KHẢO SÁT HOẠT TỈNH KHÁNG NÁM Cuandida albicans CỦA CÁC PHYTOESTROGEN

TỔNG LIÊN ĐỒN LAO ĐỘNG VIỆT NAM ĐẠI HỌC TƠN ĐỨC THẮNG KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG NẤM Candida albicans CỦA CÁC PHYTOESTROGEN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Ngành Chuyên ngành Mã số : Công nghệ sinh học : Công nghiệp : GVHD : TS TRẦN HOÀNG NGỌC ÁI SVTH : ĐÀO THỊ LỆ HẰNG MSSV : 062374S TP.HỒ CHÍ MINH - 2011 LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực luận văn, em không ngừng nhận quan tâm giúp đỡ gia đình, thầy bạn bè Đó động lực giúp em phấn đấu để hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp Em gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban giám hiệu trường Đại Học Tôn Đức Thắng, Ban chủ nhiệm Khoa Khoa Học Ứng Dụng môn Công Nghệ Sinh Học tất cà q thầy tận tình truyền đạt kiến thức cho em trình học tập trường Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới TS Trần Hồng Ngọc Ái, người tận tình bảo, hướng dẫn góp ý cho em để báo cáo em hoàn thiện Cuối em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới bố mẹ người thân gia đình hết lòng quan tâm, động viên tạo điều kiện tốt để hoàn thành luận văn tốt nghiệp Mặc dù cố gắng hoàn thiện luận văn tất nhiệt tình an8ng lực mình, nhiên thời gian có hạn, trình độ cịn hạn chế thiếu nhiều kinh nghiệm trình làm luận văn nên khơng thể tránh khỏi sai sót, mong nhận góp ý quý báu thầy cô bạn bè Một lần em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới tất q thầy cơ, gia đình bạn Tp HCM, ngày tháng năm Sinh viên thực ĐÀO THỊ LỆ HẰNG i MỤC LỤC CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích phạm vi đề tài 1.3 Ý nghĩa đề tài: CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chủng nấm Candida albican 2.1.1 Đại cương nấm Candida: 2.1.2 Vị trí Candida albicans phân loại nấm men: 2.1.3 Hình thể C albicans: 2.1.4 Môi trường nuôi cấy: 2.1.5 Tác hại nấm Candida bệnh lí: 2.2 Tổng quan phytoestrogen: 2.2.1 Phytoestrogen gì? 2.2.2 Thực vật chứa phytoestrogen: 15 2.2.3 Vai trò phytoestrogen sinh lí người: 10 CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 13 3.1 Thời gian địa điểm: 13 3.1.1 Thời gian: 13 3.1.2 Địa điểm: 13 3.2 Nôi dung nghiên cứu: 13 3.3 Vật liệu thí nghiệm: 13 3.3.1 Đối tượng nghiên cứu: 13 3.3.2 Trang thiết bị nghiên cứu: 13 3.3.3 Hóa chất mơi trường thí nghiệm: 14 3.3.4 Điều kiện nuôi cấy: 14 3.4 Phương pháp thí nghiệm 15 3.4.1 Bố trí thí nghiệm 15 ii 3.4.1.1 Nuôi cấy nấm men C albicans: 15 3.4.1.2 Tách chiết phytoestrogen từ đậu nành acid béo từ lựu: 21 3.4.1.3 Khảo sát hoạt tính kháng nấm Candida albicans phytoestrogen 22 3.4.2 Phương pháp xử lí số liệu: 24 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Tách chiết phytoestrogen từ thực vật: 25 4.1.1 Thu nhận genistein từ đậu nành: 25 4.1.2 Thu nhận acid béo từ dầu lựu: 28 4.2 Khảo sát đường cong sinh trưởng nấm men C albicans: 28 4.3 Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C albicans phytoestrogen môi trường lỏng: 30 4.4 Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans phytoestrogen mơi thạch phương pháp đếm khuẩn lạc 37 4.5 Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans phytoestrogen môi trường thạch phương pháp vòng kháng khuẩn: 38 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 41 5.1 Kết luận: 41 5.1.1 Khả kháng nấm C.albicans phytoestrogen môi trường lỏng: 41 5.1.2 Khả kháng nấm C.albicans phytoestrogen môi trường thạch đĩa: 41 5.2 Kiến nghị: 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 iii DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 4.1: kết chạy sắc kí mẫu TPCN 20 Bảng 4.2: kết chạy sắc kí mẫu bột đậu nành 21 Bảng 4.3: kết chạy sắc kí mẫu mầm đậu nành 22 Bảng 4.4: bảng nồng độ genistein 22 Bảng 4.5: kết đo OD nấm men 24 Bảng 4.6: kết đo OD mẫu trắng 25 Bảng 4.7: kết đo OD C.albicans – TPCN 25 Bảng 4.8: bảng % sống sót nấm men C.albicans mẫu TPCN 25 Bảng 4.9: kết đo OD - bột đậu nành 26 Bảng 4.10: bảng % sống sót nấm men C.albicans mẫu bột 27 Bảng 4.11: kết đo OD C.albicans - mầm đậu nành 28 Bảng 4.12: bảng % sống sót nấm men C.albicans mẫu mầm 28 Bảng 4.13: kết đo OD - dầu lựu 29 Bảng 4.14: bảng % sống sót nấm men C.albicans mẫu dầu lựu 29 Bảng 4.15: kết đo OD C.albicans – CLA 30 Bảng 4.16: bảng % sống sót nấm men C.albicans mẫu CLA 31 Bảng 4.17: kết đếm khuẩn lạc 32 Bảng 4.18: kết đo vòng kháng nấm men C.albicans 33 iv DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 2.1: tế bào chồi, tạo ống dài Hình 2.2: hình thái khuẩn lạc C.albicans thạch đĩa Hình 2.3: cơng thức cấu tạo genistein Hình 2.4: công thức cấu tạo punicic acid Hình 2.5: CTCT CLA Hình 2.6: đậu nành hạt 10 Hình 2.7: mầm đậu nành 10 Hình 2.8: trái nho 10 Hình 2.9: lựu 10 Hình 3.1: nồi hấp 14 Hình 3.2: cân điện tử 14 Hình 3.3: tủ sấy 14 Hình 3.4: máy quay 14 Hình 4.1: kết chạy sắc kí mỏng dẩu lựu 23 Hình 4.2: vịng kháng nấm tạo dịch chiết mầm đậu nành 34 Hình 4.3: vòng kháng nấm tạo TPCN 34 Hình 4.4: vịng kháng nấm tạo dịch chiết bột đậu nành 34 Hình 4.5: vịng kháng nấm tạo CLA 35 Hình 4.6: vịng kháng nấm tạo acid béo dầu lựu 35 v DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Trang Đồ thị 4.1: sắc kí đồ TPCN 20 Đồ thị 4.2: sắc kí đồ bột đậu nành 21 Đồ thị 4.3: sắc kí đồ mầm đậu nành 22 Đồ thị 4.4: đồ thỉ biểu diễn đường cong sinh trưởng nấm men C.albicans 24 Đồ thị 4.5: đồ thị biểu diễn phần trăm sống sót nấm men dịch kháng TPCN 26 Đồ thị 4.6: đồ thị biểu diễn phần trăm sống sót nấm men dịch kháng bột đậu nành 27 Đồ thị 4.7: đồ thị biểu diễn phần trăm sống sót nấm men dịch kháng mầm đậu nành 28 Đồ thị 4.8: đồ thị biểu diễn phần trăm sống sót nấm men dịch kháng acid béo từ dầu lựu 30 Đồ thị 4.9: đồ thị biểu diễn phần trăm sống sót nấm men dịch kháng CLA 31 vi DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT C.albicans : Candida albicans SDB : Sabouraud Dextrose broth SDA : Sabouraud Dextrose Agar CTPT : công thức phân tử CLA : conjugated linoleic acid CLnA : conjugated linolenic acid TPCN : thực phẩm chức ODtr : độ đục mẫu trắng ODtpcn : độ đục mẫu thực phẩm chức ODbột : độ đục mẫu bột đậu nành ODmầm : độ đục mẫu mầm đậu nành ODlựu : độ đục mẫu acid béo từ lựu ODCLA : độ đục mẫu CLA DMSO : Dimethyl sulfoxide vii CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.4 ĐẶT VẤN ĐỀ Từ xa xưa loài người biết dùng cỏ để chữa bệnh Trải qua hàng ngàn năm lịch sử, thuốc phát ngày nhiều hơn, phương pháp chế biến phong phú Trong đời lĩnh vực sinh học góp phần to lớn vào việc tìm kiếm phát hợp chất có giá trị từ giới sinh vật vơ phong phú kì diệu Do điều kiện địa lý đặc thù, nước ta nằm khu vực khí hậu nhiệt đới gió mùa nên Việt Nam có thảm thực vật vơ phong phú đa dạng sinh học với nhiều loại dược liệu q Nhân dân ta vốn có kinh nghiệm lâu đời việc dùng thuốc thảo mộc, đặc biệt bệnh viêm nhiễm Nghiên cứu hóa học hoạt tính sinh học thuốc dân tộc khơng phục vụ việc tìm kiếm thuốc mới, mà cịn giúp lí giải chế, tác dụng chữa bệnh thảo dược để sử dụng chúng có hiệu hơn, góp phần khoa học hóa y học cổ truyền Cùng với hàng ngàn dược liệu có mặt khắp vùng lãnh thổ Việt Nam, người ta phát phytoestrogen Phytoestrogen chất chiết xuất từ thực vật chất chuyển hố chúng Phytoestrogen tạo nên đáp ứng sinh học người động vật có xương sống theo giống tác dụng estrogen nội sinh Hiện có nhiều nghiên cứu hợp chất số loài thực vật thực vật có hoạt tính có ích kháng khuẩn, kháng nấm phòng ngừa điều trị số bệnh người động vật Phytoestrogen thành phần gặp với hàm lượng tương đối cao nhiều thực phẩm quen thuộc cộng đồng dân cư Á châu đậu nành, nho, lựu,… đặc biệt đậu nành thực phẩm chế biến từ đậu nành Chính chúng tơi thực đề tài "Khảo sát hoạt tính kháng nấm Candida albicans phytoestrogen" 1.5 MỤC ĐÍCH VÀ PHẠM VI ĐỀ TÀI - Nuôi cấy, nhân giống chủng nấm men Candida albicans (C albicans) đề dùng trình nghiên cứu - Tách chiết phytoestrogen từ số loại thực vật đậu nành, lựu; cụ thể isoflavonoid có genistein từ mầm đậu nành acid béo từ dầu lựu - Khảo sát hoạt tính kháng nấm C albicans phytoestrogen 1.6 Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI: - Nuôi cấy, nhân giống chủng nấm men Candida albicans (C albicans) đề dùng trình nghiên cứu - Tách chiết phytoestrogen từ số loại thực vật đậu nành, lựu; cụ thể isoflavonoid có genistein từ mầm đậu nành acid béo từ dầu lựu - Khảo sát hoạt tính kháng nấm C albicans phytoestrogen đồ thị 4.5 : đồ thị biểu diễn % sống sót nấm men dịch kháng TPCN  Nhận xét: - Dựa vào đồ thị ta thấy khỗng thời gian sau 4h ni cấy dịch kháng chưa ức chế nấm men phát triển tất nồng độ - Ở nồng độ cuối 1g/ml ta thấy dịch kháng khơng có tác dụng ức chế nấm men tất khoảng thời gian - Ở khoảng thời gian 26h sau nuôi cấy dịch kháng có tác dụng ức chế phát triển nấm men khơng cao Ở nồng độ 100g/ml hiệu kháng rõ rệt - Ở khoảng thời gian sau 19h nuôi cấy dịch kháng kháng nấm men tốt rõ rệt nồng độ 100g/ml  Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans dịch chiết từ bột đậu nành bảng 4.9 kết đo OD C.albicans - bột đậu nành(ODbột) C.albicans - bột đậu nành Nồng 4h độ ODtb 19h ODtb 26h ODtb g/ml 0.022 0.023 0.0225 0.692 0.705 0.6985 1.015 1.011 1.013 10 0.023 0.026 0.0245 0.641 0.653 0.647 0.929 0.901 0.915 50 0.025 0.027 0.026 0.583 0.575 0.554 0.849 0.853 0.851 100 0.031 0.029 0.030 0.577 0.601 0.589 0.799 0.836 0.8175 26 bảng 4.10 phần trăm % sống sót nấm men dịch kháng bột đậu nành g/ml 4h (%) 19h (%) 26h (%) 94 98,5 >100 10 >100 91 90.8 50 >100 81 84.5 100 >100 83 81.1 đồ thị 4.6 đồ thị biểu diễn % sống sót nấm men dịch kháng bột đậu  Nhận xét: - Đối với mẫu bột đậu nành ta nhận thấy nồng độ cuối 1g/ml tất khoảng thời gian khơng thấy có tác dụng kháng nấm - Dựa vào kết thí nghiệm ta nhận thấy sau 4h ni cấy nấm men phát triển bình thường không bị ức chế dịch kháng tất nồng độ - Ở nồng độ cuối dịch kháng 10g/ml ta thấy dịch kháng có tác dụng không rõ rệt chưa ức chế nhiều nấm men - Ở nồng độ kháng lại kết kháng tương đối tốt 27  Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans dịch chiết từ mầm đậu nành bảng 4.11 kết đo OD C.albicans - mầm đậu nành (ODmầm) C.albicans - mầm Nồng 4h độ ODtb 19h ODtb 26h ODtb g/ml 0.024 0.023 0.0235 0.675 0.673 0.674 1.009 1.015 1.012 10 0.024 0.023 0.0235 0.569 0.583 0.576 0.841 0.873 0.857 50 0.027 0.023 0.025 0.541 0.507 0.524 0.779 0.752 0.7655 100 0.031 0.029 0.030 0.504 0.477 0.4905 0.659 0.701 0.680 bảng 4.12 phần trăm sống sót nấm men dịch kháng mầm đậu nành g/ml 4h (%) 19h (%) 26h (%) 98 95 >100 10 98 81.2 85 50 >100 74 76 100 >100 69.2 67.5 đồ thị đồ thị biểu diễn % sống sót nấm men dịch kháng mầm đậu 28  Nhận xét: - Nhìn vào đồ thị ta thấy nồng độ 1g/ml tất khoảng thời gian khoảng thời gian 4h sau ni cấy hầu hết nồng độ dịch chiết mầm đậu nành khơng có khả kháng nấm men - Ở nồng độ 10g/ml bắt đầu thấy xuất khả kháng không rỏ rệt - Ờ nồng độ 50g/ml 100g/ml kháng rõ ràng dịch kháng kháng tốt 19h 26h - Nhìn vào đồi thị ta thấy khả kháng nấm men khoảng thời gian sau 19h nuối cấy tương đối tốt so với khoảng sau 26h nuôi cấy - Ở nồng độ 100g/ml dịch mầm kháng tốt  Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans dầu lựu: bảng 4.13 kết đo OD C.albicans - dầu lựu(ODlưu) C.albicans - dầu lựu Nồng 4h độ ODtb 19h ODtb 26h ODtb g/ml 0.025 0.023 0.024 0.815 0.703 10 0.027 0.023 0.025 0.711 0.7065 0.626 50 0.021 0.026 0.0235 0.591 0.622 0.6065 0.919 0.874 0.8965 100 0.028 0.030 0.029 0.5965 0.893 0.856 0.8745 0.594 0.599 0.759 0.997 1.013 1.005 0.973 0.942 0.9575 bảng 4.14 phần trăm sống sót nấm men dịch kháng dầu lựu g/ml 4h (%) 19h (%) 26h (%) 100 >100 99.7 10 >100 99.6 95 50 98 85.5 89 100 >100 84.1 86.8 29 đồ thị 4.8 đồ thị biểu diễn % sống sót nấm men dịch kháng dầu lựu  Nhận xét: - Ở nồng độ 1g/ml tất khoảng thời gian sau nuôi cấy 4h sau nuôi cấy tất nồng độ dịch kháng khơng có tác dụng kháng nấm men - Ở nồng độ 10g/ml nấm men không bị ức chế - Ở nồng độ cuối 50g/ml nấm men bắt đầu bị ức chế khoảng thời gian sau 19h nuôi cấy - Ở nồng độ 100g/ml nấm men bị ức chế tương đối tốt  Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans CLA bảng 4.15 kết đo OD C.albicans - CLA(OCLA) C.albicans - CLA Nồng 4h độ ODtb 19h ODtb 26h ODtb g/ml 0.025 0.024 0.0245 0.711 0.693 0.702 1.003 1.002 1.0025 10 0.023 0.025 0.024 50 0.024 0.027 0.0255 0.611 0.603 0.607 0.859 0.846 0.8525 100 0.026 0.030 0.028 0.819 0.784 0.8015 0.679 0.686 0.682.5 0.951 0.938 0.9445 0.602 0.598 0.600 30 bảng 4.16 phần trăm sống sót nấm men dịch kháng CLA g/ml 4h (%) 19h (%) 26h (%) >100 99 99.5 10 100 96.3 93.7 50 >100 85.6 84.6 100 >100 84.6 79.6 đồ thị 4.9 đồ thị biểu diễn % sống sót nấm men dịch kháng CLA  Nhận xét: - Nhìn vào bảng kết đồ thị ta nhận thấy nồng độ cuối 1g/ml 10g/ml dịch kháng không kháng nấm men tất khoảng thời gian sau cấy.Và khoảng 4h sau nuôi cấy không thu kết kháng nấm nồng độ khảo sát - Ở nồng độ cuối 50g/ml 100g/ml dịch kháng có tác dụng kháng nấm rõ mức độ kháng không mạnh - Ở khoảng thời gian 19h 26h sau nuôi cấy mức độ kháng không chênh lệch nhiều,khả kháng gần 31  Nhận xét chung: - Qua thí nghiệm trên, dựa vào đồ thị ta thấy nồng độ cuối 50g/ml 100g/ml nấm men bị ức chế rõ rệt nồng độ 100g/ml nấm men bị ức chế cao - Sau 26h nuôi cấy ta thấy khoảng thời gian 19h sau nuôi cấy khoảng thời gian nấm men bị ức chế tốt đến khoảng thời gian 26h sau nuôi cấy ức chế có giảm khơng đáng kể - Vì ta chọn nồng độ cuối 100g/ml 19h sau nuôi cấy để tiếp tục khảo sát khả kháng phytoestrogen 4.4 Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans phytoestrogen mơi thạch phương pháp đếm khuẩn lạc - Sau 19h nuôi cấy ta đem đếm khuẩn lạc: bảng 4.17 kết đếm khuẩn lạc Dịch kháng Số lượng khuẩn lạc Trung bình % tb sống đối chứng 318 356 337 mầm đậu nành 66 69 67 20% bột đậu nành 91 97 94 27.9% TPCN 85 91 88 26.1% dầu lựu 101 107 104 31% CLA 113 126 119 35.3%  Nhận xét: Sau 19h nuôi cấy nhận thấy số lượng khuẩn lạc đĩa kháng tương đối so với đĩa đối chứng, điều chứng tỏ phytoestrogen hay cụ thể genistein đậu nành, acid béo dầu lựu acid linoleic có khả kháng nấm men C.albicans tương đối tốt So sánh ta thấy dịch kháng có khả ức chế nấm men mức độ ức chế có khác Ta nhận thấy mầm đậu nành có khả kháng nấm cao nhất, bột đậu nành, TPCN dầu lựu khả kháng tương đối tốt, CLA có khả kháng yếu hiệu kháng nấm CLA 32 rõ rệt 4.5 Khảo sát hoạt tính kháng nấm men C.albicans phytoestrogen mơi trường thạch phương pháp vịng kháng khuẩn: Bảng 4.18 kết đo vòng kháng nấm men Trung Dịch kháng mầm đậu nành bột đậu nành TPCN dầu lựu CLA đường kính vịng kháng(mm) 15 12 13 10 10 14 11 12 10 16 11 12 10 bình(mm) 15 11.33 12.33 10 9.33  Nhận xét: - Ở phương pháp vòng kháng khuẩn ta dễ dàng nhìn thấy CLA dầu lựu có khả kháng nấm tương tự Vòng kháng khuẩn CLA dầu lựu tạo tương đối - Khả kháng nấm TPCN tương đối tốt rõ rệt - Mầm đậu nành tạo vòng kháng lớn rõ ràng - Bột đậu nành có khả kháng nấm C.albicans khơng TPCN mầm đậu nành Khả kháng bột cao CLA dầu lựu 33 hình 4.2: vịng kháng nấm tạo dịch mầm đậu nành hình 4.3: vịng kháng tạo TPCN hình 4.4:vịng kháng tạo dịch chiết bột đậu nành 34 hình 4.5: vịng kháng tạo CLA hình 4.6 :vịng kháng tạo dầu lựu 35 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận: 5.1.3 Khả kháng nấm C.albicans phytoestrogen môi trường lỏng: Các phytoestrogen cụ thể genistein acid béo có tính chất estrogen có khả kháng nấm men C.albicans Tuy nhiên khả kháng dịch chiết tương đối khác có chênh lệch dịch chiết chứa genistein acid béo Khả kháng nấm men C.albicans dịch chiết chứa genistein cao so với acid béo Trong môi trường lỏng khả sống sót chủng nấm men C.albicans cịn tương đối cao (> 67.5 %) hầu hết tăng nhẹ sau 19h 5.1.4 Khả kháng nấm C.albicans phytoestrogen môi trường thạch đĩa: Trên môi trường thạch đĩa, phương pháp đếm khuẩn lạc tất dịch dịch chiết cho thấy khả kháng nấm men C.albicans Tuy nhiên khả kháng nấm loại phytoestrogen khác từ dịch chiết khác khác Khả kháng nấm men C.albicans genistein cao so với khả kháng acid béo có chất estrogen Ở phương pháp đếm khuẩn lạc khả ức chế phát triển nấm men tương đối cao cao nhiều so với phương pháp đo độ đục Khả sống sót nấm men C.albicans phương pháp tương đối thấp (< 36%) Trên môi trường thạch đĩa, phương pháp đo vòng kháng khuẩn nhận thấy tất đĩa xuất vòng kháng nấm rõ Tuy nhiên khả kháng dịch chiết khác cho vịng khác có đường kính 36 chênh lệch Cũng phương pháp trên, phương pháp dịch chiết chứa genistein cho vòng kháng tương đối lớn so với acid béo Tuy nhiên nồng độ genistein mẫu bột đậu nành tương đối thấp nên hiệu kháng mẫu không cao nhiều so với acid béo Ở tất phương pháp thấy mẫu dịch chiết từ mầm đậu nành cho khả kháng tốt khả kháng nấm men C.albicans genistein cao so với acid béo 5.2 Kiến nghị: Sau trình nghiên cứu, em thấy để kết thí nghiệm có ý nghĩa thiết thực cần phải giải vấn đề sau: - Các phytoestrogen có khả ức chế tốt nấm men C.albicans Tuy nhiên phytoestrogen có hiệu ức chế khác nấm men C.albicans Vì cần phải khảo sát thêm khả ức chế phytoestrogen loại vi sinh có hại khác - Nguồn phytoestrogen phong phú, dễ tìm quen thuộc cần khảo sát thêm loại phytoestrogen khác loài thực vật khác để tận dụng tối đa ưu điểm phytoestrogen việc kiểm soát vi sinh gây bệnh - Khảo sát nhiều nguồn thực vật khác thực phẩm chức sản phẩm có lợi cho người tiêu dùng - Cần thử nghiệm thực tế khả kháng nấm men C.albicans loại phytoestrogen Khảo sát khả nhiễm bệnh thời gian thích hơp, liều lượng cần thiết để nâng cao hiệu sử dụng phytoestrogen dạng tinh thể - Cần khảo sát thêm khác việc dùng phytoestrogen cách tự nhiên theo truyền thống (đưa vào thể theo phần) cách dùng có chủ định để phòng trị bệnh 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu nước ngoài: 1.Jin - Ae Kim, Seung - Beom Hong, Woo - Suk Jung, Chang - Yeon Yu, Kyung - Ho Ma, Jae - Goon Guag, I11 - Min Chung Comparison of isoflavones composition in seed, embryo, cotyledon and seed coat of cooked with rice and vegetable soybean (glycine max L.) varieties Food chemistry 102 (2007) 738 744 Setchell KDR Soy isoflavones - Benefits and risks from nature’s Selective Estrogen Receptor Modulators (SERMs) J Amer Coll Nutrition, 2001; 20(5):354S–362S Song TT, Hendrich S, Murphy PA: Estrogenic activity of glycitein, a soy isoflavone J Agric Food Chem 1999, 47(4):1607-1610 http://vi.wikipedia.org/wiki/ Zhang Y, Song TT, Cunnick JE, Murphy PA, Hendrich S: Daidzein and genistein glucuronides in vitro are weakly estrogenic and activate human natural killer cells at nutritionally relevant concentrations J Nutr 1999, 129(2):399-405 Si H, Liu D (2007) "Phytochemical genistein in the regulation of vascular function: new insights" Curr Med Chem Han, RM.; Tian, YX.; Liu, Y.; Chen, CH.; Ai, XC.; Zhang, JP.; Skibsted, LH (May 2009) "Comparison of flavonoids and isoflavonoids as antioxidants" J Agric Food Chem 57 (9): 3780–5 doi:10.1021/jf803850p PMID 19296660 Borrás, C.; Gambini, J.; López-Grueso, R.; Pallardó, FV.; Viña, J (Jan 2010) "Direct antioxidant and protective effect of estradiol on isolated mitochondria" Biochim Biophys Acta 1802 (1): 205–11 doi:10.1016/j.bbadis.2009.09.007 PMID 19751829 Rao HSP, Reddy KS (1991) "Isofavones from Flemingia vestita" Fitoterapia 63: 458 Tandon V, Pal P, Roy B, Rao HS, Reddy KS (1997) "In vitro anthelmintic activity of root-tuber extract of Flemingia vestita, an indigenous plant in Shillong, India" Parasitol doi:10.1007/s004360050286 PMID 9197399 38 Res 83 (5): 492–298 10 Raynal NJ, Charbonneau M, Momparler LF, Momparler RL (2008) "Synergistic effect of 5-Aza-2'-deoxycytidine and genistein in combination against leukemia" Oncol Res 17 (5): 223–30 doi:10.3727/096504008786111356 PMID 18980019 11 Piotrowska, E.; Jakóbkiewicz-Banecka, J.; Barańska, S.; TylkiSzymańska, A.; Czartoryska, B.; Wegrzyn, A.; Wegrzyn, G (Jul 2006) "Genistein-mediated inhibition of glycosaminoglycan synthesis as a basis for gene expression-targeted isoflavone therapy for mucopolysaccharidoses" Eur J Hum Genet 14 (7): 846–52 doi:10.1038/sj.ejhg.5201623 PMID 16670689 12 Coward L, Barnes NC, Setchell KDR, Barnes S (1993) "Genistein, daidzein, and their β-glycoside conjugates: antitumor isoflavones in soybean foods from American and Asian diets" J Agric Food Chem 41 (11): 1961–1967 doi:10.1021/jf00035a027 13 Watras, AC; Buchholz, AC; Close, RN; Zhang, Z; Schoeller, DA (200608-22) "The role of conjugated linoleic acid in reducing body fat and preventing holiday weight gain" International Journal of Obesity 31 (3): 481–7 doi:10.1038/sj.ijo.0803437 PMID 16924272 14 Syvertsen, C; Halse, J; Høivik, HO; Gaullier, JM; Nurminiemi, M; Kristiansen, K; Einerhand, A; O'Shea, M et al (2006-10-10) "The effect of months supplementation with conjugated linoleic acid on insulin resistance in overweight and obese" International Journal of Obesity 31 (7): 1148–54 doi:10.1038/sj.ijo.0803482 PMID 17031391 15 Gaullier JM, Hals J, Hoye K, Kristiansen K, Fagertun H, Vik H, Gudmundsen O Supplementation with conjugated linoleic acid for 24 months is well tolerated by and reduces body fat mass in healthy, overweight humans J Nutr 2005;135(4):778-84 16 Nazare JA, de la Perriere AB, Bonnet F, Desage M , Peyrat J, Maitrepierre C, Louche-Pelissier C, Bruzeau J, Goudable J, Lassel T, Vidal H, Laville M Daily intake of conjugated linoleic acid-enriched yoghurts:effects on energy metabolism and adipose tissue gene expression in healthy subjects Br J Nutr 2007;97(2):273-280 39 17 Lu LJW et al Decreased ovarian hormones during a soya diet: Implications for breast cancer prevention Cancer Research, 2000;60:4112–21 18 Murkies AL et al Dietary flour supplementation decreases postmenopausal hot flushes: effect of soy and wheat Maturitas 1995;21:189–95 19 Quella SK et al Evaluation of soy phytoestrogens for the treatment of hot flashes in breast cancer survivors: A North Central Cancer Treatment Group trial J Clin Oncol 2000;18:1068–74 20 Yamamoto S et al Soy, isoflavones, and breast cancer risk in Japan J Natl Cancer Inst, 2003;95(12):906-13 21 Magee PJ et al Phytooestrogens, their mechanism of action: current evidence for a role in breast and prostate cancer Br J Nutrition 2004;91:513–31 22 Cyberlipid "POLYENOIC FATTY ACIDS Tài liệu từ internet: 23 http://vi.wikipedia.org/wiki/ 24.http://tusach.thuvienkhoahoc.com/wiki/C%c3%a1c_h%e1%bb%a3p_ch %e1%ba%a5t_thi%c3%aan_nhi%c3%aan_c%c3%b3_ho%e1%ba%a1t_t%c3%a dnh_hormon_estrogen 25 www.benhhoc.com/content/2105-Cac-benh-nam-candidas.html 26.http://tailieu.vn/tag/tai-lieu/b%E1%BB%87nh%20n%E1%BA%A5m% 20candidas.html 27.http://kythuatyhoc.com/diendan/archive/index.php/t645.html?s=7b22d6c 5ff362eec51a2f5a8b6f23899 28 http://www.softgel.co.il/?p=289 40 ... TRANG THI? ??T BỊ NGHIÊN CỨU: - Ống nghiệm - Đĩa petri - Que cấy vòng, que cấy trang, đèn cồn - Erlen, cốc - Đũa khuấy - Cân điện tử - Tủ sấy - Lị vi sóng - Nồi hấp - Máy cô quay - Máy lắc 13 - Máy... ngoài: 1.Jin - Ae Kim, Seung - Beom Hong, Woo - Suk Jung, Chang - Yeon Yu, Kyung - Ho Ma, Jae - Goon Guag, I11 - Min Chung Comparison of isoflavones composition in seed, embryo, cotyledon and seed... nhiều loại rau ngũ cốc khác với hàm lượng khác Genistein có tên đầy đủ 7-Dihydroxy- 3-( 4-hydroxyphenyl)chromen-4-one hay 4',5,7-Trihydroxyisoflavone CTPT C15 H10 O5 hình 2.3 genistein Phân tử lượng