0032 xác định một số yếu tố độc lực của enterotoxigenic escherichia coli (etec) gây tiêu chảy trên heo con ở đồng bằng sông cửu long luận văn tốt nghiệp

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNGĐẠIHỌCCẦNTHƠ NGUYỄNTHỊHẠNHCHI XÁC ĐỊNH MỘT SỐ YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦAENTEROTOXIGENICESCHERICHIA COLI(ETEC)GÂYTIÊU CHẢYTRÊN HEO CONỞ ĐỒNGBẰNGSÔNGCỬULONG Chuyên ngành: Vi sinh vật họcMãngành: 62 42 01 07 TÓMTẮT LUẬNÁNTIẾNSĨSINHHỌC 2015 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠOTRƯỜNGĐẠIHỌCCẦNTHƠ NGUYỄNTHỊHẠNHCHI XÁC ĐỊNH MỘT SỐ YẾU TỐ ĐỘC LỰC CỦAENTEROTOXIGENICESCHERICHIA COLI(ETEC)GÂYTIÊU CHẢYTRÊN HEO CONỞ ĐỒNGBẰNGSÔNGCỬULONG Chuyên ngành: Vi sinh vật họcMãngành: 62 42 0107 TÓMTẮT LUẬNÁNTIẾNSĨSINHHỌC Người hướng dẫn khoa học:PGS.TS Hà Thanh TồnPGS.TS.LýThịLiênKh Cơng trình hồn thành tại:Viện Nghiên cứu PháttriểnCơngnghệSinhhọc,trường Đại họcCầnThơ Ngườihướngdẫnkhoa học:PGS.TS.Hà ThanhTồn PGS.TS.LýThịLiênKhai Phảnbiện1:…………………………………………………… Phảnbiện2:…………………………………………………… Phảnbiện3:…………………………………………………… Luận án bảo vệ Hội đồng chấm luận án cấp TrườngHọptại……………………………………………… ……… Vào……giờ…… ,ngày……tháng…… năm……… Cóthểtìm luận ántại: Thư viện Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học,trườngĐại học Cần Thơ Trungtâm học liệu trườngĐại học Cần Thơ ThưviệnQuốc gia Chương1.TỔNGQUANVỀLUẬNÁN 1.1 Giớithiệu EnterotoxigenicEscherichia coli(ETEC) nguyênnhân phổ biến gây bệnh tiêu chảy cho heo theo mẹ sau cai sữa, 2yếu tố độc lực kháng nguyên bám dính độc tố ruột (Nagy andFekete,1999,GylesandFairbrother,2010).Phầnlớnnhữngnghiêncứuvề E coliở khu vực đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) dừng việc thựchiện phảnứnghuyếtthanhhọcđểpháthiệnkhángnguyênOvàkhángnguyên F, số loại độc tố Trong nghiên cứu ngồinướctrongthờigianquachothấysựphânbốvàđặcđiểm củaE coligâybệnh nói chung ETEC nói riêng ln thay đổi theo vùng địa lý, thờigianlấymẫuvàtrênnhữngđànkhácnhau.Bêncạnhđó,ngườichănnisử dụngkhángsinhđểphịngvàđiềutrịbệnhchovậtniđãtạonê n nhữngchủngđakhángvớikhángsinh.Nhữngchủngnàykhơngnhữnggâyảnh hưởng đến sức khoẻ người tiêu dùng, mà cịn ảnh hưởng đến qtrìnhđiều trị bệnh sau này.Vìvậy,n g h i ê n c ứ u n y g i ú p p h t h i ệ n c c chủng ETEC gây bệnh heo con, đề kháng khả mang genekháng kháng sinh chúng, nhằm bảo vệ vật nuôi, nâng cao suất vàchất lượng thịt theo yêu cầu ngày cao người tiêu dùng súc sảnphẩm thịt sạch, an toàn chất lượng để bảo vệ sức khỏe cho conngười Xuất phát từ vấn đề trên, nghiên cứu “Xác định số yếu tốđộc lực enterotoxigenicEscherichia coli(ETEC) gây tiêu chảy heocon ĐồngbằngsôngCửuLong” đượctiến hành 1.2 Mụctiêu Xác định phân bố yếu tố độc lực, đặc tính kháng khángsinh chủng ETEC phân lập từ heo số tỉnh/thành thuộcĐBSCL; phân tích số đặc tính di truyền mức độ phân tử cácchủngETECmangkhángnguyên F4 F18 1.3 Ý nghĩacủa luậnán Luận án cơng trình nghiên cứu cách có hệ thống sốgene độc lực chủng ETEC từ heo khỏe, heo tiêu chảy, môi trườngchăn nuôi, đánh giá phân bố gene mã hóa độc lực theo địaphương, theo nhómtuổi heo Kết đề kháng nhạy cảm với kháng sinh chủng ETECđểgiúp cán thú y chọn loại kháng sinhđiềut r ị c ó h i ệ u l ự c c a o cho từngđịa phương Kết nghiên cứu sở khoa học cho nghiên cứu tiếptheovềcácbiếnthểcủakhángnguyênbámdínhF4vàF18đểchọnnhữngchủng ETEC mang kháng nguyên thích hợp cho việc sản xuất vaccinephòng bệnh ETEC gây heo khu vực ĐBSCL, đồng thời cógiátrịgópphầnbổsung kiếnthứcthựctế,tư liệu khoahọcd ù n g c h o nghiêncứuvàgiảngdạymônVisinhvậthọcThúy, Bệnhtruyềnnhiễm,Miễndịch họctrongcáctrườngĐại học Nôngnghiệp 1.4 Nhữngđiểmmớicủaluậnán Luận án công trình ứng dụng kỹ thuật PCR để xác địnhchính xác diện gene mã hóa kháng nguyên bám dính (F4,F5, F6, F18, Intimin, AIDA-I), độc tố ruột (LT, STa, STb, EAST1) genemãh ó a k h ả n ă n g k h n g k h n g s i n h c ủ a c c c h ủ n g E T E C g â y b ệ n h t i ê u chảy heo theo mẹvàheosaucai sữaở khu vựcĐ B S C L V ì v ậ y , k ế t quảnghiêncứunàylàmcơsởđểxácđịnhvaitrịcủaETECgâytiêuchảyở heocon hiệu quảphòngchốngbệnh khu vực Kếtq u ả c ủ a l u ậ n n c u n g c ấ p t h ô n g t i n k h o a h ọ c v ề s ự p h â n b ố geneliên quanđến cácđộc lựcvàđềk h n g k h n g s i n h c ủ a c c chủngETECphân lập từ cáctrạichănnuôiheoởkhu vực ĐBSCL Phân tích mức độ tương đồng genefaeG,fedAvà quan hệ di truyềncủacác chủngETECgâybệnh tiêuchảytrênheo ĐBSCL Bố cụccủaluậnán Luận án gồm 147 trang (không kể phần phụ lục), chia thành phầnnhưsau:Chương1:Tổngquanvềluậnán(3trang);Chương2:Tổngquantài liệu (32 trang); Chương 3: Nội dung và phương pháp nghiên cứu (20trang); Chương 4: Kết thảo luận (76 trang); Chương 5: Kết luận vàđề xuất (2 trang); Tài liệu tham khảo (14 trang) Luận án có 40 bảng, 45hình Tổng tài liệu tham khảo 182, gồm 25 tài liệu tiếng Việt, 153 tài liệutiếngAnh tàiliệu thamkhảo từ trangWeb Chương2 TỔNGQUANTÀI LIỆU 2.1 VikhuẩnEscherichiacoli Vik h u ẩ n E c o l i đ ợ c T h e o d o r e E s c h e r i c h n g i Đ ứ c m ô t ả l ầ n đầutiênvàonăm1885vàsauđóđượcxemlànguyênnhângâybệnhtiêuchảy người động vật (Levine, 1987) Đây vi khuẩn thường trú trongđường tiêu hóa động vậtv n g i V i k h u ẩ n E colicó thể gây bệnhchogiasúc mọilứatuổi, đặcbiệtlàgiasúcsơ sinh(Hirsh,2004) 2.1.1 Đặcđiểm hìnhthái E colilà trực khuẩn đường ruột, Gram âm, vi khuẩn hìnhque nhỏ, kích thước dài ngắn tùy thuộc vào môi trường nuôi cấy, đườngkính khoảng µm Khơng hình thành bào tử, tạo giáp mơ mỏng, có lơngquanhc t h ể K h u ẩ n l c t r ê n m ô i t r n g đ ặ c p h t t r i ể n h o n t o n s a u ngàynicấy.Khuẩnlạccónhiềudạngkhácnhautừnhẵn,nhănnheocóbìa trịn, nhăn nheo nhầy Một vài chủng có khả gây dunghuyết(FairbrotherandGyles, 2006) 2.1.2 Đặctínhnicấy E colithuộc loại trực khuẩn hiếu khí yếm khí tùy tiện Nhiệt độthích hợpchochúngpháttriểnlà37oC, pH thích hợp 7,2-7,4 Chúng mọcdễdàngtrongMacConkey (MC),EosinMethyleneBlue(EMB),cókhảnăngsản sinh dunghuyết α β (Quinnetal., 2004) 2.1.3 Đặctínhsinhhóa KếtquảkiểmtraIndolevàMethylRed(MR)củaE.colilàdươngtính,nhưngVog esProskauer(VP)vàCitratethìâmtính,hồnngunnitratethànhnitrite,khơngsửdụngur e.TrênmơitrườngKliglerIronAgar(KIA):E.colilên men đường glucose lactose, phần thạch nghiêng thạch đứng đềuchuyểnsangmàuvàng,làmnứtthạch;ngồirakhơngsinhH2S, (Quinnetal.,2004) 2.2 Phânloại vi khuẩnE.coligây bệnh Vi khuẩnE colithuộc Enterobacteriales, họ Enterobacteriaceae,giốngEscherichia(Hirsh, 2004).E coligây bệnh chia hai nhóm:E.coligâybệnhđườngruộtvàE.coligâybệnhngồiđườngruột.Trướcđâ y, E.c o l i g â y b ệ n h đ n g r u ộ t đ ợ c c h i a t h n h p h â n n h ó m d ự a t r ê n k h ả nănggâybệnhcủachúng:EnteropathogenicE.coli(EPEC),enterohaemorrhagicE coli(EHEC),enteroinvasiveE.coli(EIEC),enteroaggregativeE.coli(EAEC),ent erotoxigenicE.coli(ETEC)vàdiffusely adherentE coli(DAEC) (Kaperet al.,2004) Gần đây, xuấthiện thêm hai phân nhóm mới, adherent invasiveE coli(AIEC) đượccho có liên quan với bệnh Crohn, không gây tiêu chảy shigatoxin (Stx) producing enteroaggregativeE coli(STEC) gây ổ dịchE coliởĐứcvàonăm2011 (Clementset al., 2012) 2.3 Giớithiệu vềETECở heo ETEC xâm nhập vào động vật đường tiêu hóa, diệnđủ số lượng, bám vào thụ thể biểu mô ruột non lớp biểumơ phủ chất nhầy, sau phát triển nhanh chóng để đạt số lượng lớnkhoảng 109vi khuẩn/ gram đoạn không tràng đến hồi tràng.ETECbámchặtvớicácbiểumơ sảnxuấtđộctốruột, kíchthíchsựbàixuất qmứcnướcvàchấtđiệngiảivàotronglịngruột.Kếtquảdẫnđếntiêuchảynếucácchấ tlỏngdưthừatừruộtnonxuốngkhơngđượchấpthụlạitrongruộtgià.ETEClàngunnhâ ntiêuchảynghiêmtrọng,cóthểdẫnđếnmấtnước,mệt mỏi, chuyển hóa nhiễm acid, gây chết (GylesandFairbrother,2010) 2.4 Cácyếutố độclực củaETEC Những nghiên cứu gần cho yếu tố bám dính ETECsinh heo K88 (F4), K99 (F5), 987P (F6), F41 F18 Ngoài cácnhà khoa học phát thêm loại bám dính khác (AIDA-I) trongcác chủng ETEC VTEC có mang kháng nguyên bám dính F18 (Mainiletal., 2002, Ngelekaet al., 2003) Sau bám vào thụ thể tế bàobiểu mô ruột, chủng ETEC sản xuất độc tố đường ruột, độc tốchịu nhiệt (STa, STb EAST1) độc tố chịu nhiệt (LT) (GylesandFairbrother, 2010) Những chủng ETEC dương tính với F4 chủng phổ biến heocon theo mẹ bị tiêu chảy, chúng sản xuất độc tố ruột LT STb, nhữngchủng dương tính với F5, F6 F41 sản xuất chủ yếu STa, vàichủng sản sinh STb, chủng gây bệnh tiêu chảy chủ yếu heotừ - ngày tuổi, heo lớn chiếm tỷ lệ thấp (FairbrotherandGyles,2006) Ngoài chủng ETEC phân lập từ heo sơ sinh cai sữa bịtiêu chảy có chứa độc tố STb hay STb: EAST1 dương tính vớiAIDA-I (Ngelekaeta l , 2003) Kháng nguyên bám dính F4 F18 chiếmtỷlệcaonhất vàđóngvaitrịquantrọngnhấttrongqtrìnhgâybệnh ởheocon(Frydendahl,2002;Zhangetal.,2007) 2.5 Tínhkhángkhángsinh E.c o l i c ó k h ả n ă n g kh n g l i m ộ t h o ặ c n h i ề u l o i k h n g s i n h, đ ặ c biệt loại kháng sinh sử dụng phổ biến thức ăn chănnivàđiềutrịbệnhgiasúc(Ahmedetal.,2009).Gầnđây,nhữngchủng E colicó tính đa kháng với nhiều loại kháng sinh ngày tăng, đặc biệtvớinhữngkhángsinhthườngsửdụnghiệnnaythuộchọβlactam,cephalosporinvà cácquinolonesthếhệ mới(Văn Bíchvà ctv., 2009) Sựkhá ng thuốcc ủavikhuẩ nc hủ yếulàdo genenằm trênpl asmi dqui định.Nhờcácgenekhángthuốcnàymàvikhuẩncókhảnăngchốnglạitácdụngcủakhángsinh.Sựđềkhángrấtbềnvữngvà đượctruyềnsangthếhệsauqua q trình di truyền (Kenneth,2012) 2.6 Tìnhh ì n h n g h i ê n c ứ u t r o n g n c v n g o i n c v ề E T E C gâybệnhtiêuchảytrên heo Các nghiên cứu nước Cù Hữu Phúvà ctv (2003), Hồ Sốivà Đinh Thị Bích Lân (2005), Trương Quang (2005), Trịnh Quang Tuyên(2006), Đỗ Ngọc Thúyvà ctv.(2008) Võ Thành Thìn (2012) ngồi nướcnhư Frydendahl (2002), Vũ Khắc Hùng Pilipcinec (2003), Wanget al (2006), Zhanget al (2007), Leeet al.(2008) Chaeet al (2012) trongthời gian qua cho thấy phân bố đặc điểm củaE coligây bệnh đườngruột nói chung ETEC nói riêng thay đổi theo thời gian vùng địalý Sự thay đổi có ảnh hưởng lớn đến hiệu biện phápphòngchốngbệnhchođànheoởcácvùngđịalý-kinhtếkhácnhau.Riêngở khu vực ĐBSCL,E coliđược xác định số nguyên nhângây bệnh tiêu chảy thường xảy heo theo mẹ sau cai sữa (LýThị Liên Khai, 2001) Chỉ có nghiên cứu chuyên sâu vềE coligây bệnhtrênheoc on ởĐBSCL c ủaNguyễ n KhảNgự v Lê V ă n Tạo(1996); L ý ThịLiênKhai(2001),BùiTrungTrựcvà ctv.(2004) ỏi so với cáckhuvực chăn nuôi heo khác ởtrongnước Chương3.NỘIDUNGVÀ PHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 3.1 Nộidungnghiêncứu 3.1.1 PhânlậpvàđịnhdanhvikhuẩnE.colitừphânheokhỏe,he otiêu chảy vàmôi trường PhânlậpvàxácđịnhtỷlệnhiễmE.colitừphânheokhỏe,heotiêuchảyvàmô i trường Địnhd a n h c c c h ủ n g E T E C b ằ n g p h ả n ứ n g n g n g k ế t n h a n h t r ê n phiếnkính 3.1.2 Xácđịnh yếutốđộc lựccủa ETEC XácđịnhsựhiệndiệnmộtsốgenemãhóakhángngunbámdínhF4,F5,F6,F18,Intimi nvàAIDA-I XácđịnhsựhiệndiệnmộtsốgenemãhóađộctốSTa,STb,LTvàEAST1.Thínghiệ mtrênđộngvậtthínghiệmtrênchuộtvàtrênheosaucaisữa 3.1.3 XácđịnhđặctínhđềkhángkhángsinhcủaETEC Xác định kháng kháng sinh ETECXácđịnh gene khángkháng sinh 3.1.4 Phântíchđặctínhditruyềnởmứcđộphântửcủamộtsốchủn gETEC Phân tích trình tự nucleotide genefaeGvàfedAmã hóa tiểu phân tửFaeG,FedAcủa khángnguyên bámdínhF4 F18 Xácđịnh quanhệ di truyềncủa chủngF4 F18 ETEC 3.2 Địađiểm vàthờigiannghiên cứu Địa điểm lấy mẫu: nông hộ/ trang trại tỉnh/ thành thuộcĐBSCL (An Giang, Bến Tre, Đồng Tháp,Sóc Trăng, Vĩnh Long ThànhphốCầnThơ) Phịng thí nghiệm: (1) phịng thí nghiệm Vi khuẩn học, Bộ môn Thúy, Đạih ọ c N ô n g n g h i ệ p v K ỹ t h u ậ t T o k y o , N h ậ t B ả n ; (2) Phịng t h í nghiệmVệ s i n h Th ự c p h ẩ m , B ộ m ô n T h ú Y , k h o a N ô n g nghi ệ p v S i n h học ứng dụng, Đại họcCần Thơ; (3) Phịng thí nghiệm Sinhhọc phântử,Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học, Đại học Cần Thơ; (4)CôngtyMacrogen, Hàn Quốc Thờigiannghiên cứu:12/2011 –7/2014 3.3 Phươngphápnghiêncứu 3.3.1 Phân lập định danh vi khuẩnE colitừ phân heo khỏe,heocontiêuchảy môitrường 3.3.1.1 Đối tượng nghiên cứu:Từ tháng 11/2011 đến 12/ 2013, mẫuphânđượcthuthậptừheotheomẹvàsaucaisữamắcbệnhtiêuchảy,mẫuphânheo khỏe mẫumôi trường 3.3.1.2 Phươngpháp a) Điềutravề trạngni vàtình hìnhbệnhtrên heo Cácnộidungcầnthuthậpkhiđiềutrađượcghinhậntheophiếuđiềutra b) Lấymẫu Tổng số mẫu phân thu thập 2.011, có 1.272 mẫu từ heotiêuchảy, 199 mẫu heokhỏe 540 mẫumôi trường Mẫu phân:dùng tăm vô trùng xoay nhẹ hướng biểu môniêm mạc trực tràng heo bị tiêu chảy nghi doE coli, cho tăm bơng có mẫuphânv o l ọ v ô t r ù n g c ó c h ứ a m i t r n g v ậ n c h u y ể n l c a r y b l a i r , b ả o quảnlạnhvậnchuyểnvềphịngthínghiệm.Sốmẫutừphântiêuchảyđượctiến hành lấy 2-3 mẫu/ đàn trại lấy 3-5 đàn Riêng mẫu phân heokhỏechỉlấy1 mẫu đại diện/ trại Mẫu môitrường Mẫu nước uống: trại/ hộ dân có heo tiêu chảy, rửa sạchnúmuốngvàbỏnhữnggiọtnướcđầutiênđi,dùngbọcnilonvơtrùnglấy 1.000 ml, bảo quản lạnh4-8oC đem phịng thí nghiệm phân lập trongngày Mẫu ổ úm/ sàn chuồng: dùng tăm vơ trùng qt nhẹ lên nềnchuồng,chổkhơráo,khơngdínhphân,chotămbơngvàomơi trườngchun chở,bảo quảnlạnh c) Nuôicấy,phânlậpvàđịnhdanhvikhuẩnE.coli Nuôi cấy phân lậpE colidựa theo quy trình BarrowandFeltham (2003) Đặc tính sinh hóa củaE colitrên môi trường KIA cácxét nghiệmIMViC(Quinet al.,2004; GylesandFairbrother, 2010) d) ĐịnhdanhcácchủngETECbằngphảnứnghuyếtthanhhọc Chọn 1.141 chủng phân lập từ 1.141 mẫu phân heo tiêu chảy;197chủngtừphânheo khỏe 220 chủngtừ môi trường Phản ứng ngưngk ế t t ì m c h ủ n g F ( K 8 ) , F ( K 9 ) v F ( P ) theoMoonetal.(1976) Moonet al.(1977) 3.3.2 Xácđịnh genemãhóacác yếu tốđộclựccủaETEC 3.3.2.1 Xác định gene mã hóa số kháng ngun bám dính(F4,F5, F6, F18, Intimin, AIDA-I) độc tố ruột (STa, STb, LT, EAST1)củavikhuẩnETEC 390chủngETECdươngtínhvớiphảnứngngưngkếtnhanhtrênphiếnkínhđượcchọn đểtiếnhành phảnứngPCR, gồmcó330chủngtừphânheocontiêuchảy,14chủngtừheokhỏevà46chủngtừmơitrường đượcthuthậptừ6tỉnh/thànhthuộcĐBSCL LytríchDNAmẫubằngphươngphápđunsơi(Costaetal.,2010).Genemã hóa cho cácloạikhángnguyênbámdínhvàđộctốcủavikhuẩnETECđược xác định phản ứng PCR PCR phát genefaeG, fanA, fasA,fedA,eaeA,aidAImãhóakhángngunbámdínhlầnlượtlàF4,F5,F6,F18,IntiminvàAIDAI;cácđộctốLT,STa,STbvàEAST1đượcmãhóabởicácgeneelt,estA,estBvàastA.Trìnhtực áccặpmồidùngđểxácđịnhcácyếutốbám dính độc tố ETEC dựa theo Boerlinet al.(2005), Ojeniyiet al.(1994),Franketal.(1998);Faganetal.(1999)vàVu-Khacetal (2007).Tổngthể tích thành phần phản ứng PCR 25 µl, hóa chất sửdụngdocơngtyPromega(Mỹ)sảnxuất 3.3.2.2 Thửnghiệmtrênđộngvậtthínghiệm a) Kiểmtra đ ộ c lực c c ácc h ủ n g E T E C t r ê n chuộtb c h t he ophươngphápcủaPicardetal.(1999) b) KiểmtrađộclựccủacácchủngETECquatiêmtruyềnchoheo Sử dụng chủng F4 F18 gây bệnh chuột để kiểm tra độclực trênheosaucaisữa,nhữngheonàyđượckiểmtrakhôngmangkhángthể kháng F4 F18 phương pháp ELISA gián Verdoncketal.(2002) Tiêm truyền theo dõi heo thí nghiệm thực theophươngphápcủaVerdoncketal.(2002) 3.3.3 XácđịnhđặctínhkhángkhángsinhcủacácchủngETEC SMDT:Số mẫudươngtính Kếtquả cho thấy, heo tiêu chảy, khỏe vàmôit r n g đ ề u l u ô n tìm thấy gene mã hóa loại kháng ngun bám dính Trong đó, F4ln chiếm ưu tất loại mẫu phân tích, F18 phổ biến phânheo bệnh, heo khỏe Và F6 phổ biến môi trường chăn nuôi So sánhtừng loại độc tố (STa, STb, LT EAST1) đối tượng heo bệnh,heo khỏe mơi trường khơng khác nhau, trừ chủng phân lập từ heokhỏekhơng tìm thấy độctốL T T ó m l i , n h ữ n g c h ủ n g E T E C p h â n lậptừheobệnhhayheokhoẻvàmơitrườngđềumanggenemãhóađộclực 4.2.1 PhânbốgenemãhóakhángngunbámdínhcủacácchủngETEC 4.2.1.1 Phân bố gene mã hóa kháng ngun bám dính cácchủngETECtrongphânheo tiêu chảy theođịaphương Bảng4 : P h â n b ố g e n e m ã h ó a k h n g n g u y ê n b m d í n h c ủ a c c c h ủ n g ETECtrongphânheotiêuchảytheođịaphương(n=55) Địađiểm Sốmẫu(Tỷlệ%)dươngtínhvớicácchủngETEC F6 F18 F41 Intimin AIDA-I An Giang Bến Tre CầnThơ ĐồngTháp SócTrăng 14 (25,45) 15 (27,27) 14 (25,45) 22 (40,00) 11 (20,00) F4 4(7,27) 2(3,64) 3(5,45) 3(5,45) 5(9,09) 7(12,73) 2(3,64) 8(14,55) 3(5,45) 7(12,73) 11 (20,00) 11 (20,00) 11 (20,00) 10 (18,18) 13 (23,64) 1(1,82) 2(3,64) 1(1,82) 2(3,64) 2(3,64) 3(5,45) 2(3,64) 8(14,55) 2(3,64) 6(10,91) 0(0,00) 2(3,64) 1(1,82) 0(0,00) 6(10,91) VĩnhLong 14 (25,45) 5(9,09) 6(10,91) 10 (18,18) 1(1,82) 2(3,64) 3(5,45) p>0,05 p>0,05 p>0,05 p>0,05 p>0,05 F5 p>0,05 p>0,05 Sự phân bố gene mã hóa kháng nguyên bám dính cácchủng ETEC phân lập từ tỉnh/ thành có khác biệt khơng có ý nghĩathống kê Nhưng gene mã hóa kháng nguyên AIDA-I chiếm tỷ lệ thấp, đặcbiệt khơng tìm thấy tỉnh An Giang Đồng Tháp Các số liệu chothấy chủng ETEC mang kháng nguyên F4 F18 xuất nhiều nhấttrong phân heo tiêu chảy tỉnh/thành thuộc ĐBSCL Kết nàygiống vớikếtquả nghiên cứu Võ Thành Thìn (2012)và Nguyen ThiLanet al.(2009), họ cho thấy chủng ETEC mang gene qui định F4 vàF18 luônchiếmtỷlệ cao 4.2.1.2 Phân bố gene mã hóa kháng nguyên bám dính cácchủngETECtrongphânheo tiêu chảy theo tuổi Kết cho thấy chủng ETEC phân lập từ heo theo mẹ tiêuchảy mang gene mã hóa F4 tìm thấy với tỷ lệ cao Kết nàytươngtựvớibáocáocủaLýThịLiênKhai(2001),VũKhắcHùngvàctv (2005a)vàVõThànhThìn(2012),cáctácgiảnàychorằngF4đóngvaitrịgâybệnh quan trọngnhấtởheo contheo mẹ Bảng4 : P h â n b ố g e n e m ã h ó a k h n g n g u y ê n b m d í n h c ủ a c c c h ủ n g ETECtrongphânheotiêuchảytheotuổi Cácchủngmang cácgenemãhóayếutốbámdính Gene mãhóaKNBD F4 F5 F6 F18 F41 Intimin AIDA-I Ítnhất1 gene KNBD Heocontheomẹ(n=162) SMDT 56 16 17 20 11 116 Tỷlệ(%) 34,57a 9,88b 10,49b 12,35b 3,09c 6,79b 1,85c 71,60 Heoconsaucaisữa(n=168) SMDT 34 16 46 12 105 Tỷlệ(%) 20,24a 3,57c 9,52b 27,38a 2,38c 7,14b 5,36b,c 62,50 Thống kê p0,05 p>0,05 KNBD: kháng nguyên bám dính; SMDT: số mẫu dương tính Các giá trị cột với chữsốmũkhác khác nhaurất cóý nghĩa thống kê (p0,05 94 55,95a p>0,05 106 63,10 Cácgiá tr ị c ù n g c ộ t v inhữ ngc hữ s ố m ũ khácnhau thìk h ác nhaur ấ t c ó ý nghĩa thống k ê (p