Thẩm định quy trình xác định n nitrosodimethylamine (NDMA) trong cá viên bằng phương pháp GC MS MS

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH N NITROSODIMETHYLAMINE (NDMA) TRONG CÁ VIÊN BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC MSMS Giảng viên hướng dẫn TS.

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP TP.HCM KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH N-NITROSODIMETHYLAMINE (NDMA) TRONG CÁ VIÊN BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-MS/MS Giảng viên hướng dẫn: TS NGUYỄN VĂN TRỌNG Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THỊ MỸ NƯƠNG MSSV: 18070361 Lớp: DHPT14 Khố: 2018 – 2022 Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP TP.HCM KHOA CÔNG NGHỆ HÓA HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH XÁC ĐỊNH N-NITROSODIMETHYLAMINE (NDMA) TRONG CÁ VIÊN BẰNG PHƯƠNG PHÁP GC-MS/MS Giảng viên hướng dẫn: TS NGUYỄN VĂN TRỌNG Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THỊ MỸ NƯƠNG MSSV: 18070361 Lớp: DHPT14 Khố: 2018 – 2022 Tp Hồ Chí Minh, tháng năm 2022 i TRƯỜNG ĐH CÔNG NGHIỆP TP HCM KHOA CƠNG NGHỆ HĨA HỌC - // - CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự - Hạnh phúc - // - NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Họ tên sinh viên: NGUYỄN THỊ MỸ NƯƠNG MSSV: 18070361 Chun ngành: Kỹ thuật hóa phân tích Lớp: DHPT14 Tên đề tài: Thẩm định quy trình xác định N-Nitrosodimethylamine (NDMA) cá viên phương pháp GC-MS/MS Nhiệm vụ: - Tham khảo sát điều kiện chạy GC-MS/MS - Thẩm định phương pháp phân tích - Ứng dụng phương pháp phân tích xác định dư lượng N-nitrosodimethylamine số sản phẩm cá viên chợ Ngày giao khóa luận tốt nghiệp: 22/10/2021 Ngày hồn thành khóa luận tốt nghiệp: 18/06/2022 Họ tên giảng viên hướng dẫn: TS NGUYỄN VĂN TRỌNG Tp.Hồ Chí Minh, ngày… tháng… năm 2022 Chủ nhiệm mơn chuyên ngành Giáo viên hướng dẫn TS Nguyễn Quốc Thắng TS Nguyễn Văn Trọng ii LỜI CẢM ƠN Đề tài “Thẩm định quy trình xác định N-nitrosodimethylamine (NDMA) cá viên phương pháp GC-MS/MS” thực Trung tâm Dịch vụ Phân tích Thí nghiệm TP.HCM (CASE) Để hoàn thành tốt mục tiêu đề ra, q trình nổ lực khơng ngừng thân, em nhận giúp đỡ, động viên nhiều từ thầy cơ, gia đình bạn bè Lời đầu tiên, em xin bày tỏ lịng kính trọng lịng biết ơn đến thầy TS Nguyễn Văn Trọng giao đề tài nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ em từ lúc bắt đầu tiếp cận đề tài đến kết thúc đề tài Em xin kính chúc thầy thật nhiều sức khỏe thành công với công việc giảng dạy, trồng người Thứ hai, em xin chân thành cảm ơn Ban Giám đốc Trung tâm Dịch vụ Phân tích Thí nghiệm Thành phố Hồ Chí Minh (CASE), Ban lãnh đạo Phịng Phân tích Sắc ký tạo điều kiện môi trường tốt nhất, đặc biệt ThS Trương Văn Nhân tận tình giúp đỡ em trình học hồn thành đề tài Đồng thời, em xin gửi lời cảm ơn đến thầy cô thuộc Khoa Cơng nghệ Hóa học, đặc biệt thầy mơn Phân tích giảng dạy kiến thức cần thiết bổ ích để em đủ hiểu hiểu biết ngành học mình, giúp em tự tin bước khỏi ghế giảng đường làm Cuối cùng, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến gia đình ln bên cạnh, yêu thương, quan tâm, động viên giúp đỡ cho suốt thời gian qua Do thời gian kiến thức thực tiễn hạn chế nên đề tài khơng tránh thiếu sót, em mong nhận góp ý từ thầy để em hồn thiện đề tài Em xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng năm 2022 Sinh viên thực Nguyễn Thị Mỹ Nương iii NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN Phần đánh giá: (thang điểm 10)  Thái độ thực hiện:  Nội dung thực hiện:  Kỹ trình bày:  Tổng hợp kết quả: Điểm số: …… Điểm chữ: TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng năm 2022 Trưởng môn Giảng viên hướng dẫn Chuyên ngành (Ký ghi họ tên) TS Nguyễn Văn Trọng iv NHẬN XÉT CỦA GIẢNG VIÊN PHẢN BIỆN TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 20… Giảng viên phản biện (Ký ghi họ tên) v MỤC LỤC LỜI NÓI ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Sản phẩm cá viên 1.1.1 Khái niệm cá viên 1.1.2 Nguồn gốc thành phần cá viên 1.1.3 Tác dụng cá viên đến sức khỏe 1.2 Tổng quan N-nitrosamine 1.2.1 Định nghĩa N-nitrosamine .2 1.2.2 Phân loại 1.2.3 Sự hình thành N-nitrosamine .4 1.2.4 Tính chất vật lý N-nitrosodimethylamine 1.2.5 Ứng dụng N-nitrosodimethylamine 1.2.6 Ảnh hưởng chất phân tích người 1.2.7 Quy định hành N-nitrosamine 1.3 Tình hình nghiên cứu 1.3.1 Các phương pháp xử lý mẫu 1.3.2 Các phương pháp phân tích 1.4 Cơ sở lý thuyết phương pháp sắc ký khí 1.4.1 Khái niệm .8 1.4.2 Sơ đồ hệ thống sắc ký khí 1.4.3 Chế độ quét toàn dải (Scan) chế độ khảo sát ion lựa chọn (Sim) 14 1.4.4 Các cố thường gặp GC-MS/MS cách khắc phục tương ứng 15 1.5 Thẩm định phương pháp .17 1.5.1 Độ chọn lọc 17 1.5.2 Xác định khoảng tuyến tính xây dựng đường chuẩn 17 1.5.3 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) phương pháp 18 1.5.4 Độ lặp lại phương pháp (RSDr) 19 1.5.5 Hiệu suất thu hồi 20 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 21 vi 2.1 Đối tượng nghiên cứu 21 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.3 Thiết bị, dụng cụ hóa chất 21 2.3.1 Thiết bị dụng cụ 21 2.3.2 Hóa chất 22 2.3.3 Pha dung dịch chuẩn 22 2.4 Khảo sát điều kiện tối ưu 23 2.4.1 Lựa chọn cột tách .23 2.4.2 Nhiệt độ cổng bơm mẫu, nhiệt độ đầu dò, kiểu bơm, thời gian lưu, mass lượng va đập 23 2.4.3 Lựa chọn chương trình nhiệt 23 2.5 Xây dựng quy trình phân tích mẫu để phân tích N-nitrosodimethylamine 24 2.5.1 Chuẩn bị mẫu sơ 24 2.5.2 Chuẩn bị mẫu trắng 24 2.5.3 Chuẩn bị mẫu thêm chuẩn 24 2.5.4 Quy trình phân tích mẫu 24 2.6 Thẩm định phương pháp .26 2.6.1 Ảnh hưởng mẫu 26 2.6.2 Khảo sát độ chọn lọc 27 2.6.3 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) phương pháp 27 2.6.4 Độ lặp lại phương pháp (RSDr) 28 2.6.5 Hiệu suất thu hồi 28 2.7 Phân tích mẫu thực tế 28 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .29 3.1 Khảo sát điều kiện tối ưu 29 3.1.1 Lựa chọn cột tách .29 3.1.2 Nhiệt độ cổng bơm mẫu, nhiệt độ đầu dò, kiểu bơm, thời gian lưu, mass lượng va đập 29 3.1.3 Lựa chọn chương trình nhiệt 30 3.2 Lựa chọn điều kiện xử lý mẫu 31 3.3 Thẩm định phương pháp .32 3.3.1 Khảo sát độ chọn lọc 32 vii 3.3.2 Ảnh hưởng mẫu 32 3.3.3 Xây dựng đường chuẩn 34 3.3.4 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) phương pháp 35 3.3.5 Độ lặp lại phương pháp (RSDr) 36 3.3.6 Hiệu suất thu hồi 37 3.4 Phân tích mẫu thực tế 38 KẾT LUẬN 39 KIẾN NGHỊ 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO 41 viii DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Một số N-nitrosamine thường gặp Bảng 1.2 Thơng tin tính chất vật lý N-nitrosodimethylamine [3] Bảng 1.3 Quy định hành hàm lượng cho phép N-nitrosamine số quốc gia Bảng 1.4 Một số đầu dị thơng dụng dùng cho sắc ký khí 10 Bảng 1.5 Các cố thường gặp GC-MS/MS cách khắc phục [22] 15 Bảng 1.6 Độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ khác (theo AOAC) 19 Bảng 1.7 Độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác (theo AOAC) 20 Bảng 2.1 Cách pha dung dịch chuẩn gốc NDMA 22 Bảng 2.2 Cách pha dung dịch nội chuẩn NDMA-d6 22 Bảng 2.3 Cách pha mẫu thêm chuẩn nồng độ 10, 25, 50 μg/kg 24 Bảng 2.4 Bảng đánh giá thông số ME (%) 26 Bảng 2.5 Cách pha chuẩn làm việc N-nitrosodimethylamine 26 Bảng 2.6 Cách chuẩn bị đường chuẩn mẫu cá viên 27 Bảng 2.7 Bảng pha hóa chất thực độ lặp lại nồng độ 28 Bảng 3.1 Thông số làm việc máy GC-MS/MS .30 Bảng 3.2 Các điều kiện MS/MS phân tích N-nitrosodimethylamine 30 Bảng 3.3 Chương trình nhiệt độ thời gian lưu 30 Bảng 3.4 Kết khảo sát đường chuẩn dung dịch 32 Bảng 3.5 Kết khảo sát đường chuẩn mẫu 33 Bảng 3.6 Kết đường chuẩn dung dịch 34 Bảng 3.7 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) phương pháp .35 Bảng 3.8 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) công bố 35 Bảng 3.9 Các thông số lặp lại N-nitrosodimethylamine 36 Bảng 3.10 Kết xác định hiệu suất thu hồi NDMA 37 35 3.3.4 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) phương pháp Sau tiến hành khảo sát 10 mẫu thêm chuẩn nồng độ 10 μg/kg, kết thu tính theo cơng thức mục 2.6.3 Kết tính tốn thể bảng sau: Bảng 3.7 Giới hạn phát (MDL) giới hạn định lượng (MQL) phương pháp STT (Mẫu thêm chuẩn nồng độ 10 �g/kg) Xbi (µg/kg) 10,425 8,725 8,043 8,936 8,896 9,329 9,690 9,202 8,167 10 9,384 Xtb (�g/kg) 9,080 SD 0,702 MDL MQL (�g/kg) (�g/kg) 2,106 7,020 R 4,311 Nhận xét: Hệ số R = 4,311 (4