu h p lý Vì E.coli m t nh ng tr c khu n có kh n ng sinh ESBL cao III K T LU N Qua k t qu kh o sát 7502 m u b nh ph m máu 1210 m u n c ti u t i B nh vi n Nhi đ ng II t ngày 1/11/2013 đ n ngày 4/2014 có th đ a k t lu n:  Trong 87502 m u máu có 554 m u cho k t qu d ng tính chi m 7.4% s m u d ng E.coli chi m 5.2% Còn 1210 m u n c ti u có 155 m u d ng tính chi m 12.8% s m u d ng E.coli chi m 47.1%  Trong nhi m trùng E.coli m u máu có s ch nh l ch không nhi u gi a nam n C th nam ( 55.2%), n (44.8%) Còn nhi m khu n E.coli m u n c ti u c ng có s ch nh l ch t ng t nam (47.9%), n (51.1%)  Qua th ng kê có th th y đ c t l nhi m khu n E.coli bé đ tu i d i tu i chi m t l cao C th đ i v i m u máu 48.2% m u n c ti u 27.4%, tr đ tuôi 1-5 kh o sát m u n c ti u có t l nhi m khu n cao nh t 58.9%  Th ng kê cho th y t l nhi m khu n E.coli khoa nh s sinh, th n n i ti t, UBHH, n i t ng h p chi m t l cao Xét v m c đ nh y c m c a kháng sinh v i Escherichia coli  Trong m u máu: Escherichia coli kháng đa kháng sinh m c cao: đa s kháng sinh thu c nhóm cephalosporin h -lactams đ u b kháng v i t l cao, gi m d n theo th h , t l kháng th p nh t FEP (31.0%) Các kháng sinh thu c nhóm -lactams/ c ch -lactamase có t l kháng c ng cao Kháng sinh thu c nhóm Carbapenem có t l nh y cao, c th IMI (34.5%), MER (13,8%) Tình hình kháng đa kháng sinh c a E.coli kh n ng ti t ESBL có kh n ng kháng kháng sinh thu c nhóm Cephalosporin nh ng kháng th p v i kháng sinh thu c nhóm Carbapem kh n ng sinh men carbepenemase th p  Trong m u máu: Escherichia coli kháng đa kháng sinh m c cao: đa s kháng sinh thu c nhóm cephalosporin h -lactams đ u b kháng v i t l cao, gi m d n theo th h , t l kháng th p nh t FEP (37.0%) Các kháng sinh thu c nhóm -lactams/ c ch -lactamase có t l kháng c ng cao Kháng sinh thu c nhóm Carbapenem có t l nh y cao, c th IMI (98.6 %), MER (100 %) Tình hình kháng đa kháng sinh c a E.coli kh n ng ti t ESBL có kh Trang 89 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH n ng kháng kháng sinh thu c nhóm Cephalosporin nh ng kháng th p v i kháng sinh thu c nhóm Carbapem kh n ng sinh men carbepenemase th p IV NGH Ti p t c có nghiên c u t ng t v i u ki n thí nghi m chuyên sâu h n, c m u l n h n có nh ng qui đ nh ch t ch h n v cách l y m u, l u m u đ có nh ng đánh giá tòan di n h n v v n đ NKHH d i tr c khu n Gram âm gây tr em Qua k t qu kh o sát trên, ta có th th y t l tr c khu n Gram âm kháng đa kháng sinh ngày t ng kh n ng sinh ESBL tránh tình tr ng gia t ng s kháng kháng sinh, xin đ ngh : - C n đ cao bi n pháp kh trùng tránh tình tr ng “nhi m khu n chéo” - Duy trì li u l ng thu c đ cao mô đ nh ng vi khu n đ t bi n b c ch nh ng vi khu n ban đ u cđ u - Ph i h p thu c: s d ng đ ng th i lo i thu c khơng có ph n ng chéo M i lo i s gi m thi u nh ng ch ng đ t bi n đ i v i lo i thu c - H n ch s d ng: tránh không cho vi khu n quen thu c - Ch s d ng kháng sinh c n thi t - S d ng kháng sinh li u l ng - Giám sát s đ kháng kháng sinh c a tr c khu n Gram âm - Tìm ki m k thu t m i đ nh danh phát hi n vi khu n nhanh chóng xác, h tr vi c u tr Tr c khu n Gram âm tác nhân gây nhi m trùng b nh vi n, c n có nh ng bi n pháp ch t ch phòng ch ng nhi m khu n b nh vi n Trang 90 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH TÀI LI U THAM KH O Tr n Th Ng c Anh(2007), S đ kháng kháng sinh c a vi khu n gây b nh th ng g p t i b nh vi n Nhi đ ng II, n m 2007 Nguy n Thái Bình(2012), Giáo trình Vi sinh v t gây b nh, i h c M Tp H Chí Minh Nguy n Thanh B o(2003), Vi khu n hoc, HYD Tp.HCM - B môn vi sinh Bùi Th Lý Hoa, T ng Phi Khanh, Nguy n Th Hoa, Th Chín, Tr ng Quang Vinh, Vi sinh h c Y khoa th c hành, HYD Tp.HCM-b y t B môn xét nghi m, Vi sinh h c y khoa, Tr ng ih cYd c Thành ph H Chí Minh B Y t (2000), Tài li u t p hu n Vi sinh lâm sàng, Hà N i Lê ng Hà c ng s (03/2000), Tài li u t p hu n vi sinh lâm sàng, Hà N i Nhà Xu t B n Y H c (2006), K thu t xét nghi m vi sinh lâm sàng, Ph m Hùng Vân Ph m Hùng Vân (2004), C m nang xét nghi m vi sinh lâm sàng, Tài li u n i b 10 Ph m Hùng Vân (1999), K thu t l y chuyên ch làm b nh ph m kh o sát vi sinh lâm sàng, HYD Tp.HCM 11 Ph m Hùng Vân, Ph m Thái Bình, Lê Th Kim Anh, V Th Châu H i (2009), Nghiên c u đa trung tâm kh o sát tình hình đ kháng kháng sinh c a tr c khu n Gram âm d m c gây nhi m khu n b nh vi n phân l p t 01/2007 đ n 5/2008, Y h c TP H Chí Minh* t p13* Ph b n s 12 B Y t - V u tr (2005), H i ngh t ng k t ho t đ ng H i đ ng thu c u tr n m 2005, Hà N i 4-2004 13 C.T Nga, H.D M ch (2007), T l sinh Beeta Lactamase ph r ng ESBL ch ng Klebsiella, E.coli Enterobacter phân l p t i b nh vi n Vi t Ti p H i Phòng t 1-7-2005 đ n 31-6-2006, T p chí y h c Vi t Nam s 11 k Trang 91 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH 14 N T.Y Xuân, N.V.V Châu, N.T Tùng (2005) Tình hình kháng kháng sinh c a vi khu n Gram âm sinh men beta-lactamases ph m r ng gây nhi m khu n b nh vi n t i b nh vi n Nhi t đ i t 5/2002 đ n 2/2004, y h c Tp H Chí Minh Vol 9: 172-177 15 S kháng thu c c a vi khu n gây b nh th ng g p t i b nh vi n Th ng Nh t, n m 2006” c a Cao Minh Nga 16 D ng Nh t Linh(2008), Giáo trình th c t p vi sinh gây b nh, i h c M Tp H Chí Minh 17 D ng Nh t Linh, Giáo trình Vi sinh v t gây b nh, 18 Nguy n V n Minh, D i h c M Tp H Chí Minh ng Nh t Linh(2008), Giáo trình th c t p vi sinh c s , i h c M Tp H Chí Minh 19 Nhà Xu t B n Y H c (2006), K thu t xét nghi m vi sinh lâm sàng, Ph m Hùng Vân 20 Ph m Hùng Vân, Vi khu n Gram âm đ kháng kháng sinh th c tr ng t i Vi t Nam m m i v chu n m c bi n lu n đ kháng 21 Tr n Linh Th c(2010), “Ph ng pháp phân tích vi sinh v t n c, th c ph m m ph m”, NXB Giáo d c Vi t Nam, Hà N i 22 Nguy n Th Vinh, Nguy n c Hi n, oàn Mai Ph Thu H ng, Ngô Th Thi, Chu Th Nga, ng, Võ Th Chi Mai, ng oàn Th H ng H nh, Bùi V n T o, Nguy n Th Nam Liên, Nguy n Th Ng c Hu , Phan V n Bé B y c ng s (2006), “ Giám sát s đ kháng kháng sinh c a vi khu n gây b nh th ng g p Vi t Nam n m 2005”, T p chí nghiên c u Y h c, 46(6), tr 87-91 23 Tài li u h ng d n qui trình xét nghi m lâm sàng đ i v i b nh ph m n c a khoa vi sinh b nh vi n Nhi 24 Tài li u h c ti u ng ng d n qui trình xét nghi m lâm sàng đ i v i b nh ph m máu c a khoa vi sinh b nh vi n Nhi ng Trang 92 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH 25 KTV Tr n Th Kim Loan “S đ kháng kháng sinh c a E.coli invitro t i b nh vi n đa khoa Qu ng Nam” t tháng 1/2010 _9/2011 26 BS V n Bích c ng s BS Nguy n S Minh Tuy t, BS Võ Th Trà An, BS Nguy n Thanh Tùng “ Kh o sát s đ kháng kháng sinh c a Escherichia coli t i b nh vi n nhân dân Gia nh” 27 Bradford PA (2001), Extended-spectrum -lactamases in the 21st century: characterization, epidemiology, and detection of this important resistance threat, Clin Microbiol Rev.14: 933-951 Trang 93 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH PH L C Ph l c 1: M u đ c k t qu kháng sinh đ theo CLSI 2012 TÊN KHÁNG KHU CHăTỄNă SINH A N NG NG Aă KÍNH KHÁNG VỊNG SINH VƠ KHU N S≤ R≥ MIC (mg/ml) K T QU S: Nh y S≥ I ≤R I: Trung gian R: Kháng NS: Không nh y PENICILLINS Penicilline 10 µg 29 28 0.12 - 0.25 Oxacilline (S aureus + 30 µg 22 ludnensis) cefoxitin 21 Cefoxi 4 Cefoxi Oxacilline (SCN) Ampicilline ăậLACTAMS/ 10 µg C CH 25 24 0.25 Oxa 0.5 17 13 16 32 ăậLACTAMASE Amoxcilline-clavulanic acid 20/10 µg 18 13 8/4 16/8 32/16 Ampicilline-sulbactam 10/10 µg 15 11 8/4 16/8 32/16 Piperacilline- 100/10 21 17 16/4 32/4- 128/4 Trang 94 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P tazobactam Piperacillinetazobactam aeruginosa) GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH µg 100/10 (P µg 64/4 21 14 16/4 32/464/4 128/4 Ticarcilline-clavulanic acid 75/10 µg 20 14 16/2 32/464/2 128/4 Ticarcilline-clavulanic (P aeruginosa) 75/10 µg 24 15 16/2 32/464/2 128/4 Cefoperazone-sulbactam 75/30 µg 21 15 CEPHEMS Cephalothin 30 µg 18 14 16 32 Cefuroxime (tiêm) 30 µg 18 14 16 32 Cefuroxime (u ng) 30 µg 23 14 8-16 32 Cefoperazone 75 µg 21 15 16 32 64 Cefotaxime 30 µg 26 22 Cefotaxime (Acinetobacter spp) 30 µg 23 14 16-32 64 Ceftriaxone 30 µg 23 19 Ceftriaxone (Acinetobacter spp) 30 µg 21 13 16-32 64 Ceftazidime 30 µg 21 17 16 Ceftazidime(P aeruginosa+ Acinetobacter spp) 30 µg 18 14 16 32 (B 30 µg 21 17 16 32 Ceftazidime cepacia) Trang 95 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH Cefepime 30 µg 18 14 16 32 Cefotetan 30 µg 16 12 16 32 64 Cefoxitine 30 µg 18 14 16 32 Cefixime µg 19 15 30 µg 21 17 16 (P 30 µg 22 15 16 32 10 µg 23 19 (P 10 µg 19 15 Imipenem (Acinetobacter + Aeromonas) 10 µg 16 13 16 Meropenem 10 µg 23 19 Meropenem aeruginosa) (P 10 µg 19 15 10 µg 16 13 16 Meropenem (B cepacia) 10 µg 20 15 16 Ertapenem 10 µg 22 18 0.5 ≥2 Gentamycine 10 µg 15 12 16 Amikacine 30 µg 17 14 16 32 64 Tetracycline 30 µg 15 11 16 MONOBACTAMS Aztreonam Aztreonam aeruginosa) CARBAPENEMS Imipenem Imipenem aeruginosa) Meropenem (Acinetobacter + Aeromonas) AMINOGLYCOSIDES Trang 96 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P Tetracycline (Staphylococci Vibrio) 30 µg GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH 19 14 16 + FLOUROQUINOLONES Ciprofloacine µg 21 15 Ciprofloacine µg 31 20 ≤ 0.06 0.120.5 ≥1 Levofloxacine µg 17 13 Levofloxacine (Staphylococci) µg 19 15 Norfloxacine 10 µg 17 12 16 Ofloxacine µg 16 12 Ofloxacine (Staphylococci) µg 18 14 30 µg 19 13 16 - 32 (S typhi + Salmonella spp ru t) QUINOLONES Nalidixic acid FOLATE PATHWAY INHIBITORS Trimethoprimesulfamethoxazole 1.25/23.7 16 µg 10 2/38 - 4/76 Chloramphenicol 30 µg 18 12 16 32 Azithromycine 15 µg 18 13 Erythromycine 15 µg 23 13 0.5 1-4 Rifamycine µg 20 16 MACROLIDES Vancomycine aureus) (S 30 µg - - 4-8 16 Vancomycine (S 30 µg - - 8-16 32 Trang 97 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH coagulase negative) Clindamycine µg 21 14 0.5 1-2 Nitrofurantoin 300 µg 17 14 32 64 128 Linezolid 30 µg 21 20 - Fosfomycin 200 µg 16 12 64 128 256 Colistin (P aeruginosa) 10 µg 11 10 Colistin Acinetobacter) - - - 12 11 - - - Polymycin aeruginosa) Polymycin (Acinetobacter) ( B (P 300 đv B - Trang 98 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH Ph l c 2: Phi u xét nghi m MS:ầầầầ S Y T TP.HCM B NH VI N NHI S :ầầầầ NG PHI U XÉT NGHI M B nh ph m:ầầầ - H tên ng i b nh:ầầầầầầầầầầ Tu i:ầầầầầNam/N a ch : ầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầ - Khoa: ầầầầầầầầầầầầầầầầ Bu ng:ầầầ.Gi - Chu n đoán:ầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầầ YÊU C U XÉT NGHI M K T QU XÉT NGHI M Ngàyầầthángầ n m BÁC S I U TR H tên:ầầầầầầầầầầầ ng:ầ Ngàyầthángầ.n mầầ TR NG KHOA XÉT NGHI M H tên:ầầầầầầầầầ Trang 99 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH Ph l c 3:Hình nh trang thi t b Hình 2.2: T m Hình 2.4: Kính hi n vi Hình 2.3: T l nh Hình 2.5: Máy vortex Trang 100 SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN KHÓA LU N T T NGHI P Hình 2.6: T GVHD:ThS.BS TR N TH NG C ANH m Hình 2.7: T CO2 Hình 2.8: T an toàn sinh h c SVTT: LÊ NGUY N C M XUÂN Trang 101