Thẩm định quy trình phân tích áp dụng đánh giá hàm lượng flavonoid tổng trong trà khô thành phẩm và nước trà ở nhiều điều kiện pha chế khác nhau

11 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỀN TÁT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỤC PHÁM VÀ MỒI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHÓA LUẬN TĨT NGHIỆP THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH PHÂN TÍCH ÁP DỤNG ĐÁNH GIÁ HÀM LƯỢNG FLAVONOID TỔNG TRONG TRÀ KHÔ THÀNH PHẨM VÀ NƯỚC TRÀ Ở NHIÈƯ ĐIỀU KIỆN PHA CHÉ KHÁC NHAU THẠCH THỊ NA UY Tp.HCM, tháng 10 năm 2021 —ít TĨM TẮT Trà (Camellia sinensis L.) biết đến thức uống phô biến giới Trên thị trường có nhiều sản phẩm trà, tùy thuộc vào giong trình chế biến Chat lượng giả trị trà định thành phần nội chất, đặc biệt hợp chất kháng oxy hóa Q trình thực nghiêm tiến hành thông qua phương pháp xác định hàm lượng flavonoid tông (total flavonoid contents hay TFCs) dựa nguyên lý kỹ thuật quang phô hấp thu phân tử (UV- Vis) xem phương pháp phân tích đơn giản nham đảnh giá khác biệt hàm lượng loại hợp chất Đối với trà, quercetin đirợc sử dụng làm chất chuẩn để định lượng TFCs, tinh theo milligram quercetin equivalence gram mầu khơ (mg QE g l) Mặc dù có nhiều phương pháp sử dụng để xác định hàm lượng flavonoid tông tat dựa khả tạo phức chelate với ion nhôm với bô sung so loại tác chat khác nhưNaNCẸ, CHỉCOOH, CHĩCOONa, Quy trình với có mặt NaNO? mơi trường kiềm dành cho rutin, luteolin catechin, có độ hấp thụ đảng kể bước sóng 510 nm Đường chuẩn phương pháp xây dựng từ 50 đến 700 mg L ‘, cho độ tuyến tính tot với R2 = 0.998, độ lặp độ tái lặp thóa mãn yêu cầu AOAC (2016) Hảm lượngflavonoid tổng mầu trà giảm dần theo thứ tự trà xanh, trà pu ’erh, trà trắng, trà đen trà oolong Khi pha trà, nhiệt độ thời gian tăng cỏ xu hướng làm tăng hàm lượng flavonoid tong chiết đạt giả trị cao 90 °C 40 phút ỉii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii ABSTRACT iv MỤC LỤC V DANH MỤC CHỮ VIÉT TẨT viii DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC BẢNG ix MỞ ĐẦU 1 ĐẬT VẤN ĐÈ MỤC TIÊU NGHIÊN cứu 2.1 Mục tiêu tong quát 2.2 Mục tiêu cụ thê NỘI DUNG NGHIÊN cứu PHẠM VI NGHIÊN cứu 4.1 Đối tuợng nghiên cứu 4.2 Thời gian nghiên cứu CHƯƠNG TÓNG QUAN VÈ NGHIÊN cúư 1.1 Giới thiệu trà 1.1.1 Nguồn gốc trà nơi phân bố .7 1.1.2 Phân loại trà 1.2 Thành phần hóa học trà 1.3 Các phuơng pháp phân tích hàm lượng flavonoid trà 11 V 1.3.1 Phương pháp chiết hợp chất polyphenol trà 11 1.3.2 Phương pháp xác định hàm lượng flavonoid tống trà 11 1.4 Tổng quan tình hình nghiên cứu liên quan đến đề tài 12 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 13 2.1 2.2 Hóa chất, dụng cụ thiết bị 13 2.1.1 Hóa chất 13 2.1.2 Chuẩn bịhóa chất 13 2.1.3 Dụng cụ 13 2.1.4 Thiết bị 14 Lấy mầu bảo quản mẫu 14 2.2.1 Lấy mẫu 14 2.2.2 Tiền xử lýmẫu bảo quản mầu 15 2.3 Quy trình chiết mầu 15 2.4 Quy trình lên màu 15 2.5 Thấm định phương pháp 16 2.6 2.5.1 Giới hạn phát giới hạn định lượng 17 2.5.2 Đường chuẩn khoảng tuyến tính 18 2.5.3 Độ lặp lại độ tái lặp 18 Xác định hàm lượng flavonoid tổng mẫu trà 18 2.6.1 Phân tích hàm lượng flavonoid tổngtrong mầu trà 18 2.6.2 Phân tích hàm lượng flavonoid tống nước trà nhiệt độ thời gian pha trà 18 CHƯƠNG KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 3.1 Thẩm định phương pháp phân tích hàm lượng flavonoid tống trà 20 3.2 Hàm lượng flavonoid mẫu trà Việt Nam 21 VI 3.3 Ảnh hưởng nhiệt độ pha trà 23 3.4 Ảnh hưởng cùa thời gian đến hàm lượng flavonoid tong 24 CHƯƠNG ĐỀ XUÁT CÁC GIẢIPHÁP 26 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 27 Kết luận 27 Kiến nghị 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO 28 PHỤ LỤC 31 vii DANH MỤC CHỮ VIÉT TẮT Từ viết tắt AOAC EC ECG EGC EGCG GAE HPLC ISO LAL LWL MP MS PL PTFE ỌC rpm RSD SP TFC UAL UPLC UV-Vis UWL Nghĩa tiếng Anh Association of Official Analytical Chemists Epicatechin Epicatechin gallate Epigallocatechin Epigallocatechin gallate Gallic Acid Equivalent High Performance Liquid Chromatography International Organization for Standardization Lower Action Limit Lower Warning Limit Mobile phase Mass Spectrometer Polytetrafluoroethylene Quality Control round per minute Relative Standard Deviation Stationary phase Total Flavonoid Contents Upper Action Limit Ultrahigh Performance Liquid Chromatography UltraViolet-Visible Upper Warning Limit Nghĩa tiếng Việt Hiệp hội nhà hóa học phân tích thức Đương lượng gallic acid Sắc ký lỏng hiệu cao To chức Tiêu chuẩn quốc te Giới hạn hành động Giới hạn cânh báo Pha động Máy đo khối Phụ lục Kiểm sốt chất lượng vịng phút Độ lệch chuẩn tương đối Pha tĩnh Hàm lượng flavonoid tổng Giới hạn hành động Sac ký lỏng siêu hiệu Tữ ngoại-Khà kiến Giới hạn cảnh báo viii DANH MỤC HINH Hình 1.1 Cây trà cổ thụ Suối Giàng, Yên Bái (Việt Nam) Hình 1.2 Sáu loại trà Hình 1.3 Các hợp chất sản phẩm Phenylalanine 10 Hình 2.1 Quy trình chiết/trích ly phân tích TFCs mầu trà 15 Hình 2.2 Quy trình lên màu họp chat flavonoid tổng 16 Hình 2.3 Thiết bị ƯV-Vis 1800 Shimadzu Phịng thí nghiệm Hóa Phân tích, Khoa Kỹ thuật thực phẩm môi trường 17 Hình 3.1 Đường chuan quercetin .20 Hình 3.2 Biểu đồ kiếm sốt chất lượng 21 Hình 3.3 Hàm lượng flavonoids mầu trà 22 Hình 3.4 Ánh hưởng nhiệt độ pha trà đến hàm lượng flavonoid tổng 23 Hình 3.5 Ảnh hưởng thời gian pha trà đến tỉ lệ chiết flavonoids 24 viii DANH MỤC BANG Bảng 1.1 Thành phần cùa trà Bảng 2.1 Thông tin mầu trà thực đề tài 14 Bảng 2.2 Các điều kiện pha trà 19 Bảng 3.1 Ket thẩm định phương pháp 20 Bảng PL Độ chệch điểm chuẩn Bảng PL Ket đánh giá độ tái lặp cùa mầu trà Bảng PL Kết hàm lượng flavonoid tổng mầu trà Bảng PL Ket khảo sát nhiệt độ đầu nước pha trà đến phần trăm flavonoid tong chiết mầu trà trắng Bảng PL Ket khảo sát nhiệt độ đầu cùa nước pha trà đến phần trăm flavonoid tong chiết mầu trà đen Bảng PL Ket khảo sát nhiệt độ đầu nước pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mầu trà pu’erh Bảng PL Ket khảo sát nhiệt độ đầu nước pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mầu trà xanh Bảng PL Ket khảo sát thời gian pha trà đến phần trăm flavonoid tống chiết mầu trà xanh Bảng PL Ket khảo sát thời gian pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mầu trà Pu’erh Bảng PL 10 Ket khảo sát thời gian pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mầu hồng trà đen Bảng PL 11 Ket khảo sát thời gian pha trà đến phần trăm flavonoid tống chiết mầu trà trắng ix MỞ ĐÀU ĐẶT VẤN ĐÈ Flavonoid loại sản phẩm tự nhiên quan trọng đặc biệt, chúng thuộc loại chất chuyến hóa thứ cấp thực vật có cấu trúc polyphenol, đuợc tìm thấy rộng rãi trái cây, rau số đồ uống Flavonoid đuợc tìm thấy nhiều thực phẩm đồ uống có nguồn gốc thực vật, chắng hạn nhu trái cây, rau, trà, ca cao rượu vang Flavonoid có số phân nhóm, bao gồm chaicones, flavon, flavonols isoflavone Flavonoid có liên quan đến nhiều tác dụng tăng cường sức khỏe thành phần thiếu nhiều ứng dụng dinh dường, dược phẩm mỳ phẩm Điều đặc tính chống oxy hóa, chống viêm, chống đột biến chống ung thư với khả điều chỉnh chức enzym tế bào Chúng biết đến chất ức chế mạnh so enzym, hạn xanthine oxidase (XO), cyclo-oxygenase (COX),lipoxygenase phosphoinositide3-kinase(4-6) Trà loại thức uống có the dễ dàng tìm thấy thị trường với nhiều dịng trà khác nhau, với giá thành họp lý vậy, chúng phổ biến khắp noi từ nông thôn thành thị từ nước nước, nhu cầu sử dụng trà cao thời gian vừa qua, việc khảo sát hàm lượng flavonoid tổng trà điều kiện pha tra giúp ta xác định hàm lượng flavonoid loại trà khác MỤC TIÊU NGHIÊN CỬU 2.1 Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu hàm lượng Flavonoids tổng cùa trà điều kiện pha khác loại trà Việt Nam nhằm xác định thay đối hàm lượng flavonoid trà qua điều kiện khác 2.2 Mục tiêu cụ thể Đe đạt mục tiêu tống quát nêu trên, đặt mục tiêu cụ the sau: ■ Tham định phưong pháp phân tích hàm lượng flavonoid tong (TFCs) trà khô thành phẩm thiết bị UV-Vis Shimadzu 1800 Phịng Thí nghiệm Hóa Phân tích, Khoa Kỹ thuật Thực phấm Mơi trường; Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Trang ■ Đánh giá hàm lượng flavonoid tổng (TFCs) số loại trà khô thành phẩm tron sản xuất khu vực miền Nam miền núi phía Bắc Việt Nam dựa phương pháp tham định; ■ Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ thời gian pha trà đến hàm lượng flavonoid tong so (TFCs) nước trà (tea liquor) NỘI DUNG NGHIÊN cúu STT Nội dung công việc Nội dung Tìm kiếm, tơng hợp tài liệu xây dựng đê cương nghiên cứu Nội dung Thu thập mẫu, bảo quản mầu Phịng thí nghiệm tiền xử lý mẫu Nội dung 2.1 Thu thập mẫu bảo quản mầu Phịng thí nghiệm Nội dung 2.2 Thực quy trình tiền xử lý mẫu Kết cần đạt Báo cáo tông họp tài liệu đề cương nghiên cứu Các mẫu trà thu thập gồm: trà xanh, trà pu’erh, trà trắng, trà đen (miên núi phía Băc) trà xanh, trà oolong (miên Nam) Báo cáo điều kiện bảo quản mẫu thích họp Phịng thí nghiệm Báo cáo quy trình tiền xử lý mẫu mẫu trà qua bước tiền xử lý Nội dung Thâm định phương pháp phân tích flavonoid tơng thiết bị UV-Vis Shimadzu 1800, bao gồm: ■ Ước lượng giới hạn phát giới hạn định lượng ■ Xây dựng đường chuẩn ■ Đánh giá độ lặp, độ tái lặp Các tiêu chi cho thấm định đánh giá theo Phụ lục F AOAC số liệu tham chiếu ISO 14502-1:2005 Nội dung Đánh giá hàm lượng flavonoid tông mầu trà khác nhau: ■ Khu vực miền núi phía Bắc: trà xanh, trà pu’erh, trà trắng, trà đen ■ Khu vực miền Nam: trà xanh, trà oolong Nội dung Đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ pha trà đên hàm lượng Báo cáo kết thấm định phương pháp phân tích flavonoid tơng thiêt bị ƯV-Vis Shimadzu 1800 gồm: giá trị giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng ước lương, đường chuẩn, đánh giá vê độ lặp độ tái lặp (thông qua biêu kiêm sốt chât lượng) Kết hàm lượng flavonoid tống mầu trà trình bày dạng bảng số liệu đồ thị kèm theo nhận xét, đánh giá người làm Kết đánh giá ảnh hưởng nhiệt độ pha trà đên hàm lượng flavonoid Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Trang CHƯƠNG ĐỀ XUẤT CÁC GIẢI PHÁP Nghiên cứu cung cấp số thông tin xu hướng biến đổi cùa hàm lượng flavonoid tổng loại trà khác thay đối hàm lượng flavonoid tổng hai khu vực lấy mầu nghiên cứu (miền Nam miền núi phía Bắc) Ngoài ra, nghiên cứu điều kiện pha trà mốc thời gian nhiệt độ khác góp phần cung cấp thơng tin hữu ích cho việc pha trà với hàm lượng flavonoid tông tôt hon Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Trang 26 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ ỉ Ket luận Phương pháp phân tích hàm lượng flavonoid tống thấm định thiết bị ƯV-Vis 1800 Shimadzu với tiêu chí thỏa mãn yêu cầu AO AC, bao gồm đường chuẩn xây dựng khoảng từ 50 đến 700 mg L-1 với độ tuyến tính cao (R2 = 0.998 > 0.995), độ lặp độ tái lặp tốt, áp dụng phương pháp vào phân tích thường quy Ọuy trình phân tích áp dụng vào việc xác định đánh giá hàm lượng flavonoid tổng mầu trà Việt Nam (trà xanh, trà trắng, trà pu’erh, trà đen khu vực miền núi phía Bắc, trà xanh, trà oolong miền Nam) cho thấy khác biệt hàm lượng flavonoid tổng phân tích được, biến động hàm lượng flavonoid tồng thay đối theo giống trà vị trí địa lý cách chế biến Ảnh hưởng nhiệt độ pha đen hàm lượng flavonoid tổng nước trà chuẩn bị từ bốn mầu trà đánh giá Khảo sát cho thấy nhiệt độ nước pha trà tăng sè dần đến gia tăng hàm lượng polyphenol tổng nước trà, với phần trăm flavonoid chiết nước trà cao (lên đến 55.4% mầu trà xanh) Thời gian pha trà lâu hàm lượng flavonoid tống có xu hướng tăng theo đến khoảng thời gian tối đa 40 phút sau bắt đầu giảm dần Kiến nghị Nghiên cứu cho thấy khác biệt giá trị flavonoid tổng số mẫu trà khác Việt Nam ảnh hưởng nhiệt độ thời gian pha đến phóng thích hợp chat flavonoid từ trà vào nước trà Tuy nhiên, số lượng mầu trà cần thu thập nhiều để có thêm nhiều dừ liệu hàm lượng polyphenol tổng nhiều mầu trà với giống phương pháp chế biến khác (khơng có có q trình lên men với nhiều mức độ khác nhau) Bên cạnh đó, đe hoàn thiện thêm đánh giá hàm lượng flavonoid tong, có the thực thêm khảo sát ảnh hưởng số lần hãm trà den flavonoid tổng nước trà, từ có the đưa lời khuyên điều kiện pha trà phù hợp cho loại trà để thu hàm lượng flavonoid mong muốn Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Trang 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO A B Arsyad, "Analisis pengaruh waktu pemanasan terhadap degradasi aktivitas antioksidan pada daun kangkung air (Ipomoea Aquatica Forsk)," UIN Walisongo, 2014 Alan Crozier, p (2016) Flavonoid, California University, Davis A Pẹkal and K Pyrzynska, "Evaluation of aluminium complexation reaction for flavonoid content assay," Food Analytical Methods, vol 7, no 9, pp 1776-1782, 2014 Cabrera, c., Artacho, R., & Gimenez, R (2006) Beneficial effects of green tea—a review Journal of the American College ofNutrition, 25(2), 79-99 Chang, K (2015) World tea production and trade Current and future development FAO Intergovernmental Group on Tea A Subsidiary Body of the FAO Committee on Commodity Problems (CCP) c K111Ọ, z Can, A Yilmaz, s Yildiz, and H Tuma, "Antioxidant properties of some herbal teas (green tea, senna, com silk, rosemary) brewed at different temperatures," International Journal of Secondary Metabolite, vol 4, no 3, Special Issue 1, pp 142148,2017 Einỏther, s (2016) Tea, Vlaardingen, The Netherlands E F Susiani, A Guntarti, and K Kintoko, "Pengaruh Suhu Pengeringan Terhadap Kadar Flavonoid Total Ekstrak Etanol Daun Kumis Kucing (Orthosiphon Aristatus (BL) Miq)," Borneo Journal of Pharmascientech, vol 1, no 2, 2017 Hung, Y.-T., Chen, P.-C., Chen, R L c., & Cheng, T.-J (2010) Sequential determination of tannin and total amino acid contents in tea for taste assessment by a fluorescent flow-injection analytical system Food Chemistry, 118(3), 876-881 J K Kundu et al., "Inhibition of Phorbol Ester-Induced COX-2 Expression by Epigallocatechin Gallate in Mouse Skin and Cultured Human Mammary Epithelial Cells," The Journal of nutrition, vol 133, no 11, pp 3805S-3810S, 2003 J Peterson et al., "Major flavonoids in dry tea," Journal of Food Composition and Analysis, vol 18, no 6, pp 487-501, 2005 J V Higdon and B Frei, "Tea catechins and polyphenols: health effects, metabolism, and antioxidant functions," 2003 ISO 14502-1 (2005) Determination of substances characteristic of green and black tea-Part 1: Content of total polyphenols in tea-Colorimetric method using Folin Ciocalteu reagent Khan, N., & Mukhtar, H (2013) Tea and health: studies in humans Current Pharmaceutical Design, 79(34), 6141-6147 M Lorenz et al., "A constituent of green tea, epigallocatechin-3-gallate, activates endothelial nitric oxide synthase by a phosphatidylinositol-3-OH-kinase-, cAMPdependent protein kinase-, and Akt-dependent pathway and leads to endothelialdependent vasorelaxation," Journal of Biological Chemistry, vol 279, no 7, pp 6190-6195,2004 N Ahmad, D K Feyes, R Agarwal, H Mukhtar, and A.-L Nieminen, "Green tea constituent epigallocatechin-3-gallate and induction of apoptosis and cell cycle arrest in human carcinoma cells," Journal of the National Cancer Institute, vol 89, no 24, pp 1881-1886, 1997 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Trang 28 N Ahmad, p Cheng, and H Mukhtar, "Cell cycle dysregulation by green tea polyphenol epigallocatechin-3-gallate," Biochemical and biophysical research communications? vol 275, no 2, pp 328-334, 2000 N Phuyal, p K Jha, p p Raturi, and s Rajbhandary, "In vitro antibacterial activities of methanolic extracts of fruits, seeds, and bark of Zanthoxylum armatum DC," Journal of tropical medicine, vol 2020, 2020 Naczk, M., & Shahidi, F (2004) Extraction and analysis of phenolics in food Journal of Chromatography A, 1054(\-2~), 95-111 N Ọ Izzreen and A Mohd Fadzelly, "Phytochemicals and antioxidant properties of different parts of Camellia sinensis leaves from Sabah Tea Plantation in Sabah, Malaysia," International Food Research Journal, vol 20, no 1, 2013 R Myers et al., "AOAC SMPR® 2016.004," Journal of AO AC International, vol 99, no 4, pp 1105-1106,2016 s Bansal, N Syan, p Mathur, and s Choudhary, "Pharmacological profile of green tea and its polyphenols: a review," Medicinal Chemistry Research, vol 21, no 11, pp 3347-3360,2012 Scientific, p (2018) Prime Scientific - Theory and Practice of Spectrophotometric Measurements Semiz, G., Semiz, A., & Mercan-Dogan, N (2018) Essential oil composition, total phenolic content, antioxidant and antibiofilm activities of four Origanum species from southeastern Turkey International Journal ofFood Properties, 194-204 Senanayake, s p J N (2013) Green tea extract: Chemistry, antioxidant properties and food applications-A review Journal of Functional Foods, 5(4), 1529-1541 T Egziabher and s Edwards, "MM No Title No Title," Africa’s Potential for the Ecological Intensification of Agriculture, vol 53, no 9, pp 1689-1699, 2013 T Putri, "In vitro anti-gout activity and phenolic content of' black tea" soursop (Annona muricata L.) leaves brew," Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, vol 7, no 11, pp 735-743,2015 T Yokozawa et al., "In vitro and in vivo studies on the radical-scavenging activity of tea," Journal of agricultural and food chemistry, vol 46, no 6, pp 2143-2150, 1998 u J Unachukwu, s Ahmed, A Kavalier, J T Lyles, and E J Kennelly, "White and green teas (Camellia sinensis var sinensis): variation in phenolic, methylxanthine, and antioxidant profiles," Journal of food science, vol 75, no 6, pp C541-C548, 2010 w Modder and A Amarakoon, "Tea and Health," 2002 Zhang, J., Yang, R., Chen, R., Peng, Y., Wen, X., & Gao, L (2018) Accumulation of heavy metals in tea leaves and potential health risk assessment: a case study from Puan county, Guizhou province, China International Journal of Environmental Research and Public Health, 75(1), 133 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Trang 29 PHỤ LỤC Bảng PL 12 Độ chệch điểm chuẩn Nồng độ (mgỌÉL-1) Độ chệch (%) 50 100 200 300 400 500 600 700 2.97 2.19 8.48 0.88 2.66 3.55 0.15 1.80 4.75 2.69 3.85 1.51 2.54 4.94 0.09 2.14 3.53 0.68 3.58 3.06 1.09 1.03 1.32 0.36 Bảng PL 13 Kết đánh giá độ tái lặp mẫu trà Mẩu thí nghiệm Giá trị trung bình Độ lệch chuân lặp lại (Sr) Độ lệch chuân lặp lại trung bình (Srtb) Độ lặp lại - RSDr (%) Độ lệch chuẩn tương đối lặp lại - RSDr tb (%) Độ lệch chuẩn tái lặp (Sr) Độ lệch chuân tương đôi tái lặp RSDr(%) Ngày 53.85 53.34 52.84 53.34 52.83 53.33 53.25 0.38 0.61 0.71 Ngày 54.02 54.65 52.53 52.90 52.08 52.92 53.19 0.96 Ngày 53.65 53.50 54.09 53.82 53.34 54.67 53.84 0.48 1.81 0.89 14 0.70 't Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 14 Két hàm lượng ílavonoỉd tổng mẫu trà Green-1 Green-2 Green-3 Pu'erh-1 Pu'erh-2 Pu'erh-3 White-1 White-2 White-3 Black-1 Black-2 Black-3 Oolong-1 Oolong-2 Olong-3 Kết qua (mgQE g1) 141.8 144.1 140.8 141.2 140.1 139.2 156.5 153.9 155.4 109.2 108.8 107.6 143.5 140.6 141.4 117.9 114.7 118.0 96.7 96.8 94.7 96.1 94.1 95.8 99.9 99.2 97.8 59.6 61.3 61.6 77.1 77.0 76.8 90.9 89.1 89.0 59.5 59.8 60.0 42.5 42.0 41.5 44.4 44.4 44.4 Trung bình (mgQE g ‘) SD RSD (%) 142.2 1.66 1.17 140.2 1.01 0.72 155.3 1.31 0.84 108.5 0.84 0.77 141.8 1.53 1.08 116.9 1.89 1.62 96.1 1.20 1.25 95.4 1.05 1.10 99.0 1.05 1.06 60.8 1.10 1.82 77.0 0.13 0.17 89.7 1.09 1.21 59.8 0.27 0.45 42.0 0.49 1.16 44.4 0.01 0.02 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Green-5 Green-6 Green-7 Kết (mgQE g-‘) 98.1 96.1 94.5 92.4 90.3 88.3 86.6 84.2 84.8 Trung bình (mgQE g-‘) SD RSD (%) 96.2 1.82 1.90 90.3 2.07 2.29 85.2 1.29 1.52 Khóa luận tôt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 15 Két khảo sát nhiệt độ đàu nưóc pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà trắng Nhiệt độ (°C) Hàm lượng flavonoids (mgQE g ■') 10 19.6 20 25.3 30 29.8 40 38.3 50 26.7 60 30.0 70 31.0 80 30.5 90 45.7 % TFC chiết 20.5 20.4 20.3 26.1 25.3 27.7 30.5 32.8 29.7 34.3 39.7 45.7 33.6 24.7 25.0 32.1 29.5 31.9 32.5 31.1 33.2 30.7 32.1 32.4 46.8 48.0 47.9 Trung bình %TFC chiết SD 20.4 0.1 26.4 1.2 31.0 1.6 39.9 5.8 27.8 5.1 31.2 1.4 32.3 1.1 31.7 0.9 47.6 0.6 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 16 Két khảo sát nhiệt độ đàu nưóc pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà đen Nhiệt độ (°C) Hàm lượng flavonoids (mgQE g -') 10 1.0 20 7.7 30 9.0 40 16.3 50 12.0 60 26.1 70 20.6 80 28.4 90 41.1 % TFC chiết 1.1 1.0 1.0 8.0 7.8 8.2 9.5 9.7 9.0 16.9 17.1 17.0 12.9 12.1 12.4 26.8 27.4 27.2 22.1 21.7 20.6 28.8 30.3 29.6 42.3 42.2 43.9 Trung bình %TFC chiết SD 1.0 0.1 8.0 0.2 9.4 0.4 17.0 0.1 12.5 0.4 27.1 0.3 21.5 0.8 29.6 0.7 42.8 1.0 Khóa luận tôt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 17 Két khảo sát nhiệt độ đàu nưóc pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà pu’erh Nhiệt độ (°C) Hàm lượng flavonoids (mgQE g -') 10 54.8 20 54.8 30 61.5 40 62.8 50 59.0 60 73.3 70 72.8 80 73.4 90 77.2 % TFC chiết 39.3 38.7 37.9 39.3 38.9 37.8 43.0 43.4 43.7 44.4 44.0 44.5 42.3 40.9 41.7 51.0 52.0 51.9 51.8 51.1 51.1 52.0 52.0 51.2 51.7 55.9 55.7 Trung bình %TFC chiết SD 38.6 0.7 38.7 0.8 43.4 0.4 44.3 0.3 41.6 0.7 51.7 0.6 51.3 0.4 51.8 0.4 54.4 2.4 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 18 Két khảo sát nhiệt độ đàu nưóc pha trà đến phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà xanh Nhiệt độ (°C) Hàm lượng flavonoids (mgQE g -') 10 49.8 20 67.9 30 68.9 40 76.4 50 68.6 60 74.4 70 69.8 80 84.3 90 86.1 % TFC chiết 31.4 37.7 27.1 37.9 46.7 46.6 43.7 44.7 44.7 48.8 50.6 48.2 44.4 43.3 44.9 47.4 46.7 49.7 45.3 45.0 44.7 53.2 55.1 54.6 56.0 54.7 55.6 Trung bình %TFC chiết SD 32.1 5.3 43.7 5.0 44.3 0.5 49.2 1.3 44.2 0.8 47.9 1.6 45.0 0.3 54.3 1.0 55.4 0.7 Khóa luận tôt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 19 Két khảo sát thời gian pha trà đén phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà xanh Thời gian (phút) Hàm lượng flavonoids (mgQE g1) 85.0 84.3 10 83.5 20 90.4 30 92.6 40 96.7 50 91.8 60 86.5 % TFC chiết 54.9 55.0 54.4 54.0 55.2 53.7 53.0 54.0 54.4 57.7 58.7 58.2 59.9 59.3 59.8 62.9 61.8 62.2 55.9 60.7 60.6 55.7 55.5 55.9 Trung bình %TFC chiết SD 54.8 0.3 54.3 0.7 53.8 0.8 58.2 0.5 59.7 0.3 62.3 0.6 59.1 2.8 55.7 0.2 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 20 Két khảo sát thời gian pha trà đén phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà Pu’erh Thời gian (phút) Hàm lượng flavonoids (mgQE g -') 63.4 72.9 10 88.6 20 92.2 30 91.1 40 98.2 50 75.7 60 73.4 % TFC chiết 44.6 44.9 44.6 51.8 51.7 50.7 62.2 62.1 63.1 64.8 65.2 65.0 64.1 64.2 64.4 68.6 69.9 69.2 54.7 52.9 52.6 52.5 52.8 49.9 Trung bình %TFC chiết SD 44.7 0.2 51.4 0.6 62.5 0.5 65.0 0.2 64.2 0.2 69.2 0.7 53.4 1.1 51.7 1.6 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 21 Két khảo sát thời gian pha trà đén phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu hồng trà đen Thời gian (phút) Hàm lượng flavonoids (mgQE g -') 28.5 39.7 10 36.4 20 51.9 30 55.1 40 36.6 50 38.8 60 % TFC chiết 29.9 29.3 30.5 32.2 31.9 31.2 44.0 44.7 44.1 40.0 41.0 40.5 58.1 57.8 57.8 61.5 62.5 60.2 40.9 40.8 40.7 43.2 42.9 43.6 Trung bình %TFC chiết SD 29.9 0.6 31.7 0.5 44.3 0.4 40.5 0.5 57.9 0.2 61.4 1.2 40.8 0.1 43.2 0.4 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 Bảng PL 22 Két khảo sát thời gian pha trà đén phần trăm flavonoid tổng chiết mẫu trà trắng Thời gian (phút) Hàm lượng flavonoids (mgQE g -') 43.8 36.7 10 35.3 20 45.3 30 63.6 40 75.1 50 49.9 60 57.1 % TFC chiết 45.3 45.3 46.0 38.9 39.1 36.5 36.5 36.8 37.0 47.2 47.0 47.4 66.4 66.2 65.9 78.5 78.2 78.1 51.8 52.0 52.0 58.6 59.2 60.7 Trung bình %TFC chiết SD 45.6 0.4 38.2 1.5 36.8 0.3 47.2 0.2 66.2 0.3 78.2 0.2 51.9 0.2 59.5 1.1 Khóa luận tơt nghiệp đại học-SV: Thạch Thị Na Uy-1611540902 ... lặp tốt, áp dụng phương pháp vào phân tích thường quy Ọuy trình phân tích áp dụng vào việc xác định đánh giá hàm lượng flavonoid tổng mầu trà Việt Nam (trà xanh, trà trắng, trà pu’erh, trà đen... 18 Xác định hàm lượng flavonoid tổng mẫu trà 18 2.6.1 Phân tích hàm lượng flavonoid tổngtrong mầu trà 18 2.6.2 Phân tích hàm lượng flavonoid tống nước trà nhiệt độ thời gian pha trà ... tổng trà điều kiện pha tra giúp ta xác định hàm lượng flavonoid loại trà khác MỤC TIÊU NGHIÊN CỬU 2.1 Mục tiêu tổng quát Nghiên cứu hàm lượng Flavonoids tổng cùa trà điều kiện pha khác loại trà