Khảo sát ảnh hưởng của chất lượng ánh sáng và các yếu tố ức chế lên sự tăng trưởng và tích lũy lipid ở picochlorum sp.pdf

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH VĂN LUU THY ĐAN KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT LƯỢNG ÁNH SÁNG VÀ CÁC YẾU TÓ ÚC CHẾ LÊN sụ TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID Ờ PICOCHLORUMSỸ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC TP.HCM - 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGƯYẺN TẤT THÀNH VĂN LƯU THY ĐAN KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT LƯỢNG ÁNH SÁNG VÀ CÁC YỂU TĨ ÚC CHẾ LÊN sụ• TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID Ở PICOCHLORUM SP Chuyên ngành Sản xuất phát triển thuốc KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC Hướng dẫn khoa học: TS Võ Hồng Trung TP.HCM - 2019 LỜI CẢM ƠN Em xin gởi lời cảm ơn chân thành đến Thầy TS Võ Hồng Trung tận tình hướng dần, bảo, truyền đạt cho em nhiều kiến thức, kinh nghiệm quý báu, tạo điều kiện tốt suốt thời gian em nghiên cứu làm khóa luận Em xin cảm ơn Q Thầy Cơ to mơn Hóa sinh - Độc chất, Q Thầy Cô giảng dạy trường Đại học Nguyền Tất Thành giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu Cảm ơn bạn sinh viên làm nghiên cứu mơn Hóa sinh - Độc chất: Phạm Lương Tuấn Anh, Tôn Nữ Thúy Vy hồ trợ giúp đờ nhiệt tình để em hồn thành tốt, tiến độ trình nghiên cứu Trong suốt trình học tập thực đề tài em nhận động viên bạn bè người thân gia đình Em xin chân thành cảm ơn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đê tài: “Tối ưu hóa điều kiện ni cấy vi tảo Picochlorum sp để thu nhận sinh khối có hàm lượng lipid cao” cơng trình nghiên cứu tơi hướng dần khoa học TS Võ Hồng Trung Các kết quả, số liệu nội dung nghiên cứu nêu khóa luận trung thực Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung khóa luận Sinh viên thực Văn Lưu Thy Đan MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC CHỮ VIẾT TẨT iii DANH MỤC HÌNH ANH iv DANH MỤC BẢNG vi ĐẶT VẤN ĐÈ CHƯƠNG TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hình thái cấu trúc tế bào vi tảo 1.2 Quá trình tong họp lipid 1.2.1 Sinh tống họp acid béo 1.2.2 Sinh tông họp triglyceride 1.3 Các yếu tố ảnh huởng đen sinh trưởng tích lũy lipid vi tảo 1.3.1 Ánh sáng 1.3.2 Chất dinh dường 1.3.3 Nhiệt độ 1.3.4 Độ mặn 1.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 10 1.4.1 Trong nước 10 1.4.2 Ngoài nước 11 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 12 2.1 Đối tượng nghiên cửu diều kiện nuôi cấy 12 2.2 Phương pháp phân tích 12 2.2.1 Phân tích tăng trưởng 12 2.2.2 Xác định tốc độ tăng trưởng đặc hiệu 13 2.2.3 Phân tích sắc tố 13 2.2.4 Xác định hàm lượng lipid tổng phương pháp Sulfo - Phosphor - Vanilin 13 2.2.5 Thu hoạch sinh khối tảo phân tích hàm lượng acid béo 14 2.2.6 Phân tích hàm lượng acid béo 14 2.2.7 Xử lí số liệu 14 2.3 Phương pháp thiết kế thí nghiệm 15 2.3.1 Chuẩn bị mầu Picochlorum sp cho thí nghiệm 15 2.3.2 xanh Pỉcochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng 15 2.3.3 Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ 17 2.3.4 Picochỉorum sp môi trường MD4 nuôi cấy hệ thống Plastic bag photo - bioreactor điều kiện ức chế 19 CHƯƠNG 3.1 KÉT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 21 Kết 21 3.1.1 xanh Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng 21 3.1.2 Picochỉorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ 27 3.1.3 Plasti 3.2 Picochlorum sp môi trường MD4 nuôi cấy hệ thống c bag photo - bioreactor điều kiện ức chế 33 Bàn luận 38 3.2.1 xanh Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng 38 3.2.2 Picochỉorum sp môi trường MD4 bổ sung điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ 39 3.2.3 Picochlorum sp môi trường MD4 nuôi cấy hệ thống Plastic bag photo - bioreactor điều kiện ức chế 40 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 4.1 Kết luận 42 4.2 Kiến nghị 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẢT Kí hiệu Chú thích h Giờ xanh Xanh dương dcw Dry cell weight (khối lượng khô tế bào) LED Điốt phát quang PSƯ Practical salinity unit (độ mặn thực tế) ACP Acyl Carrier Protein ATP Adenosine triphosphate NADPH Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-oxidease TAG Triacylglycerol DGLA Dihomo-gamma linolenic acid EPA cis-5,8,11,14,17-Eicosapentaenoic Acid ETA cis-11,14,17-Eicosatrienoic Acid iii DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Hình dạng tế bào Picochlorum sp HM1 kính hiển vi quang học (A) kính hiến vi điện tử truyền qua (B) Hình 1.2 Con đường tống họp acid béo lục lạp Hình 1.3 Giản đồ thể đường sinh tổng hợp triacylglycerol vi tảo Hình 2.1 Cấu tạo khung đem vị trí đếm tế bào Pỉcochlorum sp buồng đếm hồng cầu 12 Hình 2.2 Sơ đồ tóm tắt thí nghiệm 15 Hình 2.3 Sơ đồ thí nghiệm ánh sáng xanh dương 16 Hình 2.4 Sơ đồ thí nghiệm ánh sáng xanh dươngkết họp ánh sáng đỏ 18 Hình 2.5 Hệ thống Plastic bag photo - bioreactor 20 Hình 2.6 Hình dạng kích thước túi nuôi sinh khối hệ thống Plastic bag photo - bioreactor 20 Hình 3.1 Mật độ tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh 21 Hình 3.2 Tốc độ tăng trưởng đặc hiệu Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh 22 Hình 3.3 Hàm lượng diệp lục tố a thể tích (a) tế bào (b) Picochỉorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh dương 23 Hình 3.4 Hàm lượng diệp lục tố tổng thể tích (a) tế bào (b) Pỉcochlorunì sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh 24 Hình 3.5 Hàm lượng carotenoid the tích (a) tế bào (b) Pỉcochlorum sp môi trường MD4 điêu kiện ánh sáng xanh dương 25 Hình 3.6 Hàm lượng lipid Pỉcochlorum sp thể tích (a) tế bào (b) môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh 26 Hình 3.7 Mật độ tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ 27 Hình 3.8 Tốc độ tăng trưởng đặc hiệu Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ .28 iv Hình 3.9 Hàm lượng diệp lục tố a thể tích (a) tế bào (b) Pỉcochỉorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh dương ánh sáng đỏ 29 Hình 3.10 Hàm lượng diệp lục tố tổng thể tích (a) tế bào (b) Pỉcochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ 30 Hình 3.11 Hàm lượng carotenoid the tích (a) tế bào (b) Picochỉorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh dương ánh sáng đỏ 31 Hình 3.12 Hàm lượng lipid the tích (a) tế bào (b) Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ánh sáng xanh dương ánh sáng đỏ 32 Hình 3.13 Mật độ tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 nuôi cấy hệ thống Plastic bag photo - bioreactor điều kiện ức chế 33 Hình 3.14 Tốc độ tăng trưởng Picochlorum sp môi trường MD4 nuôi cấy hệ thống Plastic bag photo - bioreactor điều kiện ức che 33 Hình 3.15 Hàm lượng lipid Picochlorum sp môi trường MD4 nuôi cấy hệ thống bag photo - bioreactor điều kiện ức chế 34 Hình 3.16 Hàm lượng lipid khối lượng khô Picochlorutn sp điều kiện ức chế 36 V DANH MỤC BANG Bảng 2.1 Mô tả điều kiện ánh sáng xanh thí nghiệm 17 Bảng 2.2 Mơ tả điều kiện ánh sáng xanh ánh sáng đỏ thí nghiệm 18 Bảng 3.1 Mật độ tế bào Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ức chế 34 Bảng 3.2 Hàm lượng lipid thể tích Picochlorum sp môi trường MD4 điều kiện ức chế 35 Bảng 3.3 Hàm lượng acid béo thành phần (mg/g) khối lượng khô Picochlorum sp 37 vi ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGƯYẺN TẤT THÀNH VĂN LƯU THY ĐAN KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT LƯỢNG ÁNH SÁNG VÀ CÁC YỂU TÓ ÚC CHẾ LÊN sụ• TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID Ở PICOCHLORUM SP... chất lượng ánh sảng yếu tố ức chế lên tăng trưởng tích lũy lipid Picochlorunĩ sp ” thực MỤC • ĐÍCH NGHIÊN cứu > Khảo sát tăng trưởng, khả tích lũy lipid vi tảo Picochlorum sp điều kiện ánh sáng. .. 2019 KHẢO SÁT ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT LƯỢNG ÁNH SÁNG VÀ CÁC YỂU TÓ ÚC CHẾ LÊN SỤ TĂNG TRƯỞNG VÀ TÍCH LŨY LIPID Ở PICOCHLORUM SP Văn Lưu Thy Đan Hướng dẫn khoa học: TS Võ Hồng Trung Mở đầu: Vi tảo Picochlorutn