Khảo sát ảnh hưởng của các thành phần khoáng, BA, Kinetin, IAA, IBA, NAA đến sự sinh trưởng và phát triển của cây hoa hồng Juliet (Rosa hybrid l) in vitro

ĐẠI HOC NGUYỄN TẤT THÀNH NGUYEN TAT THANH THỤC HỌC - THỤC HÀNH - THỤC DANH - THỤC NGHIỆP KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC KHĨA LUẬN TĨT NGHIỆP KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC THÀNH PHẦN KHOÁNG, BA, KINETIN, IAA, IBA, NAA ĐÉN Sự SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA CÂỲ HOA HỒNG JULIET(7?Ớ5« hybrid L) IN VITRO Sinh viên thực : Phan Thị Thúy Quỳnh MSSV : GVHD : ThS Mai Thị Phương Hoa 1611540375 ThS Đồ Tiến Vinh TP HCM, 2020 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i MỤC LỤC .ii TÓM TẮT iv SUMMARY V DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC BẢNG BIỂU vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii ĐẶT VẤN ĐÈ ix CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cây hoa hong Juliet 1.1.1 Phân loại khoa học 1.1.2 Đặt điểm thực vật 1.1.3 Giá trị kinh tế 1.2 Phương pháp nhân giống hoa hong Juliet 1.2.1 Phương pháp nhân giống truyền thống 1.2.2 Phương pháp nhân giống công nghệ sinh học 1.3 Sơ lược nuôi cấy mô thực vật 1.3.1 Các gia đoạn nuôi cấy mô thực vật 1.3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy 1.4 Cơng trình nghiên cứu ngồi nước 1.4.1 Công trình nghiên cứu nước 1.4.2 Cơng trình nghiên cứu nước CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN củu 10 ii 2.1 Nơi thực 10 2.2 Nội dung nghiên cứu 10 2.3 Phương pháp nghiên cứu 10 2.4 Nội dung nghiên cứu 11 2.4.1 Vô trùng mầu hoa hong Juliet 11 2.4.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng thành phần mơi trường khống đến sinh trưởng phát triển Hoa hồng Juliet 12 2.4.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin đến khả tạo chồi hoa hong Juliet 12 2.4.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng hàm lượng IAA, IBA, NAA đến trình tạo rề hoa hong Juliet 13 2.5 Phương pháp thu thập xử lý số liệu 13 2.5.1 Phương pháp thu thập so liệu 13 2.5.2 Xử lý số liệu 14 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 15 3.1 Ket thí nghiệm 1: Vơ trùng mầu hoa hong Juliet 15 3.2 Ket thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng thành phần mơi trường khống đến sinh trưởng phát triên cùa Hoa hong Juliet 18 3.3 Ket thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin đến khả tạo choi hoa hong Juliet 20 3.4 Ket thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng cùa hàm lượng IAA, IBA, NAA đến trình tạo rề hoa hong Juliet 23 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO 28 PHỤ LỤC 29 iii TÓM TẤT Hoa hồng Juliet (Rosa Hydrida L) loại hoa hồng ngoại đẹp, có giá trị kinh tế cao, nhiều người ưa chuộng Đe tài “Khảo sát ảnh hưởng thành phần khoáng, BA, Kinetin, IAA, IBA, NAA đế sinh trưởng phát triển hoa hồng Juliet (Rosa hybrid L) in vitro ” thực từ tháng 10 năm 2019 đến tháng 04 năm 2020 phịng ni cấy mô thực vật, khoa Công nghệ Sinh học trường Đại học Nguyễn Tất Thành với mục tiêu xác định thành phần khống chất điều hịa sinh trưởng thực vật thích hợp đế nhân giống hoa hong Juliet (Rosa hybrid Lj in vitro Đe tài có nội dung: Vô trùng mẫu hoa hong Juliet; Khảo sát ảnh hưởng thành phần mơi trường khống đến sinh trưởng phát triển hoa hồng Juliet; Khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin đến khả tạo choi hoa hong Juliet; Khảo sát ảnh hưởng IAA, IBA, NAA đến trình tạo rề hoa hong Juliet Các thí nghiệm bố trí theo cách hoàn toàn ngầu nhiên Những kết đạt sau trình nghiên cứu Xác định nồng độ Javel 75% 10 phút thích hợp đe vô trùng mẫu đốt thân hoa hong Juliet mơi trường WPM mơi trường khống thích họp đe nhân giống hoa hong Juliet Nồng độ BA mg/1 thích hợp cho trình tạo chồi hoa hong Juliet Nồng độ IAA 0,5 mg/1 thích hợp cho trình tạo rễ hoa hong Juliet IV DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây Hoa Hồng Juliet Hình 3.1 Vơ trùng mầu hoa hong Juliet (NT-1.5) 17 Hình 3.3 Kết thí nghiệm 19 Hình 3.3 Kết thí nghiệm 22 Hình 3.4 Kết thí nghiệm 24 Hình 3.5 Cây hoa hông Juliet sau 60 ngày nuôi cay (NT4.2) .26 VI DANH MỤC BANG BIÊU Bảng 2.1 Các nghiệm thức vô trùng mẫu vô trùng mẫu hoa hồng Juliet 12 Bảng 3.1 Ket vô trùng hoa hong Juliet 16 Bảng 3.2 Ket khảo sát ảnh hưởng thành phần mơi trường khống đen sinh trưởng phát triển cũa Hoa hong Juliet 18 Bảng 3.3 Ket khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin đen khả tạo chồi hoa hong Juliet 21 Bảng 3.4 Ket khảo sát ảnh hưởng hàm lượng IAA, IBA, NAA đen trình tạo rễ hoa hong Juliet .25 vii DANH MỤC CHỮ VIÉT TẤT BA: Benzyladenine B5: Môi trường Gamborg 1968 IBA: Indolebutyric acid LV: Môi trường Litvay 1985 MS: Môi trường Murashige-Skoog 1962 NAA: a-Naphthalene acetic acid NT: Nghiệm thức IAA: P-indol-acetic acid TN: Thí nghiệm SAS: Statistical Analysis System CV: Cộng WPM: Môi trường Loyd & McCown 1980 viii ĐẶT VẤN ĐÈ Tính cấp thiết đề tài Những năm gần đây, hoa hong Juliet thị trường ưa chuộng nguồn cung nước không đủ đế đáp ứng Nguồn cung cấp hoa hong Juliet chủ yếu nhập từ Anh nên giá thành thường cao, trưởng thành từ 1,5 - năm có giá 10 - 20 triệu đồng/cây Nắm bắt nhu cầu số khu Hà Nội, Lâm Đồng, Hồ Chí Minh, tiến hành nhập nhân giống, cho thấy loại thích nghi tốt với khí hậu Việt Nam Hoa hong Juliet nhân giống phương pháp truyền thống giâm cành, ghép cành Phương pháp có the tạo giống mang đặc tính ban đầu, thời gian phát triển rút ngắn Tuy nhiên cho hệ số nhân giống thấp, dề bị nhiễm bệnh, nhiễm virus, việc thụ phấn chéo xảy đặc điểm giống trộn lẫn, dễ bị thối hóa, rễ yếu Phương pháp chiết cành, giâm cành không đảm bảo bệnh bệnh truyền từ mẹ sang Riêng phương pháp ghép cành giống hoa hong Juliet ghép với gốc hoa hồng nội địa đe tăng khả thích ứng thời gian chúng có the làm thay đoi chất lượng hoa không ban đầu Vì nguồn cung nước khơng đảm bảo chất lượng, số lượng không đáp ứng đủ nhu cầu thị thường Nên việc nghiên cứu nhân giống hoa hong Juliet cần thiết Phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật phương pháp thích hợp đe nhân giống hoa hong Juliet nhằm nhân nhanh giống trong, tạo giống trồng bệnh, đảm bảo chất lượng tính đồng mặt di truyền giống giúp hạ giá thành sản phàm mà vần đảm bảo chất lượng giống Xuất phát từ yêu cầu thực tiền tiến hành thực đề tài “Khảo sát ảnh hưởng thành phần khoáng, BA, Kinetin, IAA, IBA, NAA đế sinh trưởng phát triển hoa hồng Juliet (Rosa hybrid L) in vitro IX Mục tiêu đề tài Xác định thành phần khống chất điều hịa sinh trưởng thực vật thích hợp để nhân giống hoa hồng Juliet (Rosa hybrida) in vitro Đe tài thực từ tháng 10 năm 2019 đến tháng 04 năm 2020 phịng thí nghiệm ni cấy mơ thực vật, Khoa Cơng nghệ Sinh học, trường Đại học Nguyễn Tất Thành X Chương Tổng quan tài liệu CHƯƠNG TÓNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cây hoa hồng Juliet 1.1.1 Phân loại khoa học Giới: Plantae Bộ: Rosales Họ: Posaceae Chi: Rosa Lồi: Rosa hybrida Hình 1.1 Cây Hoa Hong Juliet (https://www.vuonhongvanloan.com) Hoa Hong Juliet (Rosa hybrid L), ngồi cịn có tên khác AUSjamson loại hoa hong co điển nước Anh, thuộc Rosales Hoa hong Juliet loại hoa hồng thân bụi, hoa có màu vàng vàng cam, hoa to có dạng hình trứng có đường kín từ - 10 cm so cánh hoa lên tới 90 cánh, thường mọc thành chùm đầu cành mồi chùm thường có - hoa, có độ lặp lại tốt - tuần cho hoa lần Hoa hong Juliet có hương trà xanh nhẹ Cây phân nhánh nhiều từ gốc, trồng thành bụi sân vườn, công viên, nhà hàng, khách sạn, Bông hoa hong Juliet lựa chọn hàng đầu việc trang trí hoa cầm tay dâu, hoa cưới kiện trọng đại 1.1.2 Đặt điểm thực vật Cây hoa hong Juliet giống hồng thân bụi, có chiều cao khoảng 1,5 m, chiều cao tối đa đạt 2,5 m với tán rộng - 1,5 m Hoa Hong Juliet cịn có hoa liên tục quanh năm, đặc biệt sai hoa thời tiết mát Nụ hoa có dạng hình trứng, cánh hoa bắt đầu nở thường có đường kính khoảng 1,3 cm dài khoảng cm đài hoa có màu xanh ôm trọn cánh hoa vào Hoa hong Juliet thường cho hoa thành cụm, cụm hoa có từ - hoa, hoa với mục đích cắt cành chúng thường cắt bớt hoa để loại cụm để hoa to đẹp Hoa có dạng hình trứng, thường có màu vàng màu vàng cam, cánh hoa xếp cách tinh tế, độc đáo đẹp mắt Hoa Hong Juliet có đường kính Chương Kết thảo luận chung, nồng độ chất điều hòa sinh trưởng BA cho kết sinh trưởng phát trien tốt so với Kinetin Nên xác định môi trường WPM có bơ sung BA mg/1 thích hợp để tạo choi hoa hong Juliet in vitro Bảng 3.3 kết khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin đến khả tạo chồi hoa hông Juliet Chỉ tiêu khảo sát NT BA Kinetin Chiều cao Số chồi Số (lá) (chồi) (cm) Số rễ (rễ) 3.1 0,1 - 2,80d ll,67ef l,07d 0,93D 3.2 0,5 - 3,89bc 13,20cd l,60bc l,80d 3.3 - 4,53a 18,53a 2,07a 3,40a 3.4 - 3,55b 14,06a l,86ab l,93c 3.5 - 0,1 2,75d 10,93f l,33cd 0,87d 3.6 - 0,5 2,79d 12,26df l,40cd 2,26b 3.7 - 3,15c 13,87bc l,53bc l,80d 3.8 - 3,17c 12,02def l,27cb 2,67b 4,32 5,26 5,42 5,44 cv Các ký tự theo sau giá trị trung bình cột khác biệt nghiệm thức với mức ý nghĩa p F F T F 0.0770 Corrected Total Source R-Square Coeff Var Root MSE N Mean 0.555556 4.622504 0.115470 1.200000 DF Anova ss Mean Square F Value 0.13333333 0.04444444 3.33 Pr > F T 0.0770 35 ... hoa hong Juliet - Khảo sát ảnh hưởng thành phần môi trường khoáng đến sinh trưởng phát triển Hoa hong Juliet - Khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin đến khả tạo chồi Hoa hồng Juliet - Khảo sát ảnh hưởng. .. có giá trị kinh tế cao, nhiều người ưa chuộng Đe tài ? ?Khảo sát ảnh hưởng thành phần khoáng, BA, Kinetin, IAA, IBA, NAA đế sinh trưởng phát triển hoa hồng Juliet (Rosa hybrid L) in vitro ” thực... phát triển Hoa hong Juliet Khảo sát ảnh hưởng BA, Kinetin BA (0,1: 0,5: l:2mg /l) đến khả tạo chồi Hoa hồng Kinetin (0,1: 0,5; 1;2 mg/1 Juliet Khảo sát ảnh hưởng IAA, IBA, NAA đến trình tạo rề Hoa