Phân lập, xác định vai trò gây bệnh của Escherichia coli (E.coli) trong hội chứng tiêu chảy ở lợn con tại một số huyện của tỉnh Bắc Giang và biện pháp phòng

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN DƯƠNG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY BỆNH CỦA ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ Chuyên ngành: Thú Y Mã số: 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: GS.TS NGUYỄN QUANG TUYÊN PGS.TS CÙ HỮU PHÚ THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN DƯƠNG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY BỆNH CỦA ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Bắc Giang tỉnh có nghề chăn nuôi phát triển đem lại nguồn thu nhập cao cho nhiều hộ gia đình, ngày 17/08/2005 chủ tịch UBND tỉnh Bắc Giang ban hành Quyết định số 61/2005/QĐ- UB việc ban hành Quy định số sách hỗ trợ đầu tƣ phát triển Chăn nuôi - Thú y thời kỳ 2006 - 2010 địa tỉnh Bắc Giang Do vậy, tỉnh Bắc Giang thực nhiều dự án nạc hoá đàn lợn, hỗ trợ giống, đƣa nái ngoại vào chăn nuôi nông hộ Theo báo cáo thống kê chăn nuôi năm 2009 Sở Nông nghiệp PTNT tổng đàn lợn tỉnh đạt 1.133.188 con; đó, đàn lợn nái 191.957 đàn lợn thịt 939.809 Trên địa bàn tỉnh có 430 trại chăn nuôi lợn tập trung với quy mô trang trại 20 nái 100 lợn thịt trở lên Đây thực bƣớc tiến chăn nuôi lợn tỉnh, góp phần phát triển chăn nuôi lợn bền vững, tạo sản phẩm an toàn có sức cạnh tranh cao thị trƣờng Tuy nhiên, song song với phát triển chăn nuôi tình hình dịch bệnh diễn biến phức tạp, hàng năm làm chết nhiều đầu lợn tỉnh Theo báo cáo dịch tễ Chi cục Thú y[5] năm 2007 toàn tỉnh có 79.430 lợn bị ốm 7.620 chết; năm 2008 có 71.671 lợn bị ốm 5.100 chết; năm 2009 có 88.036 lợn bị ốm 5.970 chết, gây thiệt hại lớn kinh tế, hay gặp phổ biến hội chứng tiêu chảy lợn dƣới tháng tuổi, vi khuẩn E.coli đƣợc đánh giá nguyên nhân gây bệnh phổ biến quan trọng Cù Hữu Phú cs (1999)[41] tiến hành phân lập vi khuẩn E.coli từ mẫu phân lợn từ 35 ngày đến tháng tuổi bị tiêu chảy xác định đƣợc 60/70 mẫu có vi khuẩn E.coli, chiếm tỷ lệ 85,71% Lý Thị Liên Khai (2001)[22] phân lập đƣợc 42 mẫu phân có vi khuẩn E.coli tổng số 50 mẫu phân lợn bị tiêu chảy, chiếm tỷ lệ 84% Trịnh Quang Tuyên cs (2004)[73] tiến hành phân lập vi khuẩn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn E.coli từ mẫu phân lợn bị tiêu chảy, xác định đƣợc 259/325 mẫu có vi khuẩn E.coli chiếm tỷ lệ 79,69% Trong đó, Nguyễn Thị Kim Lan (2004)[23] phân lập E.coli từ mẫu phân lợn bị bệnh phù đầu tỉnh Bắc Giang Thái Nguyên, thông báo có 100% mẫu phân lợn bị tiêu chảy phù đầu phân lập đƣợc vi khuẩn E.coli Bệnh tiêu chảy lợn theo mẹ xảy quanh năm, nhƣng cao từ tháng đến tháng (Hoàng Văn Tuấn cs, 1998)[70] Trong năm, lợn nuôi mùa xuân mùa hè mắc tiêu chảy cao so với hai mùa lại (Nguyễn Thị Kim Lan cs, 2006b)[25] Đặc biệt lợn thƣờng bị tiêu chảy thời tiết thay đổi đột ngột (lạnh, ẩm, mƣa phùn…) kết hợp với điều kiện chăm sóc nuôi dƣỡng không đảm bảo vệ sinh; lợn bị ảnh hƣởng yếu tố stress; lợn sinh không đƣợc bú sữa kịp thời sữa đầu lợn mẹ thiếu, không đảm bảo chất lƣợng dinh dƣỡng Tổng hợp báo cáo dịch tễ hàng năm Trạm thú y huyện, thành phố tỉnh cho thấy bệnh tiêu chảy lợn hai năm 2007 2008 xảy phổ biến chiếm tỷ lệ 60% so với tổng số ca bệnh thƣờng gặp lợn, riêng năm 2009 số lợn mắc bệnh tiêu chảy 62.151 / 88.036 mắc ca bệnh thông thƣờng (chiếm tỷ lệ 71%) Khi áp dụng phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn tính kháng thuốc vi khuẩn cao nên kết điều trị thấp Xuất phát từ thực tiễn nêu trên, triển khai nghiên cứu đề tài: “Phân lập, xác định vai trò gây bệnh Escherichia coli (E.coli) hội chứng tiêu chảy lợn số huyện tỉnh Bắc Giang biện pháp phòng trị” Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn dƣới hai tháng tuổi số huyện thuộc tỉnh Bắc Giang - Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E.coli hội chứng tiêu chảy lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - Xây dựng đề xuất phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn đạt hiệu cao Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài - Đề tài công trình nghiên cứu có hệ thống, lý luận gắn liền với thực tiễn sản xuất, chứng minh vai trò vi khuẩn E.coli hội chứng tiêu chảy lợn dƣới tháng tuổi tỉnh Bắc Giang - Kết nghiên cứu đề tài sở khoa học phục vụ cho nghiên cứu nhƣ phục vụ cho công tác bào chế chế phẩm sinh học phòng bệnh (vác xin, kháng thể…), đồng thời đóng góp thêm tƣ liệu tham khảo cho nghiên cứu giảng dạy, cho cán thú y sở ngƣời chăn nuôi - Kết nghiên cứu phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy lợn có hiệu cao giúp cho thú y sở, ngƣời chăn nuôi phòng trị bệnh, góp phần giảm thiệt hại tăng thu nhập chăn nuôi lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 MỘT SỐ HIỂU BIẾT CHUNG VỀ HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy Tiêu chảy thuật ngữ để tƣợng đại tiện phân lỏng, đƣợc mô tả phân lỏng, nhiều nƣớc có máu, mủ Tiêu chảy biểu lâm sàng trình bệnh lý đƣờng tiêu hóa, tƣợng vật ỉa nhanh, nhiều lần ngày, phân có nhiều nƣớc rối loạn chức tiêu hóa, ruột tăng cƣờng co bóp tiết dịch (Phạm Ngọc Thạch, 1996)[58] Hoặc phản ánh đơn thay đổi tạm thời phân gia súc bình thƣờng gia súc thích ứng với thay đổi phần ăn Tiêu chảy xảy nhiều bệnh thân bệnh đặc thù (Arche.H, 2000)[2] Tuỳ theo đặc điểm, tính chất, diễn biến bệnh, loài gia súc, nguyên nhân gây bệnh mà hội chứng tiêu chảy đƣợc gọi tên khác nhƣ bệnh xảy gia súc non theo mẹ, gọi bệnh lợn ỉa phân trắng, hay bê nghé ỉa phân trắng,… gia súc sau cai sữa chứng khó tiêu, chứng rối loạn tiêu hoá, hội chứng rối loạn tiêu hoá Nếu xét nguyên nhân gây bệnh có tên gọi nhƣ bệnh Colibacillosis vi khuẩn E.coli gây ra, bệnh phó thƣơng hàn lợn vi khuẩn Samonella Cholerae Suis gây ra, bệnh viêm dày ruột truyền nhiễm (TGE) Coronavirus gây … Thực chất tiêu chảy phản ứng tự vệ thể nhƣng thể tiêu chảy nhiều lần ngày (5 đến lần trở lên) nƣớc phân từ 75% trở lên gọi tƣợng tiêu chảy Tiêu chảy nhiều nguyên nhân gây đồng thời nên gọi hội chứng tiêu chảy Cho dù nguyên nhân dẫn đến tiêu chảy hậu nghiêm trọng nƣớc, chất điện Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn giải kiệt sức, gia súc khỏi thƣờng bị còi cọc, thiếu máu, chậm lớn Đặc biệt gia súc bị tiêu chảy nặng kèm tƣợng viêm nhiễm, tổn thƣơng thực thể đƣờng tiêu hóa dẫn đến gia súc chết với tỷ lệ cao, gây thiệt hại lớn kinh tế 1.1.2 Đặc điểm sinh lý tiêu hóa lợn 1.1.2.1 Đặc điểm tiêu hóa lợn Ở gia súc non sau sinh , chƣ́c của các quan thể nhất là quan tiêu hóa chƣa hoàn chỉ nh , nồng độ HCl và các men tiêu hóa chƣa đảm nhiệm đầy đủ chƣ́c tiêu hóa , rất dễ gây rối loạn trao đổi chất , hậu quả dễ nhận biết là rối loạ n tiêu hóa , gây tiêu chảy , còi cọc, thiếu máu và chậm lớn Trong dị ch vị của gia súc non chƣa có đủ axit HCl tƣ̣ nên không hoạt hóa đƣợc men pepsin không tiêu hóa hết sữa mẹ , đó sƣ̃a mẹ lại môi trƣờng ph át triển tốt nhiều loại vi khuẩn Cù Xuân Dần cs (1996)[7] cho dịch vị lợn dƣới tháng tuổi HCl tự do, lúc axit tiết nhanh chóng liên kết với dịch nhầy Do vậy, vi sinh vật có điều kiện phát triển gây bệnh viêm dày, viêm ruột lợn Ở lợn có giai đoạn HCl dày , đƣợc coi giai đoạn thí ch ƣ́ng cần thiết tƣ̣ nhiên Chính nhờ thích ứng , thể lợn mới có khả hấp thu đƣợc kh thể miễn dịch qua sữa đầu Trong giai đoạn này thì dị ch vị lại không có hoạt tí nh phân giải protein mà chỉ có hoạt tính làm vón sƣ̃a đầu và sƣ̃a nên a lbumin và globulin đƣợc chuyển xuống ruột thẩm thấu vào máu, nhƣng lợn 15 ngày tuổi tình trạng thiếu HCl dày không cần thiết sinh lý bình thƣờng Việc tập ăn cho lợn sớm và cai sƣ̃a sớm đã rút ngắn đƣợc giai đoạn thiếu HCl , hoạt hóa hoạt động tiết dị ch, giúp tăng khả tạo đáp ứng miễn dịch thể Giai đoạn sau cai sƣ̃a sẽ là một giai đoạn khó khăn đối với lợn chuyển tƣ̀ sƣ̃ a mẹ sang thƣ́c ăn tổng hợp (dạng rắn ) Điều đó có thể gây mất Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn cân bằng hệ vi sinh vật đƣờng ruột tạo điều kiện cho vi khuẩn có hại phát triển và cũng là nguyên nhân gây bệnh , dẫn đến kết quả là lợn chậm lớn và có thể chết Ngoài , lợn còn chị u nhiều tác động của lợn mẹ , sƣ̣ thay đổi ngoại cảnh góp phần làm tăng stress lợn 1.1.2.2 Khả đáp ứng miễn dịch lợn Là khả thể đáp ứng lại cá c kí ch thí ch của mầm bệnh xâm nhập vào thể Ở gia súc non , mầm bệnh có nhiều thuận lợi xâm nhập vào thể Trong hệ thống tiêu hóa của lợn lƣợng enzym tiêu hóa và lƣợng HCl tiết còn í t nên chƣa đủ để đá p ƣ́ng cho quá trì nh tiêu hóa , gây rối loạn trao đổi chất , tiêu hóa kém , hấp thu kém Chính , giai đoạn mầm bệnh nhƣ Salmonella, E.coli… dễ dàng xâm nhập vào thể qua đƣờng tiêu hóa và gây bệnh cho lợn Ngoài ra, gia súc non yếu tố mi ễn dịch không đặc hiệu nhƣ bổ thể, protein liên kết , lysozym đƣợc tổng hợp còn í t , phản ứng đại thực bào rất yếu , gia súc non chƣa có kháng thể đặc hiệu mà kháng thể không đặc hiệu cũng rất yếu Chính lợn bú sữa đầu cần thiết để tăng sƣ́c bảo vệ thể , chống lại mầm bệnh Do cấu tạo đặc biệt của gia súc non nên tiêu chảy thƣờng xảy ở giai đoạn lợn tập ăn và cai sƣ̃a Bên cạnh đó còn một yếu tố quan trọng nƣ̃a là sƣ̣ phát triển của hệ vi sinh vật đƣờng ruột của gia súc non , việc cân bằng hệ vi sinh vật có lợi đƣờng ruột nhƣ thế nào để khắc phục , hạn chế sƣ̣ loạn khuẩn quá trì nh phát triển và trƣởng thành của thể gia súc non là rất quan trọng Để nuôi dƣỡng tốt và hạn chế đƣợc hội chƣ́ng tiêu chảy ở lợn cần tiêm phòng cho lợn mẹ và tạo cho gia súc non điều kiện sống tốt , tránh yếu tố bất l ợi tác động vào thể nhƣ c hế độ ăn uống không hợp lý , khẩu Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn phần thƣ́c ăn không đảm bảo dinh dƣỡng , ăn không đúng giờ , thời tiết thay đổi đột ngột, chế độ chăm sóc không thí ch hợp sẽ tạo điều kiện cho mầm bệnh xâm nhập vào thể gây bệnh 1.1.3 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy lợn Theo Lê Minh Chí (1995)[6], Phạm Ngọc Thạch (1996)[58] tiêu chảy tƣợng bệnh lý có liên quan đến nhiều yếu tố, có yếu tố nguyên nhân nguyên phát, có yếu tố nguyên nhân thứ phát Vì việc phân biệt rạch ròi nguyên nhân gây tiêu chảy khó khăn Phạm Sỹ Lăng (2009)[31] tiêu chảy lợn biểu lâm sàng nhiều tác nhân gây bệnh khác nhƣ virut, vi khuẩn, ký sinh trùng, thời tiết, môi trƣờng ngoại cảnh, độc tố 1.1.3.1 Do môi trường ngoại cảnh Môi trƣờng ngoại cảnh yếu tố gây bệnh dịch, mối quan hệ Cơ thể - Mầm bệnh - Môi trƣờng nguyên nhân không ổn định sức khoẻ, đƣa đến phát sinh bệnh (Nguyễn Nhƣ Thanh, 2001)[57] Môi trƣờng ngoại cảnh bao gồm yếu tố: nhiệt độ, ẩm độ, điều kiện chăm sóc nuôi dƣỡng, vệ sinh chuồng trại, di chuyển, thức ăn, nƣớc uống… Khi gia súc bị nhiễm lạnh kéo dài làm giảm phản ứng miễn dịch, giảm tác dụng thực bào, làm cho gia súc dễ bị nhiễm khuẩn gây bệnh (Hồ Văn Nam cs, 1997)[32] Khẩu phần ăn cho vật nuôi không thích hợp, trạng thái thức ăn không tốt, thức ăn chất lƣợng nhƣ mốc, thối nhiễm tạp chất, vi sinh vật có hại dễ dẫn đến rối loạn tiêu hoá kèm theo viêm ruột, ỉa chảy gia súc (Trịnh Văn Thịnh, 1985a [64], Hồ Văn Nam, 1997 [32]) Khi gặp điều kiện ngoại cảnh không thuận lợi, thay đổi đột ngột thức ăn, vitamin, protein, thời tiết, vận chuyển… làm giảm sức đề kháng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vật, vi khuẩn thƣờng trực tăng độ độc gây bệnh (Bùi Quý Huy, 2003)[20] Nhƣ nguyên nhân môi trƣờng ngoại cảnh gây bệnh tiêu chảy không mang tính đặc hiệu mà mang tính tổng hợp Lạnh ẩm gây rối loạn hệ thống điều hoà trao đổi nhiệt thể lợn, dẫn đến rối loạn trình trao đổi chất, làm giảm sức đề kháng thể, từ mầm bệnh đƣờng tiêu hoá có thời tăng cƣờng độc lực gây bệnh 1.1.3.2 Nguyên nhân vi sinh vật Vi sinh vật bao gồm loại virus, vi khuẩn, nấm mốc chúng vừa nguyên nhân nguyên phát, vừa nguyên nhân thứ phát gây tiêu chảy * Tiêu chảy vi khuẩn Trong đƣờng tiêu hoá gia súc có hệ vi khuẩn gọi hệ vi khuẩn đƣờng ruột, đƣợc chia thành loại, vi khuẩn có lợi lên men phân giải chất dinh dƣỡng, giúp cho trình tiêu hoá đƣợc thuận lợi vi khuẩn có hại, có điều kiện phát triển nhanh gây bệnh cho vật chủ Theo Lê Văn Tạo (1997)[55] cho biết họ vi khuẩn đƣờng ruột gồm vi khuẩn cộng sinh thƣờng trực đƣờng ruột Những vi khuẩn này, muốn từ vi khuẩn cộng sinh trở thành gây bệnh phải có điều kiện: - Trên thể vật chủ có cấu trúc giúp cho vi khuẩn thực đƣợc chức bám dính - Vi khuẩn phải có khả sản sinh yếu tố gây bệnh, đặc biệt sản sinh độc tố, quan trọng độc tố đƣờng ruột Enterotoxin - Có khả xâm nhập vào lớp tế bào biểu mô niêm mạc ruột, từ phát triển nhân lên Một số vi khuẩn thuộc họ vi khuẩn đƣờng ruột E.coli, Salmonella spp, Shigella, Klebsiella, Cl.perfringens… vi khuẩn quan trọng gây rối loạn tiêu hoá, viêm ruột tiêu chảy ngƣời nhiều loại động vật Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read data error !!! can't not read ... HỌC NÔNG LÂM LÊ VĂN DƯƠNG PHÂN LẬP, XÁC ĐỊNH VAI TRÒ GÂY BỆNH CỦA ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở LỢN CON TẠI MỘT SỐ HUYỆN CỦA TỈNH BẮC GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ... (E .coli) hội chứng tiêu chảy lợn số huyện tỉnh Bắc Giang biện pháp phòng trị” Mục tiêu nghiên cứu - Xác định số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn dƣới hai tháng tuổi số huyện thuộc tỉnh Bắc. .. Bắc Giang - Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E .coli hội chứng tiêu chảy lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - Xây dựng đề xuất phác đồ điều trị bệnh tiêu